基础生物化学实验
生物化学与基础分子生物学实验
生物化学与基础分子生物学实验本实验旨在增进学生对于生物化学与基础分子生物学知识的理解，同时也希望借此机会增强学生的实验动手能力和实验数据分析能力。
本实验主要分为两部分，第一部分是生物化学实验，主要包括蛋白质的提取、纯化和酶促反应的研究。
第二部分是基础分子生物学实验，主要涉及DNA的提取、PCR扩增和凝胶电泳检测等。
一、生物化学实验1. 蛋白质的提取蛋白质的提取是研究蛋白质功能和结构的基础。
常用的蛋白质提取方法有机械破碎法、化学破碎法和生物学破碎法等。
本实验以细胞生物学破碎法为主要方法，即利用超声波或手工研磨等方法将细胞破碎。
其中，手工研磨可以选择石英砂或三氧化二铬等研磨介质。
破碎过程中需加入适量浓度等渗液和抑制剂，以防止蛋白质的降解和氧化。
2. 蛋白质的纯化蛋白质的纯化是进一步研究蛋白质结构和功能的关键。
常用的蛋白质纯化方法包括离子交换、凝胶过滤、透析、亲和层析和电泳等方法。
本实验以离子交换和凝胶过滤为主要方法。
其中，离子交换可利用正离子交换和负离子交换两种模式进行，考虑到蛋白质电荷状态的不同以及离子交换树脂的不同选择，从而使得目标蛋白质与其它蛋白质的区分度大大增加。
凝胶过滤则利用凝胶的孔径大小进行分离纯化。
3. 酶促反应的研究酶促反应是生物化学研究的重要组成部分，可以研究酶的特性、动力学以及酶对于特定底物和抑制剂的亲和性等。
本实验选择酶促细胞色素C氧化为模型反应。
反应中需要考虑诸多因素，如温度、pH、反应时间等，同时还需考虑反应体系中酶、底物和抑制剂的摩尔比例关系。
二、基础分子生物学实验1. DNA的提取DNA的提取是基础分子生物学实验的关键步骤，其目的是提高纯度和量。
常用的DNA提取方法有化学法、机械法、热平衡法和离心法等。
本实验以盐酸摇法为主要方法进行DNA的提取。
其中将细胞经过适当处理后加入盐酸和β-己糖苷酯，在恒温和摇动条件下分离得到DNA。
2. PCR扩增PCR是分子生物学中的核心技术之一，是一种复合酶链反应。
生物化学实验
⽣物化学实验实验⼀1、糖类的颜⾊反应1. α-萘酚反应糖在浓⽆机酸（硫酸或盐酸）作⽤下，脱⽔⽣成糠醛及糠醛衍⽣物，后者能与α-萘酚⽣成紫红⾊物质。
注意：因糠醛及糠醛衍⽣物对此反应均呈阳性，不是糖类的特异反应。
2. 间苯⼆酚反应在酸作⽤下，酮糖脱⽔⽣成羟甲基糠醛，后者再与间苯⼆酚作⽤⽣成红⾊物质。
此反应是酮糖的特异反应。
因为醛糖在同样条件下呈⾊反应缓慢，只有在糖浓度较⾼或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。
2、还原作⽤许多糖类由于其分⼦中含有⾃由的或潜在的醛基或酮基，因此在碱性溶液中能将铜、铁、银等⾦属离⼦还原，同时糖类本⾝被氧化成糖酸及其他产物。
糖类这种性质常被利⽤于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。
本实验所⽤的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。
它们都是Cu2＋的碱性溶液，能使还原糖氧化⽽本⾝被还原成红⾊（颗粒⼤）或黄⾊（颗粒⼩）的Cu2O沉淀。
实验⼆脂肪碘值的测定碘值（价）是指100g脂肪在⼀定条件下吸收碘的克数。
碘值是鉴别脂肪的⼀个重要常数，可⽤以判断脂肪所含脂肪酸的不饱和程度。
脂肪中常含有不饱和脂肪酸，不饱和脂肪酸具有⼀个或多个双键，能与卤素起加成作⽤⽽吸收卤素。
常⽤碘与脂肪中不饱和脂肪酸的双键起加成作⽤。
脂肪的不饱和程度越⾼，所含的不饱和脂肪酸越多，与其双键起加成作⽤的碘量就越多，碘值就越⾼。
故可⽤碘值表⽰脂肪的不饱和度。
I2+－CH=CH－－CHI－CHI－本实验⽤溴化碘(Hanus试剂)代替碘。
⽤⼀定量(必须过量)溴化碘和待测的脂肪作⽤后，⽤硫代硫酸钠滴定的⽅法测定溴化碘的剩余量，然后计算出待测脂肪吸收的碘量，求得脂肪的碘值。
加成作⽤：IBr+－CH=CH－－CHI－CHBr－剩余溴化碘中碘的释放：IBr + KI KBr + I2再⽤硫代硫酸钠滴定释放出来的碘：I2 +2Na2S2O3 2Na2S4O6+2NaI思考题：何谓空⽩溶液和空⽩实验？空⽩实验有何意义？在各种分析⽅法中，为消除⼲扰，⽤与测定试样时完全⼀致的条件进⾏测定的溶液。
生物化学实验
3、显色剂50～100mL
1.1％水合茚三酮正丁醇溶液。
五、操作
1.将盛有平衡溶剂的小烧杯置于密闭的层析缸中。
2.取层析滤纸(长22cm、宽14 cm)一张。在纸的—端距边缘2～3cm处用用铅笔划一条直线，在此直线上每间隔2cm作一记号如图。
5.显色用喷雾器均匀喷上O.1％茚三酮正丁醇溶液，然后置烘箱中烘烤5分钟(100℃)或用热风吹干即可显出各层析斑点。
6.计算各种氨基酸的只Rf值。
思考题
1、何谓纸层析法?
