灰色链霉菌产链霉素汇报、

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链霉素的生产

项目名称：链霉素的生产编制人：编制时间：2012/10/23总页数：文件编码：JL-SXBG-2012-微生物药物的生产-链霉素的生产一、链霉素的概述链霉素的化学结构式定义基本解释:一种抗生的有机碱C21H39N7O12 ,是由土壤放线菌( Streptomyces griseus )产生的,能有效地抵抗许多细菌,主要用其盐治疗结核病、鼠疫、百日咳、细菌性痢疾、泌尿道感染和主要由革兰氏阴性细菌引起的其它传染病。

详细解释:抗菌素的一种。

白色粉末，有苦味，对结核杆菌、鼠疫杆菌、大肠杆菌等有抑制作用。

简介链霉素是一种从灰链霉菌的培养液中提取的抗菌素。

属于氨基糖甙碱性化合物，它与结核杆菌菌体核糖核酸蛋白体蛋白质结合，起到了干扰结核杆菌蛋白质合成的作用，从而杀灭或者抑制结核杆菌生长的作用。

由于链霉素肌肉注射的疼痛反应比较小，适宜临床使用，只要应用对象选择得当，剂量又比较合适，大部分病人可以长期注射（一般2个月左右）。

所以，应用数十年来它仍是抗结核治疗中的主要用药；链霉素由灰色链霉菌发酵生产。

双氢链霉素可由湿链霉菌产生，但通常以半合成方法生产；由灰色链霉菌产生的广谱抗生素，分子由链霉胍、链霉糖和N－甲基-L-葡萄糖胺组成；链霉素分子中链霉糖部分的醛基被还原成伯醇基后，就成为双氢链霉素，其抗菌效能与链霉素大致相同，但对听觉神经的毒性比链霉素大。

药理作用链霉素是一种氨基糖苷类药，经主动转运通过细菌细胞膜，与细菌核糖体30S亚单位的特殊受体蛋白结合，干扰信息核糖核酸与30S亚单位间起始复合物的形成，抑制蛋白合成。

使DNA发生错读，导致无功能蛋白质的合成；使多聚核糖体分裂而失去合成蛋白的功能，使大量氨基糖苷类进入菌体，细菌细胞膜断裂，细胞死亡。

作用机理链霉素和其他的氨基糖苷类药物一样是通过干扰细菌蛋白质合成而发挥抗菌作用的。

链霉素结合了细菌核糖体的30S亚基上的16SrRNA，干扰formyl-methionyl-tRNA与30SrRNA的连接，阻断细菌蛋白质的合成。

灰色链霉菌生产链霉素的发酵工艺优化

葡萄糖４０、硫酸铵６、Ｋ２ＨＰＯ４０．５、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ
０．７５、ＮａＣ１２，ＣａＣＯ０．７，ｐＨ７．５。
发酵水平徘徊不前，普遍存在生产成本高、发酵周期长、产量稳定性差等问题。近年来，人们对无公害农产品的需求不断增
法，研究摇瓶发酵中菌龄、接种量、装液量、温度、初
１．３培养条件
１．３．１菌种的斜面培养
无菌条件下，一８０ｏ【＝超低温冰箱保藏的孢子甘
油管，取２００Ｉ．ＬＬ涂布于斜面，置于３０℃ 的培养箱中，相对湿度４０％一６０％，依菌落生长情况培养７～
为２８℃ ，在此条件下发酵液中链霉素产量约为８８０Ｕ／ｍＬ，较优化前提高近１０％。
关键词
链霉素
灰色链霉菌
发酵工艺文献标志码
优化Ａ
中图法分类号
ＴＱ４６５．２；
链霉素（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）是一种由灰色链霉菌发酵产生的氨基糖苷类抗生素 ¨ Ｊ，它主要是与原核细胞（如细菌）核糖体３０Ｓ亚单位结合，干扰细菌蛋白质的合成，从而杀灭细菌或抑制细菌生长Ｊ。在医学上，主要用于治疗结核杆菌感染Ｊ，还可用于治疗多种革兰氏阴性菌所引起的感染，如大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属等Ｊ。２０世纪５０—８０年代，链霉素的大规模发酵生产发展迅速，为人类作出了不可磨灭的贡献。但近几十年来，由于链霉素耳毒性的发现，其应用受到了极大限制Ｊ，致使

