纸片法和速率法测定胆碱酯酶的比较
生化检测项目
生化检测项目肝功能#1.总胆汁酸TBA 检测方法:速率法2.前白蛋白PA 检测方法:速率法-----在生化仪上检测结果不好,正常是用特种蛋白仪检测3.腺苷脱氨酶ADA 检测方法:速率法-----在生化仪上检测结果不好,试剂非常贵,建议不做。
4.α-L-岩藻糖苷酶AFU 检测方法:速率法-----在生化仪上检测结果不好,试剂非常贵,建议不做。
5.5′-核苷酸酶5′-NT 检测方法:速率法-----在生化仪上检测结果不好,试剂非常贵,建议不做。
#6.总胆红素TBIL-----钒酸盐法试剂试剂稳定性好,但结果稳定性不好检测方法:终点法-----重氮法试剂试剂稳定性不好,但结果稳定性好检测方法:终点法#7,直接胆红素DBIL-----钒酸盐法试剂试剂稳定性好,但结果稳定性不好检测方法:终点法-----重氮法试剂试剂稳定性不好,但结果稳定性好检测方法:终点法#8。
谷丙转氨酶ALT 检测方法:速率法#9。
谷草转氨酶AST 检测方法:速率法#10。
γ-谷氨酰基转移酶GGT 检测方法:速率法#11。
碱性磷酸酶ALP 检测方法:速率法#12。
胆碱酯酶CHE 检测方法:速率法#13。
总蛋白TP 检测方法:终点法#14。
白蛋白ALB 检测方法:终点法血糖#1。
葡萄糖GLU 检测方法:终点法2。
糖化血清蛋白/果糖胺/糖化血红蛋白要用专仪器做。
生化仪做不准。
血脂#1。
甘油三酯TG 检测方法:终点法#2。
总胆固醇CHO 检测方法:终点法#3。
高密度脂蛋白胆固醇HDL 检测方法:终点法#4。
低密度脂蛋白胆固醇LDL 检测方法:终点法#5。
载脂蛋白A1 APoA1 检测方法:终点法#6。
载脂蛋白B APoB 检测方法:终点法7.脂蛋白a LP(α)检测方法:终点法-----在生化仪上检测结果不好,正常是用特种蛋白仪检测肾功能#1。
肌酐CREA------苦味酸的试剂,检测方法:固定时间法------酶法的试剂,检测方法:终点法#2。
纸片法和速率法测定胆碱酯酶的比较
纸片法和速率法测定胆碱酯酶的比较【关键词】 CHE;纸片法;速率法[摘要]目的:了解胆碱酯酶(CHE)纸片法和速率法两种方法的相关性,便于临床上对有机磷中毒患者的疗效观察和预后估计。
方法:在日立7060全自动生化分析仪上测得CHE减少的标本(其中包括有机磷中毒患者、肝病患者、低蛋白血症等各类患者标本),采用美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9A文件方案,每天再从其中随机选取8份标本,并分别用纸片法和速率法按顺序1周~8周同时进行测定,再按相反顺序8~1重复测定,共测定5 d,记录结果,然后对两种方法得出的结果进行单位比较。
结果:纸片法的结果只有几个单位值,受主观因素影响,而速率法是国际单位数值大且较精确,要做统计学比较是不现实的,只能从数值上做粗略的估计。
纸片法的0 u~8 u应该是速率法的1 000 u以下,纸片法的15 u~19 u 应该是速率法的1 000 u~2 000 u,纸片法的23 u~26 u应该是速率法的2 200 u~3 500 u,纸片法的30 u~34 u应该是速率法的3 600 u~4 300 u。
结论:纸片法是目测的试验,比色板只有简单几个单位值,而且受主观因素影响较大,误差较大,准确性和不高,难以标准化。
速率法不受人为因素影响,而且准确性和重复性高,易于标准化。
两者要做统计学比较是不现实的,只能从数值上做粗略的估计。
建议临床上对有机磷和氨基甲酸酯类中毒的患者,进行疗效观察和预后估计时,动态观察CHE以速率法检测为准。
[关键词] CHE;纸片法;速率法血清或血浆胆碱酯酶(CHE)是临床上对有机磷和氨基甲酸酯类中毒以及肝病患者的一项重要检测指标。
过去对有机磷和氨基甲酸酯类中毒鉴别和中毒程度鉴定常用方法是用纸片法测定CHE,现在由于全自动生化仪广泛应用,日常对有机磷和氨基甲酸酯类中毒以及肝病患者测定CHE多采用速率法,但是夜间为了对有机磷中毒患者鉴别和中毒程度鉴定,测定CHE还多采用纸片法。
肝功胆碱酯酶 检验误差
肝功胆碱酯酶检验误差一、引言肝功胆碱酯酶(CHE)检验是临床生化检验中的一项重要指标,对于评估肝脏功能和疾病诊断具有很高的临床价值。
然而,在实际检验过程中,由于多种原因,往往容易出现误差,影响检验结果的准确性。
为此,本文对肝功胆碱酯酶检验误差进行分析,并提出减少误差的方法。
二、肝功胆碱酯酶检验的误差类型1.方法学误差:主要包括免疫比浊法、酶速率法等测定方法的误差,不同方法之间灵敏度、特异性和精密度存在差异。
2.样本处理误差:采集样本时,容器、抗凝剂选择不当,以及样本储存和运输条件不佳等因素均可能导致检验结果的误差。
3.仪器和试剂误差:仪器设备的性能、校准情况以及试剂的质量等因素都会影响检验结果的准确性。
