MS培养基配方及培养基简介

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ms培养基配方表

ms培养基配方表

ms培养基配方表ms培养基是一种常用的细胞培养基,用于无菌条件下培养哺乳动物细胞,特别是鼠胚胎成纤维细胞(Mouse Embryo Fibroblast,MEF)。

它是由多种有机和无机化合物组成的复杂混合物,可以提供细胞生长所需的必需氨基酸、糖类、维生素和微量元素等营养物质。

同时,它还包含有机缓冲剂和盐类,可以调节培养品的 pH 值和离子浓度,保持培养条件的稳定性。

下面介绍 ms培养基的配方表:MS培养基水相1. 将1L 去离子水(DI水)加入1mol/L NaCl 至5mL2. 加入HEPES缓冲液(1mol/L)27.7g,调节至pH7.2-7.43. 加入葡萄糖25.0g,混合直至葡萄糖完全溶解4. 加入 L-谷氨酸1.42g,细胞培养I 类和 II 类所需濃度5. 加入 L-苏氨酸0.07g,细胞培养所需濃度6. 加入 L-半胱氨酸0.16g7. 加入 L-赖氨酸0.07g8. 加入 L-缬氨酸0.07g9. 加入L-异亮氨酸0.07g10. 加入L-亮氨酸0.14g11. 加入L-丙氨酸0.14g12. 加入L-天冬氨酸0.15g13. 加入L-芸香氨基酸0.42g14. 加入 L-色氨酸0.03g15. 加入 L-酪氨酸0.03g16. 加入 L-精氨酸0.17g17. 加入 L-组氨酸0.03g18. 加入 L-甘氨酸0.10gMS培养基固相1. 加入 NaHCO3(7.5%)4mL,细胞培养所需濃度2. 加入 4-(2-羟乙基)吡啶盐酸盐(HEP)2g,细胞培养所需濃度;过度使用可导致凝块形成3. 加入 MgSO4(7H2O)0.94g,细胞培养所需濃度4. 加入 KH2PO4 0.17g,细胞培养所需濃度5. 加入 NaH2PO4(H2O,2. H2O)0.19g,细胞培养所需濃度6. 加入 Na2HPO4(7H2O)3.05g,细胞培养所需濃度7. 加入次黄嘌呤(NEAA)1mL,必需的非必需氨基酸,促进细胞生长8. 加入乳酸钠2.72g,利用减少氧淤积,促进细胞生长9.加入硫酸铜子(10-5M))1mL,为MEF的细胞类型提供最佳的增生所需注:以上配方根据MS原始文献略作调整,如果在实验中出现差异,请根据实际情况微调。

MS培养基配方

MS培养基配方

MS 培养基配方1、配置MS母液母液配置:加热都是用温水浴加热,全部都要避光保存,用装乙醇的棕色瓶来保存在4度即可表2.1大量元素母液药品20x g/L 500ml(20 x)KNO338g 19gNH4NO333 g 16.5gMgSO4•7H2O7.4 g 3.7gCaCl2 6.644g 3.322gKH2PO4 3.4g 1.7g溶于200ml蒸馏水,定容至500ml 需要加热才能完全溶解CaCL2.2H2O 4.4g/L表2.2微量元素母液药品100x g/L 500ml(100x g/L)KIH3BO3MnSO4.4H2OZnSO4.7H2ONa2MoO4.2H2OGuSO4.5H2O CoCl2.6H2O 0.083g0.6222.3 g0.86 g0.025 g0.0025 g0.0025 g0.0415 g0.31 g1.115 g0.43 g0.0125 g0.00125 g0.00125 g溶于100ml蒸馏水,定容至500ml表2.3有机母液药品100x 1L500ml(100x)肌醇10g5g烟酸0.05g0.025gVB60.05g0.025gVB10.1g0.05g甘氨酸0.2g0.1g表2.4铁盐母液药品100x g/L500mlFeSO4•7H2O 2.78g 1.39gNa2-EDTA. 2H2O 3.73g 1.865g铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于100ml蒸馏水中,加热,(很重要)不断搅拌,溶解后,两液混合,加水定容至500ml,置于小口瓶中,贴上标签2、固体MS培养基材料•找到4种母液:大量元素,微量元素,有机微量元素,铁盐母液•蔗糖,琼脂锥形瓶MS培养基配方:母液都稀释至1xMS培养基配方(1L)母液体积或重量(1L) 200ml大量元素20x50mL 10ml铁盐100x 微量100x 10mL 2ml 10mL 2ml有机100x10mL 2ml 蔗糖15g(15g/L)3g琼脂8g(8g/L) 1.6gPH先调至 5.85-5.88,最终灭菌后pH接近5.81)。

