(人)胰蛋白酶
胰蛋白酶的作用
胰蛋白酶的作用胰蛋白酶是一种消化酶，主要存在于人体的胰腺中，它在消化过程中起着非常重要的作用。
胰蛋白酶可以分解蛋白质，将其分解为更小的肽链和氨基酸，以供人体吸收利用。
胰蛋白酶的作用主要发生在小肠中。
当我们进食时，胃中的食物经过胃酸和胃蛋白酶的作用，在胃中被分解成较小的颗粒，称为胃糜。
胃糜进入小肠后，胰腺会分泌胰蛋白酶及其他消化酶，对蛋白质进行进一步的分解。
胰蛋白酶主要分为三类：胰蛋白酶A（trypsin）、胰蛋白酶B （chymotrypsin）和胰蛋白酶C（carboxypeptidase）。
胰蛋白酶A主要负责将蛋白质分解成肽链，它的作用比较特殊，只能在肽链中的精氨酸和组氨酸两种氨基酸的右侧进行切割，因此其作用非常具有特异性。
胰蛋白酶B主要负责将肽链进一步分解为更小的肽链或者独立的氨基酸。
它的特点是能够剪断任意氨基酸，因此其作用较为广泛。
胰蛋白酶C主要负责将肽链的末端氨基酸逐一剪断，直到剪断到只剩一个氨基酸为止。
这种剪断方式使胰蛋白酶C具有消化肽链的能力，并在各类消化酶中扮演者重要的角色。
胰蛋白酶通过将蛋白质分解为更小的分子，使其更容易被人体吸收。
分解出来的小分子，如氨基酸，通过小肠黏膜上的转运蛋白进入肠道细胞，并通过肠道细胞膜内部的进入血液循环。
这样，蛋白质得以被人体吸收和利用，提供能量和维持生命的必要物质。
总结起来，胰蛋白酶在人体内的作用非常重要。
它能将蛋白质分解为更小的分子，方便人体吸收和利用。
胰蛋白酶的特异性和广泛性作用，使其在消化过程中不可或缺。
只有在胰蛋白酶的作用下，蛋白质才能被有效地分解和吸收，为身体提供足够的营养和能量。
因此，保持胰腺的健康和胰蛋白酶的正常分泌，对于人体的消化功能和健康至关重要。
胰蛋白酶
基本信息
物化性质
胰蛋白酶是从牛、猪、羊的胰脏提取，纯化获得的结晶，再制成的冻干制剂。易溶于水，不溶于三氯甲烷、 乙醇、乙醚等有机溶剂。在pH1.8时，短时间煮沸几乎不失活；在碱溶液中加热则变性沉淀，Ca2+有保护和激活 作用，胰蛋白酶的等电点为pH10.1。
牛胰蛋白酶原有229个氨基酸组成，含6对二硫键，其氨基酸排列顺序和晶体结构已被阐明。在肠激酶活自身 催化下，酶原的N末端赖氨酸与异亮氨酸残基之间的肽键被水解，释放出来缬-天-天-天-天-赖6肽，生成有活性 的胰蛋白酶。牛的胰蛋白酶氨基酸残基223个，分子量23800 ，活性部位的丝氨酸残基是不可缺少的丝氨
胰蛋白酶能使痰、血凝块溶化变稀，易于引流排痰，加速创面愈合净化，促进肉芽组织增生，而不损伤正常 组织，临床上有消炎消肿功能。
其他
细胞培养
胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。 胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在 pH为 8.0、温度为 37℃时，胰酶溶液的作用能力最 强。使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+、 Mg2+和血清、蛋白质可 降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含 Ca2+、 Mg2+的 BSS，如： D-Hanks液。终止消化时，可用 含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。
1.用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤、娄管等所产生的局部水肿、血肿、脓肿。 2.用于呼吸道疾患溶解黏痰和脓性痰。 3.用于治疗毒蛇咬伤，曾试用于竹叶青、银环蛇、眼镜蛇、蝮蛇等毒蛇咬伤的各型病人800余例，均获治愈。
1.肝肾出血、出血倾向及结核性脓肿患者禁用。 2.不可用于急性炎症及出血空腔中。
胰蛋白酶 药典标准
胰蛋白酶药典标准胰蛋白酶是一种消化酶，被广泛应用于临床医学中治疗消化系统疾病，如胰腺炎、胰腺癌、胃肠手术后等。
药典标准是评定药品质量的重要参考，下面将详细介绍胰蛋白酶的药典标准。
胰蛋白酶的药典标准主要包括国际药典（比如美国药典、欧洲药典）和中国药典两个方面。
这些药典标准规定了胰蛋白酶的质量要求、生产工艺以及检测方法等方面。
