化学发光介绍ppt课件
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化学发光原理及检测项目PPT课件
triglycerides2
The Intestines Constipation4 Decreased GI motility4
泛的影响
The Brain
Depression1 Decreased concentration1 General lack of interest1 Impaired fetal intellectual
The Kidneys Decreased function5 Fluid retention and edema5
1. Nemeroff CB. Clinical significance of psychoneuroendocrinology in psychiatry: focus on the thyroid and adrenal. J Clin Psychiatry. 1989;50(suppl):13-20. 2. Klausen IC, Nielsen FE, Hegedüs L, Gerdes LU, Charles P, Faergeman O.Treatment of hypothyroidism reduces low-density lipoproteins but not lipoprotein (a) Metabolism. 1992;41:911-914. 3. Polikar R, Burger AG, Scherrer U, Nicod P. The thyroid and the heart. Circulation. 1993;87:1435-1441. 4. Vassilopoulou-Sellin R, Sellin JH. The gastrointestinal tract and liver in hypothyroidism. In:Braverman LE, Utiger RD, eds. Werner and Ingbar’s The Thyroid. 7th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott-Raven Publishers; 1996:816-820. 5. Moses AM, Scheinman SJ. The kidneys and electrolyte metabolism. In:Braverman LE, Utiger RD, eds. Werner and Ingbar’s The Thyroid. 7th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott-Raven Publishers; 1996:812-815. 6. Emerson CH.Thyroid function and disease in the female. In: Gold JJ, Josimovich JB, eds. Gynecologic Endocrinology. 4th ed. New York, NY:Plenum Publishing Corp; 1987:109-133. 7. Haddow JE, Palomaki GE, Allan WC, et al. Maternal thyroid deficiency during pregnancy and subsequent neuropsychological development of the child. N Engl J Med. 1999;341:549-555.
The Intestines Constipation4 Decreased GI motility4
泛的影响
The Brain
Depression1 Decreased concentration1 General lack of interest1 Impaired fetal intellectual
The Kidneys Decreased function5 Fluid retention and edema5
1. Nemeroff CB. Clinical significance of psychoneuroendocrinology in psychiatry: focus on the thyroid and adrenal. J Clin Psychiatry. 1989;50(suppl):13-20. 2. Klausen IC, Nielsen FE, Hegedüs L, Gerdes LU, Charles P, Faergeman O.Treatment of hypothyroidism reduces low-density lipoproteins but not lipoprotein (a) Metabolism. 1992;41:911-914. 3. Polikar R, Burger AG, Scherrer U, Nicod P. The thyroid and the heart. Circulation. 1993;87:1435-1441. 4. Vassilopoulou-Sellin R, Sellin JH. The gastrointestinal tract and liver in hypothyroidism. In:Braverman LE, Utiger RD, eds. Werner and Ingbar’s The Thyroid. 7th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott-Raven Publishers; 1996:816-820. 5. Moses AM, Scheinman SJ. The kidneys and electrolyte metabolism. In:Braverman LE, Utiger RD, eds. Werner and Ingbar’s The Thyroid. 7th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott-Raven Publishers; 1996:812-815. 6. Emerson CH.Thyroid function and disease in the female. In: Gold JJ, Josimovich JB, eds. Gynecologic Endocrinology. 4th ed. New York, NY:Plenum Publishing Corp; 1987:109-133. 7. Haddow JE, Palomaki GE, Allan WC, et al. Maternal thyroid deficiency during pregnancy and subsequent neuropsychological development of the child. N Engl J Med. 1999;341:549-555.
化学发光ppt课件
