Spermine NONOate_一氧化氮供体_136587-13-8_Apexbio
一氧化氮供体对实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用
doi:10 3969/j issn 1006 2963 2011 02 002基金项目:国家自然科学基金资助项目(81070964);黑龙江省攻关基金资助项目(GC05C40602)作者单位:150001哈尔滨医科大学附属第四医院神经内科(尚宏、王鹏军);150086哈尔滨医科大学附属第二医院神经内科(付锦、王维治)通讯作者:付锦,Email:Fujin6677@126 com一氧化氮供体对实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用尚宏 付锦 王鹏军 王维治摘要:目的 探讨一氧化氮供体3 吗啉 斯德酮亚胺(3 mo rpholinosydno nimine,SIN 1)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(ex perimental auto immune encephalo myelitis,EA E)大鼠的作用。
方法 应用豚鼠髓鞘碱性蛋白68 86(my elin basic pr otein 68 86,M BP68 86)主动免疫制作EA E 实验动物模型。
将大鼠随机分为SIN 1组和对照组,SI N 1组大鼠于致敏后第0~7天给予SIN 1药物干预,动态观察两组大鼠的临床症状及体质量变化,致敏后第14天采用ELISA 方法检测各组大鼠单个核细胞(mononuclear cells,M NC)培养上清中 干扰素(IF N )和白细胞介素 4(IL 4)水平,并观察大鼠脑组织病理变化。
结果 与对照组比较,SIN 1组大鼠发病时间延迟,恢复时间提前,体质量明显增加,临床症状明显减轻;疾病症状最高评分明显降低。
SIN 1组大鼠M N C 培养上清中IF N 水平为(90 29 9 07)pg /mL ,较对照组的(121 57 10 44)pg /mL 明显降低(P <0 05);IL 4水平为(18 14 3 98)pg/mL,较对照组的(8 14 1 95)pg /mL 明显增加(P <0 05)。
一氧化氮免疫剂 鱼虾抗病促生长
一氧化氮免疫剂鱼虾抗病促生长舟山水产网日期：2011-2-2姜礼燔许云萍一氧化氮作为一种新型生物免疫剂早在十九世纪中叶就由美国科学家大卫发现了，此后伊格纳罗、穆拉及芬奇戈特通过进一步研究发现，一氧化氮既是生物的重要的免疫分子、效应分子和信使分子，又广泛分布于人体、畜、禽、鱼、虾、蟹、贝等生物机体中，参与多种生理、生化如抗病促长及其机理效应。
由于此发现发表于美国科学杂志而引起众多科学家的高度关注，伊格纳罗在1998年度荣获诺贝尔医学奖，从而掀起了全球医药、生物及化学界对一氧化氮的研究热潮。
一氧化氮在动物体内各种生理、生化过程中起着极其重要的作用，除调节体内心脑血管系统、增加新陈代谢、调节胰岛素分泌，解除堵塞血管带来的脑卒和心肌梗塞以外，还起着灭菌、灭病毒和灭寄生虫等作用。
研究证实，产生一氧化氮的机制是体内备有L-谷氨酸、L-精氨酸、花青素及维生素C、维生素E等主要前体物组分，通过一氧化氮的合成酶催化成多价胍基氮离子与强氧化物合成渗透性极强的小分子一氧化氮物质。
此反应甚速，在组织中的半衰期仅几秒钟。
在我国科学界研究一氧化氮对生物免疫抗病的性能已历时多年了，笔者在二十世纪80年代初就筛选纯天然植物萃取一氧化氮前体物应用于水生养殖动物中抗病获得良好的效果。
防治鱼类出血病从二十世纪80年代以来，在我国主要淡水养鱼地区每年皆屡发生草、鲢、鳙等家鱼的出血性败血病，甚至波及鳜、鲈、鮰等特种养殖品种，且其病情来势猛，流行面广，加之并发细菌性烂鳃、赤皮等疾病，死亡率一般在30%~40%,有的几乎“全军覆没”.各地对策常采用氯、溴、季铵盐等外用消毒剂，或结合内服抗生素等药，虽然这些措施有一定成效，但也存在不少副作用。
因而笔者选用具有高效、速效及无任何副作用的生物制剂--一氧化氮前体物质复配增效剂而成的一种新型生物免疫剂（NewBioactiveadditive简称BOA），通过内服效果十分满意。
由于提高了免疫功能增强鱼体质，几乎不患病了。
氧化纳米铈清除活性氧改善DSS诱导的小鼠结肠炎疾病活动度的研究
氧化纳米铈清除活性氧改善DSS诱导的小鼠结肠炎疾病活动度的研究卢雨涵;石亚红;龙满美;王子;吴颖为【期刊名称】《上海交通大学学报(医学版)》【年(卷),期】2024(44)1【摘要】目的·探究氧化纳米铈-聚乙二醇(ceria nanoparticles-polyethylene glycol,CeNP-PEG)清除活性氧(reactive oxygen species,ROS)、改善葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)诱导的小鼠结肠炎疾病活动度的效果。
方法·首先应用醋酸铈的水合物、油胺与二甲苯等合成氧化纳米铈,经聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(mPEG-DPSE)修饰并提纯后得到纯化的CeNP-PEG。
应用透射电子显微镜(transmission electron microscopy,TEM)和动态光散射(dynamic light scattering,DLS)观察测定CeNP-PEG粒径和zeta电位等。
体外培养小鼠巨噬细胞(Raw264.7)并诱导成为促炎表型(M1表型)。
采用0.5μg/m L和1.0μg/mL CeNP-PEG分别处理M1表型巨噬细胞后应用Western blotting检测核因子-κB(nuclear factors-κB,NF-κB)信号通路相关蛋白表达的变化。
构建DSS诱导的小鼠结肠炎模型并在造模期间予以尾静脉注射CeNP-PEG(1.0 mg/mL)3次,同时监测正常对照组(Normal组)、模型组(DSS组)和CeNP-PEG治疗组小鼠体质量、粪便性状与便血次数等,计算肠道炎症的疾病活动指数(disease activity index,DAI)。
应用二氢乙啶(dihydroethidine,DHE)染色法检测小鼠肠道组织的ROS水平并通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RTqPCR)检测肠道组织炎症细胞因子γ干扰素(interferon-γ,Ifn-γ)、白细胞介素-6(interleukin-6,Il-6)、Il-1β和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,Tnf-α)等基因的表达水平。
外源一氧化氮供体硝普钠对番茄幼苗盐胁迫伤害的缓解作用
外源一氧化氮供体硝普钠对番茄幼苗盐胁迫伤害的缓解作用孙德智;杨恒山;张庆国;范富;苏雅乐其其格;彭靖;韩晓日【摘要】以硝普钠(SNP)为NO供体,番茄品种秦丰保冠幼苗为材料,研究50～800μmol·L-1 SNP对100 mmol·L-1 NaCl下番茄幼苗生长、光合色素含量、气体交换参数、叶绿素荧光参数、膜脂过氧化及抗氧化酶活性的影响.结果显示:1)盐胁迫下,不同浓度SNP处理的番茄幼苗生长抑制均能得到有效缓解,同叶片叶绿素含量、光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、最大荧光(Fm)、PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)、实际光化学效率(ΦPSⅡ)和光化学淬灭系数(qP)显著升高,初始荧光(Fo)和非光化学淬灭系数(qN)显著降低,且SNP浓度为100μmol·L-1变幅均达最大;2)番茄幼苗在盐胁迫下叶片过氧化氢酶(CAT)活性变化不显著,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性显著升高,除400、800μmol·L-1 SNP处理抑制POD活性升高外,各浓度SNP处理均可促进上述3种酶活性的升高,并使叶片丙二醛含量和?解质渗出率显著降低,其中以100μmol·L-1 SNP处理变化最显著.研究表明,外源NO供体SNP主要通过增强番茄幼苗叶片的光合能力来缓解盐胁迫对其造成的氧化伤害,进而提高了番茄植株的耐盐性.【期刊名称】《浙江农业学报》【年(卷),期】2019(031)008【总页数】9页(P1286-1294)【关键词】f氧化氮;NaCl胁迫;番茄;光合特性;叶绿素荧光;抗氧化酶【作者】孙德智;杨恒山;张庆国;范富;苏雅乐其其格;彭靖;韩晓日【作者单位】内蒙古民族大学农学院,内蒙古通辽 028000;内蒙古民族大学农学院,内蒙古通辽 028000;内蒙古民族大学农学院,内蒙古通辽 028000;内蒙古民族大学农学院,内蒙古通辽 028000;内蒙古民族大学农学院,内蒙古通辽 028000;沈阳农业大学土地与环境学院,土肥资源高效利用国家工程实验室,辽宁沈阳110866;沈阳农业大学土地与环境学院,土肥资源高效利用国家工程实验室,辽宁沈阳110866【正文语种】中文【中图分类】S641.2盐害是限制作物生产潜力发挥的主要非生物逆境因子之一，是威胁生态安全、制约农业可持续发展的全球性问题。
一氧化氮供体对穿膜肽吸收
Result-3.3. Effects of NO donors on the intestinal absorption of insulin
The extent of absorption was greatly improved by NO donors from all loops, but the greatest enhancement was obtained in the colon.
