酵母菌的形态观察
酵母菌形态观察
微生物实验报告酵母菌的形态观察一、目的要求：1、掌握普通光学显微镜的使用方法和注意事项2、观察酵母菌的形态特征、出芽生殖方式，并掌握酵母菌与细菌形态特征的区别3、学习鉴别死活酵母细胞的实验方法二、器材和器皿：1、酵母菌2、生理盐水、美蓝染色液、3、显微镜、酒精灯、载玻片、盖玻片、接种针、擦镜纸三、实验原理酵母菌是单细胞的真核微生物，菌体比细菌大而且不运动。
酵母菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖两种，以无性繁殖为主。
芽殖是酵母菌普遍的无性繁殖方式，少数为裂殖；有性繁殖是产生子囊和子囊孢子。
本实验是通过美蓝染液水浸片来观察酵母的形态和芽殖方式。
美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。
用美蓝对酵母活细胞染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，而对代谢作用微弱或死细胞，无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。
因此，不仅用此法可观察酵母细胞形态，也可用来鉴别酵母菌的死细胞和活细胞。
四、操作步骤：（一）显微镜的主要构造：普通光学显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分。
（二）显微镜的使用方法1．低倍镜的使用方法（1）取镜和放置：显微镜平时存放在柜或箱中，用时从柜中取出，右手紧握镜臂，左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上，镜座后端距桌边1－2寸为宜，便于坐着操作。
（2）调节光源（3）低倍镜观察先将标本玻片置于载物台上，并将标本部位处于物镜的正下方，以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注在上升镜台时，切勿在目镜上观察。
一定要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。
然后，两眼同时睁开，左眼看目镜，同时反时针方向慢慢旋转粗调节轮，当在视野内出现物象后，改用细调节轮，上下微微转动，直至视野内获得清晰的物象。
然后认真观察标本各部位，确定并将需进一步要观察的部位移视野中央，准备用高倍镜观察。
酵母菌的形态观察实验报告
酵母菌的形态观察实验报告实验目的：
通过对酵母菌的形态观察，了解其形态特征及生长繁殖形式。
实验原理：
酵母菌属于真菌门，以单细胞的形态存在。
酵母菌的生活方式非常简单，只需水分、适宜温度和营养物质，就能进行无性生殖和有性生殖，产生大量的孢子。
在孢子的形态、颜色、质量等方面均有明显差异。
实验步骤：
1. 取一定量的酵母菌液，加入蒸馏水中制成适量的悬浮液。
2. 取平底草皮片，用火烤热并消毒。
3. 用灭菌的牙签蘸取酵母菌悬浮液在草皮片上均匀涂抹。
4. 将涂有酵母菌悬浮液的草皮片放入培养皿中，加入适量的固
体培养基。
5. 放入恒温培养箱中进行培养，在适宜温度下孵育。
6. 发现酵母菌长出后，取出草皮片，用显微镜观察其形态。
实验结果：
通过实验观察，我们发现酵母菌为基于球形的单细胞菌体，颗
粒细小，染色颜色不均匀。
在液体营养平板上培养时，酵母菌形
成了一个类似于小球的珠状体，称为酵母珠。
实验结论：
酵母菌为单细胞植物，无色透明，小而细，球形或椭球形。
在
液体中生长时，形态呈现球状；在固体中生长时，呈白色且有臭味。
酵母菌的营养特别简单，只要有水分、适宜温度和营养物质，就能进行无性生殖和有性生殖，产生大量的孢子。
实验总结：
通过本次实验，我对酵母菌的形态特征及生长繁殖形式有了更
深入的了解。
同时，本次实验也让我了解了实验操作的基本要领
和注意事项。
只有正确选择实验条件并且严格按照实验步骤操作，才能获得准确可靠的实验结果。
实验酵母菌的形态观察及课件
实验内容（二）四大类微生物培养特征观察
未知菌落的形态特征描述
❖ 初步鉴定
❖ 最终确证: 显微镜观察
实验要求
观察和描述酵母菌、细菌、放线菌、霉菌的培养特征（已知和未知 菌落）P37