如何配制MS培养基

如何配制MS培养基
溶解方法:1M NaOH或95%酒精,以前者为好
保存:配成一定浓度后,冰箱冷藏保存
2、细胞分裂素 自然界中,细胞分裂素影响细胞分裂,顶端优势的变化和茎的分
化等 组织培养中,细胞分类素主要促进细胞分裂和由愈伤组织上或器
官上分化不定芽。细胞分裂素常常与生长素相互配合,用以调节细 胞分裂,细胞伸长,细胞分化和器官形成。
受高温影响小,可高温消毒
等 电 点 PH=6.0, 碱 性 溶 液 中 易变质,光能加速变质 对光、空气、热稳定是转氨酶 的辅酶 受高温影响小,可高温消毒, 参与丝氨酸转变为甘氨酸过程
123.11 极易溶于水、乙醇 对空气、光、热、PH值稳定
244.31 441.40 176.12 180.16
溶于水、乙醇 易溶于乙酸、 NaOH、微溶于水 极易溶于水
2.0273
1.824 3
1.9710
1.9818
3.1173
四、培养体支持材料
• 1.琼脂 • 用量7-10g/L(0.7%-1%)
注意:1 若浓度过高,培养基就会变得很硬,营养物质就难于扩 散到培养的组织中。 2 当进行营养需要研究时,应注意不要使用琼脂,因为市场 供应所有琼脂含有杂质,特别是含有Ca,Mg和微量元素。
花药培养等
White培养基特点:
• 1943年由White为培养番茄根尖而设计的。 1963年又作了改良,称作White改良培养 基。
• 特点:无机盐含量较低 • 适用:生根培养。
B5培养基特点:
• 含较低的铵
• 双子叶植物 尤其木本植物组培 可选择
MS培养基特点: 无机盐、离子浓度高,硝酸 盐含量较高。
乙醚、丙酮
长和细胞壁结构的
松驰,也可用于诱

MS培养基的配制

MS培养基的配制

MS培养基的配制1、配制几种母液(1)配制MS大量元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液,使用时再分别稀释100倍。

分别称取名称重量名称重量NH4NO3165g KH2PO417gKNO3190g CaCl2·2H2O44gMgSO4·7H2O37g各自配成1L的母液。

各自倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中。

(2)配制MS微量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液。

依次称取(注:溶好一个后,再加下一个)名称重量名称重量KI0.083g Na2MoO4·2H20.025gOH3BO3 0.62g CuSO4·5H2O0.0025gMnSO4·H2O 1.69g CoCl2·6H2O0.0025gZnSO4·7H2O0.86g配成1L母液,倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中。

注:CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O由于称取量很小,如果天平精确度没有达到万分之一,可先配成调整液。

分别称取CuSO4·5H2O 0.05g,CoCl2·6H2O 0.05g各自配成100ml的调整液,然后取5ml就还有0.0025g的量。

(3)配制MS有机母液一般配制成100倍MS有机母液。

依次称取(注:溶好一个后,再加下一个)名称重量名称重量肌醇10g盐酸硫胺素(VB1)0.01g烟酸0.05g甘氨酸0.2g盐酸吡哆醇(VB6) 0.05g配成1L母液,倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中。

(4)配制MS铁盐母液一般配制成100倍MS铁盐母液。

依次称取EDTA二钠 3.73g,FeSO4·7H2O 2.78g(注:溶好一个后,再加下一个)配成1L母液,倒入1L试剂瓶中,存放于冰箱中。

所以MS母液有5种大量元素母液,加上MS微量元素母液、MS有机母液和MS铁盐母液,共8种母液。

(5)激素母液的配制各种生长素和细胞分裂素要单独配制,不能混合在一起,生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的NaOH溶解,细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解,然后再加蒸馏水定容。

MS培养基发苗法

MS培养基发苗法

MS培养基培养法
(1)MS培养基配制:1L培养基中,主成分4.74g,脯氨酸0.5g,谷氨酰胺0.5g,酸水解酪蛋白0.3g,蔗糖30g(均为粉状药品,可自带),按比例称取药品(称量纸和药匙可自带,电子天平),加双蒸水溶解混匀,加水定容,调pH值至5.8,经验值,1L培养基调pH=5.8需加400ul 2M NaOH(需pH计或pH试纸,试纸可自带),然后加琼脂粉8g ,121度,灭菌20分钟(高压灭菌锅);
(2)培养基分装:在超净工作台中,将培养基分装到组培瓶中(皮筋、封瓶膜和记号笔可自带,酒精灯,打火机);
(3)种子消毒:70%酒精消毒1min,灭菌双蒸水冲洗3-4次,5%NaClO消毒5min,灭菌双蒸水冲洗6-7次;
(4)将消过毒的种子用镊子夹入培养基中,作好标记放入恒温光照培养箱中培养,昼35度8h,夜30度16h;
(5)5-7天以后,将株高约5-7公分的幼苗转入土中培养。

(育苗盘,土)。

MS培养基是什么?

MS培养基是什么?