2、Methods-2 an in situ closed loop method
insulin (0.1 IU/rat, ECT (0.1 μg/rat)].
A closed loop NO donors
obtain the plasma fraction (100 μl)
the glucose oxidase method
These findings suggested that the absorption enhancing effects of NO donors on insulin permeability might be mediated by the action of NO.
Fig. 3. Effect of carboxy-PTIO (c-PTIO) on the permeability of insulin across the colonic membrane in the presence of NO
一氧化氮供体对穿膜肽吸收
1 Experimental notes-3：
Papp is the apparent permeability coefficient in centimeters per second
Papp = (dXR/dT) × (1/A·Co)
一氧化氮供体对肿瘤的作用
一氧化氮供体对肺癌的作用一、立题依据与研究意义一氧化氮（nitricoxide,NO）是由一氧化氮合酶（nitricoxide synthase, NOS）催化L-精氨酸脱胍基而生成，是近年来才发现的生物活性物质，参与机体的许多重要生理过程，且NO与消化系统的疾病（如肿瘤）日益受到关注。
已知，活化的巨噬细胞有杀伤肿瘤细胞的作用越来越多的证据表明，NO是活化的巨噬细胞杀伤肿瘤细胞时产生的毒性效应因子之一。
Hibbs首先发现，活化巨噬细胞产生的NO具有抑制生长和细胞毒性作用，能抑制与巨噬细胞共同培养的肿瘤细胞的许多代谢活动，如线粒体呼吸、DNA 复制等，导致瘤细胞内铁元素大量丧失，细胞死亡。
本实验的研究可有效控制肺癌的生长和转移。
二、实验方案（一）实验设计的目标：专家已证明一氧化氮对癌细胞有抑制作用，通过本实验可以进一步验证这一现象，并扩大了肺癌的治疗途径。
（二）实验设计：实验对象：小鼠实验原理：硝酸酯类，此类药称为NO供体。
该机制产生的NO称外源性NO，常用药物有硝酸甘油、硝酸异山犁酯，此类药物需经细胞代谢才能生成NO，连续使用数小时，或数天可出现耐受现象。
活化巨噬细胞产生的NO具有抑制生长和细胞毒性作用，能抑制与巨噬细胞共同培养的肿瘤细胞的许多代谢活动，如线粒体呼吸、DNA复制等，导致瘤细胞内铁元素大量丧失，细胞死亡。
实验步骤：1、挑选四只体型相似、健康状态良好的雄鼠标号ABCD。
2、并分别在他们皮下接种Lewis肺癌细胞，使他们患上肺癌。
3、A鼠用生理盐水(对照组)灌胃、BCD鼠分别用硝酸甘油处理高浓度组、硝酸甘油处理中浓度组、硝酸甘油处理低浓度组，处理组以不同浓度硝酸甘油溶液(1．6，0．5，016g／L)灌胃0.4mL／(只·d)。
4、连续10d，于21d处死，对血中硝酸盐含量和生化指标以及各主要脏器重量进行测定，并观察原位瘤质量和肺转移情况结果。
三、可行性分析1、小白鼠容易得到。
光响应协同释放一氧化碳与一氧化氮的供体分子及其衍生物以及制备方法和应用
光响应协同释放一氧化碳与一氧化氮的供体分子及其衍生物以及制备方法和应用一、光响应协同释放一氧化碳与一氧化氮的供体分子及其衍生物随着环境污染问题的日益严重，人们越来越关注如何减少大气中的污染物。
其中，一氧化碳(CO)和一氧化氮(NO)是两种常见的空气污染物，它们在大气中的主要来源是工业生产、交通运输和生活燃料的燃烧。
传统的净化方法往往难以有效去除这两种污染物，因此，研究一种新型的光响应协同释放一氧化碳与一氧化氮的供体分子及其衍生物的方法具有重要的理论和实际意义。
1.1 光响应协同释放原理光响应协同释放是一种利用光催化剂在光照条件下产生活性物质以达到净化目的的方法。
这种方法的基本原理是：当光照射到光催化剂表面时，光催化剂吸收光能并激发其电子结构，从而产生具有高活性的物质。
这些物质可以与空气中的一氧化碳和一氧化氮发生反应，生成无害的气体或低毒性的化合物，从而达到净化空气的目的。
1.2 供体分子的选择为了提高光响应协同释放方法的净化效果，需要选择一种具有较高活性的一氧化碳和一氧化氮供体分子。
目前已有研究表明，一些金属有机框架材料(MOFs)和金属有机骨架材料(MOFs)具有良好的光催化活性，可以有效地去除空气中的一氧化碳和一氧化氮。
一些新型的供体分子，如碳纳米管、石墨烯等也显示出良好的光催化活性。
因此，选择合适的供体分子对于提高光响应协同释放方法的净化效果至关重要。
二、制备方法2.1 光催化剂的制备光催化剂是实现光响应协同释放方法的关键组成部分。
目前，常用的光催化剂主要包括金属有机框架材料(MOFs)和金属有机骨架材料(MOFs)。
这些材料的制备方法主要有溶胶-凝胶法、水热法、化学气相沉积法等。
其中，溶胶-凝胶法是一种简单易行、成本较低的制备方法，适用于大规模生产。
2.2 供体分子的制备供体分子是实现光响应协同释放方法的核心部分，其制备方法主要包括化学合成法、生物合成法等。
其中，化学合成法是一种较为成熟且规模化的生产方法，可以有效地控制供体分子的结构和性质；生物合成法则是通过生物技术手段合成具有特定功能的供体分子，具有一定的创新性和应用前景。
一氧化氮供体型创新药物的研究进展
一氧化氮供体型创新药物的研究进展
张奕华;彭司勋
【期刊名称】《中国药科大学学报》
【年(卷),期】2006(37)5
【摘要】一氧化氮(NO)作为信使物质或效应分子在心血管、神经和免疫等诸多系统发挥非常重要的作用。
设计和研究NO供体型药物已成为创新药物研究的重要策略之一。
本文结合作者的科研实践,对NO供体型抗癌药、心血管药和非甾体抗炎药的化学特征、生物学意义、潜在用途及其作用机理作一综述,并对今后的发展趋势进行展望。
【总页数】10页(P387-396)
【关键词】一氧化氮(NO);NO供体;NO供体型抗癌药;NO供体型心血管药;NO供体型非甾体抗炎药
【作者】张奕华;彭司勋
【作者单位】中国药科大学新药研究中心
【正文语种】中文
【中图分类】R914
【相关文献】
1.一氧化氮供体型抗耐药肿瘤药物的研究进展 [J], 白成锋;黄张建;张奕华
2.呋咱氮氧化物类一氧化氮供体型药物的研究进展 [J], 孟飞;汤佳;陈莉
3.一氧化氮供体型药物抗肿瘤作用的研究进展 [J], 宾雨飞;廖端芳
4.一氧化氮供体型药物传输系统在抗肿瘤领域的研究进展 [J], 关旸; 王博
5.一氧化氮供体/一氧化氮供体型化合物在肿瘤治疗中的研究进展 [J], 崔冉;季晖;赖宜生
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【doc】一氧化氮合成酶（NOS）基因表达的半定量检测及其运用
一氧化氮合成酶（NOS）基因表达的半定量检测及其运用4生理,1994,4B(4),347354ActaPhysiologicaSinica一氧化氮合成酶(NOS)基因表达的半定量检测及其运用1张晨晖李肯虹,继峰周洪张新波场健r_元j五吾础研究所分子生物学研究室北京I.口舶3)-三Jl摘要'/4'本工作参照Mi~lin(1993)定量RTPeR方法,建立了一种灵敏,简捷,特异的定量NOSmRNA测定方法}证明了NOSmRNA不仅存在于脑组织,亦广泛分布于心,肾,肺和肝组织中,其中以脑组织含量最高,肾,心次之.除内皮细胞以外,平滑肌细胞中亦有NOS基因的表达}此外,本工作还观察到,自发性高血压大鼠的脑,肾,肝和平精肌细胞中NOSmRNA水平下降,提示NOS基因表达受抑,可能与高血压的病国密切相关.f上一,关键词:.=墨些窒盛堕差里室垄自发性高血压太最;半定量pcRzfl兰,-近年来的研究证明,一氧化氮(nitricoxide,NO)是一种血管内皮细胞释放的内皮衍化舒张因子(endothelium—delvedrelaxingfactors,EDRFs),它具有舒张血管,降低血压,抑制血管平滑肌细胞增殖和血小板粘附等重要的生理作用,在高血压,心肌缺血等许多心血管疾病的发病中具有重要意义.NO是由L广精氨酸(L—ARG)和分子氧在一氧化氮合成酶(nitricoxidesynthase,NOS)催化下合成的,NOS则是NO生成的关键酶.最近,NOS cDNA已经在大鼠内皮细胞,小脑中克隆出来0一:.但是关于它在体内不同组织的分布以及在心血管疾病高血压发病中的作用,迄今还未见报道.