第22章 超敏反应性疾病及其免疫检测
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22.超敏反应性疾病检测
超敏反应性疾病及其免疫检测
概念
★超敏反应是指机体接触到某种抗原并且致敏后，再次受到相同抗原刺激是表现出的增高的敏感性或增强的反应性。
此类免疫应答导致的机体功能紊乱称为超敏反应，具体表现为一组临床表现各异的疾病。
超敏反应分类
★Ⅰ型
★Ⅱ型
★Ⅲ型
★Ⅳ型
Ⅰ型超敏反应
常见Ⅰ型超敏反应
Ⅰ型超敏反应检测方法
★体内实验
①皮内实验
②点刺试验
★体外实验
①血清IgE的检测
②血清特异性IgE的检测
Ⅱ型超敏反应
Ⅱ型超敏反应性疾病
★输血反应
★新生儿溶血病
★自身免疫性溶血性贫血
★药物过敏性血细胞减少
★肺肾综合征
★甲状腺功能亢进
Ⅱ型超敏反应免疫检测
Ⅲ型超敏反应
Ⅲ型超敏反应性疾病
★局部免疫复合物病
★全身免疫复合物病
SLE
RA
链球菌感染后肾小球肾炎
血清病
Ⅲ型超敏反应检测
IV型超敏反应
IV型超敏反应性疾病
★感染性迟发型超敏反应
★接触性皮炎
★移植排斥反应
IV型超敏反应检测
结核菌素皮试
★48～72小时观察结果
★红肿和硬结
斑贴试验
★测试物直接与皮肤接触，
以观察其反应。
免疫学检验技术—超敏反应性疾病免疫学检验
IBT检测特异性IgE
特异性变应原加入待检血清 转印至NC膜
NC膜 -
待检血清 特异性IgE
分离特异性变应原条带
+ ++ + +
特异性抗原 条带显色
+
底物
NC膜—变应原—特异性IgE—抗-IgE·HRP
抗-IgE·HRP
（二）临床意义
sIgE测定是体外检测变应原的重要手段，主 要用于Ⅰ型超敏反应的诊断 根据sIgE含量可确定患者变应原种类，评价 患者过敏状态、脱敏治疗的疗效，对过敏性 疾病的诊断和鉴别诊断有重要帮助
• 非特异性BPT 将一定浓度的激发物装入雾化器中，进 行同特异性BPT的操作
• 吸气流速、雾化颗粒直径的大小及气道通畅与否均可 影响雾化颗粒在气道的沉积，从而影响气道的反应性
（二）测定指标及结果判断
• 支气管反应有三种类型：速发、迟发和双重反应。每次 观察不能小于24小时
• 测定指标 FEV1：重复性好，结果稳定； PEF：峰流速仪价格低廉、方便、不受场地限制，与
3.方法评价
以ELISA法为例
a) 灵敏度高于PEG比浊法，可检测到0.1µg/mL b) 重复性好，相对稳定； c) C1q制品不易精制, 纯品不稳定，只能检出与补
体结合的CIC
三、CIC检测方法评价及应用
（一）检测方法评价
1. 方法学待改进
2.IC机理研究待深化
(二)临床应用
对于明确的免疫复合物病，如系统性红斑狼疮、
2. ELISA 常用间接法，酶标记抗IgE，操作敏感性、 特异性较高，操作简便、且费用较低
3. IBT 将多种特异性变应原提取物包被于硝酸纤维 素膜上，酶标记抗IgE，操作简单，可一次性测 定多种变应原
超敏反应性疾病及其免疫检测 ppt课件
12
第一节 Ⅰ型超敏反应
参与成分
➢抗体：特异性IgE抗体→变应素
13
第一节 Ⅰ型超敏反应
抗体
➢IgE
• 含量最低，半衰期最短，分解率最高，对热最不稳定 • 鼻咽、扁桃体、气管和胃肠道黏膜下固有层淋巴组织中的B细胞产生 • 亲细胞抗体
14
第一节 Ⅰ型超敏反应
参与成分
➢细胞
• 肥大细胞/嗜碱性粒细胞 IgE Fc受体 嗜碱性颗粒、生物活性介质
哮喘
过敏性 胃肠炎
皮肤 荨麻疹
25
第一节 Ⅰ型超敏反应
二、常见疾病
26
第一节 Ⅰ型超敏反应
三、免疫检测
皮内 试验
挑刺 试验
皮肤 试验
免疫 检测
IgE 检测
总IgE
特异 IgE
27
第一节 Ⅰ型超敏反应
三、免疫检测
皮肤 试验
原理 方法
通过皮肤挑刺、划痕、 皮内注射等使变应原进 入皮肤
➢皮内试验 ➢挑刺/点刺试验
特异性IgE检测
某种抗原值 ➢RAST与变应原皮试和支气管激发试验
符合率80%
评价
➢RAST费用较高、有放射性核素污染、 需特殊设备
➢免疫印迹法一次确定多种变应原
32
第二节 Ⅱ型超敏反应
Ⅱ型超敏反应又称细胞毒型（cytotoxic type） 或细胞溶解型（cytolytic type）超敏反应，指当 抗体与特异的细胞或组织表面的抗原结合，通过活 化补体系统或其他机制引起靶细胞的损伤。
5
第一节 Ⅰ型超敏反应
特征
➢发生快，消退快 ➢常引起生理功能紊乱，较少发生严重组织细胞损伤 ➢特异性IgE介导，无补体参与 ➢明显的个体差异和遗传背景
第一节 Ⅰ型超敏反应
参与成分
➢抗体：特异性IgE抗体→变应素
13
第一节 Ⅰ型超敏反应
抗体
➢IgE
• 含量最低，半衰期最短，分解率最高，对热最不稳定 • 鼻咽、扁桃体、气管和胃肠道黏膜下固有层淋巴组织中的B细胞产生 • 亲细胞抗体
