支原体快速检测试剂盒

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支原体 试剂盒 原理

支原体 试剂盒 原理

支原体试剂盒原理
支原体试剂盒是一种用于检测支原体感染的诊断工具。

其基本原理是利用特定的抗原与支原体感染产生的抗体结合,从而实现对支原体的检测。

具体而言,支原体试剂盒中通常包含有特异性的抗体或抗原。

当患者样本中存在支原体时,该抗原与试剂盒中的抗体结合,形成免疫复合物。

这些免疫复合物可以通过染色、荧光或放射性示踪剂等方式来标记。

在进行试剂盒检测时,可将患者样本与试剂盒中的试剂混合,使其中的抗原与抗体结合。

随后,通过特定的读取设备(如酶标仪、荧光分析仪等)对免疫反应后的样本进行测定,测定结果将会显示出是否存在支原体感染。

根据浓度的不同,结果可能会显示出阳性、阴性或弱阳性等。

此外,支原体试剂盒中也可能包含有质控物质,用于确保试剂盒的准确性和可靠性。

一般情况下,试剂盒的说明书中会详细描述样本的采集、操作步骤、结果解读等信息,以帮助医护人员进行正确的使用。

总之,支原体试剂盒利用特异性抗原与抗体之间的结合反应,通过检测免疫复合物的形成或生物学指标的变化来判断是否存在支原体感染。

这种诊断工具具有操作简便、结果快速的特点,因此在临床诊断中得到了广泛应用。

支原体试检测剂盒使用说明书(中文版)

支原体试检测剂盒使用说明书(中文版)

支原体检测试剂盒使用说明书1.试剂:支原体检测试剂盒由武汉源深生物科技有限公司提供。

2.实验方法:巢式PCR的方法检测支原体污染:A.待检细胞汇合率在90%以上时取100 µL细胞上清液到离心管内B.95o C孵育5分钟C.短暂高速离心15秒钟左右D.试剂盒里的组份:引物混合物(Primer Mix) 20 µL阳性对照DNA (Positive Control DNA) 15 µL阴性对照(Internal Control DNA) 20 µL巢式PCR一共需要做2轮PCR,本检测方法不受其他来源(如所培养细胞)DNA的影响,不但提高了检测的灵敏度,同时也提高了特异性。

(1)第一轮PCR:PCR 混合物:向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分,盖紧管盖,轻弹管壁混匀,稍加离心。

E.热循环程序:将准备好的PCR管放入PCR仪,运行如下程序。

PCR 混合物:向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分,盖紧管盖,轻弹管壁混匀,稍加离心。

F. 热循环程序:将准备好的PCR 管放入PCR 仪,运行如下程序。

试验结果:2% 琼脂糖凝胶电泳,TBE 缓冲液,PCR 产物及Marker 均点样10µL ,于50V 下电泳1hr ,EB 染色15min ,紫外灯下观察。

电泳结果见下图:图中泳道M 为DNA Marker ,1和2为待检测细胞系的第一轮PCR 产物 (1st ),3和4为待检测细胞系的第二轮PCR 产物 (2nd ), 其中1、3为阳性对照管PCR 产物,2、4为阴性对照PCR 产物。

阳性对照管在200bp 左右,和300-400 bp 处各有一条带,证明本次实验准确可靠 (不同的支原体Mycoplasma, such as M. fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. hominis, M. arthritidis, M. hyopneumoniae and Acholeplasma laidlawii 的保守区的片段长度不一,大概在200-400 bp 之间)。

探针法支原体检测试剂盒说明书

探针法支原体检测试剂盒说明书

《探针法支原体检测试剂盒》(含内参)说明书(版本20230112)【本说明书会不定期更新,每次收到新的产品时,请到本公司网站重新下载最新版本!】货号QM016包装规格50次/盒储存条件该产品在常温或随冰袋运输,收到产品后,请立即放-20 ℃冰箱低温避光保存。