MS培养基是什么?生长发育所需的营养而设计的。

它既有植物所需的氮、磷、钾及锌、铜、钼、铁等元素,同时也包含了对生长发育起促进和调节作用的有机物质及植物激素等。

加入琼脂使之凝固的称固体培养基,没有琼脂的灭菌后仍保持液态的叫液体培养基。

成功的组织培养,在一定程度上依赖于对培养基的选择。

不同的培养基由于所含无机盐的量不同,对试验材料的反应也不会完全一样。

常用的植物试管苗快繁培养基是不含激素的MS基本培养基,附加2%--3%的蔗糖,用固体培养基培养时再加入0.6%--0.7%的琼脂,pH5.6--5.8.MS培养基:Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其养分的数量和比例合适,能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。

前花卉组织培养中应用最多的为MS培养基。

其组成是在配制1升(1000毫升)培养基时,加硝酸铵1.65克、硝酸钾1.9克、氯化钙0.44克、硫酸镁0.37克、磷酸二氢钾0.17克、碘化钾0.83毫克、硼酸5.2毫克、硫酸镁22.3毫克、硫酸锌3.6毫克、钼酸钠0.25毫克、硫酸铜0.025毫克、氯化钴0.025毫克、硫酸铁27.8毫克、蔗糖30克和琼脂7克。

其他生长调节物质要根据花卉的种类和培养目的而确定。

MS培养基中大量元素浓度过高,为此常采用1/2、?大量元素浓度作培养用,这样生长效果列好。

配制培养基前要准备好三角瓶、试管、烧杯、量筒、吸和等玻璃器皿,预先称好药品。

配制时先将琼脂溶化,再加入在水中深解的各种营养元素和蔗糖,然后用氢氧化钠或盐酸调整培养基的pH,一般掌握在5.7左右。

以后可分注到养瓶中,盖好瓶盖。

培养基配好要经高压灭菌。

冷却后放到培养室预培养3天,如没有杂菌污染,才可进行花卉材料的接种。

植物组织培养MS培养基配方

植物组织培养MS培养基配方

植物组织培养MS培养基配方MS培养基主要包括两部分:无机盐和有机物。

无机盐部分的配方如下:1.氮源:氮源通常由硝酸铵(NH4NO3)、硝酸钾(KNO3)和硫酸铵((NH4)2SO4)组成。

氮源的浓度通常为20-30mM。

2.磷酸盐:磷酸盐通常由二氢二钠磷酸盐(NaH2PO4)组成,浓度为10mM。

3.钠盐:MS培养基中含有钠盐,通常由硝酸钠(NaNO3)和硝酸钾(KNO3)组成。

钙盐的浓度为2.0mM,钾盐的浓度为1.0mM。

4.钠盐:MS培养基中含有钠盐,通常由硝酸钠(NaNO3)和硝酸钾(KNO3)组成。

钙盐的浓度为2.0mM,钾盐的浓度为1.0mM。

5.硫酸镁:硫酸镁(MgSO4)的浓度为1.0mM。

6.磷酸铵铁:磷酸铵铁(FeSO4·(NH4)2SO4)的浓度为27.8μM。

7.各种微量元素:包括锌、铜、锰、硼、钼、钴和镍等微量元素。

这些微量元素的浓度通常在微摩尔(μM)级别。

有机物部分的配方如下:1.蔗糖:蔗糖是植物培养基中最常用的碳源,浓度通常为30g/L。

2. 维生素:通常使用的维生素有二硝基地巴泼甲素(2,4-D)和吲哚-3-乙酸(IAA)。

它们的浓度通常在0.1-2.0 mg/L之间。

3. 激素:常用的激素包括植物生长素(BA)和乙烯利(2,4-D)。

它们的浓度通常在1.0-10.0 mg/L之间。

4.混合物:还可以加入一些有机物混合物,如胆固醇、烟酸和核酸酸等。

值得注意的是,这只是MS培养基的一个基本配方,根据具体的研究目的和植物种类的不同,还可以对该配方进行一些调整和优化。

总结起来,MS培养基是一种常用的植物组织培养基,主要用于植物生长和增殖。

其配方包括无机盐和有机物两部分,无机盐包括氮源、磷酸盐、钙盐、镁盐、磷酸铵铁和微量元素等;有机物包括蔗糖、维生素和激素等。

通过适当调整这些配方的浓度和比例,可以实现不同植物的生长和增殖需求。

MS培养基配方及培养基简介

MS培养基配方及培养基简介

MS培养基成分(1962)(单位:mg/L)无机盐含量有机物含量 PH值NH4NO4 1650 肌醇 100 5.8 KNO3 1900 烟酸 0.5CaCl2·2H2O 440 盐酸吡哆醇 0.5MgSO4·7H2O 370 甘氨酸 2KH2PO4 170 盐酸硫胺素 0.1KI 0.83 蔗糖 30g/LH3BO3 6.2 琼脂 4~8g/LMnSO4·4H2O 22.3ZnSO4·7H2O 8.6Na2MoO4·2H2O 0.25CuSO4·5H2O 0.025CoCl2·6H2O 0.025FeSO4·7H2O 27.8Na2·EDTA·2H2O 37.3一个完善的培养基配方中,应该包括一下几个部分,分别为:无机营养成分、有机营养成分、植物激素,琼脂,其他成分。

