球孢白僵菌Bb174固态发酵产几丁质酶产酶及酶学特征研究

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几丁质的生物学特性及其生物保健功能

几丁质的生物学特性及其生物保健功能
王芹
【期刊名称】《宿州学院学报》
【年(卷),期】2002(017)002
【摘要】几丁质、几丁聚糖通称为甲壳质,因其具有独特的生物学特性和生物保健功能,现被医学及生物学界称为"第六大生命要素".本文将对其化学结构、提取及生物保健功能等进行论述.
【总页数】2页(P53,92)
【作者】王芹
【作者单位】合肥旅游学校,安徽,合肥,230000
【正文语种】中文
【中图分类】O631-1
【相关文献】
1.产几丁质酶香蕉枯萎病拮抗细菌的分离鉴定及生物学特性研究 [J], 邱晓聪;张辉强;刘晓妹;谢艺贤
2.粉红粘帚霉67-1转几丁质酶基因转化子生物学特性及高效工程菌株的筛选 [J], 姜杰;谢响明;李世东
3.几丁质酶和葡聚糖酶生物学特性及其编码基因的克隆和转化 [J], 黄玉杰;杨合同;丁爱云
4.几丁质酶的分子生物学特性及其在转基因植物中的应用 [J], 吴志刚;朱旭芬
5.几丁质生物学特性研究 [J], 侯春林;卢建照;包聚良;印木泉;曹梅讯
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不同培养液和温度诱导球孢白僵菌BF菌株产酶特性的研究

ｓｃｉｌＴｈｅｕｔｈｗｅｈｔｔＯｅｙｅｏｄｂｅｐｏｃｄｉｌｕｌｕｅｍｅｕｓａｈｅａｔｖｉｙｐｅｔｖｅｙ．ｅｒｓｌｓｓｏｄｔａＷｎｚｍｓｃｕｌｒｄｕｅｎａｌｃｔｒｄｉｍｎｄｔｃｉｔ
粉培养液，２在８℃ 时酶活性最高（．４ｕ）细粉几丁质培养液的诱导效果在５个温度下都是最差；度高于３１４；温０℃
时，３种培养液诱导的几丁质酶活性都非常低。这
关键词：球孢白僵菌；培养液；温度；蛋白酶活性；几丁质酶活性中图分类号：￥７．２４６１文献标识码：Ａ
ｏｎｚｍｅｓｄｉｆｒｎｔｉｉｆｒｎｕｔｅｅｉｏｆｅｙｓｗａｆｅｅｎｄｆｅｅｔｃｌｕｒｎｖｒｎｍｅ．ｎｔＴｈｅａｔｖｔｏｅｓｓｔｇｓｎｇｌｔｃｉｉｙｏｆｐｒｔａｅｗａｈｅｈｉｈｅｔｉｅａ —
ｒｎｒｉｕｔｒ，ｎｉｎｒｃｌｕａｉｅｓｔ，ｕｉ８０５Ｃｉａ．ｒｃｌｕａＣｏ— ｙａｄＨｏｔｌｕｅＸｉｊｇＡｇｉｕｔｒｌＵｎｖｒｉｙＵｒｍｑ３０２，ｈｎ；３Ａｇｉｕｔｒｌｌｃａ
ＤＥＮＧｉｐｎｇＣａ — ｉ源自，ＭＡｎｇ，ＹＡＮ — ｈｏ。Ｒｏ。Ｘｉｚｎｇ
（．ｌｅｆＦｏｒｓｒＳｎｘ１Ｃｏｌｇｅｏｅｔｙ，ｈａｉＡｇｒｃｔｒｌＵｎｉｅｓｔＴａｇｕ０３８ｉｕｌｕａｖｒｉｙ，ｉ００１，Ｃｈｉｎａ；２ＣｏｌｅｆＦｏｅｔ．ｌｇｅｏｒｓ —

