动物细胞融合与单克隆抗体.ppt
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人教版教学课件2.2.2 动物细胞融合
二、单克隆抗体的制备
自主阅读P52：传统的抗体的生产方法 及缺陷是什么？ 传统的抗体生产方法是向动物体内反 复注射某种抗原，使动物产生抗体，然 后从动物血清中分离所需要的抗体。这 种生产抗体的方法产量和纯度都很低， 而且制备的抗体特异性差
二、单克隆抗体的制备 B淋巴细胞的特点：
１．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗 体。 ２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种 以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异 性免疫作用。 ３．每一个B淋巴细胞只能产生一种特异性 抗体。
点击此处添加标题文字
2.哺乳动物感染抗原后，其体内会形成相应的B淋巴细 胞，B淋巴细胞能分泌相应的抗体以凝聚或杀死这些抗 原，动物在免疫反应的过程中，每一种B淋巴细胞能分 泌一种特异性抗体，要想获得大量的特异性抗体，必须 使能分泌单一抗体的B淋巴细胞大量增殖。B淋巴细胞具 有产生单一抗体的能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细 胞是一种癌细胞，它能在体外培养条件下无限增殖，但 不能产生抗体。因此，把一种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞 进行细胞融合，产生杂交瘤细胞，它会兼有两个亲本细 胞的特性----在体外条件下能不断增殖，同时能产生出 某种特异性抗体
专题 专题一：
2
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
2.2.2
动物细胞融合与单克隆抗体
学习目标： 1、说出动物细胞融合原理、过程 和方法 2、单克隆抗体的原理和应用 重点和难点： 1.动物细胞融合的过程 2.单克隆抗体的制备和应用
2.2.2
动物细胞融合与单克隆抗体
• 复习回顾： 1、植物体细胞杂交的过程是怎样的？ 2、动物细胞和植物细胞有何不同 ？
一、动物细胞融合
5、过程：
动物细胞A
有丝分裂 诱导， 多核体 融合 （膜融合、质融合） （核融合）
公开课动物细胞融合与单克隆抗体ppt课件
目的获：得产生
相应抗体的B 细胞
（二选）：选 能产生所需专
一抗体的杂 交瘤细胞
体外培养 小鼠腹腔内培养
ppt课件.
√ BB 、B瘤 、瘤瘤
（B、瘤）
（一选）选 择性培养基：
只有杂交 瘤细胞才
能存活
14
2.2单克隆抗体的应用 特异性强
单克隆抗体最主要的优点：灵敏度高
并能大量制备
诊断试剂——最广泛应用
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合，形成杂交细胞
（细胞膜具有一定的流动性）
ppt课件.
8
1.2动物细胞融合过程
为什么灭活的 病毒能作诱导剂？
灭活丧失感染性 保留融合活性
ppt课件.
9
1.3动物细胞融合技术的意义和应用
意义：
Hale Waihona Puke 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交 成为可能
应用： 制备单克隆抗体（最主要的应用）
但是体外
怎样大量
？ 获得单一 抗体
培养的细胞 不能无限增
殖
癌细胞
既能产生特异性抗体，
又pp能t课件大. 量增殖的细胞 12
你的设想
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖
单克隆 动物细胞培养技术 杂交瘤细胞
抗体
动物细胞融合技术
既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞
ppt课件.
13
细胞继承了_双__亲__细__胞__的__遗__传__物__质____ ，因此不仅能分泌 特异__性__抗__体_____ ，还有 大量增殖 本领。
（3）该方案的目的是__制__备__单__克__隆__抗__体___________。
动物细胞融合和单克隆抗体(终极版)
1、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞有没 有可能无限增殖？ 不可能 2、我们学过的什么细胞具有这样的能力？
癌细胞
3、你认为有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力？
细胞融合
２、实验原理：
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖
柯勒
单克隆 动物细胞培养技术 杂种细胞 动物细胞融合 抗体 既能产生特异性抗 体，又能大量繁殖 创始人：米尔斯坦
⑵.诱导方式：
二醇（PEG）
生物法： 灭活的病毒 例如：仙台病毒
3.意义和应用：
打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能；
重要用途：制备单克隆抗体。
知识回顾
1、抗体是由何种细胞产生的？
三、单克隆抗体 浆细胞（效应B细胞）
2、抗体是如何产生的？
B淋巴细胞 抗原 增殖分化成浆细胞
浆 细胞 骨髓瘤细胞 选出能产生 特定抗体的 细胞群继续 培养
细胞融合 筛选
杂交 瘤细胞
细胞培养
体外培养
从培养液或小 鼠腹水中取出 单克隆抗体
体内培养
练习：
1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较， 在动物细胞融合中有特殊性的是（ A、融合的原理 C、融合的诱导手段 ）
B、融合的优点 D、融合的过程
2.制备过程：
注射抗原的目的是什么
诱导其融合的方法有哪些？ 融合后培养液中有几种细胞 怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交 瘤细胞有何优点 为何要进行克隆化培养和专 一抗体检测，多次筛选 大量增殖杂交瘤细胞获得单 抗的方法