(整理)链霉素的生产

详细解释:抗菌素的一种。

白色粉末，有苦味，对结核杆菌、鼠疫杆菌、大肠杆菌等有抑制作用。

简介链霉素是一种从灰链霉菌的培养液中提取的抗菌素。

由于链霉素肌肉注射的疼痛反应比较小，适宜临床使用，只要应用对象选择得当，剂量又比较合适，大部分病人可以长期注射（一般2个月左右）。

所以，应用数十年来它仍是抗结核治疗中的主要用药；链霉素由灰色链霉菌发酵生产。

使DNA发生错读，导致无功能蛋白质的合成；使多聚核糖体分裂而失去合成蛋白的功能，使大量氨基糖苷类进入菌体，细菌细胞膜断裂，细胞死亡。

作用机理链霉素和其他的氨基糖苷类药物一样是通过干扰细菌蛋白质合成而发挥抗菌作用的。

链霉素结合了细菌核糖体的30S亚基上的16SrRNA，干扰formyl-methionyl-tRNA与30SrRNA的连接，阻断细菌蛋白质的合成。

链霉素的生产——第二组

种子扩培所得的纯种培养物称为种子。
3
种子扩培的一般过程：斜面菌种 → 一级种子培
养（摇瓶） → 二级种子培养(种子罐) → 发酵
种子应具备要求 ◆总量及浓度能满足要求。 ◆生理状况稳定，个体与群体区隔明显。 ◆活力强，移种发酵后，能够迅速生长。 ◆无杂菌污染。
种子扩培的目的接种量的需要。菌种的训化。缩短发酵时间，保证生产水平。
4
种子的制备工艺
5
实验室种子制备阶段：
◆琼脂斜面 ◆固体培养基扩大培养 ◆摇瓶液体培养
生产种子制备阶段：
◆种子罐扩大培养
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斜面孢子培养将砂土管（或冷冻管）保持的链霉菌孢子接种到斜面培养基，于27℃下培养7天。摇瓶种子培养待斜面长满孢子后，制成悬浮液接入装有培养基的摇瓶中，于27℃下培养45-48小时，待菌丝生长旺盛。
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链霉素的发酵与过程监控
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链霉素的发酵与过程监控
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链霉素的分离与效价测定
链霉素的提取工艺
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效价：
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谢谢观赏！！！
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菌种的保藏
原理： ◆主要是根据菌种的生理生化特点，人工制造条件，是孢子或菌体的生长代谢活动尽量降低，以减少变异。 ◆一般可以通过保持培养基营养成分在最低水平，缺氧状态，干燥或低温，使种子处于“休眠”状态，抑制繁殖能力。
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保藏方法
◆1. 斜面冰箱保藏方法 4摄氏度 3—6个月 ◆2. 沙土管保藏法产孢子或芽孢微生物 1年 ◆3. 菌丝速冻法甘油作保护剂，零下20摄氏度 ◆4. 石蜡油封存法 1年左右 ◆5. 真空冷冻干燥保藏法任何微生物；一般五年以上 ◆6. 液氮超低温保藏法零下196摄氏度；保护剂；保存期长

不同PH条件的发酵

不同pH条件下对灰色链霉菌产链霉素的影响关秀颖李欢王新然许小马摘要：微生物的代谢调控都需要在酶的催化下进行，而酶的活性受多种因素的影响，而pH值是其中较重要的因素之一，因此我们对灰色链霉菌在不同pH下的生长情况以及对次级代谢产物——链霉素的合成进行了研究。

本实验设置了4个不同的pH值梯度，分别在培养后24h、72h、120、168h时对生物量、培养基中还原糖浓度、和链霉素浓度进行了测定。

根据所得数据分析得出灰色链霉菌生长和代谢产生链霉素的最适pH。

关键词：灰色链霉菌；链霉素；最适pH链霉素（streptomycin）是一种氨基葡萄糖型抗生素，分子式C21H39N7O12。

1943年美国 S.A.瓦克斯曼从链霉菌中析离得到，是继青霉素后第二个生产并用于临床的抗生素。

硫酸链霉素为一种氨基糖苷类抗生素。

链霉素对结核分枝杆菌有强大抗菌作用，其最低抑菌浓度一般为0.5mg/ml。

非结核分枝杆菌对该品大多耐药。

链霉素对许多革兰阴性杆菌如大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属、肠杆菌属、沙门菌属、志贺菌属、布鲁菌属、巴斯德杆菌属等也具抗菌作用；脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌亦对该品敏感。

