动物细胞融合ppt课件

形成杂种植株
形成杂种细胞， 生产细胞产品
培育新品种
制备单克隆抗体、病 毒疫苗、干扰素等
意义 突破有性杂交方法的ppt课局件.限，使远缘杂交成为可1能3
1、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确
的是 D
A．诱导融合的方法完全相同
B．所用的技术手段完全相同
C．所采用的原理完全相同
D．都能形成杂种细胞
多种杂交细胞
筛选 选择性培养基
杂交瘤细胞
筛选 抗体阳性检测
克隆化培养(动物细胞培养技术)
足够数量的、能产生特定抗体的杂交瘤细胞群
体外培养 培养液 注射到小鼠腹腔 小鼠腹水
单克pp隆t课件抗. 体
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制备单克隆抗体过程中两次筛选
• 第一次筛选是将未融合的B淋巴细胞、骨髓 瘤细胞以及BB融合、瘤瘤融合的细胞通过 选择培养基淘汰，筛选出杂交瘤细胞。
有丝分裂
杂交细胞AB
注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在 一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞。
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5、意义：
突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交 （种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。
6、应用：
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新 品种培育等的重要手段。 特别是利用杂交瘤技术制备单克隆抗体。
选修3 现代生物科技专题 2.2 细胞工程
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
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通过长期的实验，科学家们 采用植物体细胞杂交技术获得了 “番茄—马铃薯”植株。
“番茄—马铃薯”（理想图）
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植物体细胞杂交技术
过程
植物细胞A 纤果维胶方素酶法酶等？、
去壁
原生质体A
原生质体B
去壁
• 第二次筛选是将产生特定抗体的杂交瘤细 胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛 选出来。因为从体内取免疫过的B淋巴细胞 时可以取出很多种，因此形成的杂交瘤细 胞也有很多种，所以需筛选出产生特定抗 体的杂交瘤细胞。
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2、诱导方法
物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒
病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞 膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚， 细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布， 细胞膜打开，细胞发生融合。
举例： 仙台病毒 紫外线
丧失感染性
保留融合活性 （诱导细胞融合）
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植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
比较项目 原理
植物体细胞杂交
动物细胞融合
细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性 细胞的全能性
细胞融合前 去除细胞壁后诱导 使细胞分散后
的处理 原生质体融合
诱导细胞融合
诱导方法 结果 用途
物理（离心、振动、 物理、化学方法 电刺激）化学（PEG） 灭活的病毒
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动物细胞的全能性会 随着动物细胞分化程 度的提高而逐渐受到 抑制，分化潜能逐渐 变弱
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动物 细胞 工程 常用 技术
动物细胞培养技术 动物细胞核移植技术 动物细胞融合技术 制备单克隆抗体技术
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思考题
1.植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？
酶解法，如纤维素酶或果胶酶
成完整的杂种个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体
吗？
不能，只能形成杂种细胞 ppt课件.
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一、动物细胞融合技术
1.概念： 动物细胞融合（cell fusion）也称为细胞杂交，
是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传物质的 单核细胞，称为杂交细胞。
结果：“2个或多个动物细胞”→“1个杂交单核细胞””
植物细胞B
融合的 杂种
原生质
人 工
体AB
再 生
诱 筛选 出
细胞 AB
脱 分 化
愈 伤 组 织
导
细
胞
壁
物理法：离心、振动ppt、课件电. 激等 化学法：聚乙二醇等试剂
杂 再种 分植 化株
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如果将奶牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小 奶牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶吗？
动物细胞也能融合吗？
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抗原
刺激
B淋巴细胞
增殖分化效应B 细胞
分泌 抗体
反复注射抗原
（浆细胞）产量低、纯度低
不能无限增殖
抗体特异性差
克隆单一的效应B细胞
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米尔斯坦和科勒 1、设计方案：
一个B淋巴细胞——只分泌一种特异性抗体
小鼠骨髓瘤细胞——能无限增殖
杂交细胞
继承了双亲细胞的遗传物质：
既能无限增殖，又能产生特异性抗体
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2、下列关于动物细胞融合，叙述正确的是 D
A．动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细 胞遗传信息的双核或多核细胞称为杂交细胞
B．原理是细胞的全能性 C．打破生殖障碍，使远缘杂交成为现实 D．常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、离心等
3、动物细胞融合的目的中最重要的是 B
A.克服远缘杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新品种 D.生产杂种细胞
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用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程
灭活的病毒颗粒黏附于 细胞表面
病毒颗粒 细胞核
细胞核
细胞膜被病毒颗粒穿通
细胞膜连接
细胞融合，形成单核杂交细胞
原理：细胞膜具有一定的p流pt课动件. 性
有丝分裂
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3、原理： 细胞膜的流动性 4、过程：
动物细胞A 动物细胞B
诱导，融合（膜融合、质融合、核融合）
2、制备过程：
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抗原注入小鼠体内
分离
经过免疫的B淋巴细胞
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骨髓瘤细胞
细胞融合
杂交瘤细胞
细胞培养
选择培养细胞
注入小鼠
培养基
体内培养
体外培养
从腹水提取
单克隆抗体
从培养液提取
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抗原（羊的红细胞）注射到小鼠体内
获取经过免疫的B淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞
灭活的病毒、 PEG
融合
(动物细胞融合技术)
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二、制备单克隆抗体技术
1.什么是抗体？ 2.主要分布在哪里？ 3.由什么细胞产生
提问
？
抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原 发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
主要分布在血清中，也分布于组织液及外分泌液中。
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4. 传统抗体的生产方法及缺陷？
每一个浆细胞只能分泌一种抗体
2.动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？
无需，因为动物细胞无细胞壁 可用胰蛋白酶将细胞分散
3.植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？
离心、振动、电激等物理方法；聚乙二醇等化学方法
4.动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？
能 还可以利用灭活的病毒进行诱导
5.植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形