凝固酶阴性葡萄球菌.
凝固酶阴性葡萄球菌耐药机制的研究进展
正常部位时 即成为感染性病原菌 ， 尤其对于住 院时间长 、 身体 虚弱 、 免疫力下降的患者 。且用药 时问长容易产生耐药 ， 给治 疗带来 困难 。故 近年 来此 类病 原菌越 来越 引起 临床 上 的重 视 。而且有学者认 为， 患者 问的多重耐 药凝 固酶 阴性葡 萄球
ｌ０ ２
临床肺科 杂 志
２１ ０ ２年 １月 第 ｌ ７卷第 １期
凝 固酶 阴性 葡 萄球 菌 耐药 机 制 的研 究进展
费明明 综述 刘宝 审校
凝固酶阴性葡萄球菌（Ｃ ａｕａｅｎｇｔ ｅｓ ｐｙ ｃｃｕ ， ｐｇｌｓ ｅａｉ ｔ ｈｌ ｏｃｓ ｖ ａ ｏ
Ｃ Ｓ 首 先 被 Ｐ ｓ ｕ 和 Ｏ ｓ ｎ 位 学 者 在 １８ Ｎ） ａｔ ｒ ｅ ｇｔ 两 ｏ ８０年 鉴 定 ， 因不
溶血葡萄球菌都被认为是新 的重要 的医院 内感 染病原体 ， 不 仅导致侵袭性感染 ， 而且 已经成 为 耐苯 唑西林 （ 耐药率 超过 ６ ％） ０ 和多重耐 药 的病 原体 … 。有 研究 表 明 ， 在耐 苯 唑西林 的凝 固酶 阴性葡 萄球 菌 中，５ ７ ％能 测 出含 有 ｍ ｃ 基 因 。 ｅＡ
（ Ｂ ２ ） 导致对 Ｂ 内酰胺类抗生素的耐药。 ＰＰａ， 一
（） ３ 酶的作用 Ｎ ｎｓＳ ｕｅ Ｆ等研究发现 ３ 株表皮葡萄球菌 中有 ２ １ ４株约 占 ７ ． ％都 产生 ｐ 内酰胺酶 ， ７４ 一 产生 的 一 内酰胺 酶 ， 助其分 借 子中的丝氨酸活性 位点 ，与 Ｂ 内酰胺环 结合 并打 开 ｐ 内酰 一 一 胺环 ，导致此类药物失 活。表皮葡萄球菌对 氨基糖苷类药物 耐药 主要是产生 了氨基糖苷类药物的钝化酶所致 ， 而且 氨基 糖苷类药物之 间有交叉耐药性 。 ２ 溶血葡萄球菌 ． 溶 血葡 萄球 菌 （ ｔｐｙｏｏｃｓｈｅ ｏ ｔ ｕ ，Ｈ） 足 一 Ｓａｈｌ ｃｕ ａｍ ｌｉ ｓ Ｓ 也 ｃ ｙｃ 种条件致病菌 ， 它常见于会阴及腹 股沟区的皮肤黏膜 ，・ ． Ｈ感 染 ， 以引起败血症 ， 膜炎及 泌尿系统感 染 ， 可 累及 先天 可 腹 电 性瓣膜性心 内膜炎。近年来 ， 已逐 渐成为 院内除表皮 葡萄 它 球菌之外的第二大导致感 染的凝 固酶 阴性葡萄球菌 。溶血葡
凝固酶阴性葡萄球菌医院感染及耐药性分析
检 测 指 标 ， 其 影 响 因 素 较 多 ， 尿路 感 染 、 经 、 动 、 发 性 但 如 月 运 原 高血压 等 。 血 清 Ｃ ｓＣ是 近 期 发 现 检 测 ＧＦ 较 好 的 指 标 ， 较 早 发 ｙ Ｒ 能 现 肾损 害 （ Ｒ 下 降 ） 且 操 作 简 便 、 复 性 好 、 响 因 素 较 少 。 ＧＦ ， 重 影
Ｃ ｓＣ是 一 种 小 分 子 蛋 白 （ 糖 基 化 的碱 性 蛋 白质 ） 有 以下 特 ｙ 非 ， 点 ： １ 产 生 恒 定 。 由体 内 所 有 有 核 细 胞 产 生 ， 组 织 学 特 异 （） 无
［］ Ｃ ｒｎｋ Ｃ Ｃ ｓ ｔ ａａｉｍ ｆ ｖ ｅｃ ａｅ — ３ ｈｏ ｓｉ Ｍ． ｙｔ ｉ Ｃａｐｒｄ ａｎ ｇ ｏ ｉ ｎｅｂｓｄｌ ｅｄ ａ ｂ ｒｔｒ ｄｃ ｅＪ ． ｌ ｉｅｅ ｖ ２ ０ ，９ ２ ：７ ｏａｏ ｙｍｅｉｉ ［］ Ｃ ｉ Ｂｏ ｈｍ Ｒｅ ，０ ８ ２ （ ） ４ — ｎ－ ｎ
焦堕 医学与临床 ２１ 年 ４ 第 ９ ０２ 月 卷第 ８ Ｉ ｂＭｅ ｌ ， ｐｉ２１ ， ｏ ９Ｎ ． 期 ｄＣｉ Ａ ｒ ０ ２Ｖ １ ， ｏ８ ａ ｎ ｌ ． １３ 试 剂 （ ） ｙ 四 川 迈 克 Ｃ ｓ ． １Ｃ ｓ Ｃ： ｙ Ｃ测 定 试 剂 盒 及 校 准 品 。
肾 脏 是 清 除 Ｃ ｓＣ的 唯 一 器 官 。 ｓＣ可 经 。 球 自由 滤 过 ， ｙ Ｃｙ 肾小
Ｉ ］ 王 宏 儒 ， 国伟 ， 晓 荣 ． 清 胱 抑 素 ｃ在 评 价 慢 性 肾 脏 － ５ 杜 鲍 血
病 患 肾 小 球 滤 过 率 中的 价 值 Ｅ］ 中 国 中 西 医 结 合 肾病 杂 Ｊ．
１５ 统 计 学 处 理 ．
数 据 均 以 ±Ｓ 示 ， 间均 数 比较 采 用 两 独 立 样 本 ｔ 验 ， 表 组 检 以 Ｐ ００ 为差异有统计学意义 。 ＜ ．５