2、何谓片Rf值?影响Rf值的主要因素是什么?
3、怎样制备扩展剂?
4、层析缸中平衡溶剂的作用是什么？
实验二小麦萌发前后淀粉酶活力的比较
实验一纸层析法分离鉴定氨基酸
一、目的
通过氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作方法。
二、原理
纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。
层析溶剂由有机溶剂和水组成。
物质被分离后在纸层析图谱上的位置是用Rf值(比移)来表示的：
…
在一定的条件下某种物质的只Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨基酸。
休眠种子的淀粉酶活力很弱，种子吸胀萌动后，酶活力逐渐增强，并随着发芽天数增加而增加。
本实验观察小麦种子萌发前后淀粉酶活力的变化。
三、器材
1.25mL刻度试管 2. 吸管
3.离心管 4.乳钵
5.分光光度计 6.恒温水浴
7.离心机
四、试剂和材料
1、小麦种子
2、o.1％标准麦芽糖溶液
生物化学实验
生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一：糖的颜色反应实验1.1 莫氏实验一、目的掌握莫氏（molisch）实验鉴定糖的原理和方法。
二、原理糖经浓无机酸（浓硫酸、浓盐酸）脱水产生糠醛或糠醛衍生物，后者在浓无机酸作用下，能与α-萘酚生成紫红色缩合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环，因此又称“紫环反应”，其反应如下图：利用这一性质可以鉴定糖。
三、实验器材1、棉花或滤纸。
2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。
3、试管1.5*15cm(*4)。
四、实验试剂1、莫氏试剂：称取α-萘酚5g，溶于95%乙醇并稀释至100ml。
此试剂需新鲜配置，并贮于棕色试剂瓶中。
2、1%蔗糖溶液：称取蔗糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml。
3、1%葡萄糖溶液：称取葡萄糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液：讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物，然后缓缓倾入沸蒸馏水中，边加边搅。
最后以沸蒸馏水稀释至100ml。
五、操作于4支试管中，分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素（棉花或滤纸浸在1ml水中）。
然后各加莫氏试剂2滴1，摇匀，讲试管倾斜，沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇！)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层，观察液面交界处有无紫色环出现。
六、注意事项1、试管中加入各种糖后，应做好标记，浓硫酸加入的方式应保持一致。
2、莫氏反应非常灵敏，所用的试剂应洗净，不可再样品中混入纸屑等杂物。
3、当糖浓度过高时，由于浓硫酸对他的焦化作用，将呈现红色及褐色而不呈现紫色，需稀释后再做。
思考题：1、解释α-苯酚反应的原理。
2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些？试验1.2 塞氏试验一、目的掌握塞氏（Seliwanoff）实验鉴定酮糖的原理和方法。
二、原理酮糖在浓酸的作用下，脱水生产5-羟甲基糠醛，后者与间苯二酚作用，呈红色反应，有时亦同时产生棕色沉淀，此沉淀溶于乙醇，呈鲜红色沉淀2，以果糖为例，其反应如下：三、实验器材1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。
生物化学实验
生物化学实验第一节基本要求一、内容提要基础生物化学实验内容，主要以植物材料为研究对象。
实验项目包括糖类、脂类、蛋白质和氨基酸、核酸、酶、维生素的测定，既有定性又有定量。
实验内容编排不求齐全，而力求原理阐述简明扼要，通俗易懂，方法可靠，操作具体详尽，重复性好，灵敏度高。
实验方法涉及传统的滴定法以及分光光度法、层析法和电泳等现代生物化学实验技术。
本实验指导可供高等农业院校农学类、生物技术以及相关专业的本、专科学生使用，也可供从事与生物科学有关的科研工作者阅读与参考。
在以惊人速度发展的生物科学中，生物化学是其中最活跃的分支学科之一，它已成为发展生命科学各分支学科和生物工程技术的重要基础。
作为一门研究生命活动基本规律的科学，它又是一门实验科学。
工业、农业、医药、食品、能源、环境科学等越来越多的研究领域都以生物化学理论为依据，以其实验技术为手段，生物化学已成为高等院校许多相关专业学生必修的专业基础课程。