链霉素对葡萄球菌属及其他革兰阳性球菌的作用差。

各组链球菌、铜绿假单胞菌和厌氧菌对该品耐药。

链霉素主要与细菌核糖体30S亚单位结合，抑制细菌蛋白质的合成。

细菌与链霉素接触后极易产生耐药性。

链霉素和其他抗菌药物或抗结核药物联合应用可减少或延缓耐药性的产生。

用于兔热症、鼠疫、严重布氏杆菌病和鼻疽的治疗（常与四环素或氯霉素合用）。

也用于结核病的二线治疗，多与其它抗结核药合用。

链霉素由灰色链霉菌发酵生产。

本实验研究灰色链霉菌分别在pH6.6、pH6.8、pH7.2、pH7.5条件下培养，利用紫外分光光度法定量测定链霉素的产量。

1 材料和方法：1.1 实验材料灰色链霉菌；链霉素标准品。

1.2 培养基种子培养基：牛肉膏1g、蛋白胨1g、酵母膏0.5g、葡萄糖2g、乙酸钠0.5g、磷酸氢二钾0.2g、柠檬酸氢二铵0.2g、硫酸镁0.02g、硫酸锰0.025g、吐温80 0.1g、亚油酸30ul，搅拌混合并加蒸馏水至100ml，调节pH 值至6.8，121℃灭菌20min。

链霉素药物的研究进展PPT课件

目前国外链霉素的主要生产企业是美国的辉瑞公司和法国的罗纳.普朗克公司,现在全世界链霉素的产量估计在2500吨到3000 吨左右。
针对我国国内链霉素生产现状存在的问题，我们可以从以下几点改进链霉素的生产工艺①菌种的优化,如通过诱变选育高产突变菌株 ②发酵工艺的优化, 例如：罐温、罐压、pH、糖浓度、溶氧浓度等。③提炼工艺的优化，如利用膜分离技术来提炼链霉素。
扩大培养
菌种
斜面培养
摇瓶
种子罐
27 ℃， 7天斜面孢子发酵27罐℃，63h 发酵液
搅拌
27℃，45-48h
27 ℃， 7天搅拌
2、发酵液的分离提纯工艺传统工艺提纯链霉素国外提纯链霉素法离子交换法
传统工艺提纯链霉素
一般采用蒸汽加热（70～75℃）方法使蛋白质凝固变性。添加磷酸或一些络合剂如三聚磷酸等使高价离子草酸、磷酸生成不溶性沉淀物，然后通过板框过滤或离心分离将这些沉淀物除去。
链霉素的结构
H 2N
HN HO
HO
NH
OH H
N
O
NH2 HN
O
OHC
OH
O
CH3
OH H
O
OH
链霉素
HN
OH
CH3
链霉素游离碱为白色粉末，大
多数盐类也是白色粉末或结晶，无
嗅，味微苦。链霉素易溶于水，难
溶于有机溶剂中。临床上常用的是
硫酸链霉素。硫酸链霉素为白色或
类白色粉末，无嗅、味微苦、有吸
湿性。
药理作用
链霉素是一种氨基糖苷类药，经主动转运通过细菌细胞膜，与细菌核糖体30S亚单位的特殊受体蛋白结合，干扰信息核糖核酸与30S亚单位间起始复合物的形成，抑制蛋白合成。使DNA 发生错读，导致无功能蛋白质的合成；使多聚核糖体分裂而

灰色链霉菌产链霉素发酵培养基的优化

ｃｃＩ培养至孢子成熟（一般７～１０ｄ）。
１．３．２种子培养
将培养的试管斜面菌种用无菌水洗下，倒入无
２７期
李海燕，等：灰色链霉菌产链霉素发酵培养基的优化
８２０３
菌的玻璃珠的大试管中，然后放在微型漩涡混合仪上振荡１５ｍｉｎ，脱脂棉过滤后即得单孢子悬液。用无菌水稀释，使孢子悬液在分光光度计下＝
酵培养基中４种主要组分，即玉米淀粉、黄豆饼粉、硫酸铵、磷酸氢二钾的用量配比进行优化筛选。结果表明，发酵培养基中碳、氮源及主要无机盐的用量对发酵液中链霉素的产量均有显著影响。４种因素中对产量影响最大的是玉米淀粉浓度，其次是Ｋ：ＨＰＯ浓度，再次是氮源即黄豆饼粉和硫酸铵的浓度。优化得到的最佳发酵培养基组成为：黄豆饼粉５％、玉米淀粉４％、
近年来，由于化学农药严重污染，国内外对分
灰色链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｇｒｉｓｅｕｓ）购于中国工业１．２培养基
菌株编号为ＣＩＣＣ１１００２。家，研究授入较大，生产水平提高较快。然而，９０年微生物菌种保藏管理中心，产孢培养基：葡萄糖１％、蛋白胨０．２％，豌豆浸
Ｂ
链霉素（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）是１９４４年由美国瓦克斯曼（ＷａｋｓｍａｎＳ．Ａ．）首次在灰色链霉菌属中发现的