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第一节 Ⅰ型超敏反应
参与成分
➢细胞
• 肥大细胞/嗜碱性粒细胞 IgE Fc受体 嗜碱性颗粒、生物活性介质
哮喘
过敏性 胃肠炎
皮肤 荨麻疹
25
第一节 Ⅰ型超敏反应
二、常见疾病
26
第一节 Ⅰ型超敏反应
三、免疫检测
皮内 试验
挑刺 试验
皮肤 试验
免疫 检测
IgE 检测
总IgE
特异 IgE
27
第一节 Ⅰ型超敏反应
三、免疫检测
皮肤 试验
原理 方法
通过皮肤挑刺、划痕、 皮内注射等使变应原进 入皮肤
➢皮内试验 ➢挑刺/点刺试验
特异性IgE检测
某种抗原值 ➢RAST与变应原皮试和支气管激发试验
符合率80%
评价
➢RAST费用较高、有放射性核素污染、 需特殊设备
➢免疫印迹法一次确定多种变应原
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第二节 Ⅱ型超敏反应
Ⅱ型超敏反应又称细胞毒型（cytotoxic type） 或细胞溶解型（cytolytic type）超敏反应，指当 抗体与特异的细胞或组织表面的抗原结合，通过活 化补体系统或其他机制引起靶细胞的损伤。
5
第一节 Ⅰ型超敏反应
特征
➢发生快，消退快 ➢常引起生理功能紊乱，较少发生严重组织细胞损伤 ➢特异性IgE介导，无补体参与 ➢明显的个体差异和遗传背景
超敏反应性疾病及其免疫检测
超敏反应性疾病及其免疫检测超敏反应，是指机体对变应原初次应答致敏后，再次接触相同抗原刺激时，所出现的一种以生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的异常免疫应答。
分为四型：Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型超敏反应。
Ⅰ型超敏反应Ⅰ型超敏反应主要由特异性IgE抗体介导产生，其发生速度最快，常在第二次接触相同抗原后数分钟内即出现临床反应，其反应可发生于局部，亦可发生于全身，故又称速发型超敏反应，习惯上又称过敏反应。
主要特征①超敏反应发生快，消退快；②常引起生理功能紊乱，较少发生严重的组织细胞损伤；③由特异性IgE型抗体介导，无补体参与；④具有明显的个体差异和遗传背景。
参与成分变应原：①某些药物或化学物质②吸入性变应原③食物变应原④有些酶类物质抗体—IgE：含量最低，半衰期最短，分解率最高，对热最不稳定。
主要由黏膜下固有层淋巴组织中的B细胞产生。
亲细胞抗体。
IL-4诱导产生特异性IgE。
细胞：肥大细胞和嗜碱性粒细胞。
嗜酸性粒细胞。
发生过程常见疾病全身超敏反应：药物过敏性休克血清过敏性休克局部超敏反应：呼吸道过敏反应消化道过敏反应皮肤过敏反应免疫学检测皮内试验：皮肤消毒后，用注射器将变应原提取液（如青霉素、花粉、尘螨、动物皮屑、血清、食物等）注入皮内。
注入量一般为0.01～0.02ml，使皮肤形成直径约2～3mm的皮丘。
阳性结果以风团为主。
皮内试验：假阳性的常见原因：①变应原稀释液偏酸或偏碱；②患者有皮肤划痕症；③抗原不纯或被污染；④抗原量注射过多。
假阴性的常见原因：①变应原抗原性丧失或浓度过低；②患者皮肤反应较低；③受试者正使用抗组胺类药或激素类药；④注射部位过深或注射量太少。
挑刺试验：将抗原和对照液滴于受试者前臂内侧皮肤上，然后在该处用针尖透过抗原液滴，与皮肤呈45°进针点刺，以不出血为度，1分钟后拭去抗原液，15分钟后观察结果。
阳性结果以红晕为主。
皮肤试验临床意义：（1）寻找变应原：避免接触变应原是防治超敏反应的重要手段。
超敏反应性疾病及其检验
（一）、发生机制
致 敏 阶 段 发 敏 阶 段 表临 现床
I 型 超 敏 反 应 的 发 生 过 程 和 发 生 机 制
（二）、临床常见的I型超敏反应性疾病
1.过敏性休克：药物过敏性休克、血清过敏性休克 2.呼吸道过敏反应：过敏性鼻炎和过敏性哮喘 3.消化道过敏：过敏性胃肠炎 4.皮肤过敏反应：荨麻疹、湿疹、血管神经性水肿
III 型超敏反应发生的机制（二）
PAF 趋化因子 细胞因子 血小板凝集、破坏
血栓形成
血管 炎症
III 型超敏反应发生的机制
血管炎
III 型 超 敏 反 应 的 发 生 过 程 和 发 生 机 制
（二）、常见的III 型超敏反应性疾病
1.局部免疫复合物病 （1）、Arthurs反应
（2）、 人类Arthurs反应：胰岛素依赖型 糖尿病患者反复注射胰岛素。
2、 参与细胞
特异性免疫细胞：Th1细胞和效应CTL细胞 非特异性免疫细胞：NK细胞、巨噬细胞
3、 发生机制
IV 型 超 敏 反 应 的 发 生 过 程 和 发 生 机 制
4 1、传染性迟发型超敏反应:
.