1.在制备单克隆抗体的过程中，选用 哪两种细胞进行融合？为什么选择这 两种细胞？ 浆细胞和骨髓瘤细胞 浆细胞能产生单一抗体，但不能无限 增殖；骨髓瘤细胞能无限增殖，但不 能产生单一抗体。
癌细胞
3、你认为有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力？
细胞融合
２、实验原理：
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖
柯勒
单克隆 动物细胞培养技术 杂种细胞 动物细胞融合 抗体 既能产生特异性抗 体，又能大量繁殖 创始人：米尔斯坦
⑵.诱导方式：
二醇（PEG）
生物法： 灭活的病毒 例如：仙台病毒
3.意义和应用：
打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能；
重要用途：制备单克隆抗体。
知识回顾
1、抗体是由何种细胞产生的？
三、单克隆抗体 浆细胞（效应B细胞）
2、抗体是如何产生的？
B淋巴细胞 抗原 增殖分化成浆细胞
浆 细胞 骨髓瘤细胞 选出能产生 特定抗体的 细胞群继续 培养
细胞融合 筛选
杂交 瘤细胞
细胞培养
体外培养
从培养液或小 鼠腹水中取出 单克隆抗体
体内培养
练习：
1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较， 在动物细胞融合中有特殊性的是（ A、融合的原理 C、融合的诱导手段 ）
B、融合的优点 D、融合的过程
2.制备过程：
注射抗原的目的是什么
诱导其融合的方法有哪些？ 融合后培养液中有几种细胞 怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交 瘤细胞有何优点 为何要进行克隆化培养和专 一抗体检测，多次筛选 大量增殖杂交瘤细胞获得单 抗的方法
1.在制备单克隆抗体的过程中，选用 哪两种细胞进行融合？为什么选择这 两种细胞？ 浆细胞和骨髓瘤细胞 浆细胞能产生单一抗体，但不能无限 增殖；骨髓瘤细胞能无限增殖，但不 能产生单一抗体。
人教版教学课件8.动物细胞融合与单克隆抗体
4.为什么不用两个而要用多个细胞进行动物细胞间的 融合？ 就目前常用的细胞融合方法来看，不管是用物理的、 化学的方法，还是生物的方法，其融合率都不可能是 100%。仅用两个细胞融合，其效率太低，不一定能得到 融合细胞。更重要的是，即使两个细胞已发生融合，但 并不一定是研究者期望得到的细胞类型。目前动物细胞 融合技术最有价值的应用就是单克隆抗体的制备。我们 以制备单克隆抗体为例来说明这一问题。我们知道，体 内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上，但是每一 个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，如果仅取一个脾细 胞（含B淋巴细胞）和一个瘤细胞杂交，我们不能确定该 脾细胞分泌的抗体是否正是我们所需要的；若用大量的 脾细胞和瘤细胞进行融合，就可以从融合细胞中筛选出 能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
5.如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？ 融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞 就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需 抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细 胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个 ，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的 抗体（常用酶联免疫吸附试验法），那些上清液可与特定 抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证 是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释， 一般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单 克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。
知识闯关
1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融 合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量的 单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是 A A.经过免疫的B淋巴细胞 恭喜你，答 不要灰心， 不要灰心， B B.不经过免疫的T淋巴细胞 对了！再接 再来一次！ 再来一次！ 再厉！ C C.经过免疫的T淋巴细胞 D D.不经过免疫的B淋巴细胞
动物细胞融合技术与单克隆抗体(课件)高二生物(人教版2019选择性必修3)
B
A. B. C. 和17 D.无法确定
都有。已知只有同时具有 酶和 酶的融合细胞才可在 培养液中长期存活与繁殖，从图示结果来看，可以确定人的 酶基因位于( )号染色体上。
[解析] 从培养结果可以看出，培养获得的细胞中均具有小鼠的全部染色体，但是只有含人的17号染色体的细胞存活下来，由此可知，人的 酶基因位于17号染色体上，B符合题意。
应用
培育植物新品种
主要用于制备单克隆抗体
意义
突破远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖隔离，扩展了杂交的亲本组合
相同点
原生质体融合的原理相同，原生质体融合的方法相似
续表
例1 [2022·连云港期中] 下图为动物细胞融合技术过程图，相关叙述<zzd>错误</zzd>的是( )。
