附苯酚标线及测定方法
紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤
紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤紫外可见分光光度法是一种常用的分析方法，可用于测定无机和有机物质的浓度。
在本实验中，我们将利用紫外可见分光光度法测定苯酚的含量。
下面是实验步骤。
实验原理苯酚在紫外和可见光区都有吸收峰，根据它的吸收峰特征可以测定其含量。
在本实验中，我们将利用苯酚在240 nm处的吸收峰进行测定。
实验仪器、试剂以及玻璃仪器仪器：紫外可见分光光度计试剂：苯酚、甲醇玻璃仪器：比色皿、移液管、醇灯、玻璃棒、烧杯等。
实验步骤步骤1：制备苯酚样品溶液将1 g的苯酚粉末称到50 mL的烧杯中，加入约30 mL甲醇并混合均匀，然后用甲醇稀释到50 mL。
最后用玻璃棒搅拌至完全溶解。
步骤2：制备苯酚标准曲线将制备好的苯酚样品溶液定容到50 mL，在紫外可见分光光度计中，设置检测波长为240 nm，然后将苯酚标准溶液分别放入比色皿中，取0、0.2、0.4、0.6、0.8 mL苯酚标准溶液，然后用甲醇稀释成10 mL。
最后，利用紫外可见分光光度计测量各个标准溶液的吸光度。
步骤3：测定未知样品将待测样品取5 mL，加甲醇稀释成50 mL，然后放到紫外可见分光光度计中测量样品的吸光度。
根据标准曲线可以计算出样品中苯酚的含量。
注意事项1.制备苯酚样品溶液的时候，要充分混合均匀，防止苯酚沉淀。
2.操作过程中，不可碰触紫外光管等易损部件。
3.实验前，应进行紫外可见分光光度计的预热操作，以保证测试准确性。
实验结果及分析根据实验测定的吸光度可以绘制出苯酚标准曲线，通过计算未知样品的吸光度，即可求出其苯酚含量。
对测量的结果进行分析，可以了解到此方法的准确性和可行性。
总结本实验介绍了紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤。
通过本实验的学习，不仅能够掌握该分析方法的原理、仪器和操作要点，还能够提高实验技巧，从而为今后的实验研究奠定基础。
苯酚检测方法
苯酚检测方法嘿，你问苯酚检测方法啊？那咱就来聊聊呗。
首先呢，可以用化学分析法。
就是用一些化学试剂来检测苯酚。
比如说用三氯化铁试剂，把它滴到可能含有苯酚的溶液里，如果溶液变成紫色，那就说明里面可能有苯酚哦。
这个方法比较简单，但是不太准确，只能大概判断一下。
还有一种方法是分光光度法。
这个就稍微复杂一点啦。
先把要检测的样品处理一下，然后用分光光度计来测量样品的吸光度。
根据吸光度的值，就可以算出里面苯酚的含量啦。
这个方法比较准确，但是需要一些专业的设备。
另外呢，还可以用色谱法。
比如说气相色谱法或者液相色谱法。
把样品注入到色谱仪里，然后根据苯酚在色谱图上的出峰时间和峰面积，就可以确定苯酚的存在和含量啦。
这个方法非常准确，但是设备也比较贵，操作也比较复杂。
我记得有一次，我们在实验室里做实验，要检测一个水样里有没有苯酚。
我们先用了化学分析法，滴了三氯化铁试剂，发现溶液变成了紫色，我们就觉得里面可能有苯酚。
但是为了更准确地确定苯酚的含量，我们又用了分光光度法。
我们把水样处理好后，放到分光光度计里测量吸光度。
最后算出了苯酚的含量。
还有一次，我们去一个工厂检测废水，他们怀疑废水里有苯酚。
我们就用了色谱法，把废水注入到液相色谱仪里。
果然，在色谱图上看到了苯酚的峰，我们就确定了废水里有苯酚，还测出了含量。
总之呢，苯酚的检测方法有很多种，你可以根据自己的需要和条件选择合适的方法。
要是你只是想大概判断一下有没有苯酚，化学分析法就可以啦。
要是你需要准确地知道苯酚的含量，那就可以用分光光度法或者色谱法。
水质 挥发酚的测定 4-氨基安替比林分光光度法(HJ 503-2009 )
目次前言 (iv)1 适用范围 (1)2 规范性引用文件 (1)3 术语和定义 (1)方法1 萃取分光光度法4 方法原理 (1)5 干扰及消除 (1)6 试剂和材料 (2)7 仪器和设备 (3)8 样品 (3)9 分析步骤 (3)10 结果计算 (4)11 精密度和准确度 (4)12 质量保证和质量控制 (5)方法2 直接分光光度法13 方法原理 (5)14 干扰及消除 (5)15 试剂和材料 (5)16 仪器和设备 (5)17 样品 (5)18 分析步骤 (5)19 结果计算 (6)20 精密度和准确度 (6)21 质量保证和质量控制 (6)附录A（规范性附录）酚贮备液的标定 (7)附录B（资料性附录） 4-氨基安替比林的提纯 (8)水质挥发酚的测定4-氨基安替比林分光光度法警告：乙醚为低沸点、易燃和具麻醉作用的有机溶剂，使用时周围应无明火，并在通风橱内操作，室温较高时，样品和乙醚宜先置冰水浴中降温后，再尽快进行萃取操作；三氯甲烷为具麻醉作用和刺激性的有机溶剂，吸入蒸气有害，操作时应佩戴防毒面具并在通风处使用。