以下是对其中几个重要药典标准的介绍：1.国际药典：美国药典和欧洲药典规定了胰蛋白酶的质量要求。
例如，美国药典规定了胰蛋白酶的单位活性应满足特定标准，比如1 USP单位相当于3.6微克胰蛋白酶，并规定了对其它微生物污染的限制。
2.中国药典：中国药典对胰蛋白酶的质量要求与国际药典接近，但有些细节的要求有所不同。
例如，中国药典规定了胰蛋白酶的酶活力不得低于10,000 USP单位/g，并规定了胰蛋白酶的酶活性测定方法。
药典标准还要求生产工艺和质量控制方面的要求。
生产工艺包括胰蛋白酶的提取、纯化、浓缩和干燥等，要求按照良好的制造规范进行操作。
质量控制方面要求对原辅材料进行严格检测，确保其质量符合标准，并要求对成品进行全面检测，确保其有效成分含量符合规定。
胰蛋白酶的标准化是确保其质量和疗效的关键。
通过遵循药典标准，可以保证不同厂家生产的胰蛋白酶具有相同的活性，并且可以使医生和患者更容易比较不同品牌或批次的胰蛋白酶的治疗效果。
总结起来，胰蛋白酶作为一种重要的消化酶，其药典标准规定了胰蛋白酶的质量要求、生产工艺和检测方法等方面。
通过遵循这些标准，可以确保胰蛋白酶在临床应用中的质量和疗效，促进患者的康复。
医生和患者可以放心使用符合药典标准的胰蛋白酶，获得更好的治疗效果。
人胰蛋白酶原料
人胰蛋白酶的主要原料来自于牛、猪、羊的胰脏。
通过多重结晶方式纯化，并进一步采取层析及超滤技术制备而得。
该酶易溶于水，不溶于三氯甲烷、乙醇、乙醚等有机溶剂。
在pH1.8时，酶短时间煮沸几乎不失活，在碱溶液中加热则会变性沉淀。
Ca2+对酶有影响，可增强其活性。
此外，还有一种由重组大肠杆菌表达的重组人胰蛋白酶，其氨基酸序列与人胰蛋白酶完全一致。
这种重组胰蛋白酶也具有与动物源性猪胰蛋白酶相同的酶学性质，可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中。
值得注意的是，胰蛋白酶易受丝氨酸蛋白酶抑制剂如 PMSF，抑肽酶等抑制，金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。
所以在使用胰蛋白酶时，需要选择合适的抑制剂和反应条件。
胰蛋白酶活性测定
实验一胰蛋白酶活性测定实验目的：掌握测定胰蛋白酶浓度、活性、比活的原理与方法。
实验原理：胰蛋白酶相对分子量23.7 KD，主要水解肽链中碱性氨基酸与其它氨基酸相连接的肽键，此外还能水解碱性氨基酸形成的酯键，如把人工合成的N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（N-benzuyl-L-argine ethyl ester, BAEE）水解为H-苯甲酰-L-精氨酸（BA）。
胰蛋白酶所催化的上述反应中，产物BA对253 nm 的光吸收远大于BAEE，因此可以在实验起始点把253 nm 的消光值调为零，然后记录反应体系对253 nm 的消光值的增量，并把这个增量作为测定胰蛋白酶的活性指标。
酶活单位定义：在底物BAEE浓度1m mol/L，光程1 cm，波长253nm，温度25 0C，测量体积3mL,.条件下吸光值每分钟递增0.001（ A/min=0.001）为1个BAEE酶活单位。
胰蛋白酶制剂中蛋白质浓度含义：胰蛋白酶含量一般E1%表达。
这个值的含义是：浓度为1% 酶蛋白，在1cm光径下，对紫外280nm 的消光值。
不同厂家、不同产品的E1%值有很大差别。
E1% 值越高，表明酶制剂中酶蛋白含量越高。
由于酶制剂中蛋白质含量各不相同，所以用酶制剂配制E1%的蛋白质溶液时，按照厂家对产品的E1% 的测定值配制溶液。
在本实验中，胰蛋白酶酶蛋白样品采用SIGMA 公司生产的产品,生产公司对展品的描述是对280nm紫外吸收值15.3，配制胰蛋白酶标准溶液可根据厂家的这个说明。
器材以试剂：器材，电子天平，紫外分光光度计，微量加样器。
试剂：标准胰蛋白酶，N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯，HCI, Tris。
1．胰蛋白酶活性测定：1）配制E1%的胰蛋白酶溶液每组取E1%=15.3的胰蛋白酶样品10mg 放到1ml去离子水中，充分溶解后，放入冰中保存。
