细胞培养实验报告
实验报告细胞培养
一、实验目的1. 了解细胞培养的基本原理和方法。
2. 掌握哺乳动物细胞原代培养和传代培养的操作步骤。
3. 学习细胞培养过程中无菌操作的重要性。
二、实验原理细胞培养是指从生物体中取出某种组织或细胞，模拟体内生理条件，在人工培养条件下使其生存、生长、繁殖或传代的过程。
细胞培养技术具有直接观察活细胞、避免体内实验的复杂因素、提供大量生物性状相同的细胞等优点，在生物学研究、医学等领域中得到广泛应用。
细胞培养可分为原代培养和传代培养。
原代培养是指直接从体内获取的组织细胞进行首次培养；传代培养是指原代培养的细胞增殖达到一定密度后，将其分散后转移到另一个或几个容器中扩大培养。
传代培养的累积次数即为细胞的代数。
三、实验用品1. 仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、培养皿、移液器、离心机、恒温培养箱、超净工作台等。
2. 器材：胰蛋白酶、胎牛血清、DMEM培养基、双抗、无菌水、75%酒精、无菌滤纸等。
3. 试剂：细胞培养液、胰蛋白酶消化液、细胞计数板、染色液等。
四、实验步骤1. 原代培养（1）取动物组织样本，用胰蛋白酶消化处理，得到细胞悬液。
（2）将细胞悬液加入培养皿，放入37℃恒温培养箱中培养。
（3）观察细胞生长情况，待细胞贴壁生长后，用移液器将细胞分散，转移至另一个培养皿中。
（4）重复步骤（3），直至细胞增殖到一定密度。
2. 传代培养（1）取培养皿中的细胞，用胰蛋白酶消化处理，得到细胞悬液。
（2）将细胞悬液加入培养皿，放入37℃恒温培养箱中培养。
（3）观察细胞生长情况，待细胞贴壁生长后，用移液器将细胞分散，转移至另一个培养皿中。
（4）重复步骤（3），直至细胞增殖到一定密度。
3. 细胞计数（1）取一定量的细胞悬液，加入细胞计数板。
（2）在显微镜下观察细胞，计算细胞数量。
（3）根据细胞数量和体积，计算细胞密度。
4. 细胞染色（1）取一定量的细胞悬液，加入染色液。
（2）在显微镜下观察细胞，观察细胞形态和染色情况。
五、实验结果与分析1. 原代培养（1）细胞在培养皿中贴壁生长，呈梭形。
细胞培养实验报告
细胞培养实验报告细胞培养是现代生物学研究中不可或缺的手段，其涉及到细胞的生长、分化、代谢以及各种分子和信号的相互作用等。
今天我将分享一份由我亲自进行的细胞培养实验报告，以介绍这一重要技术的原理、步骤和结果。
实验原理细胞培养指的是将体外的细胞，按照一定比例和条件，放置在培养基中进行生长和繁殖的一种方法，通常包含以下步骤：使用无菌操作要求的器材和条件进行细胞总和的计数、试管的制备、制备试验培养液、细胞处理、细胞复苏、细胞的种植等。
实验步骤在实验之前，需要先准备培养所需的器材和试剂，如细胞培养基、跳汞灯、无菌器皿、超净台、离心管、显微镜和培养皿等。
接下来，我们按照以下步骤进行细胞培养。
1. 细胞的收获和处理我们用脱离液将细胞从体内取出，再加入一个特定的培养基中。
我们需要用细胞水平计算细胞总量，并将其分为每个培养皿中的所需数量。
如我们所选的細胞因子等指标。
2. 细胞扩增和培养在试管中添加适当的培养基、生长因子、荷尔蒙和混合，将所有细胞加入并处理好，很快开始分裂形成足够的细胞密度。
3. 培养的观察和种植使用无菌操作的器材和技术检查细胞的状况和数量，然后将其通过无菌技术铺在特定的基质上，进行后续的观察和研究。
实验结果在本次细胞培养实验中，我们成功提取了人造血液中的白细胞，通过分裂和培养，检测到细胞数量的增加和改变，以及不同化学和物理刺激的作用。
我们也观察了细胞的状态、形态和细胞核的状态，以评估其是否处于正常状态。
此外，我们还测试了不同培养条件下的生长速度和丰度，比较了细胞的发育和生长。
结论和思考在本次实验中，我们成功进行了细胞培养，该技术不仅可用于证实细胞的正常生长和增殖，还可用于疾病的研究和治疗中。