眼内炎临床诊断和治疗
急性眼内炎是医疗急救。治疗的最重要的组成部分是玻璃体 内注射抗生素，以及严重的玻璃体切除术。内源性眼内炎和 外源性真菌性眼内炎应使用全身性抗生素，但对外源性细菌 性眼内炎的作用尚不确定。如果对初始治疗没有反应，可能 需要重复玻璃体内注射抗生素。许多接受及时适当治疗的眼 睛将恢复有用的视力。
• Ronald等为了确定眼内炎的病原体种类和对抗生素敏感性以及25年来的变化 趋势，进行了一项回顾性的、基于实验室分离的眼内炎病原体的连续性研究。
• 诊断：病史，临床表现和特征性的眼底表现。
• 眼内培养标本最好是通过睫状体平坦部玻璃体切除术中获 取，因为很难从抽取的玻璃体液中找到出局灶性的菌丝。 玻璃体切除术后，通常玻璃体腔注射两性霉素B或伏立康 唑。
• 眼科医生应该请传染科医生会诊，对患者进行评估并制定 治疗计划
• 如果疾病没涉及黄斑区，治疗后通常有较好的视力
革兰氏染色的敏感性较差，但特异性和阳性预测值均优异。
玻璃体切割术获得的玻璃体培养比玻璃体穿刺活检更灵敏。
除了血培养和眼标本培养外，一半的患者还有一个额外的感 染灶，最常见的是尿路感染，而感染性心内膜炎则少见。有 12名患者视力改善，最终视力优于20/200，占44％。 良好的视力结果是指大于或等于结果20/200和没有前房积脓。
治疗通常是困难的，通常包括玻璃体切除术、 静脉注射两性霉素B和/或伏立康唑，以及全 身抗真菌治疗。2 / 3的患者会失去有用的视
力。
内源性酵母菌性眼内炎 • 念珠菌感染多见，一般见于经常留置尿管、长期抗生素治
疗或免疫抑制治疗，许多病人也有静脉输入营养液病史、 近期腹部手术史，或者糖尿病病史。
• 最初表现为轻度或中度的眼内感染，和黄白色脉络膜或视 网膜脉络膜病变可以是单个或多个。视网膜下的浸润可以 合并成蘑菇状的白色结节，通过视网膜进入玻璃体腔。
鉴定葡萄球菌的方法
鉴定葡萄球菌的方法葡萄球菌是一种常见的细菌，常常引起各种感染。
因此，准确鉴定葡萄球菌对于临床治疗和疾病控制至关重要。
本文介绍了几种常见的鉴定葡萄球菌的方法。
下面是本店铺为大家精心编写的5篇《鉴定葡萄球菌的方法》，供大家借鉴与参考，希望对大家有所帮助。
《鉴定葡萄球菌的方法》篇1一、生化试验生化试验是鉴定葡萄球菌的一种常用方法。
通过检测葡萄球菌的生化反应，可以初步鉴定其种类。
常见的生化试验包括:1. 葡萄糖发酵试验：葡萄球菌可以发酵葡萄糖，产生酸和气体。
将葡萄球菌接种到含有葡萄糖的培养基上，观察是否产生酸和气体，可以初步鉴定其是否为葡萄球菌。
2. 乳糖发酵试验：葡萄球菌不能发酵乳糖。
将葡萄球菌接种到含有乳糖的培养基上，观察是否产生酸和气体，可以进一步确认其是否为葡萄球菌。
3. 尿酸酶试验：葡萄球菌可以产生尿酸酶，将尿酸分解为尿酸盐和氨。
将葡萄球菌接种到含有尿酸的培养基上，观察是否产生尿酸盐和氨，可以进一步鉴定其种类。
二、药敏试验药敏试验是鉴定葡萄球菌的另一种常用方法。
通过检测葡萄球菌对不同抗生素的敏感性，可以初步鉴定其种类。
常见的药敏试验包括: 1. 盘状药敏试验：将葡萄球菌接种到含有不同抗生素的培养基上，观察葡萄球菌对不同抗生素的敏感性。
2. 纸片药敏试验：将含有不同抗生素的纸片贴在含有葡萄球菌的培养基上，观察葡萄球菌对不同抗生素的敏感性。
三、分子生物学方法近年来，分子生物学方法也被广泛应用于鉴定葡萄球菌。
常见的分子生物学方法包括:1. PCR 法：利用 PCR 技术，检测葡萄球菌的特异性基因，可以快速、准确地鉴定葡萄球菌。
2. 质谱法：利用质谱技术，检测葡萄球菌的蛋白质指纹，可以鉴定其种类。
鉴定葡萄球菌的方法有多种，包括生化试验、药敏试验和分子生物学方法等。
《鉴定葡萄球菌的方法》篇2鉴定葡萄球菌的方法包括直接镜检、分离培养、PCR 方法等。
直接镜检可通过革兰染色镜检，观察菌体形态和排列方式，判断是否为葡萄球菌。
第八章coccus球菌
section 1 staphylococcus 第一节 葡萄球菌属
一、金黄色葡萄球菌（S. aureus） 二、凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）
二、凝固酶阴性葡萄球菌
Coagulase negative staphylococcus, CNS
