抗核抗体ANA检测与临床应用PPT课件
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建议： • IIFT-ANA仍然为ANA检测的金标准 • 医院或商业诊断所应用其它ANA检测方法时，必须要求为临床大夫提供足够 的数据证明其它ANA检测方法与IFT比较具有同样或更高的敏感度和特异性 • 实验室在ANA报告当中必须注明ANA检测方法
ANA筛查: 间接免疫荧光法(IFT)
抗原谱完整 (细胞核、细胞浆) 检测ANA的金标准，具有很高的敏感性和特异性 基质组合: HEp-2细胞+灵长类肝
SLE – 各器官的表现
神经系统受累 (30%) 皮肤 (蝴蝶状皮疹, 盘状狼疮; 74%)
浆膜炎 (胸膜炎, 心包炎; 77%)
狼疮肾炎 (51%) 血液系统受累 (贫血等; 60%)
关节炎 (至少2个关节 以上受累;96%)
EUROIMMUN
系统性红斑狼疮(SLE)
代表性的抗体 抗 dsDNA 抗体 抗核小体抗体 抗 Sm 抗体 抗核糖体 P 蛋白抗体
高度特异性抗体; 70%患者阳性，0.5%正常人或RA患者阳性 滴度与疾病活动性相关，但不适用于所有患者 抗体滴度上升但临床症状不明显的患者，抗体检测后5年内
80%患者进入活动期
最新版“Autoantibodies” 描述
不同实验方法的结果并无可比性： 1、抗原来源不同； 2、抗原展现形式不同； 3、实验体系反应条件不同。
正常人
95－100 80－100
100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40
26 5-10
美国风湿学会(ACR)立场声明
• HEp-2 细胞包含大约100 至150 种自身抗原 • 其它初筛方法仅具有少量自身抗原
…大约 35% SLE患者和IFT-ANA阳性患 者在其它初筛实验中为阴性结果…
系统性硬化症 (SSc) Scl -70 and CenpB
干燥综合征 (SS) SS-A and SS-B
慢性炎症性结缔组织病 (CICTD)
夏普综合征 (MCTD)
RNP
ANCRAAhret相hurmi关taist性o(iRd血Ae 管) 炎
多肌炎/皮肌炎 (PM/DM)
Myositis Profile
41
33
LNTP = lupus nephritis requiring renal transplantation（狼疮肾炎需要 肾移植） LN = biopsy proven lupus nephritis（肾活检确诊为狼疮肾炎） CON = SLE patients without nephritis（无肾炎SLE患者）
系统性硬化症
33
类风湿/骨关节炎
60
强直性脊柱炎
20
健康对照组
31
特异性
225
144 (61.8%) 1 (2.4%) 1 (2.5%) 1 (3.0%) 1 (1.7%) 0 0 98.2%
ANuA 与疾病的活动性相关性强 (SLE DAI score)
Su et al., Clin Immunol 122: 115-120, 2007
核均质: 抗核小体抗体(ANuA)
靶抗原: dsDNA-组蛋白-复合物的构象决定簇
方法: IIFA ELISA, Blot
临床意义: SLE, 阳性率 50-95% (特异性100%)
抗核小体 ELISA: 敏感性、特异性、疾病活动度
分组
n
抗核小体阳性
SLE
233
干燥综合症
41
皮肌炎/多肌炎
40
30-90% 50-95%
5-10% 5-15%
EUROIMMUN
核均质型 HEp-2细胞/猴肝
HEp-2细胞
EUROIMMUN
猴肝
抗dsDNA 抗体
- 检测方法: IIFT, Farr-法 (RIA), ELISA or Blot IIFT dsDNA
HEp-2细胞
绿蝇短膜虫
抗dsDNA抗体与SLE
EUROIMMUN
HEp-2细胞: 筛查不同的自身抗体
均质型
核点型
着丝点型
核仁型
Scl-70
Sm/RNP
SS-A/SS-B
核膜型 核糖体P蛋白
AMA
高尔基体
溶酶体
肌动蛋白
波形蛋白
慢性炎症性结缔组织病 (CICTD)
Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) 系统性红ds斑D狼NA疮 (SLE)
EUROIMMUN
ANuA 与狼疮性肾炎
Stinton et al., Lupus 15: 394-400, 2007
• 狼疮肾炎是SLE的一种潜在的严重并发症 (高达 50%) • ~ 1.2% 需要进行肾移植的患者有狼疮肾炎
LNTP
LN
(%)
(%)
CON (%)
ANuA
79
Βιβλιοθήκη Baidu
18
9
Anti-dsDNA 43
ENA：抗可提取核抗原，包括RNP/Sm, Sm, SS-A, SS-B, Scl-70和Jo-1等 六种靶抗原
ANA检测的临床意义
ANA可见于多种疾病，特别是结缔组织疾病，常作为结缔组织病的诊断、 病情判断和疗效观察的指标
高滴度ANA则高度提示自身免疫性疾病 在非结缔组织病中也可出现阳性；正常人中（特别是老年人）也可出现阳
性，但滴度低
目前，ANA检测已成为临床上的一个极重要的自身免疫病的筛查实验。
ANA检测的临床意义
系统性红斑狼疮
活动期 非活动期 药物诱导的红斑狼疮 混合性结缔组织病（MCTD、Sharp综合征） 类风湿性关节炎 进行性系统性硬化症 多发性肌炎及皮肌炎 干燥综合征 慢性活动性肝炎 溃疡性结肠炎 其它风湿病
自身免疫抗体检测及临床意义
电力医院：马林
抗核抗体（ANA）
检测与临床应用
.
2
抗核抗体的定义
传统定义：针对细胞核成分的自身抗体的总称。
广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。对ANA的理 解不再局限于核成分，而是指核酸和核蛋白抗体的总称
ANA的靶抗原分布：
细胞核
整个细胞，包括细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期蛋白等。
EUROIMMUN
系统性红斑狼疮 (SLE)
红斑狼疮的特点 临床医生: 容易误诊的一类致死性疾病 免疫学家: 所有免疫系统的要件均参与致病机理产生过程
临床发病特点 发病率: 40/100,000(北欧);200/100,000(黑人);250,000 (美国) 患者寿命:4年/50%(1950); 15/80%(当前); 20岁诊断/35岁死亡几率1:6
ANA筛查: 间接免疫荧光法(IFT)
抗原谱完整 (细胞核、细胞浆) 检测ANA的金标准，具有很高的敏感性和特异性 基质组合: HEp-2细胞+灵长类肝
SLE – 各器官的表现
神经系统受累 (30%) 皮肤 (蝴蝶状皮疹, 盘状狼疮; 74%)
浆膜炎 (胸膜炎, 心包炎; 77%)
狼疮肾炎 (51%) 血液系统受累 (贫血等; 60%)
关节炎 (至少2个关节 以上受累;96%)
EUROIMMUN
系统性红斑狼疮(SLE)
代表性的抗体 抗 dsDNA 抗体 抗核小体抗体 抗 Sm 抗体 抗核糖体 P 蛋白抗体
高度特异性抗体; 70%患者阳性，0.5%正常人或RA患者阳性 滴度与疾病活动性相关，但不适用于所有患者 抗体滴度上升但临床症状不明显的患者，抗体检测后5年内
80%患者进入活动期
最新版“Autoantibodies” 描述
不同实验方法的结果并无可比性： 1、抗原来源不同； 2、抗原展现形式不同； 3、实验体系反应条件不同。
正常人
95－100 80－100
100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40
26 5-10
美国风湿学会(ACR)立场声明
• HEp-2 细胞包含大约100 至150 种自身抗原 • 其它初筛方法仅具有少量自身抗原
…大约 35% SLE患者和IFT-ANA阳性患 者在其它初筛实验中为阴性结果…
系统性硬化症 (SSc) Scl -70 and CenpB
干燥综合征 (SS) SS-A and SS-B
慢性炎症性结缔组织病 (CICTD)
夏普综合征 (MCTD)
RNP
ANCRAAhret相hurmi关taist性o(iRd血Ae 管) 炎
多肌炎/皮肌炎 (PM/DM)
Myositis Profile
41
33
