实验二 果蝇唾腺染色体

缺失环
倒位环
多线染色体

果蝇的唾腺染色体中含有多条染色体拷贝，称 为多线染色体（Polytene chromosome）。除 唾腺以外，在消化道等部位也有多线染色体的 存在，但是这些部位的多线染色体复制次数通 常没有唾腺多，因此染色体较唾腺染色体细。 除果蝇以外，在摇蚊等昆虫中也存在多线染色 体。DNA模板量的增加可能是基因表达调控的 一种手段。
唾腺染色体特征


3.各染色体着丝粒部分相互靠拢形成染色 中心 果蝇的2,3号染色体为中着丝粒染色体，可 以看到两条染色体臂；4号染色体为点状染 色体，通常不易观察到；X染色体为端着丝 粒染色体，只能看到一条染色体臂；因此 唾腺细胞中通常能看到的染色体是由染色 中心向外伸出五条线。
唾腺染色体特征
（二）实验材料

大果蝇的三龄幼虫 该阶段幼虫体型大，唾腺较大，容易取材，应 取爬上管壁的幼虫为宜
（三）实验步骤


1）分离唾腺；
将幼虫放在含有一滴生理盐水的洁净载玻片上。在解剖镜下观察： 幼虫头部有黑色的口沟，尾端有一对黄色的后气门。双手各持一 枚解剖针，用左手解剖针压住幼虫中部，用右手解剖针自幼虫口 沟后切断头部，体内各器宫便从切口处挤出，一对唾腺也随之而 出。
为什么还要对唾腺染色体进行研究呢？



果蝇染色体在科学研究中还有较重要的作用。 1953年发现了DNA的双螺旋结构，当时发现的DNA为B 型DNA，螺旋结构为右旋，每旋转一圈为10个碱基 （右旋结构还包括A型C型等），后来人工合成了左旋 的DNA（CGCGCG），这种DNA称为Z型DNA，每旋转一圈 为12个碱基，那么在自然条件下的生物中是否存在Z 型的DNA呢？ 研究发现部分蛋白可以特异结合左旋DNA，Z型DNA在 注射到动物体内后很快会诱导抗体的产生，而B型DNA 却不易诱导抗体的产生，用人工合成的Z-DNA免疫动 物诱导得到抗体，该抗体用荧光标记以后对果蝇的唾 腺染色体进行杂交，发现部分区域有强的荧光信号， 证实了自然条件下Z-DNA的存在。
实验二 果蝇唾腺染色体
（一）实验原理

果蝇等双翅目昆虫幼虫的唾腺细胞很大，其中 的染色体称为唾腺染色体，该染色体比普通的 染色体大很多，又称为巨大染色体。由于体细 胞的染色体通常较小，对其进行研究较为困难， 果蝇巨大的染色体是研究染色体的好材料。
唾腺染色体特征

1. 巨大
唾腺细胞通常认为是处于间期或前期的细胞，其 染色体连续进行多次细胞内复制却不进行细胞的 分裂，染色体的各拷贝不分开，大约有1000-4000 根染色体丝拷贝，是普通染色体的100-150倍。

唾腺是一对透明的棒状腺体，通常每个腺体上附着一 个源自文库色的脂肪体，是鉴别唾腺的重要标志。




2）将唾腺以外的其他部分以及脂肪体去除备 用。 3）1M盐酸水解3min；水洗三次，每次1-2min； 苯酚品红染色20min 4）压片观察；加盖玻片以后用大拇指用力压 片。可以稍微轻搓一下，但是要向同一个方向， 可能会使细胞分散的更好些。 5）显微镜下寻找分散较好唾腺染色体，观察 唾腺染色体的特点，并绘图。
M 分裂期
G2
内复制 S 合成期
G1
唾腺染色体特征

2. 体细胞配对 果蝇的体细胞中共有8条染色体，其中有3 对常染色体，1对性染色体，唾腺细胞同源 染色体之间相互配对（类似减数分裂前期 I），形成一条染色体，我们称为体细胞配 对，因此在果蝇的唾腺细胞中只能看到四 条巨大的染色体，染色体数只有体细胞的 一半 。


4. 染色体上出现深浅不同的带纹
染色体中带纹的出现是由于染色体结合染料的深浅不 同导致的，DNA螺旋相对致密的区域染色较深；每条 染色体上带纹的排列通常是恒定的，但是不同发育时 期带纹可能会有变化，显示了基因表达的变化，有时 部分区域的带纹消失，出现染色体的膨胀，称为疏松 区（puff）。

Morgen实验室将不同染色体的带纹进行划分并 进行命名，用染色体带纹的不同检测诱变产生 的突变体，通常可以检测到的突变包括染色体 的缺失、重复、倒位等，可以看到染色体上形 成缺失环、倒位环等。