CNS已成为医源性感染的常见重要病原菌， 耐药菌株日益增多；当机体免疫功能低下或细菌 进入非正常寄居部位时，CNS可引起多种感染， 各类感染中仅次于大肠埃希菌，居病原菌的第 2 位，造成诊治困难，引起临床微生物学工作者关 注。 CNS除表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌外，还 包括溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、头葡萄球菌等 30多种。 泌尿系感染 细菌性心内膜炎 败血症 术后及植入医用器械引起的感染
classification
金黄色葡萄球菌（S. aureus） 腐生葡萄球菌（S. saprophyticus）
1)据色素、生化反应 表皮葡萄球菌（S. epidermidis）
致病性葡萄球菌的鉴别
性状 菌落色素 金黄色葡萄球菌 金黄色 表皮葡萄球菌 白色 腐生葡萄球菌 白色或柠檬色
发酵甘露醇
凝固酶 α溶素
+
+ +
-
-
耐热核酸酶
致病性
+
+
-
-
三种葡萄球菌鉴别的主要性状
主要性状 色素 血浆凝固酶 甘露醇发酵 溶血性 金黄色葡萄球菌 金黄色 ＋（－） ＋ ＋ 表皮/腐生性葡萄球菌 白色/柠檬色 － － －
耐热核酸酶活性
磷壁酸核糖醇型 磷壁酸甘油型 蛋白A（SPA） 致病性
＋
＋ － ＋ 强
－
－ ＋ － 无或弱
3.Chemical reaction
凝固酶阴性葡萄球菌致病
不同的链球菌
溶血类型 Lancefield分群 改良Lancefield分群
-溶血 -溶血性链球菌
-溶血 -溶血性链球菌
不溶血 -溶血性链球菌
链球菌的溶血类型
-溶血性链球菌
-溶血性链球菌 -溶血性链球菌
链球菌的溶血类型
A群溶血性链球菌 （化脓性链球菌）
-溶血性链球菌 （多糖C）
一、发现与描述 二、基因与结构 三、致病性与临床表现 四、检测与防治
发现与描述
1、发现 2、概述
发现
Mycoplasma 支原体的形态
支原体（电镜）
生殖器支原体
溶脲脲原体
概述
支原体的生物学特性 不同的支原体
生物学特性
无细胞壁 兼性厌氧/厌氧 营养要求高，含10-12%血清培养基 高pH（7.8-8.0） 可以出芽、分枝、丝状体断裂方式繁殖 “荷包蛋”状典型菌落
胆汁溶菌试验
+
—
菊糖发酵试验
+
—
防治
应用肺炎链球菌荚膜多糖疫苗 猩红热患者应隔离 感染可首选青霉素等抗生素 防止链球菌感染后自身免疫病的发生
葡萄球菌属
一、发现与描述 二、基因与结构 三、致病性与临床表现 四、检测与防治
发现与描述
1、发现 2、概述
发现
脓液中的细菌 Staphlococcus（51个种） 葡萄球菌的形态
链球菌的改良 Lancefield 分群
基因与结构
1、细菌基因组 2、细菌结构 3、抗原类型
细菌基因组
细菌基因组
基因长度：1800kb 基因数量：1750 主要致病基因：链球菌溶血素
致热外毒素 透明质酸酶 链激酶 链道酶
细菌结构
人体正常菌群表 (1)
念珠菌属
鼻和鼻咽
金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、类白喉杆菌、链球菌属、莫拉菌属、奈瑟菌属、嗜血杆菌属
普雷沃菌属、厌氧球菌、梭菌属
结膜
凝固酶阴性葡萄球菌（表皮葡萄球菌）、草绿色链球菌（少量）、奈瑟菌属（少量）、类白喉杆菌、嗜血杆菌属（少量）
念珠菌属（少量）
参考文献
1.Mathon CR,LehmanDC, Manuselis G .Textbook of Diagnostic Microbiology.5thed.2014.
2.Tille PM . Bailey&Scott’s Diagnostic Microbiology. 13thed .2013.
3.BrooksGF, Carroll KC, Butel JS,et al.Jawetz, Melnick, & Adelberg's Medical Microbiology. 26thed.2012.
4.Murray PR, Rosenthal KS, Pfaller MA.Medical microbiology. 7th ed .2012.