常 胞内微生物感染:
见 结核病、麻风病等
迟
发 型
2、接触性皮炎
超 敏 反
小分子物质与皮肤细胞蛋白 结合
新生儿溶血症
三、 Ⅲ型超敏反应
免疫复合物型
中等大小可溶性免疫复合物沉积于全 身或局部毛细血管基底膜后，通过激活补 体和在血小板、嗜碱性、嗜中性细胞参与 下，引起的以充血水肿、局部坏死和中性 粒浸润为主的主要特征的炎症反应和组织 损伤。
三、 Ⅲ型超敏反应
主要特点
*可溶性抗原与血清中的抗体（IgG、IgM） 形成免疫复合物（循环IC）
超敏反应性疾病及其检测
型超敏反应 细胞毒性超敏反应
Ⅲ型超敏反应
免疫复合物型超敏 反应
Ⅳ型超敏反应
迟发型超敏反应
超敏反应性疾病及其免疫检测
超敏反应：机体再次接触相同抗原时，发生生理功能紊乱和（或）组织损伤。
名称 主要抗体 发病特点 常见疾病 免疫学检测要点 1.发生迅速，消退也迅速；2.由IgE 1.过敏性休克 抗体介导；3.主要病变在小动脉,毛细 2.过敏性哮喘 主要检测过敏源和 IgE 血管扩张，通透性增加,平滑肌收缩； 3.过敏性鼻炎 测定血清特异性IgE 4.明显个体差异和遗传倾向； 4.过敏性胃肠炎和荨麻疹 5.补体不参与 三个机制：1.补体介导的细胞溶解 1.输血反应2.新生儿溶血3.自 2.吞噬作用；3.抗体依赖性细胞介导的细 身免疫性溶血性贫血4.药物过 胞毒作用 敏性血细胞减少5.链球菌感染 检测重点是抗血细 IgG/IgM 四个特点：1.抗原或抗原抗体复合物存在 后肾小球肾炎6.急性风湿热7. 胞抗体 于细胞膜上；2.参与的抗体是IgG/IgM 肺出血肾炎综合征8.Graves病 3.有补体、吞噬细胞、NK细胞参与；4.后 9.重症肌无力 果为靶细胞被破坏 可溶性免疫复合物沉积于毛细血管基底膜 局部免疫复合物病：如Arthus ，通过激活补体以及在血小板、肥大细胞 反应及类Arthus反应 主要检测循环免疫 \ 嗜碱性粒细胞的参与下，引起充血水肿、 全身免疫复合物病：如血清病 复合物 中性粒细胞浸润、组织坏死为特征的炎症 链球菌感染后肾小球肾炎、慢 反应和组织损伤。 性免疫复合物病、过敏样休克. 1.是由效应T细胞再次接触相同的抗原后 （1）传染性迟发超敏反应：由 引起以单个核细胞（巨噬细胞、淋巴细胞） 胞内寄生菌（结核杆菌、麻风 浸润为主的炎症性病理损伤 杆菌）、病毒、真菌等引发的 2.发生迟缓，再次接触抗原后24-72h发生 感染（2）接触性皮炎（3）移 可用皮肤试验来检 无 2）与抗体、补体无关而与效应T细胞和吞 植排斥反应，迟发型超敏反应 测 噬细胞及产生的细胞因子和细胞毒性介质 的一个显著临床表现是移植排 有关 3）个体差异小，在抗感染免疫清除 斥反应 抗原的同时损伤组织。
Ⅲ型超敏反应
免疫复合物型超敏 反应
Ⅳ型超敏反应
迟发型超敏反应
超敏反应性疾病及其免疫检测
超敏反应：机体再次接触相同抗原时，发生生理功能紊乱和（或）组织损伤。
名称 主要抗体 发病特点 常见疾病 免疫学检测要点 1.发生迅速，消退也迅速；2.由IgE 1.过敏性休克 抗体介导；3.主要病变在小动脉,毛细 2.过敏性哮喘 主要检测过敏源和 IgE 血管扩张，通透性增加,平滑肌收缩； 3.过敏性鼻炎 测定血清特异性IgE 4.明显个体差异和遗传倾向； 4.过敏性胃肠炎和荨麻疹 5.补体不参与 三个机制：1.补体介导的细胞溶解 1.输血反应2.新生儿溶血3.自 2.吞噬作用；3.抗体依赖性细胞介导的细 身免疫性溶血性贫血4.药物过 胞毒作用 敏性血细胞减少5.链球菌感染 检测重点是抗血细 IgG/IgM 四个特点：1.抗原或抗原抗体复合物存在 后肾小球肾炎6.急性风湿热7. 胞抗体 于细胞膜上；2.参与的抗体是IgG/IgM 肺出血肾炎综合征8.Graves病 3.有补体、吞噬细胞、NK细胞参与；4.后 9.重症肌无力 果为靶细胞被破坏 可溶性免疫复合物沉积于毛细血管基底膜 局部免疫复合物病：如Arthus ，通过激活补体以及在血小板、肥大细胞 反应及类Arthus反应 主要检测循环免疫 \ 嗜碱性粒细胞的参与下，引起充血水肿、 全身免疫复合物病：如血清病 复合物 中性粒细胞浸润、组织坏死为特征的炎症 链球菌感染后肾小球肾炎、慢 反应和组织损伤。 性免疫复合物病、过敏样休克. 1.是由效应T细胞再次接触相同的抗原后 （1）传染性迟发超敏反应：由 引起以单个核细胞（巨噬细胞、淋巴细胞） 胞内寄生菌（结核杆菌、麻风 浸润为主的炎症性病理损伤 杆菌）、病毒、真菌等引发的 2.发生迟缓，再次接触抗原后24-72h发生 感染（2）接触性皮炎（3）移 可用皮肤试验来检 无 2）与抗体、补体无关而与效应T细胞和吞 植排斥反应，迟发型超敏反应 测 噬细胞及产生的细胞因子和细胞毒性介质 的一个显著临床表现是移植排 有关 3）个体差异小，在抗感染免疫清除 斥反应 抗原的同时损伤组织。