2)按照表1 的要求配制试验体系所需其它各种溶液.3)按照表1的顺序进行测定标准胰蛋白酶的活性。
食品级胰蛋白酶用途_概述及解释说明
食品级胰蛋白酶用途概述及解释说明1. 引言1.1 概述胰蛋白酶作为一种重要的酶类物质，在食品工业中具有广泛的应用价值。
它是由胰腺分泌的消化酶，主要用于食物蛋白质的分解和消化吸收。
随着人们对食品健康与营养需求的不断提高，对于食品加工过程中使用安全有效的酶类辅助剂的需求也越来越大。
食品级胰蛋白酶就是针对这一需求而设计开发出来的一种优良产品。
本文将对胰蛋白酶进行基础概念介绍，包括定义、分类和作用机制等方面内容。
同时，还将重点讨论食品级胰蛋白酶在食品工业中的应用情况，并详细说明其在面团加工中的使用要点和方法。
最后，我们将分析食品级胰蛋白酶在改善食品质量和特性方面所带来的提升效果，并展望未来研究方向和可持续发展前景。
1.2 文章结构本文共分为五个部分: 引言、胰蛋白酶的基本概念、食品级胰蛋白酶的用途概述、食品级胰蛋白酶在面团加工中的应用要点说明以及结论。
在引言部分，我们将简要介绍胰蛋白酶的用途，并概述了文章的目录结构。
1.3 目的本文旨在全面阐述食品级胰蛋白酶的用途和作用机制，重点讨论其在食品加工中特别是面团加工过程中的应用。
通过对食品级胰蛋白酶使用方法和效果进行解释和说明，旨在为相关从业人员提供科学准确的指导，并为未来研究和开发提供方向和建议。
2. 胰蛋白酶的基本概念2.1 胰蛋白酶的定义胰蛋白酶是指由胰腺分泌的一类消化酶，在肠道中起到分解食物中蛋白质的作用。
胰蛋白酶主要包括胰高脂酶、胰低糖酶和胰肽酶等。
它们能够将复杂的蛋白质分子水解成较小的多肽、低级别氨基酸以及少量游离氨基酸，从而帮助身体吸收和利用食物中的营养物质。
2.2 胰蛋白酶的分类与特点根据其活性位置和特定底物或基团，胰蛋白酶可分为几种不同类型，包括内切粒溶(endo-peptidases)、外切粒溶(exo-peptidases)以及内外都有活性者。
内切粒溶是指能够在胺基端或羧基端发生水解反应的胰蛋白酶，如胱液肽酞裂解大分子肝再生紫外线X-pro蛋白等。
胰蛋白酶活性测定
胰蛋白酶活性测定在动物胰脏中，胰蛋白酶是以无活性的酶原状态存在的。
在生理条件下，胰蛋白酶原随胰液分泌至十二指肠后，在小肠上腔有Ca2+的环境中，为肠激酶或胰蛋白酶所激活，其肽链 N -端的赖氨酸与异亮氨酸之间的一个肽键被水解，失去一个酸性6肽，其分子构象发生一定的改变后转变为具有催化蛋白质水解活性的胰蛋白酶。
胰蛋白酶原分子量约为24 000，其等电点为pH8.9；胰蛋白酶的分子量约为23 400，其等电点为pH 10.8。
胰蛋白酶在pH3.0时最稳定，其浓溶液可贮存于冰箱（0℃以下）数周而活性无显著丧失。
pH＜3时，胰蛋白酶易变性。
PH＞５时，胰蛋白酶易自溶。
胰蛋白酶催化活性的最适pH为7.6～7.8。
重金属离子、有机磷化合物和反应产物都能抑制胰蛋白酶的活性。
胰脏、卵清和大豆中也含有一些蛋白质对胰蛋白酶活性具有抑制作用。
[原理]胰蛋白酶能催化蛋白质的水解，对于由碱性氨基酸（如精氨酸、赖氨酸）的羧基与其他氨基酸的氨基所形成的肽键具有高度的专一性。
此外，胰蛋白酶也能催化由碱性氨基酸的羧基所形成的酰胺键和酯键，有高度的专一性仍表现为对碱性氨基酸羧基一侧的选择对此等化学键的催化水解活性的敏感度为：酯键＞酰胺键＞肽键。
因此，可以利用含有这些化学键中任一种键型的底物来研究胰蛋白酶的专一催化活性。
本实验方法一采用N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯[（BAEE），N-benzoyl-L-arginine ethyl ester]作为底物.N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（BAEE）在波长253nm下的紫外光吸收远远弱于N-苯甲酰-L-精氨酸[（BA），benzoyl-L-arginine]的紫外光吸收。
在胰蛋白酶的催化下，BAEE随着酯键的水解，水解产物 BA逐渐增多，反应体系的紫外光吸收亦随之相应增加，以△A253nm计算胰蛋白酶的活性。
胰蛋白酶的BAEE单位定义为：以BAEE为底物，在一定反应条件下，每分钟使△A253nm增加0.001的酶量为一个BAEE单位。
