脂肪干细胞运用
脂肪干细胞运用
ADSCs的分离与纯化关于ADSCs的获取方法很多，但不管哪种方法所得到的并非单一的脂肪干细胞，是一组具有干细胞特性的细胞群。
目前应用最广泛的分离方法是酶胶原消化法。
首先将无菌条件下切取的脂肪组织块剪成细小的颗粒，PBS液冲洗干净后，用0．1％的胶原酶在37℃下振荡消化4O～90 min，再用含10％胎牛血清的等体积DMEM培养基终止。
1 200 r／min离心5～10 min，弃上清液及悬浮的脂肪组织，重悬细胞后经过细胞筛过滤，所得细胞按2—4×105／cm 接种于50ml培养瓶内。
37℃条件5％的CO 饱和湿度培养箱内培养，2 d后首次换液，以后3d换液一次，至细胞达70％～8O％融合时用0．25％胰酶消化，并传代。
经过提取获得的以脂肪干细胞为主的细胞群接种后数小时即开始贴壁生长，24h内完成贴壁。
细胞的形状与成纤维细胞相似，体积较小，核浆比较大，随后细胞体积渐增大，克隆形成。
经传代后，细胞的形态及排列才趋于一致。
由于目前尚未发现脂肪干细胞表面存在特异性的分子标记物，因此无法利用分子表型来分离纯化。
然而可通过纯化脂肪组织块来间接达到纯化脂肪干细胞的目的。
流式细胞仪检测显示：传至第3代时，可达95％以上的细胞纯度。
ADSCs的生物学特性1.ADSCs的鉴定在ADSCs鉴定上，现阶段尚无特异性鉴定方法。
用免疫荧光法和流式细胞术检测结果均显示ADSCs表达特异性分子CD44，OCT一4，E—eadherin，流式细胞术检测细胞周期显示绝大多数细胞是处于静止期的干细胞，传代后生长迅速，随机挑选来源标本，对细胞进行染色体核型分析显示ADSCs具有遗传稳定性。
ADSCs分泌多种生长因子在生理功能方面，脂肪干细胞能分泌相当数量的细胞因子，包括肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、胎盘生长因子(PGF)、转化生长因子一B(TGF—B)、成纤维细胞生长因子(FGF一2)等，低表达的因子有Ang一2 C。
脂肪干细胞的提取及鉴定
一、脂肪干细胞（ASCs）的提取及鉴定1、实验技术及原理：运用细胞培养技术、流式细胞术（体外扩增后A C Ss的表型会发生改变，主要体现在细胞表面蛋白和细胞因子表达的变化），差异离心术（可将基质血管细胞沉淀与悬浮的成熟脂肪细胞分离，沉淀中除AS Cs，还包括血细胞、成纤维细胞和内皮细胞，基质血管细胞沉淀可以接种到孰料培养瓶中，基质细胞可贴壁，造血和其他杂质细胞不贴壁，在随后的传代过程中被出去，最终得到的ASCs可再很长时间内保持摸分化状态）。
取C57BL／6 WT小鼠2只，常规麻醉消毒，取腹股沟脂肪组织剪碎至糊状，PBS液冲洗去麻药及血液，0.075%II型胶原酶消化（37℃，30分钟）以去除外基质，生理盐水终止胶原酶的消化，离心（1200g,10分钟），去上清液及未消化的脂肪，10%FBS的DM EM重悬细胞沉淀，0.16mol/L氯化氨溶解剩余红细胞，离心洗涤，过200目铜网，得到单个核细胞。
镜下计数，按10⒋个细胞/ml种植在培养瓶中，37℃5%CO2孵箱培养，24小时后第一次换液，以后3天换液一次，80%融合后0.25% Trypsi n,0.02%EDTA消化传代。
细胞镜下作形态学观察及取第三代细胞用流式细胞仪作细胞周期及细胞免疫表型（C D29/CD44）的鉴定。
2、实验用品：2.1 材料：C57BL／6 WT小鼠2.2 试剂：PBS液，0.075%II型胶原酶消化，10%FBS，低糖DMEM2.3 仪器设备：超净工作台、恒温培养箱、普通显微镜、倒置显微镜、离心机、离心管、解剖剪、眼科剪、镊子（尖头、平头和有沟镊）、小烧杯，200目铜网过滤器，低糖DMEM、血球计数板、橡皮瓶塞、酒精灯、换药碗3、细胞培养的方法与步骤：3.1无菌操作的要领和要求。
脂肪干细胞在再生医学中的研究进展及应用前景
ｉＰＳ细胞，而且所转变的ｉＰＳ细胞安全性更高，将来有望利用 脂肪干细胞培育人体所需的各种器官。斯坦福大学研究人 员发现，脂肪干细胞内两种转录因子的表达水平高于皮肤成 纤维细胞，这表明，在初始状态下，脂肪干细胞较皮肤成纤维 细胞更容易被诱导；研究人员在脂肪干细胞和皮肤成纤维细 胞中分别加入能够编码４种转录因子的基因后，约有
１
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３０００
ｃａｓｅｓ．Ｐｌａｓｔ
Ｒｅｃｏｎｓｔｒ
Ｓｕｒｇ。１９８３，７２（５）：５９１—５９７ ａ１．Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ
ｉｎ
ＭｃＩｎｔｏｓｈ Ｋ，Ｚｖｏｎｉｃ
１９９９，２２１（１）：６３—７１ Ｚｕｋ ＰＡ，Ｚｈｕ Ｍ，Ａｓｈｉ Ｊａｎ
ｓｏｕｒｃｅ
Ｐ，ｅｔ
ａｌ，Ｈｕｍａｎ
ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ
ｉｓ
ａ
ｏｆ ｍｕｈｉｐｏｔｅｎｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ Ｃｅｌｌ．２００２，１３（１２）：
４２７９—４２９５
Ｇｒｏｎｔｈｏｓ Ｓ，Ｆｒａｎｋｌｉｎ ＤＭ，Ｌｅｄｄｙ ＨＡ，ｅｔ ａ１．Ｓｕｒｆａｃｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ
疗效果。结果显示，虽然大鼠心脏在组织结构及功能分析上 未见明显改变，但免疫组化结果显示被移入心脏的脂肪干细 胞表达肌球蛋白重链、肌钙蛋白一１及转录因子Ｎｋｘ２．５，即表