链霉素的生产

磷酸盐对菌体生长和链霉素合成非常重要，一般采用较低的磷酸盐浓度，15-150 mmol/L（46.5-465 mg/L）；
Fe2+一般适用量在20 μg/ml ；
生物调节剂A因子——简单的内酯化合物
通气和搅拌的影响和控制：
增加通气量，保持一定搅拌速度，避免长期停止搅拌和闷罐。
温度、pH的影响和控制：
Байду номын сангаас
菌种
链霉素产生菌容易发生变异
菌种用冷冻干燥法或砂土管法保存，并严格控制有效使用期；所有生产用菌种或斜面都保存于低温冷库内（0-
4℃），并限制其使用期限；
严格控制生产菌落在斜面上的传代次数，一般以3代为限，用单菌落转种，以使用新鲜斜面为原则；定期进行菌种的纯化筛选，淘汰退化的菌落；不断选育高单位的新菌种。
链霉素发酵温度以28.5℃为宜；链霉菌菌丝生长的最适pH为6.5-7.0，适于链霉素合成的pH为6.8-7.3。
补料控制：
补加葡萄糖、硫酸铵和氨水，不仅为
菌体生长和产物合成提供营养物质，还
能调节发酵液的pH。
链霉素的发酵工艺
链霉素的产生菌——灰色链霉菌（Streptomyces griseus），比基尼链霉菌（Str.bikiniensis），
灰肉链霉菌（Str.griseocarneus）
作用
• 链霉素（streptomycin）是一种氨基葡萄糖型抗生素，分子式C21H39N7O12。 1943年美国 S.A.瓦克斯曼从链霉菌中析离得到，是继青霉素后第二个生产并用于临床的抗生素。 • 它的抗结核杆菌的特效作用，开创了结核病治疗的新纪元。从此，结核杆菌肆虐人类生命几千年的历史得以有了遏制的希望。

浅谈链霉素的生产工艺及应用与发展

浅谈链霉素的生产工艺及应用与发展古冰霞摘要：生物技术被认为是21世纪最具主导地位的高新技术，而生物技术药物大部分都是抗生素类药物，抗生素类药物对治疗许多疾病都有着显著的疗效，链霉素就是其中的一种。

链霉素是一种重要的抗生素，也是一种氨基糖苷类药，在目前的制药工业中占有举足轻重的地位。

本文从链霉素的生产及提取工艺，链霉素的开发应用，链霉素的发展概况及发展前景这三个方面对链霉素进行综合性的阐述，进而对链霉素也有了进一步的认识。

关键词：链霉素；生产工艺；应用；发展1链霉素的生产工艺1.1链霉素的简介1.1.1 名称与化学结构式中文名：链霉素英文名：streptomycin分子式：C21H39N7O12分子量：581.59化学名：：2，4-二胍基-3，5，6-三羟基环己基-5-脱氧-2-O-(2-脱氧-2-甲胺基-α-L-吡喃葡萄糖基）-3-C-甲酰-β-L-来苏戊呋喃糖甙;它是由链霉胍、链霉糖、N-甲基-L-葡萄糖胺构成的糖苷。

