蟾蜍坐骨神经干
实验二 蟾蜍坐骨神经干电生理实验
缩，使收缩张力逐渐增大，完全强直收缩时收缩张力达到了一个稳
定的最大值[3]。
1.5 仪器连接和参数( Apparatus junction and parameter ) 换能
器接第1通道。1通道时间常数直流、滤波频率30Hz、灵 敏度7.5g、，采样频率：800Hz，扫描速度：2.5s/div。
1.6 坐骨神经腓肠肌的股骨插入固定孔固定，神经干标本盒的
电极上，神经与电极接触良好，调节刺激电压，记录肌肉 收缩曲线。
1.1实验动物（laboratory animal) 蟾蜍（中华蟾蜍指名亚种，
Zhuoshan Toad）
1.2药品(drug) 任氏液
1. 3器材( Experimental apparatus) RM6240 生物信号处理系统 (RM6240 multichannel physiological recording and processing system )（成都仪器厂）、神经标本盒（ nerve chamber )、 张力换能器。
1.4 坐骨神经腓肠肌标本制备 (Preparation of sciatic gastrocnemius )
蟾蜍
毁脑脊髓，去上肢和内脏，下肢剥皮浸于任氏液中。蟾蜍下肢背面向 上置于蛙板上；用剪刀从脊柱正中剪开，向下从耻骨联合剪开分成两 个下肢标本，用玻璃分针分离脊柱傍的神经丛，用线在近脊柱处结扎， 剪断神经，从大腿至腘窝分离坐骨神经，将神经干提起剪断分支。去 除股骨上的肌肉，距膝关节1cm剪断股骨，分离腓肠肌跟腱穿线结扎， 剪断跟腱，游离腓肠肌，在膝关节剪去小腿其余办法，将坐骨神经－ 腓肠肌标本标本置任氏张力也逐渐增大，强直收缩产
生的张力显著大于单收缩。肌肉单收缩时，胞浆内Ca2+浓度升高的持 续时间太短，被激活的收缩蛋白尚未产生最大张力时，胞浆Ca2+浓度
实验3-蟾蜍坐骨神经干电生理实验
实验3 蟾蜍坐骨神经干电生理实验【摘要】目的运用电生理实验技术测定蛙类坐骨神经干的单相、双相动作电位和其中Ａ类纤维冲动的传导速度，并观察机械损伤、药物对神经兴奋和传导的影响。
方法采用RM6240微机生物信号处理系统，通过电生理的方法来测定蛙坐骨神经干的单相、双相动作电位的电位和时程以及其中Ａ类纤维冲动的传导速度。
并采用夹伤神经和加不同药物等处理措施，记录一定刺激强度下坐骨神经动作电位的大小变化，从而分析坐骨神经干动作电位的影响因素及机制。
结果动作电位的传导速度为31.76±3.63 m/s，阈刺激强度为0.28±0.03 V，最大刺激强度为1.21±0.36 V。
中枢端引导动作电位正相和负相振幅分别为3.15±1.87mV和 2.11±1.46mV，末梢端引导动作电位正负相振幅分别为7.04±2.01 mV和 3.89±1.46 mV，与中枢端引导时的动作电位振幅比有显著性差异（p<0.01）；夹伤神经干后，动作电位振幅为8.49±2.48 mV，时程为 1.73±0.40 ms，与末梢端引导时正相波时程比有显著性差异（p=0.002<0.01）。
引导电极间距离分别等于10mm、20mm和30mm时，动作电位正相振幅：A110为 7.07±1.87 mV，A120为 9.57±3.08 mV，A130为 9.75±3.33 mV，负相振幅：A210为 3.87±1.19 mV， A220为 5.35±2.23 mV，A230为 4.44±2.39 mV，A120、A130分别与A110比均有显著性差异（p<0.05），A220与A210比有显著性差异（p<0.05），A230与A210以及A220与A230比没有显著性差异（p>0.05）。
快速制作蟾蜍坐骨神经标本的一种方法
1、破坏蟾蜍的脑和脊髓
从箱子里取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。
左手握蟾蜍，用食指按压其头部使其尽量前俯，右手用大头针自枕骨大穴垂直插入，向前刺入颅腔，左右搅动，毁坏其脑组织；将探针回撤向后刺入脊椎管，反复提插毁其脊髓。
如果蟾蜍四肢酸软，呼吸消失，说明其脑和脊髓被破坏的差不多，否则继续上述方法进行。
2、剪除蟾蜍的躯干上部和其内脏
沿着蟾蜍的上肢处将蟾蜍的头部剪去，继而沿脊柱两侧剪开腹壁，这时的内脏全部下垂，减除内脏。
此时，你可以在脊柱的两旁看见坐骨神经，注意剪除的过程中不要损伤坐骨神经！
3、剥皮
用镊子夹紧脊柱的断端，右手捏住蟾蜍的皮肤边缘，逐步向下剥离皮肤，将标本置于盛有任氏液的培养皿中。
4、制备坐骨神经的小腿标本
用粗剪刀沿中线将脊柱剪成左右两半，从耻骨联合处剪开两侧的大腿，在这期间，注意不要损伤了坐骨神经。
将分离的标本放到盛有任氏液的培养皿中。
