红细胞不规则抗体
不规则抗体筛选红细胞试剂简介.ppt
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血红蛋白试剂盒（硫酸铜比重法）
• 【检验结果的解释】 • 1. 若待检全血标本比重大于试剂比重，则15秒
内下沉于瓶底，表明血红蛋白初筛检测合格； 2. 若待检全血标本比重等于试剂比重，则在试 剂液面或中段悬浮15秒后下沉，表明血红蛋白 初筛检测合格； 3. 若待检全血样本比重小于试剂比重，则上浮 且15秒内不下沉，为血红蛋白初筛检测合格不 合格。
50µl)滴于瓶内， 1瓶试剂筛检血滴不能多于50滴。 • 2.打开女用试剂2(蓝色)瓶盖，将女性受检者新鲜全血标本一滴(约
50µl)滴于瓶内， 1瓶试剂筛检血滴不能多于50滴。
• 3. 滴加标本时应距试剂液面1cm并将其垂直滴入,15秒内观察血滴 下沉情况。
• 【参考值（参考范围）】 • 成年男性全血比重≥1.052 (相当于血红蛋白含量≥120 g/L) • 成年女性全血比重≥1.050(相当于血红蛋白含量≥110 g/L)
• 【储存条件及有效期】 • Hb试剂盒贮存于10℃－40℃的干燥环境
中，有效期为12个月，有效期为12个月。 • 【适用仪器】 • 本试剂为独立使用的筛查试剂，无需与
仪器配合使用。 • 【样本要求】 • 样本要求：应为人新鲜全血标本。
血红蛋白试剂盒（硫酸铜比重法）
• 【检验方法】 • 1.打开男用试剂1(绿色)瓶盖，将男性受检者新鲜全血标本一滴(约
• 【预期用途】 • 本试剂盒主要用于采供血机构对献血者全血中
血红蛋白（Hb）含量范围的筛检。 • 【检验原理】 • 血红蛋白能与硫酸铜形成蛋白质的铜盐，人体
新鲜全血标本滴入硫酸铜溶液后在其外表面形 成一层铜盐包膜，能在10－15秒内保持外形完 整而不改变比重。因此比较全血与一定浓度的 硫酸铜溶液的比重来判断全血的比重，进而筛 查出全血血红蛋白含量的范围。
红细胞血型不规则抗体检测在临床输血中的应用
红细胞血型不规则抗体检测在临床输血中的应用目的通过对输血患者进行红细胞血型不规则抗体检测，分析本地区患者不规则抗体的类型与分布情况。
方法应用微柱凝胶卡法或盐水试管法对39243例住院患者进行红细胞血型不规则抗体进行检测，并对检出的不规则抗体进行抗体特异性鉴定。
结果共检出红细胞血型不规则抗体202例，检出率为0.51%，其中Lewis 系统57例（28.24%）；Rh血型系统51例（25.24%）；MNSs系统37例（18.32%）。
结论输血前对患者进行红细胞血型不规则抗体检测，对避免或减少发生免疫性溶血的输血反应有重要意义。
标签：不规则抗体；抗体特异性；输血反应红细胞血型不规则抗体的检测对于预防与诊断免疫性溶血性输血反应有重要意义。
我院从2010年开始应用微柱凝胶卡试剂对患者输血前常规进行不规则抗体检测，报告如下。
1材料与方法1.1 一般资料我院2010年2月~2014年2月的住院的患者进行血型不规则抗体检测39243例。
1.2 试剂与仪器Ortho BioVue抗人球蛋白检测卡（Ortho Clinical Diagnostics 公司）、Ortho Bliss液（Ortho Clinical Diagnostics公司）、筛选细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ（上海血液生物医药有限责任公司）、谱细胞（上海血液生物医药有限责任公司）、Ortho AutoVue Innova全自动血型仪、Ortho BioVue System孵育器及离心机（Ortho Clinical Diagnostics公司）。
所有试剂均在有效期内使用。
1.3 标本处理EDTA-K2标本2ml，1000g离心6min备用。
1.4 不规则抗体检测使用Ortho AutoVue Innova全自动血型仪对标本进行不规则抗体检测，加样、温育、离心、判读结果全部由仪器自动完成。
1.5 不规则抗体特异性鉴定不规则抗体阳性的标本同时用盐水试管法和微柱凝胶卡法与谱细胞及自身红细胞（浓度均为1%）反应，根据与谱细胞的反应格局判断抗体的特异性。
三种红细胞不规则抗体筛选试验方法的比较
Ｃｏ ｍｐ ｒｓ ｎ ｏ ｈ ｅ ｃ ｅ ｎ ｎ ｅ ｔ ｏ ｅｅ ｔ ｅ ｅｌｉ ｒ ｇＪａ ｎ ｉ ｏ ｙ Ｓ Ｎ ｉ ｏ ｇ ，ＸＵ Ｈｕｇ ｎ ， ａ ｉｏ ｆｔ ｒ ｅ ｓ ｒ ｅ ｉ ｇ ｔｓ ｓ ｆ ｒ ｄ ｔ ｃ ｉ ｒ ｄ ｃ ｌ ｒ ｅ Ｉ ｒ ａ ｔ ｄ Ｕ Ａ ｎ ｎ ｎｇ ｌ ｂ ｉｅ
ＷＵＸａｙｎ ，ＨＵ Ｎ ｉ ｈ ｎ ‘ Ｕ Ｂ ｎ ｅ ，Ｈ Ｎ ｕｈ 。 （ ． Ｂｏｄ Ｃ ｎ ｒｏ ｅ ｒ ｓｉ ｈｎ ｓａ ， ｉ ａ‘ ｏ Ａ Ｇ Ｘａ ｏｇ ，Ｘ ｅｗ ｉ ｏ Ａ Ｇ Ｙｃ ｕ． １ ｌ ｅｔ Ｒｄ Ｃｏ ｎ Ｚ ｏｇｈ ｎ ｏ ｅ ｆ ｓ
中图分类号 ： ４６ １ Ｒ４ ．１
文献标识码 ： Ａ
三种 红 细胞 不 规 则 抗 体 筛 选试 验 方 法 的 比较
孙 爱农 许 惠根 吴 晓燕 黄 小红 徐本 卫 梁玉初 ， ， ， ， ，
（ ．中山市红十字 中心血站 ， １ 广东 中山 ５ ８０ ； ．中山火炬开发区医院， ２４ ３ ２ 广东 中山 ５ ８３ ） ２４７
