高中生物单克隆抗体的制备过程
高中生物工程有哪些
高中生物工程有哪些生物工程是高中生物课程的重点内容，需要同学们掌握生物工程知识点。
下面是店铺为大家整理的高中生物工程知识点，希望对大家有所帮助!高中生物工程一：基因工程基因工程：是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。
(一)基因工程的基本工具1. “分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
(2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。
(3)结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
2. “分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。
②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。
DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。
3. “分子运输车”——载体(1)载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
(3)其它载体：λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。
(二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1. 目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。
2023年教师资格之中学生物学科知识与教学能力通关提分题库(考点梳理)
2023年教师资格之中学生物学科知识与教学能力通关提分题库(考点梳理)单选题（共60题）1、下列关于单克隆抗体的制备过程及原理的叙述，正确的是（）A.获取某种B淋巴细胞之前，无需给实验动物注射相应的抗原B.只要将动物的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在同一培养基中培养，就能得到杂交瘤细胞C.只要将杂交瘤细胞放在适宜的培养基中培养，就能够得到产生单一抗体的细胞群D.与常规的抗体相比，单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点【答案】 D2、关于物质进出细胞的方式，以下叙述错误的是（）。
A.葡萄糖通过主动运输进入小肠绒毛上皮细胞，再通过被动运输进入红细胞B.兴奋的产生和传导过程中Na+通过被动运输进入神经元，再通过主动运输运出神经元C.氧分子在肺部通过自由扩散进入红细胞，在组织处又以自由扩散方式出红细胞D.胰岛素通过胞吐方式分泌到细胞外，又通过主动运输方式进入靶细胞传递信息【答案】 D3、不同表现型的肉牛生育出相同基因型的小牛，可以通过哪种途径？（）A.人工授精B.细胞培养C.胚胎分割移植D.显微注射技术【答案】 C4、成人思维的特点主要表现为( )。
多选A.辨证性B.相对性C.实用性D.抽象性【答案】 A5、人教版高中生物教材中，选取了较多的现代生物技术，以及最新的生物科学研究成果，这符合教材内容选择（）的思想。
A.以学生的发展作为选取内容的出发点B.应当符合学生的知识基础、心理特点和认识规律C.要反映社会、经济和科技发展的需要，体现“科学、技术、社会”的思想D.应将探究活动作为教科书内容的重要组成部分【答案】 C6、水稻根细胞中一般不存在的细胞器是（）。
A.高尔基体B.内质网C.线粒体D.叶绿体【答案】 D7、“增强学生的好奇心和求知欲。
培养他们的探索精神和创新精神”是哪一方面的生物学课程目标?（）A.知识方面的目标B.能力方面的目标C.情感态度价值观方面的目标D.方法方面的目标【答案】 C8、患者，女性，26岁。
高中生物选修3(浙科版)知识点总结
第一章基因工程一、工具酶的发觉和基因工程的诞生1、基因工程的概念：（1）广义的遗传工程：泛指把一种生物的遗传物质（细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。
（2）基因工程：就是把一种生物的基因转入另一种生物体中，使其产生我们须要的基因产物，或者让它获得新的遗传性状。
基因工程的核心是构建重组DNA分子。
由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA 重组技术。
（3）基因工程诞生的理论基础：DNA是遗传物质的发觉过程、DNA双螺旋结构的确立、遗传信息传递方式的认定。
2、基因工程的基本工具（1）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）①来源：主要是从原核生物中分别纯化出来的。
②功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并能切割（使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开），因此具有专一性。
例如：某种限制性核酸内切酶能识别的序列是GAATTC,能在G和A之间切割DNA，如下图所示。
黏性末端黏性末端③结果：能将DNA分子切割成很多不同的片段。
备注：不同DNA分子用同一种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端都相同；同一个DNA分子用不同限制性核酸内切酶切割，产生的黏性末端一般不相同。
（2）“分子缝合针”——DNA连接酶①作用：将具有末端碱基互补的2个DNA片段连接在一起（缝合磷酸二酯键）形成的DNA分子称为重组DNA 分子。
因此，DNA连接酶具有缝合DNA片段的作用，可以将外源基因和载体DNA连接在一起。