4.操作人员误差:操作人员技术水平、操作规范性和经验等因素也会对检验结果产生影响。
三、误差影响因素分析1.环境因素:包括温度、湿度、光照等,这些因素可能影响试剂的稳定性和酶活性。
2.样本质量:采集、储存和运输不当会导致样本质量下降,进而影响检验结果。
3.仪器设备:设备性能、校准情况、维护保养等因素直接影响检验结果的准确性。
4.操作技巧:操作人员技术水平、经验以及操作规范性对检验结果具有重要影响。
四、减少肝功胆碱酯酶检验误差的方法1.选择合适的方法:根据实验室设备和实际情况,选择具有较高灵敏度、特异性和精密度的方法。
2.严格规范样本处理:确保采集、储存和运输过程中的质量控制,降低样本误差。
3.确保仪器设备和试剂的质量:选购高性能的仪器设备,定期进行校准和维护,选择优质试剂,并严格遵循试剂说明书进行操作。
4.提高操作人员的专业水平:加强业务培训,提高操作技能和质量意识,规范操作流程。
5.加强室内质量控制:定期进行室内质控,分析误差原因,并及时采取措施进行纠正。
五、结论降低肝功胆碱酯酶检验误差,需要从方法选择、样本处理、仪器设备和试剂质量、操作人员专业水平以及室内质量控制等多方面进行综合改进,以确保检验结果的准确性和可靠性。
速测卡法与酶抑制率法快速检测蔬菜中农药残留的对比研究
速测卡法与酶抑制率法快速检测蔬菜中农药残留的对比研究作者:汤彤来源:《安徽农业科学》2017年第01期摘要 [目的]研究蔬菜农药残留快速检测的方法,为保障果蔬类农产品的质量安全提供技术支撑。
[方法]以六大类300份蔬菜样品的检测结果为依据,对速测卡法和酶抑制率法2种快速检测方法中的检测原理、检测步骤、检测结果、检出限、阳性结果符合率进行对比研究。
[结果]速测卡法和酶抑制率法都属于快速检测农药残留的方法,相比较气相色谱法方便简单。
速测卡法便于携带,随用随取,检测速度更快。
酶抑制率法需要使用RP-410型农残速测仪或其他类型分光光度计、恒温培养箱等设备。
[结论]速测卡法易操作,无需仪器和试剂,是市场、车站等场所快速检测蔬菜农药残留的较好方法。
关键词农药残留;快速检测;速测卡法;酶抑制率法中图分类号 S481+.8 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2017)01-0102-03A Comparative Study on Rapid Detection of Pesticide Residues in Vegetables by Measurement Card and Enzyme Inhibition MethodsTANG Tong(Agricultural Products Quality Inspection Center of Haimen City in Jiangsu Province,Haimen, Jiangsu 226100)Abstract [Objective] The aim was to study rapid detection method for pesticide residues in vegetables, and provide technical support for ensuring quality and safety of fruits and vegetables. [Method] Based on the detection results of 300 vegetable samples in 6 major categories, testing principle, procedures, results, detection limit, coincidence rate of positive results of measurement card method and enzyme inhibition method were comparatively studied. [Result] The measurement card method and enzyme inhibition method both are rapid detection methods of pesticide residues, they are convenient and simple compared with the gas chromatography method. The measurement card method is easy to carry, with the use of access, the detection rate is faster. The enzyme inhibition method requires the use of RP-410 type rapid test instrument or