实验二 果蝇唾腺染色体
果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告
果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告一、实验原理双翅目昆虫(摇蚊、果蝇等)幼虫期的唾腺细胞很大，其中的染色体称为唾腺染色体。
这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um，长约400um，相当于普通染色体的100—150倍，因而又称为巨大染色体。
唾腺染色体处于体细胞染色体联会配对状态。
并且唾腺染色体经过多次复制而并不分开，每条染色体大约有1000—4000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体。
多线染色体经染色后，出现深浅不同、密疏各别的横纹，这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征；如染色体有缺失、重复、倒位．易位等，很容易在唾腺染色体上识别出来。
各染色体的异染色质的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心；横纹有深浅、疏密的不同，各自对应排列，这意味着基因的排列。
唾腺染色体广泛应用于细胞遗传学、发生遗传学、进化遗传学及分子遗传学的研究中。
二、实验材料果蝇的三龄幼虫三、实验器材双目解剖镜，生物显微镜，解剖针，载玻片，盖玻片，滤纸条，废物缸，托盘等。
四、实验试剂生理盐水，盐酸，蒸馏水，改良苯酚品红染色液等。
五、实验步骤1.剥离唾腺：在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。
每只手各持一个解剖针，在解剖镜下进行操作。
由于果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持解剖针按压住虫体前端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。
剔除脂肪体并弃除无关物质。
2.解离：加一滴45%乙酸溶液于腺体上，作用5-7s。
用滤纸吸干溶液。
在唾腺组织上滴一滴1mol/lLHCl，解离30-40s，以松软组织，利于染色体的分散。
3.吸去 HCl，用水冲洗2-3次.4.染色：滴加改良苯酚品红染液染色30min,染色时间不可过长，否则背景也着色。
遗传学 实验材料 果蝇
实验一：果蝇唾液腺染色体制片与观察
试剂：乙醚、生理盐水、蒸馏水、1mol盐酸、石炭酸品红
器材：恒温培养箱、高压灭菌锅、显微镜、天平、培养瓶、棉塞、滤纸、载片、盖片、镊子、解剖针
实验二：果蝇饲养
试剂：乙醚、培养基
器材：放大镜、麻醉瓶、玻璃片、毛笔、石棉网、恒温培养箱、高压灭菌锅、显微镜、天平、培养瓶、棉塞、滤纸、载片、盖片、镊子、解剖针、牛皮纸
实验三：果蝇杂交实验
试剂：同上
器材：恒温培养箱、高压灭菌锅、显微镜、天平、培养瓶、棉塞、滤纸、载片、盖片、镊子、解剖针、烧杯、量筒、牛皮纸
果蝇培养基
水1000ml
玉米粉105g
红糖75g
琼脂7.5-10g
苯甲酸0.75g
酵母粉5-10g
配制方法：配制时先将水分成两份：一份用于加热溶解琼脂和糖，另一份煮玉米粉，玉米粉要先用冷水搅拌，再加到煮沸琼脂红糖溶液中，边倒边搅拌。
继续煮15-20分钟，关掉火后再加入苯甲酸(用少量酒精促溶) ，要充分搅拌后再分装培养瓶。
每瓶培养基厚度在2-3cm，置121℃高压蒸汽灭菌15分钟。
待培养基冷却后，在培养基的表面滴加新鲜酵母液，插上一块经灭菌后的滤纸片做为幼虫化蛹的干燥场所。
2 果蝇幼虫唾液腺染色体标本的制备与观察
果蝇幼虫唾腺染色体标本的制备与观察摘要果蝇幼虫唾腺细胞染色体是一种特化的巨大染色体，由于其外形具横纹与胀泡等结构，可作为物种区别标志与基因定位标志。
实验采用普通果蝇的三龄幼虫，剥离出其唾腺，通过固定、染色与压片等步骤制成果蝇幼虫唾腺染色体标本，在显微镜下观察，最终对果蝇幼虫唾腺染色体的外形、结构、特征做出简要描述。
引言果蝇三龄幼虫的唾腺细胞处于永久早期，染色体解旋呈伸展状态．在幼虫发育过程中细胞核中的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂。
复制后的染色单体DNA不分开，这种现象叫做核内有丝分裂，从而形成了多线染色体。
加之唾腺细胞中同源染色体互相靠拢在一起呈现一种联会状态，而使其比一般分裂中期体细胞中的染色体长100~150倍。
由于在唾腺细胞中8条染色体之间以着丝粒互相连结在一起形成染色盘或异染中心，以及同源染色体之间的假联会，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。
