抗核抗体ANA检测与临床应用PPT课件
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抗核抗体ANA检测与临床应用演示文稿
伴有狼疮肾炎的严重SLE的生物标记物
核均质: 抗核小体抗体(ANuA)
靶抗原: dsDNA-组蛋白-复合物的构象决定簇
方法: IIFA ELISA, Blot
临床意义: SLE, 阳性率 50-95% (特异性100%)
抗核小体 ELISA: 敏感性、特异性、疾病活动度
分组
n
抗核小体阳性
SLE
233
干燥综合症
41
皮肌炎/多肌炎
40
EUROIMMUN
HEp-2细胞: 筛查不同的自身抗体
均质型
核点型
着丝点型
核仁型
Scl-70
Sm/RNP
SS-A/SS-B
核膜型 核糖体P蛋白
AMA
高尔基体
溶酶体
肌动蛋白
波形蛋白
慢性炎症性结缔组织病 (CICTD)
Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) 系统性红ds斑D狼NA疮 (SLE)
正常人
95－100 80－100
100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40
26 5-10
美国风湿学会(ACR)立场声明
• HEp-2 细胞包含大约100 至150 种自身抗原 • 其它初筛方法仅具有少量自身抗原
…大约 35% SLE患者和IFT-ANA阳性患 者在其它初筛实验中为阴性结果…
抗核抗体ANA检测与临床应用演示文稿
抗核抗体（ANA）
检测与临床应用
抗核抗体的定义
传统定义：针对细胞核成分的自身抗体的总称。
广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。对ANA的理 解不再局限于核成分，而是指核酸和核蛋白抗体的总称
核均质: 抗核小体抗体(ANuA)
靶抗原: dsDNA-组蛋白-复合物的构象决定簇
方法: IIFA ELISA, Blot
临床意义: SLE, 阳性率 50-95% (特异性100%)
抗核小体 ELISA: 敏感性、特异性、疾病活动度
分组
n
抗核小体阳性
SLE
233
干燥综合症
41
皮肌炎/多肌炎
40
EUROIMMUN
HEp-2细胞: 筛查不同的自身抗体
均质型
核点型
着丝点型
核仁型
Scl-70
Sm/RNP
SS-A/SS-B
核膜型 核糖体P蛋白
AMA
高尔基体
溶酶体
肌动蛋白
波形蛋白
慢性炎症性结缔组织病 (CICTD)
Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) 系统性红ds斑D狼NA疮 (SLE)
正常人
95－100 80－100
100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40
26 5-10
美国风湿学会(ACR)立场声明
• HEp-2 细胞包含大约100 至150 种自身抗原 • 其它初筛方法仅具有少量自身抗原
…大约 35% SLE患者和IFT-ANA阳性患 者在其它初筛实验中为阴性结果…
抗核抗体ANA检测与临床应用演示文稿
抗核抗体（ANA）
检测与临床应用
抗核抗体的定义
传统定义：针对细胞核成分的自身抗体的总称。
广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。对ANA的理 解不再局限于核成分，而是指核酸和核蛋白抗体的总称
风湿病的常用免疫学检查及临床应用-PPT课件
30
如今最常用于检测RF的方法仍是乳胶凝 集法(IgM型)，RA 患者中阳性率 可达80 ％，如乳胶法RF阴性，临床高疑RA，可 用ELISA测IgG和IgA型RF。 一般抗体滴 度越高，关节外的表现越重，疾病越活 动，预后越差。在5％的正常老人，其它 风湿病、细菌性心内膜炎、结核、肝炎、 肺纤维化等多种疾病中都可出现不同比 例、低滴度的RF阳性（除干燥综合征症 为高 滴度）。此外RF检测是划分血清阴 性关节炎是重要标准。
33
部分分化抗原命名的T、B细胞
分化抗原 分子量
CD1
21/48
CD3
20/20/25
CD4
55
CD8
30/45
CD25 50-55
CD45RO 80
CD19
95
CD21 140
CD22 135
分布及特点 意 义
不成熟T细胞 血液病↑
成熟T细胞
自身免疫病、SLE、RA↑
辅助T细胞
风湿病的常用免疫学检查 及临床应用
1
概述
多数风湿病的发病机制都与免疫失调有 关， 因此检测自身抗体（抗细胞内、细 胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白。）、 补体、 淋巴细胞及其它免疫学成份有助 于许多疾病的诊断、治疗和疗效判断。
对检验结果的判断必须密切结合临床， 并进行综合分析。
2
抗核抗体(ANA）
7
国际以Hep-2作为基质
━━━━━━━━━━━━━━
SLE PSS
━━━━━━━━━━━━━━
HEP-2 95％ 70％
鼠肝 85％ 50％
━━━━━━━━━━━━━━
8
（二）分类
1、ds-DNA检测 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