1 适用范围本标准规定了测定地表水、地下水、饮用水、工业废水和生活污水中挥发酚的4-氨基安替比林分光光度法。
地表水、地下水和饮用水宜用萃取分光光度法测定，检出限为0.000 3 mg/L，测定下限为0.001 mg/L，测定上限为0.04 mg/L。
工业废水和生活污水宜用直接分光光度法测定，检出限为0.01 mg/L，测定下限为0.04 mg/L，测定上限为2.50 mg/L。
对于质量浓度高于标准测定上限的样品，可适当稀释后进行测定。
2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。
凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
GB 7489—87 水质溶解氧的测定碘量法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
挥发酚 volatile phenolic compounds随水蒸气蒸馏出并能和4-氨基安替比林反应生成有色化合物的挥发性酚类化合物，结果以苯酚计。
苯酚硫酸法标准曲线
苯酚硫酸法标准曲线
苯酚硫酸法是一种常用的分析化学方法，用于测定某些物质的含量。
标准曲线
是在该方法中常用的一种质量控制手段，它可以帮助我们准确地测定样品中目标物质的含量。
本文将介绍苯酚硫酸法标准曲线的建立方法及其在实验中的应用。
首先，建立苯酚硫酸法标准曲线需要准备一系列不同浓度的标准溶液。
这些标
准溶液的浓度应该覆盖到我们实际样品中目标物质的浓度范围。
然后，我们需要按照苯酚硫酸法的操作步骤，分别对这些标准溶液进行测定，得到它们的吸光度数值。
接下来，我们将这些吸光度数值作为横坐标，对应的标准溶液浓度作为纵坐标，绘制出一条标准曲线。
通常情况下，标准曲线应该是一条直线，其斜率和截距可以通过线性回归分析得到。
这条标准曲线的方程即为苯酚硫酸法的标准曲线方程，可以用来计算未知样品中目标物质的含量。
在实际实验中，我们可以通过测定样品的吸光度数值，代入标准曲线方程，计
算出样品中目标物质的含量。
这种方法简单、快捷，并且具有较高的准确性和精密度，因此被广泛应用于各种领域的分析化学实验中。
总之，苯酚硫酸法标准曲线是一种重要的质量控制手段，它可以帮助我们准确
地测定样品中目标物质的含量。
通过合理的实验设计和数据处理，我们可以建立出准确可靠的标准曲线，并且在实验中得到有效的应用。
希望本文的介绍能够对您有所帮助，谢谢阅读。
苯酚含量的测定方法
苯酚含量的测定方法主要有以下两种：一、高效液相色谱法：1.样品制备：量取适量待测溶液，使用孔径为0.45μm的滤膜过滤，得到待测样品。
2.仪器检查：按洗脱的初始体积比将流动相A（如1.0‰TFA-乙腈溶液）和流动相B（如1.0‰TFA-水溶液）接入高效液相色谱仪的C色谱柱中平衡，检查仪器各系统，确保仪器正常。
3.检测前准备：设置高效液相色谱仪的色谱条件，包括压力警戒、检测波长、流速、进样量、柱温等参数。
随后继续按初始体积比将流动相A和流动相B 接入C色谱柱中，直至C色谱柱内的各物质含量达到动态平衡。
4.苯酚洗脱：将步骤1中得到的样品加入至已平衡的C色谱柱中，按流动相A和流动相B之间的体积比的不同分成多个洗脱阶段，依次对样品中的苯酚进行梯度洗脱，记录色谱图。
5.绘制线性回归方程：精密量取不同浓度的苯酚标准溶液作为标准对照液，按照上述洗脱阶段进行梯度洗脱，记录色谱图，测得标准对照液的吸收峰面积。
以标准对照液浓度为横坐标、以吸收峰面积为纵坐标制作的线性回归方程。
6.苯酚含量测定：将待测样品的苯酚的吸收峰面积代入线性回归方程中，计算得到样品中苯酚的含量。
二、氧化还原滴定法：1.原理：供试品加水溶解后，取适量置碘瓶中，加入溴滴定液和盐酸，摇匀后静置，再加入碘化钾试液和硫代硫酸钠滴定液进行滴定，根据滴定液的使用量计算苯酚的含量。
2.试样制备：制备溴滴定液、碘化钾试液、淀粉指示液和硫代硫酸钠滴定液等所需试剂。
3.操作步骤：按照上述原理中的步骤进行操作，记录滴定结果，并用空白试验校正。
根据滴定液的使用量计算苯酚的含量。
以上两种方法各有特点，可以根据实际需求和实验条件选择适合的方法进行苯酚含量的测定。
紫外吸收光谱法测定苯酚含量
紫外吸收光谱法测定苯酚含量一、实验目的1、了解紫外可见分光光度计的结构、性能及使用方法2、熟悉定性、定量测定的方法二、实验原理紫外分光光度法，又称紫外吸收光谱法，它是研究分子吸收200.0~800.0nm波长范围内的吸收光谱。
紫外吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法。