Ｇ ａ ｇ ｏ ｇ Ｚｈ ｎ ｓ ａ ２ ４ ３， Ｃ ｉ ａ； ２ Ｚｈ ｎ ｓ ａ Ｔ ｒｈ ｅ ｅｏ ｍ ｎ Ｚ ｎ ｓ ｉ ｕｎ ｄｎ ｏｇｈ ｎ ５ ８ ０ ｈｎ ． ｏ ｇ ｈ ｎ ｏ ｃ Ｄ ｖ ｌ ｅ ｔ ｏ ｅ Ｈｏｐ ｔ ｐ ａ， Ｇｕ ｎ ｄ ｎ Ｚ ｏ ｇ ｈ ｎ ａ ｇ ｏ ｇ ｈ ｎ ｓａ
摘要 ： 目的 寻找简便 、 快速 、 敏感 的红细胞不规则抗 体筛选 的试验方法 。方法 采 用蛋 白水解酶法 、 抗球
蛋 白法 （ Ｇ ） 聚凝胺 三步法试验 （ Ｓ Ｔ 平行检测一批 Ｒ 、 Ｎ ｓ Ｄ 、 ｉｄ等系统 的不规则抗体效 价， ＡＴ及 ＴＰ） ｈ Ｍ Ｓ 、 ｕ Ｋｄ 观察
红细胞不规则抗体对输血安全的影响
红细胞不规则抗体对输血安全的影响目的：探讨红细胞不规则抗体分布特点及对输血安全的影响。
方法：选取笔者所在医院临床收治的3 272例申请输血的患者作为研究对象，均行红细胞不规则抗体筛查。
对比红细胞不规则抗体阳性者与阴性者的输血反应情况。
结果：33例患者红细胞不规则抗体检测结果为阳性。
阳性检出率为1.01%，其中男10例，阳性检出率为0.55%（10/1 811），女23例，阳性检出率为1.57%（23/1 461），女性红细胞不规则抗体阳性检出率显著高于男性，差异有统计学意义（P＜0.05）。
不规则抗体阳性患者抗-e、抗-Lea、抗-Fya、抗-Jka检出率最低，均为0.03%；抗-Ce检出率也较低，为0.06%；抗-M检出率最高，为0.21%；抗-E检出率次之，为0.18%；再次为抗-Ec，为0.15%；抗-D、自身抗体及非特异性抗体检出率均为0.09%。
不规则抗体的Ig类型：IgG共22例（66.67%），IgM+IgG共5例（15.15%），IgM共6例（18.18%）。
47例输血后发生不良反应，以荨麻疹、瘙痒等过敏反应占大部分比例，其中发热/心率异常7例，溶血/血常规异常14例。
血制品类别分布：悬浮红细胞7例，血浆21例，血小板17例，冷沉淀2例。
7例有妊娠史，12例有输血史，14例有输血合并妊娠史。
356例输红细胞制剂患者为无效输血，其中不规则抗体阳性15例，占无效输血人数的4.21%。
结论：红细胞不规则抗体阳性会影响输血安全，输血前进行抗体筛选、鉴定有助于减少输血不良反应和输血无效的发生，保障输血安全。
标签：输血；红细胞；不规则抗体；不良反应血型为人类的遗传性状之一，不同人种、不同个体的血型抗原分布差异较大，异体输血可产生不规则抗体，从而造成交叉配血困难，增加输血不良反应发生风险[1]。
红细胞不规则抗体，指的是红细胞抗体以外的抗体，有输血史或妊娠史的群体更易产生红细胞不规则抗体，红细胞不规则抗体可引起血型鉴定困难、新生儿溶血病、输血不良反应等，所以输血前进行红细胞不规则抗体筛查、鉴定，对于保证输血的有效性及输血安全具有重要作用[2]。
不规则抗体检测操作规程14-22
红细胞不规则抗体检测操作规程1．0 目的规范红细胞血型抗体筛选、鉴定操作，保证临床用血的安全性及有效性。
2．0 适用范围适用于输血科（血库）抗体筛选血标本、疑难血型标本及疑难配血标本。
3．0 材料抗球蛋白试剂、筛选细胞、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管。
4．0 设备普通离心机、血型血清专用离心机、电热恒温水浴箱、显微镜。
5．0 抗体筛选操作步骤5．1 取试管3支，分别标记Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，各加入患者血清2滴，再分别加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号筛选细胞2滴。
5．2 混匀，37℃孵育1h。
5．3 1300g离心15s。
5．4 轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集结果并记录。
若肉眼不见凝集，以显微镜检查。
5．5 对没有凝集的试管，用盐水充分洗涤3次。
5．6 最后一次洗涤后，离心去上清，将试管边缘盐水用滤纸吸干。
5．7 按试剂说明书加最适释度抗球蛋白试剂1滴，充分混合。
5．8 1300g离心15s。
轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集反应，记录结果。
6．0 抗体鉴定步骤6．1 抗体筛选阳性，应作抗体鉴定试验以确定其特异性。
6．2 依据谱细胞数量的多少（一般由8～16个单人份的已知血型表型的O型红细胞组成）取相应数目的试管，分别标记序号，各加入患者血清2滴，再分别加入谱细胞2滴。
6．3 混匀，37℃孵育1h。
6．4 1300g离心15s。
6．5 轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集结果并记录。
若肉眼不见凝集，以显微镜检查。
6．6 对没有凝集的试管，用盐水充分洗涤3次。
6．7 最后一次洗涤后，离心去上清，将试管边缘盐水用滤纸吸干。
6．8 按试剂说明书加最适稀释度抗球蛋白试剂1滴，充分混合。
6．9 1300g离心15s。
轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集反应，记录结果。
7．0 注意事项7．1 按《临床输血技术规范》第十七条要求，必须对交叉配血不合时，对有输血史、妊娠史或短期内接受多次输血者进行抗体筛选试验。
