四唑法测定种子生活力Word版

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四唑法测定种子生活力

四唑法测定种子生活力

四唑染色法测定种子生活力福建农林大学20**级农学0******* *****一、目的1、了解种子生活力测定方法2、熟悉利用四唑染色法测定种子活力方法及操作方式二、原理有生活力的种子活细胞在呼吸过程中都发生氧化还原反应,四唑溶液作为一种无色的指示剂,被种子吸收后参与活细胞的还原反应,从脱氢酶接受氢离子,在活细胞里产生红色、稳定、不扩散、不溶于水的三苯基甲。

化学反应如下:DPNH2 + TTC DPN + TTCH + HCl(辅酶IH2)(四唑)(辅酶Ⅰ)(甲)(氯化氢)HN‐N‐C6H5N‐N‐C6H5∥2H ∥C6H5‐C C6H5‐C +HCl \ \N﹦N+‐C6H5 N=N‐C6H5无生活力的种子则无此反应。

根据种子的四唑显色的部位,即可区分有活力的部分和死亡部分。

一般鉴定原则是,凡是胚的主要结构及有关活营养组织染成有光泽的鲜红色,且组织状态正常的,为有生活力的种子。

凡是胚的主要构造局部不染色或染色成异常的颜色和光泽,并且活营养组织部染色成无光泽的淡红色或灰白色,且组织已软腐或异常、虫蛀、损伤、腐烂的为死种子。

三、试材与设备1、材料大豆种子2、设备烧杯、滤纸、刀片、镊子、恒温培养箱3、试剂 1.0%的四唑溶液四、实验步骤从净度分析后并经过充分混合的大豆种子中,随机抽取30粒,3次重复。

1、种子预湿将选取的大豆种子水浸预湿,室温下浸泡8h,使其充分吸胀。

2、种子处理将吸胀的大豆种子的种皮去除,掰开子叶,露出子胚芽,保持湿润备用。

3、四唑染色将处理好的种子放入烧杯中,加入1.0%的四唑溶液,将种子淹没,然后置于35℃恒温培养箱中避光染色0.5~1 h。

4、观察鉴定将染色后的大豆种子经清水冲洗后进行染色情况的观察鉴定。

胚部全部显成鲜红色、仅子叶远离胚芽部分少量未染色、仅子叶边缘少许未染色,为有生活力的种子。

5、结果计算及处理统计各个重复中有生活力的大豆种子数,并计算其平均值。

五、结果分析根据生活力测定重复间的最大容许差距,得平均生活力百分比在22%的最大容许差距为16%。

W3105种子生活力的测定-4-微教材(精)

W3105种子生活力的测定-4-微教材(精)

农作物种子生活力的测定1种子生活力的概念种子生活力(seed viability)指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。

一些休眠种子在发芽试验中不能发芽,但它是有生活力的,破除休眠后,能长成正常幼苗。

而生活力反映的是种子发芽率和休眠种子百分率的总和。

所以,种子生活力测定,反映的是种子批的最大发芽潜力。

在短期内急需了解种子发芽率或当某些样品在发芽末期尚有较多的休眠种子时,可应用生活力的生化法快速估测种子生活力。

生活力测定是应用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(简称四唑,TTC)无色溶液作为一种指示剂,这种指示剂被种子活组织吸收后,接受活细胞脱氢酶中的氢,被还原成一种红色的、稳定的、不会扩散的和不溶于水的三苯基甲替。

据此,可依据胚和胚乳组织的染色反应来区别有生活力和无生活力的种子。

除完全染色的有生活力种子和完全不染色的无生活力种子外,部分染色种子有无生活力,主要是根据胚和胚乳坏死组织的部位和面积大小来决定,染色颜色深浅可判组织是健全的,还是衷弱的或死亡的。