超敏反应性疾病及其免疫检测PPT课件
（二）局部性超敏反应 ★1. 呼吸道过敏反应：由花粉、尘螨、真菌、动物 毛屑等吸入性变应原引起的过敏性哮喘、过敏性鼻炎
29
2.消化道过敏反应：由食物、药物引起过敏性胃肠 炎，表现为恶心、呕吐、腹泻、腹痛等症状 ★ 3.皮肤过敏反应：由食物、 药物、花粉、漆类等 引起，主要表现为荨麻疹、湿疹、血管神经性水肿
◆接触抗原机会：如对某些花粉过敏的人，在乔迁异 地后无抗原刺激机会，故不产生该 抗原 特异的 IgE
13
◆ 细胞因子： Th2细胞分泌的IL-4可促进IgE产生； Th1细胞分泌的IFN-r可抑制IL-4分泌； 因此提高Th1细胞活性，可抑制Th2分泌IL-4， 从而降低IgE产生，阻断IgE 介导的Ⅰ型超敏反应
第二十一章
超敏反应性疾病及其免疫检测
1
思考题：
1.有关超敏反应的基本概念 2.超敏反应的分型、各类型的特点、发生机制 3.各类型超敏反应性疾病及其发生机制的相互比较 4.超敏反应免疫学检测的主要方法、原理和评价
2
基基本本概概念念
★ 1. 超敏反应（hypersensitivity ） 是指机体接触到某些抗原并且致敏后，再
10
2.抗体
引起Ⅰ型超敏反应的抗体主要是IgE
IgE特点： （1） IgE产生的部位：为变应原入侵引起过敏
反应的好发部位，如呼吸道和肠道粘膜
11
（2）IgE重要的生物学特征: 能与自身肥大细胞和嗜碱性粒细胞表
面相应的IgE Fc受体结合，使机体处于 致敏状态
12
（3）IgE合成的影响因素：
◆遗传：具有过敏体质的人对变态反应性疾病易感， 该种人血清IgE水平显著升高
◆血小板活化因子（PAF）： 促使血管扩张，通透性增强
29
2.消化道过敏反应：由食物、药物引起过敏性胃肠 炎，表现为恶心、呕吐、腹泻、腹痛等症状 ★ 3.皮肤过敏反应：由食物、 药物、花粉、漆类等 引起，主要表现为荨麻疹、湿疹、血管神经性水肿
◆接触抗原机会：如对某些花粉过敏的人，在乔迁异 地后无抗原刺激机会，故不产生该 抗原 特异的 IgE
13
◆ 细胞因子： Th2细胞分泌的IL-4可促进IgE产生； Th1细胞分泌的IFN-r可抑制IL-4分泌； 因此提高Th1细胞活性，可抑制Th2分泌IL-4， 从而降低IgE产生，阻断IgE 介导的Ⅰ型超敏反应
第二十一章
超敏反应性疾病及其免疫检测
1
思考题：
1.有关超敏反应的基本概念 2.超敏反应的分型、各类型的特点、发生机制 3.各类型超敏反应性疾病及其发生机制的相互比较 4.超敏反应免疫学检测的主要方法、原理和评价
2
基基本本概概念念
★ 1. 超敏反应（hypersensitivity ） 是指机体接触到某些抗原并且致敏后，再
10
2.抗体
引起Ⅰ型超敏反应的抗体主要是IgE
IgE特点： （1） IgE产生的部位：为变应原入侵引起过敏
反应的好发部位，如呼吸道和肠道粘膜
11
（2）IgE重要的生物学特征: 能与自身肥大细胞和嗜碱性粒细胞表
面相应的IgE Fc受体结合，使机体处于 致敏状态
12
（3）IgE合成的影响因素：
◆遗传：具有过敏体质的人对变态反应性疾病易感， 该种人血清IgE水平显著升高
◆血小板活化因子（PAF）： 促使血管扩张，通透性增强
超敏反应性疾病的免疫学检验课件
放射免疫分析（RIA）
利用放射性同位素标记抗原或抗体，通过测量放射性信号，定量检测样本中抗原或抗体的 技术。
流式细胞术（Flow cytometry）
利用荧光标记抗体或荧光染料标记细胞，通过流式细胞仪对细胞表面抗原或细胞内分子进 行定量检测的技术。
免疫学检验在超敏反应性疾病中的应用
01
02
03
诊断