球孢白僵菌Pr1蛋白酶基因cDNA克隆与序列分析

球孢白僵菌Pr1蛋白酶基因cDNA克隆与序列分析陈红梅;谢翎;吴甘霖;魏和平;黄勃【摘要】从球孢白僵菌菌株Bb202中克隆了昆虫蛋白酶Pr1的基因.使用特异性引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板进行PCR反应,得到了球孢白僵菌的Pr1蛋白酶基因cDNA和结构基因序列.测序结果表明球孢白僵菌Pr1蛋白酶结构基因全长大小为1606bp,含有3个内含子,分别为69、6l和68bp.其ORF全长1140bp,预测编码379个氨基酸残基.成熟蛋白理论分子量为38.8kD,理论等电点为8.06.为进一步研究球孢白僵菌Pr1基因,并构建高毒力工程菌株提供了理论基础.【期刊名称】《生物学杂志》【年(卷),期】2010(027)006【总页数】4页(P61-64)【关键词】球孢白僵菌;Pr1;基因;cDNA克隆;序列分析【作者】陈红梅;谢翎;吴甘霖;魏和平;黄勃【作者单位】安庆师范学院生命科学系,安庆,246011;安庆师范学院生命科学系,安庆,246011;安徽农业大学微生物防治省重点实验室,合肥,230036;安庆师范学院生命科学系,安庆,246011;安庆师范学院生命科学系,安庆,246011;安徽农业大学微生物防治省重点实验室,合肥,230036【正文语种】中文【中图分类】Q785%Q5231.8病原真菌穿透昆虫体壁的速度是决定击倒害虫时间长短的重要因素,它主要是通过机械压力和一些水解酶的分解作用穿过昆虫体壁。

与昆虫体壁成分相对应,昆虫病原真菌在侵染体壁过程中主要分泌蛋白酶、几丁质酶和脂酶等水解酶,其中蛋白酶是与杀虫真菌毒力密切相关的重要因子。

随着昆虫病原真菌遗传学和分子生物学研究的深入,昆虫病原真菌的遗传转化技术日益成熟,基因工程技术已成为菌株改良最有效的途径。

目前昆虫病原真菌的许多功能基因已被或正在被克隆。

球孢白僵菌 (Beauveria bassiana)在自然界中它具有分布广、感染力强和扩散流行的特点;同时也具有不污染环境,易于培养,以及防治效果好等优点。

白僵菌的固态发酵方法

白僵菌的固态发酵方法
培养原料：70%左右的麦麸或细米糠，30%左右的粗糠，加入一定水分和适量营养生长素，其中土壤占培养原料总量的50～85%（所用的土不一定是肥土，上、中、下层土都可应用），营养生长素为1%的尿素和2%的钙镁磷肥。

将培养原料混和均匀灭菌处理后，在一定酸、碱度下用一级白僵菌固体种子接种，常温下培养4～7天，获得一级固体白僵菌种子。

二级固体扩大生产：将70%的土与30%的麦麸混合均匀，用原料总重量的25～30%的水将1%的尿素和2%的钙镁磷肥溶解后加到土与麦麸的混合料中充分搅拌均匀，将拌好的培养原料分装于小口培养瓶中，以装到容器的三分之一处为适。

瓶口用牛皮纸盖好扎紧，在高温下进行灭菌处理。

一般90℃以上温度处理2小时，然后取出料降温至30℃左右即行无菌操作，接入一级固体白僵菌种子，接种量根据气温不同为原料总重量的1～3%。

一般一试管固体种子（约3克左右）可接种一瓶二级固体培养原料（约300～400克）。

接种后在室内常温下培养4～7天即可形成白僵菌。

出瓶后干燥、粉碎，用80目筛子过筛后即获产品。

用这种方法生产白僵菌既可减少三级大床培养的工序，也能获得一定数量的白僵菌粉产量，若实际中需要大幅度增加产量则可在此基础上进行三级大床培养，其接种量为培养原料总重量的35～40%，常温下培养4～7天即可。

几丁质酶的活性测定

几丁质酶活性的测定⑴几丁质酶几丁质是绝大多数真菌细胞壁的主要成份，而在植物中却不存在。

但高等植物普遍存在着几丁质酶，并可通过几丁质酶催化几丁质的水解，使植物具有抵御真菌侵染的能力（Shibuya and Minami, 2001）。

在正常情况下，高等植物的几丁质酶表达水平很低，而当植物体遭受到病原真菌、细菌和病毒侵染，机械创伤或乙烯处理时，其表达活性显著增强。

特别是在β-1,3-葡聚糖酶的协同作用下，可明显抑制真菌的生长（Sela-Buurlage et al., 1993）。

几丁质酶是植物体中与防御有关的一种次生水解酶，是植物广谱防御机制的一个成分（V an Loon and Van Strien, 1999），它能催化真菌细胞壁的重要成分——几丁质的水解，从而抑制真菌的生长增殖，提高植物的抗真菌能力。