人体各部位常见正常菌群表
解剖部位
微生物需氧菌Biblioteka 厌氧菌真菌皮肤
微球菌属、凝固酶阴性葡萄球菌（表皮葡萄球菌）、金黄色葡萄球菌（少量）、草绿色链球菌、气球菌属、类白喉杆菌、芽孢杆菌属、不动杆菌属、莫拉菌属
梭菌属、丙酸杆菌属（痤疮丙酸杆菌）、消化链球菌属、拟杆菌属
念珠菌属、马拉色霉菌属
口腔和口咽
凝固酶阴性葡萄球菌（表皮葡萄球菌）、金黄色葡萄球菌、链球菌属、肠球菌属、口腔球菌、非致病性奈瑟菌、卡他莫拉菌、类白喉杆菌、艾肯菌属、嗜血杆菌属、肠杆菌科、假单菌属、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌、二氧化碳嗜纤维菌属、弯曲杆菌属、分枝杆菌属、支原体属、密螺旋体属、
血浆凝固酶实验
凝固酶阴性葡 萄球菌
菌血症或败血症 尿路感染 受术或介入疗法 引起的合并感染 创伤感染
皮肤红斑-起皱-水 疱-表皮脱落
毒性休克综合征
儿童、免疫低下的 人、经期妇女
高热、呕吐、腹泻、 皮疹
低血压、休克
假膜性肠炎
知识延伸
• 血浆凝固酶阴性的葡萄球菌
人工关节感染 血管移植物感染 腹膜透析腹膜炎 人工瓣膜心内膜病 女性尿路感染
血浆凝固酶试验
• 什么是血浆凝固酶？
定义：是指能使含有枸橼酸钠或肝素抗凝剂的人或 兔的血浆发生凝固的酶类物质。致病性葡萄球菌 大多能产生凝固酶，非致病性葡萄球菌不产生此 酶。
实验原理：致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶，附着于细菌菌 体表面，促使血浆中纤维蛋白原降解为纤维蛋白，从而使血浆 凝固。
致病菌
• 试验结果应立即判读，放置时间过久会造 成假阳性结果出现。
临床意义-所致疾病
p 化脓性感染
皮肤软组织感染
➢ 疖、痈、毛囊炎、伤 口化脓
内脏器官感染
➢ 心内膜炎、骨髓炎、 脑膜炎
全身感染
➢ 败血症、脓毒血症
毒素性疾病
医院感染
食物中毒
恶心、呕吐、腹泻 不发热
烫伤样皮肤综合征
儿童、免疫低下的 人Βιβλιοθήκη 纤维蛋白原受体 （结合凝固酶）
纤维蛋白原
实验材料
血浆
菌种
酒精灯
玻片 接种环
结果判断
如出现颗粒状凝集现象，即为血浆凝固酶试验阳 性。若没有立即发生凝集，可轻摇玻片加速反应， 仍无凝集现象发生则判断为阴性。
注意事项
• 试验前可用生理盐水检测两种细菌有无自 凝现象，以防假阳性结果出现。
• 取兔血浆和两种细菌时，都要将接种环灼 烧灭菌并待其冷却。
病原性球菌及检验
病原性球菌及检验球菌种类很多，根据革兰氏染色的不同，分为G-、 G+两类球菌。
G+有：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌和微球菌。
G-有：脑膜炎奈瑟氏菌、淋病奈瑟氏菌、卡他布兰汉氏菌等。
对人体致病的球菌称病原性球菌，因能引起机体化脓性炎症，故又称为化脓性球菌。
常见的有葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟氏菌、淋病奈瑟氏菌。
一、葡萄球菌属(一)形态与染色葡萄球菌呈不规则堆集排列，形似葡萄串状，也可见单个、成对或短链排列。
为G+性球菌，直径0.5-1.5um，（致病性葡萄球菌菌体较非致病性葡萄球菌菌体小）无芽胞，无鞭毛、无荚膜；无动力。
(二)分类 1965年按血浆凝固酶分为：血浆凝固酶阴性葡萄球菌，血浆凝固酶阳性葡萄球菌。
1.血浆凝固酶阴性葡萄球菌包括：表皮、腐生葡萄球菌。
2.血浆凝固酶阳性葡萄球菌包括：金黄色、中间型、家畜葡萄球菌。
(三)抗原本菌水解后，用沉淀法可获两种抗原即蛋白抗原和多糖抗原。
1.蛋白抗原：是一种表面抗原，为完全抗原；有种特异性，无型特异性。
存在葡萄球菌细胞壁的表面，结合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白。
2.多糖抗原：是半抗原，存在于细胞壁上，是金黄色葡萄球菌的重要抗原。
有型特异性，分A、B、C三型。
(四)标本接种1.脓汁、尿道分泌物、脑脊液沉淀物，通常直接接种在血琼脂上，经37℃24-48h培养，可见直径2-3mm，产生不同色素的菌落。
2.粪便、呕吐物应接种卵黄高盐、高盐甘露醇琼脂平板上，经37℃24-48h培养可形成细小菌落，48h后形成典型菌落。
3.疑为败血症者，抽取静脉血5ml，注入50ml葡萄糖肉汤培养基中。
(五)培养特性需氧或兼性厌氧，对营养要求不高。
在20%CO2环境中，有利于毒力产生。
最适温度37℃，最适PH7.4。
DNA中G+C含量：30-39%。
1.在普通琼脂平板上，经37℃、24-48h培养，可形成圆形，凸起、边缘整齐、表面光滑、湿润、有光泽、不透明、脂溶性色素的菌落，直径一般为1-2mm，但大者也有4-5 mm的菌落。
凝固酶阴性葡萄球菌感染