本工作应用聚合酶链式反应(po]y—merasechainreaction,PCR)技术建立了一种新的,简捷,特异的定量NOSmRNA的测定方法,研究了NOS在大鼠体内的分布,发现自发性高血压大鼠(spontaneoushyl~rtenslverat,SHR)脑,肾和肝中NOSmRNA的表达明显降低,其内皮依赖性的血管舒张反应亦明显下降提示,N0S基因表达下降,可能与高血压的病因密切相关.1材料和方法动物本工作选用8—1o周龄的雄性SHR和WKY(Wistar-Kyotorat,WKY)大鼠进行实验,SHR大鼠由Okamoto等选育成功,其特点为1oo%高血压自发率(BP=22.7士1.3kPa),同时具有高血压性心血管病变,适用于人类高血压病的研究,WKY为其正常对照模型,实验所用动物由中国医学科学院心血管研究中心提供车文19日3年6月8日收到1993年9月12日修回生理46卷试剂本工作所用的反转录酶(MoMLV)和TaqDNA聚台酶分别购自美国的Stret- gene公司和Perkin—Klmer公司,[P]dCTP为北京福瑞公司产品(放射比活度为3O00Ci/mmo1)RandomPrimer和dNTP购自美国Promega公司,其它试剂均购自美国Sigma 公司.细胞培养取用6—8周龄雄性SHR,WKY大鼠和新生小牛的胸主动脉段,分别按Hofman和Booyse的方法培养血管平滑肌细胞和内皮细胞.本实验选用5—8代细胞进行实验.总RNA的制备取10的平滑肌细胞或内皮细胞,用RNAzolBRNA提取试剂盒(美国TEL—TEST公司)提取细胞总RNA.各取1g脑,心,肺,肾,肝组织采用异硫氰酸胍一酚一氯仿方法:提取组织总RNA.总RNA提取完成后,分别用紫外分光光度计测定总RNA的浓度,重复测定三次.oD:OD.比值在1.8—2.0之间.计算样品总RNA的浓度.反转录(reversetranscription,RT)取2lag总RNA,在65℃变性3min,依次加入0.5mmol/LdNTP,0.01mol/LDTT,10pmol/LRandomPr/mer,15unit反转录酶和oH 8.350mmot/LTris—HCI,75mmol/LKCI,3mmol/LM鲁cl2缓冲液,总反应体积为201.在37℃保温90min.反应结束后,加入50TE缓冲液(pH8.010mmol/LTris—HCI,1mmol/ LEDTA),于70℃加热10min以终止反应定量PCRNOS寡核苷酸的引物合成是根据Bredt等E3]发表的大鼠小脑NoscD- NA序列应用DNA合成仪合成的.引物A,B序列分别为:5GG:GAATCCATACCAGCCTGATCCATGGAACC35TACTCGAAACGCCTGAA TGG3用这一对引物可以扩增出自2463bp-3124bp(661bp)的NOScDNA序列,长度相当于821aa一1041aaNOS氨基酸序列.取1/lo体积(71)反转录反应液,分别加入200mmol/LdNTP,50pmol/LNOS寡核苷酸引物,0.5ttCi32P]dCTP和pH8.310mmol/LTr/s—HCI.50mmol/LKC1,1.5mmol/ LMsCl缓冲液,2.5unitTaqDNA聚合酶;总反应体积为100l.最后加入50山轻矿物油.PCR反应所需的变性,退火和延伸温度分别为:94℃,55℃和72℃,反应时间分别为:1,2和3min.共进行25—35次循环.首次循环.94℃需要3min.反应完成后取10山PCR反应物进行1.5琼脂糖凝胶电泳(含0.5~tg/ml的溴化乙锭)分析,以0xl74/HaeⅢ为分子量标准,电泳缓冲液为1xTBE(0.09mol/LTris一硼酸,0.002mol/LEDTApH8.0). 电泳完毕后在紫外灯下照片,并切取含有荧光条带的凝胶,应用液体闪烁计数仪进行放射性测量.2实验结果2.1NosmRNA刹量方法的建立本工作依据Martin(1993)的方法建立了定量NOSmRNA测量方法.其结果如图1. 2所示.由图1可以看出,脑组织总RNA反转录后经25—35次PCR扩增后,其NOScDNA片段约为660bp与所设计的NOScDNA相同.其扩增量与扩增循环次数密切相关.由图2可以看出,脑组织总RNA样本量不同,RT—PCR后NOScDNA产率亦不同.具有明显的4期氧化氮合成酶(Nos)基因表达的半定量捡涮及其运用349剂量一效应关系;应用0.25ug的总RNA,即可检测到NOSmRNA圉1PCR扩增产率与循环次数之间的剂量一效应关系.1Dose—effectrelationshipbetwec"theyieldofPCRproductandthenumberofPCRampJificationcycle(n一3,:K2:SE).M:xl74/Ha~Il000Am0u"【ofIOtillRNA2530圉2PCR产量和总P,NA量之间的剂量一效应关系Fig.2D.se—effectrelationshipbetwoentheyieldofPCRproductandtheamountoftotalRNAn一3,士SE.0,l?2,3,4tamountoftOtalRNA(0,0t25,0.5,1.0,1.5.2,respec-tire竹).MI.xl74I/HaeI.…取浓度脑组织总RNA(2g),分别经过5RT—PCR后.NOScDNA产率基本相同?具有良好的重复性.结果见图3所示.圈32恒量总RNART-PCR重复实验Fjg?3RT-PCRrepeatexperimentwithaconstant~Jnount.ftotalRNA(2ug)l,2,3-4,5:RT—PCRrepeattimesM:似174/Ha~I.2?2N0SmRNA在大鼠体内分布取正常Wistar大鼠小脑,心,肺,肾,肝组织,提取总RNA,应用RT-PC~,测定不同组织中NOSmRNA的分布,其总RNA用量均为2.0ug,其结果如图4所示.由图可l}{∞一.r.....mr....L.................._-畜●吾j墨lu.u0u芍fd2自言q孙lE3u1lx,&5i0.I.0}dlu】lf【山生理46卷看出,在所测组织中均有NOSmRNA分布mRNA的含量约为肾脏和心脏的5倍.其中以小脑为最高,肝脏最低;其小脑内NOS取107的平滑肌细胞和内皮细胞,提取总RNA,经RT—PCT测定NOSmRNA,其细胞总RNA为2g.结果如图4所示.由图可以看出,NOSmRNA不仅存在于内皮细胞,亦分布于平滑肌细胞中,内皮细胞NOSmRNA的含量较高于平滑肌细胞图4NOS基因在正常大鼠不同组织和培养细胞中的表选Fig.4ExpressionofNOSgeneinvarioustissuesandculturedcellsofnormalratby RT—PCRM:HX174/HaeI}H:Heart;B}Brain;P;Lung;E,EC:Endothelialcall;K:KJdney~L!Uver;S,SMC:Smoothmusclec~11.2.3自发性高血压大鼠NosmRNA的变化分别取SHR和WKY大鼠的小脑,肾,肝组织,提取总RNA,依前法测定NOSmRNA .其所测样品总RNA用量均为2.结果如图5所示,由圈可以看出,在所检测的组织中,SHR大鼠NOSmRNA均低于WKY正常大鼠,其中在小脑降低了39.在肾脏降低了55,在肝脏降低了88.分别取10T个培养的WKY和SHR主动脉平精肌细胞,提取总RNA,各取2,同样用RT-PCR检测NOSmRNA,结果如图5所示.由图亦可以看出,SHR大鼠平精肌细胞中NOSmRNA含量明显降低,约较WKY大鼠降低了62.由以上结果可以看出,在SHR大鼠,无论是平滑肌细胞还是小脑,肾脏,其NOS基因的转录均明显降低.2.4自发性高血压大鼠内皮依赖性血管舒张反应为了进一步鉴定SHR大鼠血管EDRF/NO的反应性.取6只SHR大鼠主动脉环进行离giJc05u'j.三nlJ|.;4期一氧化氨合成酶(NOS)基因表达的半定量检测及其运用35J团SHR口WKY图5NOS基因在sHR和WKY不同组织和细胞中的表达Fig.5ExpressionofNOSgeneinvarioustissuesandculturedcellsinSHRandWKYn一3,土sE;P<0.05,.'P<0.01.M:174/HaeISMC:SmoothmusclecellSc:SHRSMC}SL:SHRLung;SK{SHRKidney;SB:SHRBrain;We!WKYSMClWL:WKYLung;WK:WKYKidney'WB:WKYBrain-圈6乙酰胆碱诱导的SHR和WKY主动脉内皮依赖性舒张反应≤Fig-6Endothelium—dependentrelaxationevkedbyAChinaortafromSHRandWKY.n=6.~4-SE,P<0.05,"P<0.01.j0——0WKygroupI●——●跚Rgroup1——L-ARG+SHR.囊～体灌流实验,观察乙酰胆碱(ACh)内皮依赖性血管舒张反应,结果如图6所示.由图可以看出.SHR大鼠主动脉ACh所引起的血管内皮依赖性舒张反应明显低于WKy 大鼠,其㈣uIdI.iirJ0j△2EⅢl;=E生理46卷最大的舒张反应亦只有WKY大鼠的I/2.