大量元素:氮,磷,钾,硫,钙,镁等。

(1)无机营养成分:微量元素:硼,锰,锌,钼,铜,铁,钴等。

(国际植物生理学会建议,植物所需要的元素浓度大于0.5mmol/L的为大量元素,而小于0.5mmol/L的则为微量元素)(a)维生素类:如:硫胺素(维生素B1),吡哆醇(维生素B6),烟酸(维生素B3)抗坏血酸(维生素C)(b) 氨基酸类:如甘氨酸,丙氨酸,谷氨酸等(2)有机营养成分:(c) 复杂的天然混合物:如:椰乳(CM),水解络蛋白(CH),麦芽浸出物(ME),番茄汁等(d)作为碳源的糖:常用的碳源为蔗糖,葡萄糖和果糖也是较好的碳源。

(e) 肌醇:肌醇在糖类的相互转化中起作用,是细胞壁的构建材料。

肌醇参与碳水化合物,磷脂代谢及离子平衡等生理活动,具有帮助活性物质发挥作用的效果,能促进愈伤组织生长,对胚状体和芽的形成也有良好的促进作用。

肌醇一般用量为:50~100mg/L,在培养基中加入少量肌醇就能促进维生素B1效应的发挥。

但肌醇常可由磷酸葡萄糖转变二次,并进一步转化为果胶物质,因此,在快速繁殖中有时也可省去不用。

ms培养基配方表

ms培养基配方表

ms培养基配方表MS(Murashige and Skoog)培养基是细胞培养中常用的基础培养基,其命名来源自培养基组合者Murashige和Skoog。

MS培养基呈现出广泛的适用性,可用于各种组织培养和植物组织培养的研究。

其配方主要采用无机盐和有机物的混合物,以下是MS培养基的详细配方表。

1. MS微量元素添加剂:ZnSO4.7H2O = 8.6 mg/LH3BO3 = 3.1 mg/LMnSO4.4H2O = 0.25 mg/LCuSO4.5H2O = 0.025 mg/LKI = 0.83 mg/LNa2MoO4.2H2O = 0.025 mg/LCoCl2.6H2O = 0.025 mg/LFeSO4.7H2O = 27.8 mg/L2. MS盐基:NH4NO3 = 1650 mg/LKNO3 = 1900 mg/LCaCl2.2H2O = 440 mg/LKH2PO4 = 170 mg/LMgSO4.7H2O = 370 mg/L3. MS综合维生素添加剂:Myo-inositol = 100 mg/LNicotinic acid = 50 mg/LPyridoxine.HCl = 10 mg/LThiamine.HCl = 10 mg/LGlycine = 2 mg/LL-Asparagine.H2O = 150 mg/L4. MS植物生长调节剂添加剂:2,4-Dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) = 0.5 ~ 5 mg/Lα-Naphthaleneacetic acid (NAA) = 0.5 ~ 5 mg/L6-Benzylaminopurine (BA) = 0.5 ~ 5 mg/LKinetin (Kin) = 0.5 ~ 5 mg/LGibberellic acid (GA3) = 0.1 ~ 10 mg/LAbscisic acid (ABA) = 0.1 ~ 10 mg/L以上是MS培养基的配方表,各种配方的配比可以根据实验需要适当调整。

ms培养基

ms培养基

MS培养基配方MS培养基的配制包括以下步骤。

培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的2 0倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。

这样每次使用时,取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀释,制成培养液。

现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出,供配制时使用。

成分分子量使用浓度(mg/L)大量元素硝酸钾KNO3 101.11 1900硝酸铵NH4NO3 80.04 1650磷酸二氢钾KH2PO4 136.09 170硫酸镁MgSO4.7H2O 246.47 370氯化钙CaCl2.2H2O 147.02 440微量元素碘化钾KI 166.01 0.83硼酸H3BO3 61.83 6.2硫酸锰MnSO4.4H2O 223.01 22.3硫酸锌ZnSO4.7 H2O 287.54 8.6钼酸钠Na2MoO4.2 H2O 241.95 0.25硫酸铜CuSO4.5 H2O 249.68 0.025氯化钴CoCl2.62 237.93 0.025铁盐乙二胺四乙酸二钠Na2.EDTA 372.25 37.3硫酸亚铁FeSO24.7H2O 278.03 27.8有机成分肌醇100甘氨酸 2盐酸硫胺素VB1 0.1盐酸吡哆醇VB6 0.5烟酸VB5或VPP 0.5蔗糖sucrose 342.31 30g/L琼脂agar 7 g/L [1]以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外,其余的均为200倍浓缩液。

上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。

其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。

母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5?5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。

MS培养基的配制

MS培养基的配制

一、MS培养基的配制1. 培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的10倍或100倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。