取一侧的下肢用大头针固定在蛙板上，用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经，于近脊柱侧结扎。
再循着坐股神经沟分离暴露出坐骨神经的大腿部分，直至胫腓神经分叉处。
自上向下剪断所有坐骨神经的分支，游离出坐骨神经。
将游离的坐骨神经搭于腓肠肌上，自膝关节周围向上剪除所有的大腿肌肉，在股骨的中部剪去上段股骨，保留部分即为坐骨神经小腿标本。
5、完成坐骨神经-腓肠肌标本
将上面所做的标本在跟腱处结扎后剪断，并逐步游离腓肠肌至膝关节处，将小腿的其余部分全部剪掉，这样就制成了坐骨神经-腓肠肌标本。
蟾蜍坐骨神经干电生理实验--mine
神经干动作电位及其传导速度的测定摘要目的测定蟾蜍坐骨神经干复合动作电位（compound action potential ，CAP），研究蟾蜍坐骨神经干的电生理特性、双相动作电位形成机制及神经损伤、药物对神经兴奋传导的影响。
方法应用微机生物信号采集处理系统通过电生理的方法来测定蛙类坐骨神经干的单相、双相动作电位的振幅、时程和其中Ａα类纤维冲动的传导速度，并通过夹伤神经和加药物的方法来观察对坐骨神经干的影响。
结果刺激电压1.0V，刺激波宽0.1ms时，中枢端引导的动作电位正相波和负相波振幅分别为4.38±1.81mV和2.70±1.16mV，正相波振幅A1chp大于负相波振幅A1chn，两者有高度显著性差异（P<0.01)；动作电位正相时程1.05±0.11mV显著短于负相时程2.26±0.31mV，两者有高度显著性差异（P<0.01)，末梢端引导的动作电位正相波振幅2.72±0.63mV大于负相波振幅1.31±0.60mV，两者有显著性差异（P<0.01)；动作电位正相波时程1.50±0.26ms显著短于负相波时程2.44±0.52 ms，两者有显著性差异（P<0.01)。
刺激电压1.0V，刺激波宽0.1ms，引导电极间距等于10mm、20mm 和30mm时，末梢端引导的动作电位正相振幅分别A10p为8.94±3.12mV、A20p为11.20±3.80 mV、A30p为11.49±3.84 mV，A30p、A20p大于A10p，有高度显著性差异（ P<0.01)。
负相波振幅分别A10n为5.26±1.56mV、A20n为6.13±1.31 mV、A30n为3.63±1.00 mV，A20n于A10n比无显著性差异（ P>0.05), A30n于A10n比有显著性差异（P<0.05）。
生理实验报告!
生理实验报告!蟾蜍坐骨神经干动作电位的引导、传导速度和兴奋不应期的测定【实验目的】1. 观察蟾蜍坐骨神经动作电位的基本波形，加深理解兴奋传导的概念，理解可兴奋性在兴奋过程中的变化过程;2. 进一步掌握坐骨神经—腓神经标本的制备方法与引导动作电位的方法;3. 进一步熟悉实验室里仪器设备的操作。
【实验原理】1. 神经干动作电位是神经兴奋的客观标志。
当神经受到有效刺激时，处于兴奋部位的膜外电位负于静息部位，当动作电位通过后，兴奋处的膜外电位又恢复到静息时的水平。
神经干兴奋过程所发生的这种膜电位变化称神经复合动作单位。
如果将两个引导电极置于神经干表面时(双极引导)，动作电位将先后通过两个引导电极，可记录到两个相反的电位偏转波形，称为双向动作电位;2. 神经纤维兴奋的标志是产生一个可传播的动作电位。
测定神经干上的神经冲动的传导速度，可以了解神经的兴奋状态。
在示波器上测量动作电位传导一定距离所耗费的时间，便可计算出兴奋的传导速度;3. 神经与肌肉等可兴奋组织的兴奋性在一次兴奋过程中可发生一系列变化，及绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，组织的兴奋性才可恢复。
为了测定神经干在兴奋过程中的兴奋性变化，可用双刺激法检查刺激引起的兴奋阙值和电位变化，即可观察到神经组织兴奋性的变化过程。
【实验对象】蟾蜍【实验器材】蛙类手术器械，BL-410生物信号记录分析系统，神经屏蔽盒，任氏液(林格液)等。
【实验步骤】制备蟾蜍坐骨神经-腓神经标本，并放入神经屏蔽盒内;(一)双相动作电位1.打开BL-410?实验项目?神经肌肉实验?神经干动作电位引导?记录出双相动作电位;2.由小到大改变刺激强度，记录阈强度和最大刺激强度;3.观察双相动作电位波形，测量最适刺激强度时的潜伏期、时程和波幅; (二)引导出最大刺激强度时的动作电位波形1.BL-410仪器操作:实验项目?神经肌肉实验?神经干动作电位传导速度测定?输入两电极之间的距离分别用潜伏期法和潜峰法测量其传导速度;2.潜伏期法:测量第一个通道动作电位潜伏期的时间(t)，输入刺激电极到第一个引导电极间的距离(S)，屏幕右上角显示传导速度和根据速度的公式计算传导速度:v=S/t;3.潜峰法:测量两个通道电位的动作电位的波峰间的时间差，为(t2-t1),测量并输入两对引导电极间的距离为(S2-S1),屏幕右上角显示传导速度和用公式计算传导速度:v=(S2-S1)/(t2-t1)。