为了进一步验证SHR大鼠ACh内皮依赖性血管舒张反应降低的机制,本实验还将10mol/LL-ARG预先加入SHR大鼠主动脉环灌流槽中,以补充EDRF/NO的前体,10min后,再进行ACh舒张反应实验,结果如图6所示.由图可以看出,补充Ⅱ)F,NO的前体,可使SHR主动脉ACh内皮依赖性舒张反应恢复.这些实验结果说明,自发性高血压大鼠NOS基因转录和表达下降,内皮依赖性血管舒张反应降低.3讨论3.1mRNA的测定mRNA的测定是分子生物学研究中一个常用的方法,主要有斑点杂交,NorthernBlotting等几种方法].但是由于mRNA含量少,又极易降解,因此对于其含有极小量特异mRNA的组织和样品,测定较为困难为此,近年来发展了RNA—protoc-fiveassay和含内标化的RT—PCR定量测定mRNA的方法.RNA—protectiveassay 虽然灵敏,准确,但操作复杂,价格昂贵,不易普及].定量RT—PCR虽然简便,快速并能定量,但因含有一个"内标准"而易产生"管效应",从而抑制特异性RT—PCR反应,干扰mRNA 的测定].本工作参照Martin(1993)~所建立的RT-PCR定量测定p-肾上腺素能受体mRNA 的方法,建立了NOSmRNA的测定方法.这种方法不另设内标准,排除了"管效应",而应用["P3dC'FP直接掺入PCR扩增反应,这不仅可使小量mRNA通过RT—PCR得以扩增和放大,而且可以通过掺入的放射性强度,直接进行rnRNA的定量测定.这种方法具有明显的荆量一效应关系和良好的重复性.我们曾经应用NorthernBlotting方法,测定不同组织中NOSmRNA含量,结果发现需要4O一6O嵋总RNA,才可检测到太鼠小脑和肾中NOSmR-NA,在肝脏,肺,平滑肌细胞中即使应用再太剂量总RNA亦难以测定;而应用本文这种方法,只需0.25—2g总RNA,即可测出组织中所含的NOSmRNA.应该指出.应用这种方法时,对提取的总RNA定量必须十分准确.ODOD的比值必须在18以上,总RNA定量应多次测量.3.2NOSmRNA在体内分布关于NOSmRNA在组织中的分布已有报道Brcdt等(1991)应用大鼠脑NOSeDNA探针和NorthernBlotting分析,发现NOSmRNA只存在于脑内rIWilliam等(1992)应用牛内皮细胞NOSeDNA为探针和NorthernBlotting分析,发现NOS只分布于内皮细胞中0}从而提出NOSmRNA不是普遍存在的.在许多组织中很难测到NOSmRNA的存在,但是不同组织的NOSe.DNA具有高度同源性[JI应用NOS 生物测定的方法证明,N0s亦广泛分布于不同组织中口".因此我们设想,在一些组织中难以测定出NOSmRNA,主要是因为组织中NOS特异性的mRNA在总RNA中所占比例过少,测定方法不够灵敏所致.本工作应用快速,灵敏的定量RT-PCR方法,不仅测出了脑内和内皮细胞中NOSmRNA,亦测出平滑肌细胞和心脏,肾脏,肺,肝脏组织中NOSmRNA.提示:NOSmRNA在体内不同组织中是广泛存在的.这与生物检测的结果相一致.过去认为NOSmR—NA主要存在于内皮细胞和巨噬细胞,本工作证明了在平滑肌细胞中亦有NOS的高表达}最近Nunokawa等(】993)从平滑肌细胞中克隆到NOSeDNA:Ⅲ,说明平滑肌细胞和内皮细胞4期一氧化氮合成酶(NOS)基因表达的半定量检测及其运用353一样,亦是NOS基因转录和表达的场所之一.近年来的研究表明,NOS可分为结构型和诱导型两类,而大鼠脑NOS即属于结构型[t3;我们应用依据大鼠脑NOScDNA序列设计合成的PCR引物,检测出在脑,心,肾,肺,肝,血管内皮细胞和平滑肌细胞中都有NOSmRNA的表达提示,结构型NOS可能是不同组织中所共有的.关于NOS结构型与诱导型之间的相互关系及其组织特异性,还需进一步研究3.3NOS在高血压发病中的作用既往的研究证明,内皮细胞损伤,Ea~RF/NO生成障碍是高血压发病的一个重要因素口.我们的实验亦证明,SHR大鼠血管内皮依赖性舒张反应明显下降.但是,这些研究都是基于药理方面的实验或是间接测定NOS的结果.关于高血压时,NOS基因转录和表达的变化,迄今尚未见报道.我们首次测定了SHR 大鼠不同组织和平滑肌细胞中NOSmRNA的变化,发现SHR大鼠NOS基因转录和表达明显低于WKY大鼠NOS是EDRF/No生成的关键因素,NOS基因表达下降,可致EDRF/NO 生成下降,这可能是高血压发生和发展的又一个重要因素.关于高血压时NOS基因转录下降的机制目前尚不了解.现有一些实验证明,NOS 基因表达受许多生长园子,细胞园子的调节Its].因此SHR大鼠NOSmRNA下降,亦可能是继发于生长因子,细胞因子的变化,亦可能是基因结构的改变所致.我们的初步实验证明,应用NOScDNA探针对SHR大鼠NOS基因进行限制性长度多态性分析,发现SHR 大鼠NOS基因可能有多态性变化.参考文献[1]FrinC~-R.GandOanso~,nL(1993).Pdsinginterest_mnitricoxidesyntha~.T/B8,18(2), 35—36.[2]William,C.S.,Jeffrey,K.H.andCynil~,M.B.(1992).Molecularcloningandexpressionof aeDNAencodingendot~lialcellnitricoxidesymha~.,J.嘲.0.,2I1,15274—15276.[3]Brech-nS.-Hwang,P.andSnyde,S.H.(1991).Clonedandexpre~ednitricoxidete$ntlm~s ttu~-rurallyre穹embl鹪~ytoeaxrocnoP-450reductase.神,351,7l4—718.[4]Herman.W.andGooSer,D.(1977).hmmn0fIucenoeintheidentificationofdtfferer*ttattnamoothmugcleoe1lsinculture.脚.D妇H.朋啪H∞-18,52—54.[5]Booyse,F.M.,Sedlak,B.J.andRatelson,E.(1975).Ctlltttre0farterialend劬e1iaIcellslcharacterl-zat~onandgrowthofbovineaofticendothelJalceils.M帕.姗商靖∞..¨.925—939. [6]aI∞mii1|H,Rand鼬ochl,N.(1987).Sin~e-stepmethod0P2qAIscdailonbyacidguantdiniumcain- extraction.肺c_Blsd~a..162.156—159.[7]Mar吐n,U..Michael,B.andJohn,S.E.(1993).Altered蜘酋onB-sdr能舡g【te憷呻rkimuleand~-adeene.zglc胁D佃reinthetatartshumanheart.帕'曲_,87,454—463.[8]Frederick-M.A.,Roge~,h-Robert,E.K.,Dav~l,nM.,S~idman,J.G.,dehn+A.S.and Kcvln,S.(1992).丽州丹咄帅缸脚咖.PlIb1hedbyGreenePublishingAssociatesandJohn Wiley&Sons.,2rid.-呻.4-18～4-23.NewY ork.[93A1ice,M.W.,M~baeJ,V.D.andDavid,F.址(1989).QI衄乜吐onmRNAbymeIxdymeras~chainteac~on.Neff..删...86.9717—9721.[10]Natlum,C.(1992).Njn缸oxideasasecretorypr~luetofmammaliancells.FA~BBJ.,8,3051—3064.[¨]Hchalet"son,A.H.(1991).FMldothelinminCOllt/e1..^J..B5,ll6—125.[12]Nunol~wa?Y.,Islti~a-N.andTana[~,&(1993).Cloningofinducibleninjcoxidesy nthas~r砒v-~lscu—lar~atooth/~rluseleo~ils..咖.脑."矾嘲.,191-89—94,生理46卷[13]David,A.G.,Andreas,K.N.andMauriclo,D.S.(1993).Cytokines,endotoxin,andgluco corticoidsregulatetheexpressionofinduciblenixieoxidesyntha~inhepatocytes.Proc.NatI_删?U3A.?90,施新猷(1989).