最新+实验细菌革兰氏染色法1汇总
细菌革兰氏染色实验报告
细菌革兰氏染色实验报告细菌革兰氏染色实验报告一、实验目的1.掌握革兰氏染色的方法2.熟悉细菌涂片的制备3.革兰氏染色法进行细菌鉴定二、实验材料1.实验仪器显微镜、酒精灯、载玻片、擦镜纸、接种环,接种针,、试管架、镊子、载玻片夹子、滤纸、滴管2.实验试剂草酸铵结晶紫染色液、碘液、95%乙醇、番红复染液、无菌水,蒸馏水,、香柏油、二甲苯三、方法与步骤1.操作方法示意图,干燥, ,水, ,水, ,水, ,晾干, 制片——初染———媒染———脱色———复染——镜检 2.操作步骤,步骤一,涂片的制作(1) 涂片载玻片一张,加一滴生理盐水,取菌研磨均匀 (2) 干燥温室干燥,或置酒精灯高处慢慢烘烤(3) 固定干燥后的涂片,在酒精灯火焰中通过3次步骤,二,初染,滴加草氨酸结晶紫染液覆盖涂菌部位,染色1—2min,后倾去染液,水洗至流出水无色步骤,三,媒染,先用碘液冲去残留水迹,在用碘液覆盖1min,倾去碘液,水洗至流出水无色步骤,四,脱色,将玻片上残留水用吸水纸吸去,在白色背景下用滴管流加95%乙醇脱色,一般20——30s,,当流出液无色时立即用水洗去乙醇。
步骤,五,复染,将玻片上残留水用吸水纸吸去,用番红复染液染色2min ,水洗,吸去残水晾干。
步骤,六,镜检,像涂片涂菌部位滴加适量香柏油,进行油镜观察【小结】1. 选用活跃生长期长的菌种染色,老龄的革兰氏阳性菌会被染成红色,造成假阴性。
2. 涂片不宜过厚,以免脱色不完全造成假阳性3. 脱色是革兰氏染色是否成功的关键,脱色不够,造成假阳性,脱色过度造成假阴性。
4. 染色原理C+菌,胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障缩小,故保留结晶紫—碘复合物在细胞膜上呈紫色 C-菌,肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫—碘复合物溶出细胞壁,沙皇复染后呈红色。
【注意事项】1. 加热时使用载玻片及试管夹,以免烫伤。
细菌的革兰氏染色法
细菌的革兰氏染色法细菌的革兰氏染色法实验二细菌的革兰氏染色法学习细菌的革兰氏染色原理和方法。
单染色法：只能观察微生物的大小、形状、和细胞排列状况，但不能鉴别微生物以及它的特殊构造等。
复染色法：用两种或两种以上染色液进行染色，有协助鉴别微生物的作用，故也称鉴别染色法。
常用的有：革兰氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法、鞭毛染色法等。
革兰氏染色机制：由于G－肽聚糖层较薄，交联度低，含较多脂质，故用乙醇等有机溶剂脱色时融解了类脂质，增加了细胞的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，经沙黄复染呈红色。
而G＋细胞壁结构致密，用脱色剂处理后，肽聚糖层孔径缩小，通透性降低，故细菌仍保留初染时的紫色。
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌（24h培养物）、革兰氏染色液一套3. 初染：在做好的涂面上滴加草酸铵结晶紫染液，染1分钟，倾去染液，流水冲洗至无紫色。
4. 媒染：先用新配的路哥氏碘液冲去残水，而后用其覆盖涂面1分钟，后水洗。
5. 脱色：除去残水后，滴加95%酒精进行脱色约15-20秒，后立即用流水冲洗。
6. 复染：滴加番红染色液，染3－5分钟，水洗后用吸水纸吸干。
7. 镜检：观察染色结果并绘图。
记录所观察到的两种菌革兰氏染色颜色的差别，并绘图。
如图所示，被染为紫色的部分即为金黄色葡萄球菌，红色部分即为大肠杆菌。
六、问题与讨论要得到正确的革兰氏染色结果必须注意哪些操作？哪一步是关键？Why?按照操作顺序来看1、首先，必须强调的是实验过程中全程的无菌操作：玻片的消毒、接种环的杀菌以及实验所用材料试管的无菌使用；2、其次，是金黄色葡萄球菌以及大肠杆菌的刮取过程中，它们的量一定要适中，以免过多影响后期观察结果；3、再者，涂片操作结束后，通过酒精灯的烘烤将细菌固定，要注意控制烘干的程度，防止细菌全被烧死；4、接下来的染色过程中，注意各染色剂染色的时间长度，尤其是95%乙醇脱色的时长，18秒为适宜时长；5、最后，就是吸干水分，注意油镜的使用，先在低倍镜下找视野，再转成高倍镜、油镜。
细菌革兰氏染色实验报告
细菌革兰氏染色实验报告实验目的，通过革兰氏染色技术，观察细菌的形态特征，进一步了解细菌的分类和结构。
实验原理，革兰氏染色是一种常用的细菌染色技术，通过革兰氏阳性和阴性细菌在染色过程中的不同反应，来区分细菌的特性。
革兰氏阳性细菌在染色后呈紫色，而革兰氏阴性细菌在染色后呈粉红色。
实验步骤：1. 取一架无菌玻片，用无菌针头沾取待检测的细菌样本，涂抹在玻片上形成薄而均匀的细菌涂片。
2. 将玻片在火焰中加热灭菌，使细菌附着在玻片上。