7．2 抗体筛选有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体，并可在配血前有足够的时间来选择缺乏相应抗原的相配合的血液，避免由于寻找不到相合的血液而造成患者不能及时输血。
拟输血住院患者红细胞不规则抗体情况分析
拟输血住院患者红细胞不规则抗体情况分析摘要】目的:对入院拟输血患者血型不规则抗体检出结果情况进行回顾性分析。
方法:应用微柱凝胶免疫检测技术对我站友好进修交流医院的19847例入院患者进行不规则抗体筛查, 对抗体阳性者进一步作抗体鉴定。
结果: 在被检标本中共发现122 例不规则抗体阳性, 阳性率为0.6147%,不规则抗体阳性者男性41例,占被调查男性的0.2066%,女性81例,占被调查女性的0.4081%,女性高于男性，经统计学处理，说明之前差异具有统计学意义（P<0.05）；在122例不规则抗体阳性的患者中，有98患者有输血史/妊娠免疫史，站被调查总例数的0.4938%，且差异性具有统计学意义（P<0.05）。
在不规则抗体筛查阳性的患者中自身抗体28 例，抗-D、抗-E、抗-Ec、抗-C、抗-M、抗-Lea、抗-Leb、抗-Pl、抗-Fya、抗-Fyb、抗-Jka、抗-Mur有94例。
结论:输血前进行红细胞不规则抗体情况进行了解，对安全、有效、及时地输血具有重要的意义。
【关键词】血型；红细胞；不规则抗体；抗体筛查【中图分类号】R2 【文献标号】A 【文章编号】1671-8725（2014）11-0121-01红细胞血型不规则抗体(IABE)是血型鉴定、交叉配血难及溶血性输血不良反应的主要原因[1]，可能导致溶血性输血不良反应、新生儿溶血病和红细胞输注无效等严重威胁着输血安全的情况。
本文通过对拟输血住院患者红细胞不规则抗体的筛查情况分析，说明输血前进行红细胞不规则抗体情况进行了解具有重要意义。
1 材料与方法1.1 标本来源选择来我站友好进修交流医院就医的在妇产科、血液科、肾病科、骨科等科室，有备(输)血需求的患者共19847 人次，同一患者如多次检测只取第1次检测结果。
在19847名拟输血住院患者中,有男女性10229例，性9618例，女性：男性=1.0635。
有输血史/妊娠免疫史病例9751 例(49.13%), 无输血史/妊娠史病例10096 例(50.87%)。
不规则抗体引起的红细胞输注无效原因分析
不规则抗体引起的红细胞输注无效原因分析摘要：目的通过一例红细胞输注无效原因分析，探讨临床输血后疗效评估和实验室规范化操作在不规则抗体引起的输注无效中的重要性。
方法输血后测定血红蛋白观察预期升高值，并与输血前进行对比，检测输注的4袋红细胞Rh表现型。
结果其中2次配合性输血后血红蛋白均上升，2次不配合性输血后血红蛋白未上升，不规则抗体造成输注无效。
结论不规则抗体不相合的输血可能会造成输注无效，无效输血浪费了宝贵的血液资源、增加患者医疗费用、延误患者的治疗。
因此输血前实验室应规范化操作，临床应进行输血疗效评估，及时发现存在的问题，以确保临床输血安全、有效。
关键词：血型不规则抗体血红蛋白输注无效输血安全有效中图分类号：R457.12输血是现代医治疗中常用的支持治疗的重要手段，这种治疗手段可以在较短的时间使患者的生命体征恢复正常，得到明显的治疗效果，但如果检测技术不规范，漏捡不规则抗体，有些不相合的输血就会出现输血反应，有些虽然不出现明显的输血反应，但输血后血红蛋白却不能达到预期的效果，出现了无效输血，有些患者血红蛋白甚至会下降，但临床上往往对无效输血未引起足够的重视，我院遇到一例由不规则抗体造成的输注无效，现报告如下：资料与方法1 一般资料患者，女，23岁，汉族，无妊娠史、有多次输血史，2013年9月因葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏引起的贫血，住我院进行输血治疗，连续4天输注红细胞悬浮液，每天输注2U（400ml）,到第4天做交叉配型时发现不能配合，查找原因患者血清中存在不规则抗体，同时发现患者第一天输注后无不良输血反应，血红蛋白升高0.8g/L，第2、3天红细胞输注后血红蛋白均未上升，并伴有轻微了发热和寒战，第4天交叉配型时发现不能配合，进一步做抗体筛查试验为阳性，经省血液中心血型参比室抗体鉴定，患者血清中检出不规则抗体，根据抗体特异性进行了配合性输血，输注后无不良输血反应，血红蛋白上升10g/L。
材料和方法1 试剂抗-A、抗-B、抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e、抗lgG、ABO试剂红细胞、抗体筛查细胞、谱细胞由上海血液中心提供；聚凝胺由（台资）珠海贝索生物技术有限公司提供。
不规则抗体筛选红细胞试剂简介
不规则抗体反应引起的危害
• 轻者引起寒战、发热，影响治疗效果； 轻者引起寒战、发热，影响治疗效果； • 重者破坏输入的不配合的红细胞或缩短其寿命，产生 重者破坏输入的不配合的红细胞或缩短其寿命， 溶血性输血反应，危机病人生命； 溶血性输血反应，危机病人生命； • 对孕妇而言，不规则抗体会引起新生儿溶血病，影响 对孕妇而言，不规则抗体会引起新生儿溶血病， 新生儿脏器的发育，并使其智力发育受到伤害， 新生儿脏器的发育，并使其智力发育受到伤害，严重 者则会危及新生儿的生命安全。 者则会危及新生儿的生命安全。
血红蛋白试剂盒（硫酸铜比重法） 血红蛋白试剂盒（硫酸铜比重法）
