重金属检查标准操作规程

沈阳康达制药集团有限公司 GMP 文件

目 的：制定重金属检查标准操作规程，使检验人员的操作规范，确保检验结果的准确、可靠。 范 围：本法适用于本公司需要用重金属检查法进行检测的原料、半成品及成品。 责任人：QC 化验员对实施本规程负责。

内 容：

1.标准来源：《中华人民共和国药典》2010年版一部、中华人民共和国药典》2010年版第一增补本

2.简述

2.1重金属是指在规定实验条件下能与显色剂作用的金属盐类杂质，采用硫代乙酰胺试液或硫化钠试液作显色剂，以铅（P ｂ）的限量显示。

2.2由于实验条件不同，分为4种检查方法：第一法适用于供试品不经有机破坏，在酸性溶液中显色的重金属限量检查；第二法适用于供试品需灼烧破坏，取炽灼残渣项下遗的残渣，经处理后在酸性溶液中显色的重金属限量检查；第三法用来检查能溶于碱而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的药品中的重金属；第四法用微孔滤膜过滤，使重金属硫化物沉淀富集成色斑，用于有色溶液或重金属限量较低的品种。

3.仪器与用具

3.1纳氏比色管：应选玻璃质量较好、无色（尤以管底）、配对、

刻度标线高度一致的纳氏比色管，洗涤时避免划伤内壁。

3.2滤器：由具有螺纹丝扣并能密封的上、下两部分以及垫圈、

滤膜和辅助滤板组成。

3.2.1滤器上盖部分A 的入口处应能与50ml 注射器紧密联接，

滤器下部F 的出口处能套上一合适橡皮管。A 与F 能通过螺纹丝

扣密封。

3.2.2垫圈应内径光滑、大小相同，以使斑点边缘圆整、清楚、

大小一致。在滤器加上橡皮垫圈。既可使滤膜与滤板紧密结合，

又可避免在旋紧滤器接头时扭曲或损坏滤膜。

3.2.3滤膜的直径为10mm ，孔径为3.0μｍ，使用前在水中浸泡

24小时以上，可使色斑均匀。

3.2.4 50ml 注射器，应能与滤器上盖入口处紧密联接。

3.3茂福炉

3.4电子天平

3.5电炉子

4.试药和试液

4.1试药：盐酸、硝酸、硫酸、抗坏血酸。

4.2试液：标准铅溶液、硫代乙酰胺试液、硫化钠试液、醋酸盐缓冲液（ｐH3.5）、稀焦糖溶液、稀盐酸、氨试液。

4.3试液的配制

4.3.1标准铅溶液：精密称取硝酸铅0.1599ｇ，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ｍｌ相当于10μｇ的Pｂ）。本液仅供当日使用。

4.3.2硫代乙酰胺试液：取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml，置冰箱中保存。临用前取混合液（由1mol/L氢氧化钠溶液15ml、水

5.0ml及甘油20ml组成）5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用。

4.3.3硫化钠试液：取硫化钠1g，加水使溶解成10ml，即得。本液应临用新制。

4.3.4醋酸盐缓冲液（ｐH3.5）：取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节ｐH值至3.5（电位法指示），用水稀释至100ml，即得。

4.3.5稀焦糖溶液：取蔗糖或葡萄糖约5g，置磁坩锅中，在玻璃棒不断搅拌下，加热至呈棕色糊状，放冷，用水溶解成约25ml，滤过，贮于滴瓶中备用，临用时，根据供试液色泽深浅，取适当量调节使用。

4.3.6稀盐酸：取盐酸234ml，加水稀释至1000ml，即得。

4.3.7氨试液：取“浓氨溶液”400ml，加水稀释至1000ml，即得。

5.操作方法

5.1第一法

5.1.1取25ml纳氏比色管三支，编号为甲、乙、丙。

5.1.2甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液（ｐH3.5）2ml，加水或各品种项下规定的溶剂稀释成25ml。

5.1.3乙管中加入按各品种项下规定的方法制成的供试液25ml。

5.1.4丙管中加入与乙管相同量的供试品，加配制供试品溶液的溶剂适量使溶解，再加与甲管相同量的标准铅溶液与醋酸盐缓冲液（ｐH3.5）2ml后，用溶剂稀释成25ml；若供试品溶液带颜色，可在甲管中滴加少量稀焦糖溶液或其它无干扰的有色溶液，使之与乙管、丙管一致。

5.1.5在甲、乙、丙三管中分别加硫代乙酰胺试液各2.0ml，摇匀，放置2分钟，同置白色衬板上，自上向下透视，当丙管中显出的颜色不浅于甲管时，乙管中显示的颜色与甲管比较，不得更深。如丙管中显示的颜色浅于甲管，应取样按第二法重新检查。

5.1.6如在甲管中滴加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，仍不能使颜色一致时，应取样按第二法检查。

5.1.7供试品如含高铁盐而影响重金属检查时，可在甲、乙、丙三管中分别加入相同量的维生素C 0.5～1.0g，再照上述方法检查。

5.1.8配制供试品溶液时，如使用的盐酸超过1ml，氨试液超过2ml，或加入其他试剂进行处理者，除另有规定外，甲管溶液应取同样同量的试剂置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液（ｐH3.5）2.0ml 与水15ml微热溶解后，移置钠氏比色管中，加标准铅溶液一定量，再用水或各品种项下规定的溶剂稀释成25ml。

5.2第二法

5.2.1除另有规定外，当须改用第二法检查时，取各品种项下规定量的供试品，按炽灼残渣检查法（附录Ⅸ J）进行炽灼处理，然后取遗留的残渣；或直接取炽灼残渣项下遗留的残渣；如供试品为溶液，则取各品种项下规定量的溶液，蒸发至干，再按上述方法处理后取遗留的残渣；加硝酸0.5ml 蒸干，至氧化氮蒸气除尽后（或取供试品一定量，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1ml，使恰湿润，用低温加热至硫酸除尽后，加硝酸0.5ml,蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，在500～600℃灼使完全灰化），放冷，加盐酸2.0ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显微粉红色，再加醋酸盐缓冲液（ｐH3.5）2.0ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加水稀释成