在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同，被称作明带、暗带的横纹，这些横纹的位置，宽窄、数目都具有物种的特异性。
不同物种，不同染色体的不同部位形态位置是固定的。
因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹特征能准确识别各条染色体。
另外某染色体上出现的变异，在唾腺染色体相应的臂上就能反映出来，这样这些横纹就成了精确基因定位的“坐标”。
将野生型果蝇的带纹与缺失、重复、倒位等突变体的带纹进行比较，就可以将一些基因定位在染色体上。
[1]在染色体臂上还可看到某些带纹通过染色体的解旋、膨大形成的疏松区胀泡，其中最大的一个胀泡叫做巴尔比尼氏环。
胀泡富含转录出来的RNA，因此不着色，是基因活动的区域。
在个体发育的不同阶段，胀泡或巴尔比尼氏环在染色体上出现的部位不同，据此研究基因的表达，开展各种染色体变异的研究等等。
本次实验将通过对果蝇幼虫唾腺染色体标本的制备与观察，了解并掌握果蝇三龄幼虫唾腺的剖离技术，掌握唾腺染色体标本的制备方法，了解唾腺染色体的形态结构特点。
遗传实验报告-果蝇唾腺染色体观察
【实验目的】1.练习解剖果蝇幼虫的技术2.掌握果蝇唾腺染色体的制片方法3.了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点【实验原理】果蝇为双翅目完全变态的昆虫，幼虫期分三龄。
其幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的多线染色体。
双翅目昆虫的整个消化管细胞发育至一定阶段后就停止有丝分裂，终止在分裂间期。
但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，唾液腺细胞核的染色体仍不断地进行自我复制而并不分开。
经多次复制后，形成约1000~4000拷贝的染色体丝，比普通中期相染色体大得多（约100~500倍），因此又称为多线染色体。
黑腹果蝇染色体数2n=8，存在体联会。
各染色体的着丝粒互相靠拢形成染色中心，由染色体中心向外伸出5条很长的染色体臂和一条极短的染色体。
（如右图）染色体Ⅰ为端着丝粒染色体，所以它的一端在染色中心上，另一端游离；Ⅱ、Ⅲ染色体为中着丝粒染色体，他们从染色中心呈V字形向外伸展，所以分别能看到2L、2R、3L和3R 4条长而宽的“带状物”；点状的第Ⅳ染色体很短小，为端着丝粒。
因此可以见到5条很长的和一条仅靠染色中心的短小的染色体。
在雄性幼虫中，唾腺染色体上不见Y染色体，他捕鱼X染色体联会，而且其着丝粒及其附近的异染色质参与染色中心的形成。
这可能是雄性幼虫唾腺染色体中的X染色体比其他几对染色体相对狭窄一些的缘故。
果蝇唾腺染色体特点：巨大，是多线染色体；有丝分裂停在间期，DNA不断复制，着丝点不分开；同源染色体紧密配对—体细胞联会，染色体呈单倍数。
整个唾腺染色体上分布着染色深浅不同、粗细各异的横纹，这意味着基因的排列。
这些横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数目都具有物种的特异性。
黑腹果蝇的多线染色体具有大约5000条横纹。
染色体各条臂的端部，即远离染色中心的游离端恒定的横纹特征，是准确识别各对染色体的重要依据。
在果蝇的特定发育时期，横纹会出现不连续的膨胀，称为疏松区（puff），目前认为这是该部分基因被激活的标志。
果蝇唾液腺染色体观察实验报告
果蝇唾液腺染色体观察实验报告果蝇（Drosophila melanogaster）是一种常见的模式生物，在遗传学研究中有着重要的应用价值。
果蝇唾液腺染色体观察实验是一种常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化，为遗传学研究提供重要的数据支持。
本实验旨在通过对果蝇唾液腺细胞进行染色体观察，掌握染色体的基本结构和形态特征，为今后的遗传学研究奠定基础。
实验材料和方法。
1. 实验材料，成年果蝇、盐酸乙醇、醋酸乙酯、苏木精、酒精、冰醋酸、苏木素、甲醛、石蜡等。
2. 实验方法：（1）取一只成年果蝇，用镊子夹住果蝇的头部，将果蝇的身体用另一只镊子拔去。
（2）将果蝇头部置于盐酸乙醇中，浸泡5分钟，然后用镊子将头部转移到醋酸乙酯中，浸泡5分钟。
（3）将处理后的果蝇头部转移到苏木精中，浸泡5分钟，然后用酒精逐级脱水，最后转移到冰醋酸中浸泡5分钟。
（4）将果蝇头部转移到甲醛中，固定30分钟，然后用苏木素染色，再经过酒精逐级脱水，最后转移到石蜡中浸泡。