2. 按配方表配制MS培养基母液:大量元素50×,微量元素配100×,铁盐、有机成分配制成100×,母液贮存于4℃的冰箱中。

激素配成浓度为0.1mg/mL.3. 配制各种母液是,成分顺序加入,上一成分溶解后再加下一成分。

钙液和铁盐都单独配制。

生长素配制时,先用微量1MNaOH溶解,再以蒸馏水定容;细胞分裂素配制时,先用微量0.1MHCl溶解,再以蒸馏水定容。

二、MS母液配制取作表序号药品名称MS量(mg/L)扩大倍数母液量(g)定容取作量(mg/L)甲液NH4NO3KNO3MgSO4.7H20KH2PO41650190037017050×41.2547.59.254.25500ml 20钙液无水CaCl2440 100×11 500ml 20乙液MnSO4.4H2O或MnSO4. H2OZnSO4.7H2OH3BO3KI22.316.98.66.20.83100× 1.120.850.430.310.0415500ml 10铁盐Na2.EDTA.2H2OFeSO4.7H2037.227.8100× 1.861.39500ml 10有机成分盐酸吡哆醇(VB6)烟酸甘氨酸0.50.52100×0.0050.0050.02100ml 10丙液ⅠNa2MoO4.2H2O.2H2OCuSO4.5H2OCoCl2.6H2O0.250.0250.025100×0.01250.001250.00125500ml 10丙液Ⅱ肌醇100 100× 2 200ml 10丙液Ⅲ盐酸硫胺素(VB1) 0.4 50×0.02 100ml 2附注琼脂5.5-6.5g/L 蔗糖30g/LpH5.8-6.2备注:1钙液的母液量由于易沉淀所以取11g2丙液Ⅰ由于取的量太少所以先去12.5mg,溶于10mL水,再取1mL溶液稀释三、注意事项1、药品的质量问题:为了避免杂质及有害物质对组织培养的影响,必须注意药品质量,国内药品采用国际上通用标准,分为:一级,即保证试剂、优质纯试剂Guaranteed Reagent, GR级;二级,即分析纯试剂,Analytical Reagent, AR级;三级,即化学纯试剂,Chemical Pure, CP级;四级,即实验试剂,Laboratory Reagent, LR级。

MS培养基的配制,灭菌等注意事项

MS培养基的配制,灭菌等注意事项

一、MS培养基母液注意:1.大量元素按照使用时高10倍的数值称取,分别将各种化合物称量后,除CaCl2·2H2O单独配制外,其余化合物混合在500ml 烧杯中加适量蒸馏水溶解,用玻璃棒搅拌促溶,倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度,置小口瓶中保存,贴上标签注明化合物名称(或编号),浓缩倍数,配制日期和配制者姓名,CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2.微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取,分别将各种化合物称量除铁盐(FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O)作为一组单独配制外,其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后,定容在1000ml容量瓶中,置小口瓶中保存,贴上标签。

3.铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中,加热,(很重要)不断搅拌,溶解后,两液混合,调PH至5.5加水定容至1000ml,置于小口瓶中,贴上标签。

4.有机物母液配制,按母液要求浓缩50倍,除蔗糖按3%单独临时称量外,其余分别称量后,溶解,定容在500ml容量瓶中,置于小口瓶中保存,贴上标签。

5.母液最好在2~4℃的冰箱中贮存,特别是有机类物质,贮存时间不宜过长,无机盐母液最好在一个月内用完,如发现有霉菌和沉淀产生,就不能再使用。

1.制备母液和营养培养基时,所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求,化学药品必须是高纯度的(分析纯)。

2.称量药物采用高灵敏度的天平,每种药品专用一药匙。

.生长调节剂母液配制:为了操作方便,节约时间,生长调节剂也可如同配制母液一样,先配成原液,这样配制培养基时只要稍加计算,按需要量取即可。

不同药品在配制时若不溶于水,可用少量不同的溶剂先溶解,萘乙酸(NAA),吲哚乙酸(IAA),赤霉素(GA3),2,4-D等生长素和玉米素(ZT)可先用少量95%酒精溶解,然后加水,如溶解不完全再加热。