通过测定分子对紫外光的吸收，可以对大量的无机物和有机物进行定性和定量测定。
苯酚已经被列入有机污染物的黑名单。
但在一些药品、食品添加剂、消毒液等产品中均含有一定量的苯酚。
如果其含量超标，就会产生很大的毒害作用。
苯酚在紫外光区的最大吸收波长λmax=270nm。
对苯酚溶液进行扫描时，在270nm处有较强的吸收峰。
定性分析时，可在相同的条件下，对标准样品和未知样品进行波长扫描，通过比较未知样品和标准样品的光谱图对未知样进行鉴定。
在没有标准样品的情况下，可根据标准谱图或有关的电子光谱数据表进行比较。
定量分析是在270nm处测定不同浓度苯酚的标准样品的吸光值，并绘制标准曲线。
再在相同的条件下测定未知样品的吸光度值，根据标准曲线可得出未知样中苯酚的含量。
三、仪器与试剂1．紫外可见分光光度计2．容量瓶（1000ml、250ml、50ml）3．吸量管（5ml、10ml）4．苯酚（AR）于5支50ml的容量瓶中，用吸量管分别加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml苯酚标准溶液，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。
四、最大吸收波长的选择在标准系列溶液中任取一种，以水为参比，分别在波长200~300nm之间以10为间隔测定其吸光度，在吸光度最大值附近以间隔2nm为单位测定，直至找到最大吸收波长。
五、数据记录及结果分析(1)、标准表(2)、苯酚的吸收曲线图（根据上表任意组标准溶液数据作图）(3)、标准曲线图C phenol （mg/L）标准曲线方程：Y =0 .055+ 0.1515 * X相关系数r=0.9979六、苯酚浓度的测定在相同情况下，直接测定未知样品的吸光度。
苯酚的检测方法
苯酚的检测方法本页仅作为文档封面，使用时可以删除This document is for reference only-rar21year.March目的苯酚含量的检测方法范围常州亚邦精细化工有限公司技术部及各分厂化验室责任技术部、质量负责人及化验员程序含量检测——化学法原理：采用碘量法，利用苯酚与溴反应生成三溴苯酚，过量的溴与碘化钾反应生成碘，用硫代硫酸钠标准溶液滴定，计算出苯酚的含量。
仪器及设备（2）碱式滴定管，50ml；（3）三角烧瓶，500ml；（4）分析天平，准确至。
试剂（1）溴标准溶液，L；（2）硫代硫酸钠标准溶液，L；（3）淀粉指示液，2%；（4）碘化钾，分析纯；（4）盐酸，分析纯；（5）三氯乙烷，分析纯。
检测步骤准确称取约试样，放入500ml碘量瓶中，加水30ml水，精密加入溴标准溶液40ml，加入5ml盐酸，封口，振荡30分钟，静至15分钟，加2g碘化钾，立即封口。
充分振摇后，加入三氯乙烷1ml，用硫代硫酸钠标准液滴定至近终点时加3ml淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失为终点。
含量计算苯酚的含量按下式进行计算：%10001596.0)((%)2211⨯⨯⨯-⨯=MV N V N X 式中 X ：苯酚含量（m/m ），%N 1：溴标准溶液的浓度，mol/L ；V 1：加入溴标准溶液的体积，ml ；N 2：硫代硫酸钠标准液的浓度，mol/L ；V 2：滴定时消耗的硫代硫酸钠标准液的体积，ml ；M ：苯酚样品的称样量，g:苯酚的毫摩尔当量。
允许误差苯酚的两次平行测定结果之绝对差值应不大于%，取其算术平均值作为检测结果。
原理采用气相色谱法将苯酚与杂质组份分离，利用面积归一法计算试样中各组分的含量。
药品及试剂（1）氮气，纯度不小于%（2）氢气，纯度不小于%（3）空气，经硅胶、分子筛充分干燥和净化仪器及设备（1）气相色谱仪（2）色谱工作站（3）微量进样器，1μl（4）色谱柱检测步骤（1）仪器调整：按下列参数调整仪器：汽化室温度：230℃检测器温度：250℃柱箱温度：200℃氮气流速：20ml/min氢气流速：40ml/min空气流速：350ml/min进样量：μl（2）进样检测：用微量进样器吸取样品μl，快速进样，待最后一个组分出峰后停止检测。
检验苯酚的方法
检验苯酚的方法
检验苯酚的方法
一、苯酚溶液的检验
1 、准备苯酚溶液样品。
2 、采用标准溶液（0.1N）T液，苯酚溶液及新鲜的稀硝酸溶液（1:1）共用比色皿中，加入稀硝酸溶液，苯酚溶液的颜色褪去后，将所得混悬液滴入硫酸铋溶液中，当此液呈紫红色时，就说明溶液中有苯酚，量入苯酚的量（ml）就是多少。
3 、用1M有机酸溶液（如醋酸）滴加苯酚溶液中，苯酚溶液呈粉红色，溶液变淡，则表示苯酚的量。
4 、用0.3N烷基胺溶液，将苯酚溶液滴入其中，当混悬液呈棕色，变浊时，表示溶液中有苯酚，量入苯酚的量（ml）就是多少。
二、苯酚溶液的定量
1、准备标准苯酚溶液，其中1ml等于某一固定数量的苯酚。