医学实验动物学PP.39—40.陕西科学出版社,西安. ActaPhysio~ogicnSinlca1994,4g(4),347—354 SEMIQUANTITATIVEDETECTIONANDAPPLICATIONABOUT THEEXPRESS10NOFNIT砒COXIDESYNTHASEGENEZHAN6CHEN-HUI,LIQlANHONG,ZHAN6JIFNG,ZHOUHONG, ZHANGXn~G-BOANDTANGJIAN(,Mdeen~丑乩鲫,Card~sedar8硒由,&咖Ma~a/,&i谛10083)A±I'RAClUsingtheReverseTranscription(RT)一PolymeraseChainReaction(PER)method ofMartin(1993)forsemiquantitationdeterminatingofNOSgene,itwasfoundthat NOSmRNAisnotonlyexistedinbrain.butalsodistributedextensivelyinheart,kid- hey,lungandliver.Amongofthem,NOSmRNAlevelswerehighestinthebrain'fol- lowedindescendingorderbykidney,heart.Inadditiontoendothelialcell,NOSgene wasalsohighlyexpressedinsmoothmusclecells,suggestingthattheymaybeaDimpor- tantsiteofNOSinorganism.Furthermore.NOSmRNAlevelswerefoundtodecrease significatelyinbrain,kidney,liverandsmoothmusclecellinspontaneoushypertensive rat.Thesedatasuggestthatpathogenyofbypertentionmayberelatedtolowexpression 0fNOSgeneinthesetissues.KeywordstnitricoxideJv/nthm}8eneexpre*tton{polymerase~[111111reaction。
一氧化氮供体纳米复合物的合成与性质研究
一氧化氮供体纳米复合物的合成与性质研究王丽颖;杨彦萍;王丽;王兵;孙捷【摘要】一氧化氮供体纳米复合物由谷胱甘肽(GSH)包覆的Mn掺杂的ZnSe量子点和一氧化氮(NO)光敏供体复合而成.它通过双光子激发诱导RBS分解释放NO 可以实现NO的可控释放.本方法顺利实现了静电自组装,合成的纳米复合材料作为智能药物载体具有很大的开发潜力.该量子点纳米复合材料对NO释放采用双光子激发的可控释放,释放的一氧化氮表现出显著的癌症细胞杀伤活性.%A multi-functional nano-composite material was prepared by composing glutathione (GSH) coated Mn-doped ZnSe quantum dots, and nitric oxide (NO) donor photosensitive composite.RBS induced by two-photon excitation can decompose to release NO to a monageable size.This method successfully realized electrostatic self-assembly, and a smart drug carriers has great potential for development.The quantum dot nanocomposites with controlled release of NO release of two-photon excitation.The releasing nitric oxide exhibit significant cancer cell killing activity.【期刊名称】《化学研究》【年(卷),期】2017(028)001【总页数】5页(P108-112)【关键词】量子点;一氧化氮;肿瘤【作者】王丽颖;杨彦萍;王丽;王兵;孙捷【作者单位】山东省电力中心医院,山东济南 250001;青岛经济技术开发区第一人民医院,山东青岛 266555;山东省电力中心医院,山东济南 250001;山东省医学科学院药物研究所,山东济南 250062;山东省医学科学院药物研究所,山东济南250062【正文语种】中文【中图分类】O62量子点因为其独特的光学性能和生物医学上的应用，在过去的五年中产生了广泛的关注[1-2].在应用中，量子点显示出可调的、高效的和长时间的光致发光能力，并有超过有机染料和荧光蛋白的灵敏度和分辨率[3].然而，量子点中的有毒重金属离子抑制了其在医学进一步的应用[4].过渡金属离子(如锰)掺杂量子点无重金属离子可以克服传统量子点以上问题.尽管锰离子也有一定的毒性，但相对而言它是可以接受的[4-5].宽带隙量子点如Mn离子掺杂ZnSe量子点作为新一代发光纳米材料，引起了广泛的关注.但以往的研究主要致力于掺杂Mn离子的ZnSe量子点的合成和光致发光应用[5-8]，关于它的双光子激发荧光(TPEF)特点及相关的应用几乎没有任何报道.双光子激发荧光量子点在化学和生物医学中的应用有其独特优势[9-11].掺杂Mn 离子的ZnSe量子点双光子吸收行为在已有文献中有提及[12].但到目前为止，其引起药物释放并杀死癌细胞的报告还没有.在这里，我们介绍一种多功能纳米复合材料，它是由谷胱甘肽(GSH)包覆的Mn掺杂的ZnSe量子点和一氧化氮(NO)光敏供体复合而成，顺利实现了静电自组装，它通过双光子激发诱导RBS光解释放NO可以实现NO的可控释放.作为智能药物载体具有很大的开发潜力.该量子点纳米复合材料对NO释放采用双光子激发的可控释放，且释放NO具有显著的癌症细胞杀伤活性，经我们的研究证明这归功于NO诱导的对癌细胞的细胞毒性.作为光敏NO供体，RBS已经在早期的研究报告中报道，在紫外光或可见光波长的照射下RBS光解产生NO的释放[13-15].最近，谭连江等制备壳聚糖包覆掺杂锰的ZnS量子点，然后结合RBS形成量子点 RBS壳聚糖复合材料[16].这些复合材料可以在双光子激发下进行NO的释放，但复合材料的合成相对复杂.此外，此复合材料没有进一步应用于肿瘤治疗领域.相比之下，我们提出的量子点纳米复合材料双光子激发(1 130 nm激光)会引发NO释放.而且释放的NO有着显着的癌细胞毒性.该智能量子点纳米复合材料在双光子激发下有着多种用途，比如利用控制NO释放用于癌症治疗或心脑血管疾病的治疗，这在生物医学应用中有重要意义. 氯化锰、亚硒酸钠、谷胱甘肽，麦克林试剂；硝酸锌，阿拉丁试剂；其他为常用分析纯试剂.昆山舒美超声波清洗器KQ3200，昆山超声仪器有限公司；CW红外激光发射器，光纤通信技术有限公司；79-1磁力搅拌器，江苏省金坛市环宇科学仪器厂；深度制冷EMCCD-DU897，安道尔科技公司；紫外可见分光光度计U3000，日立有限公司.谷胱甘肽包覆的掺杂锰离子的ZnSe量子点的合成使用王超课题组[4]的合成方法.在100 mL三颈烧瓶中加入1 mL 12.5 mol/L的MnCl2溶液，然后通入N2脱气30 min.将新鲜制备的亚硒酸钠溶液加入到N2饱和的氯化锰溶液中，在谷胱甘肽(GSH)作为稳定剂的条件下调节pH至11.随后，反应在氮气保护下回流30 min，温度为95 ℃，然后加入10 mL 12.5 mol/L的Zn(NO3)2溶液继续回流5 h.反应中，锰、硒、锌、谷胱甘肽的物质的量比例为1∶25∶40∶1 200.5 h后，将混合物冷却至室温，再加入锰杂ZnSe量子点继续搅拌可得谷胱甘肽包覆的掺杂锰离子的ZnSe量子点.所得量子点可以采用乙醇沉淀纯化，沉淀物离心分离，用乙醇-水洗涤多次，然后真空干燥.取得的粉末进行表征研究.RBS,[ Fe4S3(NO)7 ]-Roussin Black Salt(陆森黑盐)，是一种一氧化氮供体，可释放NO.根据文献[17]所述的方法进行预处理，将RBS以固体形式放在惰性气体中避光保存.在搅拌和超声下，RBS水溶液10 mL缓慢滴加入量子点的水悬浮液形成量子点-RBS纳米复合材料.不需任何后处理，所得到的量子点-RBS纳米复合材料进行表征和发射光谱的吸收值测定.这些材料可以用乙醇沉淀来纯化，沉淀离心分离，用乙醇-水洗涤多次，然后干燥，在后续的实验中进一步研究.我们将谷胱甘肽包覆的掺杂锰离子的ZnSe量子点用透射电子显微镜(TEM)进行了表征.所制备的量子点平均粒径为6.7 nm且均匀分散.