化学结构式如下:1.1.2 性状与理化性质链霉素游离碱为白色粉末，大多数盐类也是白色粉末或结晶，无嗅，味微苦。

链霉素比较稳定，易溶于水，难溶于有机溶剂中。

链霉素是从放线菌属的灰链丝菌的培养液中提取的，是一种碱性甙，与酸类结合成盐。

兽医临床上常用的是硫酸链霉索。

硫酸链霉素为白色或类白色粉末，无臭、味微苦、有吸湿性。

1.2 链霉素的生产工艺1.2.1生产过程链霉素由灰色链霉菌发酵生产。

双氢链霉素可由湿链霉菌产生，但通常以半合成方法生产。

链霉素的生产过程分为两大步骤：①菌种发酵。

将冷干管或沙土管保存的链霉菌孢子接种到斜面培养基上，于27℃下培养7天。

待斜面长满孢子后，制成悬浮液接入装有培养基的摇瓶中，于27℃下培养45～48小时待菌丝生长旺盛后，取若干个摇瓶，合并其中的培养液将其接种于种子罐内已灭菌的培养基中，通入无菌空气搅拌，在罐温27℃下培养62～63小时，然后接入发酵罐内已灭菌的培养基中，通入无菌空气，搅拌培养，在罐温为27℃下，发酵约7～8天。

第三组的链霉素的生产

发酵液的过滤及预处理
• 发酵终了时，所产生的链霉素，有一部分是不菌丝体相结合的。用酸、碱或盐作短时间处理以后，不菌丝体相结合的大部分链霉素就能释放出开。通过对发酵液进行适当的预处理，即可改善其流体性能，降低滤饼比阻，提高过滤不分离的速率。
原斜面：培养恒温35——36℃，7天斜面孢子：培养恒温34——35℃，6天摇瓶种子：培养33——34℃，39.5hr转速250rpm，装量80ml/750ml接种量一块斜面/瓶50——64hr 小罐种子：培养36±0.5℃25——30h转速60—— 300rmp，搅动功率5.5kw通气量2m3/min，罐压 0.03Mpa 中罐种子：培养36±0.5℃，25hr转速60——240rmp 接种量15%通气量1.5wm罐压0.03Mpa搅拌功率大罐发酵36±0.5℃，136hr转速60——130rpm接种量15%通气量0.75wm罐压0.04Mp搅拌功率115kw
• 化学结构式如下:
链霉素理化性质
1.物理性质链霉素游离碱为白色粉末。其大多数盐类也是白色粉末或结晶，无嗅，味微苦。链霉素在中性溶液中能以三级阳离子形式存在，所以可以用离子交换法进行提取。
2.稳定性链霉素的水溶液比较稳定，但其易受 pH和温度的影响较大。短时间加热，如在70 o C加热半小时，对活性无明显影响。 100 o C加热10min，活性约损失一半。最稳定的pH是4.0~4.5。
• 发酵原理链霉素是一种从灰链霉菌的培养液中提取的抗菌素，属于氨基糖甙碱性化合物，它不结核杆菌菌体核糖核酸蛋白体蛋白质结合，起到了干扰结核杆菌蛋白质合成的作用，从而杀灭或者抑制结核杆菌生长的作用。链霉素是含有链霉胍的氨基糖苷类抗生素族中的主要成员由链霉胍、链霉糖和N甲基-L-葡萄糖胺构成的糖，苷其结构式如下。链霉素中链霉糖部分的醛基被还原成伯醇基后就成为双氢链霉，它的抗菌效能和链霉素大致相同，目前临床上使用的是链霉素或双氢链霉素的硫酸盐