2试剂应用四唑的0.1%~1.0%(m/V)溶液,1.0%溶液用于不切开胚的种子染色,而0.1%~0.5%溶液可用于已经切开胚的种子染色。

配成的溶液须贮存在黑暗处或棕色瓶里。

如果用蒸馏水配制溶液的pH值不在6.5~7.5范围内,则采用磷酸缓冲液来配制。

磷酸缓冲液的配制方法如下:溶液Ⅰ:称取9.078g磷酸二氢钾(KH2PO4)溶解于1000mL蒸馏水中。

溶液Ⅱ:称取9.472g磷酸氢二钠(Na2HPO4)或11.876g磷酸氢二钠(Na2HPO4·2H2O)溶解于1000mL的蒸馏水中。

取溶液Ⅰ2份和溶液Ⅱ3份混合即成缓冲液。

在该缓冲液中溶解准确数量的四唑盐类,以获得准确的浓度。

如每100mL缓冲液中溶入1g 四唑盐类即得1%浓度的溶液。

3仪器、设备3.1控温设备:电热恒温箱或发芽箱;冰箱。

3.2观察器具:体视显微镜或手持放大镜;光线充足柔和的灯光。

种子生活力测定—小麦种子生活力四唑测定方法

种子生活力测定—小麦种子生活力四唑测定方法

有生活力,胚染成淡红色
六、观察鉴定 有生活力,胚全部染色
六、观察鉴定 有生活力,盾片末端不染色
六、观察鉴定 有生活力,盾片末端不染色
六、观察鉴定
有生活力,盾片末端、胚 Biblioteka 顶端、胚根鞘不染色六、观察鉴定
无生活力,胚根 超过3/4不染色
六、观察鉴定 无生活力,胚芽不染色
六、观察鉴定 无生活力,盾片中部不染色
六、观察鉴定 有生活力,整胚染色
六、观察鉴定
有生活力,胚根和盾片末 端未染色
六、观察鉴定
无生活力,胚根和胚轴 下部未染色
六、观察鉴定
有生活力,胚根未染 色
六、观察鉴定 无生活力,胚根和胚芽未染色
六、观察鉴定 无生活力,种胚完未染色
六、观察鉴定 无生活力,种胚大部分未染色
六、观察鉴定 无生活力, 胚轴全部未染色
四、四唑染色 35℃染色 浓度0.1% 时间0.5~1h
五、鉴定前的处理 观察切面
六、观察鉴定
有生活力种子允许不染色、较弱或坏死的最大面积 1、盾片上下任一端三分之一不染色; 2、胚根大部分不染色,但不定根原始体必须染色。
六、观察鉴定
有生活力,胚完全染成鲜红色
无生活力,胚完全不染色
有生活力,子叶顶端不染色
六、观察鉴定 无生活力,胚根和胚根鞘全部未染色
种子生产与经营专业
小麦种子四唑测定
一、试验样品的来源和数取
试验样品来源必须是净种子。 净种子可以从净度分析后的净种子中随机数取,也可以从送验样 品中直接随机数取。 随机数取l00粒种子,2~4 个重复或少于100 粒的若干副重复。
二、预湿方式及时间 30℃恒温水浸种3~4h,或纸间12h
三、染色前种子样品准备 纵切胚和四分之三胚乳

种子生活力的四唑测定在质检中的运用

种子生活力的四唑测定在质检中的运用

种 子生活 力 的四唑测 定 在 质检中 的运用
景 彦 彪
(兰 州市种 子 管理站 ,甘 肃 兰 州 7 0 5 3 0 0)
随 着 种子 产业 化 和信 息 化 的发 展 , 种子 生 活 力 快
速测 定 在 种 子 质 量 检 测 和 种 子 贸 易 中 已 经 显 得 非 常 重要 。现 就 种子 生 活 力 的 四唑 快 速 测定 法 简 述 如下 ,
~ ~
32 磷 酸 缓 冲 液 的 配 置 .
为 保 证 四唑 的染色 效 果 ,要求 四唑 溶液 的 p 值 H 必 须在 65~75范 围之 内。 当 四唑 溶液 的 p 值 不在 . . H 这 一范 围之 内时 , 议 采用 磷 酸 缓 冲液 来 配 置 。首 先 建 配两 种母 液 I Ⅱ, 液 I 和 母 为称 取 90 7 g 酸 二氢 钾 . 磷 8 溶 于 1 0 0mL蒸 馏水 中 ,母 液 Ⅱ为称 取 9 7 磷 酸 0 . 2g 4 氢二 钠溶 于 10 0 m 0 L蒸馏 水 中 , 后取 母 液 I 然 2份 和 母液 Ⅱ 3份 混合 而成 。
23 不 受 休 眠 限 制 .
预 湿 的 目 的是 使 种 子 加 快 和 充 分 湿 润 ,软 化 种 皮, 方便 样 品准 备 和促 进 活 组 织 酶 系统 的活 化 , 以提 高 染色 的均 匀度 , 鉴定 的可 靠性 和正 确 性 。 421 缓 慢 湿 润 : 种 子 放 在 纸 上 或 纸 问 , 其 缓 慢 . . 将 让 吸湿 。该 法适 用 于那些 直接 浸 在水 中容 易破 裂 和损伤 的种子 , 以及 已经 劣 变 的种 子 或过分 干燥 的种子 。 422 水 中浸 泽 : 种 子完 全 浸 入水 中 。该 法适 用 于 .. 将 种子 直接 浸 入水 中不 会造 成 组织 破 裂 和损 伤 , 不影 并 响鉴定 结 果 的种 子 。浸种 温 度一般 采 用 3 0℃的水 温 。