膜 。生物 被膜 的形 成 分 为 ３个 步 骤 。首先 ， ］ 细胞 通过 如极性 和疏 水性 非 特 异性 力 量 ， 可逆 的方 式黏
附到 留置 的医疗设 备表 面 。其 次 ， 生黏 附素 ， 产 能够 迅速 黏附 于血管 内的导 管 中或 其他设 备 。一旦 稳定
地结 合 ， 胞 接着 会 产 生 细 菌 问 多糖 黏 附素 （ ｏｙ 细 ｐ ｌ—
凝 固酶阴性葡 萄球 菌 （ ＮＳ 首 先 被 Ｐ ｓｅ ｒ Ｃ ） ａｔｕ 和 Ｏｇｔｎ在 １ ８ ｓｏ ８ ０年 鉴定 ¨ ， 最初 命 名 为 白色葡 萄 ］ 并 ］ 球菌 ， 该菌 属因不 产生凝 固酶而 得名 。到 目前 为止 ， 已有超 过 ４ ０余 种 被鉴 定 的凝 固酶 阴性 的葡 萄球 菌
２４ ３
中国感染与化疗杂志 ２ １ ０ ０年 ５月 ２ ０日第 １ ０卷第 ３期 Ｃ ｉ Ｉｆｃ Ｃ ｅ ｔｅ ， ｙ ０ ０ ｏ １ ， ．３ ｈｎＪ ｎｅｔ ｈ ｍｏｈ ｒ Ｍａ ．２ １ ，Ｖ ｌ ０ Ｎｏ
・
综 述
・
凝 固酶 阴性葡 萄球 菌感染
周 树 生 ， 刘 宝
床 医师认 为是 污染 。然而 ， 近年来 Ｃ ＮＳ感 染逐 年增
生物 膜 ， 而形成抗 生 素 耐 药 和躲 避 宿 主 自身 防御 从
பைடு நூலகம்
高且 越 来 越 多 的 被 认 为 可 以 导 致 严 重 的 临 床 感
染ｌ 。本 综述包 括该 病 原 菌感 染 的临床 表 现 ， 行 ＿ ２ ］ 流
的环 境 。细菌 间多 糖 黏 附素 是 由表 皮 葡 萄 球 菌 的
ｉ ＡＤ Ｃ操 纵子 产生 ， ｃ ａ Ｂ 生物 膜 的形 成需 要 一 个有 功 能的 ｉ ｃ ａ基 因 座 （ｃ ｏｕ ）［ 。导 致 感 染 较 难 ｉａ ｌｃ ｓ ６ ］
《医学微生物学》临床常见病原菌的培养与鉴定
《医学微生物学》临床常见病原菌的培养与鉴定病原菌的鉴定是将一个未知菌株按其生物学特征，经过与所有已知菌种进行比较后到一个已知菌种的分析过程。
根据感染特性选择合适的培养基，首先要明确被鉴定菌种已获得纯培养。
然后确定革兰氏染色性、形态，再按科、属、种逐步鉴定下来。
应该利用已具备的条件，尽可能地缩小鉴定范围，这是在作实验设计时必须想到的，要用最小数量的试验方法作出鉴定。
基于鉴定菌的特点，选用合适的鉴定体系，力求方法学简单，反应判断明确，价廉的方法。
血清学鉴定由于操作简便、快速、特异性高，给细菌学鉴定提供了快速诊断方法。
对培养困难的病原菌，可考虑应用基因水平的鉴定技术。
最后还要提示，对检测人员应把知识和经验运用到每一鉴定步骤。
【球菌】球菌主要引起化脓性炎症，故又称化脓性球菌。
包括葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌及淋病奈瑟菌等，根据革兰氏染色可将其分为两类，均无鞭毛和芽孢，少数可形成荚膜。
本实验要求了解化脓性球菌的形态特征及染色性、链球菌溶血素“O”试验；葡萄球菌、链球菌及奈瑟球菌的检验程序和主要的鉴定方法；肺炎链球菌Op—tochin敏感试验。
一、葡萄球菌属葡萄球菌属(Staphylococcus)的细菌常堆聚成葡萄串状。
能引起皮肤粘膜、多种组织器官的化脓性炎症，是最常见的化脓性球菌。
有的菌株还可引起食物中毒、烫伤样皮肤综合征、毒性休克综合征等，又是医院内交叉感染的重要传染源。
近年来，耐药性菌株逐年增多。
临床上首先要与其他革兰氏阳性球菌鉴别，然后再作属内种的鉴定及致病性的检测。
[材料]1．菌种：葡萄球菌培养物。
2．培养基：血琼脂平板，普通琼脂平板，甘露醇发酵管，氧化、发酵(OF)管，甲苯胺蓝核酸琼脂。
3．试剂：兔血浆、3％H2O2、致敏胶乳／红细胞制剂。
4．其他：革兰氏染液、玻片、一次性卡片。
[方法]1．形态学观察：取普通琼脂平板上葡萄球菌培养物少许，涂片，革兰氏染色，镜检。
可见到葡萄状排列的革兰氏阳性球菌。
凝固酶阴性葡萄球菌脓毒症的健康宣教
临床表现
01
发热：体温升高，可能伴 有寒战
02
皮疹：皮肤出现红斑、丘 疹或水疱
03
关节疼痛：关节肿胀、疼 痛，活动受限
04
淋巴结肿大：颈部、腋下、 腹股沟等部位淋巴结肿大
05
呼吸困难：呼吸急促、胸 闷、气短等
06
胃肠道症状：恶心、呕吐、 腹泻等
预防措施
2
保持个人卫生
保持室内空气流通： 定期开窗通风，保
凝固酶阴性葡 萄球菌脓毒症 的健康宣教
x
目录
01. 凝固酶阴性葡萄球菌脓毒症 的基本知识
02. 预防措施 03. 治疗方法 04. 健康教育
凝固酶阴性葡萄
球菌脓毒症的基
本知识
1
病原体特征
1
凝固酶阴性葡萄球菌：一种 革兰氏阴性球菌，属于葡萄
球菌属
2
形态特征：球形或椭圆形， 致病性：可引起皮肤、软组
辅助治疗
心理辅导：缓解患 者焦虑、抑郁等心
理问题
家庭护理：家属参 与护理，提供关爱
和支持
营养支持：提供充 足的营养，增强患
者抵抗力
康复训练：帮助患 者恢复身体机能，
提高生活质量
健康教育