根据高等农业院校农学类专业教学计划，基础生物化学课程是一门重要的专业基础课；并且又是实践性极强的应用学科。
只有掌握扎实而广泛的基础知识和熟练的操作技能才算真正掌握好这门应用科学。
因此，我们组织编写这本基础生物化学实验指导。
本实验指导主要是配合基础生物化学教材，供高等农业院校农学类、生物技术以及相关专业的学生使用。
实验多以植物材料为主要研究对象；以生物大分子——碳水化合物、核酸、蛋白质和酶等为主要研究内容。
实验方法涉及到分光光度法、层析、电泳等现代生物化学实验技术。
在实验内容编排上，既有定性的又有定量的；实验教材由基础生物化学实验和附录两部分组成。
实验部分列出的实验项目包括糖类、脂类、蛋白质和氨基酸、核酸、酶、维生素的测定，有些项目包括几种不同方法，每一实验方法分为目的、原理、实验材料、仪器和试剂、操作步骤、结果计算、注意事项、思考题及参考答案。
本实验指导从一定角度反映了我国生物化学研究技术目前的水平和状况，内容不求全，而力求其可靠性和方法性。
生物化学实验内容
生物化学实验内容生物化学实验内容一、细胞的酶促反应实验实验原理：酶是生物体内起调节和催化作用的一类蛋白质，它能够催化某些基质（叫底物）的反应，促使底物转化成产物的过程。
本实验以酵母中的酶为例，研究酵母如何利用葡萄糖进行发酵反应，以产生二氧化碳气体。
实验步骤：1. 准备酵母发酵液：先在酵母粉中加入适量的葡萄糖，加入5%的酵母悬液，搅拌均匀，然后使用减压过滤器将液体过滤，并将过滤出的发酵液倒入操作管内。
2. 制备实验装置：将操作管与气体收集瓶通过U型玻璃管连接起来，用消毒酒精灯将管道消毒，然后将取样器放到气体收集瓶内。
3. 开始实验：将操作管倒置放在气体收集瓶内，然后用黄色指示移交管检测样品PH值。
等取样器内的气体达到稳定状态后，记录气体体积和温度，计算出气体的体积（记为V），并使用计算器计算气体里面的CO₂体积比例（%VCO₂=气体中CO₂体积/气体总体积）。
4. 重复实验：重复三次以上实验，计算平均值并分析实验数据。
实验结果：根据实验可得，当葡萄糖浓度越高时，发酵液中可产生的二氧化碳气体就会越多。
而当发酵液中的酵母数量增加时，发酵反应速率增快，产生的二氧化碳气体也会相应增多。
另外，当发酵温度过低或酸碱度过高，也会影响酵母的生长繁殖和发酵反应。
二、酶的催化实验实验原理：酶能够将底物转化成产物，同时不会自身发生变化，其催化作用也受到环境因素的影响。
本实验通过比较未加酶的底物和加入酶的底物的反应速率，来探究酶的催化作用。
实验步骤：1. 制备酶溶液：取适量的胰蛋白酶，加入适量的缓冲液，搅拌均匀，制成胰蛋白酶溶液。
2. 制备底物溶液：取适量的葡萄糖溶液，分成两份。
其中一份为未加酶的底物。
3. 加入酶溶液：将另一份葡萄糖溶液加入适量的酶溶液中，即为加入了酶的底物溶液。
4. 测定反应速率：分别加入两份底物溶液到不同的试管中，同时开始计时，观察反应产物生成的颜色变化，记录每个时间点的吸光度。
5. 分析实验结果：根据实验数据和曲线分析，可以得出在加入酶的情况下，底物反应速率明显比未加酶的底物快。
生物化学实验
生物化学实验生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一：糖的颜色反应实验1.1 莫氏实验一、目的掌握莫氏（molisch）实验鉴定糖的原理和方法。
二、原理糖经浓无机酸（浓硫酸、浓盐酸）脱水产生糠醛或糠醛衍生物，后者在浓无机酸作用下，能与α-萘酚生成紫红色缩合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环，因此又称“紫环反应”，其反应如下图：利用这一性质可以鉴定糖。
三、实验器材1、棉花或滤纸。
2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。
3、试管1.5*15cm(*4)。
四、实验试剂1、莫氏试剂：称取α-萘酚5g，溶于95%乙醇并稀释至100ml。
此试剂需新鲜配置，并贮于棕色试剂瓶中。
2、1%蔗糖溶液：称取蔗糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml。
3、1%葡萄糖溶液：称取葡萄糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液：讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物，然后缓缓倾入沸蒸馏水中，边加边搅。
最后以沸蒸馏水稀释至100ml。
五、操作于4支试管中，分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少1，摇匀，讲试管2滴1ml水中）。