高分辨率TEM清晰显示了纳米晶体的晶格条纹，晶面间距为0.32 nm.选择性区域电子衍射(SAED)图像表明衍射环与ZnSe闪锌矿相晶格匹配.量子点和纳米复合物的电子自旋共振(ESR)光谱表明二者信号相似.在静电相互作用下，带负电荷的RBS与带正电的GSH的氨基在量子点表面结合，使QDs-RBS 纳米复合材料形成.我们对量子点的光致发光进行了研究，光致发光的激发光谱在385 nm有最大吸收峰，并且在1 130 nm有一个宽的吸收峰.这两个典型的峰分别源于QDs-RBS 纳米复合材料单光子吸收(SPA)和双光子吸收(TPA)[18].此外，我们记录了QDs-RBS 纳米复合物的单和双光子激发发射光谱.在图1中，无论是单光子和双光子诱导的发射峰都在570 nm.385 nm激光激发的SPA介导发射应为锰离子状态改变产生的.ZnSe量子点的光致发光未观察到，表明锰离子掺杂在量子点内.为评价纳米复合物的细胞毒性，HeLa细胞在10%血清的基本培养液中培养，在细胞培养箱中含有5% 的CO2，温度37 ℃，Hela细胞用胰蛋白酶溶液表面分离，等分后接种到96孔板中.培养24 h后，在37 ℃下，用10 mL含有不同浓度(0,0.01,0.05,0.1,0.5,1 g/L)QDs-RBS和1 g/L的无血清细胞培养基代替原来的培养基.处理后的细胞孵育24 和48 h，在37 ℃下黑暗培养，或1 130 nm激光照射0～12.5 min，经照射的细胞与不照射的低细胞死亡组对比.最后，对HeLa细胞的死亡率，采用MTT法检测[18].浓度为1 g/L下，相比阴性对照(HeLa细胞无QDs-RBS)超过88% (84%)的HeLa 细胞无光照下存活24 h (48 h)，如图2所示.在相同的条件下，不少于87%的HeLa细胞与量子点共培养后存活48 h，这些证明了在黑暗中此纳米复合物的毒性很小.在利用激光器输出的1 130 nm激光照射(0.5 W)后，我们发现HeLa细胞存活率明显降低，如图3所示.特别是12.5 min的连续激光照射导致几乎全部的(不少于98%)HeLa细胞死亡，其阴性对照细胞死亡小于15%.此外，无复合物存在下，在照射功率高达5 W和5 min的连续照射， HeLa细胞存活率为90%.这些结果显示，复合物没有激光照射本身不能诱导显著的细胞毒性，表明其低毒性不影响其在生物医学系统中的应用.QDs-RBS纳米复合物稳定性研究需要记录TPEF光谱测量和相应的TPEF荧光强度.一个0～5 W可调连续波CW红外激光发射器(1 130 nm)作为激光源和一个Andor DU897 EMCCD作为信号采集器.纳米复合材料的水悬浮液是由CW红外激光在1 130 nm聚焦照射，TPEF荧光强度在500～650 nm波段记录.具体来说，为探讨该量子点纳米复合物的稳定性，复合物的水悬浮液(50 g/L)是在1 mmol/L PBS溶液(pH 7.4)和胎牛血清(10%)中37 ℃孵育[19-20].用1 130 nm激光照射(0.5 W)，记录在不同的时间间隔(0～72 h)下复合物的TPEF荧光强度.此外，QDs-RBS的水悬浮液(50 g/L)也用2.5 W的激光持续照射，在不同的时间间隔检测(0～2 h).实验结果证明，当照射激光(2.5 W)达2 h，QDs-RBS的TPEF强度变为原始值的91%，这揭示了该材料低光漂白性能.QDs-RBS 复合材料在磷酸盐缓冲液(PBS)和胎牛血清(FBS)中孵育72 h后， TPEF没有显著的下降(小于12%)，也没有明显的聚集或沉淀.上述结果说明了复合物的稳定性，从而意味着该纳米复合材料有潜在的生物医学应用前景.为确定水溶性介质(PBS,10 mmol/L,pH 7.4)中NO释放速度，我们使用格里斯比色反应来测量PBS中的亚硝酸盐或硝酸盐含量[21-26].测定方法是将含有复合物(1.0 g /L,5 mL) 的等量PBS溶液放入离心管在37 ℃水浴搅拌，分别用激光器输出的1 130 nm激光照射(用不同的0～2.5 W辐射功率以及不同照射时间).经过适当的时间，将PBS溶液离心10 min，取上清液(0.5 mL)，加入适量PBS，然后加入格里斯试剂组合(I)和格里斯试剂(II).之后，所得到的混合物溶液在室温下避光孵育15 min，紫红色的颜色立即出现.用紫外可见光分光光度计在540 nm下记录每个样品溶液的吸光值.通过测定亚硝酸钠的吸光度测定的标准曲线(0～100 umol/L)，计算NO的总释放量.算法如下所示:R1=c1×0.005;R2=c2×0.005 +c1×0.001;R3=c3×0.005 +(c2 +c1)×0.001;.......Rn=cn×0.005 +(cn-1+cn-2+……+c1)× 0.001Rn表示NO总量，cn表示NO浓度.实验结果表明，照射的激光在不同功率的0.5～2.5 W下， NO释放浓度随激光功率的增加而增加，如图4所示.没有激光照射(0 W，在黑暗中)，几乎没有检测到NO，表明无NO释放.在NO的达到最大浓度后，开始缓慢减少，在较低的功率照射下，减少是不太明显的.减少是由于NO的氧化.控制NO释放的“开关”是1 130 nm激光照射(0.5 W).连续照射2.5 min后，释放NO的浓度被记录.停止照射2.5 min后，RBS的量子点纳米复合材料再次连续照射2.5 min.如图5所示，NO 释放曲线变为梯度，表示激光照射下该材料具有响应快、重复疲劳影响小的特点.研究了1 130 nm激光连续照射下TPEF诱导的NO释放行为并进行了NO的定量检测，研究结果表明激光照射下QDs-RBS复合物具有响应快、可持续释放的特点.稳定性研究的结果说明了复合物的稳定性，从而意味着该纳米复合材料有潜在的生物医学应用前景，用MTT试验检查该纳米复合材料的细胞毒性.发现复合物在激光照射下具有很强的细胞毒性，而没有激光照射下其本身不能诱导显著的细胞毒性，这些实验结果表明上述细胞的死亡主要是由于光触发NO释放，其材料本身的低毒性不足以杀死细胞，故不影响其在生物医学系统中的应用.在1 130 nm激光辐照下，QDs-RBS复合物产生TPEF (约570 nm)，导致TPEF介导的RBS光解和NO的释放，且产生的NO导致明显的细胞毒性.这说明所合成的材料可以实现NO光控释放和NO介导的癌症治疗.综上所述，本文报道了通过静电相互作用的QDs-RBS的合成方法.并证明了该材料可以用于NO光控释放.对该材料对其他疾病的治疗作用，比如和NO有关的心脑血管疾病及炎症，将做进一步的研究.。
一氧化氮供体化合物的最新合成方法和研究进展
一氧化氮供体化合物的最新合成方法和研究进展作者：韩林妗来源：《科技创新导报》2020年第21期摘要：一氧化氮（NO）作为气体信号分子，作用于机体的多种生物过程中，是调节多种生理和病理过程的重要信号分子。
NO供体化合物在NO的研究和临床治疗中起着积极的作用并有着良好的发展前景。
在近几年的研究中，NO供体化合物可以通过在体内释放NO治疗和预防多种疾病，其合成方法也引起了国内外学者的关注。
本文结合国内外研究人员对这方面的关注，对近4年NO供体化合物的合成方法和研究进展进行综述。
关键词：一氧化氮供体合成方法药理作用生物活性中图分类号：TQ460.1 文献标识码：A 文章编号：1674-098X（2020）07（c）-0104-04Abstract： As a gas signal molecule， nitric oxide （NO） acts on a variety of biological processes in the body and is an important signal molecule regulating a variety of physiological and pathological processes. NO donor compounds play an active role in the research and clinical treatment of NO and have a good prospect. In recent years， NO donor compounds can cure and prevent a variety of diseases by releasing NO in vivo. The synthesis of NO donor compounds has also attracted the attention of scholars at home and abroad. In this paper， the synthesis methods and research progress of NO donor compounds in recent 4 years are reviewed.Key Words： Nitric oxide donor; Synthetic method; Pharmacological activity; Biological activity近20年的实验研究表明，一氧化氮（Nitric Oxide， NO）是心血管、神经和免疫系统主要的信息分子，在生物体内对多种生理和病理过程都有着重要作用。