在实验中，我们需要注意无菌操作、培养条件和细胞的状态，以保证实验的成功和准确性。
总之，本次细胞培养实验为我们提供了一个更深入地了解细胞生物学的机会。
不仅可以促进人类健康的治疗方法，还可以为制药、医疗和工业领域提供更好的方法和技术。
细胞培养实验报告
动物细胞造就一.实验目标.1.控制无菌操纵技巧.2.控制原代和传代细胞造就.3.控制细胞冷冻和苏醒技巧.4.懂得造就成纤维细胞的形态.二.实验道理.将动物机体的组织从机体中掏出,经各类酶（经常运用胰蛋白酶）.螯合剂（经常运用EDTA）或机械办法处理,疏散成单细胞,置适合的造就基中造就,使细胞得以生计.发展和滋生,这一进程称原代造就.细胞在造就瓶长成致密单层后,已根本上饱和,为使细胞能持续发展,同时也将细胞数目扩展,就必须进行传代（再造就）. 传代造就也是一种将细胞种保管下去的办法.同时也是运用造就细胞进行各类实验的必经进程.悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才干分瓶.对具有移动特征的稳固细胞系或细胞株进行长期保管,一方面可以作为细胞研讨的实验材料,另一方面可以做细胞成品的临盆材料.今朝普遍运用的细胞保管办法是低温冷冻保管法,.细胞的冷冻保管的原则是慢冻快融,如许做是为了防止细胞因为冷冻进程中产生了冰晶而产生细胞决裂.三.实验器材及药品.器材：怀孕的小白鼠.造就箱.造就瓶.造就皿.移液器.眼科剪.镊子.酒精灯.离心计心情.水浴锅.倒置显微镜.CO2造就箱.超净工作台.离心管.高压灭菌锅.试管架等.药品：小牛血清.DMEM合成造就基.抗生素.DMSO冷冻剂.胰酶.PBS 缓冲液等.四.实验操纵.1.消毒灭菌.将实验所需用到的对象（如枪头.造就皿.眼科剪.镊子以及每小我的实验服等）分散灭菌.烘干.配制75%的酒精以备实验时所需.2.造就基的配制.分别取10ml的小牛血清.90ml的DMEM合成造就基,将两种造就基混杂在一路,再向个中参加1ml的抗生素,吹打混匀就得到了细胞造就的造就液.3.原代造就.（1）.预备.将实验进程中会用到的对象以及药品全体放在超净工作台长进行紫外消毒灭菌.实验开端前带好乳胶手套,用酒精敌手进行消毒.将怀孕的小白鼠放在酒精中杀逝世,掏出子宫内的胚胎组织.（2）.剪切与消化.将胚胎组织放于平板中,用眼科剪将组织块剪碎,剪得越碎越好.将剪碎的组织块放于离心管中,参加大约200µl 的胰酶进行消化.也可将其置于37度恒温箱中进行消化.（3）.分别细胞.消化到一准时光时,假如离心管中的溶液中消失了显著的污浊,可用吸管吸出少许消化液在镜下不雅察,如组织已疏散成细胞团或单个细胞,则应当参加与胰酶等量的造就液终止消化.离心管于离心计心情中离心,弃上清液,得到疏散的细胞.℃恒温CO2箱造就,瓶口极少拧的松一点.4.传代造就.（1）.倒置显微镜下不雅察细胞的形态.倒置显微镜下不雅察造就细胞的长势及密度,依据细胞密度决议传代的稀释倍数.（2）.收集原代造就的细胞.吸出造就瓶中的旧造就液,并用PBS 冲洗两遍.然后向造就瓶中参加200µl的胰酶进行消化.消化一段时光后用设置装备摆设好的造就液等比例终止消化.然后离心,收集到原代造就的细胞.（3）.传代细胞的造就.向离心管内参加大约7—8ml的造就液,吹打混匀.将造就液转移到造就瓶中,置于37度恒温CO2造就箱中造就.造就1—2天后于显微镜下不雅察细胞的形态.5.细胞冷冻保管.（1）.收集细胞.吸出造就瓶中的旧造就液,并用PBS冲洗两遍.然后向造就瓶中参加200µl的胰酶进行消化.消化一段时光后用设置装备摆设好的造就液等比例终止消化.然后离心,收集细胞.（2）.冷冻.向离心管中参加必定量的造就液以及10%—20%的DMSO冷冻液,吹打混匀并转移到冷冻管中.先将冷冻管在4度冰箱中放置10min,再放在—70度的冰箱中冷冻留宿.（3）.苏醒.