B
A.图中 为灭活的病毒，此外还可用 融合法诱导动物细胞融合B.图中①过程发生了细胞膜的融合，体现了细胞膜的选择透过性C.图中②过程表示细胞核融合形成杂种细胞D.动物细胞融合技术可用于制备单克隆抗体
4.单克隆抗体的应用
（1）作为⑩__________，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。
（2）用于运载药物和⑪__________。
诊断试剂
治疗疾病
任务 了解动物细胞融合技术及其应用
活动1 比较植物体细胞杂交和动物细胞融合
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理
细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
[2022·岳阳监测] 2020年诺贝尔生理学或医学奖授予发现丙肝病毒的三位科学家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝癌。为研制丙肝病毒的单克隆抗体，某研究者以小鼠甲为
A. B. C. 和17 D.无法确定
都有。已知只有同时具有 酶和 酶的融合细胞才可在 培养液中长期存活与繁殖，从图示结果来看，可以确定人的 酶基因位于( )号染色体上。
[解析] 从培养结果可以看出，培养获得的细胞中均具有小鼠的全部染色体，但是只有含人的17号染色体的细胞存活下来，由此可知，人的 酶基因位于17号染色体上，B符合题意。
应用
培育植物新品种
主要用于制备单克隆抗体
意义
突破远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖隔离，扩展了杂交的亲本组合
相同点
原生质体融合的原理相同，原生质体融合的方法相似
续表
例1 [2022·连云港期中] 下图为动物细胞融合技术过程图，相关叙述<zzd>错误</zzd>的是( )。
B
A.图中 为灭活的病毒，此外还可用 融合法诱导动物细胞融合B.图中①过程发生了细胞膜的融合，体现了细胞膜的选择透过性C.图中②过程表示细胞核融合形成杂种细胞D.动物细胞融合技术可用于制备单克隆抗体
4.单克隆抗体的应用
（1）作为⑩__________，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。
（2）用于运载药物和⑪__________。
诊断试剂
治疗疾病
任务 了解动物细胞融合技术及其应用
活动1 比较植物体细胞杂交和动物细胞融合
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理
细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
[2022·岳阳监测] 2020年诺贝尔生理学或医学奖授予发现丙肝病毒的三位科学家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝癌。为研制丙肝病毒的单克隆抗体，某研究者以小鼠甲为
动物细胞融合与单克隆抗体PPT
跟踪训练
(2011年滦县高二检测)能使动物细胞融 )
合的特有的诱导因素是( A．离心
B．灭活的病毒
C．电激
答案：B
D．振动
单克隆抗体的制备 1．关键思路及操作依据 (1)关键思路
①克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。
②将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得杂交瘤细 胞。 (2)用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因
)
动物细胞工程 动物细胞培养和融合，单 克隆抗体的制备 胰蛋白酶处理，制作细胞 悬液 物理方法、化学方法、生 物方法 单克隆抗体的制备 动物血清不可缺少
A.1 C．3
B．2 D． 4
【尝试解答】
【解析】
B
选B。植物细胞工程常采用的技术手段
有植物组织培养和植物体细胞杂交。动物细胞工程
常采用的技术手段有动物细胞培养、细胞融合、单 克隆抗体的制备，还有胚胎移植、核移植等。动、
细胞。
远缘 杂交的不亲合性，成为研 4．意义：克服了______ 遗传 、_________ 细胞免疫 、肿瘤和生物_______ 新品种 培 究细胞_____
育的重要手段。
二、单克隆抗体
1．传统抗体的获得
抗原 ，使动 (1)方法：①向动物体内反复注射某种_____ 抗体 ；②从动物_____ 血清 中分离所需抗体。 物产生_____ 产量低 、纯度低、_______ 特异性 差。 (2)特点：_______
动物细胞融合 1．原理：膜的流动性。 2．诱导方法：物理法——离心、振动、电激；化 学法——聚乙二醇；生物方法——灭活的病毒。
3．动物细胞融合的过程
4．优点：动物细胞融合技术突破了有性杂交方法
的局限性，使远缘杂交成为可能。 特别提醒 灭活是指用物理或化学的手段使病毒或细菌失去感 染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。
动物细胞融合技术与单克隆抗体
《第2章细胞工程》第2节动物细胞工程二动物细胞融合技术与单克隆抗体必会知识考点梳理拓展延伸易错警示必会知识一动物细胞融合技术1．动物细胞融合技术：是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。
细胞融合的实质是核融合。
2．原理：动物细胞融合的基本原理为细胞膜的流动性。
3．诱导融合的方法(1)化学方法：PEG融合法。
(2)物理方法：电融合法。
(3)生物方法：灭活病毒诱导法。
4．过程：具有不同遗传信息的两个或多个细胞杂交。
5．结果：形成单核杂交细胞，具有原来两个或多个细胞的遗传信息，可表现出两个或多个亲本的特点。
6．意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。
这一技术成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
