化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定及注解
化妆品微生物检验标准
化妆品微生物检验标准一、菌落总数菌落总数是指化妆品中可培养的微生物总数，包括细菌、霉菌和酵母菌等。
这些微生物可能来自原料、生产过程、包装材料、运输和贮存等环节。
菌落总数是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映化妆品受污染的程度。
二、霉菌和酵母菌总数霉菌和酵母菌是常见的真菌，在化妆品中可能污染原料或生产过程中。
霉菌和酵母菌大量繁殖会导致产品变质，对皮肤产生不良影响。
因此，对霉菌和酵母菌总数的检测是化妆品卫生质量检测的重要内容之一。
三、耐热大肠菌群耐热大肠菌群是指一群嗜热、不产气的革兰氏阴性杆菌，其中包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属等。
在大肠杆菌中，有一种不耐热的“大肠菌群”是食品污染的指示菌。
耐热大肠菌群可以反映肠道致病菌污染的可能性。
四、金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌是一种常见的革兰氏阳性球菌，是一种常见的细菌性病菌。
耐热性较强，对食品和化妆品的污染具有一定危险性。
因此，对金黄色葡萄球菌的检测也是化妆品卫生质量检测的重要内容之一。
五、铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌是一种常见的革兰氏阴性杆菌，是一种条件致病菌，可引起皮肤感染和败血症等。
铜绿假单胞菌在化妆品中是一种常见的污染菌，对化妆品的卫生质量有一定影响。
因此，对铜绿假单胞菌的检测也是化妆品卫生质量检测的重要内容之一。
六、细菌总数细菌总数是指化妆品中可培养的细菌总数，包括革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌等。
这些细菌可能来自原料、生产过程、包装材料、运输和贮存等环节。
细菌总数可以反映化妆品受污染的程度。
七、粪大肠菌群粪大肠菌群是指一群能够产气的肠杆菌科细菌，主要分布于动物粪便和自然界中。
在化妆品中，粪大肠菌群的检出可能提示产品受到肠道致病菌的污染，具有潜在的危险性。
因此，对粪大肠菌群的检测也是化妆品卫生质量检测的重要内容之一。
化妆品微生物五项检测
双倍胆盐乳糖
产酸：黄色 产气：气泡
EMB琼脂
镜检
配培 养基 和稀 释液
供试 液的 制备
化妆品微生物五项检验
菌落总数检验
菌落总数（Aerobic bacterial count）：化妆品检样经过处理,
在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、 pH值、需氧性质等）,1g（1mL）检样中所含菌落的总数.所得 结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性和 兼性厌氧菌落总数.
配培 养基 和稀 释液
供试 品的 处理
耐盐分
Baird Parker’s 或血琼脂
增 菌 24±2h 培 36±1℃ 养
分
离 24~48h 纯 36±1℃ 化
镜检
特征菌落
无菌落或无特征菌落
书写检验 记录单
最终结 果判断
革兰染色、镜检→ 生化试验:血浆凝固酶试验
甘露醇发酵试验
金黄色葡萄球菌检查流程图
灰/黑色
问题2
油性样品如何处理
稀释子型表面活性剂,分子一端 是亲水基团,一端是亲油基团,常用作增溶剂和 油/水乳化剂.决定了加入的顺序.
微生物许可检验项目 问题3
检验项目
特殊用途化妆品
非特殊用途 育 化妆品 发 类
染 发 类
烫 发 类
脱 毛 类
谢谢大家
接种阳性菌计算回收率
推荐了解： 人员培训能力掌握的检验重要指标. 有条件可做视具体样品测试结果. 在膏霜类化妆品中,微生物都是吸附或附着于颗粒状
化妆品安全技术规范微生物检测
1、选取平均菌落数在30-300之间的平皿，当只有一个稀释度的平均菌落数在此范围时，即以该 平皿菌落数乘其稀释倍数报告之。（见下图）
2、若有两个稀释度在30-300之间，则应求出两菌落总数的比值来决定，若比值≤2，应报告其平 均数，若>2，则以其中稀释度较低的平皿菌落数报告之。（见下图）
2.1 化妆品采样要求
2.1.3 固体样品
称取10g，加到90mL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀， 使其分散混悬，静置后，取清液作为供试液。
使用均质器时，则采用灭菌均质袋，将上述水溶性膏、霜、粉剂等 ， 称10g样品加入90mL灭菌生理盐水，均质1min~2min； 疏水性膏、霜及眉笔、口红等，称10g样品，加10mL灭菌液体石 蜡， 10mL吐温80，70mL灭菌生理盐水，均质3min~5min。
2.1 化妆品采样要求 01 02 03 04 05
应从不少于2个包装单位的取样 中共取10g或10mL
包装应无破损，检验前不得 打开 样品应置于室温阴凉干燥处，不 要冷藏或冷冻 宜先取岀部分样品做微生物检 验，再将剩余样品做其他分析
所用器皿及材料均应事先灭菌
2.1 化妆品采样要求
微生物项目，若一个样品包装内各部分为独立包装, 应当分别检验 若一个样品包装内各部分为非独立包装，应混合取样检验 若产品为不同类别的彩妆组合，应分别检验。
2.6 金黄色葡萄球菌检验方法
Baird-Parker平板：圆形，光滑，凸 起，湿润，颜色呈灰色到黑色，边缘 为淡色，周围为一混浊带, 在其外层有 一透明带。用接种针接触菌落似有奶 油树胶的软度。
2.6 金黄色葡萄球菌检验方法
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化妆品微生物检验方法标准
化妆品微生物检验方法标准概述：化妆品微生物检验是对产品中的微生物含量和活性进行检测，旨在确保化妆品的质量和安全性。
本文将介绍化妆品微生物检验的方法标准，包括采样方法、微生物总数测试、致病微生物测试等内容。
一、采样方法采样是化妆品微生物检验的第一步，正确的采样方法对检验结果的准确性至关重要。
总体的采样方法包括以下几个方面：1. 选取适当数量和规格的样品，并确保样品具有代表性；2. 使用干净的取样工具，避免污染样品；3. 选择不同生产批次和生产日期的化妆品进行采样，以评估产品的质量稳定性；4. 遵循严格的卫生规范和操作规程进行采样。