4
提高公众意识
1
宣传途径：通过媒体、网络、讲座等多种 途径进行宣传
2
宣传内容：介绍凝固酶阴性葡萄球菌脓毒 症的症状、预防措施、治疗方法等
持室内空气清新
01
02
03
增强免疫力：保持 良好的生活习惯，
增强身体抵抗力
04
勤洗手：饭前便后、 接触公共物品后及
时洗手
避免接触感染源： 避免与患者密切接 触，减少感染风险
增强免疫力
临床常见病原微生物
临床意义
1. A群链球菌，即化脓链球菌：
• 化脓性感染 ：咽炎、脓皮病、丹毒、 蜂窝织炎、坏死性筋膜炎、链球菌毒性 休克综合症、产褥热、淋巴管炎、肺炎 等各种组织系统的感染
Clinical and Laboratory Standard Institution，2008，M100-s18，Vol 28,No.1
10
MRS耐药特征
• 青霉素类 • 头孢菌素类 • 加β-内酰胺酶抑制剂类的复合剂 • 碳青霉烯类 • 氨曲南 • 大部分菌株对氨基糖苷类，喹诺酮类也表
现为高水平耐药
18
病原学检查要点
1. 标本采集 ：标本2h内送到实验室 • 创伤感染：脓液 • 咽部、鼻腔等病灶的棉拭 • 败血症：血液 • 风湿热：取血清作抗链球菌溶血素O抗体测定 • B群链球菌：采集第35～37周妊娠妇女的阴道分泌
物培养 • 肺炎链球菌：采集痰液、脓液、血液和脑脊液等
2.直接检查：无菌体液离心涂片后，革兰染色镜检 初步报告“找到革兰阳性球菌，呈链排列，疑为 链球菌”
•9、要学生做的事，教职员躬亲共做；要学生学的知识，教职员躬亲共学；要学生守的规则，教职员躬亲共守。2021/8/232021/8/23Monday, August 23, 2021 •10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。2021/8/232021/8/232021/8/238/23/2021 3:02:08 AM •11、只有让学生不把全部时间都用在学习上，而留下许多自由支配的时间，他才能顺利地学习……（这）是教育过程的逻辑。2021/8/232021/8/232021/8/23Aug-2123-Aug-21 •12、要记住，你不仅是教课的教师，也是学生的教育者，生活的导师和道德的引路人。2021/8/232021/8/232021/8/23Monday, August 23, 2021
血培养中凝固酶阴性葡萄球菌的感染情况和耐药性分析
血培养中凝固酶阴性葡萄球菌的感染情况和耐药性分析
袁红萍;张霞军;周文俊
【期刊名称】《中外妇儿健康：医学版》
【年(卷),期】2011(019)006
【摘要】目的：了解凝固酶阴性的葡萄球菌在血培养中的感染特点和耐药性。
方法：应用BacT/ALERT3D进行培养,药敏实验采用K-B纸片扩散法。
结果：5172例血培养标本检出病原菌494株,凝固酶阴性葡萄球菌203株,占41.09%;凝固酶阴性葡萄球菌对阿奇霉素、罗红霉素、复方新诺明的耐药率较高,对克林霉素、庆大霉素、阿米卡星、二甲胺四环素、环丙沙星的耐药率较低,未发现万古霉素耐药株,MRCNS的检出率为76.84%。
结论：凝固酶阴性葡萄球菌在血液感染中占主导地位;监测其耐药性为临床合理用药提供有力依据。
【总页数】1页(P12-12)
【作者】袁红萍;张霞军;周文俊
【作者单位】江苏省丹阳市人民医院检验科,212300
【正文语种】中文
【中图分类】R446.5
【相关文献】
1.血培养分离的61株凝固酶阴性葡萄球菌的耐药性分析 [J], 杨秀燕;李秀;徐雪松
2.肿瘤病人血培养80株凝固酶阴性葡萄球菌的耐药性分析 [J], 庞载元;张婷
3.儿童血培养凝固酶阴性葡萄球菌的分布及耐药性分析 [J], 吴端宗;傅清流;雷莹;
林建生;周凤华
4.新生儿血培养分离的凝固酶阴性葡萄球菌细菌谱及其耐药性分析 [J], 陈淑珍;柳锡永
5.新生儿血培养耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的鉴定及耐药性分析 [J], 林素挺;林雪峰;周文斐
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凝固酶阳性的葡萄球菌可分为金黄色葡萄球菌
凝固酶阳性的葡萄球菌可分为金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌和家畜葡萄球菌。
因此凝固酶试验阳性者不能定为金黄色葡萄球菌，必须再进行有关生化试验如耐热DNA酶、β-半乳糖苷酶，方可正确鉴定。
中间型葡萄球菌一、病原学食物中毒的细菌病原众多,可按其致病机制分成三类:①细菌污染食品并在其内繁...凝固酶阳性的葡萄球菌常为金黄色葡萄球菌，但一些中间葡萄球菌及猪葡萄球菌亦产生此酶。
