凝固酶阴性葡萄球菌演示文稿
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医学微生物学课件葡萄球菌
严格执行手卫生制度，勤洗手、戴手套，避 免接触感染源。
防护措施
疫苗接种
在实验操作、医疗护理等过程中，采取严格 的防护措施，如穿戴隔离衣、戴口罩等。
针对高发人群接种相关疫苗，提高免疫保护 水平。
控制策略
监测与报告
建立有效的监测和报告机制，及时发现并 上报疑似病例。
环境消毒
对相关场所进行彻底消毒，消除传染源。
人工选择
抗生素滥用和过度使用会加速细菌耐药性的产 生，医院和医生需合理使用抗生素，避免过度 使用。
交叉耐药
一种细菌对一种抗生素产生耐药性后，可能会 对同一类的其他抗生素也产生耐药性。
抗菌治疗原则
早期治疗
01
在感染症状初现时，应尽早开始抗菌治疗，以提高疗效并减少
耐药性的产生。
足量足疗程
02
抗菌治疗需要使用足够的抗生素剂量，并持续足够的治疗时间
万古霉素、替考拉宁等糖肽类抗生素，可用 于治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染。
04
检测与诊断
检测方法
直接涂片检查
通过显微镜直接观察微生物，简单易行，但阳性 检出率低。
分离培养
将样本接种于葡萄球菌特异性的培养基上，通过 培养观察微生物的生长情况，阳性检出率高。
血清学检测
检测血清中的特异性抗体，用于诊断和流行病学 调查。
生物学特性
为需氧或兼性厌氧革兰氏阳性球菌。
大多数菌株在血平板上生长迅速，可形成圆形凸起、 湿润、光滑的菌落。
无芽胞、无鞭毛、不产生色素。
根据凝固酶产生与否，可将葡萄球菌分为凝固酶阳性 和凝固酶阴性两大类。
分类和鉴别
01
根据生化反应和产生凝固酶的能力，可将葡萄球菌分为凝固酶阳性和凝固酶阴 性两大类。
凝固酶阴性葡萄球菌胞外黏质物检测及临床意义的探讨
分 光 比色 法 测 定 判 定 为 （＋ ＋） （＋） 、 、
性有 增强趋 势。研 究认 为， 对临床 分 离的
Ｃ Ｓ进 行 Ｅ Ｓ检 测 ， 为 临床 提 供 菌株 毒 Ｎ Ｓ 可 力 强弱 以及 治 疗 用 药的 参 考依 据 。特 别 在 当前 环境 下 ， 更具 有一 定的 临床 实用价值 。 关键 词
的 情 况 。因 此 ， ｆ 在 以下 的 试 验 中 均 以 我 『 Ｊ 性 ， 株 Ｃ Ｓ 少 检 测 ３次 ， 平 均 Ａ值 每 Ｎ 以 作 为 最 后结 果 。 不 来 源 Ｃ Ｓ分 离 株 的 Ｅ Ｓ检 测 结 Ｎ Ｓ
１０ ０ 林 省 德 惠市 人 民 医院 检 验 科 ３ ３０吉 摘 要 实 验 室 用 定 量 法 ， 一 定 时 期 在
株 ， 阳性 ２ 弱 ７株 和 阴 性 ２ ６株 ） 划 线 ３ 各 只平皿传代后 ， 分别 ｝ ３人 进 行 两 种 方 法 ｝ ｉ
讨
论
大量研究表 明， Ｎ 尤其是表皮葡 萄 ＣＳ 球菌是 引起泌尿 系统感染 、 ｍ症 、 败 创伤 、 手术感染 以及院 内交 叉感 染的重 要病原
分 别 用 强 阳性 （＋ ＋） 弱 阳 性 （＋） 阴 ， 和
果 ，１ 来源不 同的 Ｃ Ｓ 其 Ｅ Ｓ阳性检 ，见 ｆ ｆ Ｎ， Ｓ ｍ率也不同 ， 中以 廊液 、 其 前列腺 和尿 液 分离株 的 Ｅ Ｓ阳性 检 …率 较 高， Ｓ 其他 来 源 的 菌 株 则 相 埘 较 低 。见 表 １ 。
０ ０ ） 见表 ２ ．５ 。
凝 固酶 阳 性 葡 萄 球 菌 胞 外 黏
定 量 法 和 定 性 法 检 测 Ｅ Ｓ的结 果 比 Ｓ
ｄｉ １ ． ９９ ｊ ｉ ｎ １０ —６ ４ ． ０ 】 ｏ：０ ３ ６ ／．ｓ ． ０ ７ ｓ １ｘ２ １．
性有 增强趋 势。研 究认 为， 对临床 分 离的
Ｃ Ｓ进 行 Ｅ Ｓ检 测 ， 为 临床 提 供 菌株 毒 Ｎ Ｓ 可 力 强弱 以及 治 疗 用 药的 参 考依 据 。特 别 在 当前 环境 下 ， 更具 有一 定的 临床 实用价值 。 关键 词
的 情 况 。因 此 ， ｆ 在 以下 的 试 验 中 均 以 我 『 Ｊ 性 ， 株 Ｃ Ｓ 少 检 测 ３次 ， 平 均 Ａ值 每 Ｎ 以 作 为 最 后结 果 。 不 来 源 Ｃ Ｓ分 离 株 的 Ｅ Ｓ检 测 结 Ｎ Ｓ