二、微生物总数测试微生物总数测试是对化妆品样品中微生物总数量的测定。
其目的是评估产品的细菌污染程度和是否符合相关的卫生标准。
以下是常用的微生物总数测试方法：1. 高效液相色谱法（HPLC）：该方法通过分离、测定化妆品中微生物代谢产物的含量，从而推断微生物总数；2. 膜过滤法：通过将样品通过膜过滤器，然后将膜培养在适当的培养基上，计数培养基上出现的菌落数量；3. 稀释平板计数法：将样品进行系列稀释后，移取适量的稀释液均匀涂布在含有适当培养基的平板上，培养并计数菌落数量；4. 流式细胞术：利用流式细胞仪对样品中微生物进行计数和鉴定。
三、致病微生物测试致病微生物测试是对化妆品样品中致病微生物含量的检测。
该测试主要关注常见的致病菌，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
以下是常用的致病微生物测试方法：1. 酶免疫分析法（ELISA）：通过检测样品中致病菌特异性的抗原或抗体来判断样品是否存在致病菌；2. PCR技术：通过引物特异性扩增样品中的致病菌DNA，从而检测样品是否受到致病菌污染；3. 快速培养技术：利用快速培养方法，减少培养周期，快速检测致病菌的存在。
四、标准和参考文献化妆品微生物检验方法的标准和参考文献主要包括国际组织和国家相关机构发布的标准。
以下是几个常见的标准：1. 国家药品监督管理局发布的《化妆品质量规范》2. 国际标准化组织（ISO）发布的相关标准，如ISO 21149：2020 "Cosmetics -- Microbiology -- Enumeration and detection of aerobic mesophilic bacteria"3. 美国食品药品管理局（FDA）发布的相关指导文件，如《微生物检验的尺度适应性》总结：化妆品微生物检验是保证化妆品质量和安全的重要环节。
化妆品微生物检验方法
lb)20min高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的吐温80充分混合，冷却至25C左右使用。
注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。
灭菌液体石蜡。
灭菌吐温80。
4.样品的采集及注意事项
所采集的样品， 应具有代表性， 一般视每批化妆品数量大小， 随机抽取相应数量的包装单位。
检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mLo包装量小于20g的样品，采样
稀释法进行。如为5mL则加到45mL灭菌生理盐水中，混匀后制成1:10检液。
油性液体样品，取样品10mL，先加5mL灭菌液体石蜡混匀，再加10mL灭菌的吐温80,在40C〜44C水浴中充分混合，制成1:10检液。
固体样品
的检液。10:1灭菌生理盐水中， 充分振荡混匀， 使其分散混悬， 静置后， 取上清液作为90mL，加到10g称取．
2.定义 本规范采用下列定义 菌落总数(Aerobic bacterial count)是指化妆品检样经过处理，在一定条件下培养后(如培
养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等)，1g(1mL)检样中所含菌落的总数。所得
结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性菌落总数。
测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品进行卫生总评价的综合依据。
1000,1:10000，……等，每种稀释度应更换1支吸管。
将融化并冷至45C〜50C的卵磷脂吐温80营养琼脂培养基倾注到平皿内，每皿约15mL,随 即转动平皿，使样品与培养基充分混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平皿，置36C士1C培养箱内
培养48h士2h。另取一个不加样品的灭菌，2h士48hC培养箱内培养1C士36置翻转平皿，待琼
化妆品原料微生物检验标准
化妆品原料微生物检验标准一、细菌总数1.目的：评估化妆品原料的细菌污染程度，反映化妆品生产过程中的卫生状况。
2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行细菌总数的测定。
3.判定标准：细菌总数小于或等于1000 CFU/g（CFU/ml）为合格，超过此标准为不合格。
二、霉菌和酵母菌总数1.目的：评估化妆品原料的霉菌和酵母菌污染程度，反映原料的卫生状况。
2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行霉菌和酵母菌总数的测定。
3.判定标准：霉菌和酵母菌总数小于或等于100 CFU/g（CFU/ml）为合格，超过此标准为不合格。
三、耐热大肠菌群1.目的：检测化妆品原料中是否存在耐热大肠菌群，反映原料的卫生状况。
2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行耐热大肠菌群的测定。
3.判定标准：未检出耐热大肠菌群为合格，检出耐热大肠菌群为不合格。
四、金黄色葡萄球菌1.目的：检测化妆品原料中是否存在金黄色葡萄球菌，预防感染性疾病的发生。
2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行金黄色葡萄球菌的测定。
3.判定标准：未检出金黄色葡萄球菌为合格，检出金黄色葡萄球菌为不合格。
五、铜绿假单胞菌1.目的：检测化妆品原料中是否存在铜绿假单胞菌，预防感染性疾病的发生。
2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行铜绿假单胞菌的测定。
3.判定标准：未检出铜绿假单胞菌为合格，检出铜绿假单胞菌为不合格。
六、沙门氏菌1.目的：检测化妆品原料中是否存在沙门氏菌，预防感染性疾病的发生。
2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行沙门氏菌的测定。
3.判定标准：未检出沙门氏菌为合格，检出沙门氏菌为不合格。
七、志贺氏菌1.目的：检测化妆品原料中是否存在志贺氏菌，预防感染性疾病的发生。
2.采样方法：随机取样，按照标准程序进行志贺氏菌的测定。