将冷冻的细胞掏出来后,连忙放在40度水浴中,使其快速熔化.并对熔化的细胞进行进一步的不雅察.五.实验成果.传代细胞传代第一次换液细胞原代第一次的细胞原代第四天的细胞冷冻苏醒的细胞六.实验剖析与评论辩论.从本次实验的图片可以看出来,实验做得还算成功,细胞根本上没有被污染.在做的进程中必定要异常留意无菌操纵,这是决议实验成功的症结身分.在做原代造就的时刻,必定要将小鼠胚胎的组织块剪得够碎,确保在用胰酶消化后可以得到分别的单个细胞.在做传代造就时,要掌控好胰酶的消化时光.冷冻苏醒时,必定要按照步调进行冷冻,遵守慢冻速溶的原则.。
培养细胞计数实验报告
一、实验目的1. 掌握细胞培养的基本原理和方法。
2. 学习使用血球计数板对培养细胞进行计数。
3. 了解细胞计数在细胞生物学研究中的应用。
二、实验原理细胞计数是细胞生物学研究中常用的一种方法，通过计数一定体积内细胞的数量，可以了解细胞的生长状况、细胞密度等参数。
本实验采用血球计数板对培养细胞进行计数，血球计数板是一种特殊的载玻片，其上刻有网格，用于计算细胞数量。
三、实验材料1. 培养细胞：人胚胎肾细胞（HEK293）。
2. 血球计数板。
3. 试管、吸管、微量移液管。
4. 培养基：DMEM培养基，含10%胎牛血清。
5. 计数显微镜。
四、实验步骤1. 准备工作：将培养细胞置于37℃、5%CO2的培养箱中培养至对数生长期。
2. 制备细胞悬液：取适量培养细胞，用吸管轻轻吹打，使其成为细胞悬液。
3. 稀释细胞悬液：将细胞悬液稀释至适当浓度，以使细胞在计数板上分布均匀。
4. 计数：将稀释后的细胞悬液滴入血球计数板的计数室中，于显微镜下观察并计数。
5. 计算细胞密度：根据计数结果，计算每个大方格内的平均细胞数，进而计算整个细胞悬液的细胞密度。
五、实验结果1. 培养细胞生长状况良好，细胞形态正常。
2. 通过计数，得到每个大方格内的平均细胞数为N个。
3. 计算得到的细胞密度为X个/mL。
六、实验分析1. 实验结果表明，所培养的细胞生长状况良好，细胞密度与预期相符。
2. 细胞计数是细胞生物学研究中常用的方法，通过计数可以了解细胞的生长状况、细胞密度等参数，为后续实验提供数据支持。
七、实验讨论1. 在细胞计数过程中，应注意细胞悬液的稀释程度，避免细胞在计数板上分布不均，影响计数结果。
2. 实验过程中，操作要轻柔，避免细胞损伤。
3. 细胞计数结果受多种因素影响，如细胞悬液的浓度、显微镜的分辨率等，因此在实验过程中应注意这些因素的影响。
八、实验结论通过本次实验，我们掌握了细胞培养的基本原理和方法，学会了使用血球计数板对培养细胞进行计数，了解了细胞计数在细胞生物学研究中的应用。
细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告实验名称：细胞培养实验实验目的：1. 了解细胞培养的基本原理和过程2. 观察细胞生长和分化的现象3. 掌握细胞培养的实验技术和方法实验原理：细胞培养是一种将生物体细胞从其原始生存环境中分离出来，在体外条件下进行培养的技术。
这种技术对于研究细胞生物学、发育生物学、药物筛选等学科具有重要意义。
本实验将通过观察细胞生长和分化的现象，加深对细胞培养技术的理解。
实验材料：1. 人体皮肤细胞2. 培养基（包含血清、抗生素、氨基酸、维生素等）3. 塑料瓶（培养皿）4. 显微镜5. 记录表实验步骤：1. 取适量人体皮肤细胞，用胰蛋白酶消化，使其从组织中分离出来。
2. 将细胞接种到塑料瓶（培养皿）中，加入适当浓度的培养基。
3. 将塑料瓶（培养皿）放入恒温培养箱中，定期观察并记录细胞生长和分化的现象。
4. 在合适的时间点，使用显微镜拍照记录细胞生长和分化的过程。
5. 实验结束后，整理数据和图片，撰写实验报告。
实验结果：经过一段时间的培养，我们观察到皮肤细胞在培养基中开始贴壁，并逐渐生长。