不同因素对蟾蜍坐骨神经干动作电位的影响
（ 键 词 ］ 蟾 蜍 ； 作 电 位 ； 骨 神 经 关 动 坐 ［ 章 编 号 ］ １ ７ — ０ ７ ２ １ ） ４ ０ ４ — ４ （ 图 分 类 号 ］ Ｒ３ ８ （ 献 标 识 ｒ ３ Ａ 文 ６ ２２ ２ （ Ｏ ０ ０ — １３０ 中 ３ 文 ａ ￣ ＿
随着 人类 社会 的发展 ， 人所 接触 的化 学药 品越来 越 多 ， 些 是有 利 于人 的身体 健 康 ， 有些 则 是威 胁 着 有 而
第 ９ 卷 第 ４期 太 原 师 范 学 院 学 报 （ 自然科 学版 ） ２１ ０ ０年 １ ２月 Ｊ ＵＲＮＡ Ｆ Ｔ ＹＵＡＮ ＮＯ Ｏ Ｌ Ｏ ＡＩ ＲＭＡＬ ＵＮＩ Ｒ Ｉ （ ｔ ｒｌ ｃ ｎ ｅＥ ｉ ｏ ） ＶＥ Ｓ ＴＹ Ｎａｕ ａ Ｓ ｉ ｃ ｄｔ ｎ ｅ ｉ
人类 的健康 ． 蟾蜍 神 经干纤 维是 多条单 纤 维的复 合干 ， 比较 容 易识 别 及剥 制 ， 同时神 经 干 的 动作 电位 特 点 也 符合 “ 全或 无” 象Ⅲ ， 现 我们应 用 电生理 实验方 法观 察 了不 同物 质对 蟾蜍 离 体 坐 骨神 经 干 的一 些 电生 理 特性 （ 包括 动作 电位 幅度 、 导速 度 ） 传 的影 响 ， 旨在 为进 一步 了解各 物质 对神 经系 统 的影 响提 供一定 的实验依 据．
１ 材 料 与 方 法
１ １ 实 验 动 物 ．
健康 蟾蜍 ８ Ｏ只 ， 雌雄 不拘 ， 体重 约 ５ ， 自山西 医科 大 学 实验 动 物 中心提 供 ． 常规 方 法制 备蟾 蜍 坐 ０ｇ 由 按
骨 神经标 本 ． ］ １ ２ 实验 材料 ． 葡萄糖 溶液 ： 天津 药业集 团新 郑股 份 有 限公 司 ， 号 ０ ０ ０ ５ 甘 露 醇溶 液 ： 西 裕 源药 业 有 限公 司 ， 批 ９１４ ； 广 批 号 ：９２ １ ； ０ ０ ０ ３ 山梨 醇 ： 天津市 光 复精 细 化工研 究所 ， 号 ：０ ８ ９ ３ 神经 标 本屏 蔽 盒 ， Ｌ 批 ２０ ００ 。 Ｂ 一４ ０ ２ Ｅ＋生 物信 号
蟾蜍坐骨神经干复合动作电位特性简述
蟾蜍坐骨神经干复合动作电位特性1 材料蟾蜍；任氏液；BB-3G标本屏蔽盒，微机生物信号采集处理系统。
2 方法2．1 系统连接和参数设置RM6240多道生理信号采集处理系统与标本盒连接，1、2通道时间常数0.02s、滤波频率3KHz、灵敏度5mV，采样频率100KHz，扫描速度0.2ms/div。
单刺激激模式，刺激波宽0.1ms，延迟1ms，同步触发。
2．2 制备蟾蜍坐骨神经干标本蟾蜍毁脑脊髓和下肢标本制备，下肢标本仰卧置于蛙板上，分离脊柱两侧的坐骨神经，紧靠脊柱根部结扎，近中枢端剪断神经干，将神经干从骶部剪口处穿出。
循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离坐骨神经直至腘窝胫腓神经分叉处，将腓浅神经、胫神经与腓肠肌和胫骨前肌分离。
置剪刀于神经与组织之间，剪切直至跟腱并剪断跟腱和神经。
剥离附着在神经干的组织，坐骨神经干标本浸入任氏液中。
2．3 实验观察2．3．1 中枢端引导动作电位神经干末梢端置于刺激电极处，用刺激电压1.0V，波宽0.1ms 的方波刺激神经干，测定第1和第2对引导电极引导的双相动作电位正相波和负相波的振幅和时程。
2．3．2 改变引导电极距离用刺激电压1.0V，波宽0.1ms的方波刺激神经干中枢端，记录引导电极距离10mm、20mm、30mm时的动作电位。
分别测定上述三个引导电极距离的动作电位正相波和负相波的振幅和时程。
2．3．3 末梢端引导动作电位和测定动作电位传导速度引导电极距离10mm，神经干中枢端置于刺激电极处，用刺激电压1.0V，波宽0.1ms的方波刺激神经干，测定第1对引导电极引导的双相动作电位正相波和负相波的振幅和时程。
分别测量两个动作电位起始点的时间差和标本盒中两对引导电极之间的距离S（应测r1- r2的间距），计算动作电位传导速度。
2．3．4 单相动作电位引导用镊子在第1对引导电极之间贴近后一电极处神经夹伤，用刺激电压1.0V，波宽0.1ms的方波刺激神经干，测量单相动作电位的振幅和动作电位持续时间。
蟾蜍坐骨神经干
通过实验验证神经兴奋的传播机制，如局部 电流和跳跃式传导等。
研究神经兴奋性
通过记录神经干动作电位，研究神经兴奋性， 了解神经元和神经纤维的兴奋过程。