2、用标准溶液（0.1N）得到一定数量苯酚溶液，将其滴入50ml 烷基胺溶液中，当乳状液由紫色褪色时，表示苯酚的定量等于苯酚溶液的ml数。
3、滴入硫酸铋溶液，当此液呈褐色，就说明溶液中含有苯酚，量入苯酚的量（ml）就是多少。
4、滴入1M有机酸溶液（如醋酸）中，苯酚溶液颜色呈褐色，溶液变暗，则表示苯酚的量。
5、将苯酚及标准溶液（0.1N）共用比色皿中，加入稀硝酸溶液，
此液呈紫红色时，就说明溶液中有苯酚，量入苯酚的量（ml）就是多少。
浅谈苯酚的检验实验方式方法
浅谈苯酚的检验实验方式方法
苯酚，又称苯酚，是一种常用的有机合成原料，是有机化学中使用最普遍的原料之一。
由于其化学特性稳定性和结构复杂性，苯酚在有机合成、分析化学、药物合成等领域得到广泛的应用，因此检验其质量无疑是必不可少的。
那么，苯酚的检验实验方式方法有哪些呢？下面，我们就具体介绍一下苯酚的检验实验方式方法。
首先，苯酚检验实验的方式方法应从检测其含量开始，由于苯酚本身具有极强的毒性和腐蚀性，因此，可以通过采用紫外分光光度法、分光光度法、红外分光光度法和气相色谱法等来检测苯酚的含量。
其次，苯酚的检验实验方式方法还应包括检测其挥发性的方式，挥发性是检测苯酚有效性的重要参数，可以采用抽提法、式热蒸发法等方法检测苯酚的挥发性。
此外，苯酚检验实验方式还应包括检测其热稳定性，首先，可以通过热额定实验，根据所需要的保温温度，将其稀释至合适的比例，再经过预先定定义的热额定，来判断苯酚的热稳定性。
另外，可以采用甲醛测定法、磷酸铵测定法等方法来检测苯酚的热稳定性。
最后，如果要进行苯酚检验实验的方式方法，还应考虑腐蚀性的问题，一般采用硝酸性条件下的硝酸定量法、硫酸定量法等，可以有效地检测苯酚的腐蚀性。
以上就是介绍苯酚检验实验方式方法的全部内容。
通过介绍可以得知，对于苯酚的检验实验，除了要检测其含量、挥发性和热稳定性外，还要注意其腐蚀性的问题，以便正确准确地检测苯酚的质量。
只
有正确选择检验实验方式，才能保证苯酚的质量，为有机合成应用提供有价值的服务。
苯酚检测方法
1、工业苯酚（GB/T 339-2001）1.1技术指标：1.1.1结晶点℃：≥40.21.1.2外观：熔融液体或结晶固体，无沉淀、无浑浊。
1.2仪器一般化验室仪器、水银温度计、玻璃套管。
1.3检验方法1.3.1外观：将液态试样置于50mL比色管中目测。
溶液应无沉沉、无浑浊。
1.3.2结晶点的测定：1.3.2.1温度计：温度范围℃ 0—50 液体：水银最小分度℃：0.11.3.2.2玻璃套管结晶管：长150±2mm，内径：25±1 mm保护管：长160±2mm，内径：38±2 mm1.3.2.3测定步骤（1）样品预先不干燥。
（2）将试样倒入结晶管里，调节试样液面，高于主温度计中间泡上缘15mm，试样填充高度约在60mm。
控制结晶管内试样温度不超过结晶点5℃，然后将结晶管插入保护管中，在室温下冷却。
（3）当试样温度下降至高于结晶温度3℃时，开始上下移动进行搅拌，搅拌时不得接触温度计和结晶管壁。
（4）当发现有结晶出现时，观察温度计读数，当温度恒定（此时停止搅拌）不再升高，继而重新下降，此恒定温度为结晶点，读取结晶点温度。
1.3.2.4精密度：苯酚结晶点两次平行测定之差不应大于0.05℃，取平均值为测定结果。
3.3.1检测方法：按照高效液相色谱法（附录V D）测定。
3.3.2色谱条件：内径4.6mm，长150mm内装十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的不锈钢色谱柱；以甲醇-水-冰醋酸（60:40:1）为流动相；流速0.5ml /分钟或1ml /分钟，检测波长为270nm。
3.3.3溶液配制：3.3.3.1供试品溶液: 取本品约0.5g，精密称定，置100ml量瓶中用流动相溶解并稀释至刻度；这个是水杨酸中含苯酚杂质的检测方法，波长和色谱柱条件合适，样品液浓度和灵敏度可根据具体情况再调整。
酚标准曲线实验报告
一、实验目的1. 熟悉酚标准曲线的制备方法。
2. 学习利用标准曲线法测定未知浓度酚的含量。
3. 培养实验操作技能和数据处理能力。
二、实验原理酚类化合物在酸性条件下，能与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应生成红色的络合物。
在一定浓度范围内，酚的浓度与溶液的吸光度成正比。
通过制备一系列已知浓度的酚标准溶液，绘制标准曲线，可以用于测定未知浓度酚的含量。
三、实验材料与仪器1. 试剂：苯酚、4-氨基安替比林、铁氰化钾、盐酸、蒸馏水。
2. 仪器：紫外可见分光光度计、移液管、容量瓶、烧杯、玻璃棒、滴定管、吸量管、试管等。
四、实验步骤1. 标准溶液的配制（1）准确称取0.1000g苯酚，用少量蒸馏水溶解，转移至100mL容量瓶中，定容至刻度，配制成1000mg/L的苯酚标准溶液。