新发现的两种血液调节因子：内皮素和一氧化氮
新发现的两种血液调节因子：内皮素和一氧化氮
姚桢
【期刊名称】《日本医学介绍》
【年(卷),期】1994(015)007
【摘要】新发现的两种血液调节因子──内皮素和一氧化氮哈尔滨医科大学姚桢内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ，ＥＴ）和一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）是最近几年才发现的器官局部血液调节因子。
ＥＴ系血管内皮细胞分泌之由２１个氨基酸构成的肽，自Ｙａｎａｇｉｓａｗａ...
【总页数】4页(P327-330)
【作者】姚桢
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】R363.14
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一氧化氮供体对实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用
一氧化氮供体对实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用尚宏;付锦;王鹏军;王维治【期刊名称】《中国神经免疫学和神经病学杂志》【年(卷),期】2011(18)2【摘要】Objective To investigate the effect of nitric oxide donor 3-morpholinosydnonimine (SIN-1)on experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) in Lewis rats. Methods EAE was induced by immunization with myelin basic protein 68-86 in Lewis rats. All rats were divided into the SIN-1 group and the control group randomly. SIN-1 was given after the sensitization, starting on the day of sensitization and continued for another 7 days in the SIN-1 group. The clinical symptoms, the body weight changes, pathology changes of brain were observed in two groups. The levels of IFN-γ and IL-4 in cultured supernatant of mononuclear cells (MNC) in each group were detected by ELISA at the14th day after sensitization. Results Compared with the control group, the onset of EAE in SIN-1 group was delayed, while the recovery appeared earlier, the weight increased obviously, the clinical symptoms relieved and the maximal clinical score reduced in the SIN-1 group.The level of IFN-γ in cultured supernatant of MNC in the SIN-1 group (90. 29±9.07) pg/mL was lower than that in the control group (121.57±10. 44) pg/mL (P＜0. 05), while the level of IL-4 (18. 14 ±3.98) pg/mL was significantly higher than t hat in the control group (8. 14 ± 1.95) pg/mL (P＜0.05). The pathologicaldamage of EAE in the SIN-1 group attenuated significantly comparing with the control group. Conclusions SIN-1 can inhibit the progression of EAE in rats, and have protective effect on EAE rats. The mechanism may be related to the balance of Th1/Th2 type cytokines.%目的探讨一氧化氮供体3-吗啉-斯德酮亚胺(3-morpholinosydnonimine,SIN-1)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠的作用.方法应用豚鼠髓鞘碱性蛋白68-86(myelin basic protein 68-86,MBP68-86)主动免疫制作EAE实验动物模型.将大鼠随机分为SIN-1组和对照组,SIN-1组大鼠于致敏后第0~7天给予SIN-1药物干预,动态观察两组大鼠的临床症状及体质量变化,致敏后第14天采用ELISA方法检测各组大鼠单个核细胞(mononuclear cells,MNC)培养上清中γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平,并观察大鼠脑组织病理变化.结果与对照组比较,SIN-1组大鼠发病时间延迟,恢复时间提前,体质量明显增加,临床症状明显减轻;疾病症状最高评分明显降低.SIN-1组大鼠MNC培养上清中IFN-γ水平为(90.29±9.07) pg/mL,较对照组的(121.57±10.44) pg/mL明显降低(P<0.05);IL-4水平为(18.14±3.98) pg/mL,较对照组的(8.14±1.95) pg/mL明显增加(P<0.05).SIN-1组大鼠组织病理损伤较对照组明显减轻.结论一氧化氮供体SIN-1可抑制EAE大鼠病情发展,对EAE具有保护作用.【总页数】4页(P79-82)【作者】尚宏;付锦;王鹏军;王维治【作者单位】150001,哈尔滨医科大学附属第四医院神经内科;150086,哈尔滨医科大学附属第二医院神经内科;150001,哈尔滨医科大学附属第四医院神经内科;150086,哈尔滨医科大学附属第二医院神经内科【正文语种】中文【中图分类】R744.5+1【相关文献】1.阿魏酸甲酯一氧化氮供体衍生物对糖尿病大鼠肾功能的干预作用 [J], 黄鹤飞;刘浩然;李燕来;王燕燕;周刚;刘红兵2.一氧化氮供体JS-K对H22荷瘤小鼠肿瘤能量代谢的调节作用 [J], 刘玲;黄紫乐;慎会娜;王静;刘沐辰;花昌林3.一氧化氮供体JS-K对H22荷瘤小鼠抑瘤作用的研究 [J], 刘玲;王静;刘沐辰;慎会娜;花昌林4.一氧化氮供体型药物抗肿瘤作用的研究进展 [J], 宾雨飞;廖端芳5.外源一氧化氮供体硝普钠对番茄幼苗盐胁迫伤害的缓解作用 [J], 孙德智;杨恒山;张庆国;范富;苏雅乐其其格;彭靖;韩晓日因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一氧化氮供体SNP对水稻根中由硒引起的脂质过氧化的调节作用
一氧化氮供体SNP对水稻根中由硒引起的脂质过氧化的调节作用摘要：研究以0.2和20 μmol/L Na2SeO3及一氧化氮供体硝普钠（SNP）处理对水稻根中根系活力和硫代巴比妥酸反应产物含量，愈创木酚过氧化酶（GPX）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）以及抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性等生理生化指标的影响。
结果表明，1 μmol/L SNP处理显著提高0.2 μmol/L Na2SeO3处理下水稻根系活力，SNP通过促进CAT酶活性，缓解了膜脂过氧化；在20 μmol/L Na2SeO3处理下，1 μmol/L SNP明显促进SOD酶活性，但显著降低APX酶活性，显著降低根系活力。