种子生活力四唑染色法测定原理(精)

种子生活力四唑染色法测定原理(精)

种子生活力四唑染色法测定原理
在生物化学测定中,种子活细胞里发生的还原过程是通过一种指示剂的还原作用而显现出来的。

所用的指示剂,一种是可被种子组织吸收的四唑盐类的无色溶液,它在种子组织里参与活细胞的还原过程,从脱氢酶接受氢离子,使氯化三苯基四氮唑,经过氢化作用,在活细胞里产生红色、稳定、不扩散的三苯基甲腊。

由于种子的死活和其某些组织内脱氢酶的有无、多少,有着密切的关系,所以当四唑溶液进入种子时,有生命的组织因含有脱氢酶,而放出氢离子,使四唑还原成红色的三苯基甲酯,故有生命的组织便呈红色。

但脱氢酶的存在是随着生命活动的减弱和死亡而逐渐消失的,因此,凡丧失生命的组织就因没有脱氢酶而不能着色。

利用这一原理,按种子染色的部位和染色程度,就可判断其内部有关组织的死活以确定种子的生活力。

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种子生活力的测定

种子生活力的测定

种子生活力的测定一、氯化三苯基四氮唑(TTC)法【原理】凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应,而无生活力的种胚则无此反应。

凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应,而无生活力的种胚则无此反应时,可产生红色的三苯基甲(TTF),胚便染成红色。

当种胚生活力下降时,呼吸作用明显减弱,脱氢酶的活性亦大大下降,胚的颜色变化不明显,故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。

TTC还原反应如下:TTC(无色) TTF(红色)【仪器与用具】培养皿2套;镊子1把;单面刀片1片;垫板(切种子用)1块;烧杯1个;棕色试剂瓶;解剖针1把;搪瓷盘1个,pH试纸;【试剂】TTC溶液的配制:取1g TTC溶于1L蒸馏水或冷开水中,配制成0.1%的TTC溶液。

药液pH应在6.5~7.5,以pH试纸试之(如不易溶解,可先加少量酒精,使其溶解后再加水)。

【方法】1.将玉米、小麦等作物的新种子、陈种子或死种子,用温水(30℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。

2.随机取种子2份,每份50粒,沿种胚中央准确切开,取每粒种子的一半备用。

3.把切好的种子分别放在培养皿中,加TTC溶液,以浸没种子为度。

4.放入30~35℃的恒温箱内保温30min.也可在20℃左右的室温下放置40~60min.。

5、保温后,倾出药液,用自来水冲洗2~3次,立即观察种胚着色情况,判断种子有无生表32-1 染色法测定种子生活力记载表方法种子名称供试粒数有生活力种子粒数无生活力种子粒数有生活力种子占供式粒数的%【注意事项】1.TTC溶液最好现配现用,如需贮藏则应贮于棕色瓶中,放在阴凉黑暗处,如溶液变红则不可再用。

2.染色温度一般以25~35℃为宜。

3.判断有生活力的种子应具备:胚发育良好、完整、整个胚染成鲜红色;子叶有小部分坏死,其部位不是胚中轴和子叶连接处;胚根尖虽有小部分坏死,但其它部位完好。

4.判断无生活力的种子应具备:胚全部或大部分不染色;胚根不染色部分不限于根尖;子叶不染色或丧失机能的组织超过1/2;胚染成很淡的紫红色或淡灰红色;子叶与胚中轴的连接处或在胚根上有坏死的部分;胚根受伤以及发育不良的未成熟的种子。