请预习下一次实验
酵母菌简介
假菌丝 酵母菌在一定条件下培养, 产生的芽体与母细胞不分离形成的特殊形
态
实验内容（一）
用水浸片法（美兰染色液）观察酵母形态结构特征（出芽生殖）, 区分死活 细胞, 并分析讨论其中的原因。
Байду номын сангаас
实验要求
绘出酵母形态结构的显微镜观察结果图, 标明各部分名称（液泡、芽 体和母细胞）；
用文字描述死活细胞的区别, 并分析讨论其中的原因
实验内容（二）四大类微生物培养特征观察
细菌: 菌落湿润、小而凸起或大而扁平，透明或不透明，通常与培养 基不结合，菌落颜色多样，菌落正反面颜色相同，一般有臭味
酵母菌: 菌落较湿润，大而凸起，稍透明或不透明，通常与培养基不 结合，一般呈乳脂或矿烛色，少数红色或黑色，菌落正反面颜色 相同，多带酒香
放线菌: 干燥或较干燥，小而紧密，不透明，与培养基结合牢固，菌 落颜色多样，菌落正反面颜色一般不同，常有泥腥味；
实验六、 酵母菌的形态观察及四大类微生 物培养特征观察
酵母菌简介
酵母菌是一群单细胞的真核微生物 形态: 多呈圆形，卵圆形。也有特殊形态，如柠檬形、三角形、藕节 状、腊肠形，假菌丝等 大小: 宽约1～5 μm,长约5～10 μ m 。发酵培养中的细胞平均直 径4～5 μ m
酵母菌简介
繁殖方式: 无性繁殖: 芽殖、裂殖、产生无性孢子（节孢子、掷孢子和厚垣孢子） 有性繁殖: 子囊孢子
实训五 酵母菌的形态观察及死活细胞鉴定
实训五酵母菌的形态观察及死活细胞鉴定一、实验目的1、观察酵母细胞的形态结构及出芽繁殖；2、掌握鉴别死活酵母细胞的染色技术；3、学会水浸制片观察酵母菌。
二、实验原理酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，细胞一般呈球状、卵圆状、椭圆状、柱状或分枝状的假菌丝。
其细胞核与细胞质有明显分化，菌体较细菌大几倍甚至十几倍，在高倍显微镜下即可观察到胞内有明显的细胞核和内含物。
酵母菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖两种。
无性繁殖大多是以出芽的方式进行，也有分裂繁殖；有性繁殖则是通过接合产生子囊孢子。
酵母菌的母细胞经过一系列的芽殖后，如长大的子细胞不与母细胞分离，就会形成藕节状的假菌丝，成为假丝酵母。
用生理盐水（或水-碘液染色液）制作水浸片可以观察酵母菌的形态和出芽繁殖方式。
用美蓝染色液制水浸片可鉴别酵母细胞的死活状态。
美蓝是一种弱氧化剂，氧化时呈蓝色，还原后呈无色。
用美蓝对酵母菌进行染色时，活酵母细胞因新陈代谢不断进行，胞内具有很强的还原能力，能将进入细胞的美蓝还原，使得细胞呈无色。
因此，具有还原能力的酵母活细胞为无色，而老化细胞还原能力弱，染色后呈淡蓝色，死细胞则失去还原能力，被染料染成蓝色。
三、实验材料1、菌种：啤酒酵母或葡萄汁酵母（制成斜面培养物或液体培养物）2、试剂：0.1%吕氏美蓝染色液、0.05%吕氏美蓝染色液、水-碘液染色液（革兰氏染液用碘液：水=1：3）、0.85%生理盐水3、仪器及其他：显微镜、擦镜纸、接种环、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、酒精灯、蒸馏水、吸水纸等四、实验时间2课时五、实验步骤（一）生理盐水浸（封）片（酵母菌的形态观察）1、在载玻片中央加1滴无菌生理盐水（不宜用无菌水制作水浸片，否则细胞易破裂），然后以无菌操作从斜面培养基上用接种环取少量啤酒酵母菌苔与生理盐水混匀，使其分散成云雾状薄层。
2、用镊子取洁净盖玻片，先将其一边与菌液接触，然后缓慢地将盖玻片放下，避免产生气泡影响观察。
3、在显微镜下，先用低倍镜观察，再用高倍镜观察酵母菌的形态、大小及出芽情况。
实 验7 酵母菌的形态观察
实验7酵母菌的形态观察、大小测定和直接计数一、实验目的酵母菌的形态及出芽生殖，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；学习并掌握用测微尺测定微生物大小和使用血球计数板进行微生物计数的方法。
二、实验原理1.酵母菌形态观察酵母菌个体较大，常规涂片方法可能损伤细胞，因此用美蓝染液水浸片法观察其出芽生殖。