随着时间的推移，部分细胞开始出现分裂，形成相互连接的细胞团。
一些细胞逐渐伸展成梭形或扁平形，呈现出典型的贴壁生长形态。
在某些区域，我们观察到细胞开始分化为两种不同形态的细胞群，一种呈圆形或椭圆形，另一种呈多角形。
这些现象表明细胞已经开始分化。
实验分析：根据实验结果，我们可以得出以下结论：1. 细胞确实可以在体外条件下贴壁生长并增殖。
这证明了细胞培养技术的可行性。
2. 细胞分化是一个自然的过程，在本实验中得到了证实。
这说明细胞具有自我更新和多向分化的潜能。
3. 实验过程中需要注意无菌操作和适宜的培养条件，以确保细胞的存活和正常生长。
此外，不同种类的细胞可能需要不同的培养条件，因此在实际操作中需要针对具体细胞类型进行实验。
实验结论：通过本次实验，我们了解了细胞培养的基本原理和过程，观察了细胞生长和分化的现象，并掌握了细胞培养的实验技术和方法。
细胞培养技术实验报告
细胞培养技术实验报告引言细胞培养技术是生物学研究中的重要工具，可以用于研究细胞的生长、分化、功能以及疾病的发生机制等。
本实验旨在通过细胞培养技术，培养和研究细胞的生长特性和细胞系的建立。
实验材料和方法实验材料•细胞培养基•细胞培养器具（培养皿、离心管、移液器等）•细胞种子实验方法1.准备培养基：根据所需培养细胞的类型选择适当的培养基，加入适量的血清、抗生素等添加剂。
将培养基分装至培养皿中。
2.细胞分离：取得细胞样本后，使用消化酶等方法将细胞分离，并进行细胞计数。
3.细胞接种：将分离得到的细胞悬浮液加入到准备好的培养基中，使细胞均匀分布于培养皿表面。
4.培养条件：将培养皿放置于恒温培养箱中，保持适当的温度、湿度和CO2浓度，并定期更换培养基。
5.细胞观察和记录：每天观察细胞的形态、生长情况，并记录观察结果。
6.细胞传代：当细胞达到一定的密度时，使用胰蛋白酶等方法将细胞从培养皿上剥离下来，进行传代，以维持细胞的活性和生长。
实验结果和讨论在本实验中，我们成功地培养了人类乳腺癌细胞系，并观察到了其在培养基中的生长情况。
以下是我们的实验结果和讨论：1.细胞形态观察：在培养基中，乳腺癌细胞呈现出典型的悬浮生长形态，细胞体积逐渐增大，呈现出圆形或不规则的形状。
2.细胞增殖：经过连续培养，我们观察到乳腺癌细胞的数量逐渐增加，呈现出指数型增长曲线。
这表明我们成功地建立了乳腺癌细胞系，并且细胞具有较高的增殖能力。
3.细胞活性：通过MTT试验等方法，我们评估了细胞的活性。
实验结果显示，乳腺癌细胞在培养基中具有较高的代谢活性，代表细胞系的良好生长状态。
综上所述，我们通过细胞培养技术成功地建立了乳腺癌细胞系，并观察到了其生长特性和活性。
这为进一步研究乳腺癌的发生机制和新药开发提供了重要的实验平台。
结论细胞培养技术是一种重要的工具，可以用于研究细胞的生长特性和功能。
本实验通过细胞培养技术成功地建立了乳腺癌细胞系，并观察到了其在培养基中的生长和活性。
细胞原代培养细胞生物学实验报告
细胞原代培养细胞生物学实验报告细胞原代培养实验报告一、实验目的本实验的主要目的是进行细胞原代培养，通过对细胞的体外生长和繁殖过程进行观察和研究，以了解细胞的生物学特性，探索细胞生长、分化和凋亡的机制，为细胞生物学、肿瘤学、药理学等领域的研究提供实验基础。
二、实验原理细胞原代培养是指将组织样本通过一定的消化和培养技术，获得并培养单细胞悬液的过程。
这些细胞可以在体外生长和繁殖，并保持一定的生物学特性。
通过细胞原代培养，我们可以对细胞的生长、分化和凋亡过程进行深入研究，了解细胞的生物学特性，探索疾病的发病机制和药物的作用机制。
三、实验步骤1.组织样本准备：选取适当的组织样本，用PBS洗涤并用剃毛刀除去表面脂肪和结缔组织，切成1-2mm3的小块。
2.消化：将组织块加入含有胰蛋白酶和EDTA的消化液中，在37℃下消化10-15分钟。
期间需轻轻摇动几次以促进细胞释放。