（5）将处理后的果蝇头部置于石蜡中，浸泡30分钟，然后取出制作切片，用显微镜观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构。
实验结果和分析。
经过实验操作，观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以看到染色体呈现出条状的形态，其中可以清晰地看到染色体的着丝粒和染色单体。
染色体的数量在观察的过程中也得到了初步的统计，一般情况下，果蝇唾液腺细胞的染色体数量为8条。
结论。
通过本次实验，我们成功观察了果蝇唾液腺细胞的染色体结构，了解了染色体的基本形态特征和数量变化。
这为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
总结。
果蝇唾液腺染色体观察实验是遗传学研究中常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化。
本次实验的成功进行，为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
《果蝇唾腺染色体的制备及观察》实验综述报告
《果蝇唾腺染色体的制备及观察》实验综述报告
果蝇唾腺染色体的制备及观察实验是一项相对简单的实验，能帮助我们深入地分析生
物体的遗传信息。
它有助于研究基因的定位，可以直接检测果蝇多种遗传现象，如基因重组、遗传连锁等。
同时，它也可以用于对果蝇染色体进行染色，以指导染色体的解剖研究。
本文将对果蝇唾腺染色体的制备及观察实验进行综述，并简要说明该实验的主要操作步骤。
果蝇唾腺染色体的制备及观察实验的前期准备较松散，需要准备的主要物品有果蝇、
固定液或甲醛、盐酸和对果蝇唾腺染色体染色所需要的染色剂。
在准备过程中一定要保证
果蝇是新鲜及易于收集的，以确保实验结果的准确性。
接下来是正式操作步骤：
（1）采集已经准备好的果蝇，在蝇斗背部用盐酸麻醉后放置在显微镜上；
（2）选择感兴趣的唾腺，将其夹紧，用毛笔蘸取染色剂，缓慢地涂抹到唾腺上；
（3）将果蝇用固定液或甲醛固定后放入、在水夹中放置，让蝇子充分固定；
（4）把固定好的果蝇放入蒸气器中，以上水蒸气状态来加强染色剂的渗入，再以滴
管仔细煮沸果蝇，使其外皮脱落；
（5）放入固定液或甲醛中，然后仔细观察标本，观察其染色情况；
（6）最终，用酒精把标本浸泡清除染色剂，待它恢复原色后，将标本用45％乙醇中
保存，打包发成图片，保持它的完整性。
果蝇唾腺染色体的制备及观察实验是一种非常有用的实验，能够帮助我们更好地理解
果蝇的染色体，并且可以应用到许多方面，如分子进化学研究等等。
但是，该实验也有许
多潜在风险，如暴露在有毒药物、辐射等环境中可能会对果蝇造成不良影响，所以在实验
过程中非常注意安全措施，严格控制暴露时间和剂量。
实验二、果蝇唾液腺染色体的制备与观察
实验二：果蝇唾液腺染色体的制备与观察一、实验目的1、练习果蝇唾液腺的分离方法2、掌握唾液腺染色体的制片技术3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征二、实验原理1、双翅目昆虫（果蝇）幼虫期的唾液腺细胞很大，其中的染色体称唾液腺染色体，相当于一般普通染色体的100－150倍，又称巨大染色体。
2、在幼虫发育过程中，唾液腺染色体仍进行复制，但细胞只生长不分裂，从而产生多线染色体。
多线染色体经染色后，出现深浅不一、宽窄不同的横纹，这些横纹的数目和位置是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征。
如果染色体缺失、重复、倒位、易位等结构变异时，很容易在唾腺染色体上识别出来。
3、多线染色体的特征：a 巨大；b体细胞配对，所以染色体只有半数（n=4）；c 各染色体的异染色质多份额着丝粒部分相互靠拢形成染色中心；d 横纹有深浅、疏密的不同，各自相应排列，这意味着基因的排列。
三、实验材料和用品实验材料：黑腹果蝇的三龄幼虫（选择行动迟缓、肥大、爬上管壁、就要化蛹了的三龄幼虫观察最佳）实验用品：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸。
0.9%生理盐水、1％醋酸洋红。
四、实验步骤1、载玻片置于显微镜下，上面滴加一滴生理盐水，放上果蝇幼虫（有一钝尾和带黑色口器的尖头，可根据其在盐水中爬行方向确定头部），两手各拿一枚解剖针，左手解剖针按住幼虫的后端1/3, 右手解剖针按住头部(尽量靠近口器)用力后拉，把头部从身体拉出，唾液腺随之而出。
（一对双叉形透明的囊状腺体）。
2、除去幼虫其他组织部分，把唾液腺周围脂肪组织（不透明）剥离干净，然后将多余生理盐水吸走，滴一滴醋酸洋红在载玻片上。
