[史上最强生物课件]复习动物细胞工程 2010.10.24

32.如何获得单一种类抗体 32.如何获得单一种类抗体？ 如何获得单一种类抗体？
由于每一个B细胞只分泌一种特异性抗体。 由于每一个B细胞只分泌一种特异性抗体。要想获得 大量的单一抗体，必须克隆单一的 淋巴细胞， 克隆单一的B 大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞 利用动物细胞培养技术 培养单个B淋巴细胞， 动物细胞培养技术， 群。利用动物细胞培养技术，培养单个B淋巴细胞，就可 以克隆单一B淋巴细胞，获得单一种类抗体。 以克隆单一B淋巴细胞，获得单一种类抗体。
动物组织块
幼龄动物的器官组织；动物胚胎 幼龄动物的器官组织； 胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分 散成单个细胞
动 物 细 胞 培 养 过 程
加入培养液
细胞悬液
细胞贴壁 接触抑制
适宜条件 原代培养 用胰蛋白酶等 处理贴壁细胞 传代培养 原代培养 传代培养 不死性细胞
17.什么是动物细胞核移植？ 17.什么是动物细胞核移植？ 什么是动物细胞核移植 将动物的一个细胞核， 将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核 的卵母细胞中， 的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚 新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）。 胎，新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）。 18.多莉羊的诞生在生物学发展史上有何意义？ 18.多莉羊的诞生在生物学发展史上有何意义？ 多莉羊的诞生在生物学发展史上有何意义
12.哪些细胞会失去接触抑制？ 12.哪些细胞会失去接触抑制？ 哪些细胞会失去接触抑制 肿瘤细胞 13.在体外培养动物细胞需要什么物质和环境条件 在体外培养动物细胞需要什么物质和环境条件？ 13.在体外培养动物细胞需要什么物质和环境条件？ 无菌无毒环境、充足营养（血清或血浆）、适 无菌无毒环境、充足营养（血清或血浆）、适 ）、 宜温度、PH、气体环境 宜温度、PH、 14.动物细胞培养有何应用价值 动物细胞培养有何应用价值？ 14.动物细胞培养有何应用价值？ 的主要作用是维持培养液的PH PH）。 （O2和CO2，C02的主要作用是维持培养液的PH）。 ①.大规模生产生物制品，如病毒疫苗、干扰素、 大规模生产生物制品，如病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体等； 单克隆抗体等； 药性、毒性检测； ②.药性、毒性检测； ③.培养基因工程中的受体细胞
26.动物细胞融合的基本原理是什么？ 26.动物细胞融合的基本原理是什么？ 动物细胞融合的基本原理是什么 27.什么是病毒的灭活？ 27.什么是病毒的灭活？ 什么是病毒的灭活
灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但 灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力， 是并不破坏病毒的抗原结构。 是并不破坏病毒的抗原结构。
通常含有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机 通常含有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、 微量元素、动物血清等 盐、微量元素、动物血清等。 离体的细胞在适宜的条件下可以增殖
4.进行动物细胞培养的材料一般有何特点？ 4.进行动物细胞培养的材料一般有何特点？ 进行动物细胞培养的材料一般有何特点 一般取胚胎组织或幼龄动物的组织做动物细胞培 养。因为胚胎组织或幼龄动物的组织的细胞生命 力旺盛，分裂能力强。 力旺盛，分裂能力强。
30.抗体有什么应用价值？ 30.抗体有什么应用价值？ 抗体有什么应用价值
（1）诊断疾病：如对癌症、乙肝等疾病的诊断 诊断疾病：如对癌症、 治疗疾病： （2）治疗疾病：如治疗毒蛇咬伤等 物质检测： （3）物质检测：如目的基因表达的检测
31.怎样获得抗体？ 31.怎样获得抗体？ 怎样获得抗体
向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，从 向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体， 血清抗体。 血清中分离出的抗体,称为血清抗体 血清中分离出的抗体,称为血清抗体。 特点： 特点： 多种抗体的混合物，纯度差、特异性差、产量低。 多种抗体的混合物，纯度差、特异性差、产量低。
20.体细胞核移植获得高产奶牛过程中， 20.体细胞核移植获得高产奶牛过程中，利用了哪 体细胞核移植获得高产奶牛过程中 些现代生物技术手段？ 些现代生物技术手段？
动物细胞培养技术、亚显微操作技术、核移植技术、 动物细胞培养技术、亚显微操作技术、核移植技术、 胚胎移植技术、 胚胎移植技术、细胞融合技术