硫酸链霉菌实验报告

硫酸链霉菌实验报告本实验旨在进一步了解硫酸链霉菌的特征和生长条件，以及对其进行定量分析。

实验原理：硫酸链霉菌（Streptomyces griseus）是一种常见的土壤细菌，其菌丝呈灰色，能产生许多有用的代谢物，如链霉素和利福平等抗生素。

因此，研究硫酸链霉菌的生物学特性对于新药开发和环境治理具有重要的意义。

硫酸链霉菌的培养基包含了海藻粉、葡萄糖、维生素和无机盐等成分。

其中，葡萄糖是菌落生长所需的碳源，维生素是生物合成细胞壁和酶的辅助因子，无机盐则是提供菌落生长所需的微量元素。

实验步骤：1. 准备硫酸链霉菌的培养基，包括海藻粉、葡萄糖、维生素和无机盐等成分。

2. 将制备好的培养基倒入无菌琼脂平板中，并用无菌铁针制作菌落点。

3. 用无菌铁针将硫酸链霉菌菌落接种到琼脂平板上。

4. 置于恒温培养箱中，以适当的温度（通常为28C）进行培养。

5. 观察硫酸链霉菌的菌落生长情况。

实验结果：通过观察和记录，我们得到了以下实验结果：1. 硫酸链霉菌菌落呈灰色，具有一定的延展性，且呈珠状生长。

2. 在28C的恒温培养箱中，硫酸链霉菌的菌落开始在接种点周围扩散生长，并最终形成规则的圆形菌落。

3. 菌落的直径随着培养时间增加而逐渐增大，生长速度逐渐加快。

4. 菌落的颜色仍然保持灰色，没有明显变化。

实验讨论：根据实验结果，我们可以得出以下结论：1. 硫酸链霉菌的菌落生长适宜温度为28C，这是因为在这个温度下，菌落能够更快地进行代谢活动和生长。

2. 硫酸链霉菌在合适的培养基中能够迅速适应环境，并通过分泌抗生素等物质来抑制竞争菌的生长。

3. 菌落的颜色是硫酸链霉菌特有的特征之一，但与生长时间和环境因素无明显相关性。

4. 硫酸链霉菌在固体培养基中的生长方式是以菌丝为主，通过延伸和分枝来扩展菌落。

结论：通过本实验，我们进一步了解了硫酸链霉菌的特征和生长条件。

通过观察菌落的形态和生长规律，我们可以对菌落生长进行定量分析，并为进一步研究硫酸链霉菌的生物学特性提供参考依据。

链霉素发酵提取应用的膜分离工艺

链霉素发酵提取应用的膜分离工艺
链霉素是从灰色链霉菌培养液中分离出来的一种碱性抗生素，我国自从大量生产以来，目前已形成了相当大的生产规模与能力。

链霉素早期的提取方法采用活性炭吸附法、带溶法、沉淀法、离子交换法。

这些传统工艺总收率不高，链霉素浓度低，各种杂质如色素、金属离子等含量较高，造成下游工艺处理困难，产品纯度不高。

膜法工艺取代链霉素生产中的薄膜蒸发工艺，使这一问题得到了很好的解决。

膜分离是一种无相变的纯物理手段，能在任何膜能承受的温度下对料液进行分子水平的分离。

清洁，环保，占地少，另外它的一大优势是运行成本低，去除一吨水的成本比普通的三效蒸发器低，有效地控制产品，提高了产品的质量。

链霉素是一种氨基葡萄糖型抗生素。

链霉素是由土壤放线菌产生的。

能有效的抵抗许多细菌，主要用其治疗结核病，鼠疫，百日咳，细菌性痢疾，泌尿系统感染等其他传染病，链霉素也是一种从灰链霉素的培养液中提取的抗菌素，属于氨基糖甙碱式化合物。

目前多用离子交换树脂法提取链霉素，其优势有需要的原辅料少且易得，可在易于控制的条件下进行，设备条件要求低，收益佳，经济效益好。

使用膜分离技术代替传统分离纯化技术，可简化抗生素生产工艺流程，具有节约有机溶媒、减少提取过程中目的产物的降解、提高产品收率、减轻环境污染等优点。

目前，膜分离技术在链霉素的提炼工艺上主要用于发酵液澄清、产品浓缩和去除内毒素3个方面。

链霉素的制备小结

项目二(链霉素的制备)小结通过这一项目的学习我们对链霉素以及链霉素的生产工艺有了很大的认识。

这不仅取决于老师在实验前的理论辅导，更重要的是我们通过试验自身所获得的体会。

一、试验中组员的表现情况大家在组长的带领下积极配合，相得益彰！任何一个试验都必须开紧密的团队协作，否则很难高效完成。

二.我们的最大收获通过做项目二链霉素生产方面的实验后，我知道了应如何来制备链霉素以及在制备过程中应该注意的事项。

虽然制备的链霉素结果不是很好，但是却让我从中学到了许多有关链霉素的知识。

首先，我知道了链霉素的来源，它是灰色链霉菌的次级产物，对结核分枝杆菌有强大的抗菌作用，能抑制蛋白质合成，毒性较强，特别是耳毒性，是1943年美国瓦克斯曼从链霉素中析离得到，是继青霉素后第二个生产并用于临床的抗生素。

接着，我了解并知道链霉素在实验室的生产工艺包括以下几个方面：（1）发酵工艺；（2）菌种活化；（3）摇瓶发酵。

最后，我还学到了如何在超净台中正确的进行链霉素抑菌试验的相关操作以及实验过程中的注意事项等等。

尤其是在超净台中做的操作，操作稍微不规范，最后出来的结果肯定会长菌，进而影响实验的效率。

同时，在链霉素生产过程中，老师一直在给我们进行有关链霉素的指导。

在开始这个项目之前，老师给我们介绍了应如何进行链霉素的生产，以及在生产过程中应该注意的事项和安全。

在试验室里，我们在操作过程中遇到不懂的问题，老师会及时地给我们进行解答。

如果我们在操作过程中的操作不规范，老师会及时地给我们提出来，让我们进行调整，防止下次操作过程中再出现类似的错误。

三.对老师的建议●无菌操作我们还不是很熟练，我们需要更多的练习机会。

●我们还要加强理论方面的学习。

灰色链霉菌产链霉素汇报、汇总.