NO对水稻根中Se引起的抗氧化活性变化具有调节作用，根系活力可以作为评价抗氧化活性的重要参考。
关键词：水稻；硒；一氧化氮；抗氧化作用Effects of Exogenous Nitric Oxide Donor SNP on Lipid Peroxidation Caused by Selenium in Roots of Rice SeedlingsAbstract：In this study，we reported some antagonist effects of exogenous nitric oxide on oxidative stress of rice induced by selenium. The root activity，the contents of TBARS and the activities of GPX，SOD，CAT and APX in roots of rice seedlings treated with varied concentr ations of selenium and 1 μmol/L SNP were investigated. The results showed that the root activity increased by treatment of SNP in 0.2 μmol/L Na2SeO3 group. SNP alleviated significantly the lipid peroxidation in rice seedlings via increasing CAT activities in rice root. In 20 μmol/L Na2SeO3 treated rice seedlings，SNP aggravated significantly the root activity loss via promoting SOD activities and repressing APX activity. Taken together，results suggested that NO regulates antioxidative activity caused by selenium in roots of rice seedlings. Root activity can be used as reference index of evaluating antioxidative activity.Key words：rice；selenium；nitric oxide；antioxidation一氧化氮（Nitric oxide，NO）是植物中一种重要的信号分子，在调节植物生长发育，促进植物细胞衰亡等方面发挥着重要作用[1]，进一步研究表明NO 在植物中的某些功能与它对活性氧（Reactive oxygen species，ROS）代谢水平的调节密切相关，如NO可作用于烟草中含血红素铁的过氧化氢酶（Catalase，CAT）和含非血红素铁的抗坏血酸过氧化物酶（Ascorbate peroxidase，APX），参与对活性氧代谢的调节[2]。
一氧化氮供体型3-丁基苯酞衍生物的合成及抗血小板活性
一氧化氮供体型3-丁基苯酞衍生物的合成及抗血小板活性闵真立;张奕华;庄佩;季晖;赖宜生;彭司勋【期刊名称】《中国药科大学学报》【年(卷),期】2008(39)5【摘要】目的:研究一氧化氮(NO)供体型3-丁基苯酞衍生物的合成和生物活性,寻找新型抗脑缺血药物。
方法:使用不同的连接基团将3-丁基苯酞的开环衍生物2-(1-乙酰氧戊基)苯甲酸与一氧化氮供体连接,合成了目标化合物6a-6c、10a-10c和12a-12c,同时测定它们在体外释放NO的量。
结果:合成了9个未见文献报道的目标化合物,其结构均经IR、1HNMR、MS和元素分析确证。
它们均有一定的抗血小板活性且有不同程度的NO释放,其中化合物10b活性最强,明显优于阿司匹林和3-丁基苯酞(P<0.01),其NO最大释放量为0.05μmol/L,而活性最弱的化合物6c仅为0.01μmol/L。
结论:NO供体型3-丁基苯酞衍生物具有较强抗血小板活性,其作用机制可能与NO释放有关。
【总页数】6页(P392-397)【关键词】NO供体;3-丁基苯酞;合成;抗血小板活性【作者】闵真立;张奕华;庄佩;季晖;赖宜生;彭司勋【作者单位】中国药科大学新药研究中心;中国药科大学药理学教研室【正文语种】中文【中图分类】TQ460.31;R914.2【相关文献】1.含单硝酸异山梨醇酯的丁苯酞衍生物的合成及抗血小板聚集活性研究 [J], 吴晶;凌菁菁;王旭亮;王晓丽;刘婧超;季晖;张奕华2.3-(3'-羟基)丁基苯酞氨基酸酯衍生物的设计与合成 [J], 赵九洋;李俊;张朝晖;江涛3.1-(3-酞酰亚胺基-2-氧丁基 )-4-取代苯基哌嗪的合成及抗HIV-1逆转录酶活性(英文) [J], 陈昕;王琳;赵知中;陈湘红;张兴权;陈鸿珊4.硫化氢供体型丁苯酞开环衍生物的设计、合成及抗血小板活性 [J], 王晓丽;王兆亚;王琳娜;季晖;张奕华;尹健因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
生物活性
靶点 :
Others
信号通路:
Nitric Oxide
产品描述:
Spermine NONOate 是二醇二氮烯类一氧化氮供体[1]。 一氧化氮（NO）增加细胞内鸟苷 3'5'环一磷酸，激活鸟苷酸环化酶，然后导致血管平滑肌松 弛[1]。 Spermine NONOate 是二醇二氮烯类一氧化氮供体。在大鼠肺动脉环中，Spermine NONOate （100 μM）促进鸟苷 3'5'环磷酸（cyclic GMP）增加 35 倍，通过激活肌浆-内质网 Ca2+-ATPase、
ON(N=O)N(CCCN)CCCCNCCCN
Soluble to 100 mM in sterile water
Desiccate at -20°C
For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37°C and shake it in the ultrasonic bath for a while.Stock solution can be stored below -20°C for several months.
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产品说明书
化学性质
产品名: Cas No.: 分子量: 分子式:
Spermine NONOate 136587-13-8 262.35 C10H26N6O2
产品名: Spermine NONOate 修订日期: 6/30/2016
化学名:
SMILES: 溶解性: 储存条件: 一般建议:
运输条件:
N'-(3-aminopropyl)-N'-(4-((3-aminopropyl)amino)butyl)-N-hydroxyni trous hydrazide
Na+/K+-ATPase 和 Ca2+激活的 K 通道导致 cyclic GMP 依赖性的舒张[1]。Spermine NONOate 抑制硫酸铜诱导的人低密度脂蛋白（LDL）氧化[2]。 在大鼠双侧子宫角损伤中，spermine NONOate (1 mg)抑制粘连的形成。此外， N,O-carboxymethylchitosan (NOCC)与 spermine NONOate 联合使用比 spermine NONOate 单独 使用严重性较低。这些结果表明，spermine NONOate 减少了术后粘连[3]。
参考文献: [1]. Homer KL, Wanstall JC. Cyclic GMP-independent relaxation of rat pulmonary artery by spermine NONOate, a diazeniumdiolate nitric oxide donor. Br J Pharmacol, 2000, 131(4): 673-682. [2]. Goss SP, Hogg N, Kalyanaraman B. The antioxidant effect of spermine NONOate in human low-density lipoprotein. Chem Res Toxicol, 1995, 8(5): 800-806. [3]. Duran B, Ak D, Cetin A, et al. Reduction of postoperative adhesions by N,O-carboxymethylchitosan and spermine NONOate in rats. Exp Anim, 2003, 52(4): 267-272.