（2）取10.00mL苯酚标准溶液，转移至100mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，配制成100mg/L的苯酚标准溶液。
（3）分别取2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL的100mg/L苯酚标准溶液，转移至10mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，配制成浓度分别为20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L、100mg/L的苯酚标准溶液。
2. 标准曲线的绘制（1）取5个试管，分别加入1.0mL的盐酸、0.5mL的4-氨基安替比林、0.5mL的铁氰化钾，混匀。
（2）分别加入0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL的苯酚标准溶液，混匀。
（3）室温下放置10分钟，用紫外可见分光光度计在波长505nm处测定吸光度。
（4）以苯酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 未知浓度酚的测定（1）取1.0mL未知浓度酚溶液，按照标准曲线绘制步骤进行测定。
（2）根据标准曲线，计算未知浓度酚的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制根据实验数据，绘制苯酚标准曲线，如图1所示。
图1 苯酚标准曲线2. 未知浓度酚的测定根据标准曲线，计算未知浓度酚的含量为65.4mg/L。
紫外吸收光谱法测定苯酚含量
紫外吸收光谱法测定苯酚含量一、实验目的1、了解紫外可见分光光度计的结构、性能及使用方法2、熟悉定性、定量测定的方法二、实验原理紫外分光光度法，又称紫外吸收光谱法，它是研究分子吸收200.0~800.0nm波长范围内的吸收光谱。
紫外吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法。
通过测定分子对紫外光的吸收，可以对大量的无机物和有机物进行定性和定量测定。
苯酚已经被列入有机污染物的黑名单。
但在一些药品、食品添加剂、消毒液等产品中均含有一定量的苯酚。
如果其含量超标，就会产生很大的毒害作用。
苯酚在紫外光区的最大吸收波长λmax=270nm。
对苯酚溶液进行扫描时，在270nm处有较强的吸收峰。
定性分析时，可在相同的条件下，对标准样品和未知样品进行波长扫描，通过比较未知样品和标准样品的光谱图对未知样进行鉴定。
在没有标准样品的情况下，可根据标准谱图或有关的电子光谱数据表进行比较。
定量分析是在270nm处测定不同浓度苯酚的标准样品的吸光值，并绘制标准曲线。
再在相同的条件下测定未知样品的吸光度值，根据标准曲线可得出未知样中苯酚的含量。
三、仪器与试剂1．紫外可见分光光度计2．容量瓶（1000ml、250ml、50ml）3．吸量管（5ml、10ml）4．苯酚（AR）于5支50ml的容量瓶中，用吸量管分别加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml苯酚标准溶液，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。
四、最大吸收波长的选择在标准系列溶液中任取一种，以水为参比，分别在波长200~300nm之间以10为间隔测定其吸光度，在吸光度最大值附近以间隔2nm为单位测定，直至找到最大吸收波长。
五、数据记录及结果分析(1)、标准表(2)、苯酚的吸收曲线图（根据上表任意组标准溶液数据作图）(3)、标准曲线图C phenol （mg/L）标准曲线方程：Y =0 .055+ 0.1515 * X相关系数r=0.9979六、苯酚浓度的测定在相同情况下，直接测定未知样品的吸光度。
[概述]酚标准曲线
![[概述]酚标准曲线](https://img.taocdn.com/s3/m/31a47b15bfd5b9f3f90f76c66137ee06eff94e82.png)
一、目的和要求
1．掌握酶反应动力学米曼式方程及其各参数意义。
2．掌握利用双倒数作图求解Km和Vmax值。
二、基本原理
利用磷酸苯二钠作为反应底物，酸性磷酸酶催化反应，水解生成苯酚和无机磷酸盐。
通过检测生成的产物苯酚的量可间接计算反应初速度，然后根据不同底物浓度和反应初速率的倒数作图求解Km和Vmax值。
三、试剂与器材
试剂：0.2ml/L,PH=5.6醋酸缓冲液酸性磷酸酶溶液100mmol/L磷酸苯二钠溶液5mmol磷酸苯二钠溶液1mol/L碳酸钠溶液Folin-酚试剂酚标准液