胰腺疾病的检查
胰腺疾病的检查一、胰腺的外分泌功能胰腺的外分泌物总称为胰液，pH7.4～8.4。
主要成分为水、消化酶和碳酸氢盐等。
碳酸氢盐：中和胃酸和激活消化酶。
消化酶：包括淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶等；蛋白酶又包括胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶等。
正常时，胰液只有很少一部分进入血液。
某些胰腺疾病可以使这些酶进入血液循环，导致血液中酶活性升高。
二、胰腺疾病的检查及其临床意义（一）淀粉酶：1.概述：属于α-淀粉酶，可通过肾小球滤过，是唯一能在正常时于尿中出现的血浆酶。
血液中淀粉酶主要来自胰腺、唾液腺，尿液中淀粉酶来自于血液。
同工酶：P-同工酶（胰型同工酶）S-同工酶（唾液型同工酶）2.测定方法：限定性底物法。
基本原理：把病人的标本（含淀粉酶）和作为底物的多糖一起进行反应后，测定反应后的剩余底物或产物来计算淀粉酶的活性。
现用限定性底物法，即用小分子低聚糖（如对硝基苯麦芽庚糖苷）作为底物，产生稳定的限定性产物，然后测定反应产物（发色团或葡萄糖）量来计算淀粉酶活性。
影响因素：①很多阴离子有激活淀粉酶的作用，其中以Cl-，Br-为最强；②血清甘油三酯浓度高时，可以抑制淀粉酶活性，应将标本加以稀释，以降低其影响；③肝素抗凝：由于Ca2+是淀粉酶分子组成的部分，一般抗凝剂如草酸盐，枸橼酸盐等因能与Ca2+结合，抑制淀粉酶活性而不宜应用。
同工酶测定：琼脂糖凝胶和醋纤膜电泳法。
3.参考值：限定性底物法。
血清淀粉酶≤220U/L（37℃）尿淀粉酶≤1200U/L（37℃）P-同工酶：血清115U/L；尿800U/L4.临床意义：（1）血清淀粉酶升高最多见于急性胰腺炎。
发病后2～12h活性开始升高，12～24h达峰值，2～5d后恢复正常。
急性胰腺炎时尿淀粉酶升高可早于血淀粉酶，而下降晚于血淀粉酶。
（2）监测急性胰腺炎的并发症：如胰腺假性囊肿，胰腺脓肿，血淀粉酶活性多持续升高。
（3）胰腺癌早期淀粉酶活性可见升高。
（4）腮腺炎、消化性溃疡穿孔、机械性肠梗阻等非胰腺疾病淀粉酶活性可中度或轻度升高。
蛋白酶种类
蛋白酶种类蛋白酶是一类具有催化作用的蛋白质分子，它们在生物体内起着至关重要的作用。
根据其催化的反应类型和底物特异性，蛋白酶可以分为多个种类。
本文将介绍几种常见的蛋白酶及其功能。
一、胰蛋白酶（trypsin）胰蛋白酶是一种水解蛋白质的酶，主要在胰腺中产生。
它能够将蛋白质分解为小分子的胺基酸，从而提供给机体进行能量代谢和新陈代谢。
胰蛋白酶的活性受到胃酸的抑制，一般在小肠中发挥作用。
二、淀粉酶（amylase）淀粉酶是一种水解淀粉为糖的酶，主要存在于唾液和胰液中。
它能够将淀粉分解为葡萄糖等小分子糖类，为机体提供能量。
淀粉酶在口腔中开始发挥作用，继续在胃和小肠中进行消化。
三、脂肪酶（lipase）脂肪酶是一种水解脂肪的酶，主要存在于胰液中。
它能够将脂肪分解为甘油和脂肪酸，从而使脂肪被人体吸收和利用。
脂肪酶主要在小肠中发挥作用，与胆汁中的胆盐一起协同作用，促进脂肪的消化和吸收。
四、蛋白酶K（proteinase K）蛋白酶K是一种特殊的蛋白酶，具有广泛的蛋白质水解能力。
它能够降解各种酶、蛋白质、肽链等，对于研究蛋白质结构和功能具有重要意义。
蛋白酶K在实验室中常用于DNA和RNA的提取过程中，用来去除蛋白质的污染物。
五、胃蛋白酶（pepsin）胃蛋白酶是胃液中的一种主要酶类，能够水解蛋白质。
胃蛋白酶在胃酸的酸性环境下才能发挥活性，它能够将蛋白质分解为小分子的多肽，为后续消化和吸收提供条件。
六、胰凝乳蛋白酶（chymotrypsin）胰凝乳蛋白酶是一种水解蛋白质的酶，主要存在于胰液中。
它能够将蛋白质分解为多肽和氨基酸，具有较强的蛋白质分解能力。
胰凝乳蛋白酶主要在小肠中发挥作用，与胰蛋白酶协同作用，促进蛋白质的消化和吸收。
七、胃蛋白酶原（pepsinogen）胃蛋白酶原是胃液中的一种前体酶，它在胃酸的作用下转化为活性的胃蛋白酶。
胃蛋白酶原的转化是一个自动催化的过程，它能够保护胃黏膜免受胃酸的腐蚀。
胃蛋白酶原的转化是胃液中消化蛋白质的重要步骤之一。