该条件下,至少5年内有效。

产品用途《探针法支原体检测试剂盒》(qPCR Mycoplasma Detection Kit with Probe)采用支原体特异性引物和支原体特异性荧光探针(报告基因为FAM),用于对样品的支原体基因组DNA进行荧光定量PCR扩增检测。

试剂盒内同时含有内参对照质粒mycoIC2和相应的引物和荧光探针(报告基因为VIC),用于监控支原体DNA 提取和qPCR扩增的效率。

本试剂盒可用于检测一切可能含支原体的样品,比如:(1)体外细胞培养的上清;(2)血清;(3)各种体液,如唾液、尿液、鼻腔分泌物等;(4)别的液体样品。

本产品仅供研究使用。

产品简介哺乳动物细胞的培养,支原体(Mycoplasma)污染是个世界性的问题。

支原体污染几乎可以改变细胞的所有参数,导致实验结果的不准确、甚至完全错误(支原体污染对细胞的详细危害,请参考本公司的网站:)。

从2013年开始,《Nature》期刊已正式要求投稿的文章,如涉及细胞培养都要进行支原体检测。

相信会有越来越多的高水平期刊将做出同样的支原体检测要求。

培养法是相对可靠的支原体检测技术,但是该方法非常耗时的,需要数周,不适合作为细胞培养液中支原体污染的快速检测。

此外,通过固体培养法无法检测污染细胞的一种最常见的支原体,即猪鼻支原体(M.Hyorhinis)。

这是因为猪鼻支原体无法在支原体固体培养基上形成可见的菌落。

而猪鼻支原体约占所有支原体污染的20-50%。

有的实验室使用荧光染色法检测支原体,但是该方法灵敏度太低,当检测成阳性时,细胞经常已经严重污染。

培养法和荧光染色法虽然是我国药典收录的支原体检测方法,但是因为其各自都有明显的缺点,不适合作为支原体快速检测的方法。

LONZA支原体检测试剂盒是一种用于检测支原体感染的试剂盒

LONZA支原体检测试剂盒是一种用于检测支原体感染的试剂盒

LONZA支原体检测试剂盒是一种用于检测支原体感染的试剂盒LONZA支原体检测试剂盒是一种用于检测支原体感染的试剂盒。

支原体是一类细菌,可引起多种疾病,如肺炎、支气管炎等呼吸道感染。

由于支原体的症状与其他病原体引起的疾病相似,因此准确快速地检测支原体感染对诊断和治疗至关重要。

LONZA支原体检测试剂盒采用一种特殊的分子生物学方法,可以通过检测支原体特异性的基因序列来确定是否存在支原体感染。

该试剂盒包含了一系列的试剂和探针,可以与支原体的DNA序列特异性结合,形成特定的标记信号。

使用LONZA支原体检测试剂盒非常简单。

首先,从患者的呼吸道样本中提取DNA。

样本可以是咽喉刷子、鼻咽拭子或痰液等。

接下来,将提取的DNA加入到试剂盒中,与试剂盒内的特定试剂和探针发生反应。

此时,如果样本中存在支原体的DNA序列,试剂盒内的试剂和探针就会与其结合并发出特定的信号。

最后,使用特殊的仪器对发出的信号进行分析。

根据信号的强度和特征,可以确定是否存在支原体感染。

该试剂盒的敏感度和特异性非常高,能够准确地检测出支原体感染,避免了其他常见的呼吸道疾病的误诊。

该产品的使用具有多个优点。

首先,它可以在短时间内提供准确的结果,从而帮助医生快速确定诊断并制定相应的治疗方案。

其次,试剂盒的操作简单易行,不需要复杂的仪器和特殊的技术。

再次,该试剂盒的成本相对较低,适用于各种医疗机构和实验室的使用。

总之,LONZA支原体检测试剂盒是一种快速、准确、简便的检测方法,可用于支原体感染的诊断和监测。

它为医生提供了重要的辅助工具,有助于及时处理支原体感染并避免疾病的蔓延。

肺炎支原体6小时快检试剂盒(快速培养法)药品说明书

肺炎支原体6小时快检试剂盒(快速培养法)药品说明书

肺炎支原体6小时快检试剂盒(快速培养法)
药品名称:
通用名称:肺炎支原体6小时快检试剂盒(快速培养法)
英文名称:暂无
成份:
产品性能:1.酸碱度:本品的PH值应在7.3-8.5之间。