美蓝染液的氧化形式蓝色，还原形式无色。
活细胞由于新陈代谢，细胞内还原性物质还原美蓝而呈现无色，死细胞或代谢能力弱的细胞不能将美蓝还原呈现蓝色。
2.细胞大小测量微生物大小的测定需借助测微尺：目镜测微尺和镜台测微尺。
镜台测微尺用于矫正目镜测微尺，总长1mm，分100个小格，每小格10μm。
目镜测微尺是一块可放入目镜的圆形玻片，有50小格和100小格2种。
由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格代表的实际长度也不一样。
因此，用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度，然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，计算出细胞的实际大小。
3.细胞计数血细胞计数板，大格1.0mm，体积0.1m3。
三、步骤1.酵母菌观察1)在载玻片中央加一滴0.05%吕氏碱性美蓝染色液，用滴管取1滴酵母菌菌液于染液中，混合均匀。
2)加盖玻片。
3)将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母菌的形态和出芽情况，并根据颜色区别死、活细胞。
4)染色约0.5h后再次进行观察，观察死细胞数量是否增加。
5)形态记录，计算0.5h后酵母菌的死亡率。
2.细胞大小测量1)装目镜测微尺：把目镜上的透镜旋下，将目镜测微尺刻度朝下放在目镜镜筒内的格板上，然后旋上目镜透镜，再将目镜插入镜筒内。
2)校正目镜测微尺：将镜台测微尺刻度面朝上放在显微镜载物台上。
校正：先用低倍镜观察，将镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央，调节焦距，当清晰地看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行。
酵母菌形态观察
酵母菌的形态观察实验目的：掌握常见真菌的不同结构特征；熟悉普通光学显微镜低倍镜与高倍镜的使用方法；实验材料：菌种：啤酒酵母试剂：乳酸石炭酸实验内容：1.酵母菌的形态观察酵母菌是单细胞的真核微生物，菌体比细菌大而且不运动。
酵母菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖两种，以无性繁殖为主。
芽殖是酵母菌普遍的无性繁殖方式，少数为裂殖；有性繁殖是产生子囊和子囊孢子。
基本原理：本实验是通过水浸片来观察酵母的形态和芽殖方式。
基本步骤：酵母培养物→制片→镜检注意事项：（1）取菌量不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液溢出或出现大量气泡。
（2）用镊子取一块盖玻片，先将一侧与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下，使其盖在菌液上，盖玻片不宜平着放下，避免气泡产生。
注意事项：观察时，宜用略暗光线；先用低倍镜找到适当视野，更换高倍镜观察2.显微镜油镜的使用与保养低倍镜的使用方法：（1）取一玻片标本放在镜台上，一定使有盖玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器弹簧夹夹住，然后旋转推片器螺旋，将所要观察的部位调到通光孔的正中。
（2）调节焦距：以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注意在上升镜台时，切勿在目镜上观察。
一定要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。
然后，两眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗调节器，使镜台缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。
（3）如果物象不在视野中心，可调节推片器将其调到中心(注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的)。