医学检验·检查项目：胰蛋白酶(Try)_课件模板
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正常值： 150～60ng／ml。
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相关检查： 胰蛋白酶、血清胰蛋白酶。
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相关症状： 腹痛、恶心与呕吐、发热、呕吐。
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相关疾：
慢性胆囊炎、急性出血坏死型胰腺炎、急 性结石性胆囊炎、急性胰腺炎、结石性胆 囊炎、运动诱发哮喘、老年人急性胰腺炎、 妊娠合并急性胰腺炎、胰腺癌、小儿慢性 胰腺炎、α1-抗胰蛋白酶缺乏症、慢性胰 腺炎、小儿急性胰腺炎、急性胆囊炎、胆 源性急性胰腺炎、胆源性慢性胰腺炎、自 身免疫性胰腺炎、蛔虫性急性胰腺炎、急 性胆源性胰腺炎。
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别名： 胰蛋白酶。
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简介： 胰蛋白酶是胰腺分泌的主要消化酶之
一。
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临床意义：
增高：大多数急性胰腺炎病人及慢性 肾功能衰竭病人的胰蛋白酶明显增高，半 数以上的胰腺癌及慢性胰腺炎病人的胰蛋 白酶也增高。但也有20％非胰性腹痛病人， 特别是胆囊炎及十二指肠溃疡穿孔病人， 胰蛋白酶也会增高。
胰蛋白酶的最适温度
胰蛋白酶的最适温度
胰蛋白酶是一种消化酶，属于丝氨酸蛋白酶家族，主要在小肠中发挥作用，负责分解蛋白质为多肽和氨基酸。
它在生物体内的最适pH 值通常在7.5到8.5之间，这反映了小肠中的微碱性环境。
然而，当我们谈论胰蛋白酶的最适温度时，我们通常指的是在实验条件下或体外应用时该酶展示最佳活性的温度。
胰蛋白酶的最适温度大约在37°C左右，这与人体的正常体温相匹配，因为胰蛋白酶需要在人体内的环境中有效地工作。
在实际应用中，胰蛋白酶的活性会随着温度的变化而变化。
温度低于最适温度时，酶的活性会降低；而温度高于最适温度时，酶的结构可能会受损，导致活性下降，甚至失活。
在极端的温度下（如接近或超过60°C），胰蛋白酶会变性，失去其原有的三维结构，从而丧失催化活性。
在实验室中，为了保证胰蛋白酶的稳定性和活性，通常会在接近其最适温度的条件下进行反应，同时避免过热可能导致的酶变性。
此外，为了长期保存胰蛋白酶，通常会将其冷藏在4°C左右，以减缓酶活性并防止微生物的生长。
总结：胰蛋白酶的最适温度约为37°C，这一温度下胰蛋白酶能够
在人体内部环境中有效地催化蛋白质的分解。
在实验和应用中，维持这一温度范围对于保持胰蛋白酶的最佳活性至关重要。
胰蛋白酶的提取
胰蛋白酶的提取原理和方法步骤2010-03-29 14:21:31 来源：易生物实验浏览次数：404 网友评论0 条在动物胰脏中除了存在胰蛋白酶外，还有另外两种与胰蛋白酶性质相似的蛋白水解酶：胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶。
在胰蛋白酶提取过程中，三者彼此很难分开。
需采用合适的方法进一步分离纯化。
关键词：胰蛋白酶trypsin［原理］在动物胰脏中除了存在胰蛋白酶外，还有另外两种与胰蛋白酶性质相似的蛋白水解酶：胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶。
在胰蛋白酶提取过程中，三者彼此很难分开。
需采用合适的方法进一步分离纯化。
从动物胰脏中提取胰蛋白酶，一般是用稀酸将胰腺细胞中含有的胰蛋白酶原提取出来，然后根据等电点沉淀的原理将提取液的pH值调至酸性（pH3.0左右），使大量的酸性蛋白沉淀出来。
经硫酸铵分级盐析将胰蛋白酶原、胰凝乳蛋白酶原和弹性蛋白酶原沉淀。