如今最常用于检测RF的方法仍是乳胶凝 集法(IgM型)，RA 患者中阳性率 可达80 ％，如乳胶法RF阴性，临床高疑RA，可 用ELISA测IgG和IgA型RF。 一般抗体滴 度越高，关节外的表现越重，疾病越活 动，预后越差。在5％的正常老人，其它 风湿病、细菌性心内膜炎、结核、肝炎、 肺纤维化等多种疾病中都可出现不同比 例、低滴度的RF阳性（除干燥综合征症 为高 滴度）。此外RF检测是划分血清阴 性关节炎是重要标准。
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部分分化抗原命名的T、B细胞
分化抗原 分子量
CD1
21/48
CD3
20/20/25
CD4
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CD8
30/45
CD25 50-55
CD45RO 80
CD19
95
CD21 140
CD22 135
分布及特点 意 义
不成熟T细胞 血液病↑
成熟T细胞
自身免疫病、SLE、RA↑
辅助T细胞
风湿病的常用免疫学检查 及临床应用
1
概述
多数风湿病的发病机制都与免疫失调有 关， 因此检测自身抗体（抗细胞内、细 胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白。）、 补体、 淋巴细胞及其它免疫学成份有助 于许多疾病的诊断、治疗和疗效判断。
对检验结果的判断必须密切结合临床， 并进行综合分析。
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抗核抗体(ANA）
7
国际以Hep-2作为基质
━━━━━━━━━━━━━━
SLE PSS
━━━━━━━━━━━━━━
HEP-2 95％ 70％
鼠肝 85％ 50％
━━━━━━━━━━━━━━
8
（二）分类
1、ds-DNA检测 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
抗核抗体检测及临床意义精品PPT课件
❖ 其他结缔组织病：23-30%
如：RA、PBC、SSc等
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抗核小体抗体（ANuA）
核小体是真核细胞染色质的基 本复制单位，由组蛋白与DNA 组成。
参与SLE发病机制： 多克隆B细胞活化剂 产生ANuA，先于其他ANA 促进抗dsDNA与AHA形成 参与LN的发生
31
抗核小体抗体临床意义
❖ SLE标记性/高特异性自身抗体 敏感性：58%-66% （优于抗dsDNA及抗Sm） 特异性：98%-100% （与抗dsDNA相当）
❖ 有助于弥漫性结缔组织病的分类和诊断 抗Sm抗体是SLE的标记抗体； 抗Scl-70抗体是SSc的标记抗体； 抗Jo-1抗体是PM/DM的标记抗体；
❖ 观察疾病活动度和治疗反应 抗dsDNA抗体
❖ 研究发病机理 抗核小体抗体、抗dsDNA抗体
4
❖基本概念 ❖ANA荧光核型 ❖ANAs中的常见抗体
❖ 用于SLE的早期诊断 ANuA 的产生早于抗dsDNA、AHA 抗dsDNA阴性者有1/4～1/2 ANuA阳性
❖ 与LN相关，用于SLE疾病活动性监测
❖ 出现在SSc中
16
核 仁 型 (N)
17
着 丝 点 型(ACA)
❖ 与抗着丝点染色质有关 存在于有丝分裂期
❖ 出现在SSc、CREST综合征等中
18
着 丝 点 型(ACA)
19
胞 浆 型 (C)
❖ 与抗胞浆成分有关 ❖ 抗核糖体P蛋白（rRNP）：出现在SLE中 ❖ 抗合成酶：Jo-1、PL-12、PL-7、OJ、EJ ❖ 抗信号识别颗粒（SRP) ❖ 抗线粒体：出现在PBC中 ❖ 抗高尔基体 ❖ 抗溶酶体 ❖ 等等
风湿免疫性疾病诊断方法
抗核抗体检测和临床意义张瑾培训课件
抗核抗体检测和临床意义张瑾
24
1/19/2021
抗核抗体检测和临床意义张瑾
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1/19/2021
抗核抗体检测和临床意义张瑾
1/19/2021
抗核抗体检测和临床意义张瑾
17
着 丝 点 型(ACA)
1/19/2021
抗核抗体检测和临床意义张瑾
18
胞 浆 型 (C)
❖ 与抗胞浆成分有关 ❖ 抗核糖体P蛋白（rRNP）：出现在SLE中 ❖ 抗合成酶：Jo-1、PL-12、PL-7、OJ、EJ ❖ 抗信号识别颗粒（SRP) ❖ 抗线粒体：出现在PBC中 ❖ 抗高尔基体 ❖ 抗溶酶体 ❖ 等等
❖ 某些核抗原成分在核仁和 胞浆内比核质内更丰富 (如SSA/RO,Jo-1,rRNP等)
1/19/2021
抗核抗体检测和临床意义张瑾
5
ANA检测方法-IIF法
1/19/2021
抗核抗体检测和临床意义张瑾
ANA滴度 ANA核型
6
ANA滴度的意义
❖ 结缔组织病的粗筛（>1:160） ❖ 阳性标本还需进一步识别 ❖ 感染、肿瘤及5%正常人可出现低滴度阳性 ❖ ANA阴性基本可以除外SLE ❖ ANA滴度与疾病活动性无明确相关性
见于 PM/DM
1/19/2021
抗核抗体检测和临床意义张瑾
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胞 浆 型 (C)
1/19/2021
抗核抗体检测和临床意义张瑾
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ANA荧光核型小结