枯草芽孢杆菌原液涂板所得抑菌圈图片
2017/9/28 16
5、链霉素的活性鉴定
测得抑菌圈直径为 1.7cm，1.4cm,1.5cm 平均值为1.53cm
枯草芽孢杆菌稀释五倍涂板所得抑菌圈图片
2017/9/28 17
5、链霉素的活性鉴定
测得抑菌圈直径为 1.8cm，1.4cm,1.5cm 平均值为1.57cm
及枪头、超净工作台等。
2017/9/28
9

2、斜面培养基的制备 2.1 高氏培养基：可溶性淀粉20g，硝酸钾1 g，氯化钠0.5 g，磷酸氢二钾0.5 g，硫酸镁0.5 g，硫酸亚铁0.01 g，琼脂20 g，水1000毫升， PH7.2—7.4（配制时注意，可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以

37℃培养12h，观察抑菌效果。
2017/9/28 8
实验材料的准备

1、实验器材天平、500mL刻度量杯、小刀、牛角匙、玻棒、纱布、 18mL × 180mL 试管、棉花、电炉、烧杯、报纸、记号笔、酒精灯、接种环、250/500ml三角瓶、棉花、电炉、烧杯、记号笔、酒精灯、
接种环、涂布棒、旋转式摇床、4℃冰箱、37℃孵箱、各型号移液枪

28℃、200r/min旋转式摇床培养24h，观察菌丝体形态及浓度。 3、摇瓶大量发酵待发酵培养基（50ml）灭菌后冷却到 30 ℃时，按接种量 8%-10%进行接种，即每个发酵瓶加入5ml种子液。32℃、100r/min旋转式摇床培养24h，发酵过程中，补加灭菌尿素以增加氮源，维持pH值。

2017/9/28
6

4、枯草芽孢杆菌的活化将配制好的蛋白胨牛肉膏培养基斜面接种枯草芽孢杆菌，方法同灰色链霉菌活化方法相同。28℃培养24h。

灰色链霉菌产链霉素汇报、.

37℃培养12h，观察抑菌效果。
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实验材料的准备
1、实验器材天平、500mL刻度量杯、小刀、牛角匙、玻棒、纱布、
18mL×180mL试管、棉花、电炉、烧杯、报纸、记号笔、酒精灯、接种环、250/500ml三角瓶、棉花、电炉、烧杯、记号笔、酒精灯、接种环、涂布棒、旋转式摇床、4℃冰箱、37℃孵箱、各型号移液枪及枪头、超净工作台等。
枯草芽孢杆菌稀释五倍涂板所得抑菌圈图片
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5、链霉素的活性鉴定
测得抑菌圈直径为 1.8cm，1.4cm,1.5cm 平均值为1.57cm
枯草芽孢杆菌稀释十倍涂板所得抑菌圈图片
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5、链霉素的活性鉴定
平板上未见预期结果，即透明的抑菌圈，培养基上也未长菌。
2、此次实验未取得理想的实验结果，可能原因如下： ① 发酵液中的链霉素浓度低，产物生成少； ② 制得的产物没有分离纯化，所得结果可能是发酵液渗透所致； ③ 阳性对照未长菌，可能与实验操作、样品、菌液有关。
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阳性对照，枯草芽孢杆菌原液涂板所得图片
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四、结论
通过活化灰色链霉菌并将其大量发酵，离心获取产物即链霉素；通过打孔加入链霉素，观察其抑菌圈大小判断链霉素的效价，可评价制得链霉素的活性。
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五、讨论
1、由于考虑到链霉素的抑菌效果，我组采用不同倍数稀释的枯草芽孢杆菌悬液。
3）灼烧试管口，在火焰旁将棉塞塞上。接种完毕，接种环上的余菌必须灼烧灭菌后才能放下。
4）斜面置于28℃恒温箱中，培养2~3d观察结果。