从一个共同的祖先通过无性繁殖的方法繁殖出来的一 群遗传特征相同的DNA分子、细胞或个体的过程。 群遗传特征相同的DNA分子、细胞或个体的过程。 DNA分子 ⑴具有包含本物种完整基因组的细胞核的活细胞（如：乳 具有包含本物种完整基因组的细胞核的活细胞（ 腺上皮细胞、牛耳细胞等）； 腺上皮细胞、牛耳细胞等）； ⑵能有效调控细胞核发育的细胞质物质（如去核卵的细胞 能有效调控细胞核发育的细胞质物质（ 质）； ⑶完成胚胎发育的必要的环境条件（如诱导核—质重组细 完成胚胎发育的必要的环境条件（如诱导核— 胞生长、分化的实验条件和怀胎母体的子宫环境）。 胞生长、分化的实验条件和怀胎母体的子宫环境）
因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和 脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合 脂质分子重新排布，细胞膜打开，
29.什么是抗体？ 29.什么是抗体？ 什么是抗体
抗体是机体受抗原刺激后产生的、 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生 是机体受抗原刺激后产生的 特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 的具有免疫功能
15.为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？ 15.为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？ 为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清 血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素 血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、 其中必需氨基酸动物细胞本身不能合成， 等，其中必需氨基酸动物细胞本身不能合成，必 须由培养液提供。 须由培养液提供。 血清激素有胰岛素、 血清激素有胰岛素、生长激素等以及多种生 长因子，能促进细胞的生长、增殖和贴附。 长因子，能促进细胞的生长、增殖和贴附。 16.动物细胞培养要经过脱分化的过程吗 动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？ 16.动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么 不需要。 不需要。 因高度分化的动物细胞发育潜能变窄， 因高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去 了发育成完整个体的能力，所以，动物细胞也就 了发育成完整个体的能力，所以， 没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。 没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。
5.原代培养与传代培养有何区别 5.原代培养与传代培养有何区别 ? 将动物组织消化后的初次培养就是原代培养。 将动物组织消化后的初次培养就是原代培养。 当原代培养的细胞贴满瓶壁后，用胰蛋白酶处理， 当原代培养的细胞贴满瓶壁后，用胰蛋白酶处理， 制成细胞悬浮液后再次分瓶继续培养就是传代培 养。 6.动物体细胞培养技术能将一个分化的体细胞培养 6.动物体细胞培养技术能将一个分化的体细胞培养 成为一个动物体吗？为什么？ 成为一个动物体吗？为什么？ 不能 7.为什么要将组织分散成了单个细胞再进行培养 为什么要将组织分散成了单个细胞再进行培养？ 7.为什么要将组织分散成了单个细胞再进行培养？ ①单个细胞容易和周围环境进行物质交换——获 单个细胞容易和周围环境进行物质交换——获 得营养物质、氧气等，排出代谢废物； 得营养物质、氧气等，排出代谢废物； ②分散成单个细胞培养能使细胞水平操作的其他 技术得以实现 。
多 莉 羊 的 培 育 过 程
细胞核移植 卵裂 早期胚胎 胚胎移植 细胞质 细胞核 重组细胞
C母绵羊子宫（代孕母体） 母绵羊子宫（代孕母体） 母绵羊子宫 妊娠 分娩 多莉羊
23.体细胞核移植技术还存在什么问题？ 23.体细胞核移植技术还存在什么问题？ 体细胞核移植技术还存在什么问题 成功率非常低； 成功率非常低； 绝大多数克隆动物还存在健康问题 24.什么是克隆 生物克隆需要哪3个基本条件？ 什么是克隆？ 24.什么是克隆？生物克隆需要哪3个基本条件？
复习动物细胞工程快速复习题
1.动物细胞工程的基础是什么？ 1.动物细胞工程的基础是什么？ 动物细胞工程的基础是什么
动物细胞培养技术
2.动物细胞培养的基本原理是什么？ 2.动物细胞培养的基本原理是什么？ 动物细胞培养的基本原理是什么 3.动物细胞培养液的主要成分是什么？ 3.动物细胞培养液的主要成分是什么？ 动物细胞培养液的主要成分是什么
