实验室环境及无菌操作

• ·无菌操作间内禁放杂物，并定期检查室内无菌状 况，发现不符合要求时应立即停止使用，彻底消 毒灭菌。并应制定对地面、门窗、墙壁、设施等 的定期清洁、灭菌的规程。室内仅存放最必须的 检验用具，保持固定位置，不随便移动。
• 常规检验工作中一般应进行环境浮游菌和沉降 菌的检查，无菌操作间定期进行环境监测，一般
• ④稀释样品或菌液时切勿用嘴直接吸吹吸管，用过的 吸管、注射器等，应及时置入消毒缸内或消毒桶内灭 菌。
• ⑤一切操作应严格按照无菌操作规定进行，不得违反。
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谢谢！
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微生物实验室环境及无菌操作
吉林省食品药品检验所
2008.3.29长春
无菌技术的概念
• 无菌技术主要指在微生物实验工作中，控 制或防止各类微生物的污染及其干扰的一 系列操作方法和有关措施，其中包括无菌 环境设施、无菌实验器材以及无菌操作等。
• 无菌技术的应用是一个完整的操作技术。 若其中的任何一个环节污染，那其他环节 虽是无菌操作，也将完全失去意义。
为2-3周。
• 应避免不同实验室间的交叉污染。
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无菌实验室的要求
• 无菌室应每周和每次操作前用0.1%新洁尔灭或 2%甲酚液或其他适宜的消毒液擦拭操作台及可 能污染的死角，开启无菌空气过滤器及紫外灯杀 菌1小时，在每次操作完毕，同样用上述消毒液 擦拭工作台面，除去室内湿气，用紫外灯杀菌半 小时.
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无菌实验室的要求
• 无菌室内温度应控制在18-26℃, 相对湿度
45%-65% .
• 缓冲间及操作室内均应设置能达到空气消 毒效果的紫外灯或其他适宜的消毒装置， 空气级别不同的相邻房间之间的静压差应 大于5Pa，洁净室与室外大气的静压差大于 10Pa。
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无菌实验室的要求
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进入无菌室的准备
• 操作人员将手部消毒后再穿无菌服。 • 在进入无菌室后，进一步用浸有消毒液的
棉球消毒手。
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检验操作过程
• ①在所有操作中均不应大幅度或快速动作，以免搅动 空气中尘埃微粒。
• ②使用玻璃器皿应轻取轻放，避免破损，以防培养物 扩散。
• ③当灭菌瓶塞或试管塞掉落在工作台上，一般不宜再 用，应另换无菌塞或通过火焰处理后再用。
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无菌操作
• 无菌操作的概念： • 无菌操作一般是指在无菌环境下，使用无
菌制品或无菌器材进行检验或实验的过程 中，能防止微生物污染与干扰的一种常规 操作方法。
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无菌操作的目的：
• 一是保证待检物品不被环境中微生物污 染，二是防止被检样品中的微生物在操 作过程中污染环境或感染操作人员。
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无菌实验室的要求
• 无菌检查、微生物限度检查实验室分无菌操作间和 缓冲间。无菌操作间应具备相应的空调净化设施和 环境，采用局部百级措施时，其环境应符合万级洁 净度要求。无菌室内部应六面光滑、平整、无缝隙、 不起灰、不落尘、耐腐蚀、易清洗、无死角，室内 不得安装上、下水道。
• 进入无菌操作间应有人净和物净的设施。无菌操作 间应根据检验品种的需要，保持对邻室的相对正压 或相对负压。室内应设专用传递窗，所有实验器材 消毒灭菌处理后，通过传递窗进入无菌间或在特制 进口通道内灭菌处理后送入无菌间。
• 阳性试验应另设单独的净化工作台，不得在供试 品检验用的无菌室内或净化工作台上操作。
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• 凡是检验中使用的器材，能灭菌处理的必须 灭菌处理。如玻璃器皿、注射器、吸管、试 管、培养基、稀释剂、无菌服、口罩、称量 纸等 ，在使用前都必须经过各种适宜的方法
灭菌，在适宜的储存器或较洁净的环境中保 存备用。凡检验用器材无法灭菌处理的，使 用前必须经消毒处理。例如：无菌室内的凳、 试管架、天平、工作台、检验样品容器或包 装以及工作人wk.baidu.com的手等，这些虽无法进行灭 菌，但可以消毒。无菌间使用的拖鞋也要定 期消毒处理。
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进入无菌室的准备
• 消毒处理无菌室
• 将实验所用器材和被检样品经灭菌和消毒 处理后通过传递窗进入无菌室
• 洗手消毒 首先用肥皂涂在手上揉搓10－ 15s肥皂虽不杀菌但有去污作用，然后用 流水彻底冲洗，可有效除去手上大多数暂 住菌，再用消毒液洗手，如洗必泰、苯扎 溴铵、碘伏、乙醇、过氧乙酸等