MS培养基配方
MS培养基的配制
MS培养基配方表
编辑本段注意事项：
1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。
2.母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。
3.MS培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0 1 mg/mL)。
其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶，将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水
浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0 1 mg/mL的母液。
4.组织培养是否能够获得成功，主要取决于对培养基的选择。
不同的培养基具有不同的特点，也就适合于不同的植物种类和接种材料。
在开展组织培养项目时，首先要对各种培养基进行了解和分析，以便能从中选择合适的使用。
组培用的培养基一般包括基础培养基和激素，但是植物激素的种类和数量，随着不同培养阶段和不同材料有变化，因此各培养基配方中均不列入植物激素。
常用的基础培养基除了有MS培养基，还有B5培养基，N6培养基。
MS培养基的配置
MS培养基的配置一、母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍。
优点：（1）保证各物质成分的准确性；（2）便于配置时快速移取；（3）便于低温保藏。
1、MS大量元素母液（50X）称10升量溶解在200 ml蒸馏水中。
配1升培养基取20 ml。
化学药品1升量10升量①NH4NO31650 mg/L 16．5g②KNO31900 mg/L 19．0g③CaCl2·2H2O440 mg/L 4．4g④MgSO4·7H2O370 mg/L 3．7g⑤KH2PO4170 mg/L 1．7g注：CaCl2·2H2O单独配置2、MS微量元素母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。
配1升培养基母液10ml。
化学药品1升量10升量①MnSO4·4H2O（MnSO4·H2O）22．3 mg/L（21．4 mg/L）223mg②ZnSO4·7H2O8．6 mg/L 86mg③CoCl2·6H2O0．025mg/L 0．25mg④CuSO4·5H2O0．025 mg/L 0．25mg⑤Na2MoO4·2H2O0．25 mg/L 2．5mg⑥KI 0．83 mg/L 8．3 mg⑦H3BO36．2 mg/L 62 mg注：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0．25 mgX10=2．5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，即含0．25 mg的量。
3、MS铁盐母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。
配1升培养基母液10ml。
化学药品1升量10升量Na2·EDTA37．3 mg/L 373 mgFeSO4·7H2O27．8 mg/L 278 mg注：配制时，两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。
MS培养基配制方法-new
MS 培养基一、大量元素母液1：大量A母液2：大量B母液3：Fe盐注：配制顺序如下1. 称取3.73 g Na2-EDTA•2H2O溶解于200 ml去离子水中，并置于70℃预热(A)；2. 称取2.78 g FeSO4•7H2O溶解于200 ml去离子水中(B)；3. 将B缓慢倒入A中混合，边倒边搅动，置于70 ℃水浴锅中螯合2 h；4. 冷却后定容至1 L。
二、微量元素母液4：微量三、有机物质母液5：有机（不含肌醇）℃注：配固体培养基可在调pH后加适量Agar或Phytagel；肌醇也可加入有机母液。
四、抗生素和激素母液试剂名称配制方法母液浓度Amp（氨苄青霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Km（卡那霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Str（链霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Cb（羧苄青霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌250 mg/ ml 6-BA (6-苄基嘌呤) 1M NaOH或盐酸溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml NAA（萘乙酸）1M NaOH溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml IAA 95% 乙醇溶解，双蒸水定容，过滤灭菌 1 mg/ ml五、乙酰丁香酮(Acetone-syringone, AS)称取196.2 mg AS用10 ml DMSO溶解，母液浓度100 mM，-20℃避光保存，工作浓度100 ~ 200 μM六、MS溶液的混合5种母液分别依次加入到800 ml蒸馏水中，混匀后加入肌醇、蔗糖和能高压灭菌的激素（6-BA和NAA），定溶至1000 ml，用1M NaOH调pH至5.8。