• 【注意事项】 • 1.使用前应检查试剂瓶有无破损，瓶内试剂有无浑浊，如有上述 情况，则不能使用。 2.应选择基本符合采血现场温度的试剂盒。 • 3.从人体采出全血 (37℃左右)后，不宜将其立即滴入试剂中，应 将其平衡至室温后再滴入试剂中。 4.在观察标本下沉情况时，不能振摇塑料瓶，避免血液中的蛋白 微粒导致试剂混浊而影响筛检结果。 5.全血标本中不得含气泡，否则影响筛检结果。 6.试剂液面应保持清洁，如有血液凝块浮在液面，应用玻璃棒消 除，以免影响下一标本筛检。 7.1瓶试剂筛检全血血滴不能多于50滴，滴入全血标本后的试剂不 可储存后再使用。检测结束时，应将其视为污染物进行处理。
血红蛋白试剂盒（硫酸铜比重法） 血红蛋白试剂盒（硫酸铜比重法）
【产品名称】 通用名称：血红蛋白试剂盒（硫酸铜比重法） 商品名称：无 英文名称：Reagent kit for Hemoglobin (Copper Sulphate Specific Gravity) 【包装规格】 14℃≤t＜18℃使用：试剂1(男用)48×85 ml；试剂2(女用)48×85 ml • 18℃≤t＜22℃使用：试剂1(男用)48×85 ml；试剂2(女用)48×85 ml • 22℃≤t＜26℃使用：试剂1(男用)48×85 ml；试剂2(女用)48×85 ml • 26℃≤t≤30℃使用：试剂1(男用)48×85 ml；试剂2(女用)48×85 ml • • • • • • •
微量板法和试管法检测红细胞不规则抗体的探讨
自动 化 微 量 板 ， Ｐ ｒ Ｔ检 测 献 血 者 Ｒ Ｃ— Ａ ， 作 简 便 迅 速 ， 合 大 批 标 本 筛 查 。 ｓ Ｂ Ｉｂ操 适
【 关键词】 红细胞不规则抗体 微量板法 试管法 聚凝胺三步法试验
Ｅ Ｃ Ｃ ｅ Ｓ Ｆ Ｊ Ｍ、 Ｐ 、 、 、 、 、 ｙ、ｋ 、 Ｎ、 １由加 拿 大 Ｄ ｍｎｏ ｏ ｉ ｎ公 ｉ
以 １ ０ ｒｎ离心 １ｍｎ 用 腕力一次性弃上 清液 ， ０ｒａ ０ ／ｉ ｉ， 此 时应 能看到红 细胞凝块 ， 再加入 ３ ｌ ０ 中和溶液 ， 轻 并
１４ 抗人球蛋 白（ Ｈ 、 ． Ａ Ｇ） 试验 用红 细胞 等相 关试剂
１６３ 微量板盐水法 ２ ｌ ．． ０ 试剂红细胞与 ３ 血清 ０
（ 或血 浆 ） 合 ， 荡 仪 上 混 匀 后 １００ ｒｍｎ离 心 混 振 ０ ／ ｉ
１ｍ ｎ观察结果 ， ｉ， 出现凝集者为 阳性反应 ， 反之为阴性 。 １６ ４ 试管盐水法 １滴 （ Ｏ ） ．． ５ 试剂红 细胞 与 ２滴
抗人球蛋 白（ 多特 异性 ） 抗 体筛查 细胞 由上海 血液 生 、 物 医药有 限责任公 司提供 ， ３个细胞 组成 ， 由 包括 Ｒ ， ｈ
（０ １血清或血浆 混合 ， １０ｗ ） 室温孵育 １ ｉ ， ０ ０ｒｍ ｎ ｎ ３ ０ ｉ ｍ ／
—
抗体鉴定细胞反应 ， 以试管法 进行抗体筛选 ， 阳 若 性反应 ， 混合前 的 １ 原始标本 重新进行 抗体筛 再将 ０份 选， 阳性者用 Ａ Ｔ并 以抗体鉴定细胞进行不规则抗体鉴 Ｇ
定， 必要时进行 吸收放散试验 ， 以确定抗体特异性。
临床输血患者红细胞血型不规则抗体分析
血。然而，由于血 液、血 液 制 品 有 着 比 较 复 杂 的 抗 原 及 抗 体
成分，导致在治疗过程中，有的患者会发生程度、类型均不同
的输血不良反应情况。近些年来，随着输血技术以及血型鉴
定单克隆检 测 试 剂 灵 敏 度 的 日 益 升 高，目 前 很 少 会 出 现 因
ＡＢＯ 血型鉴定错误 而 引 发 的 速 发 性 溶 血 性 输 血 不 良 反 应。 然而，依旧有报道显示，血液制品输注、母婴血型不合妊娠以
本研究以本院接收的２０５６７例输血患者为例展开分析， 发现１０５例红 细 胞 血 型 不 规 则 抗 体 呈 阳 性，阳 性 检 出 率 为 ０．５１％。在１０５例血型不规则抗体呈阳性的患者中，１０例为 非特异性抗体，主要为血液科（包括白血病、多发性骨髓瘤以 及自身免疫性溶血性贫血等）患者，不规则抗体的存在会在 一定程度上干扰这些患者的血型鉴定以及交叉配血等。此 外，９５例为同种特异性抗体，其中占比最大的为 Ｒｈ血型系 统［２］。现极端，我国采供血以及医疗机构仅展开 ＲＨ（Ｄ）及 ＡＢＯ 抗原检测，并采取抗原相 合 性 输 血，以 避 免 产 生 不 规 则 抗体抗Ｄ，但是在输血以后，患者产生抗Ｄ 的概率不大，但 并没有针对 ＲＨ 血型系统的其他抗原，如抗Ｅ、抗Ｃ等展开 特殊筛查与检测，只是对其进行随机输血，这便增加了患者 输血后抗Ｅ、抗Ｃ等抗体的产生概率，因而需引起临床的高 度重视［３］。
血型不规则抗体也被称为血型意外抗体，指的是血清中 除了抗Ａ 与抗Ｂ以外的其他血型抗体，其主要通过免疫刺 激（如异体输血、妊娠等）而产生，会导致母婴血型不合性、交 叉配血不相合、溶血性输血不良反应等情况的出现。在此种 情况下，为充分确保输血的安全性，就应当积极检测并鉴定 输血患者体内红细胞血型不规则抗体情况。基于此，本文作 者以本院２０５６７例次输血患者为例，就其血型不规则抗体阳 性检出率及分布情况展开分析，现报告如下。 １ 资料与方法 １．１ 一般资料
不规则抗体筛查试验
不规则抗体筛查试验（SOP）【产品名称】通用名称：不规则抗体检测试剂（人血红细胞）英文名称：Red Blood Cells Reagent for Irregular Antibody Test【包装规格】每盒有OⅠ、OⅡ、OⅢ红细胞各1瓶，5ml/瓶，浓度4%。