探索药物对神经传导的影响
研究某些药物对神经传导的影响，为药物研 发提供实验依据。
实验材料
蟾蜍
选用健康成年蟾蜍，确保其神 经系统发育成熟。
探索其在疾病模型中的作用
总结词
蟾蜍坐骨神经干在疾病模型中具有重要价值，有助于深入理解疾病的发病机制和寻找新 的治疗策略。
详细描述
利用蟾蜍坐骨神经干构建疾病模型，可以模拟神经系统疾病的发病过程，从而更深入地 了解疾病的发病机制。同时，通过研究这些模型，可以探索新的药物或治疗方法，为开
发更有效的治疗方案提供科学依据。
蟾蜍坐骨神经干
目录
Contents
• 蟾蜍坐骨神经干简介 • 蟾蜍坐骨神经干实验 • 蟾蜍坐骨神经干的应用 • 蟾蜍坐骨神经干与其他神经干的比
较 • 蟾蜍坐骨神经干的研究前景
01 蟾蜍坐骨神经干简介
定义与位置
定义
蟾蜍坐骨神经干是由坐骨神经节 和一系列神经纤维组成的神经束 ，位于蟾蜍的背部和腹部之间。
坐骨神经干
分离出蟾蜍的坐骨神经干，确 保其完整性。
刺激器和记录器
用于产生刺激和记录神经电信 号的仪器。
药物试剂
用于研究药物对神经传导影响 的各种药物试剂。
实验步骤
准备实验材料
准备好所需的实验器材和试剂，确保实验顺 利进行。
分离坐骨神经干
从蟾蜍身上分离出坐骨神经干，保持其完整性 。
连接刺激器和记录器
药物作用机制研究
通过观察药物对蟾蜍坐骨神经干的影 响，可以深入了解药物的作用机制， 为药物的研发和应用提供理论支持。
实验报告：蟾蜍坐骨神经干动作电位引导及传导速度测定
一、蟾蜍坐骨神经干动作电位引导及传导速度测定实验目的：加强理解兴奋传导的概念，掌握测定神经干动作电位传导速度的方法。
熟悉仪器设备的操作。
实验原理：通过测出示波器上动作电位传导的距离和传导所需的时间，计算传导速度。
1.潜伏期法：测量第一个通道动作电位潜伏期的时间t，输入刺激电极到第一个引导电极间的距离s，v=s/t。
2.潜峰法：测量两个通道的动作电位波峰间的时间差和两对引导电极间的距离，v=(s2-s1)/(t2-t1)。
实验步骤：1.制备坐骨神经-腓神经标本，放入神经屏蔽盒。
2.连接仪器，引导动作电位波形。
3.剪裁编辑图形，计算传导速度。
实验结果：1.图形2.计算S=10mm, t=0.33ms, v=10mm/0.33ms=33m/s分析讨论：1. 当刺激端和记录端离得较远时，引导的复合动作电位波形会发生什么改变，为什么？2.用什么方法可使复合动作电位传导速度的测量更准确？实验结论：神经干动作电位的传导速度为33m/s.二、兴奋性不应期的测定实验目的：了解测定不应期的方法和原理，并加深对兴奋性在兴奋过程中的变化过程的理解。
实验原理：神经纤维受到适宜刺激后，产生兴奋，即动作电位。
一次兴奋产生后，必须经绝对不应期、相对不应期、超常期等变化后，兴奋性才能恢复。
本实验通过生物电放大器引导并记录神经干复合动作电位，验证和测量动作电位的不应期。
先给一个条件刺激，再用另一个检验刺激在兴奋的不同时期给予刺激，检查兴奋未阈值及所引起动作电位的幅度。
实验步骤：1．制备坐骨神经-腓神经标本，并浸在任氏液中约5分钟，待其兴奋性稳定后实验。
2.连接仪器，设置实验参数，观察并测量神经干的不应期。
实验结果：（见图）分析讨论：1.为什么要先引导神经纤维的单向复合动作电位，然后再测量其兴奋性的不应期？2.神经干不应期与单根神经纤维的不应期有何不同？实验结论：兴奋性的不应期包括绝对不应期、相对不应期、超常期、低常期。
山东大学人体机能学报告之蟾蜍神经干
山东大学人体机能学实验报告【实验名称】蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定【实验目的】加深理解兴奋传导的概念，掌握测定神经干动作电位传导速度的方法。
熟悉仪器设备的操作。
【实验对象】蟾蜍【实验药品和器材】蛙类手术器械，BL-410生物信号记录分析系统，神经屏蔽盒，任氏液等。
【实验步骤及方法】（详见书P57.P58）1.坐骨神经—腓神经标本的制备。
2.将标本放入神经屏蔽盒，（注意刺激电极端为神经干的中枢端）。
3.仪器连接。
4.BL-410的操作。
【实验结果】1.神经干动作电位的引导2.坐骨神经干动作电位传导速度V=(S2-S1)/(t2-t1)实验测得两对引导电极之间的距离为1.6cm，两个通道的动作电位波峰间的时间差为0.60ms。
计算得到传导速度V=26.7m/s3.二次刺激在兴奋周期之后相对不应期受到二次刺激绝对不应期受到二次刺激二次刺激没有出现相应的动作电位。
【实验结论】实验测得两对引导电极之间的距离为1.6cm，两个通道的动作电位波峰间的时间差为0.60ms。