❖ 均质型（H）：像大饼，SLE相关 ❖ 核膜型（M)： 像圈圈，SLE相关 ❖ 斑点型（S）：像藕片，抗ENA ❖ 核仁型（N）：像纽扣，SD相关 ❖ 着丝点型（ACA）：像满天星，抗ACA ❖ 胞浆型（C）：像空心大饼,SLE PM/DM PBC相关 ❖ 混合型：稀释后检测有助于区分
抗核抗体检测与临床应用PPT【42页】
52KD, 60KD。
健康人
17%
抗SSA抗体阳性SLE和SS一级亲属 25%
• 抗SSB抗体： 常与抗 SSA抗体伴随出现
• Ro-52 为线性结构 ，可以非特异的与血 清中蛋白结合
(3)抗核糖体P蛋白抗体
抗原: 核糖体60S 亚基中的3种蛋白质
SLE
10%～40%
SLE的高特异性血清标志抗体，特异性为100％
抗nRNP/Sm和Sm抗体的结果解释
抗nRNP/Sm抗 体
73KD RNP
阴性
60KD
55KD
52KD
阳性 5 2 K D
D
32KD RNP
RNP
sm 2 9 K D
28KD
阳性
RNP 1 7 .5 K D
13.5KD
阴性 CO
阳性
Sm、 U1R N P、 RA、
SSA抗 体 阳 性
SSA抗 体 阳 性
Stinton et al., Lupus 15: 394-400, 2007
(3)抗组蛋白抗体
抗原: 组蛋白H1, H2A, H2B, H3, H4 (主要的靶抗原为H1和H2B)
功能: 核小体的组成结构
临床意义: 药物诱导性LE: 100%
(抗组蛋白抗体是该病唯一的标志性抗体)
SLE:
40% - 80%
抗原：动粒中的4种蛋白：A (17 kDa), B(80 kDa), C(140 kDa), D蛋白(50 kDa)。 着丝点蛋白B为主要的靶抗原
功能: 分裂期纺锤体的附着点
相关疾病: 硬化症: 局限型: (CREST综合征) 原发性胆汁性肝硬化
18% 80% - 95%
10%～20%
抗核抗体基本概念及对应临床疾病概述ppt课件
抗体滴度
临床意义
1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 1:2560
阳性，需结合临床表现综合判断 阳性，提示可能存在相关疾病 明确阳性，提示可能存在相关疾病 中等阳性，提示可能存在相关疾病 强阳性，高度提示存在相关疾病 极强的阳性，高度提示存在相关疾病。
H
14
HHOEBp公-2司细间胞接产免品疫系荧列光法（产举品例系）列
考虑到荧光法筛查试验存在主观性强的特点，因此应 以一种客观和现实的态度去面对筛查试验结果
H
10
几个相对常见且重要的荧光核型
均质型
粗颗粒型
着丝点型
核仁型
核膜型.
核点型
核糖体P蛋白
线粒体型
肌动蛋白
H
常见且重要核型的标准 核型表现相对典型 阳性率相对较高 靶抗原相对明确
11
应重视ANA滴度的检测
抗体滴度的临床意义 1、明确界定自身免疫性疾病患者； 2、作为疾病进程、临床疗效和病情预后及转归等的判断指标
类风湿性关节炎 进行性系统性硬化症 多发性肌炎及皮肌炎
干燥综合征 慢性活动性肝炎
溃疡性结肠炎 其它风湿病 正常人
95－100 80－100 100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40 26 5-10
H
4
ANA实验室检测策略推荐
H
5
ANA间接免疫荧光法筛查实验
40 S 亚基
P1 P1
P0
60 S
亚基
P2 P2
▪相关疾病: SLE: 为SLE的高特异性指标，阳性率为5-15%，常见于神经狼疮。
H
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AMA与AMA-M2
ANA的检测及临床应用ppt课件
动性相关。在30-40%的系统性红斑狼疮患者中也可检出抗U1-rRNP抗体，但几乎总伴有抗Sm抗体。 抗Sm抗体： 系统性红斑狼疮的特异性抗体，与抗dsDNA抗体一起，是系统性红斑狼疮的诊断性指标，但阳性率为30%左右。 抗SS-A抗体： 与各类自身免疫性疾病相关，最常见于干燥综合征（40-80%）、也见于系统性红斑狼疮（30-40%）和原发性胆汁性
ppt课件.
2
抗核抗体的检测方法
间接荧光免疫法
➢ 具有完整的抗原谱（细胞核和细胞浆） ➢ 检测ANA的金标准，具有很高的特异性跟敏感性 ➢ 基质组合：HEp-2细胞+组织切片
免疫印迹法
➢ 先将混合性抗原做凝胶电泳，分离开不同的区带，然后把区带转印到硝酸纤维膜上，加入待检血清，最后用相应的酶标抗体使 相应的抗原带显色
症中不出现。
抗PM-Scl抗体： 常见于多肌炎与硬化症的重叠综合征中，50%的该抗体阳性患者为肌炎与硬化症的重叠综合征，抗PM-Scl抗体也可见
于单独的多肌炎患者中，阳性率为8%，在弥散型硬化症中的阳性率为2-5%。 抗Jo-1抗体： 见于多肌炎，阳性率为25-35%。常与合并肺间质纤维化相关。
3. ANA阳性的意义需结合临床资料综合分析，ANA阳 性并不能确立某种临床诊断，反ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ，ANA阴性也不 能排除自身免疫性病。
ppt课件.
13
4. IFANA作为总抗体筛查实验，应该结合抗体确认试 验为临床诊断起到更好的指导作用，必要时还应提 供抗体效价。
ppt课件.
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抗核抗体的应用
抗U1-rRNP抗体： 高滴度的抗U1-rRNP抗体是混合性结缔组织病（MCTD，夏普综合征）的标志，阳性率95-100%，抗体滴度与疾病活
ppt课件.