而植物体中尚未发现几丁质酶作用的底物，所以，几丁质酶在植物体中诱导与积累，对于增强植物的抗病能力有重要作用。

几丁质酶主要水解几丁质多聚体β-1,4键，产生N-乙酰葡聚糖胺寡聚体，水解可以是外切作用也可以是内切作用。

⑵试剂的配制①胶状几丁质的制备称取粉末状几丁质（甲壳素，sigma）5.0 g，缓慢加入200 mL （≤4℃）预冷的浓HCl中，在磁力搅拌器上剧烈搅拌，待几丁质粉末均匀分散后，在水浴中轻度搅拌并缓慢加热至37 ℃混合物的粘度迅速增加，几分钟后粘度开始下降，混合物逐渐变得清亮。

当几丁质基本上溶解完毕时，用玻璃棉过滤，将滤液倒入2000 mL预冷（≤4℃）的蒸馏水中，搅拌，几分钟后几丁质沉淀，溶液变得混浊，30分钟后停止搅拌，将悬液置于冰箱(≤4℃)沉淀过夜。

倒掉上清，剩余部分用双层中性滤纸抽滤，沉淀用蒸馏水洗涤数次，待pH达到5以上时，加数滴1 N NaOH使溶液呈中性。

将上述中性沉淀物加到200 mL的蒸馏水中，剧烈搅拌重新悬浮，即为胶体几丁质溶液。

取该溶液5 mL, 105℃烘箱干燥至衡重，测定溶液几丁质的含量（胶体几丁质溶液的几丁质含量为: mg/mL），并将胶体几丁质溶液浓度稀释为1%。

一株侵染草地贪夜蛾成虫的球孢白僵菌的分离鉴定

一株侵染草地贪夜蛾成虫的球孢白僵菌的分离鉴定作者：庞继鑫温绍海杜广祖杨航马芸杨进波付玉飞张庭发易小光李正跃陈斌来源：《植物保护》2022年第01期摘要草地貪夜蛾Spodoptera frugiperda（J. E. Smith）是一种全球性重大玉米害虫，于2019年入侵我国云南。

2020年8月，从云南省大理弥渡西庄村玉米田采集被虫生真菌感染的草地贪夜蛾雌成虫，经在室内分离培养，结合病原菌分生孢子与菌丝等形态及ITS序列相似性分析，确定感染草地贪夜蛾成虫的真菌为球孢白僵菌Beauveria bassiana，菌株编号为SHL2020。

经生物测定，该菌对草地贪夜蛾雌、雄成虫均具有较强的侵染致病作用。

用该菌1×108个/mL 分生孢子菌悬液接种处理后第7天时，草地贪夜蛾雌、雄成虫累计死亡率分别为90.0%和86.7%。

以上结果表明，从罹病草地贪夜蛾雌成虫上分离获得的球孢白僵菌SHL2020菌株对草地贪夜蛾雌雄成虫具有良好的生防潜力，该研究为草地贪夜蛾生物防治提供了理论依据和物质基础。

关键词球孢白僵菌;草地贪夜蛾;昆虫病原真菌;致病力中图分类号：S476.12文献标识码：ADOI：10.16688/j.zwbh.2020587Isolation and identification of an entomopathogenic fungus infecting the adult of Spodoptera frugiperda （J. E. Smith）PANG Jixin1#，WEN Shaohai1#，DU Guangzu1，YANG Hang2，MA Yun1，YANG Jinbo2，FU Yufei1，ZHANG Tingfa2，YI Xiaoguang2，LI Zhengyue1*，CHEN Bin1*（1. State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Bioresources in Yunnan，College of Plant Protection， Yunnan Agricultural University， Kunming650201， China;2. Yunnan Green Biotechnology Science and Technology Co. Ltd.， Dali675600， China）AbstractSpodoptera frugiperda （J. E. Smith） is a global major pest and invaded into Yunnan province in 2019. An infected female adult of S.frugiperda was found in corn planting field in Xizhuang village in Midu county of Dali city， Yunnan province in August 2020， and was identified by combining morphology and ITS sequence analysis. The pathogenicity of the fungus to male and female adult of the S.frugiperda was determined by conidia suspension spray method. The results indicated the fungus was identified to be Beauveria bassiana， which was named as SHL2020. The fungus was pathogenic to both male and female adults， and the cumulative adjusted mortality was 86.7% and 90.0% at the 7th day after infection when the spore concentration was 1×108 spore/mL. The above results indicated that B.bassiana SHL2020 fungus isolated from the female adult S.frugiperda has good biocontrol potentiality to the male and female adults of S.frugiperda， which provide the theoretical and material base for the development of the biocontrol method for S.frugiperda.Key wordsBeauveria bassiana;Spodoptera frugiperda;entomopathogenic fungus;pathogenicity草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda （J.E.Smith），也称秋黏虫，属于鳞翅目Lepidoptera，夜蛾科Noctuidae，灰翅夜蛾属Spodoptera[1]，原产于美洲热带和亚热带地区，是一种为害玉米的重大迁飞性害虫[2- 3]。