3. 用染色剂革兰氏紫涂染玻片，静置1分钟后用水冲洗干净。
4. 用碘液滴在玻片上，静置1分钟后用水冲洗干净。
5. 用去色剂酒精滴在玻片上，静置数秒后用水冲洗干净。
6. 用染色剂粉红色涂染玻片，静置1分钟后用水冲洗干净。
7. 用纸巾吸干玻片上的水分，然后在玻片上滴一滴甘油作为封片剂。
8. 将盖玻片贴在涂片上，用显微镜观察细菌的染色情况。
实验结果及分析：经过革兰氏染色处理后，观察到样本中细菌的染色情况。
根据染色结果，可以初步判断细菌的分类。
革兰氏阳性细菌呈紫色，而革兰氏阴性细菌呈粉红色。
通过观察细菌的形态特征，可以进一步了解细菌的分类和结构。
实验结论：通过本次实验，我们成功使用了革兰氏染色技术，观察到了细菌的染色情况，并初步判断了细菌的分类。
革兰氏染色技术是一种简单而有效的细菌分类方法，对于细菌学研究具有重要意义。
总结：细菌革兰氏染色实验是细菌学实验中的基础实验，通过本次实验，我们深入了解了革兰氏染色技术的原理和步骤，掌握了正确的实验操作方法。
通过观察细菌的染色情况，我们对细菌的分类和结构有了更深入的认识，为今后的细菌学研究奠定了基础。
在今后的实验中，我们将继续深入学习细菌学知识，不断提高实验技能，为科学研究和实验应用做出更大的贡献。
革兰氏染色法实验报告共5篇
革兰氏染色法实验报告篇一革兰氏染色法是一种常用的细菌染色方法，可用于鉴定细菌的类型和形态。
以下是一份革兰氏染色法的实验报告范例，包含实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果和结论等部分。
实验目的： 1.了解革兰氏染色法的原理和步骤； 2.掌握细菌的革兰氏染色方法； 3.观察细菌在革兰氏染色中的反应，并进行鉴定。
实验原理：革兰氏染色法是根据细菌细胞壁的特性而设计的一种染色方法。
细菌细胞在染色过程中会根据细胞壁的结构不同，分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
革兰氏阳性菌具有较厚的细胞壁，含有较多的革兰氏染色阳性物质（如染色时用的紫檀碱），因此在染色后会呈现紫色。
革兰氏阴性菌细胞壁较薄，不含有革兰氏染色阳性物质，染色时使用的碘酒（革兰氏碘化酒）能使它产生复合革兰氏染色阳性物质（碘靛紫），再用酒精脱色，再用洋红着色，使其产生颜色变化，最终呈现红色。
实验步骤： 1.准备好菌液：选取需检测的菌株，用无菌盘收集少量菌落，用少量生理盐水悬浮，制备菌液。
2.片玻璃片：在清洁无菌玻璃片上滴上一滴菌液。
3.烘干：将玻璃片架起，自然风干。
4.固定：将玻璃片的细菌涂片在火焰上迅速烘烤，使其牢固地附着在玻璃片上。
5.染色：将烘烤后的玻璃片放入紫檀液中，染色1分钟。
6.脱色：用酒精脱色10-30秒。
7.洗净：用自来水清洗片上的超染色剂。
8.再染：将片浸入碘靛紫溶液中，染色1-2分钟。
9.脱色：用酒精脱色10-30秒。
10.洗净：用自来水清洗片上的超染色剂。
11.观察：利用显微镜观察和比较细菌的形态和染色情况。
12.记录：记录细菌的形态、颜色等观察结果。
实验结果：通过观察细菌的形态和颜色，我们可以得出以下结论：•革兰氏阳性菌在染色后呈现紫色；•革兰氏阴性菌在染色后呈现红色。
结论：革兰氏染色法是一种常用的细菌染色方法，通过染色反应可以初步鉴定细菌的类型。
本次实验中，我们成功地使用革兰氏染色法对细菌进行了染色和鉴定，观察到了不同细菌的染色结果，并且将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。
革兰氏染色的实验报告（共9篇）
革兰氏染色的实验报告(共9篇)革兰氏染色实验报告革兰氏染色法的原理及其练习摘要：革兰氏染色反应是细菌重要的鉴别特征，所以学习微生物学，进行革兰氏染色实验是很重要的。
为保证染色结果的正确性，采用规范的的染色操作方法是十分必要。
本实验主要对大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus Rosenbach）、枯草杆菌（Bacillus subtilis）进行革兰氏染色，观察它们的染色特征，辨别是革兰氏阴性还是阳性，从而掌握其染色方法。
染色方法与过程很清晰，但实验结果中金黄色葡萄球菌(S.aureus Rosenbach）多组呈现假阴性。
本实验的主要目的是熟悉并掌握革兰氏染色方法及原理，但要想做出很好的染色得多加练习。
本实验还可以锻炼显微镜操作技术和无菌操作技术。
关键词：革兰氏染色大肠杆菌(E.coli) 金黄色葡萄球菌(S. aureus Rosenbach) 枯草杆菌(B.subtilis)引言革兰氏染色是微生物学中最重要的鉴别染色方法，它可以直接将细菌分为革兰氏阴性和革兰氏阳性。
革兰氏染色法可将细菌分为革兰氏阳性（G+）和革兰氏阴性（G-）两种类型，这是由这两种细菌细胞壁结构组成与结构的差异所决定的。