枳棋种子生活力的四唑测定方法

枳棋种子生活力的四唑测定方法
室温条件下浸种 2 4 h , 去除种 皮。在 3 0℃环境下 , 采用0 . 2 5 %的 T I ' C溶液染色 4 h , 或0 . 7 5 %T r c溶液染 色2 h 。
关键 词 : 枳犋 ; 种子生活力 ; T r c染 色 法
S t u d y o n s e e d v i a b i l i t y o f Ho v e n i a a c e r b a L i n d 1 .b y T T C me t h o d / / L I Y i n g , S H E N Y o n g — b a o
摘 要 : 通 过 对 枳 楔 种 子 不 同预 处 理 、 不同的 T T C浓度 和 染 色时 间 的设 定 , 研 究 枳 犋 种 子 生 活 力 测 定 的 最佳 条 件 。
结果表 明: 四唑染 色法能够准确的检 测种子 的生活力 , 测定的适宜条件 为在远 离胚根 部 i a a c e r b a L i n d 1 . ) 隶属 鼠李科 枳棋 属 ,
h 。然后将一部分种子用 T T C染色 , 另一部分种子种
皮 剥 除后用 T T C染色 。染 色时 问及 T T C浓 度 见表 1 。 每个处 理 4×5 0粒 种 子 , 染 色 环 境 温度 为 3 O ℃ 。染 色结束 后观 察 不 同处 理 、 不同浓度 T T C溶 液 和 不 同 染 色 时间下种 子 染 色情 况 。 以胚 根 和一 半 以上 子 叶 被染 成红色 的为 有生活 力种 子 , 统 计各处 理种 子生 活 力 。利 用 E x c e l 软 件进行 数 据 的统 计分 析 。
Ab s t r a c t : T o t e s t s e e d v i a b i l i t y o f Ho v e n i a a c e r b a L i n d 1 . ,d i f f e r e n t s e e d p r e — t r e a t me n t s , TF C c o n c e n t r a t i o n a n d s t a i n i n g t i me we r e s t u d i e d .T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t Tr c me t h o d w a s a s u i t a b l e me t h o d f o r t h e s e e d v i bi a l i t y t e s t o f H o v e n i a a c e r b a L i n d 1 . .

浅析种子生活力的四唑测定

浅析种子生活力的四唑测定

浅析种子生活力的四唑测定作者:吕海忠,李文欣,张丹来源:《种子科技》 2009年第10期在实际工作中时常需要在短时间内掌握种子批的生活力状况,如果此时种子处于休眠状态则难以通过发芽测定得到结果。

种子生活力测定可以满足这一要求,四唑测定可以测定出休眠种子样品的生活力。

四唑测定法于1942年由德国的莱康教授发明,随着四唑测定技术的发展,ISTA(国际种子检验协会)于1950年成立四唑测定技术委员会。

1 生活力概念种子生活力是种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。

2种子生活力测定的意义2.1 可以测定休眠种子的生活力新收获的或在低温贮藏处于休眠状态的种子,播种之前对发芽率低而生活力高的种子,对那些发芽率低和生活力也低的种子,仅用发芽试验测定其发芽率,就不可能测出种子的最高发芽率,就必须进一步测定其生活力,以了解种子潜在发芽能力。

在实际工作中,如果发芽试验末期发现有新鲜不发芽的种子或硬实,进行生活力测定后,就可以根据具体情况做出破除休眠的处理,然后再做发芽试验。

2.2 快速预测种子发芽能力休眠种子可借助于各种预处理打破休眠后,进行发芽试验,但时间较长;在种子贸易中,常因时间紧迫,采用正规的发芽试验来测定发芽率所需时间也较长,这时可用生物化学速测法测定种子生活力,为该批种子的质量状况提供参考依据3 四唑测定适用的范围四唑测定一般适用于下列情况:收获后需马上播种的种子;具有深休眠的种子;发芽缓慢的种子;要求估测发芽潜力的种子。

另外,也适用于测定发芽末期个别种子的生活力,特别是怀疑有休眠时;测定已萌发种子,或收获期间存在的不同类型和加工的损伤(热害、机械损伤或虫蛀等)种子;解决发芽试验中存在的问题,如不清楚不正常幼苗产生的原因或怀疑杀菌剂的处理效果等。

4四唑染色测定的原理生活力测定是应用2,3,5-三苯基四氮唑(简称四唑,1rc)无色溶液作为指示剂,这种指示剂是一种可被种子活组织吸收后,接受活细胞脱氢酶中的氢而被还原成一种红色的、稳定的、不扩散的和不溶于水的三苯基甲月替。

藜科(菠菜、甜菜)四唑(TTC)法进行种子生活力测定的种子制备方法(最全)word资料

藜科(菠菜、甜菜)四唑(TTC)法进行种子生活力测定的种子制备方法(最全)word资料

藜科(菠菜、甜菜)四唑(TTC)法进行种子生活力测定的种子制备方法1.制备种子:种子软化后用刀对准发芽口,沿种子的扁平方向纵切两半,留下胚部较完整的一半放入染色板的孔穴。

2.染色0.1%四唑药液35℃ 60-90min3.生活力测定图谱提高种子活力的作用种子活力是种子发芽和出苗率、幼苗生长的潜势、植株抗逆能力和生产潜力的总和,是种子品质的重要指标。