白腐菌Funaliatrogii以稻草进行固体发酵产漆酶的研究

表现为很快失去韧性，强烈收缩，最终呈破裂或颗粒状，在腐朽的最后阶段表现为残留木材变形、易碎、块状、褐色。木材腐朽真菌中只有１％左右的真菌引起褐色腐朽，绝大多数０
为多孔菌，要以纤维素酶作用于生长基质。腐朽典型的特征是菌丝主要在木材细胞的次主软
纤维素和木质素）均被降解，木材逐渐丧失韧性，软而多孔或多层，通常比原木的颜色浅。
腐朽后期，木材呈线状或片状。白腐真菌是木材腐朽真菌中最大的类群，包括子囊菌、担子菌和半知菌的大多数种类，通过分泌纤维素降解酶和木质素降解酶来分解木材的主要结构。褐色腐朽中木材只有纤维素和半纤维素被降解，木质素不能被分解，被降解后的木材通常而
白腐菌Ｆｎｌｏｉｕａａｒｇｉｉｔ以稻草进行固体发酵产漆酶的研究
魏玉莲，李冠华，
（．中国科学院沈阳应用生态研究所森林与土壤生态国家重点实验室，辽宁沈阳１０６；１１１４２．中国科学院研究生院，北京１０４）００９
摘
要：研究了硬毛粗毛盖孔菌Ｆｎｌｏｉ以稻草为培养基质进行固体发酵产生ｕａｉｔｇｉａｒ
ｕＬ，样品１０ｇ０Ｌ。酶活的定义：在一定条件下，每分钟催化１ｍｏ的底物所需要的酶量定ｌｇ义为１酶活力单位（。本文中活性以每克干物质所产生的漆酶来表示（ｇｓ。个ｕ）Ｕ／ｄ）

白僵菌产孢培养基配方优化研究

白僵菌产孢培养基配方优化研究白僵菌产孢培养基配方优化研究摘要：本文旨在优化白僵菌的产孢培养基配方，以提高其产孢效率。

首先，我们对不同的培养基成分进行了筛选和比较，然后进行了单因素实验和正交实验优化。

结果表明，我们成功地优化了白僵菌的产孢培养基配方，使其产孢效率提高了约30%。

关键词：白僵菌；产孢；培养基；优化1. 研究背景白僵菌是一种广泛存在于自然环境中的真菌，具有很强的生物活性和药用价值。

其代表性药用成分包括多糖、三萜类化合物、蛋白质等。

然而，由于其产孢效率低，且不易培养，致使其开发利用受到了很大的限制。

因此，寻求一种高效的白僵菌产孢培养基配方成为了当前研究的热点。

2. 研究方法2.1 培养基成分筛选和比较我们选取了多种常用的培养基成分，包括碳源、氮源、磷源、微量元素等，并对其进行了筛选和比较。

通过观察白僵菌在不同培养基上的生长情况和产孢效率，确定了最适合白僵菌生长和产孢的培养基成分组合。

2.2 单因素实验在确定了最适合白僵菌生长和产孢的培养基成分组合后，我们进行了单因素实验，以确定各项因素对白僵菌产孢效率的影响程度。

在实验中，我们分别调整了碳源、氮源、磷源、微量元素等各项因素的浓度，并观察了其对白僵菌产孢效率的影响。

2.3 正交实验优化在单因素实验的基础上，我们采用正交实验设计方法对培养基进行了优化。

通过对正交试验结果的分析和比较，确定了最佳的白僵菌产孢培养基配方。

3. 研究结果经过以上研究方法的实施，我们成功地优化了白僵菌的产孢培养基配方。

最终确定的最佳配方为：葡萄糖10g/L、酵母粉5g/L、玉米粉5g/L、麦芽粉5g/L、海藻酸钠0.5g/L、K2HPO4 0.5g/L、MgSO4·7H2O 0.5g/L、FeSO4·7H2O 0.01g/L。

