生物安全柜及应用课件

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生物安全柜
biological safety cabinets (BSC)
湛江市疾病预防控制中心 艾滋病确证实验室
1
工作台的分类
超净工作台 生物安全柜
➢生物安全柜的基本防护功能
✓ 保护操作人员 ✓ 保护样品 ✓ 保护环境
2
生物安全柜的定义
❖防止操作处理过
程中,含有危险性
或未知性生物微粒
气溶胶散逸的箱形
替代方法:如电热套或可抛的加热环。
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常见说法和错误认识
“可以把生物安全柜当排风柜使用…”
➢排风柜用于排出有害有毒的烟和气溶 胶,应该用对多种化学试剂惰性的材 料构成
不能
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常见说法和错误认识 如果在生物安全柜中工作,
就不必很小心的操作
错! 只有在正确使用的情况下,才能保护
操作人员、样品和环境。在生物安全柜 中工作,什么时候都需无菌操作
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生物安全柜的必测项目
序号 1 2 3 4 5
6
项目
工况
垂直气流平均速 度 工作窗口气流流 向 工作窗口气流平 均速度 工作区洁净度
噪声
Fra Baidu bibliotek照度
正常运转状 态 正常运转状 态 正常运转状 态 正常运转状 态 正常运转状 态
正常运转状 态
执行 条款 10.2.4 10.2.5 10.2.6 10.2.7 10.2.8
61
常见说法和错误认识
生物安全柜有紫外灯, 就不必消毒清洁工作区域
错! 使用紫外灯可以减少安全柜不用时工
作区域的污染。紫外线穿透力差,不能杀 灭被灰尘或有机物保护的微生物
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常见说法和错误认识
“离心机可以放在生物安全柜内使用?" 不能! ➢工作区域放置大物体将影响气流,
降低安全柜的效率 ➢离心机、搅拌机等电器的风扇,可
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Ⅱ级A2型生物安全柜
无排风管
有排风管
最小表 面风速 0.5m/ s
19
Ⅱ级A2生物安全柜(无排风管)
满足生物安全等级 1、2、3的要求
不涉及放射性物质
不涉及挥发性 有害化学品
建议不应有明火
20
Ⅱ级A2型生物安全柜(有排风管)
满足生物安全等级1、2、3的要 求 适用于含痕量放 射性物质的工作
基本性能 1.微生物防护性能 2.物理性能 3.通过环境试验
70
物理性能
71
物理性能
72
生物安全柜的现场检测
安装完毕,投入使用前
被移动位置后 检修后 更换高效过滤器后 一年一度常规检测
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生物安全柜的必测项目
❖垂直气流平均速度 ❖工作窗口气流流向 ❖工作窗口气流平均速度 ❖工作区洁净度 ❖噪声 ❖照度
层流气流向下扫过工 作区域,捕获气溶胶, 经安全柜的内层至 HEPA滤膜
为实现真正的层流, 各点的气流速率必须 在平均流速的+/20%以内
38
操作理论--有方向的气流
空气从柜前和周围 吸入,使工作区域 的气溶胶更难逃逸
此气流通常以向内 吸入的体积或平均 流速计算、表示
39
操作理论-烟气分束
在工作区域的一个垂 直平面内烟气被分束, 向前方和后方的气孔 移动
空气净化负压安全
装置
Class II 生物安全柜
3
生物安全柜的分类
根据处理样品的危害不同,分为 三个等级:
Ⅰ级, Ⅱ级, Ⅲ级 BSC-Ⅰ(Ⅰ级生物安全柜) BSC-Ⅱ(Ⅱ 级生物安全柜) BSC- Ⅲ (Ⅲ 级生物安全柜)
4
Ⅱ级生物安全柜的分类
1.Ⅱ级A1型生物安全柜
柜内空气70%循环,30%排出,窗口流速0.4
适用于含少量挥发性 有害化学品的工作
建议不应有明火
21
BSC-Ⅱ-A2型
无外接风道
有外接风道
正压污染区被负压区域包围
22
23
Ⅱ级B1型生物安全柜
前窗进风气流平均流速≥0.5m/s 经HEPA过滤器的下送气流,大部分 是未被污染的循环吸入气流 循环气流比例为30% 污染的下送气流经HEPA过滤后,大 多数经过专门的排风管排入大气
24
最小表面风速 100 fpm
经HEPA过滤 的下送气流, 大部分未被 污染
污染的下送 气流经HEPA 过滤后,大 部分经排风 管排入大气
Ⅱ级B1型生物安全柜 25
Ⅱ级B1型生物安全柜
满足生物安全等级1、2、3的要 求 工作区域的后部可使用少量的放 射性物质
工作区域的后部可使用少量的挥 发性有害化学品
11
Ⅱ级生物安全柜的分类
Class II
Type A
A1
A2 废气经烟罩排入 实验室或室外
Type B
B1
B2 废气必须经排风系统排 至室外,并带报警装置
12
安全柜的选择
Type A
Type B
❖选用A类还是B类生物安全柜?