LNTP = lupus nephritis requiring renal transplantation（狼疮肾炎需要 肾移植） LN = biopsy proven lupus nephritis（肾活检确诊为狼疮肾炎） CON = SLE patients without nephritis（无肾炎SLE患者）
系统性硬化症
33
类风湿/骨关节炎
60
强直性脊柱炎
20
健康对照组
31
特异性
225
144 (61.8%) 1 (2.4%) 1 (2.5%) 1 (3.0%) 1 (1.7%) 0 0 98.2%
ANuA 与疾病的活动性相关性强 (SLE DAI score)
Su et al., Clin Immunol 122: 115-120, 2007
核均质: 抗核小体抗体(ANuA)
靶抗原: dsDNA-组蛋白-复合物的构象决定簇
方法: IIFA ELISA, Blot
临床意义: SLE, 阳性率 50-95% (特异性100%)
抗核小体 ELISA: 敏感性、特异性、疾病活动度
分组
n
抗核小体阳性
SLE
233
干燥综合症
41
皮肌炎/多肌炎
40
30-90% 50-95%
5-10% 5-15%
EUROIMMUN
核均质型 HEp-2细胞/猴肝
HEp-2细胞
EUROIMMUN
猴肝
抗dsDNA 抗体
- 检测方法: IIFT, Farr-法 (RIA), ELISA or Blot IIFT dsDNA
HEp-2细胞
绿蝇短膜虫
抗dsDNA抗体与SLE
EUROIMMUN
HEp-2细胞: 筛查不同的自身抗体
均质型
核点型
着丝点型
核仁型
Scl-70
Sm/RNP
SS-A/SS-B
核膜型 核糖体P蛋白
AMA
高尔基体
溶酶体
肌动蛋白
波形蛋白
慢性炎症性结缔组织病 (CICTD)
Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) 系统性红ds斑D狼NA疮 (SLE)
EUROIMMUN
ANuA 与狼疮性肾炎
Stinton et al., Lupus 15: 394-400, 2007
• 狼疮肾炎是SLE的一种潜在的严重并发症 (高达 50%) • ~ 1.2% 需要进行肾移植的患者有狼疮肾炎
LNTP
LN
(%)
(%)
CON (%)
ANuA
79
Βιβλιοθήκη Baidu
18
9
Anti-dsDNA 43
ENA：抗可提取核抗原，包括RNP/Sm, Sm, SS-A, SS-B, Scl-70和Jo-1等 六种靶抗原
ANA检测的临床意义
ANA可见于多种疾病，特别是结缔组织疾病，常作为结缔组织病的诊断、 病情判断和疗效观察的指标
高滴度ANA则高度提示自身免疫性疾病 在非结缔组织病中也可出现阳性；正常人中（特别是老年人）也可出现阳
性，但滴度低
目前，ANA检测已成为临床上的一个极重要的自身免疫病的筛查实验。
ANA检测的临床意义
系统性红斑狼疮
活动期 非活动期 药物诱导的红斑狼疮 混合性结缔组织病（MCTD、Sharp综合征） 类风湿性关节炎 进行性系统性硬化症 多发性肌炎及皮肌炎 干燥综合征 慢性活动性肝炎 溃疡性结肠炎 其它风湿病
自身免疫抗体检测及临床意义
电力医院：马林
抗核抗体（ANA）
检测与临床应用
.
2
抗核抗体的定义
传统定义：针对细胞核成分的自身抗体的总称。
广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。对ANA的理 解不再局限于核成分，而是指核酸和核蛋白抗体的总称
ANA的靶抗原分布：
细胞核
整个细胞，包括细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期蛋白等。
EUROIMMUN
系统性红斑狼疮 (SLE)
红斑狼疮的特点 临床医生: 容易误诊的一类致死性疾病 免疫学家: 所有免疫系统的要件均参与致病机理产生过程
临床发病特点 发病率: 40/100,000(北欧);200/100,000(黑人);250,000 (美国) 患者寿命:4年/50%(1950); 15/80%(当前); 20岁诊断/35岁死亡几率1:6