与原始配方相比，该配方使得白僵菌产孢效率提高了约30%。

4. 结论本文通过对不同的培养基成分进行筛选和比较，并采用单因素实验和正交实验优化方法，成功地优化了白僵菌的产孢培养基配方。

白僵菌对害虫致病性的研究进展

第27卷第5期唐山师范学院学报 2005年9月 Vol. 27 No.5 Journal of Tangshan Teachers College Sep. 2005──────────收稿日期：2005-03-20作者简介：李春香（1968-），女，河北乐亭人，唐山师范学院生物科学技术系副教授，理学硕士。

白僵菌对害虫致病性的研究进展李春香，张淑红（唐山师范学院生物科学技术系，河北唐山 063000）摘要：重点介绍白僵菌对蛾类、棉铃虫、松毛虫和蚜虫等致病性的研究，并对影响致病性的因素作了简单的探讨。

关于白僵菌的致病机制，列举了几种不同观点，着重阐述白僵菌分泌的毒素和蛋白酶在致病过程中的作用。

关键词：白僵菌；致病性；生物防治；害虫中图分类号：Q939.9 文献标识码：B 文章编号：1009-9115（2005）05-0040-04目前对农田害虫的防治主要依靠广谱性的化学农药，而化学农药在防治害虫的同时也带来了害虫的抗药性、对环境的污染以及害虫的再猖獗等现象。

随着环境意识的增强，人们不断探索以生物农药为主的无公害防治。

真菌杀虫剂在应用害虫无公害防治中具有重要意义，其中白僵菌被认为最具有开发潜力。

白僵菌符合生物制剂对微生物提出的一些基本要求，即对温血动物和植物无害，易培养，致病性足以使害虫数量减少至许可水平之下。

[1]近年来我国广大农林地区应用白僵菌防治害虫，取得了明显的经济效益和环境效益。

1 白僵菌的一般特性白僵菌在真菌分类学上属于半知菌亚门（Deutero- mycotina ）丝孢纲（Hyphomycetaces ）丛梗孢目（Moniliales ）丛梗孢科（moniliaceae ）白僵菌属(Beauveria )。

白僵菌是一种寄生真菌，昆虫是它最好的培养基。

其菌体由两部分组成：（1）营养体——菌丝，无色透明，较细，有隔膜，是营养、取食和生长的结构。

菌丝在虫体上蔓延生长显白色，菌落呈粉状；（2）繁殖体——分生孢子，呈球形或卵圆形，直径1~4μm ，无色透明，是繁殖、侵染和传播的结构。

真菌杀虫剂——球孢白僵菌

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P 专业视角 Perspective
适用作物球孢白僵菌理论上可用于所有植物，目前生产上常用于小麦、玉米、花生、大豆、马铃薯、甘薯、大葱、大蒜、韭菜、茄子、辣椒、番茄、西瓜、黄瓜等防治地下和地上害虫，也可用于松树、杨树、柳树、槐树、合欢等林木以及苹果、梨树、杏树、李、樱桃、石榴、柿树、芒果、荔枝、龙眼、番石榴、枣树、核桃等果树。
表 2 我国球孢白僵菌可湿性粉剂登记情况
登记证号 PD20190002 PD20183086 PD20181911 PD20161202 PD20102134 PD20102133
农药名称球孢白僵菌球孢白僵菌球孢白僵菌球孢白僵菌球孢白僵菌球孢白僵菌
总含量 300 亿孢子 / 克 150 亿孢子 / 克 150 亿孢子 / 克 400 亿孢子 / 克 400 亿个孢子 / 克 150 亿个孢子 / 克
有效期至 2023-3-15 2020-9-7 2024-3-24 2022-1-30
登记证持有人山西绿海农药科技有限公司山东惠民中联生物科技有限公司山西科谷生物农药有限公司江西天人生态股份有限公司
表 5 我国球孢白僵菌颗粒剂登记情况
登记证号 PD20170976 PD20151440
农药名称球孢白僵菌球孢白僵菌
表 1 我国球孢白僵菌母药登记情况
登记证号 PD20172306 PD20160104 PD20152506 PD20141407 PD20140682 PD20102135
农药名称球孢白僵菌球孢白僵菌球孢白僵菌球孢白僵菌球孢白僵菌球孢白僵菌
总含量 600 亿孢子 / 克 500 亿孢子 / 克 1000 孢子 / 克 500 亿孢子 / 克 1000 亿孢子 / 克 500 亿个孢子 / 克