如利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。
必会知识二单克隆抗体及其应用1．传统抗体的获得(1)方法：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。
(2)缺陷：制备的抗体产量低、纯度低以及特异性差。
2．单克隆抗体的制备：单克隆抗体是由单一杂交瘤细胞增殖产生的高度专一的抗体。
(1)制备原理①B淋巴细胞的特点：每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，B淋巴细胞在体外不能无限增殖。
②骨髓瘤细胞的特点：在体外能大量增殖，但不能产生抗体。
③杂交瘤细胞的特点：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞，既能迅速大量增殖，又能产生专一的抗体。
(2)制备过程①制备产生特定抗体的B淋巴细胞：用特定的抗原对小鼠进行免疫处理，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。
②培养骨髓瘤细胞。
③将小鼠的骨髓瘤细胞与从脾中得到的B淋巴细胞融合。
④用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有杂交瘤细胞才能生长。
⑤克隆化培养和抗体检测：对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
细胞融合-与-单克隆抗体课件
第二十五页，共六十二页。
4.22 杂种 细胞 (zázhǒng)
在植物育种中的应用
杂种细胞是一条新的育种途径，
可以产生新经济性状的良种。 科学家已经在禾本科、茄科、豆
科、十字花科等植物中得到了杂 种再生植株。 一些近亲(jìnqīn)植物、有性不亲和 的组合，如马铃薯×番茄等都得 到了再生植株。
细胞融合-与-单克隆抗体
第十九页，共六十二页。
2）营养互补筛选系统：细胞在缺乏一种 或几种营养成分时，不能生长(shēngzhǎng)繁殖， 即营养缺陷型细胞。利用两种亲本细胞营 养互补作用原理可以筛选杂种细胞。
亲本A：色氨酸缺陷型
亲本B：苏氨酸缺陷型 杂种细胞可以在不含色氨酸和苏氨酸的培
细胞融合-与-单克隆抗体
第十页，共六十二页。
甜菜(tiáncài)原生质体电融合过程
1）在高频电流电场 下的相互接触(jiēchù)。 2）脉冲刺激后30s 3)50秒后 4）1.5分钟后 5）6分钟后 6）15分钟后，原生质
体融合完成。
细胞融合-与-单克隆抗体
第十一页，共六十二页。
注意事项
1）对介质要求高，一般用高纯度的蒸馏水 并选用(xuǎnyòng)适当的非电介质溶液，如甘露 醇等配制等渗性介质。
稳定区（C区）
细胞融合-与-单克隆抗体
第三十页，共六十二页。
人体内的五种 抗体 (wǔ zhǒnɡ)
细胞融合-与-单克隆抗体
第三十一页，共六十二页。
4.32单克隆抗体(kàngtǐ)的制备
单克隆抗体(monoclonal antibody，简称
McAb)：将能够产生抗体的B淋巴细胞和具 有无限增殖力的骨髓瘤细胞融合在一起， 形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能在体 外快速生长，又能持续分泌成分单一的 特异性抗体。这种单一类型的只针对(zhēnduì) 某一特定抗原决定簇的抗体分子，就是单 克隆抗体。
4.22 杂种 细胞 (zázhǒng)
在植物育种中的应用
杂种细胞是一条新的育种途径，
可以产生新经济性状的良种。 科学家已经在禾本科、茄科、豆
科、十字花科等植物中得到了杂 种再生植株。 一些近亲(jìnqīn)植物、有性不亲和 的组合，如马铃薯×番茄等都得 到了再生植株。
细胞融合-与-单克隆抗体
第十九页，共六十二页。
2）营养互补筛选系统：细胞在缺乏一种 或几种营养成分时，不能生长(shēngzhǎng)繁殖， 即营养缺陷型细胞。利用两种亲本细胞营 养互补作用原理可以筛选杂种细胞。
亲本A：色氨酸缺陷型
亲本B：苏氨酸缺陷型 杂种细胞可以在不含色氨酸和苏氨酸的培
细胞融合-与-单克隆抗体
第十页，共六十二页。
甜菜(tiáncài)原生质体电融合过程
1）在高频电流电场 下的相互接触(jiēchù)。 2）脉冲刺激后30s 3)50秒后 4）1.5分钟后 5）6分钟后 6）15分钟后，原生质
体融合完成。
细胞融合-与-单克隆抗体
第十一页，共六十二页。
注意事项
1）对介质要求高，一般用高纯度的蒸馏水 并选用(xuǎnyòng)适当的非电介质溶液，如甘露 醇等配制等渗性介质。
稳定区（C区）
细胞融合-与-单克隆抗体
第三十页，共六十二页。
人体内的五种 抗体 (wǔ zhǒnɡ)
细胞融合-与-单克隆抗体
第三十一页，共六十二页。
4.32单克隆抗体(kàngtǐ)的制备
单克隆抗体(monoclonal antibody，简称
McAb)：将能够产生抗体的B淋巴细胞和具 有无限增殖力的骨髓瘤细胞融合在一起， 形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能在体 外快速生长，又能持续分泌成分单一的 特异性抗体。这种单一类型的只针对(zhēnduì) 某一特定抗原决定簇的抗体分子，就是单 克隆抗体。
新教材高中生物第2章第2节动物细胞工程：动物细胞融合技术与单克鹿体pptx课件新人教版选择性必修3
正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞
一、动物细胞工程 2.动物细胞融合
1965年，研究证实了灭活的病毒在适当条件下确实可以诱导动物细胞融合。
一、动物细胞工程
2.动物细胞融合
病毒的灭活 ：灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能 力，但是并不破坏病毒的抗原结构。
仙台病毒
紫外线 灭活
丧失感染活性（不感染细胞） 保留融合活性（诱导细胞融合）
讨论： 1.但如何才能让两个不同的细胞融合? 2.细胞融合技术在生产实践中有哪些应用?