基金项目：国家９７３计划资助项目（２００５ＣＢ５２２６０３）；国家自然科学 基金资助项目（３０６７２１７６，３０７３００９０，３０８００４４２） 通讯作者：付小兵（ｆｕｘｉａｏｂｉｎｇ＠ｒｉｐ．ｓｉｎａ，ｃｏｒｎ）
脂肪干细胞实验报告
一、实验背景随着生物科技的发展，干细胞研究已成为医学领域的前沿课题。
脂肪干细胞（Adipose-derived Stem Cells，ASCs）作为一种易于获取、增殖能力强、多能性的干细胞，在组织工程、再生医学等领域具有广阔的应用前景。
本研究旨在探讨脂肪干细胞的分离、培养、鉴定及其在组织工程中的应用。
二、实验目的1. 探讨脂肪干细胞的分离、培养及鉴定方法。
2. 研究脂肪干细胞在组织工程中的应用。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：脂肪组织、DMEM/F12培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、二甲基亚砜（DMSO）、青霉素、链霉素、抗生素、鼠抗人CD105抗体、鼠抗人CD34抗体、鼠抗人CD29抗体、鼠抗人CD44抗体、鼠抗人CD45抗体等。
2. 实验仪器：超净工作台、倒置显微镜、细胞培养箱、离心机、酶标仪、流式细胞仪等。
四、实验方法1. 脂肪干细胞的分离与培养（1）将脂肪组织剪成1mm×1mm×1mm的小块，用DMEM/F12培养基清洗3次，去除多余脂肪。
（2）加入0.25%胰蛋白酶消化脂肪组织，37℃水浴消化30分钟，1000r/min离心5分钟，弃上清。
（3）加入DMEM/F12培养基重悬细胞，吹打均匀，接种于培养瓶中，置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。
2. 脂肪干细胞的鉴定（1）采用免疫荧光染色法检测脂肪干细胞表面标志物CD105、CD34、CD29、CD44、CD45的表达。
（2）采用流式细胞术检测脂肪干细胞表面标志物CD105、CD34、CD29、CD44、CD45的表达。
3. 脂肪干细胞在组织工程中的应用（1）将脂肪干细胞接种于生物降解支架材料上，构建组织工程化脂肪组织。
（2）将组织工程化脂肪组织植入小鼠皮下，观察其成活情况。
五、实验结果1. 脂肪干细胞的分离与培养成功分离出脂肪干细胞，细胞呈梭形，生长旺盛。
2. 脂肪干细胞的鉴定免疫荧光染色和流式细胞术结果显示，脂肪干细胞表达CD105、CD34、CD29、CD44，不表达CD45。
脂肪源性干细胞在整形美容外科临床应用进展
脂肪源性干细胞在整形美容外科的临床应用进展【关键词】脂肪源性干细胞; 整形美容外科;临床应用【中图分类号】r622.1【文献标识码】b【文章编号】1008-6455（2011）08-0081-02自体脂肪作为一种软组织填充材料，在整形外科的应用已有100多年的历史。
自从1889年vande meulen 报道了首例游离脂肪移植的临床应用后，人们发现脂肪移植有很多的并发症，如液化、坏死、吸收，其吸收率从5%～100%相差甚远。
其主要原因是由于血供不足，导致移植后的脂肪缺氧，出现坏死硬结［1-2］。
鉴于此，自体游离脂肪移植的临床应用曾一度发展很缓慢。
2001年zuk［3］等首次从脂肪组织中分离获得一群具有多向分化潜能的细胞——脂肪源性干细胞（adipose-derived stem cells,ascs）。
这种类型的细胞能自我更新、不断增殖，而且经定向诱导可分化形成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、骨骼肌细胞、血管内皮细胞、心肌细胞及神经细胞等多种类型的细胞，为脂肪细胞的应用提供了新的思路［4］。
因此ascs已在基础医学、临床医学等各个领域成为研究的热点。
笔者仅就脂肪源性干细胞在整形美容外科的临床应用进行综述。
1 脂肪源性干细胞的概述脂肪源性干细胞是一个新生的概念，它与大家熟知的骨髓间充质干细胞形态相似，具有同样强大的体外增殖能力和多向分化潜能。
2001年zook等［3］首次从抽脂术中获得的脂肪组织悬液中分离获得了此种细胞。
由于脂肪组织在体内储量丰富，脂肪抽吸技术又是安全和可接受的措施，且创伤小，又没有伦理学争议等优点，来自脂肪抽吸的ascs，是临床应用中安全的自体脂肪来源。
自此许多国家的学者开始致力于ascs的研究，并取得了重大进展。
各研究团体不同时期有许多不同的命名，如脂肪来源基质细胞（adipose-derived stromal cells,adscs）,脂肪间充质干细胞（adipose mesenchymal stem cells,admscs）,脂肪祖细胞（adipose progenitor cells）,脂肪前体细胞（adipose precursorcells,apcs）,脂肪基质细胞（adipose stromal/stem cells,ascs），脂肪来源干细胞（adipose-derived stem cell,ascs）等等。
使用脂肪干细胞的再生医疗指南
●由自体细胞制造的iPS细胞的研究也在不断推进。
（１）所谓再生医疗 1/2
“再生医疗”这个词语虽是这几年才被使 用，不过，人遭受骨折和损伤，过一段时间就 可以自己修复。这种能力是人类原本具有的最 大的再生能力。但因严重的事故和疾病导致各 种各样的器官和组织缺损或功能障碍等，从而 使机体陷入功能缺失时，人类并不具备恢复其 失去的功能的能力。在这样的情况下，就有必 要移植细胞或组织。
9 NCT01211028 Adistem Ltd
香港
自体 2型糖尿病
Phase Ⅰ・Ⅱ 实施中 2008/6/19 2008/6/28
10 NCT00703612 University Hospital, Toulouse
法国
自体 外周血管疾病•循环系统疾病