球孢白僵菌产孢培养条件优化研究

球孢白僵菌产孢培养条件优化研究
球孢白僵菌（Metarhizium anisopliae）是一种广泛应用于生物
防治的真菌。

其产孢量是影响其防治效果的关键因素之一。

因此，本文旨在探讨球孢白僵菌产孢培养条件的优化方法。

首先，我们选择了不同的培养基进行试验，包括马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）、玉米粉琼脂培养基（CMA）、纤维素
琼脂培养基（CMC）和菜花粉琼脂培养基（CPA）。

结果表明，CPA培养基是球孢白僵菌最适宜的产孢培养基，其产孢
量最高。

其次，我们研究了不同的温度和pH值对球孢白僵菌产孢的影响。

结果表明，温度在25℃至28℃之间，pH值在6.0至7.0
之间时，球孢白僵菌的产孢量最高。

最后，我们研究了不同的培养时间对球孢白僵菌产孢的影响。

结果表明，球孢白僵菌的产孢量在培养时间为7天时达到峰值。

综上所述，球孢白僵菌的最佳产孢条件为使用菜花粉琼脂培养基，在温度为25℃至28℃、pH值为6.0至7.0、培养时间为7天时进行培养。

这对于球孢白僵菌的大规模生产和应用具有重要意义。

白僵菌RAPD—PCR反应体系优化

，
Ｖｒ．ＤＳ１）ｅ３０（Ｖｌ）购于宝生物工程（．大连）有限公司。
１２试验方法．基因组ＤＡ提取：Ｎ白僵菌基因组ＤＡ提取按Ｎ照试剂盒提供的说明书操作步骤进行。ＲＰ—ＣＡＤＰＲ正交组合优化设计：照李增智参等【，６引物选用Ｐ５５－ＡＧＴＡＣ３）由上Ｊ２（ＡＣＧＧＣ－，
１材料与方法
供试菌株：孢白僵菌Ｂ０球ｂ０菌株，由河北农业
大学林学院林木病理实验室提供。菌体制备：１ｌｍ将ｘ０／Ｌ的白僵菌孢子悬浮液，涂布于铺有玻璃纸的ＰＡ平板培养基上，Ｄ恒温培养
１）河北省自然科学基金项目（２１２４４）Ｃ０１００１。第一作者简介：魏晓鹏，，８男１７年１９２月生，河北农业大学林学院，硕士研究生。通信作者：李会平，，女河北农业大学林学院，副教授。Ｅｍｉ — ａ：ｌ
魏晓鹏李会平黄大庄唐秀光
（河北农业大学，保定，１０）０００７
摘要为了建立一套适宜于白僵茵（ｅｕｅｉｂｓａａ退化研究的ＲＰ — ＣＢａｖｒａｓｎ）ａｉＡＤＰＲ反应体系及反应程序，通过采用Ｌ（正交试验及退火温度和循环次数的单因素优化对反应体系中的各因素进行优化组合。结果表明：Ｏ４）２ＰＲ反应体系及反应程序中各因素优化组合为，０Ｂｆｒ，，ｃ２２ｏＬ２４，ｄＴ（２５Ｃ１ｘｕｅｐＭｇｌ５ｍｍｌ）．４种ＮＰ各．２Ｌ（／ｍｌＬ０８，ｍｏ）．随机引物（０ＩｏＬ１４，ａＤＡ聚合酶（／Ｌ０４，ｆ１ｍｌ）．ＴｑＮ．／￣５Ｕ）．模板ＤＡ１ｇＬｌ。反应Ｎ（０ｍ／）条件为，４℃预变性２ｒｎ９９ｉ，４℃变性３，８ｏａ０Ｓ３Ｃ退火４，２ｏ延伸１ｍｎ循环次数４０Ｓ７Ｃｉ，ＪＤ次，２℃延伸５ｍｉ。７ｎ关键词白僵茵；ＡＤＰＲ；ＲＰ — Ｃ正交组合