3、染色10 分钟，盖上盖玻片，用滤纸轻压一下吸去多余的染色液，然后平放在桌子上，用大拇指适当均匀用力压住，并横向揉几次（勿使盖玻片移动，用力和揉动是一个方向，不能来回揉！）。
4、显微镜观察，先在低倍镜下观察，找到分散好的染色体图像，再高倍镜观察。
用显微镜可以看到四对染色体，第一对染色体（X-）组成一个长条，第二和第三对各自组成了具有左右两臂的染色体对，它们都以中部的着丝区聚集，而第四对染色体很小，分布在着丝区呈点状或盘状。
_遗传实验报告2_果蝇唾腺
果蝇唾腺染色体标本的制备和观察实验日期：2013年3月21日一、实验目的通过实验掌握果蝇唾腺染色体的制片方法，了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点并练习解剖果蝇幼虫的技术。
二、实验原理唾腺染色体是一类存在于双翅目昆虫的幼虫唾液腺内的巨大染色体。
果蝇的唾腺染色体是典型的巨大染色体，它的巨大性的成因是核内有丝分裂造成的。
由于其染色体DNA经过多次复制（可达210～215次），但并未发生细胞核分裂，同时唾腺细胞中的染色体总是处在配对状态即体细胞联会，重复复制后的染色体聚集在一起，所以在显微镜下看到唾腺染色体要比一般的染色体大得多，又称多线染色体。
通过细胞遗传学的研究已经证明多线染色体的带纹与某些特定的基因相联系。
由于它的巨大性及其染色体上带纹清晰可数，根据C.B.Bridges等人的研究，至少已经发现5149条可以区别的带纹并已经建立了带纹分布图。
因此巨大染色体是遗传学上研究染色体形态结构及染色体畸变的好材料。
三、实验材料及仪器1.实验材料：普通果蝇的三龄幼虫。
2.实验仪器：双筒解剖镜、显微镜、解剖针、镊子、生理盐水、载玻片、盖玻片、改良苯酚品红染液、擦镜纸、吸水纸。
四、实验方法及步骤1.幼虫的培养为了在解剖镜下便于操作，使用的幼虫应发育充分而且个体较大。
在实验中，人们通常采用两个措施控制幼虫的生长。
1)良好的培养基提供了果蝇生长发育的必需营养，因此在培养瓶内放置的亲本不易过多，否则将产生过多的卵而造成养分不足。
2)培养果蝇的环境温度应比正常培养时略低一些，一般可控制在16～20℃范围内，低温下生长的果蝇个体较大。
果蝇属于完全变态的昆虫，成虫交尾后将卵产在培养基内。
在适宜的温度下，卵发育为幼虫并经过一、二龄幼虫的发育后，三龄幼虫要爬到瓶壁上化蛹，最后成熟的蛹羽化成为新一代的果蝇。
为了能够在实验时获得较多的幼虫，可以分批将亲本放入培养瓶。
实验时从培养瓶的瓶壁上挑选那些发育良好的、个体较大的幼虫。
2.调试双筒解剖镜在解剖前一定要先将解剖镜调试好，在调试时，先在载物台上放一张有字的纸作参照，用粗螺旋调节到一个固定位置，以看清载物台纸上的字为准。
实验二果蝇唾腺染色体标本的制备与观察
目录前言 (1)实验一果蝇的性状观察和性别鉴定 (2)实验二果蝇唾腺染色体标本的制备与观察 (3)实验三果蝇的单因子实验 (5)实验四果蝇的伴性遗传 (7)实验五果蝇的三点测交实验 (9)实验六减数分裂的制片与观察 (11)实验七去壁低渗法制备植物染色体标本 (15)实验八染色体核型分析 (18)实验九植物多倍体的人工诱导和鉴定 (20)实验十小鼠骨髓细胞染色体标本制作与观察 (22)实验十一染色体的分带实验 (24)实验十二诱变物质的微核检测试验 (26)实验十三粗糙链孢霉的杂交 (27)实验十四太原市污水对大麦根尖遗传损伤的研究 (30)前言遗传学实验是生物科学专业的一门专业基础课程，是一门独立的实验课程，同时也是为了配合遗传学的教学而开设的一门实验课程,本课程由验证性、综合性、设计性等多层次实验内容构成，目的在于巩固和加深学生对遗传学知识的理解、验证遗传学理论、并初步掌握遗传学研究所必需的基本实验技术。
在此基础上，进行一定比例的综合性、设计性实验，将实验理论和实验技能融为一体，从而培养学生的基本实验思想、实验方法、实验技能和综合应用能力。
本课程的任务是从个体、细胞、分子三个水平揭示遗传学的基本现象与规律，培养学生牢固掌握经典遗传学研究方法与技术，并初步掌握现代遗传学实验操作技能，熟悉遗传学分析方法，同时要求学生初步具备进行遗传学创新性研究的基本能力与素质。
实验一果蝇的性状观察和性别鉴定实验二果蝇唾腺染色体标本的制备与观察一、实验目的1、练习分离果蝇幼虫唾腺的技术，学习唾腺染色体的制片方法。
2、观察果蝇唾腺巨大染色体的结构特点。
3、了解果蝇唾腺染色体在遗传学研究中的意义。
二、实验原理本世纪初，D. Kostoff用压片法首先在D. melanogaster 果蝇幼虫的唾液腺细胞核中发现了特别巨大的染色体——唾液腺染色体（salivary gland chromosome）。
事实上，双翅目昆虫（如摇蚊、果蝇等）的幼虫期都具有很大的唾腺细胞，其中的染色体就是巨大的唾液腺染色体。