超敏反应性疾病的免疫学研究进展
深入了解发病机制
对超敏反应性疾病的发病机制进 行深入研究，有助于发现新的治
疗靶点和方法。
新型免疫疗法探索
针对超敏反应性疾病的免疫疗法 研究不断涌现，如免疫调节剂、
细胞免疫疗法等。
个体化治疗策略
基于基因组学和免疫学的研究， 为超敏反应性疾病的个体化治疗
提供了可能。
未来研究方向与挑战
过敏原检测
01
过敏原检测是超敏反应性疾病诊 断的重要手段，通过检测患者体 内对特定过敏原的抗体，确定过 敏原类型。
02
过敏原检测的方法包括皮肤点刺 试验、皮内试验和血清特异性IgE 检测等。这些方法能够检测出过 敏原，为后续治疗提供依据。
血清免疫学检测
血清免疫学检测是超敏反应性疾病诊断的重要手段之一，通过检测患者血清中的 免疫球蛋白和细胞因子等指标，评估患者的免疫状态。
超敏反应性疾病的免疫学检 验课件
contents
目录
• 超敏反应性疾病概述 • 免疫学检未来研究方向
01
超敏反应性疾病概述
定义与分类
定义
超敏反应性疾病是指机体受同一 抗原再次刺激后发生的一种表现 为组织损伤或生理功能紊乱的异 常免疫反应。
THANKS
跨学科合作
免疫学与临床医学、生物学、化学等学科的交叉融合将为超敏反 应性疾病的研究提供更多思路和方法。
利用放射性同位素标记抗原或抗体，通过测量放射性信号，定量检测样本中抗原或抗体的 技术。
流式细胞术（Flow cytometry）
利用荧光标记抗体或荧光染料标记细胞，通过流式细胞仪对细胞表面抗原或细胞内分子进 行定量检测的技术。
免疫学检验在超敏反应性疾病中的应用
01
02
03
诊断
超敏反应性疾病的免疫学研究进展
深入了解发病机制
对超敏反应性疾病的发病机制进 行深入研究，有助于发现新的治
疗靶点和方法。
新型免疫疗法探索
针对超敏反应性疾病的免疫疗法 研究不断涌现，如免疫调节剂、
细胞免疫疗法等。
个体化治疗策略
基于基因组学和免疫学的研究， 为超敏反应性疾病的个体化治疗
提供了可能。
未来研究方向与挑战
过敏原检测
01
过敏原检测是超敏反应性疾病诊 断的重要手段，通过检测患者体 内对特定过敏原的抗体，确定过 敏原类型。
02
过敏原检测的方法包括皮肤点刺 试验、皮内试验和血清特异性IgE 检测等。这些方法能够检测出过 敏原，为后续治疗提供依据。
血清免疫学检测
血清免疫学检测是超敏反应性疾病诊断的重要手段之一，通过检测患者血清中的 免疫球蛋白和细胞因子等指标，评估患者的免疫状态。
超敏反应性疾病的免疫学检 验课件
contents
目录
• 超敏反应性疾病概述 • 免疫学检未来研究方向
01
超敏反应性疾病概述
定义与分类
定义
超敏反应性疾病是指机体受同一 抗原再次刺激后发生的一种表现 为组织损伤或生理功能紊乱的异 常免疫反应。
THANKS
跨学科合作
免疫学与临床医学、生物学、化学等学科的交叉融合将为超敏反 应性疾病的研究提供更多思路和方法。
超敏反应性疾病及其免疫检测
嗜碱性粒细胞表面相应IgE Fc受体（ FcεR I） 结合，使机体处于致敏状态。
常见Ⅰ型超敏反应性疾病
全身性超敏反应 药物过敏性休克（青霉素、头孢菌素、链霉素、普
鲁卡因）
局部性超敏反应 呼吸道过敏反应（花粉、尘螨、动物毛屑、真菌等） 皮肤过敏反应 （药物、食物、油漆）
哮喘病
荨麻疹
I型超敏反应免疫检测
新生儿溶血（Rh血型不符） Rh+父亲 + Rh-母亲 产生 抗Rh抗体IgG
IgG通过胎盘 进入胎儿体内
子2 Rh+
Ⅱ型超敏反应
RBC溶解
Ⅱ型超敏反应免疫检测
（一）抗血细胞抗体的检测 1.Rh抗体的检测 2.抗球蛋白检测（Coombs试验）
(1)直接Coombs试 验 (二()2临)间床接意C义oombs试 验
Ⅰ型超敏反应发生机制
致敏阶段
• 致敏状态可维持数月甚至更长时间 • 如长期不接触相同变应原，致敏状态 可逐渐消失 • 细胞膜表面结合有特异性IgE的肥大 细胞和嗜碱性粒细胞称为致敏靶细胞
效应阶段
生物活性介质作用于效应组织和器官，引起局部或 全身过敏反应 • 早期相（速发相）反应：接触变应原后数秒或数分钟
内发生，可持续数小时；主要由组胺、前列腺素等 引起。 • 晚期相（迟发相）反应：接触变应原后6~12小时发 生，可持续数天或更长时间；主要由新合成的脂类 介质如 白三烯等引起。