MS培养基配方列表

MS培养基配方列表

MS培养基配方列表MS培养基是一种经典的植物培养基,广泛应用于细胞、组织和器官培养研究中。

其配方很复杂,包含多种无机盐和有机物,下面就介绍一下MS培养基的配方列表。

1. 硝酸铵 (NH4NO3)硝酸铵作为氮源,在细胞的生长和分化过程中非常重要。

2. 磷酸一氢钾 (KH2PO4)磷酸一氢钾是植物生长的主要磷源。

3. 硫酸镁七水合物(MgSO4·7H2O)硫酸镁七水合物是植物生长中的必需元素,同样也是叶绿素合成的关键。

4. 硝酸钾 (KNO3)硝酸钾是一种重要的氮源,也是蛋白质合成的必需元素。

5. 硝酸钙 (Ca(NO3)2)硝酸钙是植物生长过程中不可或缺的钙源,在细胞分裂和细胞伸长过程中起着重要作用。

6. 硫酸铁 (FeSO4)硫酸铁是植物体内铁元素的重要来源,对叶绿素和细胞色素c等生物化学过程有着至关重要的作用。

7. 乙酸 (CH3COOH)乙酸可以被植物利用作为碳源,同时还可以促进细胞发育和生长。

8. 吲哚-3-乙酸 (IAA)吲哚-3-乙酸是一种重要的生长素,能够影响细胞分裂和扩散,促进细胞分化和器官发育。

9. 6-苄氨基嘌呤 (BA)6-苄氨基嘌呤是一种核酸类似物,可以促进细胞分裂和增殖,对重组DNA和RNA的生成和转录起着关键的作用。

10. 抗生素 (G418)抗生素G418能够抑制细胞生长和增殖,用于防止其它微生物的污染。

以上就是MS培养基的配方列表,每种成分的浓度和配比都需要根据具体的实验室需求进行调整。

在制备MS培养基过程中,需要严格控制pH值和温度,以确保培养基的有效性。

MS培养基是一种经典、可靠的植物培养基,使用得当可以为细胞、组织和器官培养研究提供强有力的支持。

MSB5N6培养基配方

MSB5N6培养基配方

MSB5N6培养基配方培养基是一种用于细胞培养和生物学研究的基础培养液,可以为细胞提供必需的养分和环境条件,促进细胞的生长和增殖。

在细胞培养过程中,常用的培养基有多种配方,每种培养基都有特定的应用范围和成分要求。

下面将介绍MS、B5和N6培养基的配方和主要组分。

1. MS培养基(Murashige and Skoog培养基)是一种广泛应用于植物组织培养的基础培养基。

MS培养基的配方如下:成分(每升)- 盐类:硝酸铵(1.65g)、硝酸钙(1.85g)、硫酸镁(0.37g)、硫酸钾(1.90g)、硝酸镁(18.0mg)、硼酸(6.2mg)、镁硫酸(16.9mg)、硫酸锌(8.6mg)、硫酸钴(0.025mg)、硝酸铜(0.025mg)、硝酸亚铁(27.8mg)、硫酸亚铁(27.8mg)- 维生素:尼古丁酸(0.5mg)、吡哆醇(0.5mg)、吲哚-3-乙酸(0.1mg)、吲哚-3-丁酸(0.1mg)、维生素B1(0.5mg)-培养糖:葡萄糖(30g)- 植物激素:植物生长素(0.1-1.0mg/L)2.B5培养基是一种用于植物根系培养和营养生理研究的培养基。

B5培养基的配方如下:成分(每升)- 盐类:硝酸铵(1.65g)、硝酸钙(1.83g)、硫酸镁(0.25g)、硝酸钾(1.25g)、硼酸(6.2mg)、硫酸锌(8.6mg)、硫酸亚铁(27.8mg)- 维生素:葡萄糖(30g)、吡哆醇(0.01mg)、锦灯胺酸(0.1mg)、维生素B1(0.1mg)、维生素B2(0.1mg)、维生素B3(0.5mg)、维生素C(100mg)- 植物激素:植物生长素(0.5-3.0mg/L)3.N6培养基是一种用于细胞培养和植物芽培养的培养基。

成分(每升)- 盐类:硝酸铵(1.65g)、硝酸钙(1.83g)、硫酸镁(0.37g)、硫酸钾(1.25g)、硼酸(6.2mg)、硝酸亚铁(27.8mg)- 维生素:吡哆醇(0.5mg)、吲哚-3-乙酸(0.5mg)、吲哚-3-丁酸(0.05mg)、维生素B1(0.1mg)- 植物激素:植物生长素(1.0-5.0mg/L)、植物激动素(0.1mg/L)以上是MS、B5和N6培养基的配方和主要成分。

MS培养基是什么

MS培养基是什么
有利于维持培养环境稳定
稳定的pH值对于植物细胞的生长和分化至关重要,MS培养基的缓冲能力强, 能够为植物细胞提供更加稳定的培养环境。
MS培养基的抑菌效果好
添加抗菌剂
MS培养基中通常会添加一定量的抗菌剂,如青霉素、头孢菌素等,以抑制细菌 等微生物的生长,保证植物细胞的良好生长和培养。
适宜的pH值
MS培养基的pH值适宜,不利于微生物的生长繁殖,从而有效避免了微生物对植 物细胞的污染和侵害。
腺嘌呤
提供氮源和细胞分裂素。
激素
生长素
促进细胞伸长和细胞分裂,促进根 的分化。
细胞分裂素
促进细胞分裂,诱导芽的形成。
赤霉素
促进细胞伸长,诱导叶的分化。
脱落酸
抑制细胞分裂,促进叶和果实的衰 老和脱落。
03
MS培养基的应用
MS培养基在植物组织培养中的应用
植物繁殖
MS培养基是植物组织培养中 最常用的培养基之一,可以用 于快速繁殖植物,如花卉、树
用效果。
MS培养基的激素作用不均一
激素作用复杂
MS培养基中添加了多种激素和 生长调节剂,这些成分的作用复 杂,相互之间可能存在相互干扰 和拮抗作用。
不易掌握
由于MS培养基中激素作用的不 均一性,使用者需要具备一定的 植物组织培养知识和技能才能掌 握其使用技巧。
难以比较
由于MS培养基中激素作用的不 均一性,不同实验室或研究机构 之间使用MS培养基时难以进行 比较和交流,影响了实验结果的 可靠性和可重复性。
06
MS培养基的发展前景
MS培养基的改进方向
01
02
03
优化营养成分
通过调整培养基中的营养 成分,以提高植物细胞的 生长和分化能力。