遗传实验02：果蝇唾腺染色体
七、绘图
绘制你所观察到的清晰的果 蝇唾腺染色体的图像。
八、实验ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ析与讨论
1、根据实验的观察可以确定果蝇的染色体 数目吗？ 2、制备果蝇唾腺染色体需注意哪几个关键 步骤？ 3、利用果蝇唾腺染色体可以进行哪些遗传 学研究？
九、参考文献
张贵友，普通遗传学实验指导， 北京：清华大学出版社，2003 卢龙斗、常重杰，遗传学实验技术， 合肥：中国科学技术大学出版社，1996 刘祖洞、江绍慧，遗传学实验， 北京：高等教育出版社，1987
在显微镜下，短小的第4染色体有时不易观 察到，所以最容易识别的是5条（图三）。
雄果蝇的Y染色体几乎包含在染色中心里，因 为是异染色质，看起来染色可能淡?深些。有 经验的人可以发现雄果蝇的X染色体比雌果蝇X 染色体要细些，因为雄性只有一条X染色体。
3.唾腺染色体上的横纹宽窄、深浅是一定的， 但在果蝇的特定发育时期，它们会出现不 连续的膨胀，这称为疏松区（puff），目前 人们认为这是这部分基因被激活的标志。
唾腺细胞中同源染色体互相靠拢呈现联会状 态－体联会； 各染色体的异染色质多的着丝粒部分互相靠 拢形成染色中心(chromocenter)； 唾腺染色体经染色后，出现深浅不同、密疏 各别的横纹(band)，其数目和位置是恒定的， 代表着种的特征； 如果染色体有缺失、重复、倒位、易位等畸 变，很容易在唾腺染色体上识别出来，因此 唾腺染色体是研究染色体畸变的好材料。
三、实验材料
黑腹果蝇的三龄幼虫 为了得到更好的染色体标本，需要在20— 25℃和营养良好的条件下饲养幼虫。选择行 动迟缓、肥大，爬上管壁的三龄幼虫（化蛹 之前）做标本最佳。
三龄幼虫照片
四、实验仪器与试剂
１. 器具： 双筒体视解剖镜、显微镜、镊子、 解剖针、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸等。 ２. 试剂： 改良苯酚品红溶液、生理盐水、1N 盐酸。
02实验二 果蝇唾腺染色体的观察
一、实验目的
1.学习剖取果蝇三龄幼虫唾腺的方法以及制 作果蝇唾腺染色体的方法和技术； 2.观察果蝇的唾腺染色体，注意其作为巨大 染色体的特征： ①巨大，② 染色体上横纹的染色性能、横纹 数目及排列方式，③ 各染色体的异染色质 多的着丝粒部分相互靠拢形成染色中心。
二、实验原理
三、实验材料、器具和试剂
Байду номын сангаас
• 材料：果蝇三龄幼虫活体； • 器具：显微镜，载玻片，盖玻片，镊子， 解剖针（2支），吸水纸，酒精灯； • 试剂：无水乙醇，冰乙酸，1%醋酸洋红， 1mol/L 盐酸，蒸馏水。
四、实验内容和步骤
一）、实验内容： 1．幼虫的培养；2．唾腺的剖取，处理；3．染色、 压片及观察。 二）、实验步骤 １．幼虫培养：营养条件好，温度低则幼虫个体肥 大，便于操作。当幼虫爬上培养瓶壁准备蛹化前， 即为三龄幼虫。 ２．唾腺剖取： 选取一只发育良好，个体肥大的三 龄幼虫置于载玻片上的蒸馏水中，双手各持解剖针， 左手用解剖针压住虫体中后部（末端1/3处），固定 幼虫，右手用解剖针按住幼虫头部（口器稍后方）， 轻轻向前拉，使头部扯离虫体，唾腺会被随之拉出 来，这时可看到一对透明的囊状腺体，其一侧附着 着一条泡沫状脂肪体，这就是果蝇的唾液腺。用解 剖针剔除脂肪体，只保留唾腺。
五、结果
1. 找出染色中心和辨认各条染色体臂，绘制 果蝇唾腺染色体图； 2. 观察染色体上横纹数量、形状和排列顺序。
六、分析讨论
1. 多线染色体的形成原因，染色体上的横纹 与基因座位的排列有何对应关系。 2. 多线染色体玻片制作过程中的操作要领和 注意事项，分析失败的原因。
• 果蝇、摇蚊等双翅目昆虫幼虫期的唾腺细胞很大， 其中的染色体——唾腺染色体，是由500 - 1000条染色 线聚在一起形成的，故又称多线染色体（长约400μm ， 宽约5μm ，比普通染色体大千倍），是进行染色体畸 变观察和研究的好材料。 • 果蝇的唾腺位于幼虫前端的食道两侧和神经球附近。 其中的唾腺染色体是由于唾腺细胞只长大但不分裂， 染色体多次复制但不分裂，同源染色体紧密并合在一 起，且染色体的螺旋相当松开，因而形成多线特征的 巨大染色体。 • 唾腺染色体只有5条染色体臂，即2L、2R、3L、3R、 X（端部着丝点染色体），有时也可在染色中心处发现 短小的（点状）第IV 号染色体，而Y染色体几乎包含 在染色中心里。
《果蝇唾腺染色体的制备及观察》实验综述报告