然后各加莫氏试剂许纤维素（棉花或滤纸浸在倾斜，沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇！)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层，观察液面交界处有无紫色环出现。
六、注意事项1、试管中加入各种糖后，应做好标记，浓硫酸加入的方式应保持一致。
2、莫氏反应非常灵敏，所用的试剂应洗净，不可再样品中混入纸屑等杂物。
3、当糖浓度过高时，由于浓硫酸对他的焦化作用，将呈现红色及褐色而不呈现紫色，需稀释后再做。
思考题：1、解释α-苯酚反应的原理。
2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些？试验1.2 塞氏试验一、目的掌握塞氏（Seliwanoff）实验鉴定酮糖的原理和方法。
二、原理酮糖在浓酸的作用下，脱水生产5-羟甲基糠醛，后者与间苯二酚作用，呈2，以果红色反应，有时亦同时产生棕色沉淀，此沉淀溶于乙醇，呈鲜红色沉淀糖为例，其反应如下：三、实验器材1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。
生物化学实验3篇
生物化学实验第一篇：分离和纯化酶酶是一种具有催化作用的蛋白质，在生物化学研究中具有重要意义。
为了研究酶的性质和机制，需要对酶进行分离和纯化。
一、酶的分离方法1.分离基于酶的物理性质的方法，包括沉淀法、沉降法、过滤法和电泳法等。
2.基于酶的化学性质进行分离的方法，包括离子交换色谱法、凝胶过滤法、亲和层析法和扩散法等。
二、酶的纯化方法酶纯化的目的是通过不同的技术方法消除干扰因素，获得特异性高和纯度高的酶。
酶纯化一般通过以下步骤完成：1.初步分离：选择一种合适的分离方法（如沉淀法、凝胶过滤法或离子交换色谱法等），使酶从细胞或组织中分离出来。
2.活性测定：确定所分离出的物质是否为酶。
3.酶的纯化：经过不断的纯化步骤（如扩散法、凝胶层析法、电泳法、亲和层析法等），获得特异性高和纯度高的酶。
4.酶的结构与功能分析：对纯化后的酶进行结构与功能分析，探索其催化机理和调控机制。
三、酶的应用酶在生命科学和工业生产中应用广泛，主要应用包括：1.生命科学领域：用于疾病诊断、药物设计、基因工程、蛋白质工程和代谢组学等研究。
2.工业生产领域：用于食品加工、医药生产、纺织印染、制浆造纸、环境治理和能源生产等领域。
总之，酶的分离和纯化为酶的结构与功能分析和应用提供了基础。
随着生命科学和工业生产的不断发展，酶的应用前景日益广阔。
第二篇：酶催化反应酶是一种生物催化剂，能够加速生物化学反应，提高反应速率和效率。
酶催化反应的基本原理是：酶与底物结合，形成酶底物复合物，通过降低反应的活化能，促进反应速率，使底物转化成产物，最终释放出酶和产物。
具体而言，酶催化反应通常包括以下步骤：1.酶与底物的结合：酶与底物之间形成酶底物复合物，通常通过酶和底物之间的亲和性实现。
2.转化过渡态形成：酶催化的反应需要一定的能量（活化能）才能进行。
酶通过与底物结合，改变底物的构象，使底物转化成具有更高自由能的过渡态。
3.过渡态降解：在过渡态中，酶通过结构变化（催化中心的变化）降低了催化反应的活化能，促进了底物的转化，并释放出产物和酶。
基础生物化学实验
生物化学实验实验基本原理1 有效数字计算（结合电子天平的应用等）加减法：进行数字加减时，最后结果所保留的小数点后的位数应与参与运算的各数中小数点后位数最少者相同，其尾数“四舍五入”。
如：0.124+1.2345+12.34=13.6979，应取13.70。
乘除法：进行数字乘除时，最后结果的有效数字应与参与运算的各数中有效数字位数最少者为准，而与小数点的位数无关，其尾数“四舍五入”。
如：1.23×0.12=0.1476,应取0.15。
2 误差分析误差为实验分析的测定值与真实值之间的差值。
误差越小，测定值越准确，即准确度越高。
误差可用绝对误差和相对误差表示。
绝对误差= 测定值- 真实值相对误差= 绝对误差÷真实值×100%一般用相对误差表示结果的准确度，但因真实值是并不知道的，因此实际工作中无法求出分析的准确度，只得用精确度来评价分析的结果。
3 偏差分析（结合“可溶性蛋白或赖氨酸实验”要求掌握）精确度表示在相同条件下，进行多次实验的测定值相近的程度。
一般用偏差来衡量分析结果的精确度。
偏差也有绝对偏差和相对偏差两种表示方法。
绝对偏差= 单次测定值- 算术平均值（不计正负号）相对偏差= 绝对偏差÷算术平均值×100%例如：分析某一材料糖含量，共重复测定5次，其结果分别为：16.1%，15.8%，16.3%，16.2%，15.6%，用来表示精确度的偏差可计算如下：分析结果算术平均值个别测定的绝对偏差（不计正负）16.1% 0.1%15.8% 0.2%16.3% 16.0% 0.3%16.2% 0.2%15.6% 0.4%平均绝对偏差=（0.1%+0.2%+0.3%+0.2%+0.4%）÷5 = 0.2%平均相对偏差= 0.2÷16.0×100% = 1.25%在实验中，有时只做两次平行测定，这时就应用下式表达结果的精确度：两次分析结果的差值÷平均值×100%4 实验结果的表述：实验结果可用列表法（“影响酶作用的因素”常用）和作图法（综合实验用）表示。
