支气管肺泡灌洗液的半乳甘露聚糖检测在侵袭性肺曲霉病早期诊断中的应用分析

支气管肺泡灌洗液的半乳甘露聚糖检测在侵袭性肺曲霉病早期诊断中的应用分析目的评价支气管肺泡灌洗液中半乳甘露聚糖检测对于侵袭性肺曲霉病早期诊断的临床意义。

方法通过对90例因肺部感染入院就诊的患者行支气管肺泡灌洗液（BALF）的半乳甘露聚糖（GM）检测，对比分析BALF 及血清GM 检测对于侵袭性肺曲霉病的诊断效率。

结果90例患者中确诊IPA 3例，临床诊断IPA 12例，拟诊IPA 9例；以I=0.5作为临界值诊断，BALF及血清GM 检测的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为87.50%、81.82%、63.64% 、94.74%和54.17%、90.91%、68.42%、84. 51%；以I=1.0作为临界值，BALF 及血清GM 检测的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为66.67%、100.00%、100.00%、89.19%和25.00%、100.00%、100.00%、78.57%；BALF和血清GM检测的特异度和阳性预测值均达到100%，但BALF GM檢测的敏感度较血清GM检测显著升高（P＜0.05），而BALF GM检测的阴性预测值较血清GM检测也升高，但差异无统计学意义（P>0.05）。

结论与血清GM检测相比，BALF GM检测诊断的敏感度、特异度以及阳性/阴性预测值均有所提高，对于IPA的诊断更早、更准确，值得在临床中广泛应用。

[Abstract] Objective To evaluate the clinical influence of galactomannan (GM) detection in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) in the diagnosis of invasive pulmonary aspergillosis (IPA). Methods 90 cases with lung infection admitted into the hospital were selected to detect GM in BALF,and then the detection efficiency of both BALF and serum GM for the diagnosis of IPA were analyzed comparatively. Results Among 90 patients enrolled,3 cases were diagnosed as IPA,12 cases were diagnosed clinically as IPA,9 cases were diagnosed suspected as IPA;taking I=0.5 as the critical value of diagnosis,the sensitivity,specificity,positive predictive value and negative predictive value for BALF were 87.50%,81.82%,63.64%,94.74% and those for serum GM were 54.17%,90.91%,68.42%,84.51% respectively;taking I=1.0 as the critical value of diagnosis,the sensitivity,specificity,positive predictive value and negative predictive value for BALF were 66.67%,100.00%,100.00%,89.19% and those for serum GM were 25.00%,100.00%,100.00%,78.57% respectively;the specificity and positive predictive value of both BALF and serum GM reached 100%,but the sensitivity of BALF GM were higher than serum GM (P＜0.05)and the negative predictive value of BALF GM have a little improvement,but no significant difference compared with serum GM detection (P＞0.05). Conclusion Compared with serum GM detection,the sensitivity,specificity,positive/negative predictive values of BALF GM were improved for the early diagnosis of IPA,and the diagnosis for IPA is earlier and more accurate,and it is widely used in clinic.[Key words] Invasive pulmonary aspergillosis;Bronchoalveolar lavage fluid;Galactomannan;Early disgnosis侵袭性肺曲霉病（invasive pulmonary aspergillosis，IPA）是由曲霉引起的支气管真菌感染，是肺曲霉病中最严重的类型，发病率正逐年上升，且易导致患者死亡，尤其在合并慢性阻塞性肺疾病（COPD）的患者中，致死率高达67% ～100%[1]。

目前，对于IPA的诊断往往采用组织病理学检查，由于其对患者的创伤，对于某些病情严重及血小板减少的患者并不适用[2]，因此，如何有效地早期诊断IPA，从而及时施治，对患者的治疗和预后具有重要作用。

本研究通过对90例因肺部感染入院就诊的患者行支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）半乳甘露聚糖检测，评价分析BALF的半乳甘露聚糖检测对于IPA 早期诊断的临床意义。

1 资料与方法1.1 一般资料选取2012年2月~2014年2月间因肺部感染于茂名市人民医院呼吸内科就诊的患者90例为研究对象，所有患者均符合以下条件：①患者均因免疫功能低下、粒细胞严重缺乏、血液肿瘤、长期使用激素类药物或患有慢性阻塞性肺病而导致肺部感染，经影像学检查发现存在肺部病变，且服药后体温仍维持较高水平者；②有侵袭性肺真菌感染的病史；③患者均无严重的心脑血管疾病等严重基础性疾病，均可接受支气管镜检；④患者均自愿签署知情同意书，愿意配合进行支气管镜下肺泡灌洗并取样。