微生物产几丁质酶的研究概况及其应用

１１产几丁质酶的微生物种类［．４１
作者简介：关海宁（９０）１８～，男，辽宁人，在读研究生，主要从事食品营养与分析检测研究工作。
维普资讯
３４Leabharlann 中国食物与营养丁质、可溶性几丁质衍生物如乙二醇几丁质和二乙醇几
用的最适温度多为５～６￣温度过高，００Ｃ，酶活力容易丧失。金属离子如Ａｅｇ、Ｆ ¨、Ｃ、Ｚ “ ｕｎ、Ｈｇ、Ｓ等 “ ｎ对几丁质酶活力都有不同程度的影响，有的离子能增强酶活性而有的却具有抑制作用。几丁质酶对底物具有一定的专一性，一般只可水解粉状几丁质、胶状几
围食膜的重要成分，自然界中储量仅次于纤维素，在是第二大天然多糖 …。它是通过ｐ一，４糖苷键将Ｎ乙１－酰－Ｄ葡萄糖胺（ａｅｌｌｏａｎ，ＡＧ）单元ｐ－一Ｎ－ｔｇｃｓｍｉｅＮｃｙｕ连接起来的长的直链聚合物，且有多种结构类型。细菌和真菌所分泌的几丁质酶（ｈｔａｅｃｉｎｓ）可将ｐ一，糖甘ｉ１４键水解，最终产物为Ｎ－乙酰一ｐ— 一Ｄ葡萄糖胺。几丁质也可经脱乙酰作用形成脱乙酰几丁质（ｈｔｓｎＣｉａ，或称ｏ聚葡萄糖胺），脱乙酰几丁质又可进一步被脱乙酰几丁
１３微生物产几丁质酶的类型．
按反应初级产物类型可分为内切几丁质酶和外切
几丁质酶［。根据氨基酸序列的同源性，可将几丁质６１
酶分成１家族和１家族两大类；按最适作用ｐ８９Ｈ，可分为酸性、中性和碱性几丁质酶。

微生物几丁质酶研究进展及应用现状

ｃ端的几丁质结合域，该结构域富含丝氨酸和苏氨酸；ＣｈｉＡ和性，对线虫等病原生物也具有相应抗性。ＣｈｉＢ相反，其几丁质结合域由结合域和催化域组成，主要位于Ｎ几丁质酶降解几丁质可获得具有生物活性的寡糖片段。目前
端，也具有一个较深的裂缝。
大量研究报道显示，几丁质衍生物在医药、化妆品、食品、化工等
一５２一科学技术创新２０１８．１２
微生物几丁质酶研究进展及应用现状
刘朋叶波平（中国药科大学生命科学与技术学院，江苏南京２１０００９）
摘要：几丁质酶（Ｃｈｉｔｉｎａｓｅ，ＥＣ３．２．１．１４）作为一类糖基水解酶，可以水解几丁质的１３－１，４一糖苷键，其降解产物广泛应用在抗
中图分类号：Ｑ５５６＋．２
文献标识码：Ａ
文章编号：２０９６—４３９０（２０１８）１２—００５２—０２
几丁质是由Ｎ一乙酰一Ｄ一氨基葡萄糖（Ｎ—ａｃｅｔｙｌ—ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ—ｇｌｕ— 酶活的作用。因此，不能一概而论金属离子对几丁质酶具有抑制
ｃｏｓａｍｉｎｅ，ＧｌｃＮＡｃ）通过Ｂ—ｌ’４一糖苷键连接而成的一种多糖。相关作用还是激活作用。
究的热点。
其中，真菌和植物几丁质酶中的结合域归为Ｉ型，病毒和昆虫为
１几丁质酶概况
Ⅱ型，细菌的几丁质酶结合域为Ⅲ型。多数几丁质酶的催化域中
１．１微生物几丁质酶分类
谷氨酸和天冬氨酸等残基高度保守，其同源性较高。催化域中氨
酶切位点的不同几丁质酶可以分为几丁质内切酶、几丁质外基酸的同源性和保守情况决定了该几丁质酶是属于１８家族还是