如果视野内的亮度不合适，可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节，如果在调节焦距时，镜台下降已超过工作距离(>5.40mm)而未见到物象，说明此次操作失败，则应重新操作，切不可心急而盲目地上升镜台。
高倍镜的使用方法（1）选好目标：一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。
酵母菌的形态观察
酵母菌的形态观察
1.菌落观察
①取啤酒酵母、假酵母菌以三点点植法接种于麦芽汁平板培养基上，置于28～30℃下培养3天，形成菌落。
②观察菌落表面、高度、边缘、质地和颜色等方面的特点。
2.观察出芽生殖
①在载玻片上滴1滴蒸馏水，挑取少量啤酒酵母放入蒸馏水中，盖好盖玻片，制成临时装片（注意不要产生气泡）。
②观察菌体细胞的大小与出芽方式。
3.观察子囊孢子
①将面包酵母接种于麦芽汁液体培养基中，于28～30℃下培养24小时，然后连续传代3～4次，最后转接到肉汁蛋白胨培养基上，在25～28℃下培养3天左右。
使其形成子囊孢子。
②从形成子囊孢子的菌落中，取出少量菌体，在载玻片上制作涂片，干燥、固定后，在涂菌处滴上5%孔雀绿染液（尽量多滴一些，不使干燥），10分钟后，用水冲洗，再用0.5%番红染液复染1分钟。
③将涂片置于显微镜下，观察子囊孢子的形状、特点，注意每1个子囊内的孢子数目。
酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别-学时
实验一酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别活细胞数目比例有什么影响？4. 如何测定酵母菌死亡率？简述其原理。
5. 标本片上的某一物象，第一次看到后如何再次找到它?一、实验目的与要求1. 了解普通光学显微镜的构造及原理，正确掌握使用显微镜的方法；2. 观察酵母菌的形态及出芽生殖方式；3. 学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；4. 掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。
二、实验原理1. 酵母菌酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比常见细菌大几倍甚至十几倍，不必染色即可用显微镜观察其形态。
但由于细胞个体大，采用涂片的方法制片有可能损伤细胞，一般通过美蓝染液水浸片或水-碘液浸片法来观察酵母细胞。
大多数酵母以出芽方式进行无性繁殖，有的分裂繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。
本实验通过美蓝染液水浸片和水一碘液水浸片来观察酵母的形态和出芽生殖方式，并对酵母细胞进行死活染色鉴别。
2. 美蓝染液图1：酵母菌美蓝浸片观察3min（10×40）图2：酵母菌美蓝浸片观察30min（10×40）三、实验设备及材料1. 菌种酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) 或卡尔酵母(Saccharomyces calsbergensis)培养2 天左右的豆芽汁液体培养物(需稀释)。
2. 溶液或试剂：0.1%和0.05%吕氏碱性美蓝溶液(或0.01%美蓝水溶液)，革兰氏染色用碘液等。
3．器材：显微镜，擦镜纸，吸水纸，盖玻片、酒精灯、接种环、镊子、胶头滴管、小烧杯、洗瓶等等。
四、实验步骤与内容1．美蓝浸片的观察（1）在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液，然后按无菌操作接种环挑取少量酵母菌放在染液中，并用接种环将其混合均匀，酒精灯上灼烧清洗接种环。
注：染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡。
用接种环将菌体与染液混合时，不要剧烈涂抹，以免破坏细胞。
水，取少许酵母菌苔放在水-碘液中混匀，盖上盖玻片后镜检。
实验五 酵母菌的形态观察、死活细胞的鉴别及显微镜直接计数法