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抗核抗体的检测方法
间接荧光免疫法
➢ 具有完整的抗原谱（细胞核和细胞浆） ➢ 检测ANA的金标准，具有很高的特异性跟敏感性 ➢ 基质组合：HEp-2细胞+组织切片
免疫印迹法
➢ 先将混合性抗原做凝胶电泳，分离开不同的区带，然后把区带转印到硝酸纤维膜上，加入待检血清，最后用相应的酶标抗体使 相应的抗原带显色
症中不出现。
抗PM-Scl抗体： 常见于多肌炎与硬化症的重叠综合征中，50%的该抗体阳性患者为肌炎与硬化症的重叠综合征，抗PM-Scl抗体也可见
于单独的多肌炎患者中，阳性率为8%，在弥散型硬化症中的阳性率为2-5%。 抗Jo-1抗体： 见于多肌炎，阳性率为25-35%。常与合并肺间质纤维化相关。
3. ANA阳性的意义需结合临床资料综合分析，ANA阳 性并不能确立某种临床诊断，反ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ，ANA阴性也不 能排除自身免疫性病。
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4. IFANA作为总抗体筛查实验，应该结合抗体确认试 验为临床诊断起到更好的指导作用，必要时还应提 供抗体效价。
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抗核抗体的应用
抗U1-rRNP抗体： 高滴度的抗U1-rRNP抗体是混合性结缔组织病（MCTD，夏普综合征）的标志，阳性率95-100%，抗体滴度与疾病活
抗核抗体(ANA)报告解读及核型判读PPT课件
ANA的临床意义
ANA阳性
常见于系统性红斑狼疮、混合性结缔组织病、干燥综合征、 硬皮病、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病。在这些疾病中 ，ANA的滴度往往与疾病活动性相关。
ANA阴性
正常人血清中ANA一般为阴性。但是需要注意的是，ANA阴 性并不能完全排除自身免疫性疾病的可能，因为一些自身免 疫性疾病患者的ANA可能为阴性。因此，需要结合其他临床 表现和实验室检查结果进行综合判断。
表示抗体在血清中的浓度，通常以1:40、1:80、1:160等比例呈现。滴度越高 ，抗体浓度越大，提示自身免疫性疾病的可能性增加。
核型
指ANA与细胞核内不同成分结合形成的特定荧光染色模式。常见核型包括均质 型、斑点型、核膜型、着丝点型等。不同核型与特定疾病相关联。
ANA与疾病关联性的解读
ANA阳性与多种自身免疫性疾病相关，如系统性红斑狼疮（SLE）、混 合性结缔组织病（MCTD）、干燥综合征（SS）等。
ANA核型的变化与疾病活动性
某些ANA核型的变化也与疾病活动性密切相关。例如，在SLE患者中，随着病情的好转 ，均质型ANA可能转变为斑点型或核仁型。因此，观察ANA核型的变化有助于评估疾
病的活动性。
在治疗选择和预后评估中的价值
指导治疗选择
ANA检测和核型判读可以为临床医生提 供治疗选择的依据。例如，对于ANA阳 性且滴度较高的患者，可能需要采用更 积极的治疗措施，如使用免疫抑制剂等 。
ANA核型的特异性
不同ANA核型与不同自身免疫性疾病的关联程度不同，如均质型ANA与SLE密切相关，而斑点型ANA则与混合性 结缔组织病（MCTD）等相关。因此，ANA核型的判读有助于自身免疫性疾病的精确诊断。
在疾病活动性评估中的价值
抗核抗体ANA检测与临床应用精品课件(一)
抗核抗体ANA检测与临床应用精品课件(一)抗核抗体ANA检测与临床应用精品课件抗核抗体（ANA）是人体自身免疫系统攻击细胞核中成分而产生的自身抗体，被广泛应用于自身免疫性疾病的检测。
本文将介绍ANA检测与临床应用，带您了解其作用以及如何正确解读结果。
一、ANA检测的作用1.检测自身免疫性疾病ANA是自身免疫性疾病毛囊性松解症、漆黑病、全身性红斑狼疮、系统性硬化症、类风湿性关节炎等常见病的标志性指标，正确地进行血清ANA检测能够筛查出疾病患者并进行早期干预和治疗。
2.指导疾病治疗不同原因引发的ANA阳性病人临床表现不同，如强阳性在临床表现上伴有关节炎、皮肤损伤等，而弱阳性则可能没有明显表现，但可能存在临床亚型或初期症状。
因此，病人的ANA检测结果可以指导医生选用合适的治疗方案。
二、ANA检测指标1.抗核抗体（ANA）在患者血浆中可检测到特异性抗原结合能力的自身抗体，是ANA检测的核心指标。
2.特异抗体可根据临床需要检测泛ANA、ds-DNA、SSA、SSB、Scl-70等特异抗体。
三、检测方法ANA检测采用免疫荧光技术和酶联免疫吸附试验（ELISA）两种方法。
1.免疫荧光技术该技术不同于其他免疫学技术，可以同时检测多种自身抗体，但特异性较低。
2.ELISA该技术不仅可以定量，而且可以在更大规模的人群中使用，是一种常用的定量检测方法。
四、结果解读1.阳性ANA阳性并不一定意味着患有自身免疫性疾病，但是阳性提示需要等待进一步检查以确定疾病类型。
另外，阳性还可能由感染、恶性肿瘤或吸入异物等各种非自身免疫性原因引起。
2.阴性ANA阴性结果的意义也很重要，可以排除自身免疫性疾病的可能性，但并不能完全排除自身免疫性疾病的存在。
结合临床症状及其他实验室指标，医生需要权衡多个因素，确定是否进行进一步检查或治疗。