灰色链霉菌产链霉素培养基的优化

链霉素是采用发酵法生产的。早期发现产链霉素的菌种是灰色霉菌 ( S trep tomyces g riseus)。目前我国所用的菌种就是这个种及其变种。后来又找到了产链霉素或其他链霉素族抗生素 ( 如羟基链霉素或双氢链霉素 ) 的菌种。如比基尼链霉菌 ( S1bikiniensis)、灰肉链霉菌 ( S1g riseocarneu s) 等 [4-5] 。本试验采用的是灰色霉菌。其工艺采用沉没培养法, 在通气搅拌下进行发酵生产。通过正交试验对灰色链霉素的发酵培养基进行优化, 确定最佳发酵培养基组分, 提高发酵效价, 降低发酵成本。 1 材料与方法 111 菌种
抗生素工业是微生物制药工业中重要组成部分, 链霉素是瓦克斯曼 (W aksman S1A1 )于 1944年发现的第一个氨基环醇类抗生素。是相当强的有机碱, 也是多糖类化合物。
链霉素碱稳定性特别差, 工业产品主要是其硫酸盐形式, 即硫酸链霉素 ( Strep tomyc in Su lfate) [ 1]。链霉素对结核杆菌有强大抗菌作用 [ 2] , 它对许多革兰氏阴性菌 ( G- )如大肠杆菌、肺炎杆菌、肠杆菌属、沙门菌属、布鲁菌属等也具抗菌作用。链霉素对革兰氏阳性菌 ( G+ )抗菌活性较差 [ 3]。
[ 2] 彭帮柱, 岳田利, 袁亚宏, 等 1 优良苹果酒酵母的选育 [ J] 1 西北农林科技大学学报, 2004( 5) : 821
[ 3] 徐日益, 梁磊, 潘琢, 等 1 耐酒精酵母菌株的选育及其交叉耐受性的研究 [ J] 1 酿酒科技, 2007( 10): 32-361
[ 4] 胡亚平, 李宗军, 王燕, 等 1 枸杞酒酵母菌的筛选及特性研究 [ J] 1 湖南农业大学学报, 2000 ( 4) : 310-3131

灰色链霉菌菌落形态特征

灰色链霉菌菌落形态特征灰色链霉菌（Aspergillus fumigatus）是一种常见的真菌，它具有独特的菌落形态特征。

本文将为您介绍灰色链霉菌菌落形态特征，带您深入了解这一真菌的外观特征。

灰色链霉菌的菌落通常呈现出灰色或灰绿色，具有一定的粗糙质地。

在培养基上生长的菌落通常呈圆形或不规则形状，直径约为1-3厘米。

菌落的表面有时会出现白色或黄色的气溶胶，这是由于菌落内部的孢子堆积所致。

灰色链霉菌的菌落质地较硬，触摸时有时会散发出一种特殊的气味，类似于霉味。

菌落的边缘通常较光滑，但也可能出现分叉或呈不规则形状。

菌落表面的纹理较粗糙，有时呈现出绒毛状或粗糙的外观。

在显微镜下观察灰色链霉菌的菌落，可以看到菌丝网状结构。

菌丝是细长且分枝的菌落组成部分，类似于一条条细长的线。

菌丝的颜色通常为灰色或灰绿色，直径约为2-4微米。

菌丝之间呈现出交叉、网状或纵横交错的排列方式，形成了一个复杂的菌丝网。

菌落中的孢子是灰色链霉菌的繁殖结构，也是其传播的主要途径。

孢子通常呈圆形或椭圆形，直径约为2-4微米。

孢子的颜色通常为透明或淡黄色，但也可能呈现出灰色或灰绿色。

孢子在菌落的上层积累，形成了一层薄薄的粉末状物质。

除了菌落的形态特征外，灰色链霉菌还具有一些生理特征。

它是一种好氧菌，适应于富含有机物质的环境。

灰色链霉菌能够分解和利用各种有机物质，包括蛋白质、脂肪和碳水化合物。

它在自然界中广泛存在，可以在土壤、植物、食品和空气中找到。

总结一下，灰色链霉菌的菌落形态特征包括灰色或灰绿色的菌落，具有粗糙质地，表面可能有白色或黄色的气溶胶。

菌落的边缘较光滑，纹理较粗糙，菌丝呈网状结构，孢子呈圆形或椭圆形。

灰色链霉菌是一种常见的真菌，对人类和动物的健康有一定的影响。

了解其菌落形态特征有助于我们更好地认识和防范这一真菌。