【生产企业】企业名称：长春博迅生物技术有限责任公司【预期用途】有临床意义的不规则抗体会导致溶血性输血反应，破坏输入的红细胞或缩短其寿命，轻则影响治疗效果，重则危及病人生命；对于孕妇而言，不规则抗体会引起新生儿溶血病，影响新生儿脏器及智力发育，严重者则会危及新生儿的生命。
对受血者和献血者进行不规则抗体检测，能够发现有临床意义的抗体，从而减少溶血性输血反应。
本品采用凝聚胺方法检测待检血浆（血清）是否存在不规则抗体，只用于临床检测，不用于血源筛查。
【检验原理】本实验原理为血凝试验。
红细胞上含有D、C、E、c、e、Jk a、Jk b、M、N、s、Fy a、Fy b、k、Le a、Le b、P1，该实验用已知抗原的红细胞与待检血浆（血清）孵育，以发现待检血浆（血清）中是否存在不规则抗体。
【主要组成成份】本品由3人份（单人份/瓶）直接抗人球蛋白试验阴性的O型健康成人红细胞组成，红细胞上含有能引起溶血性输血反应的抗原，抗原谱至少包括Rh系统的D、C、E、c、e抗原，Kidd系统的Jk a、Jk b抗原，MNS系统的M、N、s抗原，Kell系统的k抗原，Duffy系统的Fy a、Fy b抗原，Lewis系统的Le a、Le b抗原，P系统的P1抗原。
每套试剂红细胞中至少有2人份红细胞含有D、C、c、e、s、Fy a、k抗原，至少1人份红细胞含有E、Jk a、Jk b、M、N、Fy b、Le a、Le b、P1抗原。
OⅠ红细胞5ml×1OⅡ红细胞5ml×1OⅢ红细胞5ml×1不同批号的红细胞试剂不可以互换。
【储存条件及有效期】2~8℃保存。
输血前进行不规则抗体检验的临床意义
输血前进行不规则抗体检验的临床意义输血前进行不规则抗体检验是一项非常重要的临床检查，它可以帮助医生识别受血者体内可能存在的不规则抗体，从而避免输血后发生不良反应，保障受血者的安全。
不规则抗体是指在受血者体内出现的对供者红细胞表面抗原的异常免疫反应，如果输血时未能及时发现并作出相应处理，可能会引发输血反应，严重时甚至危及受血者的生命。
进行不规则抗体检验是保障输血安全的必要步骤，具有非常重要的临床意义。
不规则抗体检验是通过检测受血者血清中的抗体，来确定是否存在与供血者红细胞抗原不相容的抗体。
这些抗体可能是由于先前的输血、妊娠、移植或其他免疫刺激所引起的。
当受血者的血液中含有与供血者红细胞上的抗原相对应的抗体时，如果进行相应抗原的输血治疗，就会发生输血反应。
输血反应的临床表现包括发热、寒战、恶心、呕吐、皮疹、黄疸等，严重者可能导致溶血性贫血、急性肾衰竭、休克甚至死亡。
及时发现并认识到受血者体内的不规则抗体，对于输血后的治疗是至关重要的。
不规则抗体检验还能够对血液制品的安全性起到重要作用。
在临床输血过程中，由于供血者和受血者之间的免疫差异，不同的人可能产生不同的抗体反应。
如果未对受血者进行不规则抗体检验，就有可能输注带有相应抗原的血液制品，从而导致输血反应的发生。
对于某些特殊的输血人群，如婴儿、孕妇等，不规则抗体检验更是必不可少的一项检查，因为这些人群可能因为各种原因产生不同种类的抗体，需要根据检测结果来选择合适的血液制品。
不规则抗体检验对于确保输血的安全性和适用性都是至关重要的。
在临床实践中，不规则抗体检验通常是在血液科、输血科及外科手术前进行的。
在一般的临床实践中，不规则抗体检验是通过间接抗人球蛋白试验（IAT）来进行的。
这种试验利用受血者的血清与标准红细胞悬液（通常是Rh阳性和Rh阴性的红细胞）反应，以确定受血者是否存在不规则抗体。
也可以通过直接抗人球蛋白试验（DAT）来检测受血者红细胞表面是否存在补体或抗体的结合，帮助诊断溶血性疾病。
红细胞不规则抗体筛选标准操作规程
红细胞不规则抗体筛选标准操作规程
1、目的
为规范输血科红细胞规则抗体筛选的技术操作，确保检测结果准确及临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.8条款的要求制定本规程。
2、适用范围
本文件适用于本院输血科红细胞规则抗体筛选的操作技术的规范化管理。
3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。
4、试验方法及原理：
不规则抗体是指不符合ABO血型系统Landsteiner法则的血型抗体，多数为免疫性抗体（IG性质），输血前受血者体内若发现此类抗体，应输入无对应抗原的红细胞，以避免抗原抗体反应，引起溶血性输血反应。
若产妇体内发现此类抗体，则应确定其效价并观察其效价变化，以避免其引起新生儿溶血病的发生。
目前不规则抗体筛查是采用已知抗原表型的O型试剂红细胞，在不同温度下、采用不同介质筛查被检血清中有无有临床意义的不规则抗体。
常用的方法有盐水凝集试验、聚凝胺试验、抗人球蛋白试验、酶试验等。
本科根据本科实际情况采用盐水凝集试验、聚凝胺试验、抗人球蛋白试验筛查不规则抗体。
其反应原理同配血试验。
不规则抗体筛查【范本模板】
不规则抗体检查不规则抗体检查也称红细胞抗体检查。
不规则抗体是指抗Ａ、抗Ｂ以外的血型抗体。
ＡＢＯ系中的亚型,变异型抗Ａ1或某种抗Ｂ等抗体,也称为不规则抗体。
其多为ＩｇＧ抗体。
主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生,在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。
临床上通常所称的“同型血”实际上是指ＡＢＯ血型系统和Ｒｈ血型系统相同,其它红细胞血型系统未必相同。