other type spectrophotometer, constant temperature incubator and other equipments. [Conclusion] The measurement card method is easy to operate, without of instruments and reagents and is a good way to detect pesticide residues in vegetables from market, station and so on.Key words Pesticide residue;Rapid detection;Measurement card method;Enzyme inhibition method蔬菜作为人们日常生活中不可或缺的食品,其质量安全直接关系到消费者的身体健康及生命安全。
全血、血浆、红细胞胆碱酯酶速率测定法
全血、血浆、红细胞胆碱酯酶速率测定法
顾华强;陈再射;游全程;蒋良述;杨跃林
【期刊名称】《现代预防医学》
【年(卷),期】1992(19)2
【摘要】本文介绍用乙酰硫代胆碱作底物、DTNB作显色剂在405nm处连续监测,建立了全血、血浆、红细胞胆碱酯酶活性的速率测定法。
线性范围全血为600-9000U/L血浆为200-8000U/L,红细胞批内CV2.6-4.3%,批间CV3.4-5.6%,平均回收率96.3%。
与羟胺法比较r=0.92(P<0.001)。
本法灵敏、精确度与线性较满意,操作简易,适于科研、临床应用。
【总页数】4页(P96-99)
【关键词】胆碱酯酶;红细胞;速率法
【作者】顾华强;陈再射;游全程;蒋良述;杨跃林
【作者单位】华西医大职业病防治医院
【正文语种】中文
【中图分类】R446.112
【相关文献】
1.全血、血浆、红细胞胆碱酯酶正常值的探讨 [J], 阿拉塔;张建余;刘彦慧
2.全血、血浆、红细胞胆碱酯酶活性在急性有机磷农药中毒病程中的变化及意义[J], 张在其;梁仁;黄韬;杨华喜;彭巍;陈涤民;尹芙蓉;易高;周玉淑
3.微量动态监测有机磷中毒者全血、血浆、红细胞胆碱酯酶活性的临床研究 [J],
张在其;梁仁;黄韬;杨华喜;彭巍;陈涤民;尹芙蓉;易高;王承志;周玉淑
4.血液胆碱酯酶活力测定方法的进一步研究Ⅰ.红细胞/全血胆碱酯酶活力比例及红细胞计数校正酶活力值的研究 [J], 孙东红;赵丽红;周宏东;薛寿征
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胆碱酯酶测定方法
胆碱酯酶测定方法
胆碱酯酶测定方法一般分为以下几种:
1.电化学法:该方法利用电化学传感器测定胆碱酯酶在体外水溶液中所釋放出的胆碱量。
2.比色法:该方法使用乙酰胆碱(ACh)作为底物,使其在胆碱酯酶作用下分解为胆碱和乙酸。
其中生成的乙酸与酶促色反应物(Ellman's reagent)发生反应,并生成黄色的苯硫酚盐(thioamato compounds),在一定波长下可测定其吸光度。
3.放射性测定法:该方法使用放射性标记的底物,如3H-ACh或14C-ACh作为标记,使其在胆碱酯酶的作用下分解,再通过放射计测量放射性底物和产生的放射性胆碱数目的差别,得出胆碱酯酶的活性。
4.光学测定法:该方法利用胆碱酯酶和重组胆碱酯酶能够在基质中催化反应,并通过检测基质中的光学旋光度或发光度来测定胆碱酯酶的活性。
总之,胆碱酯酶测定方法根据测量原理和技术手段的不同,应用范围和测量精度也会有所区别。
具体选择何种方法应根据实际需要和实验条件来选择。
肝功能中各检测项目的测定方法【精选】
肝功能中各检测项目的测定方法、测定原理和临床意义1、血清总胆汁酸TBA :(1)测定方法:A 、酶循环法,B 、3a-HDS 法(3-a 羟类固醇脱氧酶)(2)测定原理方法A :胆汁酸被3α羟基类固醇脱氢酶(3a-HSDH )及口-硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸氧化型特异性的氧化,生成3酮类固醇及}硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型。
此外,生成的3酮类固醇在3α羟基类固醇脱氢酶及β硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型存在下,生成胆汁酸及β烟酰胺嘌呤二核苷酸氧化型。
以上依据循环酶而放大量的胆汁酸测定生成的β-硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型的吸光度,计算血清中胆汁酸的量。