47
标记技术
• 标记技术 将化学发光剂的分子与某些分子 结合，直接或间接地测定待测组分。通过 分析被标记物来完成对待测组分的测定。 一些大分子化合物可直接进行标记测定。 分组量较小的组分则常通过与被标记的抗 原抗体特异性结合得到分析。
6
2.化学发光效率和发光强度
化学发光效率：
发射光子的分子数 cl r f 参加反应的分子数
激发态分子数 r 参加反应的分子数 发射光子的分子数 f 激发态分子数
化学效率：
发光效率：
化学效率主要取决于发光所依赖的化学反应本 身；而发光效率则取决于发光体本身的结构和性质， 也受环境的影响。
27
酸性高锰酸钾体系
四价铈 可直接与多 种还原性无机物或者有 机物放生氧化还原反应， 是强氧化性化学发光剂 之一。发光体系虽然简 单，但由于不收Cl-的 影响，更合适水样中有 机物污染的检测。
28
四价铈体系
（1）铈-待测物体系 可用于检测对乙酰氨基酚、色氨 酸。 （2）铈-联苯三酚-氧体系 可检测环境水样中的溶解氧。 （3）Ce4+-SO32--体系 利用某鞋荧光性有机物对其的 增敏作用，可以测定奎宁、奎宁丁、辛可丁、胆汁酸和 多种皮质类固醇、甾族化合物。 （4）Ce4+-RhB（罗丹明B）-还原性待测物体系 用于 测定叶酸、巯嘌呤、维生素C（盐）和噻唑类席夫碱。 （5）Ce4+-Ru（phen）32+（二价钌-邻菲啰啉配合物） 体系 可用于草酸、丙酮酸、维生素C、枸橼酸、酒石酸、 戊二醛和部分氟代喹诺酮衍生物的测定。
25
酸性高锰酸钾 具有很强 的氧化能力，可以与多种 无机物和有机物进行氧化 还原反应，但由于其反应 的发光强度较弱，所以知 道20世纪70年代以后， 伴随着微弱光检测技术的 发展才得到广泛的研究和 应用。
标记技术
• 标记技术 将化学发光剂的分子与某些分子 结合，直接或间接地测定待测组分。通过 分析被标记物来完成对待测组分的测定。 一些大分子化合物可直接进行标记测定。 分组量较小的组分则常通过与被标记的抗 原抗体特异性结合得到分析。
6
2.化学发光效率和发光强度
化学发光效率：
发射光子的分子数 cl r f 参加反应的分子数
激发态分子数 r 参加反应的分子数 发射光子的分子数 f 激发态分子数
化学效率：
发光效率：
化学效率主要取决于发光所依赖的化学反应本 身；而发光效率则取决于发光体本身的结构和性质， 也受环境的影响。
27
酸性高锰酸钾体系
四价铈 可直接与多 种还原性无机物或者有 机物放生氧化还原反应， 是强氧化性化学发光剂 之一。发光体系虽然简 单，但由于不收Cl-的 影响，更合适水样中有 机物污染的检测。
28
四价铈体系
（1）铈-待测物体系 可用于检测对乙酰氨基酚、色氨 酸。 （2）铈-联苯三酚-氧体系 可检测环境水样中的溶解氧。 （3）Ce4+-SO32--体系 利用某鞋荧光性有机物对其的 增敏作用，可以测定奎宁、奎宁丁、辛可丁、胆汁酸和 多种皮质类固醇、甾族化合物。 （4）Ce4+-RhB（罗丹明B）-还原性待测物体系 用于 测定叶酸、巯嘌呤、维生素C（盐）和噻唑类席夫碱。 （5）Ce4+-Ru（phen）32+（二价钌-邻菲啰啉配合物） 体系 可用于草酸、丙酮酸、维生素C、枸橼酸、酒石酸、 戊二醛和部分氟代喹诺酮衍生物的测定。
25
酸性高锰酸钾 具有很强 的氧化能力，可以与多种 无机物和有机物进行氧化 还原反应，但由于其反应 的发光强度较弱，所以知 道20世纪70年代以后， 伴随着微弱光检测技术的 发展才得到广泛的研究和 应用。
化学发光原理及应用ppt课件
Part III. 化学发光法的临床应用
甲状腺功能的免疫分析 糖代谢紊乱的免疫分析 常见肿瘤标志物及其免疫分析 常见传染性疾病的免疫检测
– – –
病毒性肝炎 HIV感染 严重急性呼吸综合征（SARS)
其他免疫检测项目
甲状腺功能的免疫分析
• 甲状腺机能的常见评价指标及其临床
意义 1.甲状腺机能亢进 2.甲状腺功能减退 3.低T3和低T3、T4综合征
C肽
C肽测定用于了解II型糖尿病人是否需要胰岛素治疗，如 果C肽水平较低，葡萄糖刺激反应差，则表示表明立即或 最终需要胰岛素治疗，也可用于评价糖尿病酮症酸中毒病 人的胰岛功能。C肽的另一个重要的临床用途是各种低血 糖病因的鉴别。C肽水平升高科见于轻型糖尿病患者，常 见空腹血糖升高不多者C肽大多高于正常。胰岛素瘤患者， 如血中存在胰岛素抗体，血清C肽大都增高。胰腺肿瘤患 者行胰腺切除后，如血清C肽仍可测出，提示手术未能全 部切除胰腺组织。如果手术后一度阴性，后又称为阳性， 提示肿瘤复发或转移。 在肝硬化时，血浆胰岛素有升高趋势，其原因在于肝脏摄 取和降解胰岛素减少；但空腹血糖正常。
癌胚铁蛋白 糖蛋白 肝 癌胚抗原 糖蛋白 结肠、直肠、胰 腺、肺、乳腺
胰癌胚抗原 糖蛋白 胰腺
鳞状细胞抗 糖蛋白 肺、皮肤、头和 原 颈部
组织多肽抗 细胞角 乳腺、结肠 原 蛋白
CEA
• 原发性结肠癌，患者CEA升高者占45-90%. • 胰腺癌、胆管癌、胃癌、食道癌、肺癌、乳腺癌和泌尿系 •
三、低T3和低T3、T4综合征
• 低T3综合征是一种由于非甲状腺疾病 造成的甲状
腺激素异常，其发生与机体的代谢状态，基础疾 病的性质和严重程度以及外来因素，如用药等有 关。代谢状态差、基础病情加重时其发生率随之 增高；当病情好转、机体健康状况趋于正常时， 低T3状态可自行消失。
化学发光介绍-PPT
26
肿瘤标志物
组织多肽抗原（TPA） 临床意义：主要见于恶性肿瘤；也可见于急性肝炎、胰腺炎、肝 炎等，但增高程度较轻。 前列腺特异性抗原（PSA） 临床意义：主要见于前列腺癌，是前列腺癌首选和最有应用价值 的肿瘤标志物。前列腺增生、前列腺炎、良性前列腺瘤、肾脏和泌 尿生殖系统疾病时，PSA可轻度升高
乙肝五项标志物的检测 3、HBeAg和HBeAb（HBeAg作为乙肝病毒复制增殖的间接指标） HBeAg阳性：说明病毒复制活跃，传染性强，是乙肝患者具有传
染性指标。可见于急、慢性乙肝和乙肝病毒携带者，如持续阳性， 表明乙肝转为慢性迁延性肝炎 HBeAb 在急性肝炎时，此抗体阳性表明乙肝复制缓解或终止，在慢性肝 炎或肝硬化患者，此抗体阳性说明乙肝病毒DNA与肝细胞发生整 合，提示病情较长，预后不佳。
27
肿瘤标志物
游离前列腺特异抗原（F-PSA）与F-PSA/PSA比值 临床意义：F-PSA 见于前列腺增生和前列腺癌，但前列腺癌增高 程度不如前列腺增生明显。 F-PSA/PSA降低 见于前列腺癌和前列腺增生，但前列腺癌的降低 程度明显高于前列腺增生 前列腺酸性磷酸酶（PAP） 临床意义：见于前列腺癌、前列腺增生，但前列腺癌增高更明显
22
肿瘤标志物
甲胎蛋白（AFP）
临床意义：常见于原发性肝炎、大多数卵巢和睾丸胚胎性肿瘤或 畸胎瘤，生殖腺外生殖细胞瘤，肝母细胞瘤，肝细胞瘤，转移性肝 癌等，也可见于婴幼儿肝炎，肝硬化、急性肝炎、重症肝炎恢复等， 但多为一过性升高，胎盘梗塞、剥离、羊水栓塞、高危妊娠、母儿 血型不合、糖尿病孕妇等血清AFP也升高。
15
感染性疾病检测
乙肝五项标志物的定量检测
4、HBcAb
阳性：表示既往感染乙肝病毒，如高抗体水平持续存在提示乙肝 病毒可能还在复制，乙肝病毒感染后，此抗体是最早出现的标志 性抗体，持续时间长，并且几乎所有患者均产生抗体，所以此抗 体是流行病学调查指标。