１０ ０ 林 省 德 惠市 人 民 医院 检 验 科 ３ ３０吉 摘 要 实 验 室 用 定 量 法 ， 一 定 时 期 在
株 ， 阳性 ２ 弱 ７株 和 阴 性 ２ ６株 ） 划 线 ３ 各 只平皿传代后 ， 分别 ｝ ３人 进 行 两 种 方 法 ｝ ｉ
讨
论
大量研究表 明， Ｎ 尤其是表皮葡 萄 ＣＳ 球菌是 引起泌尿 系统感染 、 ｍ症 、 败 创伤 、 手术感染 以及院 内交 叉感 染的重 要病原
分 别 用 强 阳性 （＋ ＋） 弱 阳 性 （＋） 阴 ， 和
果 ，１ 来源不 同的 Ｃ Ｓ 其 Ｅ Ｓ阳性检 ，见 ｆ ｆ Ｎ， Ｓ ｍ率也不同 ， 中以 廊液 、 其 前列腺 和尿 液 分离株 的 Ｅ Ｓ阳性 检 …率 较 高， Ｓ 其他 来 源 的 菌 株 则 相 埘 较 低 。见 表 １ 。
０ ０ ） 见表 ２ ．５ 。
凝 固酶 阳 性 葡 萄 球 菌 胞 外 黏
定 量 法 和 定 性 法 检 测 Ｅ Ｓ的结 果 比 Ｓ
ｄｉ １ ． ９９ ｊ ｉ ｎ １０ —６ ４ ． ０ 】 ｏ：０ ３ ６ ／．ｓ ． ０ ７ ｓ １ｘ２ １．
凝固酶阴性葡萄球菌致病
不同的链球菌
溶血类型 Lancefield分群 改良Lancefield分群
-溶血 -溶血性链球菌
-溶血 -溶血性链球菌
不溶血 -溶血性链球菌
链球菌的溶血类型
-溶血性链球菌
-溶血性链球菌 -溶血性链球菌
链球菌的溶血类型
A群溶血性链球菌 （化脓性链球菌）
-溶血性链球菌 （多糖C）
一、发现与描述 二、基因与结构 三、致病性与临床表现 四、检测与防治
发现与描述
1、发现 2、概述
发现
Mycoplasma 支原体的形态
支原体（电镜）
生殖器支原体
溶脲脲原体
概述
支原体的生物学特性 不同的支原体
生物学特性
无细胞壁 兼性厌氧/厌氧 营养要求高，含10-12%血清培养基 高pH（7.8-8.0） 可以出芽、分枝、丝状体断裂方式繁殖 “荷包蛋”状典型菌落
胆汁溶菌试验
+
—
菊糖发酵试验
+
—
防治
应用肺炎链球菌荚膜多糖疫苗 猩红热患者应隔离 感染可首选青霉素等抗生素 防止链球菌感染后自身免疫病的发生
葡萄球菌属
一、发现与描述 二、基因与结构 三、致病性与临床表现 四、检测与防治
发现与描述
1、发现 2、概述
发现
脓液中的细菌 Staphlococcus（51个种） 葡萄球菌的形态
链球菌的改良 Lancefield 分群
基因与结构
1、细菌基因组 2、细菌结构 3、抗原类型
细菌基因组
细菌基因组
基因长度：1800kb 基因数量：1750 主要致病基因：链球菌溶血素
致热外毒素 透明质酸酶 链激酶 链道酶
细菌结构
凝固酶阴性葡萄球菌致病检测与防治
检测与防治
1、微生物学检查 2、防治
微生物学检查
标本类型：感染局部分泌物
检测方法：分离培养 血清学测定 PCR
防治
肺炎支原体疫苗已应用 泌尿生殖道感染预防参照STD 感染首选四环素、红霉素
放线菌目
一、发现与描述 二、基因与结构 三、致病性与临床表现 四、检测与防治
发现与描述
1、发现 2、概述
化脓性链球菌致病
临床表现：
化脓性疾病：呼吸道化脓性炎症 皮肤、皮下组织化脓性炎症
毒素性疾病：猩红热 自身免疫病：风湿热、风湿性关节炎
风湿性心肌炎、心内膜炎、心包炎 急性肾小球肾炎
肺炎链球菌致病
致病因子：荚膜？ 肺炎链球菌溶血素 IgA1蛋白水解酶
临床表现：大叶性肺炎、支气管炎 、 中耳炎、乳突炎、副鼻窦炎、 脑膜炎、败血症等
胆汁溶菌试验
+
—
菊糖发酵试验
+
—
防治
应用肺炎链球菌荚膜多糖疫苗 猩红热患者应隔离 感染可首选青霉素等抗生素 防止链球菌感染后自身免疫病的发生
葡萄球菌属
一、发现与描述 二、基因与结构 三、致病性与临床表现 四、检测与防治
发现与描述
1、发现 2、概述
发现
脓液中的细菌 Staphlococcus（51个种） 葡萄球菌的形态
链球菌属
一、发现与描述 二、基因与结构 三、致病性与临床表现 四、检测与防治
发现与描述
1、发现 2、概述
发现
丹毒 Streptococcus（90个种） 链球菌的形态
链球菌属
肺炎链球菌
概述
链球菌的生物学特性 不同的链球菌
生物学特性
兼性厌氧 营养要求高，需含血液、血清培养基 血平板上可出现不同溶血现象
凝固酶阴性葡萄球菌分布及耐药变迁
