提取与重组胰蛋白酶的不同

胰蛋白酶与重组胰蛋白酶药典标准比较

胰蛋白酶药典标准历史

2014年之前，只有从猪或牛胰腺提取的胰蛋白酶的标准，活性标准为2500USP units/mg，目前临床已不应用。在2011年左右，通过了胰蛋白酶:糜蛋白酶（6:1）配方，用于消化道疾病的治疗。在2013年12月出版了修订稿的“用于生物医药制造过程的辅助材料”，重组胰蛋白酶作为一个例子，给出标准。2017年2月，FDA正式颁布胰蛋白酶的药典标准。

2010版中国药典第二部规定:

药品的安全性保障得到进一步加强。凡例中规定所有来源于人或动物的供注射用的原料药均增订“制法要求”。在总则十四规定：（1）来源于动物组织提取的药品，其所用动物种属要明确，所用脏器均应来自经检疫的健康动物，涉及牛源的应取自无牛海绵状脑病地区的健康牛群；来源于人尿的药品，均应取自健康人群。上述药品均应有明确的病毒灭活工艺要求以及质量管理要求。（2）直接用于生产的菌种、毒种、来自人和动物的细胞、DNA重组工程菌及工程细胞，来源途径应经国务院药品监督管理部门批准并应符合国家有关的管理规范。

2010版中国药典第三部规定:

2010版药典对安全性问题更加重视。增修订细菌内毒素检查的品种达112种；药典三部增订了逆转录酶活性检查法等。培养细胞用牛血清应来源于无牛海绵状脑病地区的健康牛群，其质量应符合本药典的有关规定；在生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中，应提供细胞培养液的详细成分，如使用人或动物源成分，如血清、胰蛋白酶、乳蛋白水解物

胰蛋白酶重组胰蛋白酶

外观形状白色或类白色溶解性可溶

溶解性可溶生物载量NMT100CFU/ml 微生物限量-

比活力

(USP units/mg pro.)

NLT3800

金黄色葡萄球

菌阴性纯度（HPLC）

NLT70%β-trysin,

NMT20%α

-trypsin

绿脓假单胞菌阴性

沙门氏菌阴性

干燥失重不高于5.0%

灼烧残渣不高于2.5%

糜蛋白酶限量不高于5.0%

活性不低于2,500USP units/mg

美国药典中，两种胰蛋白酶的标准的主要不同点:

项目胰蛋白酶2014美国药典

来源

动物来源：

从猪或牛的胰腺提取重组（无动物源性）：DNA来源产品

纯度检测方法无HPLC

活性2,500USP units/mg比活性：3800USP units/mg pro.

美国药典中最重要的不同点:

①无动物源性，由于辅料的质量，包括酶，应用在生物医药制造，会对治疗用产品有影响，因此无动物源性重组胰蛋白酶的使用是对于人畜共患病的病毒感染的必要预防措施。

②HPLC方法检测重组胰蛋白酶的纯度

主峰的保留时间为：12-17min

α-胰蛋白酶和β-胰蛋白酶的保留时间相差不小于1.0min.

按照峰面积计算：β-胰蛋白酶>70%,α-胰蛋白酶<20%。