计算得到传导速度V=26.7m/s【讨论与分析】1.神经干不能太干也不能太湿，剥离完整后在任氏液体中稳定15分钟左右，取出用滤纸吸干周围的任氏液。
2.神经干放置在引导电极上时，尽量拉直，不能使它下垂或斜向放置，以免影响神经干长度测量准确性。
3.神经干要尽可能长，两个引导电极之间的距离越远，测量的传导速度就越准确。
一、实验目的要求1．学习蟾蜍坐骨神经干标本的制备方法。
2．观察蛙坐骨神经干复合动作电位的波形，并了解其产生的基本原理。
二、实验原理1、神经干受到有效刺激后，可以产生动作电位，在另一端可以引导出双相的动作电位，如果在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏，则引导出的动作电位即为单相动作电位。
2、坐骨神经干是以由很多不同类型的神经纤维组成的，所以，神经干的动作电位是复合动作电位。
复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的变化而变化的。
蟾蜍坐骨神经干复合动作电位特性简述
蟾蜍坐骨神经干复合动作电位特征1资料蟾蜍；任氏液；BB-3G 标本障蔽盒，微机生物信号收集办理系统。
2方法2． 1 系统连结和参数设置道时间常数、滤波频次RM6240 多道生理信号收集办理系统与标本盒连结，3KHz 、敏捷度 5mV ，采样频次 100KHz ，扫描速度1、2 通。
单刺激激模式，刺激波宽，延缓 1ms，同步触发。
2．2制备蟾蜍坐骨神经干标本蟾蜍毁脑脊髓和下肢标本制备，下肢标本仰卧置于蛙板上，分别脊柱双侧的坐骨神经，紧靠脊柱根部结扎，近中枢端剪断神经干，将神经干从骶部剪口处穿出。
循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分别坐骨神经直至腘窝胫腓神经分叉处，将腓浅神经、胫神经与腓肠肌和胫骨前肌分别。
置剪刀于神经与组织之间，剪切直至跟腱并剪断跟腱和神经。
剥离附着在神经干的组织，坐骨神经干标本浸入任氏液中。
2． 3实验察看2．3．1中枢端指引动作电位神经干末梢端置于刺激电极处，用刺激电压 1.0V ，波宽的方波刺激神经干，测定第 1 和第 2 对指引电极指引的双相动作电位正相波和负相波的振幅和时程。
2． 3．2改变指引电极距离用刺激电压 1.0V ，波宽 0.1ms 的方波刺激神经干中枢端，记录指引电极距离10mm、 20mm、 30mm 时的动作电位。
分别测定上述三个指引电极距离的动作电位正相波和负相波的振幅和时程。
2．3．3末梢端指引动作电位和测定动作电位传导速度指引电极距离 10mm，神经干中枢端置于刺激电极处，用刺激电压 1.0V ，波宽 0.1ms 的方波刺激神经干，测定第 1 对指引电极指引的双相动作电位正相波和负相波的振幅和时程。
分别丈量两个动作电位开端点的时间差和标本盒中两对指引电极之间的距离S（应测 r1- r2的间距），计算动作电位传导速度。
2．3．4单相动作电位指引用镊子在第 1 对指引电极之间切近后一电极处神经夹伤，用刺激电压 1.0V ，波宽 0.1ms 的方波刺激神经干，丈量单相动作电位的振幅和动作电位连续时间。
影响蟾蜍坐骨神经冲动传导速度的因素
影响蟾蜍坐骨神经冲动传导速度的因素【目的要求】1.学习测定蟾蜍离体坐骨神经干上神经冲动传导速度的方法和原理。
2.观察温度（37℃）、3%KCl、5%NaCl、2%普鲁卡因对蟾蜍离体坐骨神经冲动传导速度的影响。
【基本原理】神经干在受到有效刺激后可以产生复合动作电位，标志着神经发生了兴奋。
如果在离体神经干的一端施加刺激，从另一端引导传来的兴奋，可以记录到双相动作电位。
如果在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损坏，阻断兴奋的传导，这时记录到的动作电位就是单相动作电位。
单个神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的，而神经干复合动作电位的幅值在一定的刺激强度下是随刺激强度的增加而增大的。
如果在原理刺激点的不同距离处分别引导离体神经干动作电位，两引导点之间的距离为m，在两引导点分别引导出的动作电位的时差为s，即可按照公式v=m/s来计算兴奋的传导速度。
神经兴奋的发生和传导有赖于细胞膜上Na＋内流。
其客观指标是神经兴奋时产生的动作电位。
普鲁卡因等局麻醉药可阻滞Na离子内流，从而抵制神经冲动的发生与传导速度的减慢。
神经纤维的静息电位接近K离子的平衡电位，故细胞外液K离子浓度升高可使细胞膜内外浓度差减小，K离子平衡电位减小，膜发生去极化。
在此基础上，由于Na离子通道受到抑制，神经干传导速度降低；当细胞外夜Na离子内流减弱，也可以使神经干传导速度减慢。