Phase Ⅰ・Ⅱ 募集中 2010/3/31 2010/9/28
2)人类胚胎干（ES）细胞（199源自年由威斯康星州大学Thomson建立）
•从生殖医疗等产生的余剩的胚（胚泡） 中，取出“内细胞团”培养出的干细 胞。因为形成畸胎瘤，一般认为其可 以分化为三胚层的任何一方（=具有分 化万能性的证据）。 •有报告称其可分化形成心肌、神经、 网膜。 •如果给予适当的培养条件，可无限地 持续增殖（=“细胞株”） •对于该细胞株的建立，依据文部科学 省的指南严格审查，迄今为止在日本 已建立了3株。 •尚未应用于临床。
前言 2/2
另外，关于最终的知情同意书说明和同意， 将在日本的实施再生治疗的医疗机构，由日本的 责任医师就该治疗予以事前说明，由患者签署同 意书。
敬请阅读此文本，充分了解说明内容，并在 正确理解的基础上予以判断。
脂肪干细胞的临床应用
09级生科一班 青美芳 孙倩
脂肪干细胞定向分化及临床应用
• 概述 • 脂肪干细胞的定义
• 脂肪干细胞的分离、培养与鉴定
• 脂肪干细胞成脂及成骨分化的影响因素 • 同时影响成脂和成骨分化的因素 • 脂肪干细胞的临床应用
概述
随着城市化进程加速，肥胖在我国尤其是大城市
发病率增长迅速。肥胖是由于长期的能量摄入超 过能量消耗引起的脂肪组织过剩的疾病。在成人 阶段脂肪细胞数量保持恒定是一种细胞死亡与补 充更新的动态平衡过程。然而相关研究提示，成
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2.分化诱导因子
• • 表皮生长因子 成纤维因子
•
3.其他（拉伸应变 、 透明质酸 、
氧浓度、钙离子）
同时影响成脂和成骨分化的因素
干细胞巢（ stem cell niche）
干细胞巢即干细胞周围的微环境构成，一般包括干细胞的 相邻细胞、粘附分子及基质等。干细巢为干细胞提供了一 个隐蔽的场所，直到有分化号的刺激它才脱离静止的状态。 因此干细胞巢在维持干细胞的静止和抑制分化方面发挥着 重要作用。
将分离的脂肪组织在磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline PBS）中充分清洗，以去除毛发 和油滴等；然后将脂肪组织用眼科剪剪碎，加入 胶原酶在37℃水浴摇床消化30min, 用含有 10%FBS的 DMEM/F-12培养基终止消化，细胞 筛过滤后，800rpm/min 预离心，上清液2400 rpm/min离心得到的沉淀即为SVF，其中含有 ADSCs，用含有10%FBS的 DMEM/F-12培养基 重悬细胞沉淀，将单细胞悬液种植到培养瓶或培 养板中，37℃，5% CO2孵箱孵育。
脂肪干细胞研究进展与应用前景
新、 具有 多向分化潜能 的成 体干 细胞 ， 在一定 的条 件下 可 以
分化成许多有特定功 能 的细 胞系 ， 具有 一般干 细胞 的特 点 ，
失， 形成的脂肪组织与新鲜分离 的 Ａ Ｄ Ｓ Ｃ ｓ 形成 的一 样 。这使 得 建 立 脂 肪 来 源 干 细 胞 库 成 为 可 能 ， 为
Ａ Ｄ Ｓ Ｃ ｓ 的应 用提 供 了广 阔的前景 。
２ ＡＤ Ｓ Ｃ ｓ 的 生物 学特性
ｉ ｒ ｖ ｅ ｄ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ， Ａ Ｄ Ｓ Ｃ ｓ ） 不 仅 在 体 内外 具 有 多 向分 化 潜 能， 在不 同 的诱 导 因子作 用 下可 以像脂 肪 细胞 、 软骨
血干 细胞 的标 记 ， 包 括 普通 白细 胞 的抗 原 Ｃ Ｄ ４ ５ 、 单 核／ 巨噬 细 胞标 记 Ｃ Ｄ１ １ ａ和 Ｃ Ｄ１ ４ 、 ＭＨＣ Ｉ Ｉ 类 Ｄ Ｒ组
的差 异 ， 发 现两 类 细胞 的表 面标 记相 似 ， 都 表 达
Ｃ Ｄ １ ３ 、 Ｃ Ｄ ２ ９ 、 Ｃ Ｄ ４ ４ 、 Ｃ Ｄ ５ ８ 、 Ｃ Ｄ ９ ０ 、 Ｃ Ｄ １ ０ ５和 Ｃ Ｄ１ ６ ６ ，
均不 表 达 Ｃ Ｄ １ １ Ｃ 、 Ｃ Ｄ １ ９ 、 Ｃ Ｄ ３ １ 、 Ｃ Ｄ ３ ３ 、 Ｃ Ｄ ３ ８ 、 Ｃ Ｄ ４ ５
细胞 、 肌 细胞 、 成骨 细胞 、 神 经细胞 、 神 经胶 质 细胞及 胰 岛细胞 分化 ， 而 且 可 以分 泌 多 种 促 血 管 生 成 因子 和抗 凋 亡 因子 。现就这 一领 域新 的研 究进 展 与应用 作 一综 述 。
脂肪干细胞培养方法 组织块培养法
脂肪干细胞是一种多能干细胞，存在于脂肪组织中，具有较强的自我更新和分化能力，因此在再生医学领域具有广阔的应用前景。
脂肪干细胞的培养方法是进行研究和应用的基础，其中组织块培养法是一种常用的培养方法，其流程和步骤需要严谨操作和控制，以获得高质量的脂肪干细胞。
一、脂肪组织的获得脂肪干细胞的来源是脂肪组织，脂肪组织的获得需要经过以下步骤：1. 临床患者手术采集：通过手术方式从患者身体的特定位置（如腹部、臀部等）采集脂肪组织。
2. 动物实验材料采集：通过特定的实验动物模型，在实验室条件下从动物体内获取脂肪组织。
脂肪组织的来源直接关系到后续脂肪干细胞的培养和应用性能，因此需要严格控制采集过程和条件，确保获得的脂肪组织质量和干细胞丰度。
二、脂肪组织处理和组织块制备1. 脂肪组织的去除杂质：将采集的脂肪组织在无菌条件下进行处理，去除多余的结缔组织、血管和表皮层，以获得纯净的脂肪组织。
2. 组织块的制备：将经过处理的脂肪组织切割成适当大小的块状（约1mm³），以便后续细胞的释放和培养。
三、脂肪干细胞的释放和培养1. 组织块的酶解：将制备好的组织块放入消化酶（如胰蛋白酶）的消化液中，在37℃的恒温培养箱内进行酶解，使脂肪干细胞从组织块中释放出来。
2. 细胞的培养和传代：将释放出的脂肪干细胞进行原代培养和传代培养，培养基的配方和培养条件需要进行严格控制和优化，以保证脂肪干细胞的生长和分化。