探 讨 凝 固 酶 阴 性 葡 萄 球 菌 （ Ｎ ） 染 分 布 及 其 耐 药 趋 势 与 变 迁 ， ｌ 治 疗 Ｃ Ｓ感 为 临床
Ｃ 感 染 提 供 正 确选 约依 据 。 方 法 收 集 本 院 ２ ０ ～ ２ ０ ＮＳ ０ ｌ ０ ３年 ４ ４株 Ｃ ８ ＮＳ与 ２ ０ ～ ２ ０ ０ ４ ０ ７年 间 ５ ２ ｌ 铢Ｃ ＮＳ进 行 对 比分 析 ， 刚 Ｋ ｒｙＢ ｕｒ 进 行 药 敏 试聆 ， 盐琼 脂 扩 散 法 对 苯 唑 西 林 耐 药 的 菌 株 作 采 ｉ —ａ ｅ 法 ｈ 高 耐 甲氧 西 林 葡 萄 球 菌 （ ＭＲＳ 测 定 ， 临 床 实 验 室 标 准 化 委 员会 （、Ｓ ／ Ｎ Ｃ ） ０ ７年 标 准 判 断 结 ） 按 （ ＩＩ Ｃ Ｉ ２０ Ｌ ｓ 果 。结 果 ９ ６株凝 同酶 阴性 葡 萄 球 菌 中 ， 发 现 万 霉 素 耐药 菌 株 ， 别 对 青 霉 素 、 霉 素 、 唑 青 ９ 未 分 红 苯 霉 素 、 楚ｆ林 克托 维 酸 、 林霉 素 、 阿 ， 玎 克 失孢 唑 啉 、 孢 曲 松 、 孢 毗 肟 等 抗 生 素 耐 药 率 均 大 于 ７ ； 头 头 ｏ 两 组 比较 蓐 异 仃统 计 学 意 义 （Ｊ ０ ０ ） 刈 利 福 平 、 喃 妥 因 、 米 ＿ 星 、 环 素 、 方 新 诺 叫 耐 药率 均 』 ．５ ； ’ 呋 阿 ｝ ÷ 四 复 小 于 ５ ， 异 无统 计 学 意 义 （ ＞ Ｏ ０ ） 结 论 近 ３年 临 床 分 离 的 Ｃ ｏ 芹 Ｐ ．５。 ＮＳ耐 药 谱 与前 ３年 相 比 。 有
ｆｒｍａ ｅ￣ ｔｎ ａｄ ｏ ａ ｔ ｃｏｂａ ｕ ｃｐ ｉｉｌ ｅ ｔ ｇ； ｆｅ ｎ ｈ ｉｆ ｒ ｔ ｎ ｓ ｐ ｌｍｅ ｔ ＣＬＳ ／ ｏ— ｎ （Ｓ ａ ｄ ｒ ｓ ｆｒｎ ｉ ｒ ｉｌｓ ｓ ｅ ｔ ｌｙ ｔｓｉ Ｆｉ ｅ ｔ ｎｏ ｍａｉ ｕ ｐ ｅ ｎ ． ｍｉ ｂｉ ｎ ｔ ｏ Ｉ
血浆凝固酶实验的操作说明
血浆凝固酶实验的操作说明
核心提示：CM304 冻干血浆用于金黄色葡萄球菌血浆凝固酶实验的操作说明
北京陆桥CM304冻干血浆，用于金黄色葡萄球菌血浆凝固酶实验，操作说明如下：
①在Baird-Parker平板上挑取可疑待测单菌落，或将可疑菌接种营养琼脂平板上纯化，转接至含5mlBHI液体培养基的试管中，36±1℃培养18-24h；
②吸取0.5ml无菌水到CM304冻干血浆西林瓶中，摇匀使之溶解均匀，再加入上述新鲜BHI 培养物0.2-0.3ml，混合均匀后放置36±1℃培养。
③间隔每0.5h观察一次结果，直至6h结束，若出现凝固（凝固体积大于原体积一半）即待测菌血浆凝固酶为阳性，否则为阴性。
注意：测试时须同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌株的新鲜肉汤培养物作为对照（建议阳性菌株可选择金黄色葡萄球菌标准菌A TCC6538，阴性菌株可选择表皮葡萄球菌或白色葡萄球菌标准菌）。
我院凝固酶阴性葡萄球菌感染临床分析
ａ ｎ ６ ｔ ｉｓｏ Ｎ ，ｍｏｔＣ Ｓ ｗｅｅＳａ ｈｌ ｏＣＳｅｉｅｍｉｉ ４ ．５ ｍｏ ｇ１ ２ ｓ ａ ｆＣ Ｓ ｒ ｎ ｓ Ｎ ｒ ｔ ｙｏｃ Ｕ ｐｄｒ ｄｓ（ ４ ４ ％）ａｄｓ ￣ｙｏｏＣ ｈｍｏ ｔ ｕ ｐ ｃ ｎ ｔ ｌｃｃ ￣ ｅ ｌ ｉ ｓ ａ ｙｃ （８ ４ ％） Ｔｈ ｓｅｔ ｌ ｒｔ ｏ Ｎ ｄＭＲＣ Ｓｔ ａｃｍｙｉ ｄｎ ｒｆｒ ｔｉ ｅｅ ０ ％ ， ｄｓｓｅｔ ｌｒｔ ２ ．０ ． ｅ ｕｃｐｉ ｅ ａｅ ｆ Ｓａ ｓ ｂ Ｃ ｎ Ｎ ｖ ｏ ｃ ａ ｉｏｕａ ｏ ｗ ｒ １ ０ ａ ｃ ｐｉ ｅ ａ ｏｎ ｎｎ ｔ ｎ ｎ ｎ ｕ ｂ ｅ
［ 键 词］ 凝固酶阴性葡萄球菌； 关 表皮葡萄球菌； 溶血葡萄球菌； 抗药性， 微生物； 抗菌药物 ［ 中图分类号］ Ｐ ７ ． １ ３ ８１ ［ 文献标识码］ Ａ ［ 文章编号］ １７ — ６８２０ ）１ ０５ — ４ ６１ ９３ （０６０ — ０８ ０
Ｃｌ ｉａ ｎ ｌ ｓｓｏ ｏ ｇ ｌ ｓ ｅ ａ ｉｅＳ ａ ｈ ｌｃ ｃ ｕ ｎ ｅ ｔｏ ｎ ａ ｈ ｓ ｉ ｉ ｃ ｌａ ａｙ ｉ ｆｃ ａ ｕ ａ ｅｎ ｇ ｔｖ ｔ ｐ ｙ ｏ ｏ ｃ ｓ ｉ ｆｃ ｉ ｎ ｉ ｏ ｐ － ｎ