22.体细胞核移植技术有哪些应用前景？ 22.体细胞核移植技术有哪些应用前景？ 体细胞核移植技术有哪些应用前景
⑴加速家畜遗传改良的进程 ⑵保护濒危物种 ⑶生产医用蛋白质及组织器官的移植 了解胚胎发育和衰老过程； ⑷了解胚胎发育和衰老过程；追踪研究疾病的发展过程和 治疗疾病
Ａ母绵羊 卵细胞
Ｂ母绵羊 乳腺细胞
说明已经分化的动物体细胞核，仍然具有全能性， 说明已经分化的动物体细胞核，仍然具有全能性，在 动物体细胞核 合适的条件下，仍然可以发育成新的个体。 合适的条件下，仍然可以发育成新的个体。
19.为什么用于核移植的供体细胞一般都选用传代 19.为什么用于核移植的供体细胞一般都选用传代 10代以内的细胞 代以内的细胞？ 10代以内的细胞？
动物细胞培养技术流程
动 物 组 织
剪碎 胰蛋白酶
单 个 细 胞
加培养液
细 胞 悬 液
贴 壁 生 长
接触抑制
分 瓶 培 养
原代培养 10 代 细 胞 50 不 代 少数癌变 死 细 畸形分化 细 胞 胞
少数
传代培养
8.怎样将动物组织分散成单个的细胞？ 8.怎样将动物组织分散成单个的细胞？ 怎样将动物组织分散成单个的细胞 用剪刀剪碎组织，再用胰蛋白酶处理。 用剪刀剪碎组织，再用胰蛋白酶处理。 9.胰蛋白酶的作用是什么呢 胰蛋白酶的作用是什么呢？ 9.胰蛋白酶的作用是什么呢？细胞间隙主要含有 什么物质成份？ 什么物质成份？ 胰蛋白酶将动物组织细胞间隙中的蛋白质分 使细胞分散开。 解，使细胞分散开。 10.为何要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下 10.为何要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下 来？ 当贴壁细胞生长到表面相互接触时， 当贴壁细胞生长到表面相互接触时，细胞就会 停止分裂增殖—细胞出现接触抑制。 停止分裂增殖—细胞出现接触抑制。 11.细胞贴壁生长对培养容器有何要求？ 11.细胞贴壁生长对培养容器有何要求？ 细胞贴壁生长对培养容器有何要求 培养瓶的内表面要光滑、无毒、易于贴附。 培养瓶的内表面要光滑、无毒、易于贴附。
10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。 10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。 代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型 培养的动物细胞一般当传代至10 50代左右时 10～ 代左右时， 培养的动物细胞一般当传代至10～50代左右时，部分 细胞核型可能会发生变化， 细胞核型可能会发生变化，其细胞遗传物质可能会发生突 变。
25.无性繁殖和有性繁殖的主要区别是什么？ 25.无性繁殖和有性繁殖的主要区别是什么？ 无性繁殖和有性繁殖的主要区别是什么
有性繁殖是通过产生有性生殖细胞——配子 有性繁殖是通过产生有性生殖细胞——配子（包括精 配子（ 细胞、卵细胞），配子结合后生长成新的个体。 ），配子结合后生长成新的个体 细胞、卵细胞），配子结合后生长成新的个体。 无性繁殖是不经生殖细胞结合的受精过程， 无性繁殖是不经生殖细胞结合的受精过程，由母体的 一部分直接产生子代的繁殖方法。 一部分直接产生子代的繁殖方法。 细胞膜的流动性
28.灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？ 28.灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？ 灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么
病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖 蛋白发生作用，使细胞互相凝聚， 蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子 和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
21.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动 21.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动 是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？ 100%的复制吗 物，是对体细胞供体动物进行了1源自文库0%的复制吗？
否。绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有 绝大部分DNA来自于供体细胞核， DNA来自于供体细胞核 少量的DNA 即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。 DNA， DNA是来自于受体卵母细胞 少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。