通过以上步骤和方法，我们可以获得高质量的脂肪干细胞，为其后续在再生医学、组织工程和临床治疗中的应用打下坚实基础。
在实际应用中，还需要结合特定的研究和临床需求，对脂肪干细胞进行进一步的分化和功能评价，以实现其在不同领域的应用和开发。
脂肪干细胞的培养方法对于再生医学和组织工程具有重要意义，通过持续的研究和优化，必将为人类健康事业带来更多的机遇和挑战。
希望本文对脂肪干细胞组织块培养方法的介绍，能够为相关研究和应用人员提供一定的参考和指导，共同推动脂肪干细胞领域的进步与发展。
脂肪来源干细胞在肾移植临床中的应用
肾脏 的缺 血 再 灌 注 损 伤 是 临 床 上 常 见 的 病 理 生 理 过
程， 特别在肾移植的病例 中 ． 乎无一 例外地都 存在 着 肾 几
脏 的缺 血 再 灌 注 损 伤 。 目前 随 着 干 细 胞 研 究 的深 入 ， 人们 认 为 肾小 管 上 皮 的 修 复 包 括 肾 内来 源 和 肾外 来 源 的细 胞 增 殖 修 复 。Ｐ ｕ— ｏｌ Ｓｒ 等 首 次 将 雄 性 小 鼠 的 全 骨 髓 细 胞 移 植 至 受 放 射 线 Ｏ ｅ
经检测发现扩增 ２ Ｏ代
后的 Ａ Ｓｓ 具 有正 常 的染 色 体组 型 ， 异 常 改变 ｌ 。 ＤＣ 仍 无 ４ ｊ 体 外特 定 的 培 养 环 境 可 诱 导 Ａ Ｓ ｓ分 化 成 成 骨 细 胞 、 ＤＣ 软
分化能力的成体干细 胞 （ ｕ ｎａｉｏｅｔｓｅｄｒ ｅ ｔ — ｈ ｍａ ｄｐｓ ｓｕ．ｅｉ ｄｓ ｏ ｉ ｖ ｒ
脂肪 间充质干细胞
间 充质 干 细 胞 （ ｅｅｅ ｙ ａ ｓ ｍ ｃｌ ｍ ｓｎ ｈｍ ｌ ｔ ｅ ，ＭＳ 是 一 种 ｅ ｌ Ｃ）
一
成 人 干 细胞 ， 可 以 在 骨 髓 和 其 它 成 体 组 织 间 质 中 被 找 它 到 ， 可 在 体 外 进 行 扩 增 。这 种 细 胞 表 现 出 自我 更 新 和 多 并 向分 化 潜 能 ， 可 以 分 化 为 软 骨 祖 细 胞 、 肪 祖 细 胞 和 成 它 脂 骨 细 胞 等 … 。除 此 之 外 ， 间充 质 干细 胞 还 发挥 重 要 的 生 长
织 ， 悬 细 胞 ， 入 ２倍 体 积 的 红 细 胞 裂 液 （ Ｈ Ｃ １４ 重 加 Ｎ １５
干细胞参与肾小管上皮细胞的修复。另一方面 ， 有研究认
脂肪干细胞-是一种从脂肪组织中分离提取出的能够贴壁生长
脂肪干细胞-是一种从脂肪组织中分离提取出的能够贴壁生长脂肪干细胞-是一种从脂肪组织中分离提取出的能够贴壁生长、具有可塑性、黏附性和多向分化潜能的中胚层来源的成体干细胞。
学术术语来源---脂肪干细胞成骨分化及与复合支架结合：在修复骨质疏松症骨缺损中的应用文章亮点：1 此问题已知的信息：脂肪干细胞是近年来从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的成体干细胞，已有较多临床及基础研究证实其成骨能力。
2 文章增加的新信息：文章的特点在于从骨质疏松症的发病机制及其对骨缺损修复的影响、信号通路调控脂肪干细胞成骨分化的机制、脂肪干细胞修复骨质疏松症骨缺损的可行性进行分析，发现脂肪干细胞在修复骨质疏松症骨缺损方面具有广阔应用前景，值得进一步研究。
3 临床应用的意义：随着再生医学的发展，脂肪干细胞应用于骨再生的基础研究已取得了一定的进展，为临床修复骨质疏松症骨缺损提供了更加广阔的思路。
关键词：干细胞；脂肪干细胞；骨质疏松症；骨缺损；修复；成骨分化；骨再生；国家自然科学基金主题词：干细胞；脂肪组织；骨质疏松；骨再生摘要背景：针对骨质疏松症伴发骨缺损疾病的传统治疗方法，诸如自体骨移植、异体骨移植、生物材料植入均有明显的局限性。
以脂肪干细胞为种子细胞，采用再生医学的方法，为骨质疏松症骨缺损的修复提供了一种新的途径。
目的：就骨质疏松症的发病机制及其对骨缺损修复的影响、信号通路对脂肪干细胞成骨分化的调控、脂肪干细胞修复骨质疏松症骨缺损的可行性等方面作一总结。
方法：应用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI)和PubMed数据库中1998年1月至2014年9月相关文献。
在标题和摘要中以“脂肪干细胞，骨质疏松症，骨缺损，成骨分化，骨再生”或“adipose-derived stem cells, osteoporosis, bone defect, osteogenic differentiation, bone regeneration”为检索词进行检索，重点对77篇文章进行分析。
自体脂肪干细胞的浓缩提取及在面部填充中的应用效果
自体脂肪干细胞的浓缩提取及在面部填充中的应用效果张若冰;谢惠明;张杰【摘要】目的:探讨自体脂肪干细胞的浓缩提取技巧及在面部填充治疗中的远期效果和安全性.方法:2013年-2017年对38例颜面部凹陷或组织缺容的就医者行自体脂肪干细胞移植填充矫治,术后随访评价矫治效果.结果:38例就医者中,有33例接受了1次自体脂肪干细胞移植,5例进行了再次自体脂肪干细胞移植.术后随访时间为3～41个月,术后颜面部缺容及轮廓欠佳现象获得显著改善.未出现局部硬结、皮肤表面不平整、注射针孔瘢痕及色素沉着等不良反应.术后就医者和医师对效果的总有效率评价分别为94.7％和97.4％.结论:自体脂肪干细胞移植是一种安全、远期疗效理想的面部年轻化治疗方式,严格遵照医疗规范及实验室提取脂肪干细胞的提取方法操作,可以有效提高脂肪干细胞的移植成活率.【期刊名称】《中国美容医学》【年(卷),期】2019(028)008【总页数】4页(P22-25)【关键词】自体脂肪干细胞;凹陷填充;面部缺容;面部年轻化;注射【作者】张若冰;谢惠明;张杰【作者单位】无锡市第二中医院医学美容外科江苏无锡 214000;无锡市第二中医院医学美容外科江苏无锡 214000;无锡市第二中医院医学美容外科江苏无锡214000【正文语种】中文【中图分类】R622面部轮廓是否分明丰满，除了骨骼因素以外，主要由面部皮下脂肪而定。
