半夏的组培快繁
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源自文库夏解毒
治疗半夏中毒,用 生姜捣汁服下,其 毒解。
前景广阔
在自然界中,半夏主要由生于叶柄下的珠芽 进行繁殖,生长缓慢,采集困难,不能广泛 栽培,因此药源十分紧张, 市场供不应求,2005年冬药市有沽55~65元/ 千克,出口和内销俱紧俏, 应用组培快繁技术加速半夏种苗生产前景广 阔。
2.愈伤组织诱导丛生芽
在启动培养基上接种的块茎,经过一段时间 后,便可产生较多的愈伤组织, 再将愈伤组织转到分化培养基MS+6-BA1.0~ 1.5mg/L+NAA0.5~1.0mg/L上, 放在25~30℃的温度下培养, 经过20d左右,就可看到从愈伤组织上分化形 成的许多不定芽,每块愈伤组织上可形成10 个左右不定芽。
(五)试管块茎的培养
将半夏茎尖接种到MS+KT0.5mg/L+NAA0.2mg/ L的固体培养基上,获得小植株后, 再用其叶柄作外植体,在MS+2,4-D+KT的培养基上 诱导出愈伤组织,继而通过形成小块茎的途径产生 完整植株,其移栽成活率可达100%。 由此所得的试管苗块茎产量(鲜重)比常规小块茎繁 殖的块茎产量高103%; 试管苗块茎的总生物碱含量高达0.344%,而野生和 人工栽培半夏总生物碱含量分别仅为0.264%和 0.203%。组培技术生产的半夏在产量和质量上均有 所提高。
(三)生根培养
将从块茎切块上产生的不定芽和由愈伤组织产生的 不定芽转移到生根培养基上。 生根培养基是MS+IBA1.0mg/L+NAA0.03mg/L, 或1/2MS+NAA0.3~0.5mg/L。 在两种生根培养基上培养20d左右,不定根从小芽 的基部产生,多者每小芽可产生5~6条根。 根生长到1.0cm左右,可移至培养室外光线比较充 足的室内炼苗,约15d便可移栽到生长基质中。
半夏 的组培快繁
半夏属天南星科草本植物,
半夏是一种重要的 中药材, 其块茎入药,有祛 痰、镇咳及消肿等 功效。
半夏
半夏有毒
半夏植物全株有毒,块茎毒性较大,生食 0.1—1.8g即可引起中毒。 对口腔、喉头、消化道粘膜均可引起强烈 刺激; 服少量可使口舌麻木,多量则烧痛肿胀、 不能发声、流涎、呕吐、全身麻木、呼吸 迟缓而不整、痉挛、呼吸困难,最后麻痹 而死。 有因服生半夏多量而永久失音者。
(一)无菌培养物的建立
1.外植体采集与消毒 灭菌 采集半夏块茎或珠芽, 用清水洗净,剥去块茎 外皮,
外植体消毒灭菌
在超净工作台上先用70%酒精浸泡30—60s, 用无菌水冲洗1次,倒掉无菌水,加入0.1% 氯化汞液,块茎浸泡杀菌10min,
或叶片浸泡灭菌7min,用无菌蒸馏水冲洗3~5 次,除去氯化汞,防止毒害培养物。
E、培养条件
培养室温度白天25℃土2℃,晚上18℃土2℃, 有利于半夏的分化和愈伤组织形成; 光照强度为1000~2000 Lx, 光照时间为8~10h/d。
(二)继代增殖培养
1.块茎诱导丛生芽 在启动培养基上,经过3周左右,即可见块茎切块 表层变为绿色,块茎体积也发生膨大, 再经3~4周,就可见不定芽出现,每个切块上可产 生5—10个芽。而且,在这种培养基上芽可继续生 长,不需要再转到壮苗培养基上。 也可将带有小芽的切块重新切割再接种到芽分化培 养基上,令其产生更多的新芽。这种培养方法简便 易行,周期短,但繁殖速度受原始接种材料数量的 限制,需大量采集块茎。
(四)试管苗移植
从培养瓶中取出带根小苗,应特别注意不要 损伤根系。 取出的小苗先放到自来水中,用柔软的小刷 子轻轻刷掉根上的琼脂,越彻底越好,要尽 量不伤根。 清洗完成后,从自来水中取出小苗,放在比 较干净的报纸或草纸上,待根、叶上没有多 余的水分再移栽入生长基质中。
移栽
移栽基质的组成是5份腐殖土(草炭或山上树 木周围的细土)、3份蛭石、1份细沙、1份珍 珠岩。 移栽完成后转入温室或大棚中,注意温度不 可太高,相对湿度应尽量保持在90%以上, 初期要适当遮阳, 经20~30d,新根就可形成,此时即可移栽 到种植田中,进行正常的田间管理。当年移 栽的试管苗当年则可收获块茎,千粒重约 2kg。
2.块茎启动培养
A、将经过消毒的珠芽和块茎取出,在无菌滤 纸上切成小块,每个块茎可纵切为4~8块, 使每个小块上都有芽原基。 B、将切块分别放到愈伤组织诱导培养基上。 C、启动培养基:MS+2,4-D 0.3~1.0mg/ L+BA0.5~2.0mg/L。
D、培养情况
2—3周即可见愈伤组织形成, 形成的愈伤组织: ①如果致密、坚硬,绿色或浅绿色,易形成 类似珠芽的组织块,可分化产生芽。 ②如果疏松,白色透明或半透明,则不易分 化产生芽,应丢弃。