ｔ ｆｍｐ ａ ３ ３ ％ ａ ｄ８ ．５ ｒ ｐｃｉ ｌ． ｉ ｒｇｒ ｉａ ｔ ａ ｒｔｒｍｙｉ ａ ｄ１１ ｔ ａｔ ｉ ｉ ｏｒａ ｉ ｗ ｓ ．３ ｎ １２ ％ ｅ ｅｔ ｅ ｗｈｌｄｕ － ｓ ｎ ｔ ｔ ｅｙｈｏ ｃ － ｃ ｍ ｎｉ ｃ ａ ｉ ｎ ８ ｓ ｖｙ ｅ ｓ ｅ ｔ ｒｅｏ ｎｎ ３ａ ａ ｍ ｍｂｌ
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［ 键 词］ 凝固酶阴性葡萄球菌； 关 表皮葡萄球菌； 溶血葡萄球菌； 抗药性， 微生物； 抗菌药物 ［ 中图分类号］ Ｐ ７ ． １ ３ ８１ ［ 文献标识码］ Ａ ［ 文章编号］ １７ — ６８２０ ）１ ０５ — ４ ６１ ９３ （０６０ — ０８ ０
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凝固酶阴性葡萄球菌感染
膜 。生物 被膜 的形 成 分 为 ３个 步 骤 。首先 ， ］ 细胞 通过 如极性 和疏 水性 非 特 异性 力 量 ， 可逆 的方 式黏
附到 留置 的医疗设 备表 面 。其 次 ， 生黏 附素 ， 产 能够 迅速 黏附 于血管 内的导 管 中或 其他设 备 。一旦 稳定
地结 合 ， 胞 接着 会 产 生 细 菌 问 多糖 黏 附素 （ ｏｙ 细 ｐ ｌ—
凝 固酶阴性葡 萄球 菌 （ ＮＳ 首 先 被 Ｐ ｓｅ ｒ Ｃ ） ａｔｕ 和 Ｏｇｔｎ在 １ ８ ｓｏ ８ ０年 鉴定 ¨ ， 最初 命 名 为 白色葡 萄 ］ 并 ］ 球菌 ， 该菌 属因不 产生凝 固酶而 得名 。到 目前 为止 ， 已有超 过 ４ ０余 种 被鉴 定 的凝 固酶 阴性 的葡 萄球 菌
２４ ３
中国感染与化疗杂志 ２ １ ０ ０年 ５月 ２ ０日第 １ ０卷第 ３期 Ｃ ｉ Ｉｆｃ Ｃ ｅ ｔｅ ， ｙ ０ ０ ｏ １ ， ．３ ｈｎＪ ｎｅｔ ｈ ｍｏｈ ｒ Ｍａ ．２ １ ，Ｖ ｌ ０ Ｎｏ
・
综 述
・
凝 固酶 阴性葡 萄球 菌感染
周 树 生 ， 刘 宝
床 医师认 为是 污染 。然而 ， 近年来 Ｃ ＮＳ感 染逐 年增
生物 膜 ， 而形成抗 生 素 耐 药 和躲 避 宿 主 自身 防御 从
பைடு நூலகம்
高且 越 来 越 多 的 被 认 为 可 以 导 致 严 重 的 临 床 感
染ｌ 。本 综述包 括该 病 原 菌感 染 的临床 表 现 ， 行 ＿ ２ ］ 流
的环 境 。细菌 间多 糖 黏 附素 是 由表 皮 葡 萄 球 菌 的
ｉ ＡＤ Ｃ操 纵子 产生 ， ｃ ａ Ｂ 生物 膜 的形 成需 要 一 个有 功 能的 ｉ ｃ ａ基 因 座 （ｃ ｏｕ ）［ 。导 致 感 染 较 难 ｉａ ｌｃ ｓ ６ ］
凝固酶阴性的葡萄球菌ppt课件
2019
-
19
2 、在血琼脂平板上形成较大的菌落，多数致病 菌株能形成β溶血。
溶血现象: α溶血——草绿色溶血，不 完全溶血； β溶血——菌落周围形成明 显的全透明溶血环； γ溶血——不溶血。
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-
20
3 、在普通肉汤中生长 24 小时，呈均匀混浊，管 底有少量沉淀，培养2~3天后可在培养基表面 形成很薄的菌环。 4、大多数致病菌株能耐高浓度 NaCl，即可在含 10~15%NaCl 培养基中生长，故对严重污染 的病料可用却蒲曼琼脂分离细菌。
二、分类
链球菌分类，迄今尚没有统一，多以其溶血性、
生理生化特性和抗原结构等加以分类。
1. 根据链球菌对绵羊红细胞的溶血能力分类 2.根据生理生化特性分类 3.根据抗原结构分类（主要是Lancefield分类 法）
2019
-
40
1、根据链球菌对绵羊红细胞的溶血能力 分为：
（1）α溶血性链球菌：致病力弱，多引起局部化脓性 炎症； （2）β溶血性链球菌：致病力强，常引起人和动物的 各种链球菌病，大部分致病性链球菌属于此类； （3）γ溶血性链球菌：一般不致病。
–白
色sta.
• 2、目前主要按照细胞组成、血浆凝固酶和毒素产 生的不同，将其分为两种：
– 金黄色sta.
–表
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皮sta.