所有其他葡萄球菌均为凝固酶阴性，其中最主要的是表皮葡萄球菌及腐生葡萄 ...引发奶牛乳房炎的病菌有哪些？全球品牌畜牧网2014-09-18来源：互联网浏览次数：769次评论:（0）字号：【大中小】在奶牛生活环境中分布着各种各样的的微生物，大多数乳房炎是由链球菌属和大肠菌群引起的，现将乳房炎的病原菌分为以下几类介绍：（一）传染性微生物1、金黄色葡萄球菌葡萄球菌属于微球菌科，葡萄球菌属，为革兰氏阳性球菌。
本属细菌分布于自然界及动物的饲料及环境中，也存在人和动物的皮肤黏膜。
大部分是不致病的腐生寄生菌，仅少数了引起人和动物的局部炎症感染，甚至发生败血症。
能引起奶牛、羊及其他动物乳房炎的葡萄球菌有金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、猪葡萄球菌、中间葡萄球菌、腐生葡萄球菌、溶血葡萄球菌等。
其中金黄色葡萄球菌是主要致病菌，其余为凝固酶阴性葡萄球菌，它们是牛体的常在菌群。
2、无乳链球菌和停乳链球菌链球菌种类很多，广泛存在于自然界。
常分布在水、乳、尘埃、动物植物的表面、呼吸道、消化道以及泌尿生殖道黏膜。
由链球菌所致的奶牛传染性乳房炎，只要是无乳链球菌，该菌常通过挤乳或用具传播而引发乳房炎。
停乳链球菌一般归为环境链球菌类。
3、支原体支原体又称霉形体，是目前发现的最小、最简单的细胞，也是唯一一种没有细胞壁的原核细胞。
（二）环境性微生物环境性微生物包括环境性链球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌、沙雷氏菌、变形杆菌及绿脓杆菌等。
通常为非传染性的条件致病菌。
凝固酶阴性葡萄球培菌在血培养中的临床价值分析
为９ ５ ． ７ ％，造 成这些差 异可 能与操 作 医师技术 、选取 的研 究对
象、 仪 器生产厂家等因素有关 ， 有待进行研究 。研究结 果也显示 ， 观察 组破裂 型和未破 裂型诊 断准确率 均明显 高于对 照组 ，国内 研究 文献也 报道 ，腹部 超声和 阴道超声对 破裂 型和未破 裂型 的 诊断 准确率结果不相 同，阴道超声诊 断准确率均高 于腹部超声 ， 其 具体造成 的差异 因素 尚未 十分清楚 ，有待进一步研究。 综 上所述 ，采用 阴道彩超联合 腹部彩超对宫外孕 患者诊断 ，
实验室资料 ，总结血培养 中分 离 出 Ｃ Ｎ Ｓ的临床价值 和意义 ，现
报道 如下 ，
１ 资 料 与方 法
１ ． １ 一般资料 选择 自 ２ ０ １ ０年 ３月 一 ２ ０ １ ２年 １ ２月笔 者所 在医 院就诊 接 受
为Ｃ Ｎ Ｓ 。包括 表皮 葡 萄球 菌 、腐 生 葡萄球 菌 、赛 氏葡 萄球 菌 、
药导报 ，２ ０ １ ０ ，１ ６ （ ４ ） ： ３ ２ — ３ ３ ． ［ ３ 】 刘 首红 ． 阴道 Ｂ超在宫外孕 中的应用及诊断分析 ［ Ｊ ］ ． 中国社 区师 （ 医
于 王刚强 ‘ 报 道 的腹 部 Ｂ超诊 断准确率 ８ Ｏ ． ７ ％，可 能与研 究对
象选 择差异 有关 。本研 究 中采 用的阴道彩 超联合 腹部彩 超诊断 准确 率也高 于罗 翠娟报道 的阴道 Ｂ超联合 腹部 Ｂ超诊 断准确率
【 关键词 】 凝同酶阴性 葡萄球菌 ； 血培养 ； 菌血症 ； 血样本污染
中图分类号 Ｒ ５ １ ５ 文献标识码 Ｂ 文章编 号 １ ６ ７ ４ － ６ ８ ０ ５ （ ２ ０ １ ４ ） ２ ４ － ０ ０ ４ ６ － ０ ３
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材料和方法
3、主要仪器设备
PCR仪：PTC100 PCR仪，美国MJ Research Inc.；
恒压恒流电泳仪、电泳槽：DF-C型，北京东方特力科贸 中心；
凝胶成像系统：GDS8000 ，美国UVP Inc.；
核酸/蛋白定量仪：DU640，美国Beckman； 酶标仪：美国雷杜，深圳组装；
2
研究背景和意义
近年来由于介入性诊疗操作、免疫抑制剂及广谱抗生素 的广泛使用，CoNS已成为院内感染的重要病原菌，而 且耐药菌株比金黄色葡萄球菌更为多见。 叶联华等报道人工瓣膜术后心内膜炎中，约有40%50%由凝固酶阴性葡萄球菌引起； 2009年中国CHINET细菌耐药监测结果MRCoNS检 出率平均为71.7%,大于MRSA的52.7%。
凝固酶阴性葡萄球菌
致病性分子标志物的建立与应用
姜ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ娟
中国人民解放军第401医院
1
第一部分 研究背景和意义
1、立题依据
凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS）广泛存在于人体皮肤、 黏膜等组织表面，常在血液、痰液、尿液、深静脉置 管等各种标本中检出。 文献报道，1995-1996年美国48个医学中心2596份 血标本中， CoNS的分离率达32.2%。 尽管血液等无菌体液培养出CoNS临床意义较大， 但据报道单次血培养CoNS污染的可能性仍高达85%。