（3）“分子运输车”——载体——质粒①载体具备的条件：1）能在受体细胞中复制并稳定保存。
2）具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。
3）具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
②最常用的载体——质粒：质粒在细菌中以独立于拟核之外的方式存在，是一种特殊的遗传物质，并具有自我复制实力的双链环状DNA分子。
高中生物选修3图解
选修3《现代生物科技专题》中的图解1．请用适当的词语填空，完成基因工程的基本操作流程图
3．请用适当的词语填空，完成蛋白质工程流程图
4
预期功能 生物功能 分子
5．请用适当的词语填空，完成植物体细胞杂交技术操作流程图
6．请用适当的词语填空，完成动物细胞培养过程示意图
培养条件：无菌无毒环境
一定的营养
适宜的温度和Ph
含95%空气加5%CO2
的气体环境
7．请用适当的词语填空，完成动物体细胞核移植过程流程图（一）：生殖性克隆
8．请用适当的词语填空，完成动物体细胞核移植过程流程图（二）：治疗性克隆
9．请用适当的词语填空，完成单克隆抗体制备过程示意图
10
11．请用适当的词语填空，完成胚胎移植示意图
早期胚胎 （发育在透明带内进行） 内细胞团 滋养层 全能细胞 形成内、中、外3个胚层
12．请用适当的词语填空，完成试管动物工厂化生产流程图。
人教版高中生物总复习[知识点整理及重点题型梳理]——细胞工程
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人教版高中生物总复习知识点梳理重点题型（常考知识点）巩固练习高考总复习细胞工程（克隆技术）专题【考纲要求】1．阐述植物组织培养的原理和过程。
2．掌握植物体细胞杂交的原理和过程。
3. 掌握动物细胞培养的条件及过程4．简述用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
5．掌握单克隆抗体的制备过程及单克隆抗体的特点。
6. 举例说明动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。
【考点梳理】考点一、植物细胞工程——植物组织培养技术1. 概念2. 原理——植物细胞的全能性（1）定义：细胞的全能性指已经分化的细胞依然具有发育成完整个体的潜能，（2）原因：生物体的每一个细胞含有该物种所特有的全套的遗传物质（全部基因或全套遗传信息）（3）不同细胞全能性的高低：受精卵﹥胚胎干细胞﹥生殖细胞﹥体细胞受精卵是全能性最高的细胞；生殖细胞和早期胚胎细胞具有较高的潜在全能性；体细胞离体后，在一定条件下表现出全能性。
3.过程，如下图：（1）脱分化：已高度分化的细胞经过诱导后，失去原有的结构和功能，恢复分裂能力转变为未分化细胞的过程。
（2）愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞，在脱分化过程中恢复细胞分裂能力，形成的一团薄壁细胞。
其特点为：排列疏松无规则、高度液泡化、无定形状态、薄壁细胞（3）再分化：愈伤组织在一定条件下，再分化出根和芽，形成完整植株的过程。
4. 植物细胞全能性实现条件（植物组织培养的条件）要点诠释（组培过程中的激素调控——生长素与细胞分裂素）：进行植物组织培养时，生长素与细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化、再分化的关键性激素，在脱分化和再分化的过程中都需要在培养基中添加适当比例的生长素和细胞分裂素，以诱导细胞的脱分化和再分化，如下图：①脱分化过程中，细胞分裂素与生长素共同使用，可促进愈伤组织的形成。
②再分化过程中，生长素与细胞分裂素的使用比例不同时，会有不同的效果：当生长素含量高于细胞分裂素时，即生长素所用比例较高时，有利于根的分化，抑制芽的形成；当细胞分裂素含量高于生长素时，即细胞分裂素所用比例较高时，有利于芽的分化，抑制根的形成。
【高中生物】高中生物知识点：单克隆抗体
【高中生物】高中生物知识点：单克隆抗体单克隆抗体：1、抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。
从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。
2、单克隆抗体的制备（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞（2）获得杂交瘤细胞①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
（3）克隆化培养和抗体检测（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取3、单克隆抗体的应用(1)作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点。
(2)用于治疗疾病和运载药物。
血清抗体与单克隆抗体的比较：名称产生特点血清抗体由B淋巴一般从血清中分离，产量低、纯度低、特异性差单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌特异性强，灵敏度高，能大量制备知识点拨：1、融合的结果是有很多不符合要求的；如有2个B淋巴细胞融合的细胞等，所以要进行筛选。
2、筛选出能够分泌所需抗体的杂种细胞。
3、杂交瘤细胞的特点：既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。
4、单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。
5、单克隆抗体的作用：作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。