五、结语ANA检测是临床诊断和治疗自身免疫性疾病的重要指标，但其检测结果需要结合其他临床表现及其他检查来作出合理判断。
自身抗体的检测演示幻灯片
ANA检测的临床意义
ANA可见于多种自身免疫性疾病， 特别是结缔组织疾病，常作为结缔 组织疾病的诊断，病情判断和疗效 观察的指标
已证实ANA对很多自身免疫性疾病有 诊断价值。ANA的靶抗原为细胞核内的不 同生化成份，包括核酸、细胞核蛋白和核 糖体蛋白。在不同疾病中，特别是风湿性 疾病，其抗体谱有一定的特意性。在炎症 性风湿病中ANA阳性率在20%-100%之间， 其中类风湿性关节炎中ANA阳性率最低， 为20%-40%。所以，检测ANA对于不同类 型风湿病意义重大。
临床意义：cANCA可见于多种系统性血管炎。 主要见于Wengener’s肉芽肿，约占ANCA阳性 率的80~95%。cANCA被认为是活动性 Wengener’s肉芽肿和微多动脉炎的特异和敏 感的标志性抗体。还见于Churg-Strauss综合 征。
抗中性粒细胞胞浆抗体（核周型）
pANCA
荧光模式：
正常的健康人
女性＞男性，出现率 随年龄而增加
风湿性疾病患者亲属 ？孕妇
SLE患者使用IIF法测定ANA阴性的一些解释
技术方面
临床方面
经皮质激素或免疫抑制剂治疗。
终末期肾病。
隐蔽ANA：与循环中免疫复合物结合，沉积于组 织。
由于大量蛋白尿而从肾脏丢失。
ANA的荧光染色型别
根据产生的荧光模型、靶抗原的分布部位分类如下：
抗SSA／SSB抗体
自身抗原：SSA抗原是一个小核糖核蛋白，由 一个RNA分子和两种不同的蛋白质组成。蛋白 质的分子量为52KD和60KD。抗体直接针对蛋 白质的抗原决定簇。SSB抗原是分子量为48kD 的磷酸化蛋白。
临床意义；最常见于干燥综合征（SS）,也见 于SLE、原发性胆汁性肝硬化（PBC），偶见 于慢活肝。抗SSA抗体在新生儿红斑狼疮的发 生率几乎为100%。
抗核抗体ANA检测与临床应用
伴有狼疮肾炎的严重SLE的生物标记物
抗U1-nRNP与Sm抗体
HEp-2细胞
EUROIMMUN
猴肝
抗U1-nRNP与Sm抗体
抗U1-nRNP/Sm抗体
抗Sm抗体 SLE
HEp-2细胞
抗U1-nRNP抗体
SLE Sharp综合征
(MCTD)
EUROIMMUN
抗U1-nRNP与Sm抗体
抗U1-RNP抗体
外分泌腺受累的自身免疫疾病
症状: - 口腔干燥 - 唾液及眼泪减少 - 腮腺肿胀 - 胰腺外分泌腺分泌不足
口腔干燥
腮腺肿胀
EUROIMMUN
干燥综合征
代表性抗体
SS-A (60 kDa)
SS-B (47 kDa)
40-95% 40-95%
抗SS-A/SS-B抗体
HEp-2细胞
EUROIMMUN
正常人
95－100 80－100
100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40
26 5-10
美国风湿学会(ACR)立场声明
• HEp-2 细胞包含大约100 至150 种自身抗原 • 其它初筛方法仅具有少量自身抗原
…大约 35% SLE患者和IFT-ANA阳性患 者在其它初筛实验中为阴性结果…
30-90% 50-95%
5-10% 5-15%
EUROIMMUN
核均质型 HEp-2细胞/猴肝
HEp-2细胞
EUROIMMUN
猴肝
抗dsDNA 抗体
- 检测方法: IIFT, Farr-法 (RIA), ELISA or Blot IIFT dsDNA
HEp-2细胞
绿蝇短膜虫
抗U1-nRNP与Sm抗体
HEp-2细胞
EUROIMMUN
猴肝
抗U1-nRNP与Sm抗体
抗U1-nRNP/Sm抗体
抗Sm抗体 SLE
HEp-2细胞
抗U1-nRNP抗体
SLE Sharp综合征
(MCTD)
EUROIMMUN
抗U1-nRNP与Sm抗体
抗U1-RNP抗体
外分泌腺受累的自身免疫疾病
症状: - 口腔干燥 - 唾液及眼泪减少 - 腮腺肿胀 - 胰腺外分泌腺分泌不足
口腔干燥
腮腺肿胀
EUROIMMUN
干燥综合征
代表性抗体
SS-A (60 kDa)
SS-B (47 kDa)
40-95% 40-95%
抗SS-A/SS-B抗体
HEp-2细胞
EUROIMMUN
正常人
95－100 80－100
100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40
26 5-10
美国风湿学会(ACR)立场声明
• HEp-2 细胞包含大约100 至150 种自身抗原 • 其它初筛方法仅具有少量自身抗原
…大约 35% SLE患者和IFT-ANA阳性患 者在其它初筛实验中为阴性结果…
30-90% 50-95%
5-10% 5-15%
EUROIMMUN
核均质型 HEp-2细胞/猴肝
HEp-2细胞
EUROIMMUN
猴肝
抗dsDNA 抗体
- 检测方法: IIFT, Farr-法 (RIA), ELISA or Blot IIFT dsDNA
HEp-2细胞
绿蝇短膜虫
抗核抗体ANA检测与临床应用
性，但滴度低
目前，ANA检测已成为临床上的一个极重要的自身免疫病的筛查实验。
ANA检测的临床意义
系统性红斑狼疮
活动期 非活动期 药物诱导的红斑狼疮 混合性结缔组织病（MCTD、Sharp综合征） 类风湿性关节炎 进行性系统性硬化症 多发性肌炎及皮肌炎 干燥综合征 慢性活动性肝炎 溃疡性结肠炎 其它风湿病
猴肝
SS-A 抗原
RNA + SS-A (60 kDa) + Ro-52