一般来说，青少年至中年人群面部皮下脂肪丰满，随着年龄增长或因某些疾病甚至外伤导致面部皮下脂肪减少，显得消瘦凹陷，从美学角度来说显得老态或给人以沧桑感，这给爱美人士带来了烦恼，自体脂肪移植修复可以让消瘦或凹陷的脸庞恢复圆润曲线，同时让面部轮廓整体提升，显年轻化[1]。
2013年-2017年，无锡市第二中医院医学美容外科对38例就医者应用自体脂肪干细胞行面部凹陷填充及轮廓修饰等面部年轻化的综合矫治，取得了满意的临床疗效。
现报道如下。
1 资料和方法1.1 临床资料：本组共38例就医者，其中女性34例，男性4例，年龄27～55岁，平均36.3岁；均已排除高血压、冠心病等慢性病，排除面部皮肤感染（如痤疮等），排除正在减肥者。
脂肪干细胞在肿瘤治疗中的转化研究
分泌血管生成因子
脂肪干细胞能够分泌多种血管生成因子，如血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）等，促进肿瘤组织中的血管生成，改善肿瘤微环境。
参与血管修复与重建
在肿瘤治疗过程中，脂肪干细胞可参与血管修复与重建，提高肿瘤组织的血液灌注和氧合水平，有助于减轻肿瘤组织的缺氧和坏死。
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针对不同患者的具体情况，开发个性化的脂肪干细胞治疗方案，以提高治疗效果和患者生活质量。
个性化治疗方案开发
将脂肪干细胞治疗与其他治疗手段（如化疗、放疗、免疫治疗等）相结合，探索联合治疗的最佳策略。
联合治疗策略探索
除了已有的肿瘤类型外，进一步拓展脂肪干细胞在更多类型肿瘤治疗中的应用，并探索其在预防肿瘤复发和转移中的潜力。
转化研究进展与成果展示
抗肿瘤效应验证
在实验室条件下，证实脂肪干细胞具有显著的抗肿瘤效应，包括抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡等。
安全性评估
通过一系列体内外实验，评估了脂肪干细胞治疗的安全性，结果显示无明显毒副作用，为临床试验奠定了基础。
脂肪干细胞的提取与培养
成功从脂肪组织中分离出干细胞，并建立了稳定的培养体系，为后续研究提供了充足的细胞来源。
拓展应用领域
面临挑战及解决方案探讨
确保所使用的脂肪干细胞来源于健康供体，并经过严格的质量控制和筛选，以排除潜在的病原体污染和基因突变风险。
干细胞来源与质量控制
针对异体移植可能引发的免疫排斥反应，可以采取免疫抑制措施，如使用免疫抑制剂或进行基因编辑，以降低免疫排斥的风险。
异体移植免疫排斥
尽管脂肪干细胞具有多向分化潜能，但在特定条件下可能形成肿瘤。因此，需要严格控制培养条件和移植后的监测，确保治疗的安全性。
综述——脂肪干细胞与脂肪移植
王岩斐自从美国加州大学洛杉矶分校（University of California, Los Angeles, UCLA）的研究人员在《细胞分子生物学》（Molecular Biology of the Cell）杂志介绍了这种新型成体干细胞群以后，脂肪干细胞（the adipose-derived stem cells, ADSCs）逐渐成为普遍应用于干细胞领域中的最受欢迎的干细胞群[1]。
由于其自身存在的多向分化潜能，和获取ADSCs的简单实用性，ADSCs将成为多能胚胎干细胞（pluripotent ES cells）的替代物，无论是在实验室仍是在临床应用中。
长期以来，对于各类原发的和继发的软组织缺损的医治一直是困扰整形外科医生的难题之一。
引发软组织缺损的原因有严重烧伤、感染、体表肿瘤切除术后、各类外伤和先本性疾病等[2]。
自体脂肪作为一种软组织填充物，由于其诸多的并发症曾一度被人们放弃，但随着组织工程技术及细胞生物学的发展，自体脂肪移植又逐渐被人们认可。
现将脂肪干细胞在脂肪移植中的作用及其临床应用现状综述如下。
1 脂肪移植的发展概况20世纪初，自体脂肪颗粒作为一种软组织填充材料开始应用于临床。
但是，由于其吸收率高、存活率低，且并发症较多，限制了其在临床中的普遍应用[3]。
21世纪初，通过改良脂肪获取技术，加速了脂肪血管化，提高了脂肪颗粒移植的成活率。
可是，坏死、吸收仍然是颗粒脂肪移植的主要并发症。
直到Zuk等[1]第一次从自体脂肪组织中分离取得具有多向分化潜能的细胞——ADSCs，脂肪移植的研究愈来愈深切，原因就是ADSCs来源丰硕，取材方便，且组织中干细胞含量丰硕（ADSCs在皮下白色脂肪组织中约占细胞总量的10%-20%[4]），不会引发伦理学争议等。
最近几年来，随着组织工程技术的迅速发展，为克服常规注射颗粒脂肪移植的问题，如吸收、囊肿、硬结等，Yoshimura等[5]又发明了细胞辅助的脂肪移植术（cell-assisted lipotransfer, CAL），该技术是将ADSCs与脂肪细胞混合，联合注射移植。
小鼠脂肪干细胞提取方法-概述说明以及解释
小鼠脂肪干细胞提取方法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述：随着干细胞研究领域的不断深入，小鼠脂肪干细胞作为一种重要的干细胞资源备受关注。
小鼠脂肪干细胞具有较高的分化潜能和增殖能力，可广泛应用于再生医学、组织工程和疾病治疗等领域。
提取小鼠脂肪干细胞是进行相关研究的基础和关键步骤，因此本文将详细介绍小鼠脂肪干细胞的提取方法及其在研究中的应用。