最后加Phytagel （Sigma）4.4g或Agar 10g。
灭菌完后，在培养基凝固前加入AS或抗生素及不能高压灭菌的激素（IAA）。
ms培养基配方表
ms培养基配方表MS（Murashige and Skoog）培养基是细胞培养中常用的基础培养基，其命名来源自培养基组合者Murashige和Skoog。
MS培养基呈现出广泛的适用性，可用于各种组织培养和植物组织培养的研究。
其配方主要采用无机盐和有机物的混合物，以下是MS培养基的详细配方表。
1. MS微量元素添加剂：ZnSO4.7H2O = 8.6 mg/LH3BO3 = 3.1 mg/LMnSO4.4H2O = 0.25 mg/LCuSO4.5H2O = 0.025 mg/LKI = 0.83 mg/LNa2MoO4.2H2O = 0.025 mg/LCoCl2.6H2O = 0.025 mg/LFeSO4.7H2O = 27.8 mg/L2. MS盐基：NH4NO3 = 1650 mg/LKNO3 = 1900 mg/LCaCl2.2H2O = 440 mg/LKH2PO4 = 170 mg/LMgSO4.7H2O = 370 mg/L3. MS综合维生素添加剂：Myo-inositol = 100 mg/LNicotinic acid = 50 mg/LPyridoxine.HCl = 10 mg/LThiamine.HCl = 10 mg/LGlycine = 2 mg/LL-Asparagine.H2O = 150 mg/L4. MS植物生长调节剂添加剂：2,4-Dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) = 0.5 ~ 5 mg/Lα-Naphthaleneacetic acid (NAA) = 0.5 ~ 5 mg/L6-Benzylaminopurine (BA) = 0.5 ~ 5 mg/LKinetin (Kin) = 0.5 ~ 5 mg/LGibberellic acid (GA3) = 0.1 ~ 10 mg/LAbscisic acid (ABA) = 0.1 ~ 10 mg/L以上是MS培养基的配方表，各种配方的配比可以根据实验需要适当调整。
配置MS培养基
配置MS培养基以配置1000ml培养基为例。
MS培养基所需材料：大量元素：KNO3、NH4NO3、MgSO4·7H2O、KH2PO4、CaCl2·2H2O微量元素：MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、H3BO3、KI、Na2MoO4·7H2O、CuSO4.5H2O4、CoCL2.6H2O铁盐：七水合硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）、乙二胺四乙酸二钠（Na2-EDTA·2H2O）有机物：甘氨酸、盐酸硫胺素（维生素B1）、盐酸吡哆醇（维生素B6）、烟酸、肌醇1、配置MS培养基所需母液。
2、称取5-7g琼脂，加入300ml蒸馏水，加热溶解直至完全溶解。
3、称取30g蔗糖倒入,搅拌溶解。
4、分别移取各种母液混合，微量母液使用移液器吸取。
5、将混合好的母液加入琼脂与蔗糖溶液中，均匀混合，加蒸馏水用量筒定溶至1L.6、用1N的HCL和1N的NaOH来调溶液PH值至5.7-5.8.8、稍微冷却后,按需要分装入培养容器中.牛皮纸封口,用橡皮筋或绳子扎紧，高温灭菌。
注意事项：1．大量元素： CaCl2·2H2O单独配制置于另一小口瓶中。
2．微量元素母液的配制：铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合配置。
3．铁盐配制：将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。
4．有机物母液配制:储存在棕色无菌瓶中。
MS培养基配方
母液用量配液体时取量
大量元素(母液Ⅰ) mg／L 50mL
NH4NO3 33 000
KNO3 38 000
CaCl2·2H2O 8 800
MgSO4·7H2O 7 400
KH2PO4 3 400
微量元素(母液Ⅱ) 5mL
KI 166
H3BO3 1 240
MnSO4·4H2O 4 460
ZnSO4·7H2O 1 720
Na2MoO4·2H2O 50
CuSO4·5H2O 5
CoCl2·6H2O 5
铁盐(母液Ⅲ) 5mL
FeSO4·7H2O 5 560
Na2-EDTA·2H2O 7 460
有机成分(母液Ⅳ) 5mL
ⅣA
肌醇 20 000
ⅣB 5mL
烟酸100
盐酸吡哆醇(维生素B6) 100
盐酸硫胺素(维生素B1) 100
甘氨酸400
以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。
上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。
其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。
母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。
各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。
MS培养基配方列表
MS培养基配方列表MS培养基是一种经典的植物培养基，广泛应用于细胞、组织和器官培养研究中。
其配方很复杂，包含多种无机盐和有机物，下面就介绍一下MS培养基的配方列表。
1. 硝酸铵 (NH4NO3)硝酸铵作为氮源，在细胞的生长和分化过程中非常重要。