RNA + SS-A (60 kDa)
hY-RNA
hY-RNA
Boire et al., 1995: - Ro-52抗体不与SS-A 抗原结合 - 纯化的 SS-A 抗原不包含 Ro-52
SS-A (Ro-60), Ro-52 and SS-B
EUROIMMUN
Anti-Ro52: 肝脏疾病中的阳性率
疾病
PBC AIH HBV HCV 献血员
n
抗Ro-52抗体 阳性
100
27 %
60
35 %
50
10 %
50
22 %
50
0
抗Ro-52抗体没有疾病特异性
Meyer, Schlumberger et al., 4th Asian Congress on Autoimmunity, Singapore, Sept. 2009
正常人
95－100 80－100
100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40
26 5-10
美国风湿学会(ACR)立场声明
• HEp-2 细胞包含大约100 至150 种自身抗原 • 其它初筛方法仅具有少量自身抗原
目前，ANA检测已成为临床上的一个极重要的自身免疫病的筛查实验。
ANA检测的临床意义
系统性红斑狼疮
活动期 非活动期 药物诱导的红斑狼疮 混合性结缔组织病（MCTD、Sharp综合征） 类风湿性关节炎 进行性系统性硬化症 多发性肌炎及皮肌炎 干燥综合征 慢性活动性肝炎 溃疡性结肠炎 其它风湿病
猴肝
SS-A 抗原
RNA + SS-A (60 kDa) + Ro-52
RNA + SS-A (60 kDa)
hY-RNA
hY-RNA
Boire et al., 1995: - Ro-52抗体不与SS-A 抗原结合 - 纯化的 SS-A 抗原不包含 Ro-52
SS-A (Ro-60), Ro-52 and SS-B
EUROIMMUN
Anti-Ro52: 肝脏疾病中的阳性率
疾病
PBC AIH HBV HCV 献血员
n
抗Ro-52抗体 阳性
100
27 %
60
35 %
50
10 %
50
22 %
50
0
抗Ro-52抗体没有疾病特异性
Meyer, Schlumberger et al., 4th Asian Congress on Autoimmunity, Singapore, Sept. 2009
正常人
95－100 80－100
100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40
26 5-10
美国风湿学会(ACR)立场声明
• HEp-2 细胞包含大约100 至150 种自身抗原 • 其它初筛方法仅具有少量自身抗原
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EUROIMMUN
HEp-2细胞: 筛查不同的自身抗体
均质型
核点型
着丝点型
核仁型
Scl-70
Sm/RNP
SS-A/SS-B
核膜型 核糖体P蛋白
AMA
高尔基体
溶酶体
肌动蛋白
波形蛋白
慢性炎症性结缔组织病 (CICTD)
Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) 系统性红ds斑D狼NA疮 (SLE)
EUROIMMUN
ANuA 与狼疮性肾炎
Stinton et al., Lupus 15: 394-400, 2007
• 狼疮肾炎是SLE的一种潜在的严重并发症 (高达 50%) • ~ 1.2% 需要进行肾移植的患者有狼疮肾炎
LNTP
LN
(%)
(%)
CON (%)ANuA79189
Anti-dsDNA 43
建议： • IIFT-ANA仍然为ANA检测的金标准 • 医院或商业诊断所应用其它ANA检测方法时，必须要求为临床大夫提供足够 的数据证明其它ANA检测方法与IFT比较具有同样或更高的敏感度和特异性 • 实验室在ANA报告当中必须注明ANA检测方法
ANA筛查: 间接免疫荧光法(IFT)
抗原谱完整 (细胞核、细胞浆) 检测ANA的金标准，具有很高的敏感性和特异性 基质组合: HEp-2细胞+灵长类肝
系统性硬化症 (SSc) Scl -70 and CenpB
干燥综合征 (SS) SS-A and SS-B
慢性炎症性结缔组织病 (CICTD)
夏普综合征 (MCTD)
RNP
ANCRAAhret相hurmi关taist性o(iRd血Ae 管) 炎
多肌炎/皮肌炎 (PM/DM)
Myositis Profile
ENA：抗可提取核抗原，包括RNP/Sm, Sm, SS-A, SS-B, Scl-70和Jo-1等 六种靶抗原
ANA检测的临床意义
ANA可见于多种疾病，特别是结缔组织疾病，常作为结缔组织病的诊断、 病情判断和疗效观察的指标
高滴度ANA则高度提示自身免疫性疾病 在非结缔组织病中也可出现阳性；正常人中（特别是老年人）也可出现阳
EUROIMMUN
系统性红斑狼疮 (SLE)
红斑狼疮的特点 临床医生: 容易误诊的一类致死性疾病 免疫学家: 所有免疫系统的要件均参与致病机理产生过程
临床发病特点 发病率: 40/100,000(北欧);200/100,000(黑人);250,000 (美国) 患者寿命:4年/50%(1950); 15/80%(当前); 20岁诊断/35岁死亡几率1:6
自身免疫抗体检测及临床意义
电力医院：马林
抗核抗体（ANA）
检测与临床应用
.