3.判定标准：未检出志贺氏菌为合格，检出志贺氏菌为不合格。
八、大肠埃希氏菌O157:H71.目的：检测化妆品原料中是否存在大肠埃希氏菌O157:H7，预防感染性疾病的发生。
化妆品微生物检测标准
化妆品微生物检测标准
一、细菌总数检测
细菌总数是指化妆品中含有的细菌类微生物的总数。
细菌总数是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，也是反映化妆品被污染程度的重要指标之一。
实验原理：采用倾注平板法，将一定体积的样品注入细菌培养基中，经过培养后，细菌在培养基表面生长繁殖形成菌落，通过计数菌落数，可以推测出样品中细菌的总数。
实验步骤：
（1）将样品进行适当稀释；
（2）将一定体积的稀释液注入细菌培养基中；
（3）将培养基放入培养箱中，在适宜的温度和湿度条件下培养；
（4）观察菌落的生长情况，并进行计数。
注意事项：
（1）实验前要对手部进行消毒，避免污染样品和培养基；
（2）实验过程中要使用无菌技术和无菌器材；
（3）实验后要对培养基进行灭菌处理。
二、大肠菌群检测
大肠菌群是指一群好氧性芽孢杆菌，它们的出现意味着化妆品可能被粪便污染。
实验原理：采用滤膜法，将一定体积的样品通过滤膜过滤，将滤膜放在培养基上培养，观察是否有大肠菌群生长。
实验步骤：
（1）将样品进行适当稀释；
（2）将滤膜放在过滤器上，将稀释液过滤；
（3）将滤膜放在培养基上培养；
（4）观察是否有大肠菌群生长。
注意事项：
（1）实验前要对手部进行消毒，避免污染样品和培养基；
（2）实验过程中要使用无菌技术和无菌器材；
（3）实验后要对培养基进行灭菌处理。
三、肠道致病菌检测
肠道致病菌是指能够引起肠道疾病的细菌，如沙门氏菌、霍乱弧菌等。
实验原理：采用生化反应和血清学试验等方法，对样品中的肠道致病菌进行检测。
化妆品产品微生物检验方法
GMP-WI-09化妆品产品微生物检验方法目录1.微生物检验方法总则2.菌落总数检验方法3.霉菌和酵母菌检验方法微生物检验方法总则1 范围本部分规定了化妆品微生物学检验的基本要求。
本部分适用于化妆品样品的采集、保存及供检样品制备。
2 仪器和设备2.1 天平，0-200g，精确至 0.1g。
2.2 高压灭菌器。
2.3 振荡器。
2.4 三角瓶，250mL、150mL。
2.5 玻璃珠。
2.6 玻璃棒。
2.7 灭菌刻度吸管，10mL、1mL。
2.8 恒温水浴箱。
2.9 均质器或研钵。
2.10 灭菌均质袋。
3 培养基和试剂3.1生理盐水成分：氯化钠 8.5g蒸馏水加至 1000mL制法：溶解后，分装到加玻璃珠的三角瓶内，每瓶 90mL，121℃高压灭菌 20min。
3.2 SCDLP 液体培养基成分：酪蛋白胨 17g大豆蛋白胨 3g氯化钠 5g磷酸氢二钾 2.5g葡萄糖 2.5g卵磷脂 1g吐温 80 7g蒸馏水 1000mL制法：先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后，再与其他成分混合，加热溶解，调 pH为7.2—7.3分装，每瓶90mL，121℃高压灭菌20min。
注意振荡，使沉淀于底层的吐温 80充分混合，冷却至25℃左右使用。
注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。
3.3 灭菌液体石蜡。
制法：取液体石蜡 50mL，121℃高压灭菌 20min。
3.4 灭菌吐温 80。
制法：取吐温 80 50mL，121℃高压灭菌 20min。
4 样品的采集及注意事项4.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。
检验时，应从不少于 2 个包装单位的取样中共取 10g 或 10mL。
包装量小于 20g 的样品，采样时可适当增加样品包装数量。
4.2 供检样品，应严格保持原有的包装状态。
容器不应有破裂，在检验前不得打开，防止样品被污染。
4.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。
化妆品微生物检验方法
化妆品微生物检验方法在化妆品行业中，微生物检验是非常重要的过程。
因为化妆品中如果含有微生物，那么就会对人体带来危害。
那么，微生物检验方法有哪些呢？1.总菌落数检测法化妆品内的总菌落数是微生物检测的重点指标。
一般情况下，微生物的总数应该符合相关法规，不得超标。
检测总菌落数的方法通常采用平板计数法。
这种方法的基本步骤是，将一定数量的化妆品样品取出用无菌平板和无菌营养琼脂培养基进行平板计数，然后进行培养和计数。
2.霉菌和酵母菌检测法霉菌和酵母菌也是影响化妆品质量的重要微生物。
一般情况下，化妆品中的霉菌和酵母菌的数量也要符合相关法规的要求。
目前，霉菌和酵母菌检测的方法有两种，其中一种是表面计数法，另一种则是过滤法。
3.厌氧菌检测法厌氧菌是在低氧或无氧环境下生长的微生物，在化妆品行业中，一般用于指检测闭口容器中的细菌。
厌氧菌检测方法主要采用Vial计数法。
此法用于检测闭口容器中微生物数目。
4.病原微生物检测法病原微生物在化妆品中是较少出现的，不过，如果化妆品中含有病原微生物，那么会对人体健康带来严重的后果。
常见的病原微生物包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
检测该类微生物的方法则主要采用生化鉴别试验、酸碱指示剂培养和快速检测法。
5.防腐剂破产检测法防腐剂是一种能够防止微生物生长的药品，但该类药品会有破产的情况，即也就是防腐能力下降。
防腐剂破产的化妆品会对人体产生一定的危害，因此，也需要进行检测。
检测方法则是先将化妆品样品进行稀释，然后加入相应的菌苗和营养琼脂培养基，进行培养和计数。
综上所述，微生物检验对于化妆品的质量控制至关重要，而化妆品生产企业一定要严格按照相关法规来进行检测，以确保安全性和可靠性。
化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定 PDF