2、特异性:用标准肺炎支原体株检验,结果应为阳性。

3】灵敏度:本品灵敏度检查采用变色单位试验法,变色单位应≥10-8。

4、稳定性:将试剂在37±1℃下放置1周,英符合特异性要求。

产品组成:改试剂盒为液体单一试剂,其主要组成为:牛心浸液、马血清、酵母浸液、抑菌剂、生长因子等。

适应症:
该产品用于体外定性检测肺炎支原体,用于临床肺炎支原体感染的六小时快速筛查和临床辅助诊断。

用法用量:
暂无
不良反应:
暂无。

禁忌:
暂无。

注意事项:
暂无。

贮藏:
暂无
有效期:
暂无
标准文号:
鄂食药监械(准)字2013第2401238号。

支原体检测说明书

支原体检测说明书

SaveIt系列产品——支原体检测试剂盒说明书一、产品简介支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。

支原体的侵染会引起细胞功能和基因表达的严重改变,并造成持续危害。

由于支原体污染会严重影响实验结果的可靠性、重复性和一致性,对支原体的常规检测非常重要。

针对细胞、培养基以及动物血清的支原体检测,我们推出了Myco-PCR-TEST快速支原体检测试剂盒。

本试剂盒基于PCR检测原理,根据支原体高度保守的16和23SrRNA区域设计的特异性引物,经过简单快速的PCR,从而迅速准确判断支原体污染是否被清除。

汉恒生物()推出的SaveIt TM抗支原体试剂能够在不影响细胞状态的前提下能够有效的清除支原体污染,从而使一些珍贵的细胞受到支原体污染之后能够得到挽救。

二、产品包装产品规格见标签三、使用说明使用Trizol 法抽提待检测细胞的RNA,反转录为CDNA 后,加入支原体检测引物,进行PCR 检测细胞支原体污染情况。

四、操作步骤4.1样品处理1、A:培养贴壁细胞:不须胰酶消化,可直接用Trizol进行消化、裂解,Trizol体积按10cm2/ml 比例加入。

B:悬浮细胞可直接收集、裂解,每1ml Trizol可裂解5×106动物、植物或酵母细胞,或107细菌细胞。

2、细胞加Trizol后,室温放置5min,使其充分裂解。

注:此时可放入-70℃长期保持。

3、12,000rpm 离心5min,弃沉淀。

4、按200ul氯仿/ml Trizol加入氯仿,振荡混匀后室温放置15min。

注:禁用漩涡振荡器,以免基因组DNA断裂。

5、4℃ 12,000g离心15min。

6、吸取上层水相,至另一离心管中。

注:千万不要吸取中间界面;若同时提取DNA和蛋白质,则保留下层酚相存于4℃冰箱,若只提RNA,则弃下层酚相。

7、按0.5ml 异丙醇/ml Trizol 加入异丙醇混匀,室温放置5-10min 。

三种快速支原体检测试剂盒检测原理与优缺点比较

三种快速支原体检测试剂盒检测原理与优缺点比较

三种快速支原体检测试剂盒检测原理与优缺点比较在细胞培养,特别是传代细胞培养中,支原体污染率达到15-35%。

支原体的侵染会引起细胞功能和基因表达的严重改变,并造成持续危害。

由于支原体污染会严重影响实验结果的可靠性、重复性和一致性,对支原体的常规检测非常重要。

传统的支原体检测方法很耗费时间,通常需要一天至数周,而且操作比较繁琐,准确度不高。

中国药典给定的支原体标准检测方法有两种:培养法和DNA染色法。

培养法方法简单,假阳性率低,但样品需要量高,耗时20天左右,时间漫长。

DNA染色法结果直观,假阳性率低,但需要荧光显微设备,实验操作复杂。

能否找到一种省时、省力且准确性高的方法检测支原体污染呢?目前,市场上具有多款支原体快速检测试剂盒,我们选取了其中3种品牌的快速支原体检测试剂盒,就其检测原理与优缺点进行一下比较。