器材：酸性磷酸酶原溶液恒温水浴槽可见分光光度计
四、操作步骤
测定酶的KM值及Vmax值
（1）.取试管7支，按1~6编号，另设0号管为空白管
（2）.按4-5表加入不同体积5mmol/L磷酸苯二钠溶液，并分别补充0.2mol/L,PH=5.6醋酸缓冲液至各管体积达0.5ml
（3）.35摄氏度预热2分钟后，按序逐管加入酸性磷酸酶溶液0.5ml,立即摇匀，每管精确计时，继续保温15分钟。
（4）.反应时间到达后，立即逐管加入1mol/L碳酸钠溶液2ml，摇匀，再加入Folin-酚稀溶液0.5ml
（5）.0号管最后加入酶液0.5ml
（6）.各管冷却后，以0号管做空白，用可见分光光度计在680nm波长处读取各管的吸光度
（7）.从酚标准曲线上查出各管吸光度所相当的酚含量，进而计算各种底物浓度下的反应初速率
（8）.以1/ [S]为横坐标，1/V。
为纵坐标作图，求得Km值和Vmax值
六、数据记录。
苯酚含量的测定(溴酸盐法)(精)
苯酚含量的测定（溴酸盐法）实验项目性质：验证性所属课程名称：《分析化学》实验计划学时：4学时一、实验目的１、掌握碘量法测定苯酚含量的方法原理及碘量法操作的基本技能。
２、了解空白实验的意义和作用，学会“空白试验”的方法和应用。
二、实验内容与要求实验内容：测定苯酚含量实验要求：通过本课程的学习，使学生学习碘量法测定苯酚含量的方法原理及碘量法操作的基本技能。
培养学生理论联系实际，分析问题和解决问题的能力。
三、实验仪器、设备及材料1. 化学试剂：1. 0.0017mol/L KBrO 3-KBr 溶液：在托盘天平上称取1.5克KBr 于烧杯中，加入适量蒸馏水，使其溶解，移入试剂瓶中，加水至500毫升,混匀备用。
2. 6 mol/L Hcl 溶液。
3. 20%KI 溶液。
4. 0.2%淀粉溶液,取0.2克可溶性淀粉，加少量水调成糊状溶于100毫升沸水中，此溶液使用前现配制。
5. K 2Cr 2O 7 (分析纯,基准物)。
6. 0.1mol/L Na 2S 2O 3 溶液。
2. 仪器和设备常规玻璃仪器四、实验原理利用准确过量的KBr KBrO --3溶液，在酸性介质中发生反应，定量地放出2Br 。
O H Br H Br BrO 2233365+→+++--所产生的Ｂr 2与苯酸发生取代反应，溴可取代苯酚芳环上的氢，定量地生成稳定的三溴苯酚白色沉淀：剩余的Ｂr 2与过量ＫＩ作用，将ＫＩ中的Ｉ－氧化I 2,，然后用3220S Na 的毫克当量数之差，即可计算出苯酚的含量。
由苯酚与Br 2的反应可知，一个分子苯酚相当于6个原子的溴。
苯酚的式量=94.11五、实验步骤1. 0.1mol/L Na 2S 2O 3 溶液的配制与标定配制方法:：在托盘天平上称取13克Na 2S 2O 3 5H 2O 毫升烧杯中，加入场300毫升新煮沸的冷蒸馏水，待完全溶液后，加入0.2克Na 2S 2O 3，然后，加水稀释至500毫升，保存于棕色磨口瓶中，在暗处放置7~10天后标定。
3.紫外分光光度法测定苯酚
实验四紫外分光光度法测定苯酚1.目的要求⒈学会使用UV-2102PC型紫外可见分光光度计。
⒉掌握紫外光谱法定量分析方法与原理。
2．基本原理苯酚在220-380nm处具有特征吸收，因此其含量可用紫外分光光度计作测定，不需进行显色反应，方法简便，快速，且准确度高。
3. 仪器与试剂⒈仪器：UV-2102PC型紫外可见分光光度计； 10mL吸量管1只； 50mL容量瓶7个； 100mL容量瓶5个。
2.试剂：0.250g/L苯酚标准溶液准确称取25.0mg分析苯酚，溶于适量水中，全部转移至100mL 容量瓶中，用纯水稀释至刻度，摇匀。
4. 实验步骤⒈绘制吸收光谱图和选择测量波长用吸量管取4mL0.250g/L苯酚标准溶液于50ml容量瓶中，用纯水稀释至刻度，摇匀。
此溶液在UV-2102PC型紫外可见分光光度计上，用1cm石英液槽，以纯水为参比溶液，于波长220-380nm 范围内，分辨精度1nm，绘制吸收光谱图，并选择测量波长λmax.⒉绘制标准曲线取5只50mL容量瓶，由吸量管分别加入2.00、4.00、6.00、8.00、10.0mL0.250g/L苯酚标准溶液，以纯水稀释至刻度。
摇匀。
得一系列苯酚标准溶液。
用1cm石英液槽，以纯水为参比溶液，在选定波长处测上列各标准溶液的吸光度。
绘制标准曲线。
⒊试样溶液的测定用移液管取适量试样溶液于50mL容量瓶中,按上述步骤2配制溶液并测定吸光度。
平行测定二份。
（黑体字部分实验报告中请按自己实际操作撰写）5．数据处理⒈根据实验所苯酚吸收光谱曲线，运用理论知识根据吸收谱带的位置形状及吸收强度（摩尔吸光系数），对所做谱图进行解析，判断苯酚紫外光谱的吸收带与跃迁类型。