方法B :在3-a 羟类固醇脱氧酶作用下,各种胆汁酸C3上α位的羟基脱氧形成羰基,同时氧化型NAD 还原成NADH 随后NADH 上的氢由黄递酶催化转移给硝基四氮唑蓝(NTB )产生甲替,用磷酸中止反应,甲替的产量与总胆汁酸成正比,在波长540nm 比色,与同样处理的标准品比较,计算其含量。
(3)临床意义1.测定血清中胆汁酸可提供肝胆系统是否正常,肝、胆疾病时周围血循环中的胆汁酸水平明显升高。
急性肝炎早期和肝外阻塞性黄疸时可增至正常值的100 倍以上。
对肝胆系统疾病的诊断具有特异性。
2.可敏感地反映肝胆系统疾病的病变过程。
肝胆疾病时血清胆汁酸浓度的升高与其他肝功能试验及肝组织学变化极为吻合,在肝细胞仅有轻微坏死时,血清胆汁酸的升高,常比其他检查更为灵敏。
据报道,急性肝炎、肝硬化、原发性肝癌、急性肝内胆汁郁滞、原发性胆汁性肝硬化以及肝外阻塞性黄疸,其血清胆汁酸均100 %出现异常。
上述疾病时均有血清胆汁酸含量的增高。
2、丙氨酸氨基转移酶ALT(1)测定方法:酶偶联法,赖氏法,连续监测法(2)测定原理:L-丙氨酸 + α-酮戊二酸---ALT ----L-丙酮酸 + L-谷氨酸 丙酮酸 +NADH+H +---------LD -------L--乳酸+NAD +4 11 201628(3)临床意义:谷丙转氨酶升高临床意义就在于对急性乙型肝炎、慢性肝炎、HBV 携带者、重型肝炎以及肝硬化、肝癌等一系列病毒性肝炎的诊断和分析,ALT 的升高只表示肝脏可能受到了损害。
有机磷农药中毒胆碱酯酶测定
实习报告
• 本次实验的名称、方法、原理 • 实验测定的结果 • 实验结果的计算和评价
• 本次实验操作采用某生物工程公司生产 的“血清胆碱酯酶测定试剂盒”测定。
• 具体的操作步骤按照试剂盒“操作说明 书”进行。
• 酶活性的计算按照“操作说明书”进行
注意事项
• 注意血量、底物浓度、反应温度、保温 时间等;
• 注意个体间胆碱酯酶活性的差异; • 由于实际工作中对比较接触毒物前后酶
活性的改变不易办到,应采用对照和正 常值作参考。
按照测定原理分类
• 测定酶作用产物生成量的方法:主要测 定乙酸,采用溴麝香草酚蓝比色法;
• 测定酶作用后剩余底物的方法:如羟肟 酸铁比色法(羟胺三氯化铁法);
• 利用特殊底物做测定:如用乙酰硫代胆 碱(DTNB法)或乙酰萘做底物的测定 方法。
按照具体操作可分为:
Байду номын сангаас• 光电比色法 • 纸片法 • 便携式测定仪
胆碱酯酶测定的意义
• 胆碱酯酶分为真性胆碱酯酶和假性胆碱酯酶。 • 真性胆碱酯酶:乙酰胆碱酯酶,主要分布在神
经细胞和红细胞,对于乙酰胆碱有特殊作用,
其主要对神经传导起作用;(有机磷抑制此酶)
• 假性胆碱酯酶:丁酰胆碱酯酶,主要分布于血 清、唾液腺及肝脏,分解丁酰胆碱作用强,也 可以分解丙酰胆碱和乙酰胆碱(作用较弱)。
• 全血胆碱酯酶(特异性胆碱酯酶)降低 主要见于有机磷农药和神经性化学毒剂 中毒。血清胆碱酯酶(非特异性胆碱酯 酶)降低见于有机磷农药中毒及肝细胞 严重损害。
胆碱酯酶测定的意义
• 血液胆碱酯酶活性检验是有机磷农药中 毒早期发现、诊断及治疗的重要指标之 一。
测定方法
• 按照2002年发布的职业病职业性急性有 机磷杀虫剂中毒诊断标准(GBZ82002),胆碱酯酶活性的检验有硫代乙 酰胆碱-二硫双硝基苯甲酸法(GBZ52)、 便携式胆碱酯酶测定仪法和纸片法等,但 是对胆碱酯酶活性测定的方法不作统一 规定。
农药残留快速检测方法操作规程
农药残留快速检测方法操作规程1目的能快速检测有机磷和氨基甲酸脂类农药在蔬菜中的残留,检验室操作人员按本规程操作,保证公司到货蔬菜的质量。
2范围本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸脂类农药残留量的快速筛选测定,规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸脂类农药残留量的快速检验方法。
有两种检验方法:速测卡片(纸片法)、酶抑制率法(分光光度法)3依据GB/T 5009.199-2003,蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测。
一、速测卡片(纸片法)4原理胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酯酸类农药的存在,农药速测卡片是用对农药高度敏感的胆碱酯酶和显色剂做成的酶试纸。
5试剂速测卡片:胆碱酯酶和靛酚乙酸试剂做成的纸片6仪器常量天平37°C±2°C恒温装置4.分析步骤4.1整体测定法①样品处理:选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1cm左右见方碎片,取5&放入带盖瓶中,加入10mL缓冲液或纯净水中,振摇50次,静置2min以上。