一、动物细胞工程 2.动物细胞融合
动物细胞融合技术的发展历史
时间
19世纪30年代 1858年 1875年 1876年 1962年 1965年 1974年
1975年
20世纪80年代
成果
观察到肺结核、天花、水痘、麻疹等疾病患者的病理组织中有多核细胞 观察到正常组织、发炎组织以及肿瘤组织中的多核细胞现象。 第一个观察到脊椎动物（蛙类）的血液细胞发生融合的过程。 在无脊椎动物中发现了细胞合并现象。 日本学者冈田发现仙台病毒具有触发动物细胞融合的效应。 英国科学家证实了灭活的病毒可诱发动物细胞融合 华裔加拿大学者高国楠创立了聚乙二醇（PEG）化学融合法。 Kohler和Milstein成功地融合了小鼠B-淋巴细胞和骨髓瘤细胞而产生能分 泌稳定单克隆抗体的杂交瘤细胞。 发展出了电融合技术(1985年酵母原生质体电融合)
思考：诱导融合后的细胞一定具有双方的遗传信息吗？为什么？
不一定，诱导A、B两种细胞融合，融合后可能有A、B未 融合细胞及AA、AB、BB等多种细胞，因此细胞融合后需 要进行筛选。
一、动物细胞工程 2.动物细胞融合
(5)意义： ①突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 ②成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要 手段。 ③利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体 开辟了新途径。
细胞融合与单克隆抗体
子、同一抗原、同一细胞上不同抗原决定簇 的单克隆抗体。 ▶ 对某一抗原而言，可能存在多种单克隆抗体。
41
二、单克隆抗体技术：
1. 免疫动物
2. 脾细胞分离
3. 骨髓瘤细胞的准备 4. 细胞融合 5. 融合细胞的筛选与 克隆
6. 单克隆抗体的大量 制备
42
1. 免疫动物：
▶ 免疫动物的目的是希望B细胞在抗原刺 激下分化增殖，使之有利于融合成杂交 瘤细胞，尤其是能分泌特异性抗体的杂 交瘤融合细胞频率增加。 ▶ 动物选择应与骨髓瘤细胞来源相同的同 一品系动物，多为BALB/c小鼠。
• 融合率高，可达50%~80%；
• 可用于细胞数量很少的融合；
• 可定向诱导细胞融合;
• 有利于融合细胞的挑选。
26
电融合的不利之处：
• 融合仪价格昂贵； • 两细胞大小差异较大时，电压较难选择； • 融合膜成分不同时细胞较难融合
27
二、融合细胞的筛选
▶ 在细胞融合过程中，不仅两类不同细胞间发
异核细胞、尤其双核异核细胞会存活。并 通过有丝分裂使两个不同亲本细胞的染色 体合并在一个细胞核中，形成杂交细胞。
▶ 利用酶缺陷型、营养缺陷型、温度敏感性、
形态和行为等标志，建立了多种选择选择 系统，最常用的是酶缺陷型HAT选择培养 法。
29
1. HAT选择系统（酶缺陷型）
• HAT系统为次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A) 和胸腺嘧啶核苷(T)的缩写。它是根据嘌 呤和嘧啶生物合成途径设计的分离杂种 细胞特殊的培养基。
第三章
细胞融合与
单克隆抗体
1
第一节 细胞融合
2
细胞融合(cell fusion)：又称体细胞
杂交(somatic hybridization)或细胞杂交
41
二、单克隆抗体技术：
1. 免疫动物
2. 脾细胞分离
3. 骨髓瘤细胞的准备 4. 细胞融合 5. 融合细胞的筛选与 克隆
6. 单克隆抗体的大量 制备
42
1. 免疫动物：
▶ 免疫动物的目的是希望B细胞在抗原刺 激下分化增殖，使之有利于融合成杂交 瘤细胞，尤其是能分泌特异性抗体的杂 交瘤融合细胞频率增加。 ▶ 动物选择应与骨髓瘤细胞来源相同的同 一品系动物，多为BALB/c小鼠。
• 融合率高，可达50%~80%；
• 可用于细胞数量很少的融合；
• 可定向诱导细胞融合;
• 有利于融合细胞的挑选。
26
电融合的不利之处：
• 融合仪价格昂贵； • 两细胞大小差异较大时，电压较难选择； • 融合膜成分不同时细胞较难融合
27
二、融合细胞的筛选
▶ 在细胞融合过程中，不仅两类不同细胞间发
异核细胞、尤其双核异核细胞会存活。并 通过有丝分裂使两个不同亲本细胞的染色 体合并在一个细胞核中，形成杂交细胞。
▶ 利用酶缺陷型、营养缺陷型、温度敏感性、
形态和行为等标志，建立了多种选择选择 系统，最常用的是酶缺陷型HAT选择培养 法。
29
1. HAT选择系统（酶缺陷型）
• HAT系统为次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A) 和胸腺嘧啶核苷(T)的缩写。它是根据嘌 呤和嘧啶生物合成途径设计的分离杂种 细胞特殊的培养基。
第三章
细胞融合与
单克隆抗体
1
第一节 细胞融合
2
细胞融合(cell fusion)：又称体细胞
杂交(somatic hybridization)或细胞杂交
高中生物单克隆抗体制备(共38张PPT)
2、它相当于植物体细胞杂交过 程的哪一步？ 3、它们的过程、基本原理、诱 导融合方法和意义是否相同？
1.1动物细胞融合的概念
鼠B淋巴细胞 鼠骨髓瘤细胞
人工诱导
动物细胞融合（细胞杂交）
是指（在一定的条件下）两
个或多个细胞结合形成一个
细胞（该单核细胞称为杂交
细胞）的过程。
杂交瘤细胞
问题：1、它相当于植物体细胞杂交过 程的哪一步？ 2、它们的过程、基本原理、诱 导融合方法和意义是否相同？
单克隆 抗体
注射抗原
效应B细胞
骨髓瘤细胞
融合
3.若细胞两两融合后， 有几种融合情况？
选择性培养基 筛选1 克隆化
多种杂 交细胞
抗原-抗体 杂交法
筛选2（有限稀释）
单克隆 抗体
注射抗原
效应B细胞
骨髓瘤细胞
融合
4.第一次筛选出的杂交瘤
细胞为何需进行克隆化培
选择性培养基 筛选1
养和专一抗体检测？
多种杂
（ 特异性强、灵敏度高，可大量制备）
（4）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的 迅速（ 大量增殖 ）特点，又具备淋巴细胞 的（ 分泌专一抗体）特点，经过选择性培养 的杂交瘤细胞，还需进行（ 克隆化培养 ） 和（ 抗体检测 ），经多次筛选，就可获得足
够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后将杂 交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或小 鼠腹腔内增殖，从（ 细胞培养液 ）或 （ 小鼠的腹水 ）中，就可以提取出大量 的单克隆抗体了。
一个效应bb细胞只分泌一种特异性抗体杂交瘤细胞动物细胞培养技术44单克隆抗体的制备方案动物细胞融合技术单克隆抗体既能产生特异性抗体又能大量繁殖的细胞一个骨髓瘤细胞能无限增殖制备单克隆抗体1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验5单克隆抗体制备过程步骤注射抗原效应bb细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞选择性培养基筛选11抗原抗体杂交法克隆化单克隆抗体筛选22有限稀释1
1.1动物细胞融合的概念
鼠B淋巴细胞 鼠骨髓瘤细胞
人工诱导
动物细胞融合（细胞杂交）
是指（在一定的条件下）两
个或多个细胞结合形成一个
细胞（该单核细胞称为杂交
细胞）的过程。
杂交瘤细胞
问题：1、它相当于植物体细胞杂交过 程的哪一步？ 2、它们的过程、基本原理、诱 导融合方法和意义是否相同？
单克隆 抗体
注射抗原
效应B细胞
骨髓瘤细胞
融合
3.若细胞两两融合后， 有几种融合情况？