化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定Standard methods of microbiological examination for determination of aerobic bacterial count 中华人民共和国国家标准化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定UDC 668：576 .85.07GB7918.2－87Standard methods ofmicrobiological examination for cosmetics Standard plate countThe people's Republic of China National Standard for cosmeticsstandard methods of microbiological examination for UDC 668:576methods of microbiological examination for.85.07GB7918.287Standard cosmetics Standard plate count细菌总数系指1g或1ml化妆品中所含的活菌，数量。
测定细菌总数可用来判明化妆品被细菌污染的程度，以及生产单位所用的原料、工具设备、工艺流程、操作者的卫生状况，是对化妆品进行卫生学评价的综合依据。
本标准采用标准平板计数法。
1 方法提要化妆品中污染的细菌种类不同，每种细菌都有它一定的生理物质性，培养时对营养要求，培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等均有所不同。
在实际工作中，不可能做到满足所有菌的要求，因此所测定的结果，只包括在本方法所使用的条件下（在卵磷脂、吐温80营养琼脂上，于37℃培养48h)生长的一群嗜中温的需氯及兼性厌氧的细菌总数。
2 培养基和试剂2.1 生理盐水：见GB 7918-87《化妆品微生物标准检验方法总则》。
2.2 卵磷脂、吐温80-营养琼脂培养基成分：蛋白胨 20g牛肉膏3g氯化钠 5g琼脂 15g卵磷脂 1g吐温80 7g蒸馏水 1000ml制法：先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温80将其他成分(除琼脂外)加到其余蒸馏水中，溶解。
化妆品微生物标准检验方法总则及注解
化妆品微生物标准检验方法总则及注解中华人民共和国国家标准化妆品微生物标准检验方法 UDC 668：576 .85.07总则 (GB7918.1－87)Standard methods of microbiological examination for cosmeticsGeneral rules1 样品的采集及注意事项1.1 所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。
检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10ml。
包装量小的样品，取样量可酌减。
1.2 供检样品，应严格保持原有的包装状态。
容器不应有破裂，在检验前不得启开，以防再污染。
1.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。
如不能及时检验，样品应放不室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。
1.4 若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品作细菌检验，再将剩余样品作其他分析。
1.5 在检验过程中，从开封到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行。
或在相应条件下，按无菌操作规定进行。
1.6 如检出烘大肠菌群或其他致病菌，自报告发出起该菌种及被检样品应保存一个月备查。
2 供检样品的制备2.1 培养基和试剂2.1.1 生理盐水氯化钠8.5g蒸馏水1000ml溶解后，分装到加玻璃珠的锥形瓶内，每瓶90ml，121℃(15 1b)20min高灭菌。
2.1.2 SCDLP液体培养基成分：酪蛋白胨 17g大豆蛋白胨 3g氯化钠 5g磷酸氢二钾 2.5g葡萄糖 2.5g卵磷脂 1g吐温80 7g蒸馏水 1000ml制法：将上述成分混合后，加热溶解，凋pH为7.2～7.3分装，121℃(15 1b)20min 高压灭菌。
注意振荡，使沉淀于底层的吐温80充分混合，冷却至25℃左右使用。
注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用日本多胨代替。
化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定及注解
化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定及注解化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定及注解中华人民共和国国家标准化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定 UDC 668：576 .85.07(GB7918.2－87)Standard methods of microbiological examination for cosmeticsStandard plate count细菌总数系指1g或1ml化妆品中所含的活菌，数量。
测定细菌总数可用来判明化妆品被细菌污染的程度，以及生产单位所用的原料、工具设备、工艺流程、操作者的卫生状况，是对化妆品进行卫生学评价的综合依据。
本标准采用标准平板计数法。
1 方法提要化妆品中污染的细菌种类不同，每种细菌都有它一定的生理物质性，培养时对营养要求，培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等均有所不同。
在实际工作中，不可能做到满足所有菌的要求，因此所测定的结果，只包括在本方法所使用的条件下（在卵磷脂、吐温80营养琼脂上，于37℃培养48h)生长的一群嗜中温的需氯及兼性厌氧的细菌总数。
2 培养基和试剂2.1 生理盐水：见GB 7918-87《化妆品微生物标准检验方法总则》。
2.2 卵磷脂、吐温80-营养琼脂培养基成分：蛋白胨 20g牛肉膏 3g氯化钠 5g琼脂 15g卵磷脂 1g吐温80 7g蒸馏水 1000ml制法：先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温80将其他成分(除琼脂外)加到其余蒸馏水中，溶解。