用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症治疗，可制成“生物导弹”，也有少量用于治疗其它疾病。
知识拓展：制备单克隆抗体过程中的筛选：筛选是将未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及BB融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出B瘤融合的细胞。
筛选是将产生特定抗体的B瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。
因为从体内取免疫过的B淋巴细胞时取出很多种，形成的杂交瘤细胞有很多种，所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。
相关高中生物知识点：植物体细胞杂交技术植物体细胞杂交技术：1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。
高中生物：细胞工程知识点
高中生物：细胞工程知识点（一）克隆1.克隆clone：无性繁殖系（只由一个模板分子、母细胞或母体直接形成新一代…）2.克隆技术cloning：从众多基因或细胞群体中通过无性繁殖和选择获得目的基因或特定类型细胞的操作技术3.内容：（1）分子水平：基因克隆即目的基因的复制（受体细胞的无性繁殖）、分离（特定基因探针选择、钓取目的基因）过程（2）细胞水平：杂交瘤制备单克隆抗体（3）个体水平：不通过两性细胞的结合，从一个单一（体）细胞繁殖出生物个体——胚胎细胞克隆以胚胎/卵细胞作为供体、利用核移植，不是严格意义上的动物个体克隆4.条件：（1）理论条件：细胞全能性/有发育成完整新个体的全套遗传物质（根本原因）（2）基本条件：①具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞②具有能有效调控细胞核发育的细胞质物质 e.g去核卵细胞③完成胚胎发育的必要的环境条件 e.g胚胎早期培养环境/子宫5.非正面影响：丰富生物多样性，促进生物进化，维护生态平衡（二）植物克隆1.全能性表达的难易程度：(1)受精卵＞生殖细胞＞胚胎/全能干细胞＞多能（干）细胞＞专能（干）细胞＞体细胞；PS生殖细胞在一定刺激下染色体可加倍；一些动物存在孤雌生殖(2)植物细胞＞动物细胞；低等动物＞高等动物PS不同种类植物或同种植物的不同基因型个体间全能性的表达程度大不相同2.植物组织培养（植物克隆的技术基础）（1）理论基础：植物细胞全能性，即植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性，因而都具有发育成完整植株的潜能（2）过程：①离体植物细胞、组织或器官（外植体）→获得愈伤组织→诱导形成试管苗→新植株PS外植体选取形成层(分生组织)部分易于诱导形成愈伤组织A.培养条件：首先是离体培养(生物体内细胞中基因在特定时间和空间条件下选择性表达，细胞分化为不同组织、器官，故无法表现出全能性)半/固体培养基（固体为例）a.营养物质：水、无机盐、蔗糖、维生素、有机添加剂(氨基酸、琼脂凝固剂等)b.植物激素/生长调节剂（适当浓度配比诱导分化出芽/根的顶端分生组织/花）——CTK中等量IAA少量诱导脱分化，CTK、IAA比例合适诱导根芽分化c.无菌条件（外植体70%酒精消毒、器械高温蒸汽灭菌）——杂菌争夺产毒d.适宜的pH、温度和渗透压B.光照：若外植体是（带叶）茎段，不经历脱分化再分化，组培全过程均需要光照；若外植体是非光合作用部位（如胡萝卜块根），再分化成芽后光照C.试管苗移栽前需炼苗（草炭土/蛭石，逐渐降湿）D.愈伤组织：排列疏松的高度液泡化的活的薄壁细胞团②外植体→愈伤组织→摇床液体悬浮培养分散成单细胞→胚状体→人工种子PS 单细胞植物克隆，类似受精卵的卵裂、分化、器官发生、形态建成单细胞：细胞质丰富、液泡小、细胞核大（胚性细胞特征）③酶解细胞壁→原生质体培养→新植株（2）用途：微型繁殖、制造人工种子(胚状体阶段)、单倍体育种、作物脱毒（植物分生组织细胞，分裂旺盛病毒极少Cf抗病毒）、在培养基中加入不同浓度的氯化钠溶液，可诱发和筛选抗盐植株细胞产物工厂化生产（愈伤组织阶段已可，试管培养苗、细胞培养反应器也可）(3)长期培养后的全能性下降原因：染色体畸变、核变异、非整倍体产生；细胞或组织中激素平衡被打破；细胞对外源生长物质的敏感性改变；形成缺乏成胚性的细胞系——植株在多次继代培养后，会逐渐丧失细胞全能性的表达能力3.原生质体融合/植物体细胞杂交（不同植物）获得原生质体：在甘露醇溶液环境（较高渗透压）中用纤维素酶和果胶酶混合液处理用网筛过滤原生质体到离心管内，离心后收集沉淀物，用等渗溶液洗涤；检验原生质体是否符合要求：依据渗透作用原理，采用低渗胀破法（见比较表格）4.植物细胞工程：培养植物细胞（包括原生质体），借用基因工程技术将外源DNA导入受体细胞或通过细胞融合将不同源的遗传物质重新组合，再通过细胞培养，获得具有特定性状的植株C细胞工程：细胞培养和细胞融合（若基因型不同为细胞杂交）——基因定位：利用细胞杂交中染色体丢失与特定基因产物的对应关系（三）动物细胞工程1. 动物细胞培养指明“动物”细胞培养（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。
高中生物单克隆抗体制备(共38张PPT)
1.1动物细胞融合的概念
鼠B淋巴细胞 鼠骨髓瘤细胞
人工诱导
动物细胞融合（细胞杂交）
是指（在一定的条件下）两
个或多个细胞结合形成一个
细胞（该单核细胞称为杂交
细胞）的过程。
杂交瘤细胞
问题：1、它相当于植物体细胞杂交过 程的哪一步？ 2、它们的过程、基本原理、诱 导融合方法和意义是否相同？
单克隆 抗体
注射抗原
效应B细胞
骨髓瘤细胞
融合
3.若细胞两两融合后， 有几种融合情况？
选择性培养基 筛选1 克隆化
多种杂 交细胞
抗原-抗体 杂交法
筛选2（有限稀释）