2
抗核抗体的定义
传统定义：针对细胞核成分的自身抗体的总称。
广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。对ANA的理 解不再局限于核成分，而是指核酸和核蛋白抗体的总称
ANA的靶抗原分布：
细胞核
整个细胞，包括细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期蛋白等。
性，但滴度低
目前，ANA检测已成为临床上的一个极重要的自身免疫病的筛查实验。
ANA检测的临床意义
系统性红斑狼疮
活动期 非活动期 药物诱导的红斑狼疮 混合性结缔组织病（MCTD、Sharp综合征） 类风湿性关节炎 进行性系统性硬化症 多发性肌炎及皮肌炎 干燥综合征 慢性活动性肝炎 溃疡性结肠炎 其它风湿病
系统性硬化症
33
类风湿/骨关节炎
60
强直性脊柱炎
20
健康对照组
31
特异性
225
144 (61.8%) 1 (2.4%) 1 (2.5%) 1 (3.0%) 1 (1.7%) 0 0 98.2%
ANuA 与疾病的活动性相关性强 (SLE DAI score)
Su et al., Clin Immunol 122: 115-120, 2007
高度特异性抗体; 70%患者阳性，0.5%正常人或RA患者阳性 滴度与疾病活动性相关，但不适用于所有患者 抗体滴度上升但临床症状不明显的患者，抗体检测后5年内
80%患者进入活动期
最新版“Autoantibodies” 描述
不同实验方法的结果并无可比性： 1、抗原来源不同； 2、抗原展现形式不同； 3、实验体系反应条件不同。
SLE – 各器官的表现
神经系统受累 (30%) 皮肤 (蝴蝶状皮疹, 盘状狼疮; 74%)
浆膜炎 (胸膜炎, 心包炎; 77%)
狼疮肾炎 (51%) 血液系统受累 (贫血等; 60%)
关节炎 (至少2个关节 以上受累;96%)
EUROIMMUN
系统性红斑狼疮(SLE)
代表性的抗体 抗 dsDNA 抗体 抗核小体抗体 抗 Sm 抗体 抗核糖体 P 蛋白抗体
30-90% 50-95%
5-10% 5-15%
EUROIMMUN
核均质型 HEp-2细胞/猴肝
HEp-2细胞
EUROIMMUN
猴肝
抗dsDNA 抗体
- 检测方法: IIFT, Farr-法 (RIA), ELISA or Blot IIFT dsDNA
HEp-2细胞
绿蝇短膜虫
抗dsDNA抗体与SLE
41
33
LNTP = lupus nephritis requiring renal transplantation（狼疮肾炎需要 肾移植） LN = biopsy proven lupus nephritis（肾活检确诊为狼疮肾炎） CON = SLE patients without nephritis（无肾炎SLE患者）
正常人
95－100 80－100
100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40
26 5-10
美国风湿学会(ACR)立场声明
• HEp-2 细胞包含大约100 至150 种自身抗原 • 其它初筛方法仅具有少量自身抗原
…大约 35% SLE患者和IFT-ANA阳性患 者在其它初筛实验中为阴性结果…
核均质: 抗核小体抗体(ANuA)
靶抗原: dsDNA-组蛋白-复合物的构象决定簇
方法: IIFA ELISA, Blot
临床意义: SLE, 阳性率 50-95% (特异性100%)
抗核小体 ELISA: 敏感性、特异性、疾病活动度
分组
n
抗核小体阳性
SLE
233
干燥综合症
41
皮肌炎/多肌炎
40
HEp-2细胞: 筛查不同的自身抗体
均质型
核点型
着丝点型
核仁型
Scl-70
Sm/RNP
SS-A/SS-B
核膜型 核糖体P蛋白
AMA
高尔基体
溶酶体
肌动蛋白
波形蛋白
慢性炎症性结缔组织病 (CICTD)
Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) 系统性红ds斑D狼NA疮 (SLE)
EUROIMMUN
ANuA 与狼疮性肾炎
Stinton et al., Lupus 15: 394-400, 2007
• 狼疮肾炎是SLE的一种潜在的严重并发症 (高达 50%) • ~ 1.2% 需要进行肾移植的患者有狼疮肾炎
LNTP
LN
(%)
(%)
CON (%)ANuA79189
Anti-dsDNA 43
建议： • IIFT-ANA仍然为ANA检测的金标准 • 医院或商业诊断所应用其它ANA检测方法时，必须要求为临床大夫提供足够 的数据证明其它ANA检测方法与IFT比较具有同样或更高的敏感度和特异性 • 实验室在ANA报告当中必须注明ANA检测方法
ANA筛查: 间接免疫荧光法(IFT)
抗原谱完整 (细胞核、细胞浆) 检测ANA的金标准，具有很高的敏感性和特异性 基质组合: HEp-2细胞+灵长类肝