【实验对象及器材】实验对象：蟾蜍实验器材：常用手术器械（手术剪，手术镊，手术刀，金冠剪，眼科剪、镊，毁髓针，玻璃分针）、娃板、纱布（卫生纸）、粗棉线、恒温箱、3%KCl、5%NaCl、2%普鲁卡因、PC机、信号采集处理系统、电子刺激器、神经屏蔽盒、Ringer’s液【方法与步骤】1.蟾蜍坐骨神经干的标本制备取蟾蜍1只，双毁髓后在尚难部用粗剪将脊柱剪短，撕下皮肤和内脏。
将带有部分脊柱、后肢的标本用任氏液洗净，置于娃解剖盘上。
在神经出脊柱处，用粗棉线结扎一侧坐骨神经，并于结扎点与脊柱之间将神经剪断。
实验1 蟾蜍坐骨神经干动作电位的实验研究
Central end
刺激电极
Peripheral end
引导电极
引导电极
（1ch）
Abp
Dbn Abn
Dbn
Abp Abn
2.4 测定兴奋传导的速度 利用前一实验结果测定第1和第2对引导电极引
导CAP起点的时间差Δt ，根据υ＝ S R1- R2- / Δt 计算出AP的传导速度。（表
6）（在分析测量时再测定）
本堂课安排
一、蟾蜍坐骨神经干动作电位的实验研究
1.讲解和讨论：实验方法、观察项目、问题及假设 2.示范： 神经干制备、动作电位引导、数据测量 3.自主实验 4.数据汇总统计 5.讨论：对实验数据统计结果的分析与机制探讨
二、失血代偿（高仿）实验
1.讲解 2.自主实验 3.讨论
1
注意事项
1.独立完成实验，不串岗，认真如实记录数据 2.遵守实验室规制制度，离开实验室须经教师许可 3. 数据资料用邮件发回，请不要使用移动存储器 4.器具须用水擦洗、擦干，按原样整齐放置 5.实验台须用湿的干净抹布擦拭干净。用品摆放整齐、关机 6.高真实验完成后，关机、将椅子放回原位 7.第3、第4组值日：督查各组善后工作；扫地、拖地，凳子
S+ S-
R1- R1 + R2- R2 +
Central end
Peripheral end
S R1- R2-
υ=
S R1- R2-
Δt
Δt
2.5 测定单相动作电位 （monophasic action potential， MAP） 用镊子夹伤第1对引 导电极间的神经干，用强度 1.0V，波宽0.1ms的电脉冲刺 激神经干中枢端，测定末梢 端引导的MAP的振幅和时程。 （表4）
蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定实验报告
神经干双向动作电位的引导传导速度及不应期的测定组员：陈良鹏肖瑶伍思静袁果曼罗冰清实验目的：观察蟾蜍坐骨神经动作电位的基本波形，掌握坐骨神经制备方法与引导动作电位的方法，理解与刺激和最大刺激强度的概念测定潜伏期时程和波幅，学会通过潜伏期法和潜峰法测定神经冲动的传导速度，通过测定神经干不应期理解兴奋性在兴奋过程中的变化过程。
实验对象：蟾蜍实验药品和器材:蛙类手术器械，BL-410生物信号记录分析系统，神经屏蔽盒，任氏液等。
实验原理：1、神经动作电位是神经兴奋的客观标志。
当神经受到有效刺激时，处于兴奋部位的膜外电位负于静息电位；当动作电位通过后，兴奋处的膜外电位又恢复到静息时水平。
神经干兴奋过程所发生的膜电位变化称神经复合动作电位。
如果将两个引导电极置于神经干表面时（双极引导），动作电位将先后通过两个引导电极处，可记录到两个相反的电位偏转波形，称为双向动作电位。
2、神经纤维兴奋的标志是产生一个可传播的动作电位。
测定神经干上的神经冲动的传导速度，可以了解神经的兴奋状态。
在示波器上测量动作电位传导一定距离所耗费的时间，便可计算出兴奋的传导速度。
3、神经与肌肉等可兴奋组织兴奋性在一次兴奋过程中可发生系列变化，即绝对不应期相对不应期超常期和低常期，组织的兴奋性才逐渐恢复。
为了测定神经干在兴奋过程中的兴奋性变化，可先给一个条件刺激以引起神经兴奋，然后再用另一检验性刺激，检查神经对检验性刺激反应的兴奋阈值以及所引起的动作电位（AP)幅度，即可观察到神经组织兴奋性的变化过程。
在本次实验中，主要观察的是不应期的变化，而非整个兴奋性的周期性变化。
实验对象：蟾蜍实验步骤及方法:1.坐骨神经—腓神经标本的制备。
2.将标本放入神经屏蔽盒，（注意刺激电极端为神经干的中枢端）。
3.仪器连接。
4.BL-410的操作。
实验内容：1、刺激坐骨神经时诱发产生的动作电位由在最适刺激强度时动作电位原图上进行区间测量可知，潜伏期为0.32ms，时程t1为 1.92ms ，波幅为11.08mV。
《蟾蜍坐骨神经干》课件
药物筛选
坐骨神经干是药物筛选的 常用实验材料，用于评估 新药对神经系统的潜在影 响。
疾病模型
坐骨神经干可以用于研究 神经退行性疾病、神经损 伤等疾病的发病机制和治 疗方法。
蟾蜍坐骨神经干生
02