3.细胞悬液制备：消化完成后，将消化液过滤至100目筛网，用PBS洗涤并离心（1000rpm，5分钟）去除上清液。
加入适量培养基制成细胞悬液。
4.细胞培养：将细胞悬液接种到培养瓶中，加入适量培养基进行培养。
在培养期间需注意观察细胞的生长情况和更换培养基。
5.细胞传代：当细胞生长到一定密度时，可以进行传代。
用胰蛋白酶消化细胞并离心收集，加入适量培养基制成细胞悬液，按比例接种到新的培养瓶中。
6.实验记录：在整个实验过程中，需要对细胞的生长情况、形态学变化等进行详细记录。
同时，需要定期拍照记录细胞的生长情况。
7.结果分析：通过对细胞的生长情况、形态学变化等进行观察和分析，可以得出有关细胞生物学特性的结论。
四、实验结果及数据分析1.实验结果（请在此插入不同时间点的细胞生长照片）通过观察和记录细胞的生长情况，我们发现原代细胞在接种后的前几天内处于适应期，细胞数量增长较慢。
随后，细胞数量开始加速增长，并逐渐形成集落。
传代后，细胞的生长速度又逐渐减缓，但仍然保持稳定增长。
细胞培养加样实验报告
一、实验目的1. 掌握细胞培养的基本操作方法，包括细胞传代、加样等。
2. 学习加样过程中应注意的问题，提高实验操作技能。
3. 了解细胞培养在生物学研究中的应用。
二、实验原理细胞培养是指将细胞从生物体中取出，在人工培养条件下使其生存、生长、繁殖或传代的过程。
细胞培养技术是生物学研究的重要手段，广泛应用于遗传、分化、胚胎发生、肿瘤发生、免疫学、细胞工程等领域。
本实验通过细胞培养加样实验，学习细胞培养的基本操作方法，掌握加样技巧。
三、实验用品1. 仪器：超净工作台、倒置显微镜、离心机、移液器、培养皿、培养瓶、移液管等。
2. 试剂：DMEM培养基、胎牛血清、青霉素、链霉素、胰蛋白酶、D-Hank's液、无菌水等。
3. 细胞：原代细胞或传代细胞。
四、实验步骤1. 准备工作（1）将细胞培养瓶放置于超净工作台，确保工作台无菌。
（2）将所需试剂、器材提前准备好，并进行消毒灭菌。
（3）将细胞置于培养箱中，预热至37℃。
2. 细胞传代（1）取出细胞培养瓶，用移液器将培养液吸出，弃去。
（2）用D-Hank's液清洗细胞两次，每次清洗后弃去液体。
（3）加入胰蛋白酶，将细胞消化成单细胞悬液。
（4）将消化后的细胞悬液加入培养瓶中，放入培养箱中培养。
3. 细胞加样（1）取出细胞培养瓶，用移液器将培养液吸出，弃去。
（2）用D-Hank's液清洗细胞两次，每次清洗后弃去液体。
（3）加入加样试剂，使细胞浓度为1×10^5个/ml。
（4）将加样后的细胞悬液加入培养瓶中，放入培养箱中培养。
4. 观察与记录（1）定期观察细胞生长状况，记录细胞生长曲线。
（2）观察加样试剂对细胞生长的影响，如细胞形态、生长速度等。
五、实验结果与分析1. 细胞生长曲线通过观察细胞生长曲线，发现细胞在加样试剂作用下，生长速度较对照组有所减缓，但细胞仍能正常生长。
2. 细胞形态通过倒置显微镜观察，发现加样试剂对细胞形态影响较小，细胞仍保持正常形态。
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动物细胞培养
一、试验目的。
1、掌握无菌操作技术。
2、掌握原代和传代细胞培养。
3、掌握细胞冷冻和复苏技术。
4、了解培养成纤维细胞的形态。
二、试验原理。
将动物机体的组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。
细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。
传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。
同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。
悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。
对具有移动特性的稳定细胞系或细胞株进行长期保存，一方面可以作为细胞研究的试验材料，另一方面可以做细胞制品的生产材料。
目前广泛应用的细胞保存方法是低温冷冻保存法，。
细胞的冷冻保存的原则是慢冻快融，这样做是为了防止细胞由于冷冻过程中产生了冰晶而发生细胞破裂。
三、实验器材及药品。
器材：怀孕的小白鼠、培养箱、培养瓶、培养皿、移液器、眼科剪、镊子、酒精
培养箱、超净工作台、离心管、灯、离心机、水浴锅、倒置显微镜、CO
2
高压灭菌锅、试管架等。
药品：小牛血清、DMEM合成培养基、抗生素、DMSO冷冻剂、胰酶、PBS缓冲液等。
四、实验操作。
1、消毒灭菌。
将实验所需用到的工具（如枪头、培养皿、眼科剪、镊子以及每个人的实验服等）集中灭菌、烘干。
配制75%的酒精以备实验时所需。
2、培养基的配制。
分别取10ml的小牛血清、90ml的DMEM合成培养基，将两种培养基混合在一起，再向其中加入1ml的抗生素，吹打混匀就得到了细胞培养的培养液。
3、原代培养。
（1）、准备。
将实验过程中会用到的工具以及药品全部放在超净工作台上进行紫外消毒灭菌。
实验开始前带好乳胶手套，用酒精对手进行消毒。
将怀孕的小白鼠放在酒精中杀死，取出子宫内的胚胎组织。
（2）、剪切与消化。
将胚胎组织放于平板中，用眼科剪将组织块剪碎，剪得越碎越好。
将剪碎的组织块放于离心管中，加入大约200μl的胰酶进行消化。
也可将其置于37度恒温箱中进行消化。
（3）、分离细胞。
消化到一定时间时，如果离心管中的溶液中出现了明显的浑浊，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，则应该加入与胰酶等量的培养液终止消化。
离心管于离心机中离心，弃上清液，得到分散的细胞。
（4）、转移细胞并培养。
向含有分散细胞的离心管中加入配制好的培养液，吹打
箱培养，瓶口少少混匀，将培养液用移液器移到细胞培养瓶中。
置于℃恒温CO
2
拧的松一点。
4、传代培养。
（1）、倒置显微镜下观察细胞的形态。
倒置显微镜下观察培养细胞的长势及密度，根据细胞密度决定传代的稀释倍数。
（2）、收集原代培养的细胞。
吸出培养瓶中的旧培养液，并用PBS冲洗两遍。
然后向培养瓶中加入200μl的胰酶进行消化。
消化一段时间后用配置好的培养液等比例终止消化。
然后离心，收集到原代培养的细胞。
（3）、传代细胞的培养。
向离心管内加入大约7—8ml的培养液，吹打混匀。
将培养液转移到培养瓶中，置于37度恒温CO
培养箱中培养。
培养1—2天后于显
2
微镜下观察细胞的形态。
5、细胞冷冻保存。
（1）、收集细胞。
吸出培养瓶中的旧培养液，并用PBS冲洗两遍。
然后向培养瓶中加入200μl的胰酶进行消化。
消化一段时间后用配置好的培养液等比例终止
消化。
然后离心，收集细胞。
（2）、冷冻。
向离心管中加入一定量的培养液以及10%—20%的DMSO冷冻液，吹打混匀并转移到冷冻管中。
先将冷冻管在4度冰箱中放置10min，再放在—70度的冰箱中冷冻过夜。
（3）、复苏。
将冷冻的细胞取出来后，立刻放在40度水浴中，使其快速融化。
并对融化的细胞进行进一步的观察。
五、实验结果。
传代细胞
传代第一次换液细胞
原代第一次的细胞
原代第四天的细胞
冷冻复苏的细胞
六、实验分析与讨论。
从本次实验的图片可以看出来，实验做得还算成功，细胞基本上没有被污染。
在做的过程中一定要非常注意无菌操作，这是决定试验成功的关键因素。
在做原代培养的时候，一定要将小鼠胚胎的组织块剪得够碎，确保在用胰酶消化后可以得到分离的单个细胞。
在做传代培养时，要把握好胰酶的消化时间。
冷冻复苏时，一定要按照步骤进行冷冻，遵循慢冻速溶的原则。