选择性培养基 筛选1 克隆化
多种杂 交细胞
抗原-抗体 杂交法
筛选2（有限稀释）
单克隆 抗体
注射抗原
效应B细胞
骨髓瘤细胞
融合
4.第一次筛选出的杂交瘤
细胞为何需进行克隆化培
选择性培养基 筛选1
养和专一抗体检测？
多种杂
（ 特异性强、灵敏度高，可大量制备）
（4）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的 迅速（ 大量增殖 ）特点，又具备淋巴细胞 的（ 分泌专一抗体）特点，经过选择性培养 的杂交瘤细胞，还需进行（ 克隆化培养 ） 和（ 抗体检测 ），经多次筛选，就可获得足
够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后将杂 交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或小 鼠腹腔内增殖，从（ 细胞培养液 ）或 （ 小鼠的腹水 ）中，就可以提取出大量 的单克隆抗体了。
一个效应bb细胞只分泌一种特异性抗体杂交瘤细胞动物细胞培养技术44单克隆抗体的制备方案动物细胞融合技术单克隆抗体既能产生特异性抗体又能大量繁殖的细胞一个骨髓瘤细胞能无限增殖制备单克隆抗体1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验5单克隆抗体制备过程步骤注射抗原效应bb细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞选择性培养基筛选11抗原抗体杂交法克隆化单克隆抗体筛选22有限稀释1
人教版教学课件动物细胞融合与单克隆抗体(共20张PPT)
培养液中或小鼠腹腔中培养 从培养液或小鼠腹水中提
如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？
融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的 细胞就是杂交瘤细胞。 但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞， 通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释， 用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个， 通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分 泌的抗体。那些上清液可与特定抗原结合的培养 孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单 个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一 般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为 单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。
产生相应的B淋巴细 效应B淋巴细胞 胞
融合
培养骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞
多种杂交细胞
（只考虑两两融合） 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细 培养液中细胞有几 胞 种类型？融合细胞 在具有筛选作用的培养基上培养 几种类型？ B淋巴细胞--- B淋巴细胞
专一抗体检验阳性 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 克隆上述杂交细胞
注射到小鼠体内
设计方案：
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖
动物细胞融合技术 单克隆 动物细胞培养技术 杂交瘤细胞 抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量繁殖的细胞
(1)、原理：杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能
迅速大量增殖，又能足够数量的单一抗体。
(2)、过程
1、单克隆抗体的制备过程
注射特定 抗原蛋白
5、动物细胞融合过程
不同DNA的两个细胞
灭活病毒诱导细胞融合
融合后的细胞 进行有丝分裂
6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交 （种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 7、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物 新品种培育等的重要手段
【高中生物】动物细胞融合技术与单克隆抗体+课件+高二下学期生物人教版选择性必修3 - 副本
2、单克隆抗体的制备过程
杂交瘤细胞(多种)
克隆化培养
第二次筛选 抗体检测 (抗原-抗体杂交技术)
阳性细胞
能分泌所需抗体 的杂交瘤细胞
二 单克隆抗体及其应用
2、单克隆抗体的制备过程 能分泌所需抗体 的杂交瘤细胞
体内或体外培养
注射到小鼠腹腔
体外培养 单克隆抗体
二 单克隆抗体及其应用
筛选原理：
①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。 ②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖。 ③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能不断分裂增殖。
张林琦教授团队
二 单克隆抗体及其应用
3、单克隆抗体的应用
3、运载药物 ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成。阅读教材50页
思考：ADC的抗体和药物各具有什么作用？ 抗体主要发挥靶向运输作用；药物发挥治疗效应，如杀伤靶细胞。
二 单克隆抗体及其应用
3、单克隆抗体的应用
对点训练
下列有关动物细胞融合与植物体细胞杂交比较的叙述，错误的是 （） A. 它们的原理都涉及细胞膜的流动性 B. 都可以用电融合法或PEG融合法诱导融合
克服远缘杂交不亲和障碍
物理方法、化学方法、灭活病毒 形成杂种细胞
二 单克隆抗体及其应用
抗体
1.定义：机体受抗原刺激后产生的，能与该抗原发 生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
12）.抗每体个的B分淋布巴：细胞只分泌一种特异性的抗体
1）血清（主要） 22））体组内织产液生及的外特分异泌性液抗（体如种乳类汁多中达）百万种以上
二 单克隆抗体及其应用
2、单克隆抗体的制备过程 注射特定抗原
多种已免疫 B淋巴细胞
杂交瘤细胞(多种)
克隆化培养
第二次筛选 抗体检测 (抗原-抗体杂交技术)
阳性细胞
能分泌所需抗体 的杂交瘤细胞
二 单克隆抗体及其应用
2、单克隆抗体的制备过程 能分泌所需抗体 的杂交瘤细胞
体内或体外培养
注射到小鼠腹腔
体外培养 单克隆抗体
二 单克隆抗体及其应用
筛选原理：
①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。 ②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖。 ③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能不断分裂增殖。