理特性
神经元特性
神经元是神经系统的基本单位， 负责处理和传输信息。
蟾蜍坐骨神经干中的神经元具有 不同的类型和功能，包括感觉神 经元、运动神经元和中间神经元
长时间神经损伤导致支配肌肉萎缩。
损伤后的生理反应
感觉障碍
受损神经支配区域的感觉减退或消失 。
炎症反应
受损部位产生炎症反应，引发红肿、 热痛等症状。
损伤后的生理反应
神经传导障碍
受损神经纤维传导速度减慢或中断。
细胞凋亡
长时间损伤导致神经细胞凋亡，影响 神经功能恢复。
损伤修复与再生
再生芽
受损神经远端长出芽状突起，向近端生长。
髓鞘形成
新生轴突逐渐被髓鞘包裹，恢复传导功能。
损伤修复与再生
• 肌肉再支配：新生轴突重新支配肌肉，恢复肌肉 功能。
损伤修复与再生
年龄
年龄越大，再生能力越差 。
损伤程度
损伤越重，再生难度越大 。
药物治疗
某些药物可促进神经再生 。
蟾蜍坐骨神干在
04
实验中的应用
在生理学研究中的应用
探究神经传导的机制
药物筛选与开发
利用蟾蜍坐骨神经干进行药物筛选，可以发现具有潜在治疗作用的药物分子，为新药开 发提供依据。
在疾病模型中的应用
神经退行性疾病模型
蟾蜍坐骨神经干可以用于构建神经退行 性疾病的模型，如帕金森病、阿尔茨海 默病等，以研究疾病的发病机制和治疗 方法。
蟾蜍老母鸡治疗坐骨神经痛验方偏方单方
蟾蜍老母鸡治疗坐骨神经痛验方偏方单方
蟾蜍老母鸡治疗坐骨神经痛验方偏方单方，医者父母心，毕生经验，诚心奉献，请关注作者、赞赏、转藏等（体质不同、仅供参考）。
治坐骨神经痛验方：组成：21只蟾蜍（俗叫癞蛤蟆）,3只老母鸡，4.5斤红高粱。
制作方法：以上原料各三等分，分三次制作，每次为一料。
其方法是：先把7只蟾蜍放人锅内，加水两碗熬。
当水熬到只剩半碗时，把蟾蜍捞出，用熬的汤水拌1.5斤红高粱喂2只母鸡。
每天早、中、晚各喂一次，五天喂完。
当鸡把高粱吃完后杀掉。
用大锅炖熟，早、中、晚吃了次，每次一碗，约3~5天将汤肉吃完。
当第一只鸡吃完后，依次吃第二只鸡、第三只鸡（喂法、吃法与第一只相同）。
此方简单易办，有坐骨神经痛病者，不妨一试。
说明：煮后的蟾蜍不能食用。
蟾蜍坐骨神经干课件
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注意事项
1.制备标本时，神经干应尽可能分离长一些，上自 脊柱附近的主干，下至踝关节附近。分离过程中 勿损伤神经组织，以免影响其兴奋性。
2.将神经干搭在引导电极上时，神经干不能与标本 盒壁相接触，尽量将其拉成水平线，不要下垂或 斜向放置。
(1) 引导双相神经动作电位
点击“神经干 动作电位的引 导”，引导出 一个双相动作 电位。
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(2)观察和测定双相动作电位
① 自动调节刺激强度，观
察动作电位波形的变化。读 出波宽为某一数值时的阈刺 激和最大刺激。
②仔细观察双相动作电位的
波形。读出最大刺激时双相 动作电位上下相的振幅和整 个动作电位持续时间数值。
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61、奢侈是舒适的，否则就不 是奢侈 。 ——CocoChanel
62、少而好学，如日出之阳； 壮而好 学，如 日中之 光；志 而好学 ，如炳 烛之光 。 ——刘向
63、三军可夺帅也，匹夫不可 夺志也 。 ——孔丘
64、人生就是学校。在那里， 与其说 好的教 师是幸 福，不 如说好 的教师 是不幸 。 ——海贝尔
实验原理(三) 神经动作电位传导速度的测定 动作电位在神经干上传导具有一定的
速度蟾蜍的坐骨神经是混合神经，由许多 粗细不等的有髓和无髓神经纤维构成，其 中以Aɑ类纤维为主，传导速度约为35— 40m/s。
神经冲动的传导速度 (v)是指动 作电位在单位时间(t)内传导的距离
(s)
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仪器与器械 (一)
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注意事项
1.破坏脑脊髓要彻底，防止蟾酥射入操作者 眼中或污染实验标本。 2.操作时避免压挤、损伤和用力牵拉标本， 不可用金属器械触碰神经干。 3.操作过程中，应给神经和肌肉滴加任氏液， 防止表面干燥，以免影响标本的兴奋性。 4.标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟,使 标本兴奋性稳定,再开始实验效果会较好。
蟾蜍坐骨神经干标本的制备