一、美国CLARK Bioscience品牌一步法检测试剂盒美国CLARK Bioscience公司研发的一步法支原体检测试剂盒One-step Quickcolor Mycoplasma Detection Kit,利用等温扩增的方法,可检测7种常见支原体的基因。

该检测方法与PCR方法类似,检测过程中,只需取少量细胞培养上清,及一个能控制温度的水浴锅或恒温金属浴,其扩增产物的颜色可通过肉眼直接观察判断,整个过程需要1小时左右。

该方法对仪器的要求比较低,理论上灵敏度比较高。

缺点在于检测的支原体种类太少,目前已发现的近200种支原体,只能检测其中的7种,检测范围太窄,也不符合国家药典的规定。

而且肉眼观察结果比较主观,有可能不同的实验人员判读的结果不一致。

二、美国Lonza品牌生物发光法检测试剂盒美国Lonza品牌的MycoAlertTM 和升级的MycoAlertTM PLUS支原体检测试剂盒,采用生物发光的方法,检测支原体酶活性。

其检测的支原体酶广泛存在于180多种支原体中,而不存在于真核细胞中。

肺炎支原体快速鉴定培药敏试剂盒介绍临床改后

肺炎支原体快速鉴定培药敏试剂盒介绍临床改后

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肺炎支原体检测试剂盒胶体金法

肺炎支原体检测试剂盒胶体金法

肺炎支原体检测试剂盒胶体金法背景与引言肺炎支原体是一种常见的致病菌,它是导致上呼吸道感染和肺炎的一种主要病原体。

近年来,肺炎支原体感染的发病率逐渐增加,因此早期快速的检测非常重要。

为了满足临床上对肺炎支原体的检测需求,研发出了肺炎支原体检测试剂盒胶体金法。

本文将详细介绍肺炎支原体检测试剂盒胶体金法的原理、操作步骤和优势。

原理肺炎支原体检测试剂盒胶体金法采用了胶体金免疫层析技术。

该技术利用了胶体金颗粒在溶液中的颜色变化特性,通过金标记的抗原与肺炎支原体的特异性抗体结合形成颗粒免疫复合物,从而实现对肺炎支原体的检测。

操作步骤1.样品处理:取适量标本(一般为呼吸道分泌物或咽拭子),按照说明书的要求进行预处理,如离心、加入提取液等。

2.载板处理:将处理后的样品滴加到测试载板上,一般每个孔滴加样品的量为5-10μL。

3.滴加试剂:将胶体金标记的抗原滴加到载板上,与样品中的肺炎支原体结合形成颗粒免疫复合物。

4.反应时间:根据产品说明书的要求,将载板放置在恒温箱或特定的反应时间,一般为10-20分钟。

5.结果读取:观察载板上颗粒免疫复合物的颜色变化,一般采用裸眼观察或光度计测量吸光度来判断结果。