3
研究背景和意义
CoNS 作为皮肤黏膜定植菌，在越来越多的标本中被 分离出来，常常引起临床困惑。其是否能作为感染的 病原菌是临床关心的问题。 有鉴于此，实验室建立对CoNS污染菌和致病菌界定 的方法十分必要，是临床明确诊断和制定合理治疗方 案的重要前提 。
4
研究背景和意义
CoNS致病物质
在 CoNS 感染的发病过程中，细菌先黏附继而形成难以 清除的生物膜是其最为重要的致病机制 ；
14
结果和讨论
刚果红试验通过培养48h后菌落的颜色变化来反映 CoNS 表达多糖胞间黏附素的情况，进而间接地反映其 致病性。 114例样品中刚果红试验阳性率21.1%，由于CoNS分泌 的PIA在培养过程中可以丢失，使阳性结果偏低；另外， 其方法学本身易于受多种因素影响，比如：蔗糖的浓 度、氯化钠和琼脂的浓度、气体条件等，干扰了实验 结果的正确性，不能满足临床要求。
ATB Expression：法国bioMé rieux Inc；
生物安全柜：BSC-1500Ⅱ B2，济南鑫贝西生物技术有限 公司；
全自动快速微生物培养检测系统：BacT/ALERT 3D 60， 法国bioMé rieux Inc；
11
材料和方法
4、实验设计及方法
标本采集 阴、阳性对照
菌种鉴定
刚果红试验 各菌种阳性 率（％）
38.3 6.98
人葡萄球菌
木糖葡萄球菌 沃氏葡萄球菌 头状葡萄球菌 中间葡萄球菌 山羊葡萄球菌 缓慢葡萄球菌 合计
11
3 2 3 1 2 2 114
9.65
2.63 1.75 2.63 0.86 1.75 1.75 100
1
0 0 1 1 0 0 24
9.09
－ － 33.3 100 － －
因此,我们选择了icaD 作为本试验的目的基因片段。
6
研究背景和意义
2、实验目的
获得CoNS特异的致病性分子标志物；
确立敏感、准确、快速的医院感染相关性 CoNS特异基因诊断方法；
能够准确鉴定致病性与非致病性CoNS。
7
研究背景和意义
3、临床意义
研究CoNS的生物标志物对该菌在医院获 得性感染中的临床微生物学诊断与鉴定，追 踪传染源，探索其在医院感染中的确切作用 和地位、传播与感染规律，从而对控制传播 途径、建立准确有效的防治措施具有重要实 际意义和经济价值。
其中CoNS产生的多糖胞间黏附素（polysacchatide intercellular adhesion，PIA）是细菌生物膜形成聚集阶 段所必需的物质，在感染过程中起重要的作用，是鉴定 其致病性的物质基础。
Heilmann 等发现 ica 操纵子对合成 PIA 以及在细菌形 成成熟的生物膜中起到非常重要的作用。
9
2、主要试剂
材料和方法
培养基： 哥伦比亚琼脂培养基、 刚果红琼脂 培养基、 LB肉汤增菌液。 引物： SodA引物 （ 5‘-CCITAYICITAYGAYGCIYTIGARCC-3’ 及 5‘-ARRTARTAIGCRTGYTCCCAIACRTC-3’）； icaD引物 （5‘-AGGCAATA TCCAACGGTAA-3’及 5‘-GTCACGACCTTTCTTATATT-3’）； 16S rDNA 引物 （5‘-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’及 5‘-CCGTCAATTCCATTTRAG TTT-3’）。
PIA检测
PCR扩增
icaD基因 sodA基因 16SrDNA序列
DNA测序、 生物信息学分析 生物膜形成实验 比较分析 确定特征片段 临床验证
12
1、刚果红试验
第三部分 结果和讨论
4
13
图2.1： 部分样品刚果红试验结果
结果和讨论
表2.1: 114例CoNS的菌种组成及刚果红试验结果
菌 种 表皮葡萄球菌 溶血葡萄球菌 例数 47 43 刚果红试验 所占比例（％） 阳性 41.2 37.7 18 3
5
研究背景和意义
ica 基因结构
ica 基因座定位于细菌染色体，全长 3.4 kb，包括 icaR 调节 基因及串联存在的 icaA、icaD、icaB 和 icaC 结构基因。 其中，icaADBC 4 个基因构成一个操纵子，可以通过检测 icaADBC 基因来反映ica 操纵子的存在。
icaB 不直接参与胞间黏附素的合成,因为重组icaADC 就能 使细胞积聚； icaA 单独呈现低的N-乙酰葡糖胺转移酶活性； icaC涉及到把不断合成的多糖物质转运至细胞表面； 生物膜的形成要求icaD编码的产物具有最佳活性。
8
第二部分 材料和方法
1、研究对象
阴性对照：表皮葡萄球菌ATCC12228，购自中国 药品鉴定所，经基因组测序证明其ica操纵子缺失 ； 阳性对照：表皮葡萄球菌1-97-337，瑞金医院倪语 星教授惠赠，含有完整ica操纵子； 待测样本：自2006年1月至2007年9月，收集我院 临床各科室共114例疑是感染性标本。