2. 磷酸一氢钾 (KH2PO4)磷酸一氢钾是植物生长的主要磷源。
3. 硫酸镁七水合物(MgSO4·7H2O)硫酸镁七水合物是植物生长中的必需元素，同样也是叶绿素合成的关键。
4. 硝酸钾 (KNO3)硝酸钾是一种重要的氮源，也是蛋白质合成的必需元素。
5. 硝酸钙 (Ca(NO3)2)硝酸钙是植物生长过程中不可或缺的钙源，在细胞分裂和细胞伸长过程中起着重要作用。
6. 硫酸铁 (FeSO4)硫酸铁是植物体内铁元素的重要来源，对叶绿素和细胞色素c等生物化学过程有着至关重要的作用。
7. 乙酸 (CH3COOH)乙酸可以被植物利用作为碳源，同时还可以促进细胞发育和生长。
8. 吲哚-3-乙酸 (IAA)吲哚-3-乙酸是一种重要的生长素，能够影响细胞分裂和扩散，促进细胞分化和器官发育。
9. 6-苄氨基嘌呤 (BA)6-苄氨基嘌呤是一种核酸类似物，可以促进细胞分裂和增殖，对重组DNA和RNA的生成和转录起着关键的作用。
10. 抗生素 (G418)抗生素G418能够抑制细胞生长和增殖，用于防止其它微生物的污染。
以上就是MS培养基的配方列表，每种成分的浓度和配比都需要根据具体的实验室需求进行调整。
在制备MS培养基过程中，需要严格控制pH值和温度，以确保培养基的有效性。
MS培养基是一种经典、可靠的植物培养基，使用得当可以为细胞、组织和器官培养研究提供强有力的支持。
组织培养实验-MS培养基及配制注意事项
一、MS培养基母液的配制注意：1．除CaCl2·2H2O单独配制外，大量元素按照使用时高10倍的数值称取，将各种化合物称量后，分别用少量水在不同的容器内充分溶解，然后在500ml烧杯中按顺序加入各溶液，加适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。
2．微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。
3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。
4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。
5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。
A.制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。
B.称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。
二、培养基配制和灭菌一．养培养基配制程序(一).母液吸取量的计算配制培养基的升数母液吸取量= 母液体积（CC）×——————————母液浓缩倍数（二）各种母液按顺序编号排列A.大量元素；B.CaCl2.2H2O；C.微量元素；D.铁盐；E.有机物；F．生长素萘乙酸（NAA）：配制0.5mg/ml的NAA称取50mg ， NAA用少量95% 酒精溶解后加蒸馏水定容至1000ml；G..细胞分裂素、激动素（KT）配制0.5mg/ml的KT 称50mgKT 用少量1N HCL溶解后,加蒸馏水定容至100ml。
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MS 培养基配方
1、配置MS母液
母液配置：加热都是用温水浴加热，全部都要避光保存，用装乙醇的棕色瓶来保存在4度即可
表2.1大量元素母液
药品20x g/L 500ml（20 x）KNO338g 19g
NH4NO333 g 16.5g
MgSO4•7H2O7.4 g 3.7g
CaCl2 6.644g 3.322g
KH2PO4 3.4g 1.7g
溶于200ml蒸馏水,定容至500ml 需要加热才能完全溶解
CaCL2.2H2O 4.4g/L
表2.2微量元素母液
药品100x g/L 500ml（100x g/L）
KI
H3BO3
MnSO4.4H2O
ZnSO4.7H2O
Na2MoO4.2H2O
GuSO4.5H2O CoCl2.6H2O 0.083g
0.62
22.3 g
0.86 g
0.025 g
0.0025 g
0.0025 g
0.0415 g
0.31 g
1.115 g
0.43 g
0.0125 g
0.00125 g
0.00125 g
溶于100ml蒸馏水,定容至500ml
表2.3有机母液
药品100x 1L500ml(100x)肌醇10g5g
烟酸0.05g0.025g
VB60.05g0.025g
VB10.1g0.05g
甘氨酸0.2g0.1g
表2.4铁盐母液
药品100x g/L500ml
FeSO4•7H2O 2.78g 1.39g
Na2-EDTA. 2H2O 3.73g 1.865g
铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于100ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，加水定容至500ml，置于小口瓶中，贴上标签
2、固体MS培养基材料
•找到4种母液：大量元素，微量元素，有机微量元素，铁盐母液
•蔗糖，琼脂锥形瓶
MS培养基配方：母液都稀释至1x
MS培养基配方（1L）
母液体积或重量(1L) 200ml
大量元素20x50mL 10ml
铁盐100x 微量100x 10mL 2ml 10mL 2ml
有机100x10mL 2ml 蔗糖15g（15g/L）3g
琼脂8g（8g/L） 1.6g
PH先调至 5.85-5.88，最终灭菌后
pH接近5.8
1）。