如果交叉配血不仔细，或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ＡＢＯ血型系统之外的不规则抗体，而此抗体与相应抗原发生免疫反应,可导致溶血性输血反应的发生.红细胞血型抗体检查适用于下列情况：1、ABO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时；2、供血者血清抗体筛检;3、输血前受者血清抗体检查；4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时；5、孕妇血清的抗体检查；6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查；7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。
1. 原理利用筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应，如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体。
2. 试剂2。
1 5％筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)2.2 凝聚胺试剂2.3 直接抗人球试剂外周血或静脉血3. 操作步骤3。
1 取试管三支，标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并往各管加病人血清（血浆)2滴,加5%筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）各1滴。
3.2 各加LIM0。
7ml，混合均匀后，再各加Polybrene 溶液2滴，并混合均匀。
3.3 用BASO专用离心机1000G离心力，离心10秒,然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0。
1ml液体。
3.4 轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重作。
3.5 最后加入Resuspending 2滴，轻轻转动试管混合并同时观察结果。
如果凝集散开，表示是由Polybrene引起的非特异性聚集，抗体筛检结果为阴性；如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，抗体筛检结果为阳性，应进一步作抗体鉴定。
不规则抗体筛查标准操作规程
不规则抗体筛查标准操作规程(一)检验目的检测受血者、孕妇等血清中是否存在抗A、抗B以外的不规则抗体，为交叉配血、ABO血型正确定型(不规则抗体干扰反定型)以及新生儿溶血病产前、产后诊断提供参考依据。
(二)检验原理1.盐水介质法IgM类不规则抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应，使用手工试管法就可以判断受检者血液中是否存在IgM类不规则抗体。
2.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集消散，而被不规则抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判断受检者血液中是否存在不规则抗体。
3.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
4.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3)，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，而未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、手工微柱凝胶法、手工玻璃珠微柱法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法不规则抗体筛查及鉴定试验。
(四)设备性能参数各种用于不规则抗体筛查试验的检测系统性能指标参见相应说明书。
(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型配血系统、阅片灯箱、卡式专用离心机、孵育器、塑料软试管、塑料硬质试管(75m m×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移液器、一次性移液枪头。
不规则抗体筛选
实验方法和抗体筛选实验相同
携手共进，齐创精品工程
Thank You
世界触手可及
抗球蛋白试验
抗球蛋 白
实验步骤
1# 2#
3#
受检者血清
2滴 2滴 2滴
筛选用红细胞悬液1# 1滴
筛选用红细胞悬液2#
1滴
筛选用红细胞悬液3#
1滴
自身 2滴
受检者5%红细胞悬液
1滴
混匀后置37℃水浴30分钟后，用生理盐水洗
涤3次（怎么洗）最后1次用吸水纸吸尽盐水， 然后加1滴抗球蛋白血清，混匀后以3400rpm 离心15秒钟，轻摇，观察结果。
不规则抗体筛选
《临床输血技术规范》
明确规定部分病人应做“抗体筛选” 检测，第四章第17条：“凡遇以下情况 必须按《全国临床检验操作规程》有关 规定做抗体筛选试验：1、交叉配血不 合的； 2、对有输血史、妊娠史或短期 内需接受多次输血者。
为什么要开展输血前的“抗体筛 选”检查