五、实验报告
1、绘图说明你所观察的酵母菌的形态特征 填表： 2、填表：
各中格中菌数 1 2 3 4 5 二次平均值 菌数/mlAຫໍສະໝຸດ B 5二、实验原理
酵母菌是不运动的单细胞真核微生物， 酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比常见 细菌大几倍甚至十几倍。大多酵母菌以出芽方式进行无性繁殖， 细菌大几倍甚至十几倍。大多酵母菌以出芽方式进行无性繁殖， 有的分裂繁殖，有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。 有的分裂繁殖，有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验是通 过美蓝染液水浸片来观察酵母菌的形态和出芽生殖方式。 过美蓝染液水浸片来观察酵母菌的形态和出芽生殖方式。
菌种： 1、菌种：酿酒酵母 仪器或其他用品：血细胞计数板，显微镜， 2、仪器或其他用品：血细胞计数板，显微镜，盖玻 片，载玻片等 0.1%美蓝染色液等 3、0.1%美蓝染色液等
四、实验内容： 实验内容：
1、美蓝浸片观察 在载玻片中央加一滴0.1%的美蓝染色液， 在载玻片中央加一滴0.1%的美蓝染色液，然后用 0.1%的美蓝染色液 接种环取少量酵母菌于染液中，混合均匀； 接种环取少量酵母菌于染液中，混合均匀； 用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触， 用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然 后慢慢将盖玻片放下，使其盖在菌液上。 后慢慢将盖玻片放下，使其盖在菌液上。将玻片放置 约三分钟后，用显微镜观察酵母的形态和出芽情况， 约三分钟后，用显微镜观察酵母的形态和出芽情况， 并判断细胞的死活。 并判断细胞的死活。
利用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生 物计数方法。该计数板是一块特制的载玻片， 物计数方法。该计数板是一块特制的载玻片，其上由四条槽构 成三个平台，中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半， 成三个平台，中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，每一边 的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分为几个大方格， 的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分为几个大方格， 中间的大方格即为计数室。血细胞计数板构造如图1 中间的大方格即为计数室。血细胞计数板构造如图1，计数室的 刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成25个中方格，而 刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成25个中方格， 25个中方格 每个中方格又分成16个小方格，另一种是一个大方格分成16 16个小方格 16个 每个中方格又分成16个小方格，另一种是一个大方格分成16个 中方格，而每个中方格又分成25个小方格， 25个小方格 中方格，而每个中方格又分成25个小方格，但无论是哪一种规 格的计数板，每一个大方格中的小方格400 400个 格的计数板，每一个大方格中的小方格400个，每一个大方格 边长为1毫米，则每一个大方格的面积为1mm 盖上盖玻片后， 边长为1毫米，则每一个大方格的面积为1mm2，盖上盖玻片后， 盖玻片与载玻片之间的高度为0.1毫米， 0.1毫米 盖玻片与载玻片之间的高度为0.1毫米，所以计数室的容积为 万分之一毫升）。 0.1mm3（万分之一毫升）。
实验七酵母菌的形态观察和死活细胞鉴别
实验报告
• 绘图说明面包酵母形态特征及出芽生殖情况 • 绘图说明曲霉和青霉的形态特征