优势1.快速检测:肺炎支原体检测试剂盒胶体金法可以在短时间内完成检测,通常只需要20分钟左右,大大缩短了检测周期。

2.简单易用:操作步骤简单,只需要少量的样品和试剂,无需复杂的实验仪器和设备,使得检测更加便捷。

3.灵敏度高:胶体金免疫层析技术具有较高的灵敏度,可以检测到低浓度的肺炎支原体,提高了检测的准确性和可靠性。

4.成本低廉:与其他检测方法相比,采用胶体金法进行肺炎支原体检测的成本较低,可以降低医疗机构的检测费用。

5.广泛应用:肺炎支原体检测试剂盒胶体金法适用于不同场景的肺炎支原体检测,可以在临床、疫情监测等多个领域得到广泛应用。

结论肺炎支原体检测试剂盒胶体金法作为一种快速、简单、灵敏度高且成本低廉的检测方法,对于肺炎支原体感染的早期诊断和疫情监测具有重要意义。

肺炎支原体快速鉴定培药敏试剂盒介绍-临床改后

肺炎支原体快速鉴定培药敏试剂盒介绍-临床改后

适用于各类患者
该试剂盒适用于所有年龄段和 类型的肺炎支原体感染患者, 包括成人、儿童、老年人以及 免疫系统较弱的患者。
适用于多种样本类型
该试剂盒可接受多种样本类型 ,如痰液、咽拭子、支气管灌 洗液等,方便医生根据患者具 体情况选择合适的样本类型进 行检测。
应用效果
80%
快速鉴定
该试剂盒能够在较短的时间内完 成肺炎支原体的鉴定,大大缩短 了检测时间,提高了诊断效率。
案例二
某社区医疗机构使用该试剂盒对社区内的疑似肺炎支原体感染患 者进行筛查,成功发现了多名早期患者,及时采取了隔离和治疗 措施,有效控制了疫情的传播。
05
结论
总结
肺炎支原体快速鉴定培药敏试剂盒是一种高效、准 确的检测工具,用于快速鉴定肺炎支原体并对药物 敏感性的测定。
该试剂盒采用先进的分子生物学技术,通过对肺炎 支原体基因的检测,能够快速、准确地鉴定出肺炎 支原体,并对其对不同药物的敏感性进行测定。
免疫学原理
试剂盒基于免疫学原理,利用抗原与抗体特异性结 合的特性,实现对肺炎支原体的检测。
聚合酶链式反应(PCR)技术
通过PCR技术对肺炎支原体DNA进行扩增,实现对 肺炎支原体的快速鉴定。
药物敏感试验
通过观察肺炎支原体在含有不同浓度药物的培养基 中的生长情况,判断其对药物的敏感性。
试剂盒使用方法
100%
准确度高
该试剂盒采用先进的检测技术, 具有高准确度,能够为临床医生 提供可靠的诊断依据。
80%
指导用药
通过该试剂盒进行药敏试验,能 够为临床医生提供针对肺炎支原 体的敏感药物信息,有助于指导 临床合理用药。
应用案例
案例一
某大型医院使用该试剂盒对疑似肺炎支原体感染患者进行检测, 通过快速鉴定和药敏试验,确诊了患者的病情,并成功指导了临 床用药,使患者得到及时有效的治疗。