参与反应主要成分 1.变应原(allergens)：引起速发型超敏反应 的抗原 • 某些药物或化学物质：青霉素、有机碘化合
试验方法： 皮肤消毒
皮内注射变应原/对照液0.01~0.02ml
20~30min观察结果
血清总IgE检测
• 测定方法：化学发光法、ELISA • 临床意义：正常人IgE为20~200IU/ml，IgE升高常见 于过敏性哮喘、过敏性鼻炎、特发性皮炎、湿疹、药物性 间质性肺炎、支气管肺曲菌病、寄生虫感染、急慢性肝炎 和IgE型多发性骨髓瘤等。 • 应用评价：血清IgE含量影响因素多（年龄、种族、地 域、环境、遗传等），因此应建立当地正常参考范围；化 学发光法敏感性高、特异性强、稳定性好、测定自动化、 检测时间短，临床实验室常用；ELISA方便、实用、敏感 性和特异性均较好、不需特殊仪器、适用于中小型实验室
常见Ⅰ型超敏反应性疾病
全身性超敏反应 药物过敏性休克（青霉素、头孢菌素、链霉素、普
鲁卡因）
局部性超敏反应 呼吸道过敏反应（花粉、尘螨、动物毛屑、真菌等） 皮肤过敏反应 （药物、食物、油漆）
哮喘病
荨麻疹
I型超敏反应免疫检测
新生儿溶血（Rh血型不符） Rh+父亲 + Rh-母亲 产生 抗Rh抗体IgG
IgG通过胎盘 进入胎儿体内
子2 Rh+
Ⅱ型超敏反应
RBC溶解
Ⅱ型超敏反应免疫检测
（一）抗血细胞抗体的检测 1.Rh抗体的检测 2.抗球蛋白检测（Coombs试验）
(1)直接Coombs试 验 (二()2临)间床接意C义oombs试 验
Ⅰ型超敏反应发生机制
致敏阶段
• 致敏状态可维持数月甚至更长时间 • 如长期不接触相同变应原，致敏状态 可逐渐消失 • 细胞膜表面结合有特异性IgE的肥大 细胞和嗜碱性粒细胞称为致敏靶细胞
效应阶段
生物活性介质作用于效应组织和器官，引起局部或 全身过敏反应 • 早期相（速发相）反应：接触变应原后数秒或数分钟
内发生，可持续数小时；主要由组胺、前列腺素等 引起。 • 晚期相（迟发相）反应：接触变应原后6~12小时发 生，可持续数天或更长时间；主要由新合成的脂类 介质如 白三烯等引起。
参与反应主要成分 1.变应原(allergens)：引起速发型超敏反应 的抗原 • 某些药物或化学物质：青霉素、有机碘化合
试验方法： 皮肤消毒
皮内注射变应原/对照液0.01~0.02ml
20~30min观察结果
血清总IgE检测
• 测定方法：化学发光法、ELISA • 临床意义：正常人IgE为20~200IU/ml，IgE升高常见 于过敏性哮喘、过敏性鼻炎、特发性皮炎、湿疹、药物性 间质性肺炎、支气管肺曲菌病、寄生虫感染、急慢性肝炎 和IgE型多发性骨髓瘤等。 • 应用评价：血清IgE含量影响因素多（年龄、种族、地 域、环境、遗传等），因此应建立当地正常参考范围；化 学发光法敏感性高、特异性强、稳定性好、测定自动化、 检测时间短，临床实验室常用；ELISA方便、实用、敏感 性和特异性均较好、不需特殊仪器、适用于中小型实验室
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效应细胞和成分
肥大细胞 嗜碱性粒细胞
FcR+细胞（吞噬 细胞、NK细胞） FcR+细胞、 补体 巨噬细胞、嗜酸 性粒细胞、CTL
初次介导组分
血管活性胺
二次介导组分
白三烯、PGD2、 PAF、细胞因子 溶酶体酶、穿孔 素
补体、 攻膜复合体 抗原-抗体、 补体复合物 IFN-γ、IL-4、 IL-5、eotaxin、 细胞毒素
临床反应，故又称速发型超敏反应（immediate
hypersensitivity）。
第一节 Ⅰ型超敏反应
一、Ⅰ型超敏反应体内检测方法
1. 皮肤试验
再次接触 Ag Mast cell IgE
Mast cell
Mast Mast cell cell
脱颗粒
20-30min
局部红肿、 硬结
第一节 Ⅰ型超敏反应
第二十二章 超敏反应性疾病及其免疫检测
重点提示
Ⅰ型超敏反应体外检测项目及检测方法。
抗血细胞抗体常见检测方法和临床意义。
抗原非特异性循环免疫复合物的检测方法和临床
意义。
第二十二章 超敏反应性疾病及其免疫检测