DOI：10.16661/ki.1672-3791.2020.17.204《果蝇唾腺染色体的制备及观察》实验综述报告①叶玉娟 宁丙乾 陈艳荣(黄山学院生命与环境科学学院 安徽黄山 245041)摘 要：该文阐述了本科院校遗传学实验课程中难度较大的《果蝇唾腺染色体的制备及观察》实验，从培养材料起，对唾腺的剥离、解离、染色、压片，再到观察唾腺染色体的实验步骤和注意事项都进行了详细的叙述。
该实验对本科院校生物学专业学生具有非常重要的意义，不仅能帮助学生掌握剥离果蝇幼虫唾腺的关键技术，也使学生更直观地了解到多线染色体的形态特征和遗传学特征。
关键词：唾腺染色体 染色 实验综述中图分类号：Q243 文献标识码：A 文章编号：1672-3791(2020)06(b)-0204-02Abstract:This paper describes the experiment of "preparation and observation of salivary gland chromosome of Drosophila melanogaster", which is very diff icult in the course of genetics experiment in undergraduate colleges.From the point of culture materials, the experiment steps and precautions of salivary gland chromosome observation are described in detail. This experiment is of great signif icance to biology students of undergraduate colleges. It can not only help students master the key technology of stripping salivary gland of Drosophila larvae, but also help students understand the morphological and genetic characteristics of multiline chromosomes more directly.Key Words: Salivary gland chromosome; Dyeing; Experimental overview1 实验目的（1）掌握剥离果蝇幼虫唾腺的技术，并学习制作果蝇唾腺染色体标本的方法。
果蝇唾腺染色体的标本制备和观察
果蝇唾腺染色体的标本制备和观察果蝇(Drosophila melanogaster)是生物学研究中常见的模式生物之一，其唾腺染色体是生物学中经常使用的标本之一。
本文将介绍如何制备果蝇唾腺染色体标本，并展示如何观察这些标本。
制备标本材料制备果蝇唾腺染色体标本需要的材料如下：•果蝇成虫•酒精•醋酸•乙醇•0.5% 的乙酸-洋红溶液•1% 的氧化铬酸钾溶液•100% 的甘油•盖片•显微镜步骤1.将成虫放入酒精中，浸泡5分钟至失去活性。
2.用镊子将成虫头部部分取下，然后将其剪开，将唾液腺取出。
3.将唾液腺置于醋酸中浸泡2分钟，然后转移到乙醇中浸泡2分钟，最后放入1%的氧化铬酸钾溶液中浸泡1-2分钟。
4.从氧化铬酸钾溶液中将唾液腺转移到100%的甘油中浸泡1-2分钟，以使其变色，然后将其取出，并放入盖片上。
5.加入0.5%的乙酸-洋红溶液，然后用另一个盖片覆盖，压扁唾液腺。
6.将盖片放入显微镜，用40倍或100倍放大倍数观察。
观察标本染色体结构果蝇唾腺染色体呈现为极细线状，可根据其结构分为两类：•染色体较长的一端为钩状，称为钩端。
•另一端较短，称为非钩端。
染色体数量成虫染色体数目为8条，如下：•一对#1染色体•一对#2染色体•一对#3染色体•两对#4染色体染色体组成果蝇唾腺染色体由DNA和蛋白质组成，其中蛋白质主要为组蛋白和非组蛋白。
通过以上步骤，我们可以轻松制备果蝇唾腺染色体标本，并通过显微镜观察其结构和数量。
这对于生物学研究和遗传学研究具有重要意义。
果蝇唾液腺染色体制片和观察
实验报告课程名称遗传学实验实验名称果蝇唾液腺染色体制片和观察一、实验原理果蝇唾腺染色体是永久间期染色体，只发生DNA复制，不发生有丝分裂。
在幼虫唾腺细胞内，每条染色体进行了10次左右的复制，形成了约210=1024条染色体拷贝，再结合同源染色体的配对，共用约2048条同源染色体拷贝进行体细胞联会，形成比正常有丝分裂中期的染色体大200倍的、巨大的多线染色体。
这些染色体的着丝点聚集在一起，形成染色中心，同源染色体的两臂向外伸展。
经过染色，唾腺染色体的显示出独具本染色体特色的带和间带模式。
这个模式是恒定的，可用用于基因的定位，如果发生染色体的结构变异，则可以通过模式的改变而发现出来。
不同的染色体，其端部不同，可以用于鉴别染色体。