②取一片速测卡片,撕去上盖膜,用白色药片沾取提取液,放置10min以上进行预反应,有条件的在37C 恒温装置中,放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
③将速测卡片对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应,根据白色药片的颜色判断结果。
每批测定应设一个空白对照卡。
4.2表面测定法(粗筛法)①擦去蔬菜表面泥土,滴2滴〜3滴缓冲液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
②取一片速测卡片,撕去上盖膜,将蔬菜上的液滴滴到白色药片上。
放置10min以上进行预反应,有条件的在37°C恒温装置中,放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
③将速测卡片对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应,根据白色药片的颜色判断结果。
胆碱酯酶(CHE)测定操作规程
胆碱酯酶(CHE)测定操作规程一、用途本产品用于体外定量测定血清、血浆样品中胆碱脂酶(CHE)的活性。
二、临床意义(一)概述胆碱脂酶可以分为乙酰胆碱酯酶和假性胆碱酯酶,前类亦称真性胆碱酯酶,主要存在于胆碱神经末梢突触间隙。
乙酰胆碱酯酶可以在神经末梢、效应器接头或突触间隙等部位终止乙酰胆碱作用。
(二)临床意义1. 病理性升高:肾病综合征,甲状腺功能亢进,糖尿病,脂肪肝,原发性家族性高CHE血症,血清CHE变异,原发性肝癌等。
2. 病理性降低:重症肝炎,慢性肝炎活动型,肝硬化,肝脓肿,各种癌,低蛋白血症(营养不良,贫血,感染,皮肌炎,急性心肌梗死),遗传性血清CHE异常症,有机磷中毒(轻度中毒降低30%,中度中毒降低50%,重度中毒降低70%),溃疡性结肠炎,肾功能不全,天疱疮,烧伤等。
(三)检验原理胆碱酯酶催化S-碘化丁酰基硫代胆碱水解,生成丁酸与硫代胆碱,硫代胆碱与黄色的铁氰化钾[Fe(CN)6]3-反应后形成无色的[Fe(CN)6]4-,在405nm吸光度下降的速率与标本中胆碱酯酶活性成正比。
四、样品血液样品原则上采集晨起空腹血(禁食12小时);患者处于平静、休息状态,减少患者由于运动、饮食带来的影响;静脉采血时患者应取坐位或卧位;止血带使用后1分钟内采血,回血后立即松开;正确使用抗凝剂;防止溶血;防止过失性采样。
样品运送过程中应防止过度振荡、防止样品容器的破损、防止样品被污染、防止样品及唯一性标志的丢失和混淆,防止样品对环境的污染、水分蒸发。
CHE测定样品为不溶血的血清、血浆(肝素抗凝)。
样品应在低温条件下运输并及时测定。
不能使用EDTA抗凝剂的标本。
五、试剂(一)试剂组成不同批号试剂中各组份不能互换。
(二)试剂准备R1和R2试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。
(三)试剂的保存及稳定性1. 不能冰冻试剂。
2. 未开瓶的R1和R2试剂应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。
胆碱酯酶活性测定方法
胆碱酯酶活性测定方法
胆碱酯酶(acetylcholinesterase, AChE)活性测定方法主要有以下几种常用的方法:
1. 利用酶促反应产生的色素变化测定:
(1) 比色法:将胆碱酯酶底物乙酰胆碱与碱性溴化镉等试剂反应,生成黄色产物,利用比色计或分光光度计测定产物的吸光度,间接测定胆碱酯酶活性。
(2) 荧光法:将胆碱酯酶底物与荧光染料反应,使底物和产物之间发生荧光变化,利用荧光光谱仪测定荧光强度,间接测定胆碱酯酶活性。
2. 利用电化学方法测定:常用的是反应器中使用碳电极或银电极,利用底物和产物之间的电位差变化测定胆碱酯酶活性。
3. 利用放射性同位素标记测定:将底物或产物标记上放射性同位素,通过测定放射性同位素的放射性强度,间接测定胆碱酯酶活性。
4. 利用质谱法测定:将底物和产物分离并通过质谱仪测定其质荷比,间接测定胆碱酯酶活性。
需要注意的是,不同的测定方法适用于不同的实验目的和样本类型,具体的选择应根据实验需求和设备条件来确定。
三种基质测定血清胆碱酯酶活力的比较