单克隆 抗体
注射抗原
效应B细胞
骨髓瘤细胞
融合
4.第一次筛选出的杂交瘤
细胞为何需进行克隆化培
选择性培养基 筛选1
养和专一抗体检测？
多种杂
（ 特异性强、灵敏度高，可大量制备）
（4）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的 迅速（ 大量增殖 ）特点，又具备淋巴细胞 的（ 分泌专一抗体）特点，经过选择性培养 的杂交瘤细胞，还需进行（ 克隆化培养 ） 和（ 抗体检测 ），经多次筛选，就可获得足
够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后将杂 交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或小 鼠腹腔内增殖，从（ 细胞培养液 ）或 （ 小鼠的腹水 ）中，就可以提取出大量 的单克隆抗体了。
一个效应bb细胞只分泌一种特异性抗体杂交瘤细胞动物细胞培养技术44单克隆抗体的制备方案动物细胞融合技术单克隆抗体既能产生特异性抗体又能大量繁殖的细胞一个骨髓瘤细胞能无限增殖制备单克隆抗体1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验5单克隆抗体制备过程步骤注射抗原效应bb细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞选择性培养基筛选11抗原抗体杂交法克隆化单克隆抗体筛选22有限稀释1
新教材高中生物第2章细胞工程 动物细胞融合技术与干细胞技术教师用书苏教版选择性必修3
第2课时动物细胞融合技术与干细胞技术课标内容要求核心素养对接1.阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物方法,使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
2．概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。
3．简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。
生命观念：以细胞结构与功能为基础,理解动物细胞融合的过程及原理。
科学思维：结合具体实例,以流程图的形式表示单克隆抗体的制备过程。
社会责任：说明干细胞在疾病治疗、新药的研制和开发等领域的应用及发展潜力。
一、动物细胞融合技术及其应用1．动物细胞融合技术(1)概念：在一定条件下将两个或多个动物细胞,通过物理、化学或生物方法,结合形成一个细胞的技术。
(2)诱导方法①生物方法：仙台病毒、疱疹病毒、腮腺炎病毒。
利用仙台病毒诱导动物细胞融合的过程示意图如下：②化学方法：聚乙二醇诱导融合法成功率高,但有一定毒性。
③物理方法：采用电场诱导融合法。
对细胞伤害小,易操作、控制和观察。
成为细胞融合的重要技术手段。
(3)融合过程细胞质膜出现粘连、破裂和融合→进而细胞质和细胞核的融合→形成杂种细胞→挑选所需要细胞(4)诱导对象：同物种细胞和不同物种的细胞。
2．单克隆抗体(1)概念：单个细胞进行无性繁殖形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的抗体。
(2)传统抗体的不足含有多种抗体的混合抗体,不能专一性地对付某一类病原体,治疗效果不佳。
(3)单克隆抗体的制备流程(4)应用①制备单克隆抗体靶向制剂：化疗药物与单克隆抗体结合,对肿瘤细胞有较好的选择性杀伤作用。
②疾病诊断：单克隆抗体检测相关抗原是否表达及其表达水平,作为肿瘤诊断的辅助方法；用同位素标记某种单克隆抗体,诊断结肠癌肿瘤病灶是否已经转移。
③导向手术：利用同位素标记的单克隆抗体在体内显示肿瘤位置,用以指导手术范围。
二、干细胞技术及其应用1．干细胞的概念：动物(包括人)胚胎及某些器官中同时具有自我更新和分化能力的细胞。
2．干细胞的形态特点：通常呈圆球形或椭圆球形,细胞体积小,核相对较大。
单克隆抗体制备流程
单克隆抗体制备流程首先，在单克隆抗体制备之前，需要选择一个适当的抗原。
抗原可以是蛋白质、多肽、糖类或其他小分子。
选取抗原时，需要考虑抗原的表达水平、抗原的免疫原性以及抗原的稳定性等因素。
接下来，选择一个合适的实验动物进行免疫。
常用的实验动物有兔子和小鼠。
在免疫之前，需要先给实验动物注射适量的佐剂，以增强免疫效果。
通常，实验动物会被多次免疫，每次免疫之间有一段时间的间隔。
在实验动物免疫一段时间后，可以进行细胞融合以产生混杂瘤细胞。
混杂瘤细胞通常是由B细胞和骨髓瘤细胞融合而成，对于小鼠骨髓瘤细胞，常用的有SP2/0和NS0细胞系。
融合的方法主要有两种：一种是将免疫细胞和骨髓瘤细胞混合，然后使用聚乙二醇（PEG）进行融合；另一种是使用电击脉冲进行细胞融合。
融合细胞会经过适当的培养条件进行筛选和扩增。
在融合细胞扩增过程中，会进行筛选以保证融合细胞是产生单克隆抗体的。
最常用的筛选方法是酶联免疫吸附测定（ELISA）。
抗原会被固定在微孔板上，然后将培养液中的细胞涂覆在孔中。
如果其中一孔中有抗体分泌，则抗原会被结合，并且可以通过添加辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗和基质来检测抗体的存在。
经过筛选和鉴定后，选择一个或多个产生单克隆抗体的细胞进行单克隆扩增。
单克隆扩增时，可以通过细胞有限稀释法以及酵母酶聚合酶链式反应（YAC-PCR）等方法进行。
最后，可以通过收集上述单克隆细胞的上清液或细胞提取物来得到单克隆抗体。
上清液或细胞提取物中的抗体可以通过纯化方法，如蛋白A/G 亲和层析或蛋白L亲和层析等，得到纯化的单克隆抗体。
综上所述，单克隆抗体的制备流程包括抗原选择、免疫动物、细胞融合、筛选和克隆等步骤。
通过这些步骤，可以获得单克隆抗体用于科学研究和临床应用。
人教版高中生物选修三《单克隆抗体的制备及应用》教学课件