肿瘤标志物
组织多肽抗原（TPA） 临床意义：主要见于恶性肿瘤；也可见于急性肝炎、胰腺炎、肝 炎等，但增高程度较轻。 前列腺特异性抗原（PSA） 临床意义：主要见于前列腺癌，是前列腺癌首选和最有应用价值 的肿瘤标志物。前列腺增生、前列腺炎、良性前列腺瘤、肾脏和泌 尿生殖系统疾病时，PSA可轻度升高
乙肝五项标志物的检测 3、HBeAg和HBeAb（HBeAg作为乙肝病毒复制增殖的间接指标） HBeAg阳性：说明病毒复制活跃，传染性强，是乙肝患者具有传
染性指标。可见于急、慢性乙肝和乙肝病毒携带者，如持续阳性， 表明乙肝转为慢性迁延性肝炎 HBeAb 在急性肝炎时，此抗体阳性表明乙肝复制缓解或终止，在慢性肝 炎或肝硬化患者，此抗体阳性说明乙肝病毒DNA与肝细胞发生整 合，提示病情较长，预后不佳。
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肿瘤标志物
游离前列腺特异抗原（F-PSA）与F-PSA/PSA比值 临床意义：F-PSA 见于前列腺增生和前列腺癌，但前列腺癌增高 程度不如前列腺增生明显。 F-PSA/PSA降低 见于前列腺癌和前列腺增生，但前列腺癌的降低 程度明显高于前列腺增生 前列腺酸性磷酸酶（PAP） 临床意义：见于前列腺癌、前列腺增生，但前列腺癌增高更明显
22
肿瘤标志物
甲胎蛋白（AFP）
临床意义：常见于原发性肝炎、大多数卵巢和睾丸胚胎性肿瘤或 畸胎瘤，生殖腺外生殖细胞瘤，肝母细胞瘤，肝细胞瘤，转移性肝 癌等，也可见于婴幼儿肝炎，肝硬化、急性肝炎、重症肝炎恢复等， 但多为一过性升高，胎盘梗塞、剥离、羊水栓塞、高危妊娠、母儿 血型不合、糖尿病孕妇等血清AFP也升高。
15
感染性疾病检测
乙肝五项标志物的定量检测
4、HBcAb
阳性：表示既往感染乙肝病毒，如高抗体水平持续存在提示乙肝 病毒可能还在复制，乙肝病毒感染后，此抗体是最早出现的标志 性抗体，持续时间长，并且几乎所有患者均产生抗体，所以此抗 体是流行病学调查指标。
化学发光PPT课件
A+B → C*, C* → C+hv 该发光反应的化学发光强度取决于反应速度dp/dt和反应 的化学发光量子效率（ ΦCL ）
ICL（T）= ΦCLdp/dt
常用化学发光试剂
A 鲁米诺（luminol）及其衍生物
（3—氨基—邻苯甲酰肼）
在碱性条件下能被许多氧化剂（例如H2O2,O2,ClO-等）氧化而发 出蓝色光，量子产率介于0.01~0.05之间是一个研究最早，最多，
适用范围广
光激发化学发光特点
高灵敏度 低本底 适用范围广
酶的活性、受体-配体反应、低亲和力的反应、第二信使 水平、DNA、RNA、蛋白质、多肽、碳水化合物、小分 子、大分子
易使用 高通量
光激发化学发光
特点：
2. 低本底 第一，天然荧光寿命小，而发光微粒的稳定发光时间超过1秒，可采取时间分辨模式采 集光信号，也就是在激光器关闭后50-100毫秒采集光信号。 第二，由于LiCA采用680nm红光激发，而红光的能级几乎不可能激发生物样品或微孔 板中的荧光物质，故本底很低。 第三，LiCA发射光的波长比激发光的波长短，能量更高，所以称为化学发光。而荧光 是激发光为高能量的而发射光为低能量的。由于生物体内富有天然的荧光物质，用荧 光法测定生物样品本底会较高，而LiCA检测反其道而行之，采用低进高出，有效降低 本底。
CL基本类型
按反应机理 自身化学发光、 敏化化学发光、电致化学发光 自身发光：是指被测物质为反应物直接参与化学反应， 利用自身化学反应释放的能量激发产物分子的光辐射。 可用反应式表示为：
A+B → C*+D， C* → C+hv
这类最普遍，多数有机物分子在液相中的化学反应属于这一类型
CL基本类型
ICL（T）= ΦCLdp/dt
常用化学发光试剂
A 鲁米诺（luminol）及其衍生物
（3—氨基—邻苯甲酰肼）
在碱性条件下能被许多氧化剂（例如H2O2,O2,ClO-等）氧化而发 出蓝色光，量子产率介于0.01~0.05之间是一个研究最早，最多，
适用范围广
光激发化学发光特点
高灵敏度 低本底 适用范围广
酶的活性、受体-配体反应、低亲和力的反应、第二信使 水平、DNA、RNA、蛋白质、多肽、碳水化合物、小分 子、大分子
易使用 高通量
光激发化学发光
特点：
2. 低本底 第一，天然荧光寿命小，而发光微粒的稳定发光时间超过1秒，可采取时间分辨模式采 集光信号，也就是在激光器关闭后50-100毫秒采集光信号。 第二，由于LiCA采用680nm红光激发，而红光的能级几乎不可能激发生物样品或微孔 板中的荧光物质，故本底很低。 第三，LiCA发射光的波长比激发光的波长短，能量更高，所以称为化学发光。而荧光 是激发光为高能量的而发射光为低能量的。由于生物体内富有天然的荧光物质，用荧 光法测定生物样品本底会较高，而LiCA检测反其道而行之，采用低进高出，有效降低 本底。
CL基本类型
按反应机理 自身化学发光、 敏化化学发光、电致化学发光 自身发光：是指被测物质为反应物直接参与化学反应， 利用自身化学反应释放的能量激发产物分子的光辐射。 可用反应式表示为：
A+B → C*+D， C* → C+hv
这类最普遍，多数有机物分子在液相中的化学反应属于这一类型
CL基本类型
常见化学发光技术PPT课件
02
它利用化学反应过程中释放的能 量激发发光物质，使其发出特定 波长的光，从而实现物质的检测 。
化学发光技术的原理
当某些物质被某种能量激发时，这些 物质会吸收能量并跃迁至激发态。
在化学发光反应中，通常需要加入特 殊的化学物质作为发光物质，这些物 质在反应过程中被激发并发出光辐射 。
当这些物质从激发态回到基态时，会 以光子的形式释放能量，从而产生光 辐射。
化学发光反应通常比较简单，所需的仪器 设备相对不复杂，操作简便，检测快速。
缺点
背景光干扰
化学发光反应中可能伴随有背景光的产生 ，对检测结果造成干扰，影响检测的准确
性。
特定性不强
某些化学发光反应可能不仅仅与目标物质 发生反应，也可能与其他类似物质发生反
应，导致检测的特异性不够强。
试剂昂贵且不稳定
某些化学发光试剂比较昂贵且容易分解变 质，需要妥善保存，增加了实验成本和难 度。
03
CATALOGUE
化学发光技术的优缺点
优点
高灵敏度
宽线性范围
化学发光技术具有很高的灵敏度，能够检 测到极低浓度的物质，因此在生物医学、 环境监测和食品安全等领域有广泛应用。
该技术线性范围较宽，可以适应不同浓度 的样品检测，减少了样品稀释和浓缩的繁 琐步骤。
非放射性
简单快捷
化学发光反应产生的光子不带电荷，因此 没有放射性污染，对实验人员和环境安全 。
在生物医学研究中的应用
蛋白质组学研究
利用化学发光技术对蛋白 质进行标记和检测，有助 于蛋白质相互作用、定位 和功能研究。
基因表达分析
通过化学发光技术检测基 因表达水平，研究基因调 控和疾病发生机制。
细胞成像与定位
利用化学发光技术对细胞 内分子进行标记和成像， 研究细胞结构和功能。
它利用化学反应过程中释放的能 量激发发光物质，使其发出特定 波长的光，从而实现物质的检测 。
化学发光技术的原理
当某些物质被某种能量激发时，这些 物质会吸收能量并跃迁至激发态。
在化学发光反应中，通常需要加入特 殊的化学物质作为发光物质，这些物 质在反应过程中被激发并发出光辐射 。