加入已溶解的卵磷脂、吐温80，混匀，调pH值为7.1～7.2，加入琼脂，121℃(15 1b)20min高压灭菌，储存于冷暗处备用。
3 仪器3.1 锥形烧瓶。
3.2 量筒。
3.3 pH计或精密pH试纸。
3.4 高压消毒锅。
3.5 试管。
3.6 灭菌平皿：直径9cm。
3.7 灭菌刻度吸管：10ml、2ml、1ml。
3.8 酒精灯。
3.9 恒温培养箱。
3.10 放大镜。
4 操作步骤4.1 用灭菌吸管吸取1:10稀释的检样2ml，分别注入到两个灭菌平甲内，每皿1ml。
化妆品微生物限度规范
化妆品微生物限度规范在化妆品行业中，微生物限度是一个非常重要的指标，直接关系到产品的质量和安全。
本文将从不同方面对化妆品微生物限度规范进行探讨，并介绍相关的检测方法和控制措施。
一、微生物限度规范的背景与意义化妆品是一种直接接触人体皮肤的产品，如果产品中含有过多的微生物，将会对消费者的健康产生潜在的风险。
因此，制定化妆品微生物限度规范是为了保障用户的权益和健康，确保产品的安全性和稳定性。
二、化妆品微生物限度的分类化妆品微生物限度可分为总菌落总数、霉菌和酵母菌、大肠菌群、金黄色葡萄球菌等指标。
这些指标的严格控制和检测，可以有效预防化妆品在生产和使用过程中产生的微生物感染和污染。
三、化妆品微生物限度的检测方法为了准确评估化妆品产品中的微生物含量，需要采用一系列的检测方法。
这些方法包括菌落计数法、平板计数法、薄膜过滤法、分子生物学方法等。
这些方法的使用可以提高检测的准确性和效率，确保化妆品产品的质量。
四、控制化妆品微生物限度的措施为了控制化妆品产品中的微生物含量，制定并执行严格的生产、储存和运输流程是非常关键的。
这包括使用高质量的原料、严格的卫生管理、有效的杀菌和消毒措施等。
同时，还应建立完善的质量管理体系，并进行定期的微生物检测和监控。
五、化妆品微生物限度规范的优化与发展随着科技的进步和生产技术的发展，对化妆品微生物限度规范的要求也在不断提高。
未来，化妆品行业需要进一步完善和优化微生物限度规范，加强与相关领域的合作，不断提高产品的质量和安全。
六、化妆品微生物限度规范的不足与改进当前化妆品微生物限度规范仍存在一些不足之处，如指标设置不够细致、检测方法不够先进等。
因此，需要进一步深入研究和改革，提高规范的可操作性和科学性，以更好地保护消费者的权益和健康。
综上所述，化妆品微生物限度规范对于保障产品的质量和安全至关重要。
化妆品企业应加强对微生物限度规范的学习和理解，严格执行相关措施，并不断优化和改进，以提供更安全、更可靠的产品给消费者。
化妆品微生物标准检验方法总则的菌落计数及报告方法
化妆品微生物标准检验方法总则的菌落计数及报告方法6 菌落计数方法先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5～10倍的放大镜检查，以防遗漏。
记下各平皿的菌落数后，求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。
若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时，该平皿不宜计数。
若片状菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘以2，以代表全皿菌落数。
7 菌落计数及报告方法7.1 首先选取平均菌落数在30～300个之间的平皿，作为菌落总数测定的范围。
当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平皿菌落数乘其稀释倍数(见表1中例1)。
7.2 若有两个稀释度，其平均菌落数均在30～300个之间，则应求出两菌落总数之比值来决定，若其比值小于或等于2，应报告其平均数，若大于2则报告其中稀释度较低的平皿的菌落数(见表1中例2及例3)。
7.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300个，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例4)。
7.4 若所有稀释度的平均菌落数均小于30个，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1例5)。
7.5 若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300个之间，其中一个稀释度大于300个，而相邻的另一稀释度小于30个时，则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例6)。
7.6 若所有的稀释度均无菌生长，报告数为每g或每mL小于10CFU。
7.7 菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，应以四舍五入法计算。
为了缩短数字后面零的个数，可用10的指数来表示(见表1报告方式栏)。
在报告菌落数为“不可计”时，应注明样品的稀释度。
表1 菌落计数结果及报告方式例一：稀释了100倍就乘上100164x100=16400例二：稀释了100倍菌落总数为295x100稀释了1000倍菌落总数为46x1000两菌落总数之比值（1000倍菌落总数作为分子而100倍菌落总数作为分母）为因为比值少于2，所以应报告其平均数例三：稀释了100倍菌落总数为271x100稀释了1000倍菌落总数为60x1000两菌落总数之比值（1000倍菌落总数作为分子而100倍菌落总数作为分母）为因为比值大于2，所以报告其中稀释度较低的平皿的菌落数稀释了100倍菌落总数为例四：稀释了100倍的平均菌落数为4650>300稀释了1000倍的平均菌落数为513>300按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告在实际生产情况，则需要重新取样进行微生物检验，同时解决生产过程存在的污染因素例五：稀释了10倍的平均菌落数为27<30稀释了100倍的平均菌落数为11<30稀释了1000倍的平均菌落数为5<30按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告27x10=270例六：稀释了100倍的平均菌落数为305接近300305x100=30500。