17
三、培养特性
• 葡萄球菌对 营养要求不高 ，在普通培养基上生长
良好， 需氧或兼性厌氧 菌。致病菌株最适生长温 度为37℃，最适pH7.4。
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-
18
1、在普通琼脂平板上24~48小时，形成：光滑、湿 润、隆起的边缘整齐、不透明的圆形菌落，直径 1~2mm，也有的达3~4mm，在有氧环境中可产 生色素，在无氧环境中不产生色素。
凝固酶阴性葡萄球菌感染课件
S. aureus
凝固酶阴性葡萄球菌 40余种 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当球菌 溶血葡萄球菌 路邓葡萄球菌 人葡萄球菌 中间葡萄球菌 耳葡萄球菌 模仿葡萄球菌 头状葡萄球菌
临床不常见 沃氏葡萄球菌 巴氏葡萄球菌 山羊葡萄球菌 孔氏葡萄球菌 木糖葡萄球菌 里昂葡萄球菌 普氏葡萄球菌 施氏葡萄球菌 解糖葡萄球菌
1.老年
2. 幼儿 低体重儿
3. 免疫功能低下者
肿瘤化疗, 艾滋病, 严重疾病, 心血管疾病者
4. 有医疗植入物者
人工关节 人工瓣膜 脑室引流管 血管导管 导尿管 腹膜透析管
5.皮肤粘膜损害
皮肤疾病, 外伤，烧伤 胃肠粘膜损伤
6. 抗菌药物导致菌群失调
凝固酶阴性葡萄球菌所致感染 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
葡萄球菌 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
金黄色葡萄球菌（致病菌） 产生色素 表皮葡萄球菌（条件致病菌）
腐生葡萄球菌 等
凝固酶阳性（致病菌） 产生凝固酶
凝固酶阴性（条件致病菌） CoNS 噬菌体分型 DNA基因型
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
REVIEW
内 容 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
★ 菌种 ★ 致病性与疾病 ★ 诊断与治疗 √
病原学诊断 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 可行性？可靠性？
1. 有标本须培养 2. 反复培养 3. 培养及药敏结果： 仅供参考 4.判定是感染 或是 定植 (不用药)
凝固酶阴性葡萄球菌
9
2、主要试剂 、
材料和方法
培养基： 哥伦比亚琼脂培养基、 培养基： 哥伦比亚琼脂培养基、 刚果红琼脂 培养基、 肉汤增菌液。 培养基、 LB肉汤增菌液。 肉汤增菌液 引物： 引物： SodA引物 引物 （ 5‘-CCITAYICITAYGAYGCIYTIGARCC-3’ 及 5‘-ARRTARTAIGCRTGYTCCCAIACRTC-3’）； ）； icaD引物 引物 （5‘-AGGCAATA TCCAACGGTAA-3’及 及 5‘-GTCACGACCTTTCTTATATT-3’）； ）； 16S rDNA 引物 （5‘-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’及 及 5‘-CCGTCAATTCCATTTRAG TTT-3’）。 ）。
2
研究背景和意义
近年来由于介入性诊疗操作、 近年来由于介入性诊疗操作、免疫抑制剂及广谱抗生素 的广泛使用， 已成为院内感染的重要病原菌， 的广泛使用，CoNS已成为院内感染的重要病原菌，而 已成为院内感染的重要病原菌 且耐药菌株比金黄色葡萄球菌更为多见。 且耐药菌株比金黄色葡萄球菌更为多见。 叶联华等报道人工瓣膜术后心内膜炎中，约有 叶联华等报道人工瓣膜术后心内膜炎中，约有40%50%由凝固酶阴性葡萄球菌引起； 由凝固酶阴性葡萄球菌引起； 由凝固酶阴性葡萄球菌引起 2009年中国 年中国CHINET细菌耐药监测结果 细菌耐药监测结果MRCoNS检 年中国 细菌耐药监测结果 检 出率平均为71.7%,大于 大于MRSA的52.7%。 出率平均为 大于 的 。
4
13
图2.1： 部分样品刚果红试验结果 2.1：
结果和讨论
表2.1: 114例CoNS的菌种组成及刚果红试验结果 菌 种 表皮葡萄球菌 溶血葡萄球菌 人葡萄球菌 木糖葡萄球菌 沃氏葡萄球菌 头状葡萄球菌 中间葡萄球菌 山羊葡萄球菌 缓慢葡萄球菌 合计 例数 47 43 11 3 2 3 1 2 2 114 刚果红试验 所占比例（％） 所占比例（％） 阳性 41.2 37.7 9.65 2.63 1.75 2.63 0.86 1.75 1.75 100 18 3 1 0 0 1 1 0 0 24 刚果红试验 各菌种阳性 率（％） 38.3 6.98 9.09 － － 33.3 100 － －
耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌感染护理
4
长期使用抗生素： 长期使用抗生素 导致耐甲氧西林 凝固酶阴性葡萄 球菌产生耐药性， 容易感染
感染特点
01 耐药性强：对多种抗生素具有 耐药性
02 感染部位广泛：可感染皮肤、 软组织、骨骼、关节等部位
03 感染症状多样：发热、寒战、 皮疹、关节疼痛等
04 感染严重性高：可导致败血症、 脓毒症等严重并发症
治疗方法
抗生素治疗：使用针对耐甲氧西林凝固酶阴 性葡萄球菌的抗生素进行治疗
手术治疗：对于感染严重的患者，可能需要 进行手术治疗
支持治疗：包括补液、营养支持等，以维持 患者的生命体征
预防感染：加强手卫生、隔离措施等，以 减少感染的传播
治疗效果评估
评估指标：体温、 白细胞计数、C
反应蛋白等
治疗周期：一般 需要7-14天
04
指导患者正确使用抗 生素，避免滥用药物
护理效果评估