经过一定的染色过程后，革兰氏阳性的细菌会因为细胞壁肽聚糖的含量高，脂质含量低而保持第一次染色的蓝紫色。
革兰氏阴性细菌细胞壁的脂质含量高，乙醇处理时脂质溶解，蓝色被洗脱，复染后变为红色。
革兰氏染色原理很简单，染色时需注意要注意使用处在活跃生长期的细菌，涂片不宜过厚，严格控制脱色时间。
大肠杆菌(E.coli)是革兰氏阴性细菌，金黄色葡萄球菌(S. aureus Rosenbach)与枯草杆菌(B.subtilis)都是革兰氏阳性细菌，染色后在显微镜下容易区别。
同时它们的形态各异，可以根据具体颜色和形态差异来判断染色是否成功。
本实验还涉及到高倍油镜的使用。
细菌革兰氏染色的实验报告
细菌革兰氏染色的实验报告细菌革兰氏染色的实验报告一、引言细菌革兰氏染色是一种常用的实验方法，用于区分细菌的结构和特性。
通过革兰氏染色，可以将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类，从而在临床诊断和疾病治疗中起到重要的作用。
本次实验旨在探究细菌革兰氏染色的原理和操作方法，并通过观察染色结果，进一步了解细菌的特性。
二、实验材料与方法1. 实验材料：- 细菌培养物：选择两种细菌菌株，一种为革兰氏阳性细菌，另一种为革兰氏阴性细菌。
- 革兰氏染色试剂：包括紫晶染液、碘液、脱色剂和红色染色液。
- 玻璃片和显微镜片：用于制作细菌涂片和观察染色结果。
2. 实验方法：- 步骤一：取两种不同的细菌培养物，分别在玻璃片上制作细菌涂片。
- 步骤二：将制作好的细菌涂片分别加入紫晶染液，静置5分钟。
- 步骤三：用蒸馏水冲洗玻璃片，使其清洁。
- 步骤四：加入碘液，静置1分钟。
- 步骤五：用脱色剂冲洗玻璃片，直到无色流出。
- 步骤六：加入红色染色液，静置1分钟。
- 步骤七：用蒸馏水冲洗玻璃片，使其清洁。
- 步骤八：将玻璃片放在显微镜片上，用显微镜观察细菌染色结果。
三、实验结果与讨论通过观察细菌染色结果，可以清晰地看到两种细菌的差异。
革兰氏阳性细菌在染色后呈紫色或蓝色，而革兰氏阴性细菌则呈红色。
这是因为细菌细胞壁的结构不同导致的。
革兰氏阳性细菌具有较厚的层状细胞壁，由多层的胞外多糖和蛋白质组成。
在染色过程中，细菌细胞壁的多糖会与紫晶染液结合，形成复合物。
而碘液的加入会使复合物更加稳定，不易被脱色剂去除。
因此，革兰氏阳性细菌在染色后仍保持紫色或蓝色。
相反，革兰氏阴性细菌细胞壁较薄，主要由一个薄层的胞外脂多糖组成。
在染色过程中，细菌细胞壁的脂多糖无法与紫晶染液结合，因此无法形成复合物。
碘液的加入也无法稳定脂多糖，使其被脱色剂去除。
因此，革兰氏阴性细菌在染色后会被红色染色液覆盖，呈现红色。
细菌革兰氏染色的结果可以帮助我们快速区分细菌的类型，从而指导临床的诊断和治疗。
细菌的革兰氏染色法实验报告
细菌的革兰氏染色法实验报告摘要：革兰氏染色法是一种常用的细菌分类和鉴定方法。
通过本实验，我们成功地利用革兰氏染色法对不同类型的细菌进行了染色，并观察到了细菌在显微镜下的形态特征。
实验结果表明，革兰氏染色法能够有效地将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类，为细菌的鉴定提供了重要的依据。
引言：细菌是一类微生物，广泛存在于我们周围的环境中。
了解细菌的分类和鉴定对于研究细菌的生理特性、病原性以及药物敏感性具有重要意义。
革兰氏染色法是一种常用的细菌分类和鉴定方法，通过染色后细菌在显微镜下的形态特征，可以将其分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。
材料与方法：1. 细菌培养物：本实验选择了两种细菌培养物，分别是革兰氏阳性菌A和革兰氏阴性菌B。
2. 革兰氏染色试剂：结晶紫、碘液、酒精、脱色剂、苏木精。
3. 显微镜：用于观察染色后的细菌样品。
实验步骤：1. 取两株细菌培养物，分别进行涂片制备。
2. 将制备好的涂片用结晶紫染色液浸泡5分钟，然后用蒸馏水冲洗。
3. 加入碘液浸泡1分钟，然后用蒸馏水冲洗。
4. 用酒精滴加在涂片上，使其脱色，然后用蒸馏水冲洗。
5. 加入脱色剂浸泡30秒至1分钟，然后用蒸馏水冲洗。
6. 将涂片用苏木精染色液浸泡1分钟，然后用蒸馏水冲洗。
7. 涂片晾干后，放入显微镜下观察。
结果与讨论：经过革兰氏染色法染色后，我们观察到了明显的差异。
革兰氏阳性菌A呈紫色，而革兰氏阴性菌B呈红色。
根据革兰氏染色法的原理，我们可以解释这种差异。
革兰氏染色法中，结晶紫染色液首先染色细菌细胞的细胞壁。
革兰氏阳性菌的细胞壁含有较多的胞外多糖和胞外蛋白质，能够吸附结晶紫，形成紫色。
而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄，胞外多糖和胞外蛋白质含量较少，无法吸附结晶紫，因此在后续的染色步骤中无法保留紫色，最终呈现红色。