在观察唾腺染色体时，会发现膨胀泡结构，这是强烈的基因转录迹象。
二、实验结果图一：果蝇幼虫解剖针分离后效果图图二：剥离的腺体一共分离了3条果蝇幼虫才分离出较清晰的唾液腺体，在分离出带腺管的2侧腺体时，上面还有其他东西，因为想剥离的干净一点，所以没急着拍照，结果分离到一半时，一条腺体丢失，所以照片仅显示剥离中期时剩的一条腺体。
图三：唾腺染色体（借用）图四：唾腺染色体——图片放大（借用）带与间带、染色中心、膨胀泡、3R端部（僧帽）特点如上图标示。
三、总结反思从挑取果蝇幼虫，到幼虫的头身分离和剥离腺体，再到染色，这些操作的较为顺畅，并没有出现大的失误。
虽然刚开始分离的两条幼虫因为手法生疏，并没有分离出完整的腺体，但是第三次尝试时就分离出带腺管的2侧腺体，剥离后还剩一条较为完整的腺体。
染色时操作也较为小心，并未让腺体随水流被滤纸吸走。
就剥离腺体这个操作而言，我觉得这是一个需要耐心、眼力和方向感的事情，可以在剥离的时候将载玻片放在显微镜下，同时2根解剖针也进入显微镜的视野内的两侧，用解剖针判断该划掉哪个方向的一部分，一点点去掉不要的东西，最后就可以留下需要的腺体了。
但是操作一定要细心，腺体特别小，划的时候如果一不小心粘到解剖针上也弄不下来，那条腺体也就没用了。
果蝇唾腺染色体的标本制备和观实验报告
果蝇唾腺染色体的标本制备和观实验报告
实验目的：
通过制备果蝇唾腺染色体标本，观察果蝇的染色体结构，了解染色体的基本性质和遗
传学规律。
实验材料：
果蝇幼虫、0.5% KCl溶液、氯仿、乙醇、木棒、荧光显微镜。
实验步骤：
1、将果蝇幼虫放入酒精中，使其身体僵硬；
2、用木棒将其身体对称裂开，取出唾腺进行制片；
3、将唾腺放入0.5% KCl溶液中，加热至65℃，使细胞膜破裂；
4、倒入等量的氯仿，轻轻摇匀，放置5-10分钟；
5、离心，移去上层液体，加入冰醋酸铅，固定标本；
6、取出标本，放入70%、95%和绝对乙醇中，依次脱水；
7、将脱水后的标本放在载玻片上，滴上染色液，加热至70℃，并静置5分钟；
8、冲洗并抽干，加入透明胶进行封片；
9、通过荧光显微镜观察唾腺染色体的结构。
实验结果：
在进行染色体标本制备后，通过荧光显微镜观察，果蝇唾腺染色体呈现出沿着中心轴
对称排列、长度相等的形态。
每个染色体被分为两个亚单元，其中有着明显的染色体节间。
每个亚单元又被分成数个不同长度的染色体节，节与节之间也有着清晰可见的连接。
实验结论：
染色体是生物遗传信息的主要携带者，表现出其特定的形态和结构。
通过制备果蝇唾
腺染色体标本，观察了果蝇染色体的基本结构和形态，了解了染色体的基本性质和遗传学
规律。
对于研究生物遗传学以及进行基因工程，染色体的结构和功能有着重要的意义。
2. 果蝇唾腺染色体的制备与观察
实验果蝇唾腺染色体的制备与观察一、实验目的1. 练习分离果蝇幼虫唾腺的技术，学习唾腺染色体的制片方法2. 观察了解果蝇唾腺染色体的形态学及遗传学特征二、实验原理1．果蝇是双翅目昆虫，幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的唾液腺染色体；2．唾液腺染色体不断地进行自我复制而不分开，经过许多次的复制形成约1000～4000拷贝的染色体丝，合起来达5mm宽，400mm长，比普通中期相染色体大得多（约100～150倍），所以又称为多线染色体；3．唾液腺染色体具有许多重要特征，为遗传学研究的许多方面，如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料。
三、实验材料与器具•三龄幼虫•0.9%生理盐水•改良苯酚品红 1N盐酸•解剖镜解剖针吸水纸四、实验步骤(1)剥离唾腺在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。
每只手各持一个解剖针，在解剖镜下进行操作。
果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，左手持解剖针按压住虫体后端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。
唾腺是一对透明的棒状腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）。
去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。
(2)染色：吸去生理盐水，注意操作时要边观察边吸湿，最好用解剖针轻压，防止连同唾腺一起吸走；滴加胭脂红染色液，染色20-30min(3)压片：染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。
将片子放在实验台上，用大拇指均匀用力压片。