阳性细胞
二、单克隆抗体的应用
（1）作为诊断试剂——最广泛应用
准确、高效、简易、快速
（如利用同位素标记的 单克隆抗体，可定位诊 断肿瘤、心血管畸形等）
二、单克隆抗体的应用
（2）运载药物
ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成。
ADC的抗体和药物各具有什么作用？ 抗体主要发挥靶向运输作用；药物发挥治疗效应，如杀伤靶细胞。
一个极富创造力的方案： B淋巴细胞 骨髓瘤细胞
（能产生抗体）（能大量增殖）
融合细胞
（既能产生抗体，又能大量增殖）
米尔斯坦
科勒
一、单克隆抗体的制备
探究一
小组合作利用太空泥模拟细胞融合的过程（只考虑两个细胞融合）
随机融合后培养基中细胞的类 型有哪些？
一、单克隆抗体的制备
探究二
已知细胞分裂过程中，合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋 呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖，其本 身也不能在体外长期存活。 鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但 可以在体外无限增殖，如果它的D途径被阻断的话，它会因为不能合成 DNA而死亡。
二、单克隆抗体的应用
（3）直接用于治疗疾病
实例：利妥昔单抗(美罗华)是一种针对 CD20抗原的人鼠嵌合型单克隆抗体，是第 一个被FDA批准用于临床治疗的单抗。进 入人体后能通过介导抗体依赖的细胞毒性 作用、补体依赖的细胞毒性作用和抗体与 CD20分子结合引起的直接效应，抑制细胞 生长，改变细胞周期以及凋亡等方式杀死 淋巴瘤细胞。
一、单克隆抗体的制备
1.传统抗体制备方法及缺陷 （1）方法： 向动物体内反复注射某种抗原
从动物血清中分离所需抗体 （2）缺点： 产量低、纯度低、特异性差
高中生物高考考点84 动物细胞融合与单克隆抗体-备战2022年高考生物考点一遍过
1．动物细胞融合（1）原理：细胞膜的流动性。
（2）融合方法：聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。
（3）意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，也为制造单克隆抗体开辟了新途径。
2．单克隆抗体（1）制备过程（2）优点：特异性强、灵敏度高，可大量制备。
（3）用途：作为诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物。
学科&网考向单克隆抗体的制备过程分析1．如图是单克隆抗体制备过程示意图，相关叙述错误的是A．过程①注射一种灭活病毒可使小鼠体内产生浆细胞B．过程②形成的两两融合细胞只有图中的3种类型C．过程③采用抗原—抗体反应进行特定杂交瘤细胞的筛选D．过程④获得的全部杂交瘤细胞都只能产生同一种抗体【参考答案】B【时候解析】A、灭活病毒可作为抗原刺激小鼠产生浆细胞，A正确；B、过程②形成的融合细胞包括同种细胞融合和异种细胞融合，即过程②还可以形成浆细胞与浆细胞、瘤细胞与瘤细胞间的融合细胞，B 错误；C、可借助抗原-抗体间特异性结合反应进行特定杂交瘤细胞的筛选，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，C正确；D、通过抗原-抗体反应筛选出的杂交瘤细胞只能产生同一种抗体，D正确。
解题技巧制备单克隆抗体过程中两次筛选的方法及目的项目第一次筛选第二次筛选筛选原因诱导融合后得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞筛选方法用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)能生长用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群筛选目的得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞2．单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。
用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示：（1）过程③常用的方法是_________________________。
2023年教师资格之中学生物学科知识与教学能力押题练习试题A卷含答案
2023年教师资格之中学生物学科知识与教学能力押题练习试题A卷含答案单选题（共30题）1、下列关于单克隆抗体的制备过程及原理的叙述，正确的是（）A.获取某种B淋巴细胞之前，无需给实验动物注射相应的抗原B.只要将动物的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在同一培养基中培养，就能得到杂交瘤细胞C.只要将杂交瘤细胞放在适宜的培养基中培养，就能够得到产生单一抗体的细胞群D.与常规的抗体相比，单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点【答案】 D2、用生长素除去水稻田中的杂草，其原理与下列实验相似的一项是（）。
A.用一定浓度的生长素培育无子番茄B.用一定浓度的生长素促进扦插枝条生根C.除去发育着的种子.子房发育停止D.植物的顶端优势现象【答案】 D3、光合作用可分为光反应和暗反应两个步骤，光反应为暗反应提供的物质是（）。
A.C3和NADP+B.ATP和O2C.ADP和H20D.[H]和ATP【答案】 D4、人教版高中生物教材中，选取了较多的现代生物技术，以及最新的生物科学研究成果，这符合教材内容选择要（）的思想。