1、目前已知红细胞有26个抗原系统（确认21 个，如ABO、Rh、MN、LW、MNS、JK等），500 多种抗原（确认200多种）。红细胞抗原的多 样性决定了抗体的多样性，检测抗A、抗B、抗 D（ABO血型、Rh血型）可确保绝大多数病人的 输血安全，但仍不能避免因血型不合（ABO、 Rh血型以外）而引发的溶血。
抗体筛选技术要求
尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 尽可能快的完成抗体检测
方法选择：每种方法都有自己的 特点，适应于不同范围及情况
盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反 应活性抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法 会检查出无临床意义的抗体，如冷凝集素抗 －I及抗－IH等，而且会漏检IgG性质的抗体。
输血科不规则抗体(红细胞血型抗体筛查)标准操作程序
输血科不规则抗体（红细胞血型抗体筛查）标准操作程序红细胞血型抗体检查适用于下列情况：①ABo血型鉴定发现受检者血清中有ABO血型以外的抗体时；②供血者血清抗体筛检；③输血前受血者血清抗体检查；④输血后溶血性输血反应疑为由同种抗体引起时；⑤孕妇血清的抗体检查；⑥新生儿溶血病婴儿血液中抗体检查；⑦直接抗人球蛋的试验阳性红细胞上抗体的检查。
［试剂］1、试剂红细胞由血型参比实验室或血液中心提供，或由各血库从供血者或工作人员中进行普查得到，筛查红细胞以2个或3个人抗原互补的不同的红细胞为1套，单独分开分装，因为单一的筛查红细胞较混合红细胞提供较高的敏感性。
2、血清标本，虽然血清和血浆中都存在相同的红细胞抗体，但一般都采用血清进行抗体检查，因为：①如果血浆中的凝血系统发生部分激活，就可以产生纤维蛋白，干扰对凝集的解释；②只有通过激活补体的作用才能证实的抗体，不能在血浆中检出；③常用的抗凝剂是结合来防止凝固，而Ca"对于补体的激活是必不可少的。
血清标本的采取时间应注意，例如：受血者血样一定要在48小时内采集。
为了检出由于最近红细胞刺激而产生的抗体，血样必须是新近的。
如果抗体筛查结果阴性，有时需要隔数天后重新采样复查，因为此时抗体的浓度可逐渐增强。
［操作］适用于红细胞抗体筛查及其特异性鉴定的方法很多，应根据不同情况采用。
1、凝聚胺法(I)取受检者血清2滴于标好的试管中；(2)取筛查红细胞悬液1滴于每个试管中；(3)各加低离子介质溶液O.6ml,混合均匀后，静置1分钟，再各加凝聚胺渗液2滴，混合均匀，静置15秒。
(4)3400转离心15秒，然后把上清液倒掉。
(5)轻摇试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集则必须重作。
(6)最后加入重悬液2滴，轻轻转动试管混匀并同时观察结果，结果判定：如果凝集在60秒内凝集散开，代表是由凝聚胺溶液引起的非特异性凝集，结果为阴性，如凝聚不散开结果为阳性，应进一步做抗体鉴定。
艾伦试验的判断标准
艾伦试验判断标准艾伦试验是一种用于检测红细胞表面是否存在不规则抗体的实验方法。
以下是艾伦试验的判断标准，包括五个方面：抗体筛选红细胞在艾伦试验中，首先需要用已知的抗体对红细胞进行筛选。
如果红细胞表面存在与已知抗体相对应的抗原，则红细胞会被抗体结合并沉降。
通过观察沉降情况，可以初步判断红细胞表面是否存在不规则抗体。
抗体筛选血清除了筛选红细胞，艾伦试验还需要对血清进行抗体筛选。
将已知的抗原溶液加入到血清中，并观察血清中是否存在与抗原相对应的抗体。
如果血清中存在与抗原相对应的抗体，则抗原-抗体复合物将会形成并出现沉淀。
通过观察沉淀情况，可以判断血清中是否存在不规则抗体。
不规则抗体筛查在艾伦试验中，还需要对不规则抗体进行筛查。
将受试者的红细胞与O型血血清进行交叉配合试验，以检测是否存在不规则抗体。
如果存在不规则抗体，则红细胞将会沉降，出现明显的颜色变化。
通过观察颜色变化情况，可以判断是否存在不规则抗体。
交叉配合试验交叉配合试验是艾伦试验中最为关键的一部分。
将受试者的红细胞与已知血型的血清进行交叉配合，以检测是否存在不规则抗体。
如果存在不规则抗体，则红细胞将会沉降，出现明显的颜色变化。
通过观察颜色变化情况，可以判断是否存在不规则抗体。
酶处理交叉配合试验在艾伦试验中，还可以采用酶处理交叉配合试验来进一步确认不规则抗体的存在。
将受试者的红细胞与已知血型的血清进行交叉配合试验，并在其中加入适量的酶。
如果存在不规则抗体，酶处理后将会破坏红细胞表面的抗原，从而阻止抗原-抗体复合物的形成，避免出现沉淀。
通过观察沉淀情况，可以判断是否存在不规则抗体。
红细胞不规则抗体筛查常用方法选择分析
红细胞不规则抗体筛查常用方法选择分析摘要】目的探讨筛选红细胞血型不规则抗体筛查的最佳方法及意义。
方法凝聚胺法(Polybrene)、蛋白水解酶法.抗人球蛋白法、微柱凝胶免疫法进行不规则抗体筛选及灵敏度，特异性鉴定。
结果除蛋白水解酶法以外其他三种方法均能全部检测出IgG型抗体,阳性符合率为100%。
但灵敏度有所差异。
结论各种血型血清学试验都有其自身的特点,适用于不同范围及不同情况。
【关键词】抗体效价不规则筛查输血安全酶法凝聚胺法抗人球蛋白法微柱凝胶免疫检测法不规则抗体引起输血不良反应、新生儿溶血病、疑难配型等的主要原因之一。