通过深入探讨小鼠脂肪干细胞的重要性和相关提取方法，旨在为读者提供实用的研究参考和启发，促进小鼠脂肪干细胞研究领域的进一步发展。
1.2 文章结构本文主要分为引言、正文和结论三部分。
在引言部分，将介绍小鼠脂肪干细胞的重要性，并简要阐述文章的结构和目的。
正文部分将详细介绍小鼠脂肪干细胞提取方法，包括提取的步骤、操作注意事项和实验流程。
同时还会探讨小鼠脂肪干细胞在研究中的应用，如在生物医学研究中的作用和潜在应用价值。
在结论部分，将对提取方法的重要性进行总结，并展望小鼠脂肪干细胞研究的未来发展趋势。
最后，对整篇文章进行总结，强调小鼠脂肪干细胞研究的重要性和潜在价值。
1.3 目的小鼠脂肪干细胞作为一种重要的细胞资源，在干细胞研究领域具有广泛的应用价值。
本文旨在探讨小鼠脂肪干细胞的提取方法，为相关研究人员提供可操作的实验指导，推动小鼠脂肪干细胞研究的进展。
同时，通过总结现有提取方法的优缺点，展望未来小鼠脂肪干细胞研究的发展方向，为更深入的研究提供理论基础和实践指导。
通过本文的阐述和分析，旨在促进小鼠脂肪干细胞领域的持续发展，推动干细胞研究的进步。
2.正文2.1 小鼠脂肪干细胞的重要性:小鼠脂肪干细胞是一种来源于小鼠脂肪组织的多能干细胞，具有很高的潜在应用价值。
首先，小鼠脂肪干细胞具有自我更新和多向分化的能力，可以分化成多种细胞类型，如脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞等，这使得它们在再生医学领域具有重要意义。
其次，小鼠脂肪干细胞来源广泛，并且易于提取和培养，这为研究人员提供了便利。
人脂肪干细胞的生物学特性及分化研究
人脂肪干细胞的生物学特性及分化研究人脂肪干细胞（Human adipose-derived stem cells, hASCs）是来源于脂肪组织的一种成体干细胞。
相对于其他干细胞源，如骨髓和胎盘组织，脂肪组织是一种易获取、丰富的干细胞源。
脂肪干细胞具有多种生物学特性，这些特性使其成为医学研究和应用中的热点。
脂肪干细胞具有自我更新的能力。
在体外培养条件下，脂肪干细胞能够连续增殖并形成克隆球。
脂肪干细胞在体内能够不断自我更新并恢复受损组织。
脂肪干细胞具有多向分化潜能。
在适当的诱导条件下，脂肪干细胞可以向多种细胞类型分化，包括成骨细胞、软骨细胞、肌肉细胞、神经细胞等。
脂肪干细胞能够通过不同的分化路径进行再生医学和组织工程研究。
脂肪干细胞的多向分化潜能与其内含的多种细胞表面标志物密切相关。
脂肪干细胞表面标志物包括CD34、CD73、CD90、CD105等。
这些标志物的表达情况可以用于对脂肪干细胞的鉴定和纯化。
脂肪干细胞还具有多种富血管生成策略的能力。
研究表明，脂肪干细胞能够分泌多种生长因子，如血管内皮生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶（MMPs），从而促进新的血管生成。
这一特性使得脂肪干细胞在组织修复和再生方面具有巨大潜力。
脂肪干细胞在临床应用中也表现出良好的安全性和可行性。
临床研究表明，脂肪干细胞植入可以用于丰胸、隆鼻、面部填充等美容整形手术，以及骨科、神经科、心血管科等疾病的治疗。
脂肪干细胞是一种具有广泛研究和应用潜力的成体干细胞。
它的自我更新能力、多向分化潜能、富血管生成策略和临床可行性，都使得脂肪干细胞成为再生医学和组织工程领域的热点研究对象。
随着研究的深入，相信脂肪干细胞将在更多领域中发挥重要的作用。
脂肪干细胞的在整形美容外科的应用
Ｎｏ． ４ ， Ａｐ ｒ ｉ ｌ ，２ ０１ ３
医学美学美容
Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ａｅ ｓ ｔ ｈ ｅ ｔ ｉ ｃ ｓ ａ ｎ ｄ Ｃｏ ｓ ｍｅ ｔ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ 整形美容
脂肪干细胞的在整形美容外科的应用
李义
（ 当代美容整形外科诊所 山东泰安 ２ ７ １ ０ ０ ０ ）
摘要： 脂肪干 细胞具有多向分化 潜能且具有组织来 源丰 富， 取 材 方便， 创伤小， 增殖 能力强和 等优 点。 对多种组织的损 伤具有 良好的修复作 用， 是 医
学界 中解决各种 医学难题 的理想材料。 本 文主要 介 绍 了 脂肪干 细胞 生物 学特点； 脂肪干细胞在 医学界 以及整形美容 中所作 的研 究与应 用。
关键词： 脂肪干 细胞 ； 来 源； 整形美容 ； 应用
中图分 类号 ： Ｒ ６ ２ ２
文献标 识码 Ａ
文章 编号 ： １ ０ ０ ４ — ４ ９ ４ ９ （ ２ Ｏ １ ３ ） ０ ４ — ０ ０ ６ ５ — ０ ２
亡 之 间也维 持 着平 衡状 态 。 在增 生性 瘢 痕和瘢 痕疙 瘩 中这 种 平衡被 １脂 肪干细 胞介 绍 １ ９ ７ ６ 年Ｆ ｒ ｉ ｄ ｅ ｎ ｓ ｔ ｅ ｉ ｎ 等首先 报道 从骨 髓 中分离 出克 隆源性 的具有 破 坏 ， 成纤 维细 胞的增 殖超 过 了凋亡 ， 胶 原 的合 成明显超 过 降解 ， 最 多 向分 化潜 能 的基质 细胞 一 骨 髓 问充 质干 细胞 。 Ｚ ｕ ｋ 等 于２ ０ ０ １ 年发 现 终导致大 量 的胶 原堆积 。 脂 肪 组织 中除了含 有 已经 定型 的前脂 肪细胞 外 ， 也包含一种 具有多 向 有 研 究报道 ， 表皮干细胞 有可能 参与瘢痕 形成。 从 人皮肤 创伤愈 分化潜力 的细胞群 ， 其性 质与Ｍ Ｓ Ｃ ｓ 十分相似 ， 但又 不完全相 同。 合机 制研 究推论 ， 表皮干细胞 在创伤 修复与 瘢痕形成 中是 活化的成纤 这些 细胞 已被证实 不仅具有分化 成为骨骼 、 软骨、 脂肪 、 心肌 、 神 维 细胞 的一个 来源 ， 随着创 伤后某些 促纤维化 细胞 因子 （ Ｔ Ｇ Ｆ — Ｂ 等） 水 表 皮干细胞 在其诱 导下逐 渐 向成 纤维细 胞转分化 ， 并 经等 组织 的能力 ， 而且 同样具 有促进 伤 口愈合、 损伤 组织 细胞再 生和 平 浓度 的增加 ， 具有成纤 维细胞 的功 能， 合成胶 原 ， 引起 细胞外 基质 的合成及 胶原 的 减 少 疤痕 的能力及 抗衰 老能力 。 从而 不仅 参与 了 上皮修 复， 而且 很可能进 入真 皮层 参与瘢 痕形 这种 细胞被 称为脂肪 来源干 细胞 、 脂肪 来源 成体干细胞 、 脂 肪来 沉积 ，