沉淀物经水溶解并调至pH8.0，用极少量的胰蛋白酶将胰蛋白酶原激活，同时溶液中的胰凝乳蛋白酶原和弹性蛋白酶原也被激活，三种酶原相互作用过程如下：也可采用从胰脏中提取出胰蛋白酶原，利用合适的提取溶液的pH值促使胰蛋白酶原部分自溶，并通过溶液中Ca2+的环境，使胰蛋白酶原被开始自溶的少量具有活性的胰蛋白酶所激活，转变为具有活性的胰蛋白酶（胰凝乳蛋白酶原及弹性蛋白酶原亦同时被胰蛋白酶激活成有活性的酶）。
激活后的酶溶液再进一步分离纯化。
［试剂和器材］1、试剂（1）pH2.5～3.0乙酸化的水溶液（2）10%（体积分数）乙酸（3）2mol/L硫酸（4）固体硫酸铵（5）无水CaCl2（6）结晶胰蛋白酶（7）25%乙醇溶液(含0.015mol/ＬHCl 、0.05mol/ＬCaCl2)（8）95%（体积分数）乙醇（9）5mol/ＬNaOH（10）丙酮2、器材（1）胰脏（2）组织捣碎机（3）离心机（4）磁力搅拌器（5）透析袋、20目筛网、纱布、水浴锅（6）烧杯、量筒、刻度吸管、试管、玻璃漏斗（7）布氏漏斗、抽滤瓶、温度计、滴管、玻璃搅棒、纱布、pH试纸等［方法和步骤］方法一1、胰蛋白酶原的提取取新鲜胰脏约150g，剥去结缔组织和脂肪，取净重100g，切成碎块，在组织捣碎机中捣碎，并加入2倍体积预冷的pH2.5～3.0 乙酸化水溶液，制成匀浆。
胰蛋白酶 药典标准
胰蛋白酶药典标准胰蛋白酶是一种由胰脏分泌的消化酶，它能够加速蛋白质的水解反应，从而促进蛋白质的消化吸收。
胰蛋白酶是治疗一些胰腺疾病的重要药物，它可以帮助消化系统顺利运作，促进胃肠道的健康。
在药典中，关于胰蛋白酶的标准包括以下几个方面。
一、药理作用胰蛋白酶属于消化酶，它能够分解蛋白质、脂肪和碳水化合物等成分，加快消化过程，促进营养吸收。
胰蛋白酶还可以协助治疗胰腺炎、肝硬化、胃十二指肠溃疡、肠疾病、营养不良等疾病，具有重要的药理作用。
二、指标要求在药典中，对于FDA（美国食品药品监督管理局）规定的胰蛋白酶的标准，指标要求包括以下几个方面：1.活性：胰蛋白酶的单位需要符合USP（美国药典）和EP（欧洲药典）标准；2.外观：胰蛋白酶的外观应为白色或类似白色的粉末；3.纯度：有效成分的纯度需要符合USP和EP标准;4.水含量：胰蛋白酶的水含量需要符合USP和EP标准;5.痕量金属：胰蛋白酶中的重金属残留需要符合USP和EP标准;6.微生物测试：胰蛋白酶的微生物检验需要符合USP和EP标准。
三、适应症根据药典的规定，胰蛋白酶适应症包括以下几个方面：1.治疗良性胃肠疾病（如胰腺炎等）所致的消化不良;2. 改善营养吸收及缓解与吸收不良相关的疾病如肠道疾病、克隆病、大肠癌等;3. 肠胃手术后的蛋白质消化吸收障碍.四、用法用量胰蛋白酶的给药剂量和用法需要根据病情、年龄、体重、用药时间和代谢率等因素来决定。
药典中常规的给药剂量为每餐1-4个胶囊，每天3-6次，最多可达30粒/天。
严重病例可以逐渐增加到最大的药量，维持在该剂量下至少一周以上。
在服药期间需要遵守严格的医嘱。
总之，胰蛋白酶是一种重要的药物，它对于帮助消化系统工作、促进蛋白质消化吸收等问题都具有很好的功效。
对于医生而言，需要根据患者的具体情况来定制合适的治疗方案，不断推动这一领域的发展和进步。
胰蛋白酶溶液配制方法
胰蛋白酶溶液的配制方法如下：
将D-Hanks液高压消毒灭菌，用NaHCO3液调节pH至7.2左右。
取胰蛋白酶粉末置烧杯中，先用少许D-Hanks液调成糊状，然后再补足，搅拌混匀，置室温4小时或冰箱内过夜，并不时搅拌振荡。
次日先用滤纸粗滤，再进行过滤除菌，分装入瓶中，低温冰箱保存备用。
常用的浓度为0.25%或0.125%。
由于胰蛋白酶溶液偏酸，使用前可调pH至7.2左右。
请注意，配制过程中需要注意安全和卫生，严格按照实验室规范进行操作。
同时，胰蛋白酶是一种强效的酶，需要妥善保存，避免高温和潮湿，以免影响其活性和稳定性。
蛋白酶的作用
蛋白酶的作用蛋白酶在动物的肝脏，植物的茎叶和果实，以及微生物中是很广泛存在的，蛋白酶的作用是很多的，现在蛋白酶在毛皮、皮革、丝绸、食品、医药、酿造方面已经有了很广泛的应用了，能够创造出很大生产力，蛋白酶的种类也有很多，常见的有胰蛋白酶和胃蛋白酶。
蛋白酶是有很多的用途的，它的药用功能也是很强大的，胃蛋白酶对于治疗消化不良有很大的作用，酸性的蛋白酶能够很好的治疗支气管炎，下面我们就来看看蛋白酶的作用，特别是胰蛋白酶。