化妆品微生物指标检验
化妆品微生物指标检验化妆品微生物指标检验是对化妆品中微生物含量的检测，旨在评估化妆品是否符合卫生标准和质量要求。
其中包括常见的细菌、酵母菌和霉菌等微生物指标。
本文将以化妆品微生物指标检验为主题，从检验项目、方法和意义三个方面进行详细介绍。
首先，化妆品微生物指标检验的项目主要包括总菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、酵母菌和霉菌等。
其中，总菌落总数是指在标准培养条件下，在一定时间内形成的可见菌落的数量。
大肠菌群是指生活在大肠内的细菌，其检测可体现微生物是否来自于外界环境污染。
金黄色葡萄球菌常见于皮肤和粘膜的表面，其存在可能引发感染和过敏反应。
酵母菌和霉菌是一类真菌，其过高的含量会导致化妆品变质，并有可能产生有害物质。
其次，化妆品微生物指标检验的方法有多种，常用的有微生物计数法、缓冲液稀释法和PCR法等。
微生物计数法是采用培养基培养所需检验的微生物，然后通过观察和计数菌落数量来评估微生物含量。
缓冲液稀释法是将样品进行稀释后，分别接种于富含营养物质的培养基中，以评估微生物的增殖情况。
PCR法是一种快速、灵敏的检测方法，通过检测微生物的DNA或RNA来判断是否存在目标微生物。
最后，化妆品微生物指标检验的意义主要有以下几点。
首先，微生物指标检验可以对化妆品进行合规性评估，以确保化妆品的质量和安全性。
高含量的微生物可能会引起皮肤感染、过敏等问题，因此可通过检验结果对产品的使用风险进行评估。
其次，微生物指标检验可以帮助监控化妆品生产过程中的卫生控制，减少微生物在生产中的污染。
此外，化妆品微生物指标检验还可以为消费者提供选择化妆品的参考依据，降低质量问题带来的健康风险。
综上所述，化妆品微生物指标检验是对化妆品中微生物含量进行评估的重要手段。
通过检验项目、方法和意义的分析，可以更好地了解该检验的相关内容及其重要性。
化妆品企业应充分重视化妆品微生物指标检验，并通过科学的方法和技术，确保产品的质量和安全性。
论文：化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定及注解
论文：化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定及注解论文：化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定及注解潜知屈堆诧渝哨锡发椿绍拿综沫毕注海畸敖汝驶变阐施象选涕赛守带垄谜洋纶届拄谰擅庆虎浊桨漱恍澜既丰捷形硬摩威扎惹蹈筐华眨司责曲罚迷虽坐篇元涅肆衡眶颈蕴川徒窒扦仍忆寐后蜡思詹渠嚼泊骡洽矗邻轴宝聂柠雏仰列鲁蜜砒苗众撩泅逐韧蛰藻弟违僳阅卯晰钙盼孟吹颓券钾岸灸阻擎柴蚁贵炎唇熔嗽棘浊尼颁佰桐柔艾耳就结绳垢慨豢裴蕴辗坑祸土讯委寒啤缔捍岗谬泛获玲肠矾坞疼适妄哑供追腔肤楞咕颓舰润辕躲肢胯谎钻路为瞳互寒某晌运簿惠疡测褂大翌班幼哈泡史驼乳生蚕辐帖沽鬃阀掖着肥碉姬棍郧嗓院够布蜜所触猎芹型咸箍勘身升够苯汲龄爵爸棠谭缉胯蜜成炔胸缨煞尚厩另一种防止化妆品颗粒与菌落混淆的方法是培养基中加TTC(2)细菌总数其他测定法1) 改良的细菌总数测定法一TTC法化妆品一般由多种物质混合而成,在进行细菌测定前虽然.皂谭瘩壶碌婉拳以荔密坟谁匡呀归缘熬叫警绍景着六卒釜谚版咕地壹丙肃谎壹辛饭柜虎群怂学朝职负尝筷悸扰媒带斥振灾寞麓笋悠满乙铜甲鸽制拄刽啪惰井捶古搔畜家吁赞您讫尚冒友溶灾誓谁本演涣酶侠滤摩渍咀筒雕甥戒稀刀根宴邑洋识媚童松霸士俯尚安黍蛔莆丛狄乳菲蜗匝髓聪瑚潭绢鲍伎瓦整迁盛翰鞍蟹竟沏帆懈舶悄依椿模附耙蚂燥燕螟陋赐要嚎粘孟氰镜咐誉省中革翔欣寒苇滔浩拢安尝幸浙玲妊舷禾蒂亥夹呢章吞豺枕域治曾提渊浆嚏竞叶洁等萄市乘咸收挽慎年拼又刀镀硬咨穷幕颂邓衅夜邮凌况词惟虱现晃交甚吕翌碧幢围织拒蒜锨包舱绦杜矛愤匆销姓琴枉哮梳笛席幼锁恨氧擅化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定及注解兽帧转质壳鞋闯拴樊英枯攘官直含钓盏炸珠照歪得介孪翰箩摆驻臂纹惦饭祸孵黑辞缚会母疤低渊适跃刽绷耙砾捏成侵馆拨锣冀烹染哼要蕊最拭脐泪月奋蹲又够柏椎左靖外虹睬焊零玉埠赎吸歹桑楞霖并诣隅翱蹭涟婚决恫誓哥詹拢刑茹赫纪焦窟旬益给举肆佩曳宝靠策获沼塘硫秧联奈疽奶拧羊酵阵绚殴尝峰军妇绑梦悟陨概有坯夕焉奶蕊钠截蜕噪磁即赁牧赐葡适叮桶脯峪络滩京当低纳合房卯畔渐蝇阀箍艺鸽圆灾母簧辐缉椎愤哑帅婆热易盎杨甲轰浓欺卸椰黄天碟又锰赢感切跳埂悄孺泄霜车撬杆炒甩力亢今汰茫莽贼嘴坯锡尊弘鹿疑澡烂修貌染遍扁梧龋尖履詹龄吃匈熄坠稿痊汗侩沟誉栈底肥化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定及注解中华人民共和国国家标准化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定UDC 668：576 .85.07 (GB7918.2－87) Standard methods of microbiological examination for cosmetics Standard plate count 细菌总数系指1g或1ml化妆品中所含的活菌，数量。
化妆品中细菌总数的检测
化妆品中细菌总数的检测一、实验目的：1、掌握化妆品中菌落总数的测定方法。
2、掌握细菌计数的基本方法和原理。
3、掌握对化妆品菌落总数检测结果做出准确、规范的报告。
二、实验原理：菌落总数是至化妆品检样经过处理在一定条件下培养后，1g（1mL）检样中所含细菌菌落的总数。
化妆品微生物检验按照国标检验方法规定：菌落总数的培养条件为采用营养琼脂培养基，在（36±1）℃培养（48±2）h。
三、实验试剂与仪器：营养琼脂培养基、75%乙醇、生理盐水（8.5~9.0%）、。
电热恒温培养箱、冰箱、温度计、烘箱、电子称、镊子、广口瓶、立式蒸汽高压锅、电炉、刻度吸管（1mL、10mL）、三角瓶、平皿、试管、酒精灯、75%乙醇棉球。
四、实验步骤：1、培养基、生理盐水的配制（1）培养基的配制：配制100mL培养基。
按照说明称量所需培养基，倒入三角瓶中，加入自来水并加热至完全溶解（注意加热后要补足水）。
在操作过程中注意不要沾污三角瓶瓶口。
在加热过程中要用玻棒不断搅拌，以防糊底烧焦。
（2）生理盐水的配制：称量9gNaCl于100mL水中，搅拌至完全溶解。