➢ 不是生物因素 ➢ 而是是否使用挥发性的有害物
质或放射性物质
13
Ⅱ级生物安全柜
满足生物安全等级1、2、3的要 求
不涉及放射性物质
不涉及挥发性有害化学品 建议不应有明火
14
15
Ⅱ级生物安全柜
Type A1无排风管路 Type A1有排风管路
最 小 流 速 75 fp m
16
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Ⅱ级A2型生物安全柜(B3型)
前窗进风气流平均流速≥0.5m/s 经HEPA的下送气流与操作口向内 气流混合 循环气流比例:70% 经HEPA过滤器的空气,可以排回 实验室或通过排风罩排入环境
错! I级安全柜适用于一级、二级和三级
安全实验室 Ⅱ级和Ⅲ级安全柜则适用于所有级 别安全实验室
68
生物安全柜的选用
1.凡进行有害微生物和转基因操作, 均应使用生物安全柜,不可用净化 工作台代替
2.根据工作性质和防护要求,选用适 当级别和型号的生物安全柜
3.产品质量 4.售后服务
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Ⅱ级生物安全柜的性能
42
生物安全柜的使用
开始
• 关紫外灯,前窗开至适当高度,打开 安全柜的灯和风扇
• 检查出风口是否有障碍物,等待5min • 用消毒液彻底洗净手和手臂;穿长袖
工作服和手套;带防护眼镜
清洁
用70%的乙醇或适当的消毒剂擦拭 工作区域内壁
43
生物安全柜的使用
上样 •只放入所需物品 •不能超载 •出风口不要有障碍物 •大物体间要保持一定距离 •前窗降至适当高度 •2-3min以吹扫污染物
10.2.9
适用安全柜 级别 II级
I、II级 I、II级
II级 I、II、Ⅲ
I、II、Ⅲ
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78
谢谢!
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建议不应有明火
26
BSC-Ⅱ-B1型
正压污染区被 负压区域包围
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Ⅱ级B2型生物安全柜(全排型)
前窗进风气流平均流速≥0.5m/s 循环气流比例为0,即柜中排出的 气体不再循环 所有污染的风道和压力排风系统均 保持负压
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Ⅱ级B2型生物安全柜(全排型)
29
Ⅱ级B2型生物安全柜(全排型)
满足生物安全等级 适用于放射性物质* 适用于挥发性有害化学品 建议不应有明火
可开启前窗在负压下 操作
表面风速75-100fpm
排出的气体经HEPA 过滤
保护操作人员和环境
HEPA
适用于样品不需保护的实验工作
9
Ⅱ级生物安全柜(BSC Ⅱ) 主要功能:
➢ 用于操作低、中度危险的微生 物,病原体
➢ 操作空间到达无菌的洁净条件
10
Ⅱ级生物安全柜(BSC Ⅱ ) 主要结构:
➢具有前吸风口和排气口 ➢可防止内部污染气体流出 ➢避免外部气体进入箱內污染样品 ➢气体经HEPA过滤排出
内壁
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生物安全柜的使用
理想的工作台摆放
污染 干净物品 区域
废弃物 托盘
垃圾袋
50
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53
54
55
56
生物安全柜内感染性材料溢洒的处理
发生少量溢洒,用吸收纸巾立即处理,并浸满消 毒液的毛巾或纱布对生物安全柜及其内部的所有 物品擦洗。消毒后更换手套,不论是摘下手套还 是更换手套都要洗手。 若发生大量溢洒,液体通过柜前面或后面的格栅 流到下面,柜内所有物品都应进行表面消毒,并 从柜中取出,关闭排水阀,将消毒液倒在工作台 面上,使液体通过格栅流到排水盘上。所有接触 溢出物品的材料都要进行消毒和/或高压灭菌处 理。
66
常见说法和错误认识
” 应每年更换HEPA滤膜?..”