革兰氏染色法的原理是通过染色后细菌在显微镜下的形态特征来进行分类和鉴定。
革兰氏阳性菌的细胞壁较厚，呈紫色，在显微镜下观察到细胞形态较大、圆润。
细菌革兰氏染色实验报告
细菌革兰氏染色实验报告细菌革兰氏染色实验报告引言：细菌革兰氏染色是一种常用的细菌分类和鉴定方法，通过染色技术可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
本实验旨在通过观察细菌在革兰氏染色过程中的变化，进一步了解细菌的特性和结构。
实验材料与方法：1. 细菌培养物：从实验室中获取两种不同类型的细菌培养物。
2. 细菌涂片制备：取适量的细菌培养物，滴在玻璃片上，用铅笔头均匀涂抹成薄片。
3. 革兰氏染色试剂：包括革兰氏染色碱液、革兰氏碘液、酒精洗涤液和苏木精染色液。
4. 显微镜和油浸镜头。
实验步骤：1. 将细菌涂片放置在实验台上，用革兰氏染色碱液滴在细菌涂片上，静置1分钟。
2. 用蒸馏水冲洗细菌涂片，使碱液流失。
3. 加入革兰氏碘液，静置1分钟。
4. 用蒸馏水冲洗细菌涂片，使碘液流失。
5. 加入酒精洗涤液，静置10-30秒，直至洗涤液不再有颜色溢出。
6. 用蒸馏水冲洗细菌涂片，使洗涤液流失。
7. 加入苏木精染色液，静置1分钟。
8. 用蒸馏水冲洗细菌涂片，使苏木精染色液流失。
9. 将细菌涂片放在显微镜上，用油浸镜头进行观察。
实验结果与讨论：经过革兰氏染色处理后，观察到两种不同类型的细菌在显微镜下呈现出不同的颜色和形态。
其中，革兰氏阳性菌呈现紫色或深蓝色，而革兰氏阴性菌呈现红色或粉红色。
革兰氏阳性菌的细胞壁较为厚实，富含多糖和多肽聚合物，因此在革兰氏染色过程中能够吸附和保留革兰氏染色碱液和苏木精染色液。
这些染色液与细菌细胞壁中的大量多糖和多肽结合，形成紫色或深蓝色的复合物。
典型的革兰氏阳性菌包括葡萄球菌和链球菌等。
相反，革兰氏阴性菌的细胞壁较为薄弱，富含脂质和蛋白质，因此无法吸附和保留革兰氏染色碱液和苏木精染色液。
这些染色液会被酒精洗涤液洗去，导致细菌呈现红色或粉红色。
典型的革兰氏阴性菌包括大肠杆菌和沙门氏菌等。
通过细菌的革兰氏染色结果，可以初步判断细菌的分类和特性。
革兰氏阳性菌多数为球状或梭状，常见于皮肤和黏膜表面，有些能够引起感染。
最新细菌革兰氏染色
细菌革兰氏染色革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。
它是1884年由丹麦医师Gram 创立的。
革兰氏染色法（Gram stain ）不仅能观察到细菌的形态，而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示。
细菌对革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁成分比较金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、产气荚膜梭菌、粪链球菌、炭疽杆菌等属革兰氏染色阳性菌。
沙门氏菌、大肠杆菌、志贺氏菌、铜绿假单胞菌、霍乱弧菌均属革兰氏阴性。
所以根据细菌的革兰氏染色性质，可以缩小鉴定范围，有利于进一步分离鉴定。
1.菌种（1）大肠杆菌（Escherichia coli )斜面菌种1支 （2）枯草杆菌（Bacillus subtilis )斜面菌种1支 图2-2-3 革兰氏阳性菌、阴性菌结构2.仪器普通光学显微镜3.染色液（1）结晶紫染色液结晶紫 1g95％乙醇 20mL1％草酸铵水溶液 80mL将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。
（2）革兰氏典液碘 1g碘化钾 2g蒸馏水 300mL将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水至300mL。
番茄花红复染液（3）番茄花红复染液番茄花红 0.25g95％乙醇 10mL蒸馏水 90mL将番茄花红溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。
4.其他材料载玻片、接种环、镊子、酒精灯、各种染色液、火柴、玻璃铅笔、蒸馏水、擦镜纸、吸水纸、香柏油、清洁剂等【任务实施】 1.无菌取样制片——固定——初染（结晶紫染液）1-2min ——水洗——媒染（碘液）1min ——水洗——脱色（95％乙醇至无色）——水洗——复染（番红染液）1-2min ——水洗——干燥——镜检2.操作说明涂片干燥固定图2-2-1 无菌取样技术 图2-2-2 简单染色流程图2-2-4 革兰氏染色流程（1）涂片：在洁净无脂的载玻片中央滴一小滴蒸馏水，用接种环以无菌操作从枯草芽孢杆菌斜面上挑取少许菌苔于水滴中，混匀并涂成薄膜，涂布面积约1～1.5cm2。
革兰氏染色实验总结[整理版]