张林琦教授团队
二 单克隆抗体及其应用
3、单克隆抗体的应用
3、运载药物 ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成。阅读教材50页
思考：ADC的抗体和药物各具有什么作用？ 抗体主要发挥靶向运输作用；药物发挥治疗效应，如杀伤靶细胞。
二 单克隆抗体及其应用
3、单克隆抗体的应用
对点训练
下列有关动物细胞融合与植物体细胞杂交比较的叙述，错误的是 （） A. 它们的原理都涉及细胞膜的流动性 B. 都可以用电融合法或PEG融合法诱导融合
克服远缘杂交不亲和障碍
物理方法、化学方法、灭活病毒 形成杂种细胞
二 单克隆抗体及其应用
抗体
1.定义：机体受抗原刺激后产生的，能与该抗原发 生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
12）.抗每体个的B分淋布巴：细胞只分泌一种特异性的抗体
1）血清（主要） 22））体组内织产液生及的外特分异泌性液抗（体如种乳类汁多中达）百万种以上
二 单克隆抗体及其应用
2、单克隆抗体的制备过程 注射特定抗原
多种已免疫 B淋巴细胞
动物体细胞融合与单克隆抗体
）
D．离心
骨髓 造血干 1.淋巴细胞是由动物体---------------------中的---------------------细胞分化发育而 来的。 主动运输 2.杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是---------------------
三.思考与探究 1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同？
4.下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破 伤风杆菌的实验方案
A
制备单克隆抗体 (1).该实验方案的目的是：________________ (2).该方案能达到预期效果吗？为什么？ 不能，没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产 生单一抗体的B淋巴细胞。 (3).A是从小鼠的脾脏中取得__________ 该细胞能 B淋巴细胞 抗体 够产生______ 。 细胞融合 (4).图中B为________________过程，常用 灭活的病毒 _________________作为诱导剂，该细胞继承 ___________的遗传特性，既能__________,又能 双亲细胞 分泌抗体 无限增殖 ___________。
教学反馈
1.动物细胞融合技术最重要的用途是 （ B A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞
2.单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 （ A.B淋巴细胞 B.T淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D.杂交瘤细胞 ）
）
D
3.（多选）1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。下列细胞中与单 克隆抗体的制备有关的是 （ A B C D） A.效应B细胞 C.骨髓瘤细胞 B．T淋巴细胞 D．杂交瘤细胞
免疫小鼠
培养骨髓瘤细胞
注射特定 抗原蛋白
单克隆抗体制备过程示意图
2.2-2 动物细胞工程——动物细胞融合技术与单克隆抗体-高二生物课件(人教版2019选择性必修3)
课后习题·拓展应用
假如你掌握了动物细胞融合技术，你想用这种技术来解决哪些问题? 解决这些问题的大致思路是怎样的?这样做会有什么风险?请查阅相关 资料，完善自己的思路，并形成文字报告，与同学交流。
提示：可以利用动物细胞融合技术培育多倍体胚胎，研究其发育机制，甚至可能 培育出新的物种。但是，目前相关技术还不成熟，存在融合率低、胚胎死亡率高 等问题，并且还可能带来一些伦理方面的问题。
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 ↓
细胞膜被病毒颗粒穿通 ↓
细胞膜连接 ↓
细胞核融合，形成杂交细胞
相关信息
灭活病毒诱导细胞融合的原理
病毒表面的糖蛋白和一些酶与细胞膜上 的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚， 细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新 排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
➢ 请同学们看图对比动物和植物细胞融合的异同：
二、单克隆抗体及其应用
1.单克隆抗体的优点
单克隆抗体能准确地识别 抗原的细微差异，与特定 抗原发生特异性结合，并 且可以大量制备
二、单克隆抗体及其应用
2.单克隆抗体的应用
（1）作为诊断试剂——最广泛的应用
抗人绒毛促性腺激素单克隆抗体
比原来诊断方法提前了10d左右， 准确率在90﹪以上。
具有准确、高效、简易、快速特点
第一次筛选 置于选择性培养基上培养
多种杂交 瘤细胞
1
2
3
杂交瘤细胞
二、单克隆抗体及其应用
2.单克隆抗体制备过程
克隆化培养
多种杂交瘤细胞
第二次筛选 抗体检测 (抗原-抗体杂交技术)
能分泌所需抗体 的杂交瘤细胞
阳性细胞
二、单克隆抗体及其应用
2.单克隆抗体制备过程
能分泌所需抗体 的杂交瘤细胞
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比较项目
植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理
细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 细胞膜的流动性
去除细胞壁后诱 使细胞分散后诱 细胞融合的方法 导原生质体融合 导细胞融合
诱导方法
物理（离心、振动、物理、化学方法
电刺激）
（同左）
化学（聚乙二醇） 灭活的病毒
用途
获得杂种植株
主要用于制备 单克隆抗体
下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤
通过长期的实验，科 学家们采用体细胞杂交 技术获得了“番茄—马 铃薯”植株。
“番茄—马铃薯”理想图
植物体细胞杂交技术过程
植物细胞的融合
植物组织培养
植物细胞A 方法？
融合 完成
去壁
的 标志
原生质体A 原生质体B
去壁
融合的 杂种
愈
原生质
人 工
体AB
诱
导
再 生 出 细
细胞
AB
脱 分
化
伤 组 织
植物细胞B
胞
促进融合 壁
的方法？
杂
种
再植
分 化
株
成果和未解决的问题
成果：克服不同生物远缘杂交的障碍，出 现自然界没有的新品种。
未解决的问题：未能让杂种植物按照人们 的需要表现出亲代的优良。
如果将牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶 牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶啦！
动物细胞也能融合吗？
一、动物细胞融合
一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这 个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发 育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途， 但是不能