肺炎支原体检测试剂盒

肺炎支原体检测试剂盒

肺炎支原体检测试剂盒简介肺炎支原体是一种常见的革兰阴性细菌,是引起人类呼吸道感染的重要病因。

肺炎支原体感染可导致轻度到中度的上呼吸道感染、肺炎、气管支气管炎等疾病。

为了准确检测和诊断肺炎支原体感染,科学家们开发了肺炎支原体检测试剂盒,以便在临床诊断中使用。

检测试剂盒原理肺炎支原体检测试剂盒是一种基于分子生物学原理的检测工具。

它利用核酸扩增技术,特别是聚合酶链反应(PCR),可以从临床标本中扩增并检测肺炎支原体的核酸。

该检测试剂盒通常包含肺炎支原体特异性的引物和探针,并且还可能包含一些辅助试剂和储存缓冲液等。

在使用肺炎支原体检测试剂盒时,首先需要采集患者的呼吸道标本,如咽喉拭子、痰液等。

然后,将标本中的核酸提取出来,并与检测试剂盒中的引物和探针混合。

通过PCR反应,将肺炎支原体的核酸扩增成千倍。

如果在标本中存在肺炎支原体的核酸,那么PCR反应将在一定的温度条件下产生阳性信号,表明该患者可能感染了肺炎支原体。

检测结果解读肺炎支原体检测试剂盒可以提供两种结果:阳性和阴性。

阳性结果表示在患者的标本中检测到肺炎支原体的核酸,说明患者可能感染了肺炎支原体。

阴性结果则表示未检测到肺炎支原体的核酸,表明患者可能没有感染肺炎支原体。

请注意,肺炎支原体检测试剂盒并不能完全排除肺炎支原体感染的可能性。

在某些情况下,可能由于标本采集、核酸提取等环节的技术原因,导致结果的假阴性或假阳性。

因此,在进行结果解读时,仍需结合临床症状和其他检查结果进行综合分析。

应用领域肺炎支原体检测试剂盒主要应用于临床肺炎的诊断和流行病学调查。

通过及时检测和诊断肺炎支原体感染,可以采取有效的治疗措施,避免疾病的进一步发展和传播。

此外,肺炎支原体检测试剂盒还可用于研究肺炎支原体的流行病学特征,为疫情监测和预防控制提供重要依据。

注意事项使用肺炎支原体检测试剂盒时需要遵循以下注意事项:1.仅供专业人员使用:肺炎支原体检测试剂盒是一种专业的医疗设备,仅应由经过培训和具备相关专业知识的人员操作和解读结果。

C0296 支原体检测试剂盒说明书

C0296 支原体检测试剂盒说明书
¾ 本试剂盒如用于六孔板样品检测,至少可以检测100个样品。
包装清单:
产品编号 C0296-1 C0296-2 C0296-3
—ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
产品名称 固定液 Hoechst染色液 抗荧光淬灭封片液 说明书
包装 100ml 10ml 10ml
1份
保存条件:
4℃保存,一年有效,其中Hoechst染色液需避光保存。
注意事项:
使用说明:
1. 细胞样品的准备: a. 对于贴壁细胞,在六孔板或其它多孔板内或盖玻片上培养细胞至50%-80%满。 细胞培养过满会导致很难判断是否存在支原体污染。 b. 对于悬浮细胞,离心沉淀细胞,取少量细胞做细胞涂片,空气中充分晾干。
2. 用PBS按照1:10稀释Hoechst染色液(1体积Hoechst染色液加入9体积PBS)。
¾ 本试剂盒的检测效果图参考上图。左图为无支原体污染情况,中图为支原体轻度污染情况,箭头所指为微粒状的一些支 原体,右图为支原体重度污染情况,可见大量微粒状的支原体。
¾ 如果发现有支原体污染,建议更换无污染的细胞进行培养。如果有必要去除支原体,可以使用Mycoplasma Removal Agent、cyprofloxacin或BM-Cyclin去除支原体污染。
稀释后的Hoechst染色液宜在24小时内使用。 3. 加适量固定液固定10-20分钟。
对于六孔板的一个孔,加入1ml固定液。确保固定液充分覆盖样品,固定前切勿对细胞进行洗涤。另外对于贴壁细胞,固 定前需去除培养液。 4. 去除固定液,空气中晾干。 5. 加适量10倍稀释的Hoechst染色液室温染色10-30分钟。 对于六孔板的一个孔,加入1ml染色液。确保染色液充分覆盖样品,染色时注意避光。可以用铝箔纸避光。 6. 去除染色液,空气中晾干。 7. 滴加试剂盒中提供的抗荧光淬灭封片液,封片后荧光显微镜下观察蓝色荧光。 荧光显微镜观察时需400倍或1000倍放大观察(需使用油镜)。参考上图判断支原体污染情况。没有支原体污染或其它原核 生物污染的细胞样品,仅观察到细胞核的蓝色荧光,线粒体DNA不会被染色。有支原体污染的细胞样品可以观察到细胞 核周围微粒状或丝状蓝色荧光。支原体污染严重的细胞可以观察到大量微粒状或丝状蓝色荧光。有细菌、酵母或霉菌污 染的情况虽然Hoechst染色也会呈阳性,但细菌、酵母或霉菌污染在光学显微镜下可以观察到,而支原体观察不到,由此 可以初步区分是支原体还是其它微生物。如有必要进一步鉴定,可以通过把支原体接种培养和RT-PCR等方法进行进一步 检测。