（注意不要使盖片移动。
）(4)观察：1、将制片置低倍镜下找到分散好的标本，移至视野中心，然后转到高倍镜下观察。
2、对分散良好、染色体臂充分伸展的片子，应仔细观察染色体的横纹数量、形状和排列顺序，对照模式照片辨认出不同的染色体臂五、注意事项1. 一定加生理盐水，否则唾腺易干。
2. 将脂肪组织清除干净3. 水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活跃4. 染色时间不可过长，否则背景也着色5. 压片时要揉，用力要均匀6. 染色完以后，将旧的染色液吸去，加新的染色液，再压片7. 吸水时勿将唾腺一起吸走六、实验结果七、分析讨论1.请画一个有代表性的果蝇唾腺染色体图。
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为什么还要对唾腺染色体进行研究呢？
果蝇染色体在科学研究中还有较重要的作用。 1953年发现了DNA的双螺旋结构，当时发现的DNA为B 型DNA，螺旋结构为右旋，每旋转一圈为10个碱基 （右旋结构还包括A型C型等），后来人工合成了左旋 的DNA（CGCGCG），这种DNA称为Z型DNA，每旋转一圈 为12个碱基，那么在自然条件下的生物中是否存在Z 型的DNA呢？ 研究发现部分蛋白可以特异结合左旋DNA，Z型DNA在 注射到动物体内后很快会诱导抗体的产生，而B型DNA 却不易诱导抗体的产生，用人工合成的Z-DNA免疫动 物诱导得到抗体，该抗体用荧光标记以后对果蝇的唾 腺染色体进行杂交，发现部分区域有强的荧光信号， 证实了自然条件下Z-DNA的存在。
（二）实验材料
大果蝇的三龄幼虫 该阶段幼虫体型大，唾腺较大，容易取材，应 取爬上管壁的幼虫为宜
（三）实验步骤
1）分离唾腺；
将幼虫放在含有一滴生理盐水的洁净载玻片上。在解剖镜下观察： 幼虫头部有黑色的口沟，尾端有一对黄色的后气门。双手各持一 枚解剖针，用左手解剖针压住幼虫中部，用右手解剖针自幼虫口 沟后切断头部，体内各器宫便从切口处挤出，一对唾腺也随之而 出。
4. 染色体上出现深浅不同的带纹
染色体中带纹的出现是由于染色体结合染料的深浅不 同导致的，DNA螺旋相对致密的区域染色较深；每条 染色体上带纹的排列通常是恒定的，但是不同发育时 期带纹可能会有变化，显示了基因表达的变化，有时 部分区域的带纹消失，出现染色体的膨胀，称为疏松 区（puff）。
Morgen实验室将不同染色体的带纹进行划分并 进行命名，用染色体带纹的不同检测诱变产生 的突变体，通常可以检测到的突变包括染色体 的缺失、重复、倒位等，可以看到染色体上形 成缺失环、倒位环等。
实验二 果蝇唾腺染色体
（一）实验原理
果蝇等双翅目昆虫幼虫的唾腺细胞很大，其中 的染色体称为唾腺染色体，该染色体比普通的 染色体大很多，又称为巨大染色体。由于体细 胞的染色体通常较小，对其进行研究较为困难， 果蝇巨大的染色体是研究染色体的好材料。
唾腺染色体特征
1. 巨大
唾腺细胞通常认为是处于间期或前期的细胞，其 染色体连续进行多次细胞内复制却不进行细胞的 分裂，染色体的各拷贝不分开，大约有1000-4000 根染色体丝拷贝，是普通染色体的100-150倍。
缺失环
倒位环
多线染色体
果蝇的唾腺染色体中含有多条染色体拷贝，称 为多线染色体（Polytene chromosome）。除 唾腺以外，在消化道等部位也有多线染色体的 存在，但是这些部位的多线染色体复制次数通 常没有唾腺多，因此染色体较唾腺染色体细。 除果蝇以外，在摇蚊等昆虫中也存在多线染色 体。DNA模板量的增加可能是基因表达调控的 一种手段。
唾腺是一对透明的棒状腺体，通常每个腺体上附着一 个白色的脂肪体，是鉴别唾腺的重要标志。
2）将唾腺以外的其他部分以及脂肪体去除备 用。 3）1M盐酸水解3min；水洗三次，每次1-2min； 苯酚品红染色20min 4）压片观察；加盖玻片以后用大拇指用力压 片。可以稍微轻搓一下，但是要向同一个方向， 可能会使细胞分散的更好些。 5）显微镜下寻找分散较好唾腺染色体，观察 唾腺染色体的特点，并绘图。
唾腺染色体特征
3.各染色体着丝粒部分相互靠拢形成染色 中心 果蝇的2,3号染色体为中着丝粒染色体，可 以看到两条染色体臂；4号染色体为点状染 色体，通常不易观察到；X染色体为端着丝 粒染色体，只能看到一条染色体臂；因此 唾腺细胞中通常能看到的染色体是由染色 中心向外伸出五条
内复制 S 合成期
G1
唾腺染色体特征
2. 体细胞配对 果蝇的体细胞中共有8条染色体，其中有3 对常染色体，1对性染色体，唾腺细胞同源 染色体之间相互配对（类似减数分裂前期 I），形成一条染色体，我们称为体细胞配 对，因此在果蝇的唾腺细胞中只能看到四 条巨大的染色体，染色体数只有体细胞的 一半 。