A.以学生的发展作为选取内容的出发点B.应当符合学生的知识基础、心理特点和认识规律C.要反映社会、经济和科技发展的需要，体现“科学、技术、社会”的思想D.应将探究活动作为教科书内容的重要组成部分【答案】 C5、下列关于中学“腐乳的制作”实验的叙述，正确的是（）。
A.加盐主要是为了调节水分，利于毛霉生长B.加料酒主要是为了灭菌，避免腐乳变质C.发酵过程中起主要作用的是乳酸杆菌D.实验室制作的腐乳不宜直接食用【答案】 D6、酶在社会生产、生活中的应用越来越广泛。
下列说法错误的是（）。
A.利用酶生产某些化工产品，能显著降低能耗、减少污染、节约成本B.“加酶洗衣粉”的洗涤效果与水温、酸碱度有关，与污物或衣物的性质无关C.用于治疗消化不良症的肠溶多酶片含有多种消化酶，但嚼服后会失去疗效D.要较长时间保持酶活性，各种酶制剂都应保存在低温的条件下【答案】 B7、糖尿病人血液中的含糖指数远高于常人。
制备单克隆抗体的原理
制备单克隆抗体的原理
单克隆抗体是一种高度特异性的抗体，可以识别并结合到特定的抗原上。
制备
单克隆抗体的原理主要包括抗原免疫、细胞融合、筛选和鉴定等步骤。
首先，制备单克隆抗体的第一步是抗原免疫。
通常选择小鼠或兔子等动物作为
免疫动物，将目标抗原注射到动物体内，激发动物产生特异性抗体。
在免疫过程中，抗原会激发动物体内的B细胞产生抗体，其中包括对抗原特异性的B细胞。
接下来是细胞融合。
将免疫动物体内的B细胞与骨髓瘤细胞进行融合，形成杂交瘤细胞。
这些杂交瘤细胞具有B细胞产生抗体的能力，同时又具有骨髓瘤细胞
的无限增殖能力，从而可以长期稳定地产生单克隆抗体。
随后是筛选和鉴定。
通过细胞培养和克隆技术，筛选出产生特定单克隆抗体的
杂交瘤细胞，并将其进行扩增。
接着，利用ELISA、Western blot等方法对单克隆
抗体进行鉴定，确定其对目标抗原的特异性和亲和力。
最后是大规模生产。
经过筛选和鉴定的单克隆抗体细胞株可以进行大规模的培
养和生产，以满足科研和临床的需求。
总的来说，制备单克隆抗体的原理是通过抗原免疫、细胞融合、筛选和鉴定等
步骤，最终获得特异性的单克隆抗体。
这种单克隆抗体在生物医学领域具有广泛的应用前景，可以用于疾病诊断、药物研发、免疫治疗等方面，对于促进医学科研和临床应用具有重要意义。
高中生物第一单元第二章第三节细胞融合技
第三节细胞融合技术1．举例说出细胞融合技术。
2．简述单克隆抗体的制备过程。
一、细胞融合技术1．杂交细胞当两个细胞紧密接触时，在适当条件下，其细胞膜可能融合在一起，产生具有原来两个细胞遗传信息的细胞，称为杂交细胞。
2．细胞融合两个或两个以上的同种或异种细胞融合成一个细胞的过程，叫做细胞融合。
（1）原理：膜的流动性。
（2）过程：不同动物的两个体细胞杂交细胞。
（3）诱导细胞融合的方法：聚乙二醇诱导、灭活的病毒诱导、电融合法等。
二、细胞融合与单克隆抗体1．单克隆抗体源自一个B淋巴细胞的克隆所产生的抗体只会特异性地作用于一种抗原决定簇，我们将这种抗体称为单克隆抗体。
2．单克隆抗体的制备过程（2）杂交瘤细胞的特点：既能在体外培养条件下快速生长和无限增殖，又能产生和分泌特异性抗体。
（3）单克隆抗体的特点：理化性质单一、与抗原结合的特异性强。
思考治疗癌症时，能否让治疗癌症的药物只杀死癌细胞，而不损伤正常细胞？提示：把抗癌细胞的单克隆抗体与药物相结合，制成“生物导弹”，注入体内，借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。
三、细胞融合与作物育种1．植物体细胞杂交植物体细胞杂交是指将两个来自不同种植物的体细胞在一定条件下融合成一个杂交细胞，并且把杂交细胞培养成新的植物体的方法。
2．获得原生质体的常用方法——酶解法在温和的条件下用纤维素酶、果胶酶等分解植物细胞的细胞壁。
3．诱导原生质体融合原生质体融合包括细胞膜融合→细胞质融合→细胞核融合。
4．细胞融合技术的意义细胞融合技术可以避免受精过程，在亲缘关系较远的物种间实现基因转移，创造出自然界没有的新物种。
1．植物体细胞杂交技术的原理、过程及应用（1）原理：依据细胞融合的生物学原理，即细胞膜的流动性。
（2）过程及分析。
①原生质体在融合过程中可能出现多种融合方式，进而形成不同的杂交细胞，因此应进行筛选。
②杂交细胞形成的标志是细胞壁的再生，此过程与高尔基体等细胞器有关。
高中生物选择性必修三 2 2 2 动物细胞融合技术与单克隆抗体(导学案)
第二节动物细胞工程----- 动物细胞融合技术与单克隆抗体【学习目标】1.举例说出动物细胞融合的概念、原理及应用（生命观念、社会责任）2.举例说出单克隆抗体的原理及应用(生命观念、社会责任）3.单克隆抗体的制备过程（生命观念）课前自主探究一、动物细胞融合技术1．概念：使细胞结合形成一个细胞的技术。
2．诱导原理和结果(1)诱导原理：。
(2)诱导结果：形成细胞。
3．诱导方法：法、电融合法和法等。
4．意义：突破了的局限，使成为可能。
5．动物细胞融合技术的应用(1)成为研究、、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
(2)用于制备。
教材中的隐性知识源于选择性必修3 P48“相关信息”：(1)灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去，但并不破坏病原体的。
(2)灭活病毒诱导细胞融合与病毒和细胞所含的糖蛋白有关。
二、单克隆抗体1．制备原理(1)B淋巴细胞特点：一种B淋巴细胞分泌一种抗体。
(2)骨髓瘤细胞特点：能在体外大量。
(3)杂交瘤细胞特点：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞，既能又能产生大量。
2．制备过程（如图）3．单克隆抗体的优点能准确地识别，与特定抗原发生特异性结合，并且可以。
4．单克隆抗体的应用(1)作为，具有准确、高效、简易、快速的优点。
(2)用于和。