参考文献:[1]Biao He,Liang Y ou et al.S OCS23is frequently silenced by hypermethyla2tion and suppresses cell growth in human lung cancer[J].Proc Natl Acad Sci U S,2003,100(24):14133.[2]Farabeg oli F,Ceccarelli C,Santini D,et al.Suppress or of cytokine sig2nalling2(S OCS22)expression in breast carcinoma[J].J Clin Pathol, 2005,58(10):1046.[3]Lee H,Y u H.M ethylation of S tat1prom oter can contribute to squam ouscell carcinogenesis[J].J Natl Cancer Inst,2006,98(3):154.[4]C orvinus FM,Orth C,M origgl R,et al.Persistent ST AT3activation incolon cancer is ass ociated with enhanced cell proliferation and tum orgrowth[J].Neoplasia,2005,7(6):545.[5]Brnder C,Nielsen M,K altoft K,et al.ST AT32mediated constitutive ex2pression of S OCS23in cutaneous T2cell lym phoma[J].Blood,2001,97(2):1056.[6]Niwa Y,K anda H,Shikauchi Y,et al.M ethylation silencing of S OCS23prom otes cell growth and migration by enhancing JAK/ST AT and FAK signalings in human hepatocellular carcinoma[J].Oncogene,2005,24(42):6406.[7]贾芙蓉,周劲松,张哲雄,等.S OCS23mRNA在胃癌组织及胃癌细胞系中的表达[J].中国实验诊断学杂志,2006,10(5):446.(收稿日期:2006-11-27)文章编号:1007-4287(2007)04-0490-02三种基质测定血清胆碱酯酶活力的比较谢 萍1,潘洪涛2,刘国良3(1.吉林出入境检验检疫局,吉林长春130062;2.中国人民解放军第二○八医院,吉林长春130062;3.吉林大学公共卫生学院卫生检测教研室,吉林长春130021) 人的血液胆碱酯酶(Cholinesterase)有两类。
全血胆碱脂酶测定精讲
实验器材
一次性注射器(1ml) 12个,采血用; 微量移液器(20μl);分光光度计; 玻璃比色杯(每组至少3个);擦镜纸; 恒温水浴箱(37℃±0.5 ℃ ) 移液管(0.2ml,1ml,5ml); 试管;漏斗;容量瓶
试剂
试剂均为分析纯,水为蒸镏水或去离子水。 1.磷酸盐缓冲溶液,pH=7.2 准确称取磷 酸氢二钠(Na2HP04· 12H2O)16.72g和磷酸二氢钾 (KH2PO4)2.72g,用水溶解并稀释到1000ml, 置4℃冰箱中保存。 2.碱性羟胺溶液 临用时将139 g/L的盐酸 羟胺溶液与140 g/L的氢氧化钠溶液等体积混 合。 3.盐酸溶液1+2 浓盐酸l份加水2份混合。
A管(样品管)
37℃水浴 30min(准确计时) 碱性羟胺4ml,振3min 1∶2盐酸溶液2ml, 摇1min 10%三氯化铁溶液2ml
摇匀、过滤、比色
计算
1.被水解 的乙酰胆碱吸光度=
对照管吸光度(B管)- 样品管吸光度(A管)
2.对照标准曲线,得出被水解的乙酰胆碱( μmol )
---即0.02ml血经37 ℃,30min反应条件下的
准确控制水浴温度和放置时间
加三氯化铁显色后,在20min内比色
参比管的溶液留用到最后
实验报告要求
[实验目的] [实验原理] [实验步骤] [实验结果]
[分析与讨论]
胆碱酯酶活性绝对值C
3.胆碱酯酶活性相对值(%)
样品胆碱酯酶活性绝对 值 100 健康人碱酯酶活性绝对 值
浙江地区健康人胆碱酯酶活性绝对值
男:3.22 ±0.336 μmol
女:3.19 ±0.398 μmol
注意事项
采血前先准备好试管,加入磷缓 采血时严格消毒,用过的棉球、刺针集 中放置
微生物快检方法纸片法与平板计数法的对比研究
2 微生物快速检验的范畴及指标
2.1 微生物快速检验的范畴 (1)对食品生产环境卫生及消毒
情况的检测,如对其加工过程加工环 境的卫生条件把控,工器具等生产加 工必需物品的微生物检验;对其生产 车间(或后厨)的整体卫生指标的检 控等。
(4)VITEK 法:需要全自动菌落 检定仪,样品中致病菌经过处理后, 用平板划线培养单个菌落,之后使用 仪器进行鉴定,5 天左右可查看结果, 所需经费高昂。
(5)PCR 法:使用聚合酶链式反 应仪,样品经处理后上机检验,直至 找到目标基因,本方法有着极高的灵
160 食品安全导刊 2019年6月 Copyright©博看网 . All Rights Reserved.