• 第1组：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，1000ml，121℃灭菌 20min，P241
• 第2组：伊红美蓝培养基（EMB培养基）：伊红美蓝琼脂 22.5g, 水600ml, 121℃灭菌20min
• 第6组：固体淀粉培养基：600ml，P243 蛋白胨6g，氯化钠3g，牛肉膏3g，可溶性淀粉1.2g，水 600ml，琼脂10g， 121℃灭菌20min。
• 第7组：明胶培养基，500ml，P243 蛋白胨5g，氯化钠2.5g，牛肉膏1.5g，明胶80g，水500ml ，每管7ml， 121℃灭菌20min。
实验材料
• 1. 培养2d的面包酵母斜面培养物 • 2. 0.1%吕氏碱性美蓝染液
实验方法
美蓝染液水浸片法
1. 滴一滴吕氏碱性美蓝染液于载玻片中央，无菌操作取酵母培 养物置于染液中，混合均匀。
2. 取盖玻片，将盖玻片一端与菌液接触，缓慢将盖玻片倾斜并 盖在菌液上。
3. 3min后，镜检。观察酵母菌形态及出芽情况，并根据细胞 颜色区别死活细胞。
20%乳糖水溶液120ml：24g加水120ml，115℃灭菌20min
第3组：3倍浓缩乳糖蛋白胨培养基100ml： 蛋白胨3g，氯化钠1.5g，水100ml 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液0.5ml，每管加5ml，共15管,内装倒置
小管，121℃灭菌20min。
第4-5组：普通浓度乳糖蛋白胨发酵培养基700ml：P244 蛋白胨7g，氯化钠3.5g，水700ml 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1.2ml， 每管加7ml，共45管，内装倒置小管 每管加10ml，共35管，内装倒置小管，121℃灭菌20min。
酵母菌形态的观察和显微镜直接计数法_OK
实验三 酵母菌形态的观察和显微镜直接计数法
2021/7/27
执教 单位
刘森林
生命科学学院
1
实验目的
• 观察酵母菌的形态，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法。 • 掌握酵母菌的一般形态特征。 • 明确血球计数板计数的原理。 • 掌握使用血球计数板进行微生物计数的方法。
2006/02
沈阳广众
三.实验步骤:
二．显微镜直接计数法 • 4. 显微镜计数：加样后静止5分钟，然后将血球计数板置
于显微镜下，先用低倍镜找到计数室，再用高倍镜进行 计数。 • 在计数前若发现菌液太浓或太稀，需重新调节稀释度再 计数。一般样品稀释度要求每个中格内15-20个菌体为宜。 每个计数室选5个中格（可选4个角和中央的一个中格） 中的菌液进行计数。 • 注：位于格上的菌体一般只数上方和右边线上的（计上 不计下2，006/计02 右不计左）。若遇沈酵阳广母众出芽，芽体大小与母7 细胞一样大时，即作为两个菌体计算。
• 3. 将玻片放置约3分钟后镜检，先用低倍镜观察 后用高200倍6/02镜观察酵母菌的沈形阳广态众 ，并根据颜色区4别 死活细胞。
三.实验步骤:
•
作业
画图说明你所观察到的酵母菌的形态特征，并说明死细胞和活细胞分别为什么颜色。
2006/02
沈阳广众
5
三.实验步骤:
二．显微镜直接计数法
• 1. 菌悬液的制备：以无菌水将酿酒酵母制成浓度适 中的菌悬液
• 2. 镜检计数室：在加样前，先对计数板的计数室进 行镜检，若有污物，则需清洗，吹干后才能计数。
• 3. 加样品：将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室， 一般计数室均能充满菌液。
教学课件-酵母菌的形态观察.
接目测微尺是一块可以放入接目镜的圆形小玻片，其中央
有精确的等分刻度，有等分为50小格和100小格的两种。在 测量时将接目测微尺放在目镜的隔板上，即可来测量经显 微镜放大后的细胞物象。
或者专用的目镜，里面已经安放好了接目测微尺
放大倍数不同，接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度也不一样。
使用前应标定
（4）镜检 在高倍镜下观察子囊孢子的形状和每个子囊 内的孢子数。