纳入的90例患者中，男57例，女33例；年龄24~75岁，平均（54.7±17.6）岁。

所有患者均参照欧洲癌症研究治疗组织／国立研究院真菌病研究小组和美国国立变态反应与传染病研究院真菌病研究小组（EORTC/MSG）所制订的IPA诊断标准[3]进行诊断，包括确诊、临床诊断、拟诊及非IPA 4个类型、本研究参照以往的文献报道，将确诊IPA、临床诊断IPA、拟诊IPA患者作为病例组，非IPA患者作为对照组。

其中，病例组24例，男17例，女7例；年龄24~72岁，平均（55.6±17.2）岁；确诊IPA 3例，临床诊断IPA12例，拟诊IPA9例；患者所患基础疾病：COPD 10例，支气管扩张5例，肺癌2例，支气管哮喘2例，间质性肺病2例，急性粒细胞白血病2例，再生障碍性贫血1例；病原学检测发现，痰培养曲霉菌阳性6例，BALF 培养阳性9例。

对照组66例，男40例，女26例；年龄27~75岁，平均（54.2±18.4）岁；患者所患基础疾病：COPD 22例，支气管扩张12例，肺癌7例，支气管哮喘8例，间质性肺病2例，肺炎8例，急性粒细胞白血病5例，再生障碍性贫血2例。

1.2 研究方法1.2.1 纤维支气管镜检查自患者入院就诊时，行肺部高分辨CT（high resolution computer tomography，HRCT）检查，以确定病变位置，先收集痰液，后按照支气管镜说明依次进行相关操作，包括术前准备、经鼻雾化吸入2%利多卡因进行局部麻醉、持续射频吸氧、术中生命体征监测等内容，后经鼻将支气管镜置入病变部位检查，分2次分别注入37℃的灭菌生理盐水各30 ml，对病变部位进行支气管肺泡灌洗并回收灌洗液，回收率为30%～60%，将回收后的灌洗液分装于2支无菌离心管內，分别用于送检或-20℃冻存。

同时，依据患者的病情及HRCT检查情况，进行肺组织活检及病理学检查。

1.2.2 病原学检查[4]病原学检查即进行细菌/真菌培养，本研究中包括所收集的痰液、BALF以及行肺活检的组织样本等，分别接种于沙氏培养基（SDA）和察氏琼脂（CZA）平皿培养基中，37℃培养，观察菌落生长情况并鉴定。

1.2.3 血清收集自患者就诊时及每3 天收集静脉血2 ml于真空采血管，以3000 r/min离心10 min，取血清，置于灭菌离心管内，送检或-20℃冻存，持续监测2周。

1.2.4 半乳甘露聚糖检测对于半乳甘露聚糖（galactomannan，GM）的监测，采用法国伯乐公司的Platelia酶联免疫试剂盒进行，通过免疫夹心法对患者BALF 及血清GM 抗原进行半定量分析，收集并记录各患者样本的吸光度（A），计算BALF 及血清的指数（I），I为样本吸光度与标准吸光度的比值，其中，参照国际惯例以0.5作为临界值，I≥0.5作为阳性标准，对于血清检查而言，两次结果的I均≥0.5判定为阳性[5]；同时以I=1.0作为阈值，评价不同阈值的设定对于BALF 及血清GM 检测诊断效率的影响。

诊断效率包括敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值，具体计算如下：敏感度=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）×100%；特异度=真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）×100%；阳性预测值=真阳性例数/（真阳性例数+假阳性例数）×100%；阴性预测值=真阴性例数/（真阴性例数+假阴性例数）×100%。

1.3 统计学处理数据分析采用SPSS 17.0统计学软件进行，计量资料用中位数表示，采用t 检验，计数资料用百分率（%）表示，采用χ2 检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果2.1 两组GM检测结果的比较病例组患者的BALF及血清GM 检测的吸光度中位数分别为1.32、0.58、0.62，较对照组显著升高（P＜0.05）（表1）。