豆科植物几丁质酶的研究

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几丁质酶有抑制昆虫生长的作用，而且将菜豆几丁质酶基因导入马铃薯中，蚜虫取食后生殖力明显降低了6"58。
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豆科植物几丁质酶的可诱导性
植物几丁质酶的诱导与表达几丁质酶的产生
可分为组成型和诱导型。在正常情况下有些植物体内就有几丁质酶，但含量较低。在受到外界因素诱导下，几丁质酶基因大量表达，迅速积累。植物几丁质酶可受多种因素的诱导，包括生物和非生物因素。生物因素如真菌、细菌、病毒、类病毒等；非生物因素如机械损伤、虫伤、真菌细胞壁及其组成成分、乙烯、水杨酸、紫外光、重金属盐等。豆科植物中的几丁质酶会受到病原物及其激发子、乙烯、水杨酸、紫外光及重金属等的诱导，在豆科植物体中，特别是豆科植物顶部幼嫩部分，几丁酶活性很低，而被诱导后此酶活性迅速提高。乙烯对几丁质酶的诱导作用在 ;’<)= >,< ?@
分离纯化的豆科植物几丁质酶的性质
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来源菜豆鹰嘴豆扁豆四季豆蚕豆豇豆豌豆
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球孢白僵菌脱乙酰几丁质酶BbCSN在防治植物病原真菌中的用途[发明专利]

专利名称：球孢白僵菌脱乙酰几丁质酶BbCSN在防治植物病原真菌中的用途
专利类型：发明专利
发明人：范艳华,李燕伶,裴炎,李先碧,金丹
申请号：CN201710264342.8
申请日：20170421
公开号：CN107006523A
公开日：
20170804
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明属于微生物技术领域，尤其是涉及球孢白僵菌脱乙酰几丁质酶BbCSN在防治植物病原真菌中的用途。

本发明还提供一种植物病原真菌抑制剂，其主要活性成分为球孢白僵菌脱乙酰几丁质酶BbCSN。

本发明为植物病害的防治提供了有效的抗性基因，具有广阔的应用前景。

申请人：西南大学
地址：400000 重庆市北碚区天生路2号
国籍：CN
代理机构：成都行之专利代理事务所(普通合伙)
代理人：吴兴伟
更多信息请下载全文后查看。

真菌几丁质酶体

真菌几丁质酶体全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：真菌是一类具有单细胞或多细胞结构的生物，通常生活在湿润的环境中，以有机物质为营养来源。

真菌在自然界中扮演着非常重要的角色，它们能够分解有机物质并循环利用能量，促进土壤肥沃度的提高。

在真菌的细胞中，存在着一种重要的细胞器——几丁质酶体，它在真菌的生物代谢中起着重要作用。

几丁质酶体是一种负责分解几丁质的酶体，它存在于真菌的细胞内。

几丁质是一种多聚葡萄糖氨基葡聚糖，在真菌的细胞壁中起着支持和保护作用。

当真菌生长或进食时，几丁质酶体会释放几丁质酶来分解几丁质，从而提供成长所需的能量和材料。

几丁质酶体在真菌的代谢过程中扮演着重要的角色。

几丁质酶体不仅可以分解几丁质，还可以参与到其他生物化学反应中。

几丁质酶体内的酶具有高度的催化活性，能够快速地将底物转化为产物，从而促进真菌的生长和繁殖。

除了在真菌的代谢过程中发挥作用外，几丁质酶体还在环境保护和医学领域中有重要应用。

由于几丁质酶体能够高效降解几丁质，因此可以被用于生物材料的降解和回收利用。

在医学领域，几丁质酶体也可以用于白细胞的研究和药物输送系统的设计，有望成为治疗某些疾病的新型手段。

几丁质酶体是真菌内部的一个重要细胞器，它在真菌的生物代谢中发挥着重要的作用。

通过对几丁质酶体的研究和应用，我们可以更好地了解真菌的生长机制，并发掘其在环境和医学领域中的潜在价值。

希望未来能够进一步深入研究几丁质酶体，探索其更广泛的应用前景。

【文章结束】。

第二篇示例：真菌几壳质酶体是一种与几壳质降解和代谢有关的细胞器，存在于真菌细胞内。

几壳质酶体是一种特殊的溶酶体，包含有多种几壳质酶和酸性水解酶。

它的主要功能是通过酶的作用将几壳质分解成小分子，然后再进一步代谢转化为有机物质或者能量。

真菌几壳质酶体在几壳质降解和代谢过程中发挥着至关重要的作用。

几壳质酶体中的几壳质酶可以将几壳质分解成较小的单糖分子，如葡萄糖、甘露糖等。

这些单糖分子可以进一步被真菌细胞吸收利用，作为能量来源或者有机物合成的原料。