生物化学试验基础
4 实验室规则
7)爱护实验器材，非本次实验使用的仪器设备未经老师允许不得乱动。本次实验必 须使用的仪器设备，在了解仪器性能和操作规程之前，不得冒然使用，更不可擅自 拆卸或将部件带出室外。实验过程中，如发现设备损坏或运转异常，应立即报告老 师。 8)实验室内严禁饮、食及吸烟!．对腐蚀性或易燃性试剂，操作时要格外小心。如酒 精、乙醚等低沸点有机溶剂，使用时应禁明火，远离火源，若需加热要用水浴加热 ，不可直接在火上加热。用吸量管吸取试剂时应使用吸球，严禁用嘴吸取。对于有 毒、腐蚀的试剂更应注意，应避免其直接接触人体及衣物。乙醚、丙酮等易燃试剂 应远离火源，以免发生意外。 9)注意实验室卫生、整洁。废弃液体应倒入水槽，放水冲走，有毒废弃物应放入废 物缸并及时作无害化处理,实验用过的棉花、废纸、沉淀废渣及其他废弃物品等均应 放入指定容器，不得随意乱扔或丢进水槽。 10)每次实验课由学生轮流值日。值日生要负责打扫实验室的卫生，整理实验室。检 查水、电，关好门窗，经老师检查后，方可离开实验室。
3 吸收池
吸收池又称比色皿或比色杯，按材 料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前 者不能用于紫外区。
吸收池的种类很多，其光径可在 0.1~10cm之间，其中以1cm光径吸收池 最为常用。
玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英——不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致）
2)紫外-可见分光光度法的特点：
(1 ) 与其它光谱分析方法相比，其仪器设备 和操作都比较简单，费用少，分析速度快; (2) 灵敏度高; (3 ) 选择性好; (4 ) 精密度和准确度较高; (5) 用途广泛。
3) 紫外-可见吸收光谱
物质对光的选择性吸收
物质对光的吸收是选择性的，利用 被测物质对某波长的光的吸收来了解物 质的特性，这就是光谱法的基础。
生物化学实验内容3篇
生物化学实验内容实验一：糖类的定性和定量分析糖类是重要的生物分子之一，无论是在生物体内还是在工业领域都有着重要的应用。
本实验旨在通过定性和定量分析糖类的实验，让学生了解糖类的性质和分析方法。
实验一、糖类的定性实验材料：葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、淀粉、碘液、硝酸银、硫酸、苯酚、NaOH、酚酞指示剂步骤：1.将葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、淀粉各取一份，用水溶解。
2.取5ml的各种糖溶液于试管中，加入2滴苯酚，再加入1ml NaOH溶液和1滴酚酞指示剂，观察是否变色。
3.将1ml的碘液加入每种糖溶液中，观察反应结果。
4.将1ml的硝酸银溶液加入每种糖溶液中，放置后观察反应结果。
结果分析：1.苯酚试剂可以检测出葡萄糖和果糖的存在，经反应产物为红褐色。
2.加入碘液后，葡萄糖和淀粉溶液会呈现出蓝色复合物；果糖溶液则无反应；麦芽糖和蔗糖溶液则会出现棕色沉淀。
3.加入硝酸银溶液后，蔗糖会产生白色沉淀，而麦芽糖和淀粉则无明显反应。
实验二、糖类的定量实验材料：葡萄糖溶液、NaOH溶液、硫酸、费林试剂步骤：1.将试样称取10mg，加入5ml的NaOH溶液，在沸水浴中加热10min，冷却后将pH值调节至7-8。
2.将所有试剂进行融合，称取0.1g的硫酸和0.5g的费林试剂，放入10ml的水中混合均匀。
3.加入数滴试样到试剂溶液中，混合均匀后沸腾2min，冷却后去除浮渣并将溶液转移到5ml容量瓶中。
4.在溶液中加入几滴酚酞指示剂，并用2.5％NaOH溶液滴加，直至出现红色，记录加滴量。
结果分析：1.根据加入NaOH溶液的体积和试样的含量，可以计算出糖类物质的浓度。
2.费林试剂可以与糖类发生反应，生成物质的深度颜色与糖的含量成正比。
实验三、酵母的发酵过程酵母是一类单细胞真菌，可以通过发酵过程产生乙醇和二氧化碳。
本实验旨在观察酵母在不同条件下的发酵过程，了解发酵原理和条件对发酵有何影响。
材料：酵母、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、发酵管、氢氧化钠溶液、氢氧化钠的饱和的饱和的水解液、试剂瓶、称瓶步骤：1.称取3g酵母溶解在50ml水中。
生物化学实验
(3)磷酸 取一支试管，加入2mL水解液， 然后加入5滴硝酸银和1mL钼酸 铵溶液后，在沸水浴中加热， 观察有无黄色磷钼酸铵沉淀
