穿心莲内酯提取精制理化性质鉴定

3、穿心莲内酯的析晶宜在含乙醇量稍高的情况下进行，此时晶形与结晶的纯度都较好。 当溶液的含水量较高，或粘稠度太大时，往往不易析出结晶。
4、加入的活性炭不能过多，否则会吸附穿心莲内酯，使产率降低。
六、思考题 1、为什么要对提取工艺进行实验研究?
答：通过对药材穿心莲提取溶媒、回流提取时间、提取次数及产品收率等方面的实验考察改 进了穿心莲内酯的提取工艺，保证了该产品质量．
分离鉴定：（1）异羟肟酸铁反应 取穿心莲内酯结晶数毫克，加乙醇 1ml 溶解，加 7％ 盐酸羟胺甲醇溶液 2～3 滴，加 10％氢氧化钾甲醇溶液 1～2 滴使呈碱性，于水浴上加热 2 分钟，放冷后，加稀盐酸使呈酸性，加 1％三氯化铁溶液 1～2 滴，混匀，呈紫红色。
又根据穿心莲内酯与去氧穿心莲内酯在氯仿中溶解度不同而进行分离。也可利用穿心莲内
酯、去氧穿心莲内酯及新穿心莲内酯结构上的差异所表现的极性不同，用氧化铝柱色谱分离。
一、
实验仪器与试剂
仪器：圆底烧瓶、旋转蒸发仪、冷凝管、烧杯、天平、胶头滴管、试管、量筒、薄层
板等
试剂：穿心莲粗品、穿心莲对照品、乙醇、乙酸乙酯、活性炭、碳酸钠、水等
2. 提取工艺
穿心莲叶粗粉 30g
↓95%乙醇提取；合并提取液
提取液
↓回收乙醇至 300ml
总浓缩液
↓活性炭脱色
滤液
↓浓缩
来自百度文库
粗品
↓过滤
↓￣￣￣￣￣￣￣￣￣￣↓
滤液
不溶物（除去）
↓加适量的水；放冷析晶
精制穿心莲内酯
提取分离流程图
醇提法
穿心莲粗粉用 8 倍 95%乙醇回流提取 2 次（第一次 2h，第二次 1.5h），合并回流液，过滤，
粗品
丙酮法
乙酸乙酯法
色谱柱法
加 40 倍量丙酮，
加热回来 10min
加 60 倍量乙酸乙酯，加热回流 30min
中性氧化铝柱
过滤
过滤
①
②③
不溶物加 20 倍量丙酮， 不溶物加 40 倍量乙酸乙酯，加热
加热回来 10min
回流 30min
脱氧穿心 穿心莲 新穿
莲内酯 内酯 心莲
过滤
过滤
内酯
合并 2 次丙酮液，
醚、苯中，微溶于水。
4．脱水穿心莲内酯(dehydroandrographolide) 分子式 C20H28O4,分子量 332.42。无色
针状结晶（30％或 50％乙醇），mp.204℃。易溶于乙醇、丙酮，可溶于氯仿，微溶于苯，几
不溶于水。
15
HO
O
16
13
O
O O
O O
11 20
10
17
CH2
CH2
5.2 提取时，如用热乙醇加热回流提取穿心莲总内酯，能同时提出大量穿心莲中的叶绿 素、树脂以及无机盐等杂质。使析晶和精制较为困难，因此本实验用冷浸法和超声波振荡法 提取。
5.3 穿心莲内酯的析晶宜在含乙醇量稍高的情况下进行，此时晶形与结晶的纯度都较 好。当溶液的含水量较高，或粘稠度太大时，往往不易析出结晶。 参考文献 [1] 中药学．人民教育出版社，PT0
中，微溶于水，较难溶于苯、乙醚、氯仿及石油醚。
3．去氧穿心莲内酯(deoxyandrographolide) 又称穿心莲甲素。分子式 C20H30O4，分子量
334.44。无色片状（丙酮、乙醇或氯仿）或无色针状结晶（醋酸乙酯），味稍苦。mp.174～
175℃，［α］ -40°（C=1,无水乙醇）。易溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶、氯仿，可溶于乙
五、注意事项 1、穿心莲内酯类化合物为二萜类内酯，性质极不稳定，易氧化、聚合而树脂化。因此所
提取的穿心莲应是当年产的新药材，并且要未受潮变质的茎叶部分，否则内酯含量明显下降 至极低，难以提取得到。
2、水提取一般可将多糖等多种水溶性杂质提取出来， 水提取出膏率较高， 但 穿心莲内 酯水溶性较低，不适合穿心莲的提取。
二、 实验过程
（一） 提取分离流程图
穿心莲粗粉 30g
80%乙醇回流提取 2 次，合并提取液 提取液
回收乙醇至 75mL 回收乙醇至 75mL
总浓缩液 活性炭脱色
滤液 浓缩（25 mL），析晶
粗品
超声提取 以 10 倍量 80%乙醇回流两次，合并
提取液
总浓缩液 活性炭脱色
滤液 浓缩（25 mL），析晶
10
17
CH2
CH2
CH2
HO
HO
HO
18
CH2OH
19
CH2OH
glc O CH2
穿心莲内酯
去氧穿心莲内酯
新穿心莲内酯
H CH2OH
脱水穿心莲内酯
1 仪器与设备