当这些物质从激发态回到基态时，会 以光子的形式释放能量，从而产生光 辐射。
化学发光反应通常比较简单，所需的仪器 设备相对不复杂，操作简便，检测快速。
缺点
背景光干扰
化学发光反应中可能伴随有背景光的产生 ，对检测结果造成干扰，影响检测的准确
性。
特定性不强
某些化学发光反应可能不仅仅与目标物质 发生反应，也可能与其他类似物质发生反
应，导致检测的特异性不够强。
试剂昂贵且不稳定
某些化学发光试剂比较昂贵且容易分解变 质，需要妥善保存，增加了实验成本和难 度。
03
CATALOGUE
化学发光技术的优缺点
优点
高灵敏度
宽线性范围
化学发光技术具有很高的灵敏度，能够检 测到极低浓度的物质，因此在生物医学、 环境监测和食品安全等领域有广泛应用。
该技术线性范围较宽，可以适应不同浓度 的样品检测，减少了样品稀释和浓缩的繁 琐步骤。
非放射性
简单快捷
化学发光反应产生的光子不带电荷，因此 没有放射性污染，对实验人员和环境安全 。
在生物医学研究中的应用
蛋白质组学研究
利用化学发光技术对蛋白 质进行标记和检测，有助 于蛋白质相互作用、定位 和功能研究。
基因表达分析
通过化学发光技术检测基 因表达水平，研究基因调 控和疾病发生机制。
细胞成像与定位
利用化学发光技术对细胞 内分子进行标记和成像， 研究细胞结构和功能。
化学发光ppt
概念
• 化学发光免疫技术：集灵敏的化学 发光分析和特异的抗原抗体免疫测 定于一体的检测技术。
• 特点： 特异性高、敏感性高、分离简便、 快速、试剂无毒、安全稳定、 可自动化。
化学发光免疫技术的类型
• 按发光剂不同分为 1.发光酶免疫测定（CLEIA） chemiluminescence enzymeimmunoasssay 2.化学发光免疫测定技术(CLIA) chemiluminescence immunoassay 3.电化学发光免疫测定技术(ECLI) electrochemiluminescence immunoassay
三联毗啶钌 分子结构图
N
N
N
Ru
N
N
N
O O
N O
O
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第二节 发光酶免疫测定（CLEIA）
一、原理 属于酶免疫测定的一种。只是最后一 步酶反应所用底物为发光剂，通过发光反应 发出的光在特定的仪器上进行测定。
二、技术类型 根据酶促反应底物不同可分为： 1.荧光酶免疫测定技术 2.化学发光酶免疫测定技术
2.分离技术 将复合物转移到玻璃纤维上，用缓 冲液洗涤，没结合的抗原被洗脱，酶标抗体-抗 原-胶乳微粒抗体复合物则被保留在纤维膜上。
3.酶促发光反应 加入4-MUP，酶标抗体上AP将 4-MUP分解，形成4-MU，它在360nm激发光的照 射下，发出448nm的荧光，经荧光仪记录，放大， 根据标准曲线由电脑计算出所测物质的含量
E
Байду номын сангаасE E
洗涤
E
弃上清
E
E
E
A M P P D 发 光
E
碱性磷酸酶
抗 塑
体料是通包微 利过被珠 光用酶强度对标记的发抗光测体 定底而物样抗 本原催直接化进作A M行用P P定而D 量直。接发光，
发光现象ppt课件
发光现象的应用领域
总结词
发光现象在多个领域都有广泛的应用，如生物医学、 化学分析、照明显示等。
详细描述
发光现象在多个领域都有广泛的应用。在生物医学领域 ，荧光和化学发光技术被广泛应用于生物标记、免疫分 析、核酸检测等领域，可以用于疾病的诊断和治疗。在 化学分析领域，荧光和化学发光技术可以用于检测环境 中的污染物、药物残留等，具有高灵敏度和高选择性。 在照明显示领域，LED等发光器件已经成为现代照明和 显示技术的主流，具有高效、节能、环保等特点。此外 ，发光现象还在能源、安全等领域有着广泛的应用。
海洋生物发光现象的应用
海洋生物发光现象是指某些海洋生物能够通过生物化学反应产生光的现象。
海洋生物发光现象在生态系统中具有重要的意义，如吸引食物、繁殖和通讯等。
海洋生物发光现象也为人类提供了新的能源和生物材料来源，如利用细菌产生的荧 光蛋白标记物进行生物成像和药物筛选等。
Part
05
发光现象的研究进展与未来展 望
生物发光原理
总结词
生物发光是指生物体内某些化学物质在酶的作用下， 经过一系列的化学反应释放出光子的现象。
详细描述
生物发光是一种特殊的发光现象，其原理基于生物体 内某些化学物质在酶的作用下发生的一系列化学反应 。这些化学反应释放出的能量以光子的形式释放出来 ，表现为可见的光辐射。生物发光现象通常出现在一 些生物体中，如萤火虫、某些细菌和海洋生物等。生 物发光的优点是发光效率高、持续时间长、对环境无 害，因此在生态学、生物学等领域有广泛应用。
LED照明技术的应用
LED（发光二极管）是一种能够 直接将电能转化为可见光的固态 光源，具有高效、节能、环保等
优点。
LED照明技术在照明产业中占据 越来越重要的地位，广泛应用于 室内外照明、显示屏幕、汽车照
化学发光PPT课件
第2页/共56页
教学目标及任务
一、掌握化学发光免疫技术的概念 二、掌握化学发光免疫分析基本原理 三、熟悉化学发光免疫分析的类型 四、了解临床应用 五、了解发展与展望
第3页/共56页
第九章 化学发光免疫 分析技术
第一节 慨 述 一、化学发光 二、化学发光效率
第二节 化学发光剂和标记技术 一、化学发光剂 二、发光剂的标记技术
第41页/共56页
电化学发光免疫分析示意图
第42页/共56页
电化学发光免疫测定示意图
第43页/共56页
标记磁颗粒在电场中发光工作示意图
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第47页/共56页
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四、临床应用
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光照发光（photoluminescence）是指发光剂（荧 光素）经短波长的入射光照射后，电子吸收能量跃迁 到激发态，在其回复至基态时，发射出较长波长的可 见光（荧光）。
生物发光（bioluminescence）是指发生在生物体内 的发光现象，如萤火虫的发光，反应底物为萤火虫荧 光素，在荧光素酶的催化下，利用ATP能，生成激发 态氧化型荧光素，它在回复基态时多余的能量以光子 的形式释放出来。
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㈠直接化学发光剂 直接化学发光剂在发光免疫分析过程中不需 酶的催化作用，直接参与发光反应，它们在 化学结构上有产生发光的特有基团，可直接 标记抗原或抗体。
第18页/共56页
1. 吖啶酯 在碱性条件下被H2O2氧化 时,发出波长为470nm的光，具有很高的 发光效率，其激发态产物 N-甲基吖啶 酮是该发光反应体系的发光体。
教学目标及任务
一、掌握化学发光免疫技术的概念 二、掌握化学发光免疫分析基本原理 三、熟悉化学发光免疫分析的类型 四、了解临床应用 五、了解发展与展望
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第九章 化学发光免疫 分析技术