实验现象及结果分析
取新鲜橘子皮2g制作样液 标准液滴定：2,6-二氯酚靛1.8ml，滴定终点 样液滴定：第一次1.4ml，第二次1.6ml
1. 用铅笔将层析色谱轮廓和 中心点描出来； 2. 测量原点至色谱中心和至 溶剂前沿的距离，计算各种已 知氨基酸和未知氨基酸的Rf值。 3. 分析混合样品中未知氨基 酸的组分。
探究温度对淀粉酶活性的影响 放置于0度、室温、沸 水中的试管，分别呈 淡紫色、无色、深紫 色。
探究ph对淀粉酶活性的影响
pH 5.0、 5.8 、6.8 、8.0
1. 盐析:取一支试管加入3ml蛋白质氯化钠溶液和3m1饱和硫酸铵溶液，混匀，静置 约10 min,球蛋白则沉淀析出，倒出少量混浊沉淀，加少量水。观察现象，加水前后 如图1，2所示
图1
图2
2. 重金属离子沉淀蛋白质:取1支试管，加入蛋白质溶液2ml，再加3%硝酸银溶液12滴，振荡管，有沉淀产生。放置片刻，倾去上清液，沉淀中加入少量的水，观察现 象，加水前后如图3，4所示
卵磷脂的提取与纯化： 黄色油状物加入3~5 mL氯仿搅
拌使其完全溶解，然后搅拌下慢 慢加入10 mL丙酮，搅动使卵磷脂 尽量析出，抽滤，得固体物质卵 磷脂
三甲胺试验：
取制得的卵磷脂一部分放
入试管中加入10%氢氧化钠 2ml，在100℃水浴上加热 闻到鱼腥味
钼酸铵试验： 取干净试管一支，加入
10滴上述滤液，加入10滴 95%乙醇，摇匀，再加入10 滴钼酸铵试剂，观察现象； 最后将试管放入热水浴中 加热5～10min，有刺激性 气味产生。
图3
基础生物化学实验报告
一、实验目的1. 掌握基础生物化学实验的基本操作技能。
2. 了解生物大分子的性质和结构。
3. 培养严谨的科学态度和实验习惯。
二、实验原理生物大分子是生物体内重要的组成部分，主要包括蛋白质、核酸、多糖等。
本实验通过观察和比较不同生物大分子的性质和结构，加深对生物大分子的认识。
三、实验器材与试剂1. 器材：显微镜、离心机、电泳仪、紫外可见分光光度计、紫外灯、移液器、吸管、烧杯、试管等。
2. 试剂：蛋白质、核酸、多糖样品，生理盐水，染色剂，缓冲液等。
四、实验步骤1. 蛋白质鉴定实验（1）观察蛋白质样品的外观，记录颜色、形态等特征。
（2）用生理盐水制备蛋白质溶液，记录浓度。
（3）观察蛋白质溶液的透明度，记录是否出现浑浊现象。
（4）将蛋白质溶液滴加到试管中，加入染色剂，观察颜色变化。
2. 核酸鉴定实验（1）观察核酸样品的外观，记录颜色、形态等特征。
（2）用生理盐水制备核酸溶液，记录浓度。
（3）观察核酸溶液的透明度，记录是否出现浑浊现象。
（4）将核酸溶液滴加到试管中，加入染色剂，观察颜色变化。
3. 多糖鉴定实验（1）观察多糖样品的外观，记录颜色、形态等特征。
（2）用生理盐水制备多糖溶液，记录浓度。
（3）观察多糖溶液的透明度，记录是否出现浑浊现象。
（4）将多糖溶液滴加到试管中，加入染色剂，观察颜色变化。
4. 蛋白质、核酸、多糖分离实验（1）将蛋白质、核酸、多糖样品分别加入离心管中，加入适量缓冲液。
（2）用离心机进行离心，观察沉淀和上清液的颜色变化。
（3）用紫外可见分光光度计测定沉淀和上清液的吸光度，计算浓度。
五、实验结果与分析1. 蛋白质鉴定实验结果蛋白质样品呈现白色固体，加入染色剂后变为红色，说明蛋白质具有染色特性。
2. 核酸鉴定实验结果核酸样品呈现白色固体，加入染色剂后变为蓝色，说明核酸具有染色特性。
3. 多糖鉴定实验结果多糖样品呈现白色固体，加入染色剂后变为红色，说明多糖具有染色特性。
4. 蛋白质、核酸、多糖分离实验结果蛋白质、核酸、多糖在离心过程中分别沉淀和溶解，说明它们在溶液中的溶解度不同。
基础生物化学实验
《基础生物化学》课程实验教学大纲课程编号：3011010 学时：32 学分：2一、课程的性质和任务“基础生物化学实验”是采用生物化学的原理和方法探究植物生命现象化学本质的实验科学。
它是植物生产类、环境资源类各专业重要的专业基础实验课程。
本课程讲授基础生物化学实验方面的基本理论，着重进行实验技术方面的系统训练，并安排综合实验及综合实验报告写作训练。
二、教学内容和方法教学内容分为基础生化实验理论讲授（4学时）和实验操作（28学时）两部分，以实验操作为主。
实验理论讲授离心技术、电泳技术、层析技术和分光光度技术的基本原理和方法。
实验操作安排多次基本实验、1-2次综合实验或设计实验。
基本实验1人1组。
综合实验和设计实验4-8人1组，每人独立操作。
课程安排与基础生物化学理论课程同步，在第4学期进行。
三、教学目的和要求通过实验理论学习、实验技术训练及实验技术的综合应用，提高学生的实验技能，培养学生的实验能力和创新思维能力，为应用生物化学实验手段进行科学研究奠定基础。
实验前要求预习，检查预习报告。
基本实验每人独立完成实验操作并交实验报告。
以技术为主的基本实验完成后进行操作考核。
综合实验每组做4-8个样品（或处理），1人做1个样品（或处理），以组统计数据，每人撰写1份综合实验报告。