对有输血史、妊娠史或短期内需要接受多次输血者作抗体筛选试验发现有临床意义的不规则抗体,从而避免输血的不良反应,保证临床用血的安全,特别是对有输血史和妊娠史的择期手术患者有更为重要的临床意义。
本文采用微柱凝胶法、凝聚胺法和 LIM抗人球法，蛋白水解酶法，进行不规则抗体检测。
一、材料仪器1.聚凝胺试剂盒由珠海贝索生物技术有限公司(台资)提供,2.酶技术相关试剂抗人球蛋白，菠萝酶粉剂均由上海血液生物医药有限责任公司提供,3.抗体筛查细胞由长春博迅生物医药有限责任公司提供，由 3 个细胞组成，包括 Rh，Kidd，MNSs，Duffy，Diego，Kell，Lewis，P等8个血型系统的19个抗原互补; 凝胶卡专用离心机、孵育器由长春博迅公司提供。
4.不规则抗体抗-D、E、C、c、e、S、s、K、Fya、Fyb、Jka、Jkb、M、N、P1来自加拿大Dominion公司。
二、试验方法1.抗体效价测定使用商品的筛选细胞分别采用微柱凝胶法、凝聚胺法、蛋白水解酶法，抗人球蛋白法对倍比稀释后的各种抗血清进行检测，比较四种实验方法对不同血型系统抗体的敏感性测其效价,以最高稀释度且凝集≥1+者为效价终点。
同时用该试剂红细胞与正常献血者血清反应,作为阴性对照试验，见表1。
2.四种方法所用血清量和实验时间的比较见表2。
输血科检验结果解释与咨询服务指南
输血科检验结果解释与咨询服务指南1.目的为规范输血科（血库）对检验结果的解释及更好地提供临床输血询服务，满足临床临床输血相关科室的需要，针对输血实验检测中一些常见的问题，依据《输血实验室管理程序》435（I）条款的要求制定本指南。
2.适用范围适用于输血科技术人员向临床医护人员提供检验结果的解释与咨询服务。
3.职责3.1输血科技术人员3.1.1负责向临床医护人员解释检验结果并提供咨询服务。
4.指引要点（以问答形式）4.1交叉配血用血标本有哪些要求？交叉配血用血标本准确无误来自患者本人，能够代表患者当前免疫学状态，EDTA-K2抗凝。
详见《血标本管理程序》4.5.4条款。
4.2什么是红细胞不规则抗体？红细胞不规则抗体是指不符合ABO血型系统的Land-Steiner法则，意外存在于血清中的抗-A、抗-B及抗-AB 以外的血型抗体。
红细胞不规则抗体一般是妊娠和（或）输异体免疫刺激产生，也包括细菌和病毒感染以及由于肿瘤性疾患引起的抗原性物质刺激所产生的“天然抗体二4.3ABO血型正反定型不一致的常见原因有哪些？ABO血型正反定型不一致的常见原因有：①漏加试剂、器材不洁、试剂污染或失效、血标本或试剂搞错等；②被检血清中存在IgM型红细胞不规则抗体，如同种抗-P、自身抗-1等；③红细胞悬液过浓或过淡，导致抗原抗体比例不适当，出现前带或后带现象；④受检红细胞上抗原位点过少（如亚型）或抗原性减弱（如白血病）或CiSAB等；⑤受检血清蛋白紊乱（如巨球蛋白血症）或实验温度过高，常引起红细胞呈缗线状凝集；⑥受检血清中抗-A或抗-B效价下降或缺失，如老年人血清抗体效价大幅下降、兵种免疫球蛋白缺乏症患者；⑦各种原因引起的红细胞溶血，误认为不凝集；部分溶血时，可溶性血型物质中和了相应的抗体，可导致假阴性结果；⑧由细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集；⑨近期曾输过异形血或嵌合体血型，表现为“混合外观凝集”；⑩革兰阴性杆菌感染使红细胞获得“类B”活性。
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红细胞不规则抗体
一、什么是不规则抗体？为什么要做不规则抗体？
人的血型抗体有IgG和IgM两类。
ABO血型系统的抗-A，抗-B 属IgM型，这些抗体天然就存于人的血清中（如A型血中存在抗B，B型血中存在抗A），称之为规则抗体；而与此相对应，抗A、抗B以外的血型抗体，称为不规则抗体，其多为IgG型，如Rh血型中的抗D、抗E等抗体，Kidd、Duffy血型系统中的抗体。
不规则抗体不是天然就存在的，而是通过后天免疫刺激（妊娠、输血等）产生的。
这些抗体会导致交叉配血不合，如果盲目输入，会引起输血不良反应：轻者引起寒战、发热，影响治疗效果；重者破坏输入的不配合的红细胞或缩短其寿命，产生溶血性输血反应，危机病人生命。
此外，对孕妇而言，不规则抗体会引起新生儿溶血病，影响新生儿脏器的发育，并使其智力发育受到伤害，严重者则会危及新生儿的生命安全。
因此，不规则抗体筛选是很必要而且必须的，对需要输血治疗的患者，进行不规则抗体筛查，一旦抗筛结果阳性，进行抗体鉴定，通过抗体鉴定结果来选择对应抗原阴性的血液进行输注，从而防止因为输注含有抗体对应抗原的血液而引起溶血性输血反应，保证输血安全。
二、.为什么要将血型与不规则抗体进行组合检查？
抗体筛查和血型项目捆绑在一起，患者入院时就做全套检测，电脑点击“血型鉴定及不规则抗体”，紫头管2ml。
抗筛一旦检测阳性，提前告知临床，如手术或输血，可以提前做好备血准备，这样就有充分的时间筛选相合的血液，有利于手术和输血安全顺利进行。
即便是对于暂时不做手术不备血和不输血的患者，其抗体筛选的结果可以作为以后用血或备血的依据，保证以后用血的安全。
三、检测说明
1、术前备血及输血前的血交叉标本就不再做抗体筛选，只做血型复检。
2、患者一次入院原则上只做一次抗体筛查，但如果一次住院
时间过长，超过一个月，备血或输血前需加做抗体筛查。
3、对于多次入院的患者，备血或输血前，血库会查询患者的抗体筛查是否检测过或是否过期，如未检测或上次检测时间超过1个月，会提示临床加查，即点击“血型单特异性抗体鉴定”。