第一节 慨 述 一、化学发光 二、化学发光效率
第二节 化学发光剂和标记技术 一、化学发光剂 二、发光剂的标记技术
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电化学发光免疫分析示意图
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电化学发光免疫测定示意图
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标记磁颗粒在电场中发光工作示意图
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四、临床应用
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光照发光（photoluminescence）是指发光剂（荧 光素）经短波长的入射光照射后，电子吸收能量跃迁 到激发态，在其回复至基态时，发射出较长波长的可 见光（荧光）。
生物发光（bioluminescence）是指发生在生物体内 的发光现象，如萤火虫的发光，反应底物为萤火虫荧 光素，在荧光素酶的催化下，利用ATP能，生成激发 态氧化型荧光素，它在回复基态时多余的能量以光子 的形式释放出来。
第17页/共56页
㈠直接化学发光剂 直接化学发光剂在发光免疫分析过程中不需 酶的催化作用，直接参与发光反应，它们在 化学结构上有产生发光的特有基团，可直接 标记抗原或抗体。
第18页/共56页
1. 吖啶酯 在碱性条件下被H2O2氧化 时,发出波长为470nm的光，具有很高的 发光效率，其激发态产物 N-甲基吖啶 酮是该发光反应体系的发光体。
化学发光介绍ppt课件
9
主要内容
免疫学检测方法介绍 感染性疾病检测 肿瘤标志物检测 甲状腺及甲状旁腺功能检测 肝纤维化检测 肾功能检测 激素检测 自身抗体检测 优生优育
唐氏筛查 心血管及心肌标志物 高血压辅助诊断 糖代谢 骨代谢 贫血类 炎症 药物浓度
10
感染性疾病检测
甲型肝炎病毒（HAV）免疫检测 HAV属于小RNA病毒科中的肝RNA病毒属 HAV-IgM 人感染HAV后，血液中首先出现anti-HAV-IgM,于发病
优点：特异性好
缺点：灵敏度较差，结果判断主观，只能定性检测
6
免疫学检测方法介绍
时间分辨荧光分析法：用3价稀土离子及螯合物为示踪物代替荧 光物质、酶、同位素化学发光物质，标记抗体、抗原、激素、多 肽、蛋白质、核酸及生物细胞，待反应体系发生后，用时间分辨 检测仪测定反应产物中的荧光强度。根据产物荧光强度和相对荧 光强度的比值，判断反应体系中分析物的浓度，从而达到定量分 析。
14
感染性疾病检测
乙肝五项标志物的定量检测
4、HBcAb
阳性：表示既往感染乙肝病毒，如高抗体水平持续存在提示乙肝 病毒可能还在复制，乙肝病毒感染后，此抗体是最早出现的标志 性抗体，持续时间长，并且几乎所有患者均产生抗体，所以此抗 体是流行病学调查指标。
优点：灵敏度高、特异性好、可实现自动化 缺点：成本较高
7
免疫学检测方法介绍
化学发光检测技术：免疫反应系统和化学发光分析系统。 化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和 氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态 中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用 发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发 光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在 抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或酶作用于发光底物。
主要内容
免疫学检测方法介绍 感染性疾病检测 肿瘤标志物检测 甲状腺及甲状旁腺功能检测 肝纤维化检测 肾功能检测 激素检测 自身抗体检测 优生优育
唐氏筛查 心血管及心肌标志物 高血压辅助诊断 糖代谢 骨代谢 贫血类 炎症 药物浓度
10
感染性疾病检测
甲型肝炎病毒（HAV）免疫检测 HAV属于小RNA病毒科中的肝RNA病毒属 HAV-IgM 人感染HAV后，血液中首先出现anti-HAV-IgM,于发病
优点：特异性好
缺点：灵敏度较差，结果判断主观，只能定性检测
6
免疫学检测方法介绍
时间分辨荧光分析法：用3价稀土离子及螯合物为示踪物代替荧 光物质、酶、同位素化学发光物质，标记抗体、抗原、激素、多 肽、蛋白质、核酸及生物细胞，待反应体系发生后，用时间分辨 检测仪测定反应产物中的荧光强度。根据产物荧光强度和相对荧 光强度的比值，判断反应体系中分析物的浓度，从而达到定量分 析。
14
感染性疾病检测
乙肝五项标志物的定量检测
4、HBcAb
阳性：表示既往感染乙肝病毒，如高抗体水平持续存在提示乙肝 病毒可能还在复制，乙肝病毒感染后，此抗体是最早出现的标志 性抗体，持续时间长，并且几乎所有患者均产生抗体，所以此抗 体是流行病学调查指标。
优点：灵敏度高、特异性好、可实现自动化 缺点：成本较高
7
免疫学检测方法介绍
化学发光检测技术：免疫反应系统和化学发光分析系统。 化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和 氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态 中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用 发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发 光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在 抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或酶作用于发光底物。
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3
免疫比浊技术：在免疫反应沉淀检测法的 基础上建立起来的，是用透射比浊仪或散 射比浊仪检测可溶性抗原抗体复合物在液 相中形成的浊度从而测定抗原（抗体）的 含量 优点：快速简便 缺点：受“前带现象”影响较大，灵敏度 和特异性较差 放射免疫分析技术：用同位素标记纯化的 抗原（抗体）与待测的抗体（抗原）结合，
•化学发光免疫检 测介绍
1
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
主要内容
免疫学检测方法介绍 筛查 感染性疾病检测 管及心肌标志物 肿瘤标志物检测 压辅助诊断 甲状腺及甲状旁腺功能检测 谢 肝纤维化检测 谢
唐氏 心血 高血
糖代 骨代
2
免疫学检测方法介绍
免疫学检测是基于抗原和抗体的特 异性反应进行检测的一种手段；
免疫标记技术是将一些既易测定又 具有高度敏感性的物质标记到特异 性抗原或抗体分子上，通过这些标 记物的增强放大效应来显示反应系 统中抗原或抗体的性质与含量。