教学结束后，在教材的思考题范围内进行实验笔试。
四、考核方式及办法实验成绩以预习5%，操作15%，实验报告40%，综合实验报告10%，实验笔试30%，进行综合评定。
实验课指导教师可以一次考核实验或多次检察现场评定预习和操作成绩；实验报告和综合实验报告成绩以批阅分数评定，实验笔试在期末进行全校统考。
五、配套的实验教材或指导书实验教材采用《植物生理生化实验教程》（第2版），叶尚红主编，云南科技出版社，2007、2。
六、适用专业植物生产类和环境资源类各专业。
在选择实验内容时可考虑与专业结合。
七、实验项目：(28学时)在下列实验中选做28学时，并开设2-3组综合实验或设计实验序号项目学时实验类型实验类别实验要求每组人数1 酵母RNA的提取和鉴定(或植物DNA的提取和鉴定)3 验证型专业基础必选 12 影响酶作用的因素3 验证型专业基础必选 13 聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳分离过氧化物同工酶4技能及研究型专业基础必选84 氨基酸的薄层层析 3 技能型专业基础必选15 种子粗脂肪测定(索氏残余法) 1-2 演示或技能型专业基础自选86 淀粉酶活性的测定 3 技能及研究型专业基础自选 17 过氧化氢酶活性测定 3 技能型专业基础必选 18 硝酸盐含量的测定（紫外吸收法） 3 技能及研究型专业基础必选 19 谷物蛋白含量的快速测定(双缩脲法)3技能及研究型专业基础必选 210 植物体内可溶性糖的测定(蒽酮法)3技能及研究型专业基础必选 211 谷物赖氨酸含量的测定(茚三酮比色法)3技能及研究型专业基础必选 212 分光光度技术及应用12 技能综合型专业基础(实验8、9、10、11组合)自选 113 不同谷物的蛋白质及赖氨酸含量比较6 综合研究型专业基础（实验9和11组合）必选2-414 不同蔬（野）菜硝酸盐含量比较 3 设计型专业基础（实验8的材料组合）必选4-8基础生物化学实验技术基本原理：(理论课讲授4学时)1、离心技术离心技术的基本原理, 离心机的种类、用途，普通离心机的使用注意事项，使用普通离心机分离提取DNA或RNA。
基础生物化学实验报告
基础生物化学实验报告基础生物化学实验报告引言：生物化学是研究生物体内化学反应的科学，它通过实验方法来揭示生物体内各种化学反应的机理和特性。
本次实验旨在通过一系列基础的生物化学实验，探索生物体内重要的化学过程，并理解其在生命活动中的作用和意义。
实验一：酶的活性测定酶是生物体内的一类特殊蛋白质，它在生物体内催化各种化学反应。
本实验通过测定酶的活性，来评估酶在不同条件下的催化效率。
首先，我们选取了一种常见的酶——过氧化氢酶，用其催化过氧化氢的分解反应来测定酶的活性。
实验结果表明，在适宜的温度和pH值下，酶的活性最高，而过高或过低的温度和pH值会显著降低酶的催化效率。
这一实验结果对于理解生物体内酶的催化机制和调节酶活性的因素具有重要意义。
实验二：蛋白质的分离与纯化蛋白质是生物体内最基本的生物大分子，它在细胞结构和功能的维持中起着重要作用。
本实验通过离心、层析和电泳等方法，对混合蛋白质样品进行分离与纯化。
通过实验，我们成功地将不同蛋白质分离出来，并得到其纯化产物。
这一实验结果为研究蛋白质的结构和功能提供了重要的基础。
实验三：核酸的提取与分析核酸是生物体内贮存和传递遗传信息的重要分子，它在细胞的遗传物质DNA和RNA中存在。
本实验通过提取和分析DNA和RNA，来研究核酸的结构和功能。
实验结果显示，DNA和RNA具有不同的物理和化学性质，其分子结构和碱基组成也不同。
这一实验结果对于理解生物体内遗传信息的传递和表达具有重要意义。
实验四：酸碱平衡的调节生物体内的酸碱平衡对于维持细胞内外环境的稳定非常重要。
本实验通过调节酸碱度和测定酸碱度对生物体内酶活性的影响，来研究酸碱平衡的调节机制。
实验结果表明，生物体内存在一系列酸碱调节系统，能够维持细胞内外环境的稳定。
这一实验结果对于理解生物体内酶的催化机制和细胞内环境的稳定具有重要意义。
结论：通过一系列基础的生物化学实验，我们深入了解了生物体内重要的化学过程。
酶的活性测定实验揭示了酶的催化机制和调节因素；蛋白质的分离与纯化实验为研究蛋白质的结构和功能提供了基础；核酸的提取与分析实验揭示了核酸的结构和功能；酸碱平衡的调节实验研究了细胞内外环境的稳定。
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课程基本信息（Course Information）
课程代码
（Course Code）
BI284
学时
（CreditHours）
48
学分
（Credits）
1.5
课程名称
（Course Name）
基础生物化学实验
Basic Biochemistry Experiment
课程性质
1.《生物化学实验》，主编：丛峰松，上海交通大学出版社，2013.