系统性硬化症 (SSc) Scl -70 and CenpB
干燥综合征 (SS) SS-A and SS-B
慢性炎症性结缔组织病 (CICTD)
夏普综合征 (MCTD)
RNP
ANCRAAhret相hurmi关taist性o(iRd血Ae 管) 炎
多肌炎/皮肌炎 (PM/DM)
Myositis Profile
ENA：抗可提取核抗原，包括RNP/Sm, Sm, SS-A, SS-B, Scl-70和Jo-1等 六种靶抗原
ANA检测的临床意义
ANA可见于多种疾病，特别是结缔组织疾病，常作为结缔组织病的诊断、 病情判断和疗效观察的指标
高滴度ANA则高度提示自身免疫性疾病 在非结缔组织病中也可出现阳性；正常人中（特别是老年人）也可出现阳
EUROIMMUN
系统性红斑狼疮 (SLE)
红斑狼疮的特点 临床医生: 容易误诊的一类致死性疾病 免疫学家: 所有免疫系统的要件均参与致病机理产生过程
临床发病特点 发病率: 40/100,000(北欧);200/100,000(黑人);250,000 (美国) 患者寿命:4年/50%(1950); 15/80%(当前); 20岁诊断/35岁死亡几率1:6
自身免疫抗体检测及临床意义
电力医院：马林
抗核抗体（ANA）
检测与临床应用
.
2
抗核抗体的定义
传统定义：针对细胞核成分的自身抗体的总称。
广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。对ANA的理 解不再局限于核成分，而是指核酸和核蛋白抗体的总称
ANA的靶抗原分布：
细胞核
整个细胞，包括细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期蛋白等。
性，但滴度低
目前，ANA检测已成为临床上的一个极重要的自身免疫病的筛查实验。
ANA检测的临床意义
系统性红斑狼疮
活动期 非活动期 药物诱导的红斑狼疮 混合性结缔组织病（MCTD、Sharp综合征） 类风湿性关节炎 进行性系统性硬化症 多发性肌炎及皮肌炎 干燥综合征 慢性活动性肝炎 溃疡性结肠炎 其它风湿病
系统性硬化症
33
类风湿/骨关节炎
60
强直性脊柱炎
20
健康对照组
31
特异性
225
144 (61.8%) 1 (2.4%) 1 (2.5%) 1 (3.0%) 1 (1.7%) 0 0 98.2%
ANuA 与疾病的活动性相关性强 (SLE DAI score)
Su et al., Clin Immunol 122: 115-120, 2007
高度特异性抗体; 70%患者阳性，0.5%正常人或RA患者阳性 滴度与疾病活动性相关，但不适用于所有患者 抗体滴度上升但临床症状不明显的患者，抗体检测后5年内
80%患者进入活动期
最新版“Autoantibodies” 描述
不同实验方法的结果并无可比性： 1、抗原来源不同； 2、抗原展现形式不同； 3、实验体系反应条件不同。
SLE – 各器官的表现
神经系统受累 (30%) 皮肤 (蝴蝶状皮疹, 盘状狼疮; 74%)
浆膜炎 (胸膜炎, 心包炎; 77%)
狼疮肾炎 (51%) 血液系统受累 (贫血等; 60%)
关节炎 (至少2个关节 以上受累;96%)
EUROIMMUN
系统性红斑狼疮(SLE)
代表性的抗体 抗 dsDNA 抗体 抗核小体抗体 抗 Sm 抗体 抗核糖体 P 蛋白抗体
30-90% 50-95%
5-10% 5-15%
EUROIMMUN
核均质型 HEp-2细胞/猴肝
HEp-2细胞
EUROIMMUN
猴肝
抗dsDNA 抗体
- 检测方法: IIFT, Farr-法 (RIA), ELISA or Blot IIFT dsDNA
HEp-2细胞
绿蝇短膜虫
抗dsDNA抗体与SLE
41
33
LNTP = lupus nephritis requiring renal transplantation（狼疮肾炎需要 肾移植） LN = biopsy proven lupus nephritis（肾活检确诊为狼疮肾炎） CON = SLE patients without nephritis（无肾炎SLE患者）
正常人
95－100 80－100
100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40
26 5-10
美国风湿学会(ACR)立场声明
• HEp-2 细胞包含大约100 至150 种自身抗原 • 其它初筛方法仅具有少量自身抗原
…大约 35% SLE患者和IFT-ANA阳性患 者在其它初筛实验中为阴性结果…
核均质: 抗核小体抗体(ANuA)
靶抗原: dsDNA-组蛋白-复合物的构象决定簇
方法: IIFA ELISA, Blot
临床意义: SLE, 阳性率 50-95% (特异性100%)
抗核小体 ELISA: 敏感性、特异性、疾病活动度
分组
n
抗核小体阳性
SLE
233
干燥综合症
41
皮肌炎/多肌炎
40