评估指标：体温、白细胞计 数、C反应蛋白等
Байду номын сангаас
评估方法：定期监测、记录、 分析
评估结果：病情好转、感染 控制、并发症减少
护理措施调整：根据评估结果 调整护理方案，提高护理效果
3
感染预防
预防原则
1
严格执行 手卫生
2
佩戴个人 防护装备
3
隔离感染 患者
耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄 球菌感染护理
刀客特万
目录
01. 感染概述 02. 护理措施 03. 感染预防 04. 感染治疗
1
感染概述
感染定义
耐甲氧西林凝固 酶阴性葡萄球菌 （MRSA）是一 种常见的细菌感 染
01
MRSA感染可能 导致皮肤、肺部、 血液等部位的感 染
凝固酶试验实验报告
1. 掌握凝固酶试验的基本原理和方法。
2. 了解凝固酶在细菌致病性中的作用。
3. 学会使用玻片法和试管法进行凝固酶试验。
二、实验原理凝固酶是一种能够使血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白的酶。
致病性葡萄球菌能产生凝固酶，使血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白，从而使细菌凝集成块，具有抗吞噬作用。
凝固酶试验用于鉴定和鉴别致病性葡萄球菌。
三、实验材料1. 菌种：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌2. 试剂：新鲜兔血浆、0.9%生理盐水3. 器材：接种环、载玻片、小试管（13mm×100mm）、37℃水浴箱、火柴等四、实验方法1. 玻片法（1）取一张洁净载玻片，中央滴加1滴9%氯化钠（生理盐水）溶液。
（2）用接种环挑取待检菌一环，与生理盐水混合，制成浓菌悬液。
（3）若10～20秒内无自凝现象，加入1环新鲜兔血浆，与菌悬液混合。
（4）10秒内观察结果，出现明显细菌凝块为阳性，否则为阴性。
2. 试管法（1）取2支试管，各加入0.5ml新鲜兔血浆。
（2）用接种环挑取3～5个菌落，加入试管中，混匀。
（3）将试管置于37℃水浴箱中，3～4小时后读取结果。
（4）若血浆凝固呈胶冻状，为阳性；若血浆不凝固，继续观察至24小时，若仍不凝固，则为阴性。
1. 玻片法：金黄色葡萄球菌出现明显细菌凝块，表皮葡萄球菌无凝块。
2. 试管法：金黄色葡萄球菌血浆凝固呈胶冻状，表皮葡萄球菌血浆不凝固。
六、实验分析凝固酶试验是一种常用的细菌鉴定方法，通过检测细菌是否产生凝固酶，可以区分致病性葡萄球菌和非致病性葡萄球菌。
在本实验中，金黄色葡萄球菌产生了凝固酶，导致血浆凝固，而表皮葡萄球菌未产生凝固酶，血浆不凝固。
这说明凝固酶试验可以有效地区分这两种葡萄球菌。
七、实验总结通过本次实验，我们掌握了凝固酶试验的基本原理和方法，了解了凝固酶在细菌致病性中的作用。
同时，我们也学会了使用玻片法和试管法进行凝固酶试验，为今后的细菌鉴定工作奠定了基础。
八、注意事项1. 实验过程中应严格无菌操作，防止污染。
凝固酶阴性葡萄球菌感染PPT课件
导管相关性血流感染 Catheter-Associated BSI
单纯性菌血症： (去甲)万古霉素 替考拉宁 利奈唑胺 疗程：拔除导管后 5-7d
复杂性菌血症： 不能拔除导管 疗程 请感染专家会诊 感染性心内膜炎 （见后）
B. 感染性心内膜炎
常见细菌
表皮 溶血（含天然瓣膜） 路邓
分为三组
表皮 溶血
Native or, more commonly, prosthetic valve endocarditis 中枢神经系统引流管感染 Central nervous system shunt infections
葡萄球菌血流感染
★108例小儿血流感染
细菌种类
金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌
epidermidis
, particularly
S.
念珠菌属
Candida species
Catalase NEG
肠球菌
Enterococci S. aureus
Catalase POS
金葡菌
Staphylococcus
导管相关性血流感染 Catheter-Associated BSI ★一份外周血及导管尖同时培养出同一种细菌 ★ 中心静脉导管与外周血培养出同种细菌，而前者出 现阳性快于后者2h, 或前者细菌量多于后者 ★拔出导管指针 A.严重脓毒症 B.化脓性血栓性静脉炎 C.感染性心内膜炎 D.敏感菌感染用药72小时以上无效 E.金葡菌、铜绿假单胞菌、真菌、分枝杆菌感染
40 35 30 25 20 15 10 5 0
科室分布%
4.下尿路
腐生
A
B
C
D
E
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（5‘-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’及 5‘-CCGTCAATTCCATTTRAG TTT-3’）。
3、主要仪器设备
材料和方法
PCR仪：PTC100 PCR仪，美国MJ Research Inc.；
恒压恒流电泳仪、电泳槽：DF-C型，北京东方特力科贸 中心；
凝胶成像系统：GDS8000 ，美国UVP Inc.；
0
－
缓慢葡萄球菌
2
1.75
0
－
合计
114
100
24
结果和讨论
刚果红试验通过培养48h后菌落的颜色变化来反映 CoNS 表达多糖胞间黏附素的情况，进而间接地反映其 致病性。
114例样品中刚果红试验阳性率21.1%，由于CoNS分泌 的PIA在培养过程中可以丢失，使阳性结果偏低；另外， 其方法学本身易于受多种因素影响，比如：蔗糖的浓 度、氯化钠和琼脂的浓度、气体条件等，干扰了实验 结果的正确性，不能满足临床要求。