2.《Biochemistry Experiment》, Handout: Shanghai Jiaotong Univesity.
其它
（More）
无
备注
（Notes）
无
备注说明：
1．带*内容为必填项。
2．课程简介字数为300-500字；课程大纲以表述清楚教学安排为宜，字数不限。
教学内容
学时
教学方式
作业及要求
基本要求
考查方式
实验基础操作规范
2
实验
实验报告
1.了解实验室基本常识。
2.掌握生化实验基本操作技术。
综合
总糖和还原糖的测定——3，5－二硝基水杨酸法
4
实验
实验报告
1.了解还原糖和总糖的测定原理。
2.学习用比色法测定还原糖的方法。
综合
不同蛋白质的定量测定方法比较
4
实验
实验报告
课程教学大纲（course syllabus）
*学习目标(Learning Outcomes)
1. 学习生物化学实验技术基础知识；
2. 熟练掌握生物化学实验基本操作技能；
3. 培养学生创新思维、发现问题和解决问题的能力。
*教学内容、进度安排及要求
(Class Schedule
&Requirements)
(Course Type)
专业基础实验课
授课对象
（Target Audience）
生命学院本科生
授课语言
(Language of Instruction)
中文
开课院系
（School）
生命科学技术学院先修课程ຫໍສະໝຸດ （Prerequisite）
生物化学
授课教师
（Teacher）
丛峰松、郑有丽
电邮、电话
（email& phone）
综合
米氏常数的测定
4
实验
实验报告
1.了解底物浓度对酶促反应的影响。
2.掌握测定米氏常数Km的原理和方法。
综合
蛋白滴定电泳
4
实验
实验报告
1.了解移动界面电泳原理。
2.掌握蛋白滴定电泳技术
综合
转基因食品DNA的提取检测（1）
4
实验
实验报告
1.了解转基因食品的基本原理。2.掌握植物DNA的提取方法。
综合
转基因食品的定性PCR检测（2）
fscong@、zylji@
办公时间
（Office Time）
8:30—5:00
办公地点
（Office Location）
生物药学楼4-316
课程网址
(CourseWebpage)
;好大学在线
*课程简介（Description）
1.了解紫外吸收法测定蛋白质含量的原理。
2.学习双缩脲法测定蛋白质的原理和方法。
综合
血清蛋白的分离——聚丙烯酰胺凝胶电泳法
5
实验
实验报告
1.了解聚丙烯酰胺凝胶电泳原理。
2.掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳的操作技术。
综合
自由流电泳实验
4
实验
实验报告
1.了解自由流电泳的基本原理。
2.学习自由流电泳仪的操作方法。
4
实验
实验报告
1.了解PCR方法的基本原理。2.掌握PCR的操作技术。
综合
(教师可根据课程情况添加行数，每个内容均可点击、弹出注释、提示框，对需要填写内容进行详尽解释，考查方式对应具体教学内容）
*考核方式
(Grading)
实验操作45%+实验报告45%+课堂表现10%
*教材或参考资料
(Textbooks & Other Materials)
综合
酶联免疫吸附测定
5
实验
实验报告
1.学习酶联免疫吸附测定原理
2.掌握酶联免疫吸附测定方法。
综合
氨基置换反应
4
实验
实验报告
1.了解转氨酶在代谢过程中的重要作用。
2.学习应用纸层析法鉴定氨基转换反应。
综合
果蔬维生素C含量测定及其分析设计实验
4
实验
实验报告
在教师指导下，独立完成实验选题、实验设计、实验准备、实验实施和实验论文撰写等全过程。
基础生物化学实验是训练学生基本的生化实验方法和技术，熟练掌握常用生物大分子的定性定量分析法，常规的生物分子提取分离纯化鉴定技术，酶动力学的基础性研究常识，培养学生开拓创新能力，实验设计能力，以及科学论文写作能力。
*课程简介（Description）
Basic biochemistry experimentaimsto train students the basic biochemical experiment method and technology,make themmasterthequalitative and quantitative analysisofcommonly usedbiological macromolecules,the conventional extraction,isolation,identificationand purificationofbioactive compounds andthebasicknowledgeofenzyme kinetics,cultivate theminnovative ability, experimental designability andwriting ability of scientific paper.