长期以来都用发芽试验检验种子的质量,生产实践表明,实验室的发芽率与田间的出苗率之间往往存在很大差距。

遗传性决定种子活力强度的可能性,发育程度决定活力程度表现的现实性,贮藏条件则决定种子活力下降的速度。

由于种子活力是一项综合性指标,因此靠单一活力测定指标判定其总活力水平或健壮度是不科学的。

提高种子活力的作用1.提高出苗率高活力的种子播到田间后出苗迅速、均匀一致,保证全苗壮苗和作物的田间密度,为增产打下良好基础。

2.抵御不良环境高活力种子由于较强的生命力,对田间逆境具有较强的抵抗能力。

3.提升竞争能力高活力种子由于发芽迅速、出苗整齐,可以逃避和抵抗病虫害,同时由于幼苗健壮、生长旺盛,具有和杂草竞争能力。

4.抗寒力强适于早播某些作物生长季节较短,要求提早种才能保证一定的产量。

通常高活力种子对早春低温条件具有抵抗能力,故可适当提早播种。

一般在早播条件下可以适当早收和提高产量。

5.节约播种费用高活力种子成苗率高,因此可比低活力种子减少播种量。

6.增强作物产量高活力种子不仅可以获得全苗壮苗,且可提早和增加分蘖及分枝,增加有效穗数和果枝,因而可以明显增产。

7.提高耐藏性高活力种子可抵抗各种贮藏逆境,如高温、高湿等不良条件。

JTRS – 8SP系列沥青含量测定仪-燃烧法使用说明书一、系统概述1.特点●智能型:具有自动生成、保存试验结果;调用历史数据及打印试验报告等功能。

●温度控制精度高、稳定性好:采用PWM调制方式进行具有PID功能的温度控制。

●电磁兼容性强:加热通道的通、断电具有软启动功能;电控系统具有电磁屏蔽防护罩。

实验四 生活力测定

实验四 生活力测定

实验四生活力测定一、目的种子生活力测定的目的是:1. 快速估测种子样品的生活力,特别是休眠种子样品的生活力;2. 某些样品在发芽测定结束时剩有较多的休眠种子未能萌发,此时可以逐粒测定这些种子的生活力,也可以再取一份样品测定样品的生活力。

二、定义种子生活力是用染色法测得的种子潜在的发芽能力。

三、应用范围本测定适用于附录B表B2给出方法的树种四、原理1. 四唑测定原理应用2,3,5-三苯基氯化(或溴化)四唑(2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride of bromide)的无色溶液作为指示剂,以显示活细胞中所发生的还原过程。

这种指示剂被种子吸收,在种子组织内与活细胞的还原过程起反应,从脱氢酶接受氢。

在活细胞中,2,3,5-三苯基氯化四唑经氢化作用,生成一种红色而稳定的不扩散物质,即三苯基甲肤(triphenyl formazan)。

这样就能识别种子中红色的有生命部分和不染色的死亡部分。

除完全染色的有生活力种子和完全不染色的无生活力种子外,还会出现一些部分染色的种子。

在这些部分染色种子的不同部位看到其中存在着或大或小的坏死组织,它们在胚和(或)胚乳(配子体)组织中所处的部位和大小(不一定是颜色的深浅),决定着这些种子是有生活力还是无生活力。

不过同组织的健全程度相关的颜色差异仍然被认为具有决定性意义,主要是因为在某种程度上,它们有助于识别出健全、衰弱或死亡组织并确定其位置。

2. 靛蓝测定原理靛蓝(indigo carmine)为蓝色粉末,分子式为C16H8N2O2(SO3)2Na2。

靛蓝能透过死细胞组织使其染上颜色。

因此,染上颜色的种子是无生活力的。

根据胚染色的部位和比例大小来判断种子有无生活力。

五、试剂1. 使用氯化(或溴化)四唑的水溶液,浓度随树种而略有不同,见表B2中的规定。

如果所使用蒸馏水的pH值不在6.5~7.5范围之内,可将四唑溶于缓冲溶液。

缓冲溶液的配制方法如下:溶液a--在1 000ml水中溶解9.078g磷酸二氢钾(KH2PO4);溶液b--在1 000ml水中溶解11.876g磷酸氢二钠(Na2 H2PO4o2H2O),或9.472g磷酸氢二钠(Na2 H2PO4)。