超敏反应（hypersensitivity）：是机体接受某些
抗原刺激时，出现生理功能紊乱或组织细胞损伤等异常
二、Ⅳ型超敏反应皮肤试验临床意义及应用评价 （一）临床意义
1．寻找变应原
2．结核菌素皮试意义：①了解机体是否对结核菌素 有免疫力及接种卡介苗后的免疫效果观察 ；②排除结核 菌感染 ；③了解机体细胞免疫功能状况 。 3．传染病的诊断 （二）应用评价 结核菌素皮试不但可以判断机体是否对变应原过敏， 而且可以反映机体的细胞免疫功能状况。斑贴试验虽然敏 感度不太高，但假阳性较少。
第一节 Ⅰ型超敏反应
第二节 Ⅱ型超敏反应
第二节 Ⅱ型超敏反应
Ⅱ型超敏反应：又称为溶细胞型或细胞毒型超敏反应， 特点是由IgG或IgM类抗体与靶细胞表面相应抗原结合后， 在补体、吞噬细胞和NK细胞参与下，引起的以细胞溶解或
组织损伤为主的病理性免疫反应，发作较快。
第二节 Ⅱ型超敏反应
一、Ⅱ型超敏反应常见检验项目及其检测方法 （一）抗血细胞抗体检测方法 1．抗球蛋白试验（antiglobulin test，AGT），即 Coombs试验。 2. 微柱凝胶法
和特异性均较好，但使用荧光素做标记时，试剂的使用有
效期较短。
第一节 Ⅰ型超敏反应
3. IgG4检测
（1）检测方法：包括放射免疫试验、酶联免疫吸附
试验、免疫比浊等。
（2）临床意义 ： ① IgG4异常增高可见于Ⅰ型超敏反应性疾病和IgG4 相关性疾病。 ②此外，类风湿关节炎、系统性红斑狼疮等自身免疫 病患者血清中亦可出现IgG4水平升高。
第一章 血液标本采集与处理
临床免疫学检验技术
第二十二章 超敏反应性疾病及其免疫检测
杨巍
第二十二章 超敏反应性疾病及其免疫检测
目 录
第一节 Ⅰ型超敏反应 一、Ⅰ型超敏反应体内检测方法 二、Ⅰ型超敏反应体外检测项目及检测方法 第二节 Ⅱ型超敏反应 一、Ⅱ型超敏反应常见检验项目及其检测方法 二、Ⅱ型超敏反应抗血细胞抗体检测的临床意义及应用评价 第三节 Ⅲ型超敏反应 一、Ⅲ型超敏反应常见检验项目及其检测方法 二、Ⅲ型超敏反应免疫复合物检测的临床意义及应用评价 第四节 Ⅳ型超敏反应 一、Ⅳ型超敏反应常见检验项目及其检测方法 二、Ⅳ型超敏反应皮肤试验临床意义及应用评价 本章小结
3．酶介质法：原理是IgG型不完全抗体与红细胞膜上 相应抗原结合不能形成肉眼可见的凝集。加入酶介质后， 红细胞膜表面的唾液酸糖肽被破坏，细胞膜表面负电荷减 少，细胞间排斥力减小，细胞之间距离缩小，呈现肉眼可 见的凝集。 最常用的酶是1%的木瓜酶或菠萝蛋白酶。
第二节 Ⅱ型超敏反应
（二）自身抗体检测 常见的介导Ⅱ型超敏反应的自身抗体还包括抗乙酰胆 碱受体抗体、抗促甲状腺激素受体抗体以及抗肾小球基底 膜Ⅳ型胶原抗体和抗肾小管基底膜抗体等。 检测方法：间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence，IIF）。检测时，以特异性组织切 片作为检测基质。
第一节 Ⅰ型超敏反应
4．细胞脱颗粒测定 （1）类胰蛋白酶测定：作为肥大细胞活化、脱颗粒 的指标。一般采用双抗体夹心ELISA法。 （2）嗜碱性粒细胞脱颗粒测定：该试验阳性不仅能 够证实sIgE的存在，而且能够证明sIgE是有功能的，较单 纯皮肤试验或sIgE阳性结果更有临床意义。 （3）嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(eosinophil cationic protein，ECP)测定：作为嗜酸性粒细胞活化、 脱颗粒的指标。ECP测定包括荧光免疫试验、化学发光免 疫试验、酶联免疫吸附试验和放射免疫试验等多种方法。
2 ．激发试验(provocation test)：是模拟自然发 病条件，以少量致敏原引起一次较轻的变态反应发作， 用以确定变应原的试验。
非特异性激发试验 特异性激发试验
二、Ⅰ型超敏反应体外检测方法 血清总IgE检测 特异性IgE检测 体外检测方法 IgG4检测 细胞脱颗粒测定
第一节 Ⅰ型超敏反应
第三节 Ⅲ型超敏反应
第三节 Ⅲ型超敏反应
Ⅲ型超敏反应：又称为免疫复合物型或血管炎型超敏 反应，是由抗原和抗体结合形成中等大小的可溶性免疫复 合物沉积于局部或全身多处毛细血管基底膜后，激活补体