2绘制标准曲线，并由曲线求算试样溶液中苯酚量（mg/L）.6．问题讨论本实验测定时能否用玻璃液槽代替石英液槽盛放溶液，为什么？紫外光谱实验参考文献紫外及可见光谱包括有几个谱带系，不同的谱带系相当于不同电子能级的跃迁。
11-紫外分光光度法测定苯酚标准曲线
一、实验目的掌握紫外光谱法进行物质定性、定量分析的基本原理；2、学习紫外--可见分光光度计的使用方法。
二、实验原理含有苯环和共轭双键的有机化合物在紫外区有特征吸收。
物质结构不同对紫外及可见光的吸收具有选择性。
其中，最大吸收波长λ、摩尔吸收系数ε及吸收曲线的形状不同是进行物质定性分析的依据。
由于在λmax处吸光度A有最大值，在此波长下A随浓度的变化最为明显，方法的灵敏度最大，故在紫外分光光度计上作苯酚水溶液（试液）的吸收光谱曲线，再由曲线上找出λmax，据此对物质进行定量分析。
用紫外分光光度计进行定量分析时，若被分析物质浓度太低或太高，可使透光率的读数扩展10倍或缩小10倍，有利于低浓度或高浓度的分析，其方法原理是依据朗伯-比耳定律：A=εbc。
三、主要仪器与试剂主要仪器：紫外-可见分光光度计；1cm石英吸收池2个；50mL比色管5支；5mL、1支；吸耳球1个。
试剂：苯酚标准溶液：100mg/L；四、实验步骤(1)、分析溶液的配制取5支50mL的比色管，用移液管分别准确加入0.5mL、1mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL浓度为100mg/L的苯酚标准溶液，用去离子水稀释至25mL刻度，摇匀。
实验数据记录于标准表中。
(2)、确定最大吸收波长取稀释后浓度为8 mg/L的苯酚标准溶液，在紫外-可见分光光度计上，用1cm石英吸收池，去离子水作参比溶液，在200~330nm波长范围内进行扫描，绘制苯酚的吸收曲线。
在曲线上找出λmax1、λmax2。
(3)、标准曲线的制作各浓度的苯酚标准溶液，用1cm石英吸收池，去离子水作参比溶液，在选定的最大波长下，按顺序从低至高浓度依次测量各溶液的吸光度，实验数据记录于标准表中。
以吸光度对浓度作图，作出标准工作曲线。
五、数据记录及结果分析标准曲线图六、思考题紫外分光光度计的基本结构。
苯酚检验操作规程
目的：为检验苯酚辅料规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。
范围：适用于苯酚的检验。
职责：检验员、检验室主任。
规程：1.性状：本品为无色或微红色的针状结晶或结晶性块；有特臭；有引湿性；水溶液显弱酸性反应。
遇光或在空气中色渐变深。
本品在乙醇、氯仿、乙醚、甘油、脂肪油或挥发油中易溶，在水中溶解，在液状石蜡中略溶。
1.1 凝点：称取本品约15g，置内管中（加微温使熔融），按凝点测定法（SOP-QC- 354-00）测定，本品的凝点应不低于40℃为符合规定。
2. 鉴别2.1 试剂与仪器2.1.1 三氯化铁试液 2.1.2 溴试液2.1.3 烧杯（20ml） 2.1.4 刻度移液管（5ml）2.1.5 试管 2.1.6 滴管2.1.7 IR470型红外光谱仪 2.1.8 电子天平（万分之一克）2.2 项目与步骤2.2.1 称取本品0.1g，置烧杯中，加水10ml溶解后，照下述方法试验。
2.2.2 吸取上述溶液5ml，置试管中，加三氯化铁试液1滴应即显蓝紫色为符合规定。
2.2.3 吸取上述溶液5ml置试管中，加溴试液，即生成瞬即溶解的白色沉淀，但溴试液过量时，即生成持久的沉淀。
2.2.4 红外光光度法鉴别：取本品按红外光光度法（SOP-QC-302-00）膜法测定，本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致为符合规定。
3.检查3.1 仪器3.1.1 称量瓶 3.1.2 蒸发皿3.1.3 小型三用水箱 3.1.4 直热式电热恒温干燥箱3.1.5 电子天平（万分之一克）3.2 步骤3.2.1 称取本品5.0g，置蒸发皿中，置水浴上挥发后，在105℃干燥至恒重，遗留残渣应不得过2.5mg为符合规定。
4. 含量测定4.1 试剂与仪器4.1.1 溴滴定液（0.1mol/l） 4.1.2 盐酸4.1.3 碘化钾试液 4.1.4 氯仿4.1.5 硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/l) 4.1.6 淀粉指示液4.1.7 称量瓶 4.1.8 容量瓶(500ml)4.1.9 单标移液管 4.1.10 刻度移液管4.1.11 振摇超声仪 4.1.12 碱式滴定管4.1.13 碘量瓶250ml 4.1.14 铁架台4.1.15 电子天平(万分之一克)4.2 检验步骤4.2.1 溴滴定液(0.1mol/l)的制备: 按溴滴定液(0.1mol/l)(SOP-QC-353-00)制备方法配制。