肺炎支原体lgM检测

肺炎支原体lgM检测

肺炎支原体lgM检测【原理】肺炎支原体快速检测卡可检测血清中的肺炎支原体lgM抗体。

患者的血清样品分别加入两个测试孔内,当样品沿膜扩散时,分别加入3滴抗人lgM碱性磷酸酶复合物、3滴洗液和2滴底物,5分钟后观察结果。

质控孔为质量控制,固定有人lgM,测试孔固定有肺炎支原体抗原。

阳性反应结果为蓝色,阴性结果为无色。

【材料】1、患者血清。

2、肺炎支原体lgM检测试剂盒,包括:(1)检测卡:单独锡纸包装,卡上固定有肺炎支原体抗原或人lgM(质控孔)。

(2)阳性质控液(1.7ml):含有人抗肺炎支原体lgM的0.1%叠氮钠缓冲液。

(3)阴性质控液(1.7ml):0.1%叠氮钠缓冲液。

(4)酶结合物:(11ml):含有以碱性磷酸酶标记的抗人lgM单克隆抗体的0.1%叠氮钠缓冲液。

(5)洗液:9.5%(W/V)的呱基氢氯酸。

(6)底物(15ml):含有5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸的0.1%叠氮钠的缓冲液。

(7)移液管。

【样本处理】血清样品2—8℃可保存3天,如果不能在此期间测试,-20℃保存,样品不宜反复冻融。

【操作】1、从冰箱中取出试剂盒,置室温平衡20分钟。

2、从锡纸袋中取出检测卡,作好标记。

3、用移液管滴加2滴血清到卡下端两个测试孔中。

4、22—25℃下孵育2分钟。

2分钟内血清应沿膜扩散至上端的测试孔中。

5、加入3滴酶结合物到下端两个测试孔中,22—25℃下孵育2分钟,酶结合物应沿膜扩散至上端的测试孔中。

6、加入3滴洗液到上端两个测试孔中,等待完全吸收。

7、滴加2滴底物试剂到上端两个测试孔,22—25℃下孵育5分钟,5分钟后立即观察反应结果。

【结果】根据上端两个反应孔的反应结果判断:阳性结果:上端两孔都出现蓝色。

提示肺炎支原体性lgM存在。

阴性结果:质控孔出现蓝色或轻微蓝色,测试孔无色或呈暗灰色,提示不存在肺炎支原体lgM或其浓度在检测下限之下。

无效反应:质控孔不出现蓝色。

产生无效反应的可能原因为:试剂或检测卡质量问题,操作不当,样品扩散不好,酶结合物严重污染,血清中含有过多脂质成分等。

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Inhibition of cell metabolism Production of viruses compromised
Disruption of nucleic acid synthbrane antigenicity
CELL DEATH
DNA fragmentation due to Mycoplasmal nucleases NOT apoptosis
Program I-013 + DNA
57.7% GFP+ 转染效率由57.7%下降至23.0%!
23.0% GFP+
多家期刊要求发表文章前进行支原体检测
当你发表文章后,同行慕名,向实验室 求赠细胞系时。。。
Biotool支原体快速检测试剂盒
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最终反应颜色深浅程度与支原体污染程度呈正相关!
支原体污染严重影响实验结果的可靠性、重现性和一致性!
支原体污染影响肿瘤细胞在裸鼠体内的成瘤性
支原体污染降低转染效率
HeLa cells uninfected
Program I-013 no DNA
HeLa cells infected with Mycoplasma fermantans
no program + DNA
支原体污染影响细胞多种生理参数
Increased sensitivity Inhibition of cell growth to inducers of apoptosis
Alteration of DNA transfection efficiency
Chromosomal aberrations
Price comparison
Brand Biotool Lonza Sigma R& D Invivogen
Price/Test 0.88 USD 7.25 USD 10.29 USD 1.25 USD 1.35 USD
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