四、酵母菌观察 4、微生物细胞大小测定意义
微生物基本的形态特征 微生物分类鉴定的重要依据 控制产品质量
显微镜测微尺测量 电子显微镜测量
❖ 测微尺的构造
镜台测微尺是一张中央部分刻有精确等分线的载玻片，刻 度的总长是1mm，被等分为100格，每格0.01mm（即10μm）
❖测微尺的使用方法 ⑴、装接目测微尺
⑵、接目测微尺的标定
使接目测微尺与镜台测微尺的刻度相平行。两尺在某一区域 内两线完全重合，然后分别数出两重合线之间镜台测微尺 和接目测微尺所占的格数。
❖ （3）酵母菌细胞大小测量的步骤
①、制备酵母菌悬液 ②、酵母水浸片的制作
要求： 无气泡产生 吸取多余水分
三、接目测微尺的标定并记录标定结果
四、酵母菌观察
2、酵母菌形状与出芽繁殖的观察 （1）酿酒酵母的观察 ①制片。在载玻片上滴一小滴0.1％美蓝液（或一滴无菌水），无菌操作
用接种环取酿酒酵母少许（并注意酵母菌与培养基结合是否紧密），与 美蓝液混合均匀，染色2～3min。 ②加盖玻片。将盖玻片一端与菌液接触，然后慢慢放下使其盖在菌液上。 ③镜检。先用低倍镜，后用高倍镜观察酵母细胞的形态、构造和出芽情况， 并注意区分死细胞（蓝色）与活细胞（不着色）。 （2）假丝酵母的观察：将假丝酵母划线接种在麦芽汁或豆芽汁平板上， 在划线部分加无菌盖玻片，28～30℃培养3d。将假丝酵母的平板放在显 微镜下，用高倍镜观察假丝酵母的形状和大小。
酵母菌形态的观察和显微镜直接计数法
显微镜直接计数法的优缺点
优点
操作简单、快速，适用于初步估 计样品中微生物的数量。
缺点
主观性强，误差较大，无法准确 反映样品中微生物的种类和分布 情况。
03 酵母菌的应用
酿酒工业
酿造啤酒
酵母菌是酿造啤酒的关键微生物，通 过发酵作用将麦芽中的糖分转化为酒 精和二氧化碳。
选择高倍数显微镜，以 便清晰观察酵母菌形态。
用于放置观察样本，需 干净无痕。
酵母菌培养液
选择适当的培养基，以 便培养和观察不同种类
的酵母菌。
染色剂
如美蓝或苯酚品红，用 于染色酵母菌，使其更
易于观察。
实验操作步骤
1. 制备样本
将酵母菌培养液滴在载玻片上 ，然后盖上盖玻片。
2. 染色
用染色剂对样本进行染色，使 酵母菌更容易观察。
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3. 观察
在显微镜下观察酵母菌形态， 记录其特征。
4. 计数
采用直接计数法，统计显微镜 下观察到的酵母菌数量。
实验注意事项与安全须知
样本新鲜度
确保样本新鲜，避免酵母菌死亡 或污染。
显微镜操作
正确操作显微镜，避免损坏仪器或 造成人身伤害。
安全须知
避免染色剂与皮肤、眼睛接触，如 不慎接触，应立即用大量清水冲洗。
酵母菌的分类学依据
形态学特征
根据酵母菌的形态、大小、 出芽方式等特征进行分类。
生理生化特征
根据酵母菌的生理生化反 应和代谢产物进行分类。
分子生物学特征
通过分析酵母菌的基因组 序列和分子标记进行分类。
02 显微镜直接计数法
实验五酵母菌形态的观察和显微镜下细胞测量和计数
实验五酵母菌形态的观察和显微镜下细胞测量和计数刘洋生物101 1002040120一、实验目的1、观察酵母菌的形态，掌握区分酵母菌死活细胞的染色方法。
2、掌握利用显微测微尺测量酵母菌大小的方法。
3、学习利用血球计数板测定微生物细胞数量的原理和方法。
二、实验原理（一）酵母菌的形态观察酵母菌是单细胞真核微生物，细胞呈圆形、椭圆形或柱状。
酵母的细胞比细菌大得多，经过特殊的染色，在高倍镜下就可以观察到。
酵母菌既可无性繁殖，又可有性繁殖。
无性繁殖有芽殖和裂殖两种，芽殖又有单出、双出和多出之分。
酵母菌的有性生殖一般能形成4~8个子囊孢子。
在一定条件下，有的酵母菌进行芽殖后，长大的子细胞不与母细胞立即分离，并继续出芽，细胞成串排列，这种菌丝状的细胞串就称为假菌丝。
假菌丝的各细胞间仅以狭小的面积相连，呈藕节状。
酵母菌的死活细胞可以通过美兰染色加以区分。
美兰是一种无毒性染色剂，其氧化型为蓝色，还原型为无色。
由于活细胞具有较强的还原能力，可以使美兰由蓝色的氧化型转变为无色的还原型。
处于代谢旺盛的细胞还原美兰的能力强，细胞为无色，为代谢缓慢的老细胞、幼嫩芽体为浅蓝色，死细胞为深蓝色。