MS培养基的配置

MS培养基的配置

MS培养基的配置一、母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液,一般配成比所需浓度高10—100倍。

优点:(1)保证各物质成分的准确性;(2)便于配置时快速移取;(3)便于低温保藏。

1、MS大量元素母液(50X)称10升量溶解在200 ml蒸馏水中。

配1升培养基取20 ml。

注:CaCl2·2H2O单独配置2、MS微量元素母液(100X)称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基母液10ml。

注:CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量(0.25 mgX10=2.5 mg)或100倍量(25 mg)称取后,定容于100ml水中,每次取10ml或1ml,即含0.25 mg的量。

3、MS铁盐母液(100X)称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基母液10ml。

注:配制时,两种成分分别溶解在少量蒸馏水中,其中EDTA盐较难完全溶解,可适当加热。

混合时,先取一种置容量瓶(烧杯)中,然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡,至产生深黄色溶液,最后定容,保存在棕色试剂瓶中。

4、MS有机物母液(200X)称10升量溶解在50ml蒸馏水中。

配1升培养基母液5ml。

二、MS固体培养基的配制1、将配制好的MS培养基母液从冰箱中取出,按顺序排列,并逐一检查是否沉淀或变色,避免使用已失效的母液。

2、取少量的蒸馏水(约为配制培养基量的2/3)加入烧杯中。

注意:配500ml培养基用1000ml烧杯。

3、按母液顺序和规定量,用量筒、移液管或微量移液器取母液,依次放入烧杯中。

每1000ml培养基,需要:MS大量元素母液 20mlMS微量元素母液 10mlMS铁盐母液 10mlMS有机物母液 5ml4、通过计算,用微量移液器取所需的各种生长调节剂母液。

5、加入蔗糖(30g/L),溶解。

6、定容:用容量瓶。

7、调pH值:用0.1 N 和0.5N 的NaOH,一般pH=5.8。

注意:①经高温高压灭菌后,培养基的pH值会下降0.2—0.8,故调整后的pH值应高于目标pH值0.5个单位。

ms基础培养基的配方及配制注意事项

ms基础培养基的配方及配制注意事项

ms基础培养基的配方及配制注意事项下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。

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ms培养基配方

ms培养基配方

ms培养基配方MS培养基是一种广泛用于植物细胞培养的抗生素添加的标准培养基,可以用于各种植物细胞生物学实验,是一种快速高效的植物细胞培养方法。

MS培养基(Murashige and Skoog,1962)主要由六种化学复配组成,包括氯化钾、磷酸钾、硝酸钾、谷氨酸、氯化钠和B5维生素混合液。

这六种补充物是培养细胞生长和发芽的重要成分,可以通过调整不同组分的比例来获得更高的营养价值,以满足不同植物的生长需求。

MS培养基的组成比例可以调整,以便满足不同植物的生长需求。

氯化钾是培养基中最重要的钾源,每克培养基含有0.5-2.0毫克氯化钾,磷酸钾作为钾的替代品,其含量为0.2-0.8毫克每克培养基。

硝酸钾是细胞生长所需的重要组分,每克培养基含有0.15-0.8毫克硝酸钾。

谷氨酸作为一种有机氮源,每克培养基含有0.1-0.4毫克谷氨酸;氯化钠可维持培养基的离子平衡,每克培养基含有0.1-0.5毫克氯化钠;B5维生素混合液通常为2-9%,用于维持正常细胞生长。

此外,MS培养基作为植物细胞培养的标准培养基,也可以添加24种氨基酸和多种无机盐,以满足细胞生长和发芽的需求。

24种氨基酸中,非必需氨基酸比饱和氨基酸高出2倍左右,作为某些特殊植物细胞特殊需要的氨基酸,如甘氨酸和苏氨酸,可以根据细胞的特殊需求以不同的比例添加进去。

常用的无机盐包括硫酸钾、硫酸钠、氟化钠、氯化钠、酸钠、硫酸胺和亚硝酸钠等,细胞在此无机盐环境中才能正常发芽。

MS培养基是根据美国科学家Murashige和Skoog(1962)提出的植物培养技术来配制的,是一种标准化的植物细胞培养基配方,由营养物质如钾、磷、氮和铁等成分通过恰当的比例混合而成。

它具有组成比例可调、配方固定、细胞发芽率高、培养效率高、平衡缺乏及对细胞有利等特点,常用于植物细胞的培养实验,广泛用于植物细胞的生物学实验和栽培。

MS培养基的制备和使用步骤要求严格,首先,经过精制的培养基配方应由专家进行审核,确保其品质和效果,然后将所有组分称量、混合、离心、灭菌并过滤后,使其具有良好的稳定性。

MS培养基的配制,灭菌等注意事项

MS培养基的配制,灭菌等注意事项

一、MS培养基母液注意:1.大量元素按照使用时高10倍的数值称取,分别将各种化合物称量后,除CaCl2·2H2O单独配制外,其余化合物混合在500ml 烧杯中加适量蒸馏水溶解,用玻璃棒搅拌促溶,倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度,置小口瓶中保存,贴上标签注明化合物名称(或编号),浓缩倍数,配制日期和配制者姓名,CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2.微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取,分别将各种化合物称量除铁盐(FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O)作为一组单独配制外,其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后,定容在1000ml容量瓶中,置小口瓶中保存,贴上标签。