其中CoNS产生的多糖胞间黏附素（polysacchatide intercellular adhesion，PIA）是细菌生物膜形成聚集阶 段所必需的物质，在感染过程中起重要的作用，是鉴定 其致病性的物质基础。
Heilmann 等发现 ica 操纵子对合成 PIA 以及在细菌形 成成熟的生物膜中起到非常重要的作用。
第二部分 材料和方法
1、研究对象
阴性对照：表皮葡萄球菌ATCC12228，购自中国 药品鉴定所，经基因组测序证明其ica操纵子缺失 ；
阳性对照：表皮葡萄球菌1-97-337，瑞金医院倪语 星教授惠赠，含有完整ica操纵子；
待测样本：自2006年1月至2007年9月，收集我院 临床各科室共114例疑是感染性标本。
结果和讨论
2、ica D基因片段的扩增
ab c d e f g
图2.2 ：部分样品的icaD基因片段的 PCR 扩增结果
研究背景和意义
CoNS 作为皮肤黏膜定植菌，在越来越多的标本中被 分离出来，常常引起临床困惑。其是否能作为感染的 病原菌是临床关心的问题。
有鉴于此，实验室建立对CoNS污染菌和致病菌界定 的方法十分必要，是临床明确诊断和制定合理治疗方 案的重要前提 。
CoNS致病物质
研究背景和意义
在 CoNS 感染的发病过程中，细菌先黏附继而形成难以 清除的生物膜是其最为重要的致病机制 ；
研究背景和意义
2、实验目的
获得CoNS特异的致病性分子标志物； 确立敏感、准确、快速的医院感染相关性
CoNS特异基因诊断方法； 能够准确鉴定致病性与非致病性CoNS。
研究背景和意义
3、临床意义
研究CoNS的生物标志物对该菌在医院获 得性感染中的临床微生物学诊断与鉴定，追 踪传染源，探索其在医院感染中的确切作用 和地位、传播与感染规律，从而对控制传播 途径、建立准确有效的防治措施具有重要实 际意义和经济价值。
核酸/蛋白定量仪：DU640，美国Beckman；
酶标仪：美国雷杜，深圳组装；
ATB Expression：法国bioMérieux Inc；
生物安全柜：BSC-1500Ⅱ B2，济南鑫贝西生物技术有限 公司；
全自动快速微生物培养检测系统：BacT/ALERT 3D 60， 法国bioMérieux Inc；
研究背景和意义
近年来由于介入性诊疗操作、免疫抑制剂及广谱抗生素 的广泛使用，CoNS已成为院内感染的重要病原菌，而 且耐药菌株比金黄色葡萄球菌更为多见。 叶联华等报道人工瓣膜术后心内膜炎中，约有40%50%由凝固酶阴性葡萄球菌引起； 2009年中国CHINET细菌耐药监测结果MRCoNS检 出率平均为71.7%,大于MRSA的52.7%。
凝固酶阴性葡萄球菌演示文稿
第一部分 研究背景和意义
1、立题依据
凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS）广泛存在于人体皮肤、 黏膜等组织表面，常在血液、痰液、尿液、深静脉置 管等各种标本中检出。 文献报道，1995-1996年美国48个医学中心2596份 血标本中， CoNS的分离率达32.2%。 尽管血液等无菌体液培养出CoNS临床意义较大， 但据报道单次血培养CoNS污染的可能性仍高达85%。
研究背景和意义
ica 基因结构
ica 基因座定位于细菌染色体，全长 3.4 kb，包括 icaR 调节 基因及串联存在的 icaA、icaD、icaB 和 icaC 结构基因。 其中，icaADBC 4 个基因构成一个操纵子，可以通过检测 icaADBC 基因来反映ica 操纵子的存在。 icaB 不直接参与胞间黏附素的合成,因为重组icaADC 就能 使细胞积聚； icaA 单独呈现低的N-乙酰葡糖胺转移酶活性； icaC涉及到把不断合成的多糖物质转运至细胞表面； 生物膜的形成要求icaD编码的产物具有最佳活性。 因此,我们选择了icaD 作为本试验的目的基因片段。
菌种
例数
所占比例（％）
刚果红试验 阳性
表皮葡萄球菌
47
41.2
18
溶血葡萄球菌
43
37.7
3
人葡萄球菌
11
9.65
1
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
刚果红试验 各菌种阳性
率（％）
38.3
6.98
9.09
木糖葡萄球菌
3
2.63
0
－
沃氏葡萄球菌
2
1.75
0
－
头状葡萄球菌
3
2.63
1
33.3
中间葡萄球菌
1
0.86
1
100
山羊葡萄球菌
2
1.75
4、实验设计及方法
材料和方法
标本采集 阴、阳性对照
菌种鉴定
PIA检测
PCR扩增
icaD基因 sodA基因 16SrDNA序列
生物膜形成实验 比较分析
DNA测序、 生物信息学分析
确定特征片段
临床验证
第三部分 结果和讨论
1、刚果红试验
4
图2.1： 部分样品刚果红试验结果
结果和讨论
表2.1: 114例CoNS的菌种组成及刚果红试验结果
2、主要试剂
材料和方法
培养基： 哥伦比亚琼脂培养基、 刚果红琼脂 培养基、 LB肉汤增菌液。
引物： SodA引物
（ 5‘-CCITAYICITAYGAYGCIYTIGARCC-3’ 及 5‘-ARRTARTAIGCRTGYTCCCAIACRTC-3’）； icaD引物
（5‘-AGGCAATA TCCAACGGTAA-3’及 5‘-GTCACGACCTTTCTTATATT-3’）； 16S rDNA 引物
3、主要仪器设备
材料和方法
PCR仪：PTC100 PCR仪，美国MJ Research Inc.；
恒压恒流电泳仪、电泳槽：DF-C型，北京东方特力科贸 中心；
凝胶成像系统：GDS8000 ，美国UVP Inc.；
0
－
缓慢葡萄球菌
2
1.75
0
－
合计
114
100
24