四唑染色法测定白花前胡种子生活力方法研究

四唑染色法测定白花前胡种子生活力方法研究

四唑染色法测定白花前胡种子生活力方法研究作者:何伶俐,易休,杨旻,陈科力来源:《湖北农业科学》2011年第18期摘要:为探讨白花前胡(PeucedanumpraeruptorumDunn.)种子生活力的适宜测定方法,采用四唑(2,3,5-氯化三苯基四氮唑;2,3,5-Triphenyltetrazoliumchloride,TTC)染色法,设置不同浸种时间、不同染色浓度、不同染色时间的正交试验设计,来研究白花前胡种子的生活力测定条件。

结果TTC法测定白花前胡种子生活力的最佳条件为在30℃环境下,浸种10h,采用浓度1g/L的TTC溶液在35 ℃环境里染色16h。

此法可作为白花前胡种子生活力测定的标准方法。

关键词:白花前胡;四唑染色法;种子生活力中图分类号:S567.7+9;Q945.34文献标识码:A文章编号:0439-8114(2011)18-3775-03Study on TTC Method for Testing Seed Viability of Peucedanum praeruptorumHELing-li,YIXiu,YANGMin,CHENKe-li(School of Medicine / KeyLaboratoryofMinistryofEducationonTraditionalChineseMedicineResourceandCompoundPrescription,HubeiUniversityofChineseMedicine,Wuhan430065,China)Abstract:ToexploreapropelmethodfortestingseedviabilityofPeucedanumpraeruptorumDunn.,theeffectsofsoakingtime,2,3,5-trphenyltetrazoliumchloride(ttc)concentrationandstainingtimeoftheTTCtestingmethodwasstudiedbyorthogonaldesign.TheresultsshowedthattheoptimumconditionsfortestingseedviabilityofP.praeruptorumweresoakingseedsat30℃for10handthenstainingin1g/LTTCsolutionat35℃for16h.TTCmethodcouldbeusedasthestandardmethodfortestingseedviabilityofP.praeruptorum.Keywords:PeucedanumpraeruptorumDunn.;2,3,5-Triphenyltetrazoliumchloridetest;seedviability种子的生活力是种子质量的重要指标,是种用价值的主要组成部分,它与种子田间出苗率密切相关,是反映种子生命过程中十分重要的特性之一[1]。

四唑染色法测定巨紫荆种子生活力

四唑染色法测定巨紫荆种子生活力

四唑染色法测定巨紫荆种子生活力作者:凌敏杨秀莲王良桂来源:《江苏农业科学》2015年第01期摘要:为探讨巨紫荆(Cercis gigantea)种子生活力的适宜测定方法,采用四唑染色法,以染色浓度、染色温度、染色时间设计正交试验,研究巨紫荆种子的生活力测定条件。

结果表明,染色浓度、染色温度、染色时间3者之间存在一定的关系,TTC浓度为0.1%、温度为35 ℃、染色时间为8 h是巨紫荆种子生活力测定的最佳条件。

关键词:巨紫荆种子;四唑染色;生活力中图分类号: S339.3+1文献标志码: A文章编号:1002-1302(2015)01-0295-03收稿日期:2014-03-05基金项目:江苏省林业三新工程项目(编号:lysx[2013]24)。

作者简介:凌敏( 1990—),女,安徽滁州人,硕士研究生,研究方向为园林植物与应用。

E-mail:974574883@。

通信作者:王良桂,教授,博士生导师。

E-mail:wlg@ 。

巨紫荆(Cercis gigantea)原产中国浙江、河南、湖北、广东、贵州等地,是现存极少的乡土树种。

巨紫荆是高大落叶乔木,高可达15 m,胸径可达40 cm。

树干通直,生长整齐,枝展开张,树冠绿荫面积大,覆盖度高,园艺性状突出,适宜作行道树、庭荫树,艺术效果良好。

巨紫荆春季满树开淡红或淡紫红花,先花后叶,灿若云锦,观赏效果极佳;夏季叶绿荚红,茵质浓厚;秋季彩叶如霞;冬季落叶后荚果仍然悬挂枝头,尽展生命之劲力。

巨紫荆实乃春季观花、夏秋观叶、冬季观果的优良园林树种,是园林绿化中具有广阔应用前景的乡土树种[1]。

在小苗培育方面,巨紫荆的出苗率一直不高,播种前用浓硫酸酸蚀再用赤霉素浸泡,其发芽率最高仅有25.5%[2]。

准确的生活力测定方法能够真实反映种子的发芽能力,尤其对一些休眠期长的种子更为适用。

四唑(2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride,TTC)测定技术是通过鉴定种子内部活组织的染色情况测定种子活力,是国际上公认的测定种子生活力较好的方法,能够快速、有效、准确地反映出种子的生活力,是《国际种子检验规程》中用于测定发芽缓慢或有休眠种子的生活力、快速判断种子潜在发芽能力的一种有效方法[3-5]。

