薄层快速分析多糖的单糖组成概要

干扰物质NaCl KCl Ca(NO 32

葡萄糖麦芽糖果糖蔗糖酒石酸柠檬酸倍数

200

200

200

100

100

100

100

100

100

表 1 干扰物质的影响Table 1 Effect of foreign species 样品编号

加入 (×10-5mol/L

检出a (×10-5mol/L

10.550.5420.760.7330.790.824

0.97

0.98

表 2 样品测定结果

Table 2 Results of the determination of samples

注:a 10次检测的平均值。

误差控制在±5%之内时。因此,该电极应用于蔬菜和水果中抗坏血酸的测定将具有很好的选择性。2.3.2

样品测定

为了验证该修饰电极能否在实际样品中抗坏血酸含量进行正确的测量,我们自制了几种样品。自制样品组成为:1.0×10-4

mol/L NaCl 、KCl 、Ca(NO 32、葡

萄糖、麦芽糖、果糖、蔗糖、酒石酸及柠檬酸及0.5×10-5~1×10-5mol/L 抗坏血酸。其测定结果如表2所示。由表2可知,测定的抗坏血酸含量与已知含量基本一致。3

结论

该新型的修饰电极具有极高的化学稳定性,且对溶液中的抗坏血酸具有良好的电催化作用,已成功地应用于水果中抗坏血酸含量的测定,获得了比较满意的结

果,可望成为能满足不同需要的抗坏血酸传感器。

参考文献:

[1] D W Martin Jr. Harper's Review of Biochemistry, 19th ed Eds: D W Martin Jr, P

A Mayes, V W Rodwell. Lange, Los Altos, CA, 1983. 112.[2]胡慰望, 谢笔钧. 食品化学[M]. 北京: 科学出版社, 1992. 243.[3]黄伟坤, 等. 食品检验与分析[M]. 北京: 中国轻工业出版社, 1989.96.[4]

A H Ensminger, M E Ensminger, J E Konlande, 等. 食品与营养百科全书[M]. 王淮洲, 王惟球, 王模善, 等译. 北京:农业出版社, 1989.

收稿日期:2006-07-26 *通讯作者

基金项目:四川省中医药管理局重点及专项项目(2003A001、2003C001

作者简介:颜军(1971-,男,实验师,研究方向为生物活性成分的提取及检测。

TLC 快速分析多糖的单糖组成

颜军,郭晓强,李晓光,邬晓勇,苟小军*(成都大学中药化学实验室,四川成都610106

摘要:本文采用薄层色谱法分析多糖的单糖组成。从斑点分离度、清晰度、有无拖尾现象及展层时间等方面综合评价展层效果。通过实验确定了适合的展开剂为展开系统(乙酸乙脂:吡啶:无水乙醇:水=8:1:1:2、合适的显色剂为苯胺-二苯胺磷酸显色剂。通过此体系确定了单糖的Rf 值,可用于快速分析水解多糖的单糖组分。关键词:多糖;单糖组成;薄层色谱

TLC to Fleetly Analyze Monosaccharide Composition of Polysaccharide

YAN Jun ,GUO Xiao-qiang ,LI Xiao-guang ,WU Xiao-yong ,GOU Xiao-jun*

(Laboratory of Traditional Chinese Medicine, Chengdu University, Chengdu 610106, China

Abstract :Applying TLC to analyze monosaccharide composition of polysaccharides was stuided. A mixed solution composed of ethylacetate, pyridine, alcohol and water in a ratio of V C 4H 8O 2

:V C 5

H 5

N :V C 2H 6

O :V H 2

O = 8:1:1:2 by volume is used as extending system.

A solution containing aniline and diphenylamine dissolved in acetone is used as coloration system. Satisfactory separation is

acquired as shown by the thin layer chromatogram. Qualitative results can be obtained in accordance with the R f value of the standard spots. Distinct figures indicating the monosaccharide composition of polysaccharides obtained by the modified TLC.The extending system and coloration system can be used in monosaccharide composition analysis.

Key words:polysaccharide;monosaccharide composition;thin-layer chromatography ( TLC

中图分类号:TS207.3 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(200612-0603-05

多糖作为来自高等植物、动物细胞膜和微生物细胞壁中的天然高分子化合物,是构成生命的四大基本物质之一。随着人们对多糖组成、性质、结构与功能研究的不断深入。对多糖的生物活性也有了更多的认识,能提高机体免疫力,增强机体耐缺氧能力,清除自由基,抑制肿瘤,可用于治疗高血压、高血脂、糖尿病、乙型肝炎等多种现代医学中的疑难病症[1~3]。多糖的研究受到了越来越广泛的重视。并取得了丰硕的成果,已有香菇多糖、灵芝多糖等应用于临床。国内外研究表明,多糖的活性与许多因素有关,如分子量、溶解性等,特别是与其空间结构密切相关[4,5]。由于一级结构是空间结构的基础,而多糖的单糖组成是一级结构的主要内容,所以有必要找到一种简便、灵敏的方法以确定多糖的单糖组成。

单糖组分的分离测定方法目前主要有高效液相色谱法(HPLC、气相色谱法(GC、薄层色谱法(TLC等[6]。采用G C测定糖类,遇到的主要困难是糖本身没有足够的挥发性,所以必须在气相色谱分析之前预先转化成易挥发、对热较稳定的衍生物。另外,由于糖的异构化,在某些衍生物的制备过程中,会产生衍生物的异构体,使色