，并在中性粒细胞、血小板、嗜碱性粒细胞等效应细胞参
与下，引起的以充血水肿、局部坏死和中性粒细胞浸润为 主要特征的炎症反应和组织损伤。
1．血清总IgE(total IgE，tIgE)检测 （1）检测方法：包括免疫比浊、化学发光免疫试验
和酶联免疫吸附试验。
（2）临床意义 ：TIgE升高常见于过敏性疾病 ，当 患者有选择性IgA缺乏症，感染、肿瘤和其他情况（输血、川 崎病、肾病综合症、肝脏疾病）时也出现血清TIgE升高。 单纯TIgE升高不能作为疾病诊断依据，也不能说明患者属
清tIgE结果时须建立当地人群tIgE水平的参考区间。
第一节 Ⅰ型超敏反应
2．特异性IgE（specific IgE，sIgE）检测
（1）检测方法：包括放射免疫试验、免疫印
迹和荧光酶免疫试验。 放射变应原吸附试验 （radioallergosorbent test，RAST） RAST是目前公认的检测Ⅰ型超敏反应的有效方 法之一 。根据标记物不同分为：RAST RIA 、RAST EIA 、RAST FEIA。
第一节 Ⅰ型超敏反应
（2）sIgE检测的临床意义 ：sIgE检测可以与变应原 皮试和支气管激发试验互为补充，但不能完全代替后两种 试验。
（3）sIgE检测的应用评价： ①RAST方法检测效率低
（每次只能检测一种变应原）；有放射性核素污染风险； 当待测血清中含有相同特异性IgG时可干扰正常结果。② 免疫印迹无污染、无需特殊设备、操作简单、能一次性确 定多种变应原，故广泛应用。③荧光酶免疫试验的敏感性
于特异质个体；TIgE正常也不能排除变态反应疾病。
第一节 Ⅰ型超敏反应
（3）血清总IgE检测的应用评价： ①免疫比浊和化学发光免疫试验敏感性高、特异性强、 稳定性好，测定自动化、检测时间短；酶联免疫吸附试验 方便、实用，敏感性和特异性均好，不需要特殊仪器。 ②血清tIgE含量受多种因素的影响，因此，在分析血
溶酶体酶 趋化因子、细胞 因子、细胞毒素、 炎症介质
第二十二章 超敏反应性疾病及其免疫检测
第一节
Ⅰ型超敏反应
第一节 Ⅰ型超敏反应
Ⅰ型超敏反应：亦称变态反应（allergy）或过敏反 应（anaphylaxis），主要由特异性IgE抗体介导产生，因 其发生速度快，常在再次接触相同抗原后数分钟内即出现
第三节 Ⅲ型超敏反应
一、Ⅲ型超敏反应常见检验项目及其检测方法
类别 物理法 原理 溶解度 方法 PEG比浊试验 敏感度（μg） 20
补体法
抗球蛋白法
结合C1q
结合RF
C1q固相试验
mRF固相抑制试验
0.1
1~20
细胞法
补体受体
Raji细胞试验
6
第三节 Ⅲ型超敏反应
二、Ⅲ型超敏反应免疫复合物检测的临床意义及应用
RBC 通过凝 胶，沉 积在管 底
+
凝集 RBC 在凝 胶下 部
++
凝集 RBC 在凝 胶中 部
双群
凝集 RBC在 凝胶顶 部；未 凝集 RBC在 管底
+++
凝集 RBC 在凝 胶中 上部
++++
凝集 RBC 在凝 胶顶 部， 呈线 条形
第二节 Ⅱ型超敏反应
2．凝聚胺法： 原理： 低离子介质——降低溶液的离子强度——促进不完全 抗体与红细胞抗原结合； 高价阳离子多聚物（凝聚胺）——中和红细胞表面的 负电荷——使IgG型抗体直接凝集红细胞。 加入中和液——由凝聚胺引起的非特异性凝集——分 散；由抗体介导的特异性凝集——不分散。 结果判定： 凝集块在短时间（1分钟）内分散——判断为阴性； 形成不同强度的凝集块——判断为阳性。
第四节 Ⅳ型超敏反应
Ⅳ型超敏反应皮肤试验结果的判断标准
反应程度 + ++ +++ ++++ 皮内试验斑贴试验 无反应或小于对照 仅有红肿 红肿伴硬结 红肿、硬结、水疱 大疱和（或）溃疡 皮内试验斑贴试验 无反应或小于对照 轻度红肿、瘙痒 明显红肿、时有红斑 红肿伴豆疹、水疱 红肿、水疱、溃疡
第四节 Ⅳ型超敏反应
评价
（一）临床意义 免疫复合物阳性或浓度升高主要见于感染性疾病和自 身免疫性疾病。 CIC的消长可反映病情的严重程度、检测治疗效果。 须对比多次检测结果才能证实其与疾病的相关性。 对有蛋白尿、关节痛、血管炎、浆膜炎、紫癜症状等 诊断不明确的患者，可考虑检测循环免疫复合物，并结合 局部免疫复合物的免疫组化检测结果以明确病变是否与Ⅲ 型超敏反应有关。