快速测定林木种子生活力的方法──四唑法

快速测定林木种子生活力的方法──四唑法

快速测定林木种子生活力的方法──四唑法王印肖;李秀文;管跃义【期刊名称】《河北林果研究》【年(卷),期】2000(000)0S1【摘要】四唑法是快速测定种子生活力的一种有效方法。

它是根据种子胚部是否染成红色及染色的部位、形状和大小,来判断种子生活力的。

此法简单快速,准确可靠,不受种子休眠期的限制,可在林木种子收购、贮藏、调运及休眠种子的检验中推广应用。

1测定方法1.1取样从纯净种子中随机抽取25或50粒为1组,共取4组,即4次重复。

1.2种子预处理为了软化种皮,便于剥取种仁,要对种子进行预处理。

一般种壳较薄,易吸水、剥胚的种子(如油松等),用始温40℃水浸种24h即可。

而种壳较厚且深休眠的种子(如核桃、山杏等),要浸种3~6d或更长时间,注意每天换水。

具有硬粒的豆科种子如刺槐,可用始温80℃水侵种,搅拌,自然冷却24h。

种皮致密坚硬的种子如沙枣,可用98%浓硫酸浸种20~120min,充分冲洗,再用水浸种24~48h。

一般说,浸种时间长的可缩短染色时间。

1.3取胚染色不同树种可采取不同的取胚方法。

1.3.剥离法种子软化后,轻轻剥去种皮,露出胚部,注意勿使种胚受到机械损伤。

此法多用于豆科等种子。

1.3.2纵切法沿胚部正中,经过胚根、胚轴、胚芽的中线,均匀地纵切为两半,取其中的一半进行染色。

多用于小粒针叶树种子如侧柏、樟子松等。

1...【总页数】2页(P)【作者】王印肖;李秀文;管跃义【作者单位】河北省林木种苗管理站【正文语种】中文【中图分类】S722.1【相关文献】1.四唑染色法快速测定小叶黑柴胡种子生活力研究 [J], 彭云霞;张东佳;武伟国;米永伟;蔺海明2.四唑染色法快速测定茄子种子生活力的研究 [J], 余振宙;陶鸿;占梦丹;孟淑春3.用过氧化氢法快速测定林木种子生活力的研究 [J], 张玉英;喻方圆4.介绍几种林木种子生活力快速测定方法 [J], 李基平5.四唑染色法快速测定菊芋种子生活力的研究 [J], 丁鹏因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

快速测定玉米种子生活力三法

快速测定玉米种子生活力三法

快速测定玉米种子生活力三法
若了解玉米种子发芽率,可用生物化学法快速测定。

常用方法有三
1.四唑盐类法首先配制溶液,用蒸馏水或pH值6~7的应用水配制浓度为0.25%~0.5%的溶液,然后把玉米种子沿种胚切成两半,取其中一半浸入溶液中,2~4小时后,取出种子用清水冲洗数次,逐粒观察,凡是种胚全部或主要构造染成鲜红色的为有生活力种子,种胚染成淡红色、不染色或其主要构造不染色的为生活力弱或无生活力种子。

2.靛红染色法将种子在30℃左右的水中浸泡20小时后取出,沿胚部切成两半,取其中一半放入0.1%~0.2%的靛红溶液中,15分钟后取出洗净观察,凡种胚末染色者为有生活力种子,染成斑点状者为生活力弱种子,染成深蓝色的为无生活力种子。

3.红墨水染色法按160的比例配制成溶液、将种胚浸泡15分钟后取出观察。

种胚染成红色或染色较浅的为有生活力种子。

四唑染色法测定茄子种子生活力

四唑染色法测定茄子种子生活力

四唑染色法测定茄子种子生活力作者:余振宙陶鸿占梦丹来源:《江苏农业科学》2016年第05期摘要:根据四唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride,缩写TTC)染色法测定种子生活力的原理,研究不同浓度四唑溶液,不同染色温度和不同染色时间对京茄218茄子种子生活力测定的影响,摸索出测定茄子种子生活力的最佳条件。

结果表明,四唑溶液浓度,染色温度,染色时间三者之间存在一定的相关性,通过改变三者中的一者或两者可以达到改变其他两者或一者的目的,因此,可根据实际需要来确定测定条件。