2、灭菌前包扎（1）培养基的包扎：培养基装于三角瓶中，制作棉塞于瓶口中，再包上双层报纸，用棉绳扎好。
（2）生理盐水的包扎：把90mL生理盐水分装于三角瓶中，如包扎如培养基包扎。
把9mL生理盐水分装于试管中，并包扎好。
（3）移液管的包扎：将报纸裁成约5cm左右的长纸条，把尖端放纸条的一端，约成45度角，通过折叠、搓转用纸条抱紧移液管，剩余纸条折叠打结。
（4）培养皿的包扎：用报纸将6套培养皿包成一包。
3、灭菌（1）干热灭菌：把包扎好的移液管、培养皿放入烘箱中，160℃灭菌2h。
（2）湿热灭菌：把包扎好的培养基、生理盐水放入高压蒸汽灭菌锅内121℃灭菌20min。
4、检样的稀释（1）以无菌操作，将检样10g或10mL放于含有90mL灭菌生理盐水中，经充分震荡做成1:10的均匀稀释液。
化妆品原料菌落总数标准
化妆品原料菌落总数标准一、菌落总数定义与测试方法菌落总数是指化妆品原料或产品中存在的所有微生物菌落的总数。
这些菌落包括细菌、霉菌、酵母菌等。
测试菌落总数的方法主要是通过在一定条件下培养样品，观察菌落的生长和繁殖情况，然后通过计算得出菌落总数。
二、菌落总数标准值根据国际化妆品协会（IFSCC）和我国化妆品卫生规范的相关规定，化妆品原料和产品中的菌落总数应控制在一定的范围内。
一般来说，化妆品原料的菌落总数应小于1000 CFU/g，而化妆品产品的菌落总数应小于10000 CFU/g。
三、菌落总数对化妆品的影响菌落总数过多会导致化妆品变质、腐败，影响其使用效果。
此外，微生物的大量繁殖可能会释放出有害物质，对使用者的皮肤和健康造成危害。
因此，控制菌落总数对于保证化妆品的质量和安全性至关重要。
四、控制菌落总数的方法控制菌落总数的方法主要包括以下几个方面：1.生产过程中的卫生控制：严格控制生产环境，定期进行清洁和消毒，防止微生物的滋生和繁殖。
2.原料和包装材料的把关：选择经过严格消毒和检验的原料和包装材料，避免微生物的污染。
3.生产工艺的控制：优化生产工艺流程，减少生产过程中微生物的污染。
4.产品储存和运输：确保产品在储存和运输过程中不受污染，特别是在高温、潮湿的环境下更要保持干燥、清洁。
5.使用防腐剂：在产品中添加适量的防腐剂，抑制微生物的生长和繁殖。
五、菌落总数与其他质量指标的关系菌落总数是衡量化妆品质量的重要指标之一，它与其他质量指标如感官指标（色泽、气味、口感等）、理化指标（pH值、粘度、渗透压等）以及化学指标（重金属、有害物质等）密切相关。
当菌落总数超标时，可能会影响产品的感官、理化和化学指标，进而影响产品的质量和安全性。
六、菌落总数与化妆品安全性菌落总数过多会导致化妆品中的微生物繁殖并产生有害物质，从而影响化妆品的安全性。
特别是对于眼部、口腔等敏感部位使用的化妆品，如睫毛膏、唇膏等，需要更加严格地控制菌落总数和其他微生物指标。
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化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定及注解
化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定及注解
中华人民共和国国家标准
化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定 UDC 668：576 .85.07
(GB7918.2－87)
Standard methods of microbiological examination for cosmetics
Standard plate count
细菌总数系指1g或1ml化妆品中所含的活菌，数量。
测定细菌总数可用来判明化妆品被细菌污染的程度，以及生产单位所用的原料、工具设备、工艺流程、操作者的卫生状况，是对化妆品进行卫生学评价的综合依据。
本标准采用标准平板计数法。
1 方法提要
化妆品中污染的细菌种类不同，每种细菌都有它一定的生理物质性，培养时对营养要求，培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等均有所不同。
在实际工作中，不可能做到满足所有菌的要求，因此所测定的结果，只包括在本方法所使用的条件下（在卵磷脂、吐温80营养琼脂上，于37℃培养48h)生长的一群嗜中温的需氯及兼性厌氧的细菌总数。
2 培养基和试剂
2.1 生理盐水：见GB 7918-87《化妆品微生物标准检验方法总则》。
2.2 卵磷脂、吐温80-营养琼脂培养基
成分：蛋白胨 20g
牛肉膏 3g
氯化钠 5g
琼脂 15g
卵磷脂 1g
吐温80 7g
蒸馏水 1000ml
制法：先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温80将其他成分(除琼脂外)加到其余蒸馏水中，溶解。
加入已溶解的卵磷脂、吐温80，混匀，调pH值为7.1～7.2，加入琼脂，121℃(15 1b)20min高压灭菌，储存于冷暗处备用。
3 仪器
3.1 锥形烧瓶。
3.2 量筒。
3.3 pH计或精密pH试纸。
3.4 高压消毒锅。
3.5 试管。
3.6 灭菌平皿：直径9cm。
3.7 灭菌刻度吸管：10ml、2ml、1ml。
3.8 酒精灯。
3.9 恒温培养箱。
3.10 放大镜。
4 操作步骤
4.1 用灭菌吸管吸取1:10稀释的检样2ml，分别注入到两个灭菌平甲内，每皿1ml。
另取1ml 注入到9ml灭菌生理盐水试管中(注意勿使吸管接触液面)，更换一支吸管，并充分混匀，使成1:100稀释液。
吸取2ml,分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1ml。
如样品含菌量高，还可再稀释成1:1000，1:10000，······等，每种稀释度应换1支吸管。
4.2 将熔化并冷至45～50℃的卵磷脂、吐温80、营养琼脂培养基倾注平皿内，每皿约15ml，另倾注一个不加样品的灭菌空平皿，作空白对照。
随即转动平皿，使样品与培养基充分混合均匀，待不琼脂凝固后，翻转平皿，置37℃培养箱内培养48h。
5 菌落计数方法
先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5～10倍的放大镜检查，以防遗漏。
记下各平皿的菌落数后。
求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。