5
金标记免疫（胶体金）分析技术：简便、 快速、不需要特殊仪器，适用于单人份操 作，可用于较紧急和实验条件较差场合。 但是灵敏度、特异性较差，无法实现自动 化，结果判断主观，受环境影响较大，成 本高。 免疫荧光技术：先将已知的抗原（抗体） 标记上荧光素，再用这种荧光抗原（抗体） 作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗 原（或抗体）。在细胞或组织中形成的抗
唐氏 心血 高血
糖代 骨代
10
感染性疾病检测
甲型肝炎病毒（HAV）免疫检测 HAV属于小RNA病毒科中的肝RNA病毒属 HAV-IgM 人感染HAV后，血液中首先出现 anti-HAV-IgM,于发病后2～3周达峰值， 1～2月后迅速下降，3个月后基本消失。因 此，anti-HAV-IgM是诊断甲型肝炎早期感 染的指标。 HAV-IgG Anti-HAV-IgM一般在急性感染 后3～12周出现，滴度缓慢上升，6个月后 达到峰值，然后逐渐下降，但维持时间较
化学发光介绍.ppt
分析诊断试剂发光类型为辉光型。
4
化学发光免疫分析的优势
▪ 灵敏度高
▪ 灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性，其灵敏度 可达 10-22 mol/L （ RIA 为 10 -12 mol/L ）。化学发光 免疫分析能够检出放射免疫分析和酶联免疫分析等方法 无法检出的物质，对疾病的早期诊断具有十分重要的意 义。
化学发光介绍
二零零九年元月
1
▪ 化学发光免疫分析方法简介
▪ 化学发光免疫分析
▪ （Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）
▪
是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它
具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无
污染、仪器简单经济等优点。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分
这些情况的发生，为正确判断病情提供依据。并且目前病毒性肝炎和其他
病因所致的肝病甚多，而且临床症状、体征及肝功能无特殊改变差异，故
只有依靠高灵敏度的病原学鉴别诊断。
10
▪ 1．缩短急性乙肝HBsAg 测定“窗口期” ▪ 2．如病毒发生变异后，表达量较低，常规ELISA测不出抗原，而化
学发光免疫分析定量具有极高的灵敏度，可发现并极有可能同时测定 出HBsAg和HBsAb。 ▪ 3. 可发现低浓度HBsAg携带者。特别是一些群体如医护工作者、病人 家属等，由于长期密切接触，但又非直接经血传播感染成急性乙肝， 而是长期少量感染，并刺激机体产生一定的免疫力，可能呈低浓度感 染，特别应当引起人们的足够重视，密切关注并采取措施防止发展成 乙肝或慢性携带者。
9
▪ 一、化学发光极大地提高了检测灵ห้องสมุดไป่ตู้度
▪
HBsAg是HBV感染的特异标志，HBsAg的出现就可作为乙肝的早期诊
4
化学发光免疫分析的优势
▪ 灵敏度高
▪ 灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性，其灵敏度 可达 10-22 mol/L （ RIA 为 10 -12 mol/L ）。化学发光 免疫分析能够检出放射免疫分析和酶联免疫分析等方法 无法检出的物质，对疾病的早期诊断具有十分重要的意 义。
化学发光介绍
二零零九年元月
1
▪ 化学发光免疫分析方法简介
▪ 化学发光免疫分析
▪ （Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）
▪
是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它
具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无
污染、仪器简单经济等优点。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分
这些情况的发生，为正确判断病情提供依据。并且目前病毒性肝炎和其他
病因所致的肝病甚多，而且临床症状、体征及肝功能无特殊改变差异，故
只有依靠高灵敏度的病原学鉴别诊断。
10
▪ 1．缩短急性乙肝HBsAg 测定“窗口期” ▪ 2．如病毒发生变异后，表达量较低，常规ELISA测不出抗原，而化
学发光免疫分析定量具有极高的灵敏度，可发现并极有可能同时测定 出HBsAg和HBsAb。 ▪ 3. 可发现低浓度HBsAg携带者。特别是一些群体如医护工作者、病人 家属等，由于长期密切接触，但又非直接经血传播感染成急性乙肝， 而是长期少量感染，并刺激机体产生一定的免疫力，可能呈低浓度感 染，特别应当引起人们的足够重视，密切关注并采取措施防止发展成 乙肝或慢性携带者。
9
▪ 一、化学发光极大地提高了检测灵ห้องสมุดไป่ตู้度
▪
HBsAg是HBV感染的特异标志，HBsAg的出现就可作为乙肝的早期诊
化学发光介绍 ppt课件
2、定量测定HBeAg和HBeAb浓度的变化，可以反映病情变化和治疗效果。明确测定 HbeAg向抗-Hbe转换的时期，即表现为HbeAg浓度下降和抗-Hbe浓度升高的过程。高浓 度的HbeAg还可间接提示病毒处于高复制状态，具有较高的传染性。高浓度的抗-Hbe一方 面提示病情的好转，而在某些时候（如肝功能指标很差）可能与肝坏死、肝硬化、肝癌有 关。
缺点
化学发光 放射免疫 酶联免疫 时间分辨 电化学发光
操作简单，成本较低，灵 进口试剂成本较高，国产 敏度较高，试剂较稳定 试剂合理
试剂成本低，灵敏度较高 操作复杂操作简单
灵敏度低，适用于定性和 半定量
灵敏度较高，试剂较稳定 操作复杂，反应时间长， 试剂成本较高
灵敏度较高，试剂较稳定 试剂成本高，仪器维护费 用较高，有本底干扰
收费标准 每月标本量 每年毛收入 每年成本
(元)
(万元)
(万元)
乙肝两对半
180
15*22天
71.28
化学发光免疫仅乙肝五项年净收入总计47.52万元
23.76 每人份60元
年净收入/ 万元(保守
估计)
47.52
乙肝两对半
25
15*22天
9.90
1.19
8.71
每人份3元
酶法试剂乙肝五项年净收入总计 8.71万元
3、性激素系列
（LH,FSH,TSH,E2,PRO,PRL,TES,HC G,B-HCG…）
8、优生优育类
（TOX,CMV,HSVI,HSVII,RUB）
4、甲状腺功能
9、其他类
（T3,T4,FT3,FT4,TSH,TM,TG,TPO…） （ALB,一些药物测试等）
5、糖尿病系列
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分析诊断试剂发光类型为辉光型。
精选ppt
4
化学发光免疫分析的优势
▪ 灵敏度高
▪ 灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性，其灵敏度 可达 10-22 mol/L （ RIA 为 10 -12 mol/L ）。化学发光 免疫分析能够检出放射免疫分析和酶联免疫分析等方法 无法检出的物质，对疾病的早期诊断具有十分重要的意 义。