1．1 仪器 旋转蒸发仪 冷凝管 圆底烧瓶 电热套 铁架台 真空抽滤泵 烧杯等
1．2 试药 穿心莲对照品 穿心莲药材 95%乙醇 乙酸乙酯等
穿心莲连内酯提取精制探索资料准备全过程 穿心莲为爵床科植物穿心莲（Andrographis paniculata（Burm．f．）Nees）的全草或 叶。又名春莲秋柳，一见喜，榄核莲、苦胆草、金香草、金耳钩、印度草，苦草等。有清热 解毒、消炎、消肿止痛作用。主治细菌性痢疾、尿路感染、急性扁桃体炎、肠炎、咽喉炎、 肺炎和流行性感冒等，外用可治疗疮疖肿毒、外伤感染等。主产于广东、福建等省，华中、 华北、西北等地也有引种。
无色方形或长方形结晶，味极苦。mp.230～231℃，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶中，微
溶于氯仿、乙醚、难溶于水、石油醚、苯。
2．新穿心莲内酯(neoandrographolide) 又称穿心莲丙素、穿心莲新苷。分子式 C26H40O8，
分子量 480.58。无色柱状结晶，无苦味。mp.167～168℃，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶
回收乙醇浓缩至 2g/ml 溶液，冷却至 10～20℃，静置 12h，析出结晶，结晶物加 10～15 倍
95%乙醇（以结晶物重量计）搅拌溶解，加 0.5 倍活性炭（以结晶物重量计），加热回流 30min，
趁热过滤，滤液回收乙醇，静置 12h 以上，滤取结晶，结晶物 50～70℃减压干燥 6～8h。
取穿心莲内酯粗品，过滤，取滤液，加适量的水，振摇，放冷析晶，冷浸放置 1h 过滤，不
3．熟悉穿心莲内酯类成分的性质和检识方法。
4．了解去除叶绿素的方法。
（二）、主要化学成分的结构及性质
穿心莲为爵床科植物穿心莲 Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees 的全草。穿心
莲中含有多种二萜类化合物，主要为穿心莲内酯、新穿心莲内酯、脱氧穿心莲内酯等。
1．穿心莲内酯(andrographolide) 又称穿心莲乙素。分子式 C20H30O5，分子量 350.44。
0.16
试剂
穿心莲内酯精制品 穿心莲内酯标准品
原点到样品圆心距离 /ml 5.5 5.5
原点到前沿的距离 /ml 4.5 4.4
相对应的 Rf 值
0.82 0.80
穿心莲粗粉提取穿心莲内酯产率为 0.16/30X100%=0.53% 。 5 讨论
5.1 穿心莲内酯类化合物为二萜类内酯，性质极不稳定，易氧化、聚合而化。因此提取 所用的穿心莲应是当年产的新药材，并且要未受潮变质的茎叶部分，否则内酯含量明显下降 至极低，难以提取得到。
2、叶绿素除用活性炭吸附法去除外，还可采用哪些方法去除？3、穿心莲总内酯的分
3、离可采用哪些方法？试比较各种方法的优缺点。
4、根据穿心莲内酯类成分的结构，试判断其极性的强弱，在进行吸附薄层色谱时其 Rf
值大小如何？ 5、Legal 反应和 Kedde 反应的机理是什么？什么样的结构才有阳性反应？
【摘要】目的：探讨穿心连内酯的提取工艺。方法：以穿心莲内酯为检测指标，测定其含量。
制备方法：穿心莲叶用95%乙醇浸泡，所得乙醇浸泡取液用活性炭脱色，脱色液蒸馏回 收乙醇后的浓缩液静置得到粗晶品，粗晶加15倍量95%乙醇加热溶解，活性炭脱色，趁热过 滤，静置重结晶，得淡黄色重结晶品，再经蒸馏水、氯仿、甲醇洗涤精制得到穿心莲内酯成 品。对生药计，总收率1-1.5%。
（一）目的要求 学习中药中内酯类成分的提取分离及检识，通过实验要求： 1．掌握从穿心莲中提取、分离穿心莲内酯的操作方法。 2．学习穿心莲内酯亚硫酸氢钠加成物的制备。
无色方形或长方形结晶，味极苦。mp.230～231℃，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶中，微
溶于氯仿、乙醚、难溶于水、石油醚、苯。
2．新穿心莲内酯(neoandrographolide) 又称穿心莲丙素、穿心莲新苷。分子式 C26H40O8，
分子量 480.58。无色柱状结晶，无苦味。mp.167～168℃，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶
中，微溶于水，较难溶于苯、乙醚、氯仿及石油醚。