★胰蛋白酶的作用胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。
不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。
胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在 pH 为 8.0 、温度为 37℃时，胰酶溶液的作用能力最强。
使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。
因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ，如： D-Hanks 液。
终止消化时，可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。
1. 称取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液浓度为 0.25 %，用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调 PH 到 7.2 左右)或 PBS ( D-hanks )液中。
搅拌混匀，置于 4℃内过夜。
2. 用注射滤器抽滤消毒：配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器( 0.22 微米微孔滤膜)抽滤除菌。
然后分装成小瓶于-20℃保存以备使用。
胰蛋白酶能够催化蛋白质的特定肽键水解，这个催化过程是不需要能量的，不会使酶失去活力，也不会改变形状和使自身水解。
底物与酶的活性中心的结合是可逆的，这种结合使得蛋白质特定肽键因弯曲变形而被活化，更易于受到水分子的攻击，分别形成氨基和羧基而断裂，得到小分子多肽或氨基酸。
不同的蛋白酶可以作用在不同氨基酸相连组成的肽键，因此胰蛋白酶并不能作用在所有的肽键。
人羊膜间充质干细胞分离培养：胰蛋白酶及胶原酶消化时间及浓度的选择
人羊膜间充质干细胞分离培养：胰蛋白酶及胶原酶消化时间及浓度的选择张惠娟，丛姗，梁美萍，刘俊平，黄利刚，宋瑾，曹贵方内蒙古农业大学动物组织胚胎与发育生物学实验室，内蒙古自治区呼和浩特市 010018Isolation and culture of human amniotic mesenchymal stem cells: proper digestion time and concentrations of trypsin and collagenase Zhang Hui-juan, Cong Shan, Liang Mei-ping, Liu Jun-ping, Huang Li-gang, Song Jin, Cao Gui-fangLaboratory of Animal Histology and Embryology and Development al Biology, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, Inner Mongolia Autonomous Region, China摘要背景：文献报道人羊膜间充质干细胞提取方法各不一致，得到的细胞数量各不相同。
目的：探索人羊膜间充质干细胞在体外分离培养的最适方法。
方法：无菌条件下取正常足月剖腹产胎儿的羊膜剪成碎片，分别通过4个实验7种方法体外培养人羊膜间充质干细胞。
①实验一：分别采用3种方法：0.05 g/L胰蛋白酶消化10 min后，再加0.75 g/L胶原酶Ⅰ消化60 min；0.75 g/L胶原酶Ⅰ直接消化120 min；0.05 g/L胰蛋白酶与0.75 g/L胶原酶Ⅰ同时消化60 min。
②实验二：采用0.05 g/L的胰蛋白酶消化30 min后，再加0.75 g/L胶原酶Ⅰ消化30 min。
③实验三：分别采用2种方法：0.05 g/L的胰蛋白酶连续2次消化30 min后，再加入0.75 g/L的Ⅰ型胶原酶消化60 min；0.05 g/L的胰蛋白酶连续2次消化40 min后，再加0.75 g/L 胶原酶Ⅰ消化60 min。
胰蛋白酶