（二）显微镜下的细胞计数本次实验采用血球计数法测定微生物细胞数。
方法是将经过适当稀释的菌体细胞或孢子悬液，加到血球计数板的计数室内，在显微镜下逐格计数。
因为计数室的容积是固定的（0.1mm3），所以可以将在显微镜下计得的菌数换算成单位体积试样中的菌数。
血球计数板使一块特制的载玻片，中部有H形的沟槽将中部分成上下两个计数室。
计数室方格的边长为3mm，每个方格分为9个大方格，正中央的大方格被分为25个中方格，而每个中方格又被分为16个小方格。
这样正中央的大方格总共分成400个小方格，每个小方格的体积为1/4000mm3（计数室的高度为0.1mm）。
由此得到如下公式：每毫升的菌数个=平均每个中方格内的菌数16×稀释倍数×4000×1000（三）显微镜下细胞大小的测量用来测量微生物大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
【精品】酵母菌的形态观察
【精品】酵母菌的形态观察
酵母菌是一种单细胞真菌，常见于发酵食品和发酵饮料中。
虽然酵母菌只有一种单细胞，但在不同阶段却会表现出不同的形态，本文将介绍酵母菌在发酵过程中的几种形态。
1. 酵母菌的单细胞状态
酵母菌的单细胞状态呈现为圆形或类似卵形的形状，直径约为5-10微米。
其表面光滑，无毛发脊纹，质地松软。
在显微镜下观察，它的胞质呈现出明显的颗粒状结构，这是由于
它富含蛋白质和核酸所致。
在适当的营养和环境条件下，酵母菌会进入新细胞的生长期，这个过程叫做萌芽。
此时，酵母菌的胞体会膨胀，生成新的萌芽细胞。
萌芽细胞主要是由细胞壁和胞质膜组成，
可以看到细胞壁上呈现出一圈圈的条纹。
在酵母菌产生足够多的新细胞之后，它们会开始聚集在一起，形成细长的菌丝状结构。
这个过程通常发生在发酵液中。
菌丝的长度和形态都会随着不同的生长条件而变化。
菌丝
结构的变化也会影响发酵的成分和发酵速度。
当酵母菌处于厌氧或营养不良的环境中时，它会形成一些孢子，能够通过空气媒介进
行传播。
孢子通常是圆形或卵形的，由坚硬的细胞壁包裹，具有抵御外部侵害的耐受性。
当环境适合时，酵母孢子会萌发成新的酵母菌，恢复其生长和发酵的能力。
总而言之，酵母菌在不同的发酵过程中会呈现出不同的形态和特点。
观察和细致研究
这些不同状态下的酵母菌形态和特性可以帮助我们更好地了解和利用酵母菌在发酵中的作用。
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酵母菌形态观察
实验目的
认识酵母菌的形态结构，掌握其观察方法。
实验原理
酵母菌是单细胞真菌，通常呈圆形、椭圆形或卵圆形，其菌落较大而厚，湿润，较光滑，颜色多为乳白、灰黄、淡黄、灰褐色，少见粉红或红色，偶见黑色。
酵母菌个体比细菌大几倍到十几倍，在高倍镜下即能观察清楚。
细胞内常有明显的细胞核及其内含物。
无性繁殖以芽殖为主，在细胞的一端初生小突起如芽，逐渐增大，芽缢裂而与母细胞分离，形成独立的菌体。
发生的芽如不立即脱离母细胞并继续出芽，则多数芽细胞集聚成芽簇。
在陈旧培养中，芽簇细胞伸长成丝状，称假菌丝。
酵母菌的有性生殖形成子囊袍子，其过程由两个菌休细胞结合后，其中配合的细胞核分裂，形成2个、4个或8个子囊孢子。
实验器材
酿酒酵母培养物显微镜、载玻片、盖玻片、接种针0.1％美蓝液、中性红染色液、碘液
实验步骤
1．菌落特征的观察取少量酿酒酵母划线接种在土豆平板培养基上，2830℃养35d。
用肉眼观察菌落特征，项目包括菌落表面湿润或干燥、有无光泽、隆起形状、边缘形状、大小、颜色等。
2．酵母菌细胞形态及芽殖方式在洁净载玻片上滴加一滴无菌水或0.1%美蓝液一滴，用接种环取酵母菌菌台少许与无菌水或美蓝液混匀，盖上盖玻片，即成为水浸片。
用高倍镜观察酵母细胞形态及出芽情况。
染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察。
盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响观察
实验结果及讨论
1．实验结果绘图说明你所观察到的酵母菌的形态特征。
2．讨论针对实验原理、步骤、现象进行讨论。