3．去氧穿心莲内酯(deoxyandrographolide) 又称穿心莲甲素。分子式 C20H30O4，分子
量 334.44。无色片状（丙酮、乙醇或氯仿）或无色针状结晶（醋酸乙酯），味稍苦。mp.174～
22.5
175℃，［α］ -40°（C=1,无水乙醇）。易溶于D甲醇、乙醇、丙酮、吡啶、氯仿，可溶于乙
醚、苯中，微溶于水。
22.5 D
4．脱水穿心莲内酯(dehydroandrographolide) 分子式 C20H28O4,分子量 332.42。无色针
状结晶（30％或 50％乙醇），mp.204℃。易溶于乙醇、丙酮，可溶于氯仿，微溶于苯，几不
溶于水【2】。
15
HO
O
16
13
O
O O
O O
O O
11 20
合并 2 次滤液，回收至 1/4 量
① 乙酸乙酯
回收至 1/2 量 放置析晶
放置析晶
②乙酸乙酯—无水乙醇 ③50%乙醇
滤取白色颗粒结晶 滤取白色颗粒结晶 （二）称量，计算产率。
（三）穿心莲内酯的鉴定 (1)异羟肟酸铁反应 取穿心莲内酯结晶数毫克，加乙醇 1ml 溶解，加 7%盐酸羟胺甲醇 溶液 2-3 滴，加 10%氢氧化钾甲醇溶液 1-2 滴使呈碱性，于水浴上加热 2 分钟，放冷后， 加稀盐酸使呈酸性，加 1%三氯化铁溶液 1-2 滴，混匀，呈紫红色。 (2) Legal 反应 取穿心莲内酯结晶少许，加乙醇 1ml 溶解，加 0.3%亚硝酰铁化钠溶液 2-4 滴，加 10%氢氧化钠溶液 1-2 滴，呈紫色。
结果：穿心莲粗粉提取穿心莲内酯产率为 0.53%
【关键词】穿心莲；穿心莲内酯；提取
穿心莲为爵床科植物穿心莲 Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees 的全草。穿心莲中
含有多种二萜类化合物，主要为穿心莲内酯、新穿心莲内酯、脱氧穿心莲内酯等【1】
1．穿心莲内酯(andrographolide) 又称穿心莲乙素。分子式 C20H30O5，分子量 350.44。
[2] 徐志勇，刘启德穿心莲及其制荆中有效成分的分析方法的研究进展 EJ3．广东药学， 2003，13(6) [3] 中国药典 1990 年版 一部[s]．1990．486 [4] 中国药典 2000 年版． 一部[s1．2000．221，542 [5]张艺，张希，孟宪丽，等．穿心莲提取工艺及含量测定研究进 展[J]．中成药，1993，15(6)：6
穿心莲内酯化学结构式 穿心莲内酯，分子式 C20H30O5，天然植物穿心莲的主要有效成份，具有祛热解毒，消炎 止痛之功效，对细菌性与病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊疗效，被誉为天然抗生素药物。 本品为二萜类内酯化合物，均难溶于水，通常仅能口服给药。 穿心莲内酯又名：穿心莲乙素，雄茸内脂。
物理性质：白色方棱形或片状结晶 （乙醇或甲醇），无臭，味苦。在沸乙醇中溶解， 在甲醇或乙醇中略溶，极微溶于氯仿，在水或乙醚中几乎不溶。熔点230～231℃，（α）17D -126.6±2°（冰醋酸）,[α]D –112.7 (c,0.53,MeOH)，与碱性2% 3,5－二硝基苯甲酸试 剂，显紫红色，异羟肟酸铁反应呈阳性。密度 (21℃）1.2317g/cm3。UVλEtOHmax nm （ε）,223(12300); IRvKBrmax cm-1: 3448,3390～?279(OH),1828,1647,906 (C=CH2),1727 （α，β-不饱和γ-内酯）,1672 （共 的 C=C)； 13CNMR。
溶部分再用冷水洗涤两次，干燥得精制穿心莲内酯，称重，计算产率【5】。
3 穿心莲内酯类成分的检识【3】【4】
穿心莲内酯类成分的薄层色谱检识
薄层板：硅胶 G-CMC-Na
试 样：自制穿心莲内酯乙醇溶液
对照品：穿心莲内酯对照品乙醇溶液
展开剂：乙酸乙酯
显色剂：碘单质
4 结果
试剂
重量/g
穿心莲粗粉
30
穿心莲内酯精制品
CH2
HO
HO
HO
18
CH2OH
19
CH2OH
glc O CH2
（穿三心）莲实内验酯原理
去氧穿心莲内酯
新穿心莲内酯
O O
H CH2OH
脱水穿心莲内酯
本实验是利用穿心莲内酯类成分易溶于甲醇、乙醇、丙酮等溶剂的性质，选用乙醇为提
取溶剂进行提取。穿心莲中含有大量叶绿素，故用活性炭吸附，除去叶绿素等脂溶性杂质。