易错易混辨析：(1)植物原生质体融合与动物细胞融合的原理是相同的( )(2)杂交瘤细胞进行体内培养，更容易控制培养条件( )(3)制备单克隆抗体时，要选用已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞( )(4)灭活的病毒能促进动物细胞融合，但不能促进植物细胞融合( )(5)相比植物体细胞杂交，动物细胞融合特有的诱导方式是用灭活的病毒处理( )(6)杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎( )(7)杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专一抗体( )课堂合作探究探究一、动物细胞融合【情境探究】如图为两种生物细胞融合的过程示意图，请思考回答：(1)动物细胞融合的结构基础是什么？(2)融合处理后的细胞是否可以直接用于培养？为什么？(3)比较动物细胞融合与植物体细胞杂交所用的促融方法的异同。
高中生物《单克隆抗体的制备》
高中生物《单克隆抗体的制备》单克隆抗体是一种专一性极强的抗体，是由一种单一的淋巴细胞或细胞群体产生的，仅能特异性的识别和结合一种抗原。
在医学、生物科学、免疫学等领域中得到了广泛的应用。
本文将介绍单克隆抗体的制备方法。
单克隆抗体制备方法：一、免疫原制备制备单克隆抗体的关键是选取质量优良的免疫原，一般来说，免疫原应是纯化、特异性强和含有多个抗原表位的物质。
二、小鼠免疫将经充分清洗的免疫原，加入无菌纯水中混合悬浮后，与适量的氢氧化铝混合，制成疫苗。
将经过筛选的小鼠作为进行免疫的实验动物，并用疫苗进行免疫，使小鼠产生多克隆抗体。
免疫期一般在5-8周之间，不宜过短或过长，以免影响产生的抗体的质量。
三、脾细胞制备在小鼠免疫期结束后，将小鼠的脾脏取出，用PBS缓冲液冲洗，得到脾细胞。
脾细胞是制备单克隆抗体时的重要材料，需要在取出脾脏后尽快处理，以保证细胞数量和活性的充足。
四、瘤细胞融合将脾细胞与瘤细胞进行混合，经过某些药物的刺激，使两种细胞融合成杂交瘤细胞。
杂交瘤细胞的特点是生长速度快，细胞寿命长，抗体分泌能力强，是单克隆抗体的制备过程中不可或缺的一环。
五、分选单克隆细胞将杂交瘤细胞进行分离和筛选，筛选出能够产生特异性单克隆抗体的细胞。
六、培养细胞产生抗体将分选出来的单克隆细胞培养在含有特定物质的培养基中，经过数次分离和筛选，获取产生大量单克隆抗体的细胞系。
七、提取单克隆抗体将细胞培养物通过旋转离心等方法，将单克隆抗体从培养液中提取出来，并进行进一步的纯化和检测。
对提取出来的单克隆抗体进行检测，包括其特异性、纯度、抗原特异性等指标的检测，确保单克隆抗体的质量。
总结：单克隆抗体制备的流程繁琐，但制备出的单克隆抗体优异的特异性和高度的纯度，尤其在生物医学和免疫学领域中得到广泛的应用。
生物-动物细胞融合技术与单克隆抗体
动物细胞融合技术与单克隆抗体[高中生物] 1.阐明动物细胞融合技术的概念，举例说出诱导动物细胞融合的方法。
2.概述单克隆抗体的制备过程。
一、动物细胞融合技术1．概念：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
2．原理：细胞膜的流动性。
3．诱导融合的方法Error!4．意义：细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。
5．应用(1)成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
(2)用于制造单克隆抗体。
判断正误(1)与植物原生质体融合相比，动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒( ) (2)灭活的含义是用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构( ) (3)二倍体动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞( )答案 (1)× (2)√ (3)×探讨点 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较1．19世纪30年代，科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中，观察到多核细胞。
如何解释这一现象？提示 病人体内的病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。
2．比较动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术(1)动物细胞融合和植物体细胞杂交技术的原理分别是什么？提示 动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
(2)两者在方法上有什么异同？提示 都可用聚乙二醇(PEG)融合法和电融合法诱导融合；但动物细胞还可用灭活病毒诱导法诱导细胞融合。
(3)两者在最终结果上有什么不同？提示 动物细胞融合最终得到的是杂交细胞，而植物体细胞杂交技术最终得到的是杂种植株。
核心归纳 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性步骤酶解法去掉细胞壁后，诱导原生质体融合，形成杂种细胞，再经植物组织培养形成杂种植株分散成单个细胞后诱导细胞融合，形成杂交细胞方法聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca 2＋—高pH 融合法、电融合法、离心法PEG 融合法、电融合法、灭活病毒诱导法结果形成杂种植株形成杂交细胞，以生产细胞产品意义打破生殖隔离，实现远缘杂交育种突破有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能1．下列关于动物细胞融合的说法，不正确的是( )A ．常用于诱导动物细胞融合的方法有PEG 融合法、灭活病毒诱导法、电融合法、紫外线照射等B ．动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的细胞称为杂交细胞C ．动物细胞融合就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程D ．细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能答案 A解析 常用于诱导动物细胞融合的方法有PEG 融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等，紫外线照射不是诱导动物细胞融合的方法，A 错误。