胰蛋白酶文章目录*一、胰蛋白酶的基本信息1. 定义2. 专科分类3. 检查分类4. 适用性别5. 是否空腹*二、胰蛋白酶的正常值和临床意义1. 正常值2. 临床意义*三、胰蛋白酶的检查过程及注意事项1. 检查过程2. 注意事项*四、胰蛋白酶的相关疾病和症状1. 相关疾病2. 相关症状*五、胰蛋白酶的不适宜人群和不良反应1. 不适宜人群2. 不良反应胰蛋白酶的基本信息1、定义胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 为蛋白酶的一种,EC 3.4.4.4,是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。
在脊椎动物中,作为消化酶而起作用。
在胰脏是胰蛋白酶的前体胰蛋白酶原被合成后,作为胰液的成分而分泌,受肠激酶,或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶,是肽链内切酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。
它不仅起消化酶的作用,而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体,起活化作用。
是特异性最强的蛋白酶,在决定蛋白质的氨基酸排列中,它成为不可缺少的工具。
2、专科分类消化3、检查分类生化检查4、适用性别男女均适用5、是否空腹空腹胰蛋白酶的正常值和临床意义1、正常值RIA法:阴性。
酶速率法(37℃):十二指肠液:150-600μg/ml2、临床意义升高:大多数急性胰腺炎病人及慢性肾功能衰竭病人的胰蛋白酶明显增高,半数以上的胰腺癌及慢性胰腺炎病人的胰蛋白酶也增高。
但也有20%非胰性腹痛病人,特别是胆囊炎及十二指肠溃疡穿孔病人,胰蛋白酶也会增高。
降低:胰腺外分泌功能不全(慢性胰腺炎后期)。
胰蛋白酶的检查过程及注意事项1、检查过程采集检测标本后立即送检,检测方法同酶速率法测定。
2、注意事项采集时请避免挖取沾到马桶内尿液及自来水的部分;同时也请勿将粪便直接置于卫生纸或擦手纸上。
为避免干扰检验结果,请勿使用棉花棒挖取。
粪便采集量请勿过少,以避免无足够的检体以供检验。
若需要以化学法检测粪便潜血时,请于采集前三天避免进食红肉、肝脏及菠菜、甘蓝、花椰菜等食物,以避免造成伪阳性结果。
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重组人胰蛋白酶
Cat.No.:RHT03
CAS:9002-07-7
EC:3.4.21.4
来源：人胰蛋白酶，基因工程生产，大肠杆菌表达
1.重组生产，无动物源性
重组人胰蛋白酶，氨基酸序列及性质与人胰蛋白酶完全相同。
无动物源性，无病毒污染。
可用于干细胞治疗、肿瘤的细胞治疗等过程中，无抗原性。
2.优势
安全性高
重组生产，无动物源性的病毒污染，如猪流感病毒、猪细小病毒等；
特殊工艺，无内源性病毒污染，无细菌、真菌、支原体污染；
冻干粉，运输及储存安全，活性不易损失；
不含任何蛋白酶抑制剂，如PMSF等。
上海雅心生物技术有限公司
✧纯度高
HPLC纯化；
活性特异，无其它蛋白酶活性。
✧活性高
比活性不低于2500USP u/mg。
3.用途范围
胰蛋白酶是一种内肽酶，可用于赖氨酸及精氨酸C末端剪切肽键，从而将大分子蛋白裂解为小肽。
胰蛋白酶广泛用于各种生物技术过程中，如：细胞培养各种组织的细胞分离；变性蛋白质的降解；蛋白质的酶解、测序；干细胞、肿瘤的细胞治疗等。
4.特性
纯化HPLC
产品性状白色或类白色冻干粉
纯度（HPLC）≥95%
比活不低于2500USP u/mg
其他酶含量无糜蛋白酶、羧肽酶A等污染及活性
不含任何蛋白酶抑制剂无PMSF、EDTA等任何蛋白酶抑制剂
上海雅心生物技术有限公司
5.信息
产品名称比活包装产地
重组人胰蛋白酶≥2500USP u/mg10mg,100mg,1g上海雅心
活力单位：25℃，pH7.6，反应体系3.0ml(1cm光路)，每分钟酶解BAEE使253nm下的吸收值增加0.003定义为一个USP单位。
6.相关产品
重组猪胰蛋白酶；
重组胰蛋白酶细胞消化液。
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