蟾蜍坐骨神经干标本的制备121140066 许克波 B3一、实验目的1、离体标本实验（与在体标本实验的区别）2、掌握锌铜弓导致生物电产生的原理3、掌握离体标本的制备及手术训练4、掌握剪刀的技用和双毁髓的意义二、实验原理1、锌铜弓的作用及原理锌铜弓：在生理学实验中，锌铜弓是检验标本机能活性最常用而简易的刺激器。
由铜片和锌片两种金属制成。
锌铜弓具有刺激作用，是因为金属与溶液之间产生电位差，即电极电位。
通常将金属浸入电解质溶液中，如Zn便溶解而成Zn离子。
而在Zn的里面则形成负离子。
Cu在溶液中则相反，金属与溶液之间便产生了电位差——电极电位。
如果将Zn和Cu一端接触，则在接触部位电流由Cu向Zn方向流动；而在溶液中则相反，由Zn向Cu流动。
当锌铜弓接触组织时（注意：表面必须湿润），电流便沿Zn→可兴奋组织→Cu方向流动，而产生流动作用。
这样，锌铜弓好像一个电池，Zn如同其阳极，Cu好像阴极而发挥作用。
神经或肌肉的电刺激阈值非常小，所以仅用锌铜弓接触，即可构成刺激，以便检验组织的机能活性。
2、蟾蜍的毁髓及单毁髓和双毁髓及双毁髓的意义蟾蜍破坏脑脊髓：取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。
右手握住蟾蜍，用食指压住头部前端使头前俯，中指、无名指捏住两前腿，无名指以及小指捏住两后腿，左手持针，当触及到两耳中间的凹陷处时，持针手即感觉针尖下陷，此处即是枕骨大孔的位置。
左手持针从枕骨大孔向前刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织，然后将刺蛙针退到枕骨大孔，不拔出而是将其尖转向后插入脊柱管中捣毁脊髓，插入椎管时，蟾蜍后肢立即失去紧张性，多数情况出现尿失禁。
若脑脊髓破坏完全，可见蟾蜍四肢松弛，呼吸消失。
单毁髓：如毁髓针确在颅腔内，实验者可感到针尖触及颅骨。
双毁髓：再将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。
彻底捣毁脊髓时，可看到动物的后肢突然蹬直，而后瘫软如棉。
双毁髓的意义：这个实验主要是探讨神经纤维冲动产生、兴奋传递和肌肉收缩之间的关系，与神经中枢无关。
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3低温的作用： ⑴ 现象：神经干放在冰水中浸泡后，动作电位的幅度及传导速度均下降。 ⑵ 机制：低温可阻断神经纤维的传导活动，在温度很低时神经纤维的兴奋性及电传导均直线下降，较大的带髓鞘的神经易受抑制。低温时神经细胞的耗氧率及能量代谢率都降低，细胞膜上及细胞内与代谢有关的蛋白酶活性降低，离子扩散速率减慢，细胞膜的流动性下降。
3、神经干动作电位的不应期： 我们所记录到的神经干的动作电位的不应期是不应期最短的那类神经纤维的不应期。动作电位是Na+内流的电化学平衡电位，Na+通道的激活、失活和备用有时间依赖性和电压依赖性。本实验用阈上刺激，虽然可以激活Na+通道，但其离子通道仍要经历激活、失活和备用三个时期。在失活期内无论给多大刺激，均不能产生动作电位，称之为绝对不应期；在备用期，给予阈上刺激，可以产生局部电位，当刺激强度足够大时可以产生一个新的动作电位，称之为相对不应期。
实验讨论：
1、实验观察的是复合神经纤维动作电位及其特性，其与单一神经纤维的动作电位有很多不同： a)引导方法不同：神经干动作电位记录的是多个细胞外两点之间的电势差，记录时负波向上，正波向下；而单一神经纤维的动作电位是用微电极记录的同一细胞膜内外的电势差。 b)波形不同：神经干动作电位随两个记录电极之间电势差的变化而成双相动作电位，如果两个记录两极之间的距离无限大，可以记录到方向相反的两个单相波；而单一神经纤维只能记录到单相动作电位。c)产生原理不同：在单细胞膜外，如图1已兴奋部位（细胞膜内为正，膜外为负）较未兴奋部位或兴奋已恢复部位成负电位，因此两点间存在电势差。神经干动作电位是多根神经纤维的复合电位，如图2当B区兴奋时，B与A和C间存在电位差，由I电极引导出一个动作电位。B区兴奋后，又逐渐复极，动作电位逐渐向C、D区传导。当动作电位传导到D区时，B区已完全复极，D区兴奋故II电极又记录到一个动作电位，同时D区又逐渐复极，由此引导出双相动作电位。
2、神经干动作电位的阈刺激和最大刺激： 当刺激强度达到一定程度时，一部分神经细胞兴奋产生动作电位，这时能够记录到神经干的动作电位。当刚刚出现动作电位时的刺激强度称阈值。随着刺激强度的不断增加，越来越多的神经纤维兴奋产生动作电位，记录到的神经干的动作电位波幅也越来越大。当刺激强度增加到一定大小时，所有神经纤维都被兴奋，神经干的动作电位不再增大，这时的刺激强度称为最大刺激强度。