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高中生物单克隆抗体的制备过程
高中生物课本中描述单克隆抗体的制备过程是怎么样的？下面是店铺为大家整理的高中生物单克隆抗体的相关知识点，希望对大家有所帮助!
高中生物：杂交瘤技术制备单克隆抗体的具体过程
1、免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B 淋巴细胞的过程。
一般选用6-8周龄雌性Balb/c小鼠，按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。
抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B淋巴细胞。
2、细胞融合采用眼球摘除放血法处死小鼠，无菌操作取出脾脏，在平皿内挤压研磨，制备脾细胞悬液。
将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合，并加入促融合剂聚乙二醇。
在聚乙二醇作用下，各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞。
3、选择性培养选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞，一般采用HAT选择性培养基。
在HAT培养基中，未融合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶，不能利用补救途径合成DNA 而死亡。
未融合的淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶，但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。
只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶，并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性，因此能在HAT培养基中存活和增殖。
4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化。
通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。
采用灵敏、快速、特异的免疫学方法，筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞，并进行克隆扩增。
经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后，及时进行冻存。
5、单克隆抗体的大量制备单克隆抗体的大量制备重要采用动物
体内诱生法和体外培养法。
(1)体内诱生法取Balb/c小鼠，首先腹腔注射0.5ml液体石腊或降植烷进行预处理。
1-2周后，腹腔内接种杂交瘤细胞。
杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖，并产生和分泌单克隆抗体。
约1-2周，可见小鼠腹部膨大。
用注射器抽取腹水，即可获得大量单克隆抗体。
(2)体外培养法将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。
在培养过程中，杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体，收集培养上清液，离心去除细胞及其碎片，即可获得所需要的单克隆抗体。
但这种方法产生的抗体量有限。
近年来，各种新型培养技术和装置不断出现，大大提高了抗体的生产量。
高中生物：杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要步骤
(1)抗原制备;
(2)免疫动物;
(3)免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备;
(4)细胞融合;
(5)杂交瘤细胞的选择培养;
(6)杂交瘤细胞的筛选;
(7)杂交瘤细胞的克隆化;
(8)单克隆抗体的检定;
(9)分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立;
(10)单克隆抗体的大量制备。
高中生物：区别单克隆抗体和多克隆抗体
多克隆抗体：抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，这就是免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。
当病原体入侵人体，能够刺激机体免疫系统产生大量的多种抗体，那么这一堆抗体就是多克隆的。
单克隆抗体(MAb)：是针专一的抗原决定簇产生的抗体，单克隆技术又名杂交瘤技术，起源于1975年，由G.KÖhler和Milstein创立。
主要原理是利用产生抗体的B细胞与肿瘤细胞杂交融合成杂交瘤
细胞，生产抗体。
此类抗体是专一的，或者说是同一种蛋白质，因此是单克隆的。