![革兰氏染色实验总结[整理版]](https://img.taocdn.com/s3/m/6006795aff4733687e21af45b307e87101f6f87e.png)
革兰氏染色法革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师、细菌学家Christain Gram创立。
细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G—）。
为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红、稀释复红等进行复染。
阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。
有芽胞的杆菌和绝大多数的球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。
革兰氏阳性菌对青霉素敏感，革兰氏阴性菌对链霉素敏感。
可根据革兰氏染色法鉴别不同菌种并对症下药。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样。
现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物，它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。
另外，阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同PH 条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料很多，因此不易脱去，阴性菌则相反。
所以染色时的条件要严格控制。
例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应；PH很低时，则可都呈负反应。
此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。
所以脱色时间，脱色方法也应严格控制。
G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。
呈紫色。
Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：１）涂片固定。
在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，固定。
革兰氏染色实验报告
革兰氏染色实验报告一、实验目的革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，通过此实验，我们旨在：1、学习并掌握革兰氏染色的原理和方法。
2、能够区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
3、了解细菌细胞壁结构与革兰氏染色反应的关系。
二、实验原理革兰氏染色法的原理基于细菌细胞壁的结构和化学组成的差异。
革兰氏阳性菌的细胞壁较厚，主要由肽聚糖层组成，且肽聚糖含量高，交联度大，脂质含量少。
当用乙醇脱色时，细胞壁肽聚糖层脱水而使孔隙缩小，故保留结晶紫碘复合物在细胞内，细胞仍呈紫色。
革兰氏阴性菌的细胞壁较薄，肽聚糖含量低，交联度小，脂质含量高。
当用乙醇脱色时，脂质被乙醇溶解，细胞壁孔隙变大，结晶紫碘复合物容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细胞被染成红色。
三、实验材料1、菌种选取了大肠杆菌（革兰氏阴性菌）和金黄色葡萄球菌（革兰氏阳性菌）作为实验菌株。
2、试剂草酸铵结晶紫染液、碘液、95%乙醇、沙黄（番红）染液。
3、仪器显微镜、载玻片、盖玻片、酒精灯、接种环、镊子、擦镜纸、香柏油、二甲苯等。
四、实验步骤1、涂片取一块干净的载玻片，在中央滴一滴无菌水，用接种环分别挑取少量的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，与无菌水混合均匀，涂成薄而均匀的菌膜。
2、干燥将涂片在空气中自然干燥。
3、固定手持载玻片一端，在酒精灯火焰上过 2-3 次，以固定细菌。
4、染色（1）初染：滴加草酸铵结晶紫染液覆盖菌膜，染色 1-2 分钟，水洗。
（2）媒染：滴加碘液冲去残水，覆盖菌膜 1 分钟，水洗。
（3）脱色：用 95%乙醇脱色 20-30 秒，立即水洗。
（4）复染：滴加沙黄染液覆盖菌膜 1 分钟，水洗。
5、干燥用吸水纸吸干载玻片上的水分，自然干燥。
6、镜检先用低倍镜找到清晰的视野，再换用高倍镜观察，最后用油镜观察细菌的形态和颜色。
五、实验结果1、金黄色葡萄球菌经过革兰氏染色后，金黄色葡萄球菌呈现紫色，判断为革兰氏阳性菌。
在显微镜下观察，菌体呈球形，排列成葡萄串状。