D A．有选择地繁殖某一性别的家畜 B．繁殖家畜中的优秀个体 C．用于保存物种 D．改变动物的基因型
下列哪—项属于克隆
D
A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中
诱导剂：仙台病毒、聚乙二醇 诱导细胞融合的仙台病毒必须灭活。
思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的 病毒需要灭活？不灭活行吗？
因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂 质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭 活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。
细胞融合技术应用于哪些方面？ 细胞学、遗传学、免疫学及制备单克隆抗体。
由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所 以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单 克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义， 只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。）
3.单克隆抗体的应用：
①作为诊断试剂 特异性高、灵敏度高等优越性。
②用于治疗疾病和运载药物 生物导弹
植物、动物细胞融合的比较
不能
6、你能归纳出什么叫做动物细胞融合吗？
2、动物细胞融合的概念
动物细胞融合也称细胞杂交， 是指两个或多个动物细胞形成一 个细细胞融合有哪些方面的应用吗？ 利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞
8、在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用？ 生产单克隆抗体
细胞融合与融合诱导细胞融合物质：
再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易
成功“复生”野驴的方法是
C
A．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分 化、再分化，培育成新个体 B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新 个体 C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中， 经孕育培养成新个体 D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体
B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内
C．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤
风杆菌的实验方案
A
1、该实验方案的目的是_制__备__单__克__隆_ 抗体
骨髓瘤细胞 B
杂交瘤细胞
2、A是从小鼠的脾脏中取得
C
__B_细__胞__,该细胞能够产生_抗__体___
3、图中B为_细__胞__融__合_过程，常用 足够数量的细胞群 _灭__活__病__毒__作为诱导剂，该细胞继
承__双__亲__细__胞___的遗传特性，既能 _分__泌__抗__体___,又能__无__限__增__殖___。
体外培养
注射到
4、C过程指细胞培养，该过程包括
小鼠腹腔
_原__代__培养和_传__代__培养两个阶段。
下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是 A.培养基成分不同
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 A
C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能 D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株
杂种细胞
浆细？胞
抗？原
二、单克隆抗体
2.制备过程：
诱导其融合的 方法有哪些？
细胞融合后培养液中有几种细胞？ B BB B瘤 瘤瘤 瘤 筛选（特定的 选择性培养基）
杂种细胞
整个制备过程要经过几次筛选?
（第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种），
第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤 细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性 抗体的细胞群。
细胞A
细胞B
物理法 化学法
仙台病毒 灭活的病毒 疱疹病毒
杂交细胞
新城鸡瘟病毒
1、动物细胞融合过程
不同DNA的两个细 胞 灭活病毒诱导细胞融合
融合后的细胞 进行有丝分裂
思考题
1、植物体细胞杂交前做何处理？怎么处理？
去壁
酶解法，如纤维素酶或果胶酶
2、动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？
无需，因为动物细胞无细胞壁
下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是 C
A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素 和动物血清 B．原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞 C．动物细胞培养一般能够传到40～50代，但其遗传物质 发生了改变 D．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身 健康细胞
生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不
二、单克隆抗体
提 问
1.抗体是由何种细胞产生的？
2. 如何得到抗体？
？
二、单克隆抗体
1、抗原
刺激
浆细胞 动物体内
抗体
2、特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏
抗原 刺激
浆细胞
动物体内
抗体
抗原不纯
抗体不纯
筛选单一浆细胞
不能增殖产生大量抗体
二、单克隆抗体
如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？ 设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖
3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？ 离心、振动、电激等物理方法；PEG等化学方法
思考题
4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法？ 能 还可以利用灭活的病毒进行诱导
5、植物体细胞杂交过程应先进行原生质体融合再进行 组织培养形成完整的个体，动物细胞融合后能形成杂种 动物个体吗？