3.铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中,加热,(很重要)不断搅拌,溶解后,两液混合,调PH至5.5加水定容至1000ml,置于小口瓶中,贴上标签。

4.有机物母液配制,按母液要求浓缩50倍,除蔗糖按3%单独临时称量外,其余分别称量后,溶解,定容在500ml容量瓶中,置于小口瓶中保存,贴上标签。

5.母液最好在2~4℃的冰箱中贮存,特别是有机类物质,贮存时间不宜过长,无机盐母液最好在一个月内用完,如发现有霉菌和沉淀产生,就不能再使用。

1.制备母液和营养培养基时,所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求,化学药品必须是高纯度的(分析纯)。

2.称量药物采用高灵敏度的天平,每种药品专用一药匙。

.生长调节剂母液配制:为了操作方便,节约时间,生长调节剂也可如同配制母液一样,先配成原液,这样配制培养基时只要稍加计算,按需要量取即可。

不同药品在配制时若不溶于水,可用少量不同的溶剂先溶解,萘乙酸(NAA),吲哚乙酸(IAA),赤霉素(GA3),2,4-D等生长素和玉米素(ZT)可先用少量95%酒精溶解,然后加水,如溶解不完全再加热。

MS培养基

MS培养基

MS培养基
一、MS培养基
MS培养基是目前使用最普遍的培养基。

其具有较高的无机盐浓度,能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。

由于配方中的离子浓度高,在配制、贮存和消毒等过程中,即使有些成分略有出入,也不会影响离子间的平衡。

MS固体培养基可用于诱导愈伤组织,也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养,其液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。

MS培养基的无机养分的数量和比例比较合适,足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。

因此,一般情况下,不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。

和其它培养基的基本成分相比,MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高,这是它的显著特点。

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MS培养基成分(1962)(单位:mg/L)
无机盐含量有机物含量 PH值NH4NO4 1650 肌醇 100 5.8 KNO3 1900 烟酸 0.5
CaCl2·2H2O 440 盐酸吡哆醇 0.5
MgSO4·7H2O 370 甘氨酸 2
KH2PO4 170 盐酸硫胺素 0.1
KI 0.83 蔗糖 30g/L
H3BO3 6.2 琼脂 4~8g/L
MnSO4·4H2O 22.3
ZnSO4·7H2O 8.6
Na2MoO4·2H2O 0.25
CuSO4·5H2O 0.025
CoCl2·6H2O 0.025
FeSO4·7H2O 27.8
Na2·EDTA·2H2O 37.3
一个完善的培养基配方中,应该包括一下几个部分,分别为:无机营养成分、有机营养成分、植物激素,琼脂,其他成分。

大量元素:氮,磷,钾,硫,钙,镁等。

(1)无机营养成分:
微量元素:硼,锰,锌,钼,铜,铁,钴等。

(国际植物生理学会建议,植物所需要的元素浓度大于0.5mmol/L的为大量元素,而小于0.5mmol/L的则为微量元素)
(a)维生素类:如:硫胺素(维生素B1),
吡哆醇(维生素B6),烟酸(维生素B3)
抗坏血酸(维生素C)
(b) 氨基酸类:如甘氨酸,丙氨酸,谷氨酸等
(2)有机营养成分:(c) 复杂的天然混合物:如:椰乳(CM),
水解络蛋白(CH),麦芽浸出物(ME),
番茄汁等
(d)作为碳源的糖:常用的碳源为蔗糖,
葡萄糖和果糖也是较好的碳源。

(e) 肌醇:肌醇在糖类的相互转化中起作
用,是细胞壁的构建材料。

肌醇参与碳水化合物,磷脂代谢及离子平衡等生理活动,具有帮助活性物质发挥作用的效果,能促进愈伤组织生长,对胚状体和芽的形成也有良好的促进作用。

肌醇一般用量为:50~100mg/L,在培养基中加入少量肌醇就能促进维生素B1效应的发挥。

但肌醇常可由磷酸葡萄糖转变二次,并进
一步转化为果胶物质,因此,在快速繁殖中有时也可省去不用。

生长素:IAA(吲哚乙酸),IBA(吲哚丁酸),NAA
(萘乙酸),2,4-D(二氯苯氧乙酸), GA(赤霉素)
(3)植物激素
细胞分裂素:BAP(苄胺基嘌呤),6-BA(编辑腺嘌
呤),2-iP(异物烯氨基嘌呤),激动素(6-糠基氨基
嘌呤)等
(4)琼脂:琼脂溶解于95℃左右的热水,成为溶胶,当温度降到45℃以下时,即凝固为固体状凝胶。

(5)其他成分:为了较少培养基的污染,可适当加入的诸如;一些抗生素,活性炭,抗氧化剂,诱变剂等等。

其中,活性炭的用量一般为:0.5g~10g/L.常用的抗生素有:青霉素,链霉素,土霉素,金霉素,红霉素等。

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