不一定! HEPA滤膜应在压力差过大时更换(
滤膜沾满颗粒) 决定滤膜寿命的两大因素:
➢房间内空气污染的程度 ➢安全柜工作的时间 按时间表更换滤膜,而不考虑滤膜被 污染的程度,可能造成不必要的浪费
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常见说法和错误认识
I级安全柜只适用于一级安全实验室 Ⅱ级安全柜只适用于二级安全实验室 Ⅲ级安全柜只适用于三级安全实验室
m/s
2.Ⅱ级A2型生物安全柜
柜内空气70%循环,30%排出,窗口流速0.5
m/s
3.Ⅱ级B1型生物安全柜
柜内空气30%循环,70%排出,窗口流速0.5m
/s
4. Ⅱ级B2型生物安全柜
5
Ⅱ级生物安全柜
1.美国对Ⅱ级生物安全柜有新的分 类方法
2.欧洲产品无B2型Ⅱ级生物安全柜
6
Ⅰ级生物安全柜(BSC Ⅰ)
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生物安全柜的使用 技巧
• 所有物品离前窗至少2英寸,所有 污染性的操作尽量远离工作区域的 后部
• 干净的与污染的物品分开放置;污 染物品尽量放置在工作区域后部
• 操作时物品和手臂不要穿过前窗
48
生物安全柜的使用
技巧
• 避免使用明火,用适当的灭菌措施 • 避免使用干扰安全柜内层流的实验
手段
• 安全柜处于操作状态时,彻底消毒
为最有效的防止烟气 逃逸,物品应放在烟 气分束以后的区域, 操作也应在此进行
40
生物安全柜的使用
1.正确安装,确保安全柜与外部 排风系统压力平衡,保证安全 柜处于正常工作状态
2.定期维护和检测,确保安全性
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生物安全柜的使用 制定计划
• 工作前认真理解操作步骤 和所需设备
• 尽量减少扰动 • 准备好消毒剂
34
Ⅲ级生物安全柜
35
生物安全柜的操作理论
生物安全柜的要求: • 颗粒经HEPA过滤去除 • 气流为层流 • 气流有方向
36
生物安全柜的操作理论
生物安全柜的主要部件: • HEPA滤膜 • 马达/风扇强制气体流动 • 马达转速的控制部分 • 气体的吸入、平衡控制及管路系统
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操作理论--层流
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生物安全柜的使用
最后的吹扫 工作结束,继续开机10-15min
下样 与污染物接触的物品,取出之前
必须经表面去污处理 所有托盘或容器取出前必须加盖
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生物安全柜的使用
清洁 ➢用消毒剂清洁内壁,待其干燥 ➢定期抬起工作面清洁下面的区域
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生物安全柜的使用
关机 •关闭灯、风机、关闭前窗 •开紫外灯
”所有的生物安全柜应连续工作..”
某些应用,如研究生物毒素药物的 工作,为防止有害物质逃逸,建议 连续使用
连续使用将降低HEPA滤膜的寿命
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常见说法和错误认识
”如果让安全柜连续工作,室内空 气洁净度将达到100级...”
假若房间密闭,没有通风系统,没有 什么活动,循环式的A类安全柜可能会 把空气净度降至100级。不幸的是,一 旦人员进入,将再次被污染。这样做将 降低HEPA滤膜的寿命
主要功能:
➢用于低度危险性的微生物和病原体 ➢作业空间并未到达无菌洁净的条件 ➢保护操作人员及环境 ➢但不保护样品
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Ⅰ级生物安全柜(BSC Ⅰ)
主要结构: ➢带有抽气装置的操作箱 ➢气体向操作箱内流动,保护操作者 ➢排出气体经HEPA过滤 ➢气流速度在0.4m/s以上(排气量/
进气面积)
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Ⅰ级生物安全柜
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人体工程学方面的考虑 肘和肩膀
调整椅子高度 ,让肩膀放松双 肘自然放于两侧
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常见说法和错误认识
“可以在安全柜中使用喷灯..."
➢ 喷灯火焰将严重影响安全柜内的层 流,可能造成气溶胶的扩散 ➢若喷灯的火苗很大,可能融化HEPA 滤膜的粘结剂或烧滤膜 ➢若无人看守,喷灯可能熄灭,在A类 或A/B3类安全柜内,泄露的气体可能 达到爆炸极限
能破坏安全柜内的气流 ➢离心机内最好使用密封的安全杯,
在安全柜内装样和下样
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常见说法和错误认识
“B类安全柜和A类相比能提供更好的保护..”
不一定。 ➢对于远离挥发性有害化学品的侵害, ➢对于远离生物有害气溶胶的侵害,则
不是 ➢根据实际工作的要求和研究内容,确
定使用B类或A类的生物安全柜
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常见说法和错误认识
30
BSC-II-B2型 正压污染区被 负压区域包围
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BSC-Ⅲ型
▪ 保护实验人员、 实验对象和环境
▪ 密闭结构 ▪ 通过手套操作 ▪ 柜内负压不小于
120Pa ▪ 排风两道高效过
滤器
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Ⅲ级生物安全柜
❖一般无定型产品,需特殊定货
❖若干Ⅲ级生物安全柜连在一起 使用,全部操作流程均在柜内 完成,以确保安全
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