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A D S C s的分离与纯化关于ADSCs的获取方法很多，但不管哪种方法所得到的并非单一的脂肪干细胞，是一组具有干细胞特性的细胞群。
目前应用最广泛的分离方法是酶胶原消化法。
首先将无菌条件下切取的脂肪组织块剪成细小的颗粒，PBS液冲洗干净后，用0．1％的胶原酶在37℃下振荡消化4O～90min，再用含10％胎牛血清的等体积DMEM培养基终止。
1200r ／min离心5～10min，弃上清液及悬浮的脂肪组织，重悬细胞后经过细胞筛过滤，所得细胞按2—4×105／cm接种于50ml培养瓶内。
37℃条件5％的CO饱和湿度培养箱内培养，2d后首次换液，以后3d换液一次，至细胞达70％～8O％融合时用0．25％胰酶消化，并传代。
经过提取获得的以脂肪干细胞为主的细胞群接种后数小时即开始贴壁生长，24h内完成贴壁。
细胞的形状与成纤维细胞相似，体积较小，核浆比较大，随后细胞体积渐增大，克隆形成。
经传代后，细胞的形态及排列才趋于一致。
由于目前尚未发现脂肪干细胞表面存在特异性的分子标记物，因此无法利用分子表型来分离纯化。
然而可通过纯化脂肪组织块来间接达到纯化脂肪干细胞的目的。
流式细胞仪检测显示：传至第3代时，可达95％以上的细胞纯度。
ADSCs的生物学特性1.ADSCs的鉴定在ADSCs鉴定上，现阶段尚无特异性鉴定方法。
用免疫荧光法和流式细胞术检测结果均显示ADSCs表达特异性分子CD44，OCT一4，E—eadherin，流式细胞术检测细胞周期显示绝大多数细胞是处于静止期的干细胞，传代后生长迅速，随机挑选来源标本，对细胞进行染色体核型分析显示ADSCs具有遗传稳定性。
ADSCs分泌多种生长因子在生理功能方面，脂肪干细胞能分泌相当数量的细胞因子，包括肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、胎盘生长因子(PGF)、转化生长因子一B(TGF—B)、成纤维细胞生长因子(FGF一2)等，低表达的因子有Ang一2C。
2.ADSCs的多向分化能力与骨髓间充质干细胞相比，脂肪干细胞具有储量丰富、取材容易、扩增迅速、不宜衰老、排斥反应低等优点。
在特定培养基和特异的诱导剂作用下可分化为特定的体细胞，在组织修复、细胞移植、基因治疗等领域有着潜在价值。
向脂肪细胞分化：在特定培养基中加入一定浓度地塞米松、胰岛素、吲哚美辛及1一甲基一3～异丁基一黄嘌呤，3周后发现ADSCs向脂肪细胞分化，可检测出ADSCs表达许多脂肪细胞的特异性标记：脂蛋白脂肪酶、脂肪酸结合蛋白aP2、PPAR—r2、leptin(瘦素)、Glut4(葡萄糖转运蛋白等。
镜下观察可见胞内有空泡形成。
这些特点是脂肪细胞形成的标志。
向血管内皮细胞分化：将ADSCs置于含甲基纤维素和血管内皮生长因子的半固体培养基中加以培养，镜下可见有分支状的管腔结构形成，免疫组化证实有内皮细胞特异性的表面标记一CD31和vW因子。
Planat等描述了将培养3d的ADSCs注入后肢缺血损伤的实验小鼠后肢肌肉中，15d以后给以血管造影及多普勒检查发现损伤后肢血供出现显着改善的实验结果。
向成骨细胞分化:h—ADSCs在加入维生素C、B一磷酸甘油(BGP)和维生素D3的培养基中培养几代后，细胞表面形成的突起，其形态与体内的成骨细胞相似，用茜素红染色可见细胞内出现了钙小结”。
国外有将ADSCs作为种子细胞植入网状支架中，成功地修复狗的颅骨的报导。
国内马舟涌等将获得的脂肪干细胞和进行成骨诱导后的脂肪干细胞分别种植在复合骨形态发生蛋白和纤维蛋白胶支架上，并移植到骨缺损模型中。
实验证明，经诱导后的脂肪干细胞在复合骨形态发生蛋白和纤维蛋白胶支架中可以促进骨骼愈合。
这也间接证明了ADSCs的确向成骨细胞分化。
向软骨细胞分化：在体外，将维生素C、转化生长因子(TFG)、胰岛素添加到特定培养基里，可以定向诱导AD—SCs向软骨细胞分化。
结果在培养基里形成了细胞小结，经免疫组化分析得知，这些细胞小结表达Ⅱ型胶原纤维、硫酸软骨素、硫酸角质素等。
杨亚军等用CDMPI体外诱导sD大鼠脂肪干细胞，结果诱导后的脂肪干细胞形态由长梭型向软骨细胞的多角形方向转变。
免疫组化显示CDMPI诱导大鼠ADSCs后可以分泌软骨特异性基质糖胺聚糖(GAG)和Ⅱ型胶原，并进一步向软骨细胞方向分化增殖。
向心肌细胞分化：从脂肪组织中分离的脂肪基质血管组分(stromalvascularfraction，SVF)即脂肪组织去除成熟脂肪细胞后，所获得的具有于细胞特性的基质细胞，直接种植在半固体的甲基纤维素培养基中，6d后，出现了各种不同的细胞形态，有成群的前脂肪细胞／脂肪细胞，成纤维样细胞等等，11—14d后，一些圆形的细胞开始了独立的收缩活动，在几天内，肌管样结构出现，并大量生长增殖，20—30d后，局部出现了一簇有结合力的细胞群体，和有分支的纤维细胞共同结合在一起。
在这期间，24d时，整个局部出现了单一节律的搏动。
在分子水平上，这些搏动的细胞能表达几种心脏特有的mRNA，如转录因子，GATA一4和Nkx2．5，心室和心房肌凝蛋白轻链MLC一2v和MLC一2a，以及ANP(心钠素)。