化学发光介绍
二零零九年元月
精选ppt
1
▪ 化学发光免疫分析方法简介
▪ 化学发光免疫分析 ▪ （Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）
▪
是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它
具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无
污染、仪器简单经济等优点。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分
▪ 3. 可发现低浓度HBsAg携带者。特别是一些群体如医护工作者、病人 家属等，由于长期密切接触，但又非直接经血传播感染成急性乙肝， 而是长期少量感染，并刺激机体产生一定的免疫力，可能呈低浓度感 染，特别应当引起人们的足够重视，密切关注并采取措施防止发展成 乙肝或慢性携带者。
（C肽，INS,INS-AB,GAD,PINS,ICA…） 项目。。。
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8
为什么要开展乙肝“两对半”定量检测
▪ 乙型病毒性肝炎是世界性的传染病，严重地威胁着人类的健康。我国是乙型 病毒性肝炎高发病国家。据统计全世界无症状携带者（HBsAg携带者）超过 2.8亿，我国占1亿以上，且多数无症状。所以乙肝的早期诊断对控制传染源、 降低发病率及疾病的治疗均具有很重要的意义。酶标（ELISA）检测始于20 世纪80年代中期，它对乙肝“两对半”定性测定在疾病的诊断，病情监测， 疗效观察起到了一定的作用，但酶标检测HbsAg灵敏度较低，不能真正意义 上定量测定血清中HbsAg含量。随着临床医学的发展，定性检测已经远远不 能满足临床及患者的要求。化学发光免疫分析定量测定乙肝“两对半”大大 弥补了酶标定性测定及灵敏度低的不足。
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6
▪ 分析方法简便快速
▪ 绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂（或复合试剂）的一步模式。
▪ 结果稳定、误差小
▪ 样品系直接自己发光，不需要任何光源照射，免除了各种可能因素（光源 稳定性、光散射、光波选择器等）给分析带来的影响，使分析结果灵敏稳 定可靠。
▪ 安全性好及使用期长
▪ 免除了使用放射性物质。到目前为止，还未发现其危害性；试剂稳定，保 存期可达一年。
激素、甲状腺功能等方面的体外诊断实验中。
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3
▪ 化学发光是一种特异的化学反应，有机分子吸收化学能后发生能级跃迁， 产生一种高能级的电子激发态不稳定的中间体，当其返回到基态而发出 光子，即为化学发光。将化学发光与抗原抗体相结合而形成的免疫分析 技术，即为化学发光免疫分析。
▪ 化学发光的发光类型通常分为闪光型（flash type）和辉光型（glow type） 两种。闪光型发光时间很短，只有零点几秒到几秒。辉光型又称持续型， 发光时间从几分钟到几十分钟，或几小时至更久。闪光型的样品必须立 即测量，必须配以全自动化的加样及测量仪。测量辉光型的样品可以使 用通用型仪器，也可以配全自动化仪器。北京泰格科信的化学发光免疫
析的取代者，是免疫分析重要的发展方向。CLIA发展迅猛，已占各
种免疫分析的首位，是目前放射免疫分析和酶联免疫分析最佳的取
代者。
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2
▪ 化学发光免疫测定是目前世界公认先进的标记免疫测定 技术，化学发光免疫分析技术具有高度的准确性和特异 性，成为检验方法中最为重要的技术之一。化学发光免 疫分析技术作为疾病诊断的主要手段已被广泛用于机体 免疫功能、传染性疾病、内分泌功能、肿瘤标志物、性
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9
▪ 一、化学发光极大地提高了检测灵敏度
▪
HBsAg是HBV感染的特异标志，HBsAg的出现就可作为乙肝的早期诊
断，绝大多数HBV感染者外周血可出现HBsAg。化学发光免疫分析检测
HBsAg灵敏度可达0.2ng/ml，而酶标（EIASA）检测的灵敏度为2ng/ml，
放射免疫（RIA）灵敏度为灵敏度。因此，在急性乙肝早期化学发光免疫分析检测能及早检出HBsAg，
缩短窗口期的时间，而酶标检测在乙肝早期往往HBsAg呈阴性；其次，可
发现低浓度HBsAg携带者；在部分慢性乙肝患者中，由于机体缺乏对HBV
包膜蛋白的免疫应答，HBsAg表达较低，酶标检测可出现HBsAg和表面抗
体（HBsAb）均阴性的情况，化学发光免疫分析检测的高灵敏度则可避免
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7
目前化学发光开展的项目
1、乙肝两对半（表面抗原、表面 6、肝纤维化检测
抗体、E抗原、E抗体、核心抗体）
（HA,LN,PCIII,CIV,FN）
2、肿瘤标志物
（AFP,CEA,PSA,FPSA,FER,CA199,C A125,CA153,B-2MG…）
7、不育不孕类
（AOA,AEA,ASA,ATB.ACA.ZB,HCG）
这些情况的发生，为正确判断病情提供依据。并且目前病毒性肝炎和其他
病因所致的肝病甚多，而且临床症状、体征及肝功能无特殊改变差异，故
只有依靠高灵敏度的病原学鉴别诊断。
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10
▪ 1．缩短急性乙肝HBsAg 测定“窗口期”
▪ 2．如病毒发生变异后，表达量较低，常规ELISA测不出抗原，而化 学发光免疫分析定量具有极高的灵敏度，可发现并极有可能同时测定 出HBsAg和HBsAb。
3、性激素系列
（LH,FSH,TSH,E2,PRO,PRL,TES,HC G,B-HCG…）
8、优生优育类
（TOX,CMV,HSVI,HSVII,RUB）
4、甲状腺功能
9、其他类
（T3,T4,FT3,FT4,TSH,TM,TG,TPO…） （ALB,一些药物测试等）
5、糖尿病系列
10、不断发展中的其他临床检测
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5
▪ 宽的线性动力学范围
▪ 发光强度在 4 ～ 6 个量级之间与测定物质浓度间呈线 性关系。这与显色的酶免疫分析吸光度（ OD 值）为 2.0 的范围相比，优势明显。虽然 RIA 也有较宽的线性 动力学范围，但放射性限制了其应用。
▪ 光信号持续时间长
▪ 辉光型的 CLIA 产生的光信号持续时间可达数小时甚至 一天。简化了实验操作及测量。
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4