苯酚的紫外光谱的绘制及定量测定
苯酚的紫外光谱的绘制及定量测定
苯酚的紫外光谱的绘制及定量测定可以通过以下步骤进行：
绘制苯酚的紫外光谱：
（1）准备苯酚样品：将苯酚溶解在适当的溶剂中，例如甲醇或乙腈，制备成适当浓度的溶液。
（2）准备紫外光谱仪：将紫外光谱仪预热并校准，确保仪器处于良好状态。
（3）设置参数：设置扫描范围、扫描速度、扫描间隔等参数，这些参数将影响光谱的精度和分辨率。
（4）开始扫描：将制备好的苯酚溶液倒入样品池中，开始扫描紫外光谱。
（5）记录数据：在扫描过程中，记录每个波长下的吸光度值。
定量测定苯酚：
（1）选择合适的工作曲线：根据苯酚的浓度范围，选择合适的工作曲线，例如线性工作曲线或非线性工作曲线。
（2）绘制工作曲线：使用不同浓度的苯酚溶液，按照相同的方法绘制紫外光谱，并记录每个波长下的吸光度值。
将这些数据点绘制在图上，拟合一条直线或曲线作为工作曲线。
（3）测定未知样品：将未知样品的苯酚溶液按照相同的方法绘制紫外光谱，并记录每个波长下的吸光度值。
（4）定量分析：根据工作曲线的斜率和截距，计算未知样品中苯酚的浓度。
需要注意的是，在进行定量分析时，需要保证实验条件的一致性，包括溶剂、温度、pH值等。
此外，还需要注意紫外光谱仪的校准和仪器的维护保养，以保证实验结果的准确性和可靠性。
苯酚浓度的测定紫外分光光度法
紫外分光光度法测定苯酚的浓度
一、实验目的
1．掌握紫外分光光度法测定酚的原理和方法。
2．掌握应用紫外分光光度计进行定量分析的方法和基本操作。
二、实验原理
苯酚是工业废水中的一种有害物质，如果流入江河，会使水质受到污染，因此在检测饮用水的卫生质量时，需对水中酚含量进行测定。
苯具有环状共轭体系，由π→π*跃迁在紫外吸收光区产生三个特征吸收带：强度较高的E1带，出现在180nm左右；中等强度的E2带，出现在204nm左右；强度较弱的B带，出现在255nm。
有机溶剂、苯环上的取代基及其取代位置都
可能对最大吸收峰的波长、强度和形状产生影响。
具有苯环结构的化合物在紫外光区均有较强的特征吸收峰，在苯环上的部分取代基（助色团）使吸收增强，而苯酚在270nm处有特征吸收峰，在一定范围内其吸收强度与苯酚的含量成正比，符合Lambert-Beer定律，因此，可用紫外分光光度法直接测定水中总酚的含量。
三、实验步骤
1.原溶液的配制
准确称取0.0250g苯酚与烧杯中，用蒸馏水溶解后定容于100ml的容量瓶中，则此溶液的浓度为250mg/L。
2.标准溶液的配制
取5支50ml的容量瓶，分别编号为1、2、3、4、5，向其中分别移取1ml、5ml、10ml、20ml、40ml的250mg/L的苯酚溶液，并用蒸馏水定容。
计算其浓度分别
3．标准曲线的测定
选择苯酚的最大吸收波长（270nm），用1cm石英比色皿，以溶剂空白（去离子水）作参比，按浓度由低到高顺序依次测定苯酚标准溶液的吸光度。
四、数据记录与处理。
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1 苯酚的测定方法
一、仪器
分光光度计。
二、试剂
1．缓冲溶液(pH 约为10)：称取2g 氯化铵(NH 4Cl)溶于100mL 氨水中，加塞，置于冰箱中保存。
2．2%(m/V)4-氨基安替比林溶液：称取4-氨基安替比林(C 11H 13N 3O)2g 溶于水，稀释至100mL ，置于冰箱内保存。
可使用一周。
注：固体试剂易潮解、氧化，宜保存在干燥器中。
3．8%(m/V)铁氰化钾溶液：称取8g 铁氰化钾{K 3[Fe(CN)6]}溶于水，稀释至100mL ，置于冰箱内保存。
可使用一周。
三、测定步骤
1．标准曲线的绘制：于一组50 mL 比色管中，分别加入0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00、10.00、12.50mL 苯酚标准中间液，加水至50 mL 标线。
加0.5mL 缓冲溶液，混匀，此时pH 值为10.0±0.2，加4-氨基安替比林溶液1.0mL ，混匀。
再加1.0mL 铁氰化钾溶液，充分混匀，放置10min 后立即于510nm 波长处，用20mm 比色皿，以水为参比，测量吸光度。
经空白校正后，绘制吸光度对苯酚含量(mg)的标准曲线。
已测定。
标线如下：
苯酚标准曲线
0.2
0.4
0.60.8
050100150
苯酚质量ug
吸光度
3．水样的测定：分取适量滤出液于50mL 比色管中，稀释至50mL 标线。
用与绘制标准曲线相同步骤测定吸光度，计算减去空白试验后的吸光度。
空白试验是以水代替水样，经蒸馏后，按与水样相同的步骤测定。
水样中苯酚的含量按下式计算：
苯酚 式中：m —水样吸光度经空白校正后从标准曲线上查得的苯酚含量(mg)；
V —移取滤出液体积(mL)。
V
m mg/L)(。