(2)对其制作所需原料、辅料的 微生物检验,包括食用动物、蔬菜、 谷物等原料,及用于调味调色等辅料
的病原微生物检验,防止在食品成品 中带入有害且不易杀灭的微生物。
(3)对用于盛放食品成品的器皿 和饮食中所必需的工具进行检验,如 碗、筷子等餐饮具。
(4)对预包装食品的包装工序进 行监控及检验。 2.2 微生物快速检验的指标
Technology 科技 食品技术研究
微生物快检方法纸片法与平板计数法的对比研究
□ 柴景亮 酒钢集团甘肃祁牧乳业有限责任公司
摘 要:当前,社会经济飞速发展,人们对健康生活水平的追求也在不断提高,就食品服务行业来说,吃得好、吃 的健康是现代人们的追求。但是,市场上也存在部分不合格食品,人们担心自己吃的食品到底是不是健康无害的食品, 这使食品快速检验成为监控食品质量安全极为重要的一个环节。本文针对食品微生物检验中较为快捷的“纸片法(Rapid Microbiological Test Paper)”和“平板培养法”两种方法来进行比对及研究,列出它们各自的优缺点,便于更好的选择 及使用。
血液胆碱酯酶活性测定三种方法的比较
血液胆碱酯酶活性测定三种方法的比较黄金祥;汤晓勇;陈巍;王文玲【期刊名称】《劳动医学》【年(卷),期】2000(17)3【摘要】比较三种测定血液胆碱酯酶 (ChE)活性的方法。
[方法 ]用改良Ellman 法 (A法 )、携带式ChE测定仪法 (B法 )和纸片法 (C法 )同时测定 74名健康人和急性农药中毒患者 5 8人次血液ChE活性 ,统计和分析测定结果。
[结果 ]建立了三种方法血液ChE活性的正常参比值 ,急性氨基甲酸酯、有机磷及有机磷与其他农药混配中毒患者血液ChE活性均有不同程度下降 ,A法中红细胞AChE、全血和血浆ChE以及C法中全血ChE活性百分值与B法中红细胞AChE活性均呈密切的正相关关系 ,相关系数r分别为 0 92 8、0 939、0 6 83和0 90 6。
[结论 ]三种方法均可用于急性有机磷中毒患者ChE活性的测定 ,三种方法各有所长 ,各有所短。
【总页数】3页(P156-158)【关键词】胆碱酯酶;测定;杀虫剂;中毒;血液;测定【作者】黄金祥;汤晓勇;陈巍;王文玲【作者单位】中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所【正文语种】中文【中图分类】R139.3;R446.122【相关文献】1.测定苷甲对ERK激酶活性影响的三种方法比较 [J], 刘姬艳;于立坚;马润娣2.测定人红细胞G6PD活性的三种方法比较 [J], 聂崇兴;赵双星3.离子色谱法和传统分析法测定血液透析水中三种阴离子的方法比较 [J], 田海娇;武婷;申剑4.三种血液胆碱酯酶测定方法的比较 [J], 王玉萍;王绪玲;李慧;张巡淼;何凤生5.两种全血胆碱酯酶活性测定方法的相关性比较 [J], 万伟国;徐麦玲;陆爱玲;邹和建;陈宇明因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
蔬菜农药残留快速检测技术_胆碱酯酶速测卡法
定在一张小卡片上,减少了试剂配制过程,便于室温 以 1:1 的比例加缓冲液提取,所以溶液中的残留量与
贮存,随用随取,成本低廉。特别是配合 PR2000A 型 蔬菜中的农药残留浓度相当,检测时只需滴 2 滴溶
农药残留速测仪使用,使酶抑制反应在最佳状态下进 液,使得检出绝对量较低,而分光光度法是取 2g 蔬
※分析检验
食品科学
2003, Vol. 24, No. 6 109
蔬菜农药残留快速检测技术 —胆碱酯酶速测卡法
王多加,胡祥娜,周向阳,张 兵 (深圳市无公害农产品质检站,深圳 518040)
摘 要:介绍了一种简便、快速、准确而实用的蔬菜农药残留快速检测方法,与胆碱酯酶比色法进行了对比试 验,并用国标法进行了验证,结果表明,该法灵敏度较高,重现性好,能够满足蔬菜采前和售前检测的需要。特别适 用于无公害蔬菜监测网络的建设和管理。 关键词:蔬菜;农药残留;快速检测;胆碱酯酶 A b s t r a c t:A rapid testing method of pesticides residue in vegetables was introduced.It was compared with conventional colorimetric analysis of cholinesterase and verified by Chinese standard method. The results showed that the rapid method was sensitive and accurate.It satisfied the requirement for testing before harvesting and selling, especially suitable for the setting-up and management of the inspection network of non-pollution vegetables. K e y w o r d s:vegetable;pesticide residue;rapid testing;cholimesterase 中图分类号:TS207.5+3 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2003)06-0109-05