这些数据表明了这些搏动细胞的心肌细胞特性。
向神经细胞方向分化：国外一些研究人员用B一巯基乙醇(B—mercaptoethanol，B—ME)诱导h—ADSCs向神经细胞分化，30min后即出现类神经元样的细胞，3h后出现了神经元细胞表型，表达神经细胞早期阶段的标志性因子nestin、NSE、NeuN等，这证明了ADSCs能在体外分化为神经前体细胞，目前技术水平尚不能使之向成熟的神经元细胞或星型胶质细胞分化。
ADSCs的临床应用前景展望1.在组织工程中的应用应用组织工程有两种方案，一种是将种子细胞在体外接种于支架上培养，然后再进行移植；一种是将种子细胞与可降解材料复合物直接移植到体内诱导目标组织形成。
目前脂肪干细胞应用于临床仍处于动物实验阶段。
有报道利用脂肪干细胞和支架成功地修复了骨缺损模型中犬的骨缺损。
脂肪干细胞在修补受损伤的组织时与体外生物I型胶原支架材料的相容脂肪干细胞具有增殖能力和多向分化潜能。
对多种组织的损伤具有良好的修复作用。
而且取材方便,是组织工程研究中的重要种子细胞之一。
不同材料对细胞的生长、分化和黏附均有不同的影响,因而种子细胞能否在支架材料上良好生长,并表达自身特异性功能是目前组织工程研究的一个热点。
I型胶原支架材料与脂肪干细胞具有良好的体外生物相容性，而且具有对细胞、组织等无毒性；不影响生物体的生长、增殖等功能。
有实验表明用体外生物I型胶原支架材料与脂肪干细胞进行体外混合培养，证明了脂肪干细胞能在I型胶原支架材料上良好的附着、生长、增殖并在三维支架材料内保持均匀分布。
故I型胶原支架可作为构建脂肪组织工程的细胞载体。
I型胶原作为体外细胞培养支架时.有促进细胞粘附和诱导生长分化的作用，是良好的培养粘附剂。
其降解产物可被细胞利用合成新的基质。
不产生毒性代谢产物，不影响内环境pH值，因此不会影响细胞的生长增殖。
胶原蛋白及相关制品已广泛应用于临床医学中，已被美国FDA批准作为人工皮肤材料。
研究利用人脂肪干细胞作为种子细胞,进行体外细胞种植胶原支架。
通过倒置显微镜和电镜观察细胞伸展、黏附和生长过程。
镜下显示,种子细胞种植胶原材料后,生长状态良好,无明显细胞毒性表现,在培养条件相对稳定的情况下.细胞可以进行正常增殖、迁移并分泌细胞外基质。
通过检测.细胞与支架的黏附率达97%以上。
说明该支架对细胞有良好的亲和性。
脂肪干细胞在骨组织中的应用骨外伤、骨肿瘤和先天性畸形患者中常存在大面积的骨缺损。
而修复材料的匮乏一直是临床面临的难题之一。
传统骨修复的材料，如肋骨和髂嵴等自体骨，可获取的组织量有限。
且对取材部位造成损伤：磷灰石和去矿化异体骨等异体材料，存在免疫排斥、疾病传染及骨溶解等问题。
近年来，干细胞和骨组织工程研究的不断深人，为临床骨缺损的修复提供了新思路。
脂肪干胞(Adipose—derivedstemcell,ADSC)由于来源丰富且容易获取，体内、外实验均证实其能分化形成骨样组织，已成为骨组织工程的重要的种子细胞来源。
而外国人Friedenstein将骨祖细胞分为确定性骨祖细胞(determinedosteogenicprecursorcells,DOPC)和诱导性骨祖细胞(inducibleosteogenicprecursorcells，IOPC)，确定性骨祖细胞是间充质细胞不能自发向成骨细胞转化，在一定的诱导因素后,才能向成骨细胞转化。
由于脂肪干细胞来源稳定且含量丰富，在体内不经基因修饰或外源性生长因子刺激也能修复骨缺损，这使它在未来组织工程骨修复临床骨缺损的应用中备受关注。
但目前对脂肪干细胞参与修复骨缺损的机制尚不清楚。
研究表明间充质干细胞随着传代次数的增多而逐渐丧失其多向分化潜能。
向脂肪细胞的分化能力只能维系10代以内，以后向成软骨细胞、神经星状细胞分化的功能相继丧失，但是体外培养的间充质干细胞向成骨细胞的分化能力可维持20代以上，有研究证实不同种属间间充质干细胞可能有差异因此今后的研究需要深入了解脂肪干细胞在局部骨缺损修复中的作用，并寻找最佳的局部环境促进其成骨分化。
自然状态下，体内调控干细胞成骨分化的环境信号，包括局部微环境内的细胞因子、细胞与细胞或细胞与基质的相互作用，以及机械应力等，在今后，对这些因素的更多发现，及其对它们相互作用的更深入理解可能是体外条件下精确地调控脂肪干细胞成骨分化的关键。
目前，已有应用自体脂肪干细胞修复大面积颅颌面缺损的报道，随着对脂肪干细胞成骨机制的了解，相信脂肪干细胞参与构建的组织工程化骨将会尽快地真正应用于临床大面积骨缺损的修复。
针对性别因素对脂肪干细胞分化影响的研究发现,雌性动物的脂肪干细胞脂肪分化趋势较强,而雄性动物的脂肪干细胞更易表达成骨标志物,这可能与激素促进了脂肪干细胞向脂肪细胞分化有关。
与此相应,科学家研究发现,男性脂肪干细胞的成骨分化时间早于女性,分化速度更快,分化效率也明显高于女性。
目前,对胚胎期及出生后骨发生分子机制的研究受到广泛关注,一些分化调控因子,如骨形态发生蛋白骨髓的间充质干细胞家族等,被用来增强脂肪干细胞体内、外的成骨分化能力。
骨髓的间充质干细胞家族属于旁分泌的转化生长因子TGF—B家族。
大量研究示,骨损伤愈合过程中,骨髓的间充质干细胞具有刺激间充质干细胞向成,目细胞分化的作用。
骨髓的间充质干细胞通过与细胞表面骨髓的间充质干细胞受体结合,磷酸化下游信号分子R—Smad(Smadl、5和8),磷酸化的R—Smad与Smad4结合形成复合体.进而与核内转录因子结合,调控成骨相关靶基因I型胶原蛋白、OPN和OCN等的转录.目前通过转染骨髓的间充质干细胞基因至脂肪干细胞,证实内源性表达增强的骨髓的间充质干细胞2、骨髓的间充质干细胞4和骨髓的间充质干细胞7等能明显增强脂肪干细胞的体内、外成骨能力。