实验 细菌的革兰氏染色
实验二细菌的革兰氏染色一、实验目的1、掌握微生物涂片、染色的基本技术；2、掌握细菌革兰氏染色法的基本原理和方法。
二、实验仪器与器材1、菌种：大肠杆菌2、染色液和试剂：结晶紫、碘液、95%酒精、蕃红染液、石炭酸复红染液、二甲苯、香柏油3、器材：显微镜、废液缸、洗瓶、载玻片、接种杯、酒精灯、擦镜纸三、实验原理革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。
该染色法所以能将细菌分为G+菌和G-菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。
G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。
G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色。
四、实验内容1、涂片：取干净载玻片一块，在载玻片的中央加一滴蒸馏水，用接种环以无菌操作法取少量菌苔于水滴中，混匀并涂成薄膜。
注意取菌不要太多；涂片要均匀，不易过厚。
2、干燥：让涂片自然晾干或者在酒精灯火焰上方文火烘干。
3、固定：手执玻片一端，有菌面朝上，迅速通过火焰2～3次固定（以薄片背面不烫手为宜，以免破坏细胞形态），热固定的目的是使细菌细胞质凝固，以固定细胞形态，并使之牢固附着在载玻片上。
4、初染：滴加适量（以盖满细菌涂面为宜）结晶紫染色液染色1分钟，倾去染色液，用水小心地冲洗。
5、媒染：滴加碘液，媒染1min，水洗，用滤纸吸干残存的水。
6、脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色20～25s至流出的乙醇无色，立即水洗。
7、复染：滴加蕃红染液复染2～3min，水洗。
8、镜检：将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水纸吸干，先低倍观察，再高倍观察和油镜观察。
革兰氏染色的实验报告
革兰氏染色的实验报告革兰氏染色的实验报告导言：革兰氏染色是一种常用的细菌染色技术，它能够将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类。
本实验旨在通过革兰氏染色技术，对不同细菌进行染色观察，以便更好地了解细菌的形态和结构。
实验材料和方法：1. 实验材料：- 细菌培养物- 革兰氏染色试剂：紫晶染液、碘液、酒精、脱色剂、蔗糖水- 显微镜- 玻璃片- 消毒棉球2. 实验方法：1) 取一滴细菌培养物，涂抹在玻璃片上。
2) 将玻璃片放入火焰中进行固定。
3) 滴加紫晶染液，静置1分钟。
4) 用蒸馏水洗净玻璃片，使其呈现紫色。
5) 滴加碘液，静置1分钟。
6) 用蒸馏水洗净玻璃片，使其呈现紫色。
7) 滴加酒精，静置数秒钟。
8) 用蒸馏水洗净玻璃片，使其呈现紫色。
9) 滴加脱色剂，静置数秒钟。
10) 用蒸馏水洗净玻璃片，使其呈现紫色。
11) 滴加蔗糖水，静置数秒钟。
12) 用蒸馏水洗净玻璃片，使其呈现紫色。
13) 用消毒棉球擦干玻璃片。
14) 将玻璃片放在显微镜下观察。
实验结果：经过革兰氏染色处理后，观察到细菌呈现出不同的颜色和形态。
根据染色结果，我们将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
1. 革兰氏阳性菌：革兰氏阳性菌呈现紫色，形态多为球形或椭圆形。
其细胞壁含有较多的肽聚糖和穿孔素，因此在染色过程中能够保留紫晶染液并呈现紫色。
2. 革兰氏阴性菌：革兰氏阴性菌呈现粉红色或无色，形态多为椭圆形或棒状。
其细胞壁含有较少的肽聚糖和穿孔素，因此在染色过程中无法保留紫晶染液，而被脱色剂脱色。
讨论：革兰氏染色技术通过染色剂的作用，能够将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
这一技术在细菌学研究中具有重要意义。
首先，革兰氏染色能够帮助鉴定细菌的类型。
根据染色结果，我们可以初步判断细菌的分类，从而为后续的研究提供指导。
例如，对于临床医学来说，革兰氏染色结果可以帮助医生判断细菌感染的种类，从而选择合适的抗生素进行治疗。
其次，革兰氏染色还能够帮助观察细菌的形态和结构。
实验细菌的革兰氏染色
结果判断的注意事项
观察时需注意染色结果是否清晰、准确，避免因操作不当或染色时间过长导致颜色 过深或过浅。
对于某些特殊细菌，如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等，革兰氏染色结果可能与其他 细菌不同，需结合其他实验结果进行鉴别。
学习革兰氏染色的操作步骤
结晶紫染色
涂片上滴加结晶紫染液，染色 1-2分钟，水洗去多余染液。
复染
涂片上滴加复染液，染色30秒 左右，水洗去多余复染液。
涂片