化学发光免疫分析的优势
▪ 灵敏度高
▪ 灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性，其灵敏度 可达 10-22 mol/L （ RIA 为 10 -12 mol/L ）。化学发光 免疫分析能够检出放射免疫分析和酶联免疫分析等方法 无法检出的物质，对疾病的早期诊断具有十分重要的意 义。
化学发光介绍
二零零九年元月
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1
▪ 化学发光免疫分析方法简介
▪ 化学发光免疫分析 ▪ （Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）
▪
是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它
具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无
污染、仪器简单经济等优点。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分
▪ 3. 可发现低浓度HBsAg携带者。特别是一些群体如医护工作者、病人 家属等，由于长期密切接触，但又非直接经血传播感染成急性乙肝， 而是长期少量感染，并刺激机体产生一定的免疫力，可能呈低浓度感 染，特别应当引起人们的足够重视，密切关注并采取措施防止发展成 乙肝或慢性携带者。
（C肽，INS,INS-AB,GAD,PINS,ICA…） 项目。。。
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8
为什么要开展乙肝“两对半”定量检测
▪ 乙型病毒性肝炎是世界性的传染病，严重地威胁着人类的健康。我国是乙型 病毒性肝炎高发病国家。据统计全世界无症状携带者（HBsAg携带者）超过 2.8亿，我国占1亿以上，且多数无症状。所以乙肝的早期诊断对控制传染源、 降低发病率及疾病的治疗均具有很重要的意义。酶标（ELISA）检测始于20 世纪80年代中期，它对乙肝“两对半”定性测定在疾病的诊断，病情监测， 疗效观察起到了一定的作用，但酶标检测HbsAg灵敏度较低，不能真正意义 上定量测定血清中HbsAg含量。随着临床医学的发展，定性检测已经远远不 能满足临床及患者的要求。化学发光免疫分析定量测定乙肝“两对半”大大 弥补了酶标定性测定及灵敏度低的不足。
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6
▪ 分析方法简便快速
▪ 绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂（或复合试剂）的一步模式。
▪ 结果稳定、误差小
▪ 样品系直接自己发光，不需要任何光源照射，免除了各种可能因素（光源 稳定性、光散射、光波选择器等）给分析带来的影响，使分析结果灵敏稳 定可靠。
▪ 安全性好及使用期长
▪ 免除了使用放射性物质。到目前为止，还未发现其危害性；试剂稳定，保 存期可达一年。
激素、甲状腺功能等方面的体外诊断实验中。
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3
▪ 化学发光是一种特异的化学反应，有机分子吸收化学能后发生能级跃迁， 产生一种高能级的电子激发态不稳定的中间体，当其返回到基态而发出 光子，即为化学发光。将化学发光与抗原抗体相结合而形成的免疫分析 技术，即为化学发光免疫分析。
▪ 化学发光的发光类型通常分为闪光型（flash type）和辉光型（glow type） 两种。闪光型发光时间很短，只有零点几秒到几秒。辉光型又称持续型， 发光时间从几分钟到几十分钟，或几小时至更久。闪光型的样品必须立 即测量，必须配以全自动化的加样及测量仪。测量辉光型的样品可以使 用通用型仪器，也可以配全自动化仪器。北京泰格科信的化学发光免疫
析的取代者，是免疫分析重要的发展方向。CLIA发展迅猛，已占各
种免疫分析的首位，是目前放射免疫分析和酶联免疫分析最佳的取
代者。
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2
▪ 化学发光免疫测定是目前世界公认先进的标记免疫测定 技术，化学发光免疫分析技术具有高度的准确性和特异 性，成为检验方法中最为重要的技术之一。化学发光免 疫分析技术作为疾病诊断的主要手段已被广泛用于机体 免疫功能、传染性疾病、内分泌功能、肿瘤标志物、性
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9
▪ 一、化学发光极大地提高了检测灵敏度
▪
HBsAg是HBV感染的特异标志，HBsAg的出现就可作为乙肝的早期诊
断，绝大多数HBV感染者外周血可出现HBsAg。化学发光免疫分析检测
HBsAg灵敏度可达0.2ng/ml，而酶标（EIASA）检测的灵敏度为2ng/ml，
放射免疫（RIA）灵敏度为灵敏度。因此，在急性乙肝早期化学发光免疫分析检测能及早检出HBsAg，
缩短窗口期的时间，而酶标检测在乙肝早期往往HBsAg呈阴性；其次，可
发现低浓度HBsAg携带者；在部分慢性乙肝患者中，由于机体缺乏对HBV
包膜蛋白的免疫应答，HBsAg表达较低，酶标检测可出现HBsAg和表面抗
体（HBsAb）均阴性的情况，化学发光免疫分析检测的高灵敏度则可避免
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7
目前化学发光开展的项目
1、乙肝两对半（表面抗原、表面 6、肝纤维化检测
抗体、E抗原、E抗体、核心抗体）
（HA,LN,PCIII,CIV,FN）
2、肿瘤标志物
（AFP,CEA,PSA,FPSA,FER,CA199,C A125,CA153,B-2MG…）
7、不育不孕类
（AOA,AEA,ASA,ATB.ACA.ZB,HCG）
这些情况的发生，为正确判断病情提供依据。并且目前病毒性肝炎和其他
病因所致的肝病甚多，而且临床症状、体征及肝功能无特殊改变差异，故
只有依靠高灵敏度的病原学鉴别诊断。
精选ppt
10
▪ 1．缩短急性乙肝HBsAg 测定“窗口期”
▪ 2．如病毒发生变异后，表达量较低，常规ELISA测不出抗原，而化 学发光免疫分析定量具有极高的灵敏度，可发现并极有可能同时测定 出HBsAg和HBsAb。
3、性激素系列
（LH,FSH,TSH,E2,PRO,PRL,TES,HC G,B-HCG…）
8、优生优育类
（TOX,CMV,HSVI,HSVII,RUB）
4、甲状腺功能
9、其他类
（T3,T4,FT3,FT4,TSH,TM,TG,TPO…） （ALB,一些药物测试等）
5、糖尿病系列
10、不断发展中的其他临床检测
精选ppt
5
▪ 宽的线性动力学范围
▪ 发光强度在 4 ～ 6 个量级之间与测定物质浓度间呈线 性关系。这与显色的酶免疫分析吸光度（ OD 值）为 2.0 的范围相比，优势明显。虽然 RIA 也有较宽的线性 动力学范围，但放射性限制了其应用。
▪ 光信号持续时间长
▪ 辉光型的 CLIA 产生的光信号持续时间可达数小时甚至 一天。简化了实验操作及测量。