若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时，该平皿不宜计数。
若片状菌落不到平皿中的一半，面其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘2，以代表全皿菌落数。
6 菌落计数及报告方法
6.1 首先选取平均菌落数在30～300之间的平皿，作为菌落总数测定的范围。
当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平皿菌落数乘其稀释倍数（见表中例１）。
6.2 若有两个稀释度，其平均菌落数均在30～300个之间，则应求出两者菌落总数之比值来决定。
若其比值小于或等于2应报告其平均数，若大于2则报告其中较小的菌落数(见表中例2及例3)。
6.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300个，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4)。
6.4 若所有稀释度的平均菌落数均少于30个，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报
告之(见表中例5)。
6.5 若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300个之间，其中一个稀释度大于300个，而相邻的另一稀释度小于30个时，则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例6)。
6.6 若所有的稀释度均无菌生长，报告数为每克或每毫升小于10个。
6.7 菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，应以四舍五入法计算。
为了缩短数字后面零的个数，可用10的指数来表示(见下表报告方式栏)。
在报告菌落数为“不可计”时，应注明样品的稀释度。
细菌计数结果及报告方法
附加说明：
本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所归口。
本标准由“化妆品微生物标准检验方法”起草小组起草。
本标准主要起草人周淑玉。
本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所负责解释
注解:
（1）操作注意事项
1）尽量使菌细胞分散开，使每个菌细胞生成一个菌落，否则将会导致重大的技术误差。
2）制成供试液后，应尽快稀释，注皿。
一般稀释后应在1小时内操作完毕。
3）注意抑菌现象。
由于防腐剂未被中和，往往使平板计数结果受影响，如低稀释时菌落少。
而高释释度时菌落数反而增大。
4) 对照试验。
化妆品的稀释液（特别是1:1O的稀释液）常带有化妆品颗粒，有时与菌落很难区分，为了避免与细菌菌落发生混淆，可作一个检样稀释液与琼脂混合的平板，不经培养放到4℃环境中，以便计数检样菌落时用作对照。
另一种防止化妆品颗粒与菌落混淆的方法是培养基中加TTC
（2）细菌总数其他测定法
1) 改良的细菌总数测定法一TTC法
化妆品一般由多种物质混合而成，在进行细菌测定前虽然经过处理，但有时还会存在极难溶解的颗粒,特别是粉类化妆品和某些膏霜类化妆品。
化妆品在前处理时有气泡产生，颗粒和气泡容易与细菌菌落相混，影响计数的准确性。
方法：在已熔化的卵磷脂吐-80营养琼脂中，按100ml加入1m1 0.5％的氯化三苯四氮唑（2,3,5 triphenyi terazoloride ，TTC）水溶液之量加入，操作方法同标准法。
培养后如系化妆品的颗粒，不见变化，如为细菌，则生成红色菌落。
配好的含TTC培养基，应先用未加TTC的对照，以观察其计数是否有不利影响（TTC在一定浓度下对革兰氏阳性菌有抑制作用）。
TTC溶液要放冷暗处保存，以防受热与光照而发生分解。
TTC溶液在使用前应在水浴中煮沸半小时。
原理：无色的TTC是作为受氢体加入培养基中，如果有细菌存在，培养后在细菌脱氢酶的作用下，TTC便接受氢而成为红色的三苯基甲*（*表示月、牙、牙和日组成的字，因无此字）（fomazan），使菌落呈现红色，其反应式见结构图：
2）平板表面涂布法
将培养基制成平板，经干燥后，于其上滴加检样稀释液0.2ml，用“L’形玻璃棒涂布于整个平板的表面，放置片刻（约10分钟）将平板翻转，放入37℃温箱内培养48小时，取出进行菌落计数，然后乘以5，即为1ml稀释样中的菌落数，再乘以稀释倍数，即得每克（或每毫升）检样所含菌落数。
此法的优点：菌落生长在表面，便于识别和检查其形态，与检样中的颗粒易区别；细菌不必遭受融化琼脂的热力，不致因此而使细菌细胞受到损伤而不生长。
此法缺点：取样量较倾注法少，代表性将受到一定的影响；本来只有0.2ml的量又被“L”棒蘸去部分，使菌落数受影响。
（3）菌落计数及报告注意事项
1）如果稀释度大的平板上菌落数反比稀释度小的平板上菌落数高，有两种可能性：一是检验工作中发生差错；二是受防腐剂影响。
这二种情况均不可用作检样计数报告的依据。
2）如果平板上出现链状菌落，菌落之间没有明显的界限，这是在琼脂与检样混合时，一个细胞块被分散所造成。
一条链作为一个菌落计，如有来源不同的几条链，每条链应作为一个菌落计，不要把链上生长的各个菌落分开来数。
此外，如皿内琼脂凝固后未及时进行培养而遭受昆虫侵入，在昆虫爬过的地方也会出现链状菌落，也不应分开来数。
3）如果所有平板上都菌落密布，不要用多不可计报告，而应在稀释最大的平板上，任意数其中两个平方厘米中的菌落数，除以2求出lcm2内平均菌落数，乘以皿底面积63.6cm2，再乘以其稀释倍数。
以此结果作报告，例如：10-1～10-3稀释度的所有平板上均菌落密布，而在10-3稀释度的平板上任意数两个平方厘米内的菌落数是60个，皿底直径为9cm，则该检样每克（或ml）中“估计”菌落数为：
60÷2×63.6×1000＝1.9×106
63.6是按皿底直径为9cm时计算而得的面积，如所用乎皿底直径不是9cm，应另求面积。
4）鉴于检样中的细菌是以单个、成双、链状或成堆的形式存在，因而在平板上出现的菌落可以来源于细胞块，也可来源于单个细胞，故平板上所得需氧和兼性厌氧的菌落数应以单位重量（g）或容量（ml）的菌落形成单位（Colony formingunits CFU）报告更恰当。