将待测细菌均匀涂布在载玻片 上。
脱色
涂片上滴加脱色液，脱色30秒 左右，水洗去多余脱色液。
干燥
将涂片自然干燥或用吸水纸吸 干。
掌握革兰氏染色的结果判断
据。
实验中遇到的问题及解决方案
问题
染色过程中出现颜色不均 的现象。
问题
部分细菌在染色后形态不 清晰。
问题
部分细菌在染色过程中脱 落。
解决方案
调整染色时间或染色液的 浓度，确保染色均匀。
解决方案
优化制片步骤，确保细菌 均匀分布在载玻片上，以
便观察。
解决方案
增加固定步骤，使用更好 的固定剂，以保持细菌在
在观察革兰氏染色结果时，需注意区分污染菌和实验菌，避免误判。
06
实验结论
实验总结
实验过程顺利，染色效果明显， 成功地进行了细菌的革兰氏染色。
通过实验，我们掌握了革兰氏染 色的基本原理和操作方法，了解 了不同细菌在染色后的形态特征。
实验中，我们观察到了革兰氏阳 性菌和阴性菌在染色后的明显差 异，为后续的细菌鉴定提供了依
革兰氏染色的重要性
细菌的革兰氏染色实验报告
细菌的革兰氏染色实验报告实验目的，通过革兰氏染色实验，观察和比较革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的形态特征，了解其细胞壁的结构差异。
实验材料和方法：材料，革兰氏阳性菌（如葡萄球菌）、革兰氏阴性菌（如大肠杆菌）、墨汁、碘酒、95%乙醇、碘液、革兰染色试剂盒、显微镜等。
方法：1. 取一片清洁的玻璃片，用酒精棉球擦拭干净，标记好样本编号。
2. 取一根无菌的接种环，在无菌条件下取一部分革兰氏阳性菌涂抹于玻璃片的一侧，用另一根无菌接种环取一部分革兰氏阴性菌涂抹于玻璃片的另一侧。
3. 将玻璃片放在通风处晾干，然后用火烧消毒。
4. 将墨汁涂抹在细菌上，静置1分钟后用水冲洗干净。
5. 用碘酒浸渍1分钟，倒去碘酒，用95%乙醇洗涤10秒钟，然后用水冲洗干净。
6. 最后用碘液浸染30秒钟，然后用水冲洗干净，晾干后即可进行观察。
实验结果：观察革兰氏阳性菌在显微镜下呈紫色，球状或椭圆形，细胞壁较厚，没有外膜；而革兰氏阴性菌在显微镜下呈红色，细胞形态多样，细胞壁较薄，有外膜。
两者在染色后呈现出明显的形态差异。
实验讨论：革兰氏染色是细菌学中的一种重要染色方法，通过染色后的观察可以初步判断细菌的分类，对于细菌的形态特征有着重要的参考价值。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在染色后呈现出不同的颜色和形态特征，这与其细胞壁的结构有关。
革兰氏阳性菌的细胞壁主要由大量的肽聚糖组成，而革兰氏阴性菌的细胞壁中含有较多的脂多糖，这也是它们在染色后呈现不同颜色的原因。
结论：通过本次实验，我们成功地进行了革兰氏染色实验，并观察到了革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在染色后的形态特征。
革兰氏染色是一种简单而有效的细菌分类方法，可以帮助我们初步了解细菌的结构和分类。
对于进一步的细菌鉴定和分类有着重要的意义。
实验注意事项：1. 在进行实验前要做好无菌操作，避免细菌的外源污染。
2. 实验中的染色试剂要注意保存，避免受到光照和高温影响。
3. 在观察细菌形态时，要注意调节显微镜的放大倍数，以便更清晰地观察细菌的形态特征。
细菌的革兰氏染色实验报告
细菌的革兰氏染色实验报告实验名称：细菌的革兰氏染色实验
实验目的：通过细胞壁结构的不同，观察细菌的革兰氏反应，了解细菌的形态特征及分类情况。
实验原理：细菌细胞壁的结构不同，根据革兰氏染色方法可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，其中革兰氏阳性菌在染色后呈紫色，革兰氏阴性菌在染色后呈红色，通过观察染色后的细菌颜色能够大致了解细菌的分类情况。
实验材料：
1. 革兰氏染色试剂（含靛派液、碘酒、脱色剂、碱性洗涤液）
2. 外部消毒液、无菌采样棒、无菌平板
3. 革兰氏阳性菌（如金黄色葡萄球菌）
4. 革兰氏阴性菌（如大肠杆菌）
实验步骤：
1. 将需要实验的细菌分别接种于无菌平板上。
2. 用外部消毒液将无菌采样棒消毒并晾干。
3 .取一个无菌采样棒分别在革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的菌落上轻轻刮取，避免沾到无关菌种。
4. 将采样棒沾有菌落的一端放入一滴靛派液中浸润，再在菌液上加2-3滴碘酒，静置1分钟，使靛派液和碘酒渗透到其内部。
5. 倒掉靛派液和碘酒，用脱色剂加水洗涤液一一洗去染色剂，每次洗涤2-3秒，规定洗4次，每次可以轻轻甩去液体。
6. 最后观察染色后的细菌颜色，革兰氏阳性菌为紫色，革兰氏阴性菌为红色。
实验结果：本次实验观察到革兰氏阳性菌（金黄色葡萄球菌）染后呈紫色，革兰氏阴性菌（大肠杆菌）染后呈红色。