比较四唑染色法测定京茄218茄子种子生活力的不同条件,本研究提出处理组合11(浸种温度20 ℃、浸种时间18 h、染色液浓度1%、染色温度35 ℃、染色时间18 h)和处理组合23(浸种温度30 ℃、浸种时间4 h、染色液浓度1%、染色温度35 ℃、染色时间18 h)为最理想的2组处理组合,为TTC法快速测定京茄218茄子种子生活力的适宜方法。

关键词:四唑染色;茄子种子;生活力中图分类号: S641.101文献标志码: A文章编号:1002-1302(2016)05-0206-03收稿日期:2015-04-09基金项目:北京市农林科学院青年科研基金(编号:QNJJ201211);国家科技支撑计划(编号:2012BAK26B03);北京市农林科学院科技创新能力建设专项(编号:KJCX201202001、KJCX20140111);北京市科委重大科研项目(编号:D131100*********)。

作者简介::余振宙(1989—),男,安徽潜山人,硕士。

E-mail:291765585@。

通信作者:孟淑春,副研究员,主要从事蔬菜种质资源和种子技术研究。

E-mail:mengshuchun@。

种子生活力是种子质量的重要指标,是种用价值的主要组成部分,与种子田间出苗率密切相关,是反映种子生命过程中十分重要的特性之一[1]。

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四唑染色法测定种子生活力
福建农林大学20**级农学0******* *****
一、目的
1、了解种子生活力测定方法
2、熟悉利用四唑染色法测定种子活力方法及操作方式
二、原理
有生活力的种子活细胞在呼吸过程中都发生氧化还原反应,四唑溶液作为一种无色的指示剂,被种子吸收后参与活细胞的还原反应,从脱氢酶接受氢离子,在活细胞里产生红色、稳定、不扩散、不溶于水的三苯基甲。

化学反应如下:DPNH2 + TTC DPN + TTCH + HCl
(辅酶IH2)(四唑)(辅酶Ⅰ)(甲)(氯化氢)
H
N‐N‐C6H5N‐N‐C6H5
∥2H ∥
C6H5‐C C6H5‐C +HCl \ \
N﹦N+‐C6H5 N=N‐C6H5
无生活力的种子则无此反应。

根据种子的四唑显色的部位,即可区分有活力的部分和死亡部分。

一般鉴定原则是,凡是胚的主要结构及有关活营养组织染成有光泽的鲜红色,且组织状态正常的,为有生活力的种子。

凡是胚的主要构造局部不染色或染色成异常的颜色和光泽,并且活营养组织部染色成无光泽的淡红色或灰白色,且组织已软腐或异常、虫蛀、损伤、腐烂的为死种子。

三、试材与设备
1、材料大豆种子
2、设备烧杯、滤纸、刀片、镊子、恒温培养箱
3、试剂 1.0%的四唑溶液
四、实验步骤
从净度分析后并经过充分混合的大豆种子中,随机抽取30粒,3次重复。

1、种子预湿将选取的大豆种子水浸预湿,室温下浸泡8h,使其充分吸胀。

2、种子处理将吸胀的大豆种子的种皮去除,掰开子叶,露出子胚芽,保持湿润备用。

3、四唑染色将处理好的种子放入烧杯中,加入1.0%的四唑溶液,将种子淹没,然后置于35℃恒温培养箱中避光染色0.5~1 h。

4、观察鉴定将染色后的大豆种子经清水冲洗后进行染色情况的观察鉴定。

胚部全部显成鲜红色、仅子叶远离胚芽部分少量未染色、仅子叶边缘少许未染色,为有生活力的种子。

5、结果计算及处理统计各个重复中有生活力的大豆种子数,并计算其平均值。

五、结果分析
根据生活力测定重复间的最大容许差距,得平均生活力百分比在22%的最大容许差距为16%。

其中16%>23.33%-20.00%、16%>23.33%-20.69%、16%>20.69%-20.00%。

以上均在误差允许范围内,实验数据合理。

六、注意事项:
1、四唑染色时,恒温箱内要求黑暗或弱光,因为光线可使四唑盐类还原。

2、已用过的四唑溶液不能再循环利用。

3、染色温度过高或染色时间过长,也会引起种子组织的劣变,这样可能掩
盖由于遭受冻害、热伤和本身衰弱而呈现不同颜色或异常的情况。

鉴定结
组别 果 1 2 3 4 5 6 生活力百分率%
2 6 1 0 0 0 2
3 23.33% 3 6 0 0 3 2 18 20.69%
平均值 5.67 0.67 0.33 2.33 1.00 20.00 21.00%(取整)。

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