结果和讨论
刚果红试验通过培养48h后菌落的颜色变化来反映 CoNS 表达多糖胞间黏附素的情况，进而间接地反映其 致病性。
114例样品中刚果红试验阳性率21.1%，由于CoNS分泌 的PIA在培养过程中可以丢失，使阳性结果偏低；另外， 其方法学本身易于受多种因素影响，比如：蔗糖的浓 度、氯化钠和琼脂的浓度、气体条件等，干扰了实验 结果的正确性，不能满足临床要求。
其中CoNS产生的多糖胞间黏附素（polysacchatide intercellular adhesion，PIA）是细菌生物膜形成聚集阶 段所必需的物质，在感染过程中起重要的作用，是鉴定 其致病性的物质基础。
Heilmann 等发现 ica 操纵子对合成 PIA 以及在细菌形 成成熟的生物膜中起到非常重要的作用。
第二部分 材料和方法
1、研究对象
阴性对照：表皮葡萄球菌ATCC12228，购自中国 药品鉴定所，经基因组测序证明其ica操纵子缺失 ；
阳性对照：表皮葡萄球菌1-97-337，瑞金医院倪语 星教授惠赠，含有完整ica操纵子；
待测样本：自2006年1月至2007年9月，收集我院 临床各科室共114例疑是感染性标本。
结果和讨论
2、ica D基因片段的扩增
ab c d e f g
图2.2 ：部分样品的icaD基因片段的 PCR 扩增结果
研究背景和意义
CoNS 作为皮肤黏膜定植菌，在越来越多的标本中被 分离出来，常常引起临床困惑。其是否能作为感染的 病原菌是临床关心的问题。
有鉴于此，实验室建立对CoNS污染菌和致病菌界定 的方法十分必要，是临床明确诊断和制定合理治疗方 案的重要前提 。
CoNS致病物质
研究背景和意义
在 CoNS 感染的发病过程中，细菌先黏附继而形成难以 清除的生物膜是其最为重要的致病机制 ；
研究背景和意义
2、实验目的
获得CoNS特异的致病性分子标志物； 确立敏感、准确、快速的医院感染相关性
CoNS特异基因诊断方法； 能够准确鉴定致病性与非致病性CoNS。
研究背景和意义
3、临床意义
研究CoNS的生物标志物对该菌在医院获 得性感染中的临床微生物学诊断与鉴定，追 踪传染源，探索其在医院感染中的确切作用 和地位、传播与感染规律，从而对控制传播 途径、建立准确有效的防治措施具有重要实 际意义和经济价值。
核酸/蛋白定量仪：DU640，美国Beckman；
酶标仪：美国雷杜，深圳组装；
ATB Expression：法国bioMérieux Inc；
生物安全柜：BSC-1500Ⅱ B2，济南鑫贝西生物技术有限 公司；
全自动快速微生物培养检测系统：BacT/ALERT 3D 60， 法国bioMérieux Inc；
研究背景和意义
近年来由于介入性诊疗操作、免疫抑制剂及广谱抗生素 的广泛使用，CoNS已成为院内感染的重要病原菌，而 且耐药菌株比金黄色葡萄球菌更为多见。 叶联华等报道人工瓣膜术后心内膜炎中，约有40%50%由凝固酶阴性葡萄球菌引起； 2009年中国CHINET细菌耐药监测结果MRCoNS检 出率平均为71.7%,大于MRSA的52.7%。
凝固酶阴性葡萄球菌演示文稿
第一部分 研究背景和意义
1、立题依据
凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS）广泛存在于人体皮肤、 黏膜等组织表面，常在血液、痰液、尿液、深静脉置 管等各种标本中检出。 文献报道，1995-1996年美国48个医学中心2596份 血标本中， CoNS的分离率达32.2%。 尽管血液等无菌体液培养出CoNS临床意义较大， 但据报道单次血培养CoNS污染的可能性仍高达85%。
研究背景和意义
ica 基因结构
ica 基因座定位于细菌染色体，全长 3.4 kb，包括 icaR 调节 基因及串联存在的 icaA、icaD、icaB 和 icaC 结构基因。 其中，icaADBC 4 个基因构成一个操纵子，可以通过检测 icaADBC 基因来反映ica 操纵子的存在。 icaB 不直接参与胞间黏附素的合成,因为重组icaADC 就能 使细胞积聚； icaA 单独呈现低的N-乙酰葡糖胺转移酶活性； icaC涉及到把不断合成的多糖物质转运至细胞表面； 生物膜的形成要求icaD编码的产物具有最佳活性。 因此,我们选择了icaD 作为本试验的目的基因片段。
菌种
例数
所占比例（％）
刚果红试验 阳性
表皮葡萄球菌
47
41.2
18
溶血葡萄球菌
43
37.7
3
人葡萄球菌
11
9.65
1
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
刚果红试验 各菌种阳性
率（％）
38.3
6.98
9.09
木糖葡萄球菌
3
2.63
0
－
沃氏葡萄球菌
2
1.75
0
－
头状葡萄球菌
3
2.63
1
33.3
中间葡萄球菌
1
0.86
1
100
山羊葡萄球菌
2
1.75
4、实验设计及方法
材料和方法
标本采集 阴、阳性对照
菌种鉴定
PIA检测
PCR扩增
icaD基因 sodA基因 16SrDNA序列
生物膜形成实验 比较分析
DNA测序、 生物信息学分析
确定特征片段
临床验证
第三部分 结果和讨论
1、刚果红试验
4
图2.1： 部分样品刚果红试验结果
结果和讨论
表2.1: 114例CoNS的菌种组成及刚果红试验结果
2、主要试剂
材料和方法
培养基： 哥伦比亚琼脂培养基、 刚果红琼脂 培养基、 LB肉汤增菌液。
引物： SodA引物
（ 5‘-CCITAYICITAYGAYGCIYTIGARCC-3’ 及 5‘-ARRTARTAIGCRTGYTCCCAIACRTC-3’）； icaD引物
（5‘-AGGCAATA TCCAACGGTAA-3’及 5‘-GTCACGACCTTTCTTATATT-3’）； 16S rDNA 引物