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纸片法和速率法测定胆碱酯酶的比较
【关键词】 CHE;纸片法;速率法
[摘要]目的:了解胆碱酯酶(CHE)纸片法和速率法两种方法的相关性,便于临床上对有机磷中毒患者的疗效观察和预后估计。
方法:在日立7060全自动生化分析仪上测得CHE减少的标本(其中包括有机磷中毒患者、肝病患者、低蛋白血症等各类患者标本),采用美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9A文件方案,每天再从其中随机选取8份标本,并分别用纸片法和速率法按顺序1周~8周同时进行测定,再按相反顺序8~1重复测定,共测定5 d,记录结果,然后对两种方法得出的结果进行单位比较。
结果:纸片法的结果只有几个单位值,受主观因素影响,而速率法是国际单位数值大且较精确,要做统计学比较是不现实的,只能从数值上做粗略的估计。
纸片法的0 u~8 u应该是速率法的1 000 u以下,纸片法的15 u~19 u 应该是速率法的1 000 u~2 000 u,纸片法的23 u~26 u应该是速率法的2 200 u~3 500 u,纸片法的30 u~34 u应该是速率法的3 600 u~4 300 u。
结论:纸片法是目测的试验,比色板只有简单几个单位值,而且受主观因素影响较大,误差较大,准确性和不高,难以标准化。
速率法不受人为因素影响,而且准确性和重复性高,易于标准化。
两者要做统计学比较是不现实的,只能从数值上做粗略的估计。
建议临床上对有机磷和氨基甲酸酯类中毒的患者,进行疗效观察和预后估计时,动态观察CHE以速率法检测为准。
[关键词] CHE;纸片法;速率法
血清或血浆胆碱酯酶(CHE)是临床上对有机磷和氨基甲酸酯类中毒以及肝病患者的一项重要检测指标。
过去对有机磷和氨基甲酸酯类中毒鉴别和中毒程度鉴定常用方法是用纸片法测定CHE,现在由于全自动生化仪广泛应用,日常对有机磷和氨基甲酸酯类中毒以及肝病患者测定CHE多采用速率法,但是夜间为了对有机磷中毒患者鉴别和中毒程度鉴定,测定CHE还多采用纸片法。
由于两种方法采用单位不同,这就给临床上观察有机磷中毒患者的疗效观察和预后估计造成一定困难。
目前还没有对速率法和纸片法相关性的报道,为了解这两种方法的相关性,分别用这两种方法同时对临床上各种CHE减少的患者进行检测。
1 材料和方法
1 仪器
日立7060全自动生化分析仪,37 ℃恒温箱,计时器。
2 试剂
速率法用山东3 V试剂公司生产的CHE试剂盒,纸片法用潍坊市康华公司生产的CHE试纸。
3 原理
纸片法:血清中CHE与含有氯化乙酰胆碱和溴麝香草酚蓝混合液的纸片作用,生成胆碱与醋酸,由于醋酸可使pH下降,纸片由深蓝变成黄绿色,经一定时间后,取出纸片与比色板对照可得CHE活性。
速率法:丁酰硫代胆碱+Н2О。
表1 纸片法和速率法结果比较(略)注:i为标本号,X1、X2、分别为速率法两次测定结果和平均值,Y1、Y2、分别为纸片法两次测定结果和平均值。
纸片法如果值太低延长一
倍时间后再观察结果。
以上单位已做舍去小数点后数字处理。
纸片法是目测方法,参考值为30 u~80 u,结果只有0、8、15、23、30、38、45、60、80几个单位值,受主观因素影响,误差较大,精确度不高。
速率法的参考值为4 300 u~13 200 u,单位是国际单位数值大且较精确,两者要做统计学比较是不现实的,只能从数值上做粗略的估计。
从表1估计,纸片法的0 u~8 u应该是速率法的1 000 u以下,纸片法的15 u~19 u应该是速率法的1 000 u~2 200 u,纸片法的23 u~26 u应该是速率法的2 300 u~3 500 u,纸片法的30 u~34 u应该是速率法的3 600 u~4 300 u。
4 讨论
人体CHE可分为二种,一种是乙酰CHE(AcCHE),由神经细胞和骨髓新生细胞所制造,主要存在于中枢神经系统灰质和红细胞中,其生理作用主要是水解乙酰胆碱为胆碱和醋酸;另一种是丁酰CHE(BuChE),由肝细胞制造,主要存在于血浆、肝脏和神经系统白质中,生理作用除了水解乙酰胆碱还作用于其他胆碱酯类。
临床常用的血清CHE测定主要是BuCHE的测定,CHE的测定是临床上对有机磷和氨基甲酸酯类中毒以及肝病患者的一项重要检测指标。
由于CHE减少也可见于营养不良、重症贫血、严重结核病、晚期血吸虫病等,所以鉴别有机磷和氨基甲酸酯类中毒,应排除以上因素。
过去对有机磷和氨基甲酸酯类中毒鉴别和中毒程度鉴定常用方法是用纸片法测定CHE,由于有机磷和氨基甲酸酯类中毒患者要动态观察CHE的变化,而纸片法的结果只有0、8、15、23、30、38、45、60、80简单几个单位值,很难。