实验结论：通过细菌的革兰氏染色实验，发现革兰氏阳性菌在染色后呈紫色，革兰氏阴性菌在染色后呈红色，这种染色方法为快速鉴别大肠杆菌等革兰氏阴性菌和金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌提供了简单、快捷的方法。
实验一细菌的革兰氏染色
四 操作步骤
制片（涂片，干燥，固定）→初染（草酸铵结晶 紫染1 min，水洗）→媒染（加碘液覆盖涂面染1 min，水洗，用吸水纸吸去水分）→脱色（加 95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20 s后水 洗，用吸水纸吸去水分）→复染（蕃红复染约1 min，水洗）→干燥→镜检
Smear preparation
五 注意事项
注意涂片不宜过。 火焰固定温度要适宜。
注意控制好脱色程度。
六 思考题
造成革兰氏染色结果不正确（假阴性或假阳性） 的主要原因有哪些？
Structure of a Gram-Negative Cell Wall
Structure of a Gram-Positive Cell Wall
三 材料与器材
菌种： 大肠杆菌约24 h营养琼脂斜面培 养物，金黄色葡萄球菌约24 h 营养琼脂 斜面培养物。 革兰氏染色液 载玻片、酒精灯、显微镜。
实验法的原理，掌握革兰氏 染色方法的操作技术。
二 实验原理 1、染色方法
Since bacteria are almost colorless and therefore show little contrast with the broth in which they are suspended, they are difficult to observe when unstained. Staining microorganisms enables one to: -see greater contrast between the organism and the background,
四四操作步骤操作步骤制片涂片干燥固定初染草酸铵结晶min水洗媒染加碘液覆盖涂面染1min水洗用吸水纸吸去水分脱色加95酒精数滴并轻轻摇动进行脱色20洗用吸水纸吸去水分复染蕃红复染约1min水洗干燥镜检smearpreparationstainingheatfixingcrystalvioletstainwashwaterstaingramsiodinesolutiondecolorizeadding95alcoholcounterstain火焰固定温度要适宜
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三、实验器材： 1、菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌 2、染色剂：革兰氏染液 3、接种环、载玻片、酒精灯、洗瓶、显微镜、 双层瓶、擦镜纸等
四、实验方法
1、制片 涂片——干燥——固定
2、初染 滴加结晶紫染色1——2分钟，水洗； 3、媒染 用碘液冲去残水，并用碘液覆盖1分钟； 4、脱色 滴加95%酒精脱色，25-30秒，立即水洗； 5、复染 用番红液复染约2分钟，水洗； 6、镜检 干燥后，用油镜观察。
1、涂片后为什么要固定？固定时应注意什么/ 2、革兰氏染色过程中，哪些操作是成败关键？为什么？
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2010+实验细菌革兰氏染色法1
当用结晶紫初染后，所有细菌都被染成初染剂的兰紫色， 碘作为媒染剂，它能与结晶紫结合成结晶紫-碘复合物，从而 增强了染料与细菌的结合力。当用脱色剂处理时，两类细菌 的脱色效果是不同的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要有舦聚 糖形成的网状结构组成，壁厚，类脂含量低，用酒精脱色时 细胞壁脱水，使舦聚糖层的网状结构孔径缩小，透性降低， 从而使结晶紫碘复合物不易被洗脱而保留在细胞内，经脱色 和复染后仍保留初染剂的兰紫色。革兰氏阴性细菌则不同， 由于其细胞壁舦聚糖层较薄，类脂含量较高，，所以当脱色 处理时，类脂质被酒精溶解，细胞壁透性增大，使结晶紫-碘 复合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细胞被染上 复染剂的红色。
图6 无菌操作过程
ห้องสมุดไป่ตู้
1、结晶紫染1min 2、水洗 3、碘液媒染1min 4、水洗 5、乙醇脱色30秒 6、水洗 7、番红复染2min 8、水洗 9、吸水纸吸干
图7 革兰氏染色程序
实验结果：
1、绘出大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的革兰氏染色视野图，并指 出哪种是革兰氏阳性菌，哪种是革兰氏阴性菌。
思考题：