金黄色葡萄球菌(借鉴材料)
金葡球菌实验报告
一、实验目的通过本次实验，掌握金黄色葡萄球菌的分离、培养和鉴定方法，了解其生物学特性，为临床诊断和治疗提供依据。
二、实验材料1. 实验菌株：金黄色葡萄球菌标准菌株2. 培养基：普通琼脂、血琼脂、Baird-Parker培养基、营养肉汤3. 实验仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、显微镜、移液器、试管、培养皿等4. 实验试剂：革兰氏染色液、碱性复红液、氯化钠、葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、甲基红等三、实验方法1. 菌株分离与纯化（1）将金黄色葡萄球菌标准菌株接种于营养肉汤中，37℃培养24小时。
（2）取培养好的肉汤，用无菌移液器吸取适量接种于普通琼脂平板，37℃培养24小时。
（3）挑取单菌落，接种于血琼脂平板，37℃培养24小时。
（4）挑取单菌落，接种于Baird-Parker培养基平板，37℃培养24小时。
2. 鉴定试验（1）革兰氏染色：取纯化后的金黄色葡萄球菌，进行革兰氏染色，观察菌体形态。
（2）生化试验：进行触酶实验、葡萄糖发酵实验、麦芽糖发酵实验、乳糖发酵实验、蔗糖发酵实验、甲基红反应、VP反应等，以确定金黄色葡萄球菌的生化特性。
（3）溶血试验：观察金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的溶血情况。
（4）过氧化氢酶试验：观察金黄色葡萄球菌在Baird-Parker培养基平板上的过氧化氢酶反应。
四、实验结果1. 菌株分离与纯化在普通琼脂平板、血琼脂平板和Baird-Parker培养基平板上均分离出金黄色葡萄球菌，菌落呈圆形、凸起、表面光滑、湿润、不透明，产生黄色脂溶性色素。
2. 革兰氏染色金黄色葡萄球菌革兰氏染色阳性，呈球形，排列成葡萄串状。
3. 生化试验金黄色葡萄球菌触酶实验阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、产酸不产气，甲基红反应阳性，VP反应阴性。
4. 溶血试验金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上产生溶血环。
5. 过氧化氢酶试验金黄色葡萄球菌在Baird-Parker培养基平板上产生黑色沉淀。
五、实验结论根据实验结果，分离出的金黄色葡萄球菌符合金黄色葡萄球菌的生物学特性，可以确认为金黄色葡萄球菌。
金色葡萄球菌介绍及图片
金色葡萄球菌介绍及图片简介金色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus Rosenbach) 是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属（Staphylococcus），可引起多种严重感染。
有“嗜肉菌"的别称。
菌类介绍细菌按形态可分为:球菌,杆菌,和螺旋菌.金黄色葡萄球菌就是球菌的一种.它是革兰氏阳性菌的代表.革兰氏阳性菌就是可以被结晶紫初染,碘液媒染,乙醇处理,沙黄(红色)复染后呈现紫红色的细菌.而革兰氏阴性菌则呈现红色.这些差别源于金黄色葡萄球菌细胞壁的组成和结构不同.金黄色葡萄球菌细胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸.其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密,造成了不同的染色结果.金黄色葡萄球菌与青霉素的发现有很大的渊源.当年弗莱明就是在他的金黄色葡萄球菌的培养皿中发现有些球菌被杀死了,于是发现了青霉素.而研究也表明青霉素只对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌作用明显.这也是由肽聚糖层的厚度和结构造成的。
生物学特性典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4,干燥环境下可存活数周。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1~2mm。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl肉汤中生长。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。
甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
感染与致病机理金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。
金黄色葡萄球菌实训报告
一、实验目的1. 熟悉金黄色葡萄球菌的基本生物学特性。
2. 掌握金黄色葡萄球菌的分离、纯化及鉴定方法。
3. 了解金黄色葡萄球菌的致病性及防治措施。
二、实验原理金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一种革兰氏阳性球菌，广泛存在于自然界和人类及动物体内。
该菌具有高度的致病性，可引起多种化脓性感染，如肺炎、败血症、心内膜炎等。
实验中，通过观察金黄色葡萄球菌的形态特征、生化反应和药物敏感性，实现对金黄色葡萄球菌的鉴定。
三、实验材料1. 金黄色葡萄球菌菌种：购自某生物技术公司。
2. 实验器材：显微镜、无菌操作台、接种环、接种针、无菌培养皿、营养琼脂、血液琼脂、药敏纸片、生理盐水、75%酒精、碘酒、显微镜油镜等。
3. 实验试剂：青霉素、红霉素、万古霉素、庆大霉素等药敏纸片。
四、实验方法1. 金黄色葡萄球菌的分离与纯化（1）接种：将金黄色葡萄球菌菌种接种于营养琼脂平板，37℃恒温培养24小时。
（2）挑取单菌落：用接种环挑取生长良好的单菌落，接种于新的营养琼脂平板，37℃恒温培养24小时。
（3）重复挑取：继续挑取单菌落，直至获得纯化后的金黄色葡萄球菌。
2. 金黄色葡萄球菌的形态特征观察（1）革兰氏染色：将纯化后的金黄色葡萄球菌涂片，进行革兰氏染色，显微镜下观察。
（2）菌落观察：将纯化后的金黄色葡萄球菌接种于营养琼脂平板，37℃恒温培养24小时，观察菌落形态。
3. 金黄色葡萄球菌的生化反应鉴定（1）糖发酵实验：将纯化后的金黄色葡萄球菌接种于糖发酵培养基，37℃恒温培养24小时，观察是否产生气泡。
（2）氧化酶实验：将纯化后的金黄色葡萄球菌接种于氧化酶培养基，37℃恒温培养24小时，观察是否产生颜色变化。
4. 金黄色葡萄球菌的药物敏感性实验（1）药敏纸片法：将纯化后的金黄色葡萄球菌接种于营养琼脂平板，将药敏纸片贴于平板表面，37℃恒温培养24小时，观察抑菌圈的大小。
（2）最低抑菌浓度（MIC）测定：将纯化后的金黄色葡萄球菌接种于微量肉汤稀释法培养基，分别加入不同浓度的药物，37℃恒温培养24小时，观察生长情况，确定最低抑菌浓度。
金黄色葡萄球菌(牛肉膏蛋白胨培养基)
金黄色葡萄球菌（牛肉膏蛋白胨培养基）一、生物学特性典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8 ^m左右，显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37。
C，最适生长pH7.4。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15% NaCI肉汤中生长。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。
甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素, 还原硝酸盐，液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
二•流行病学金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。
因而，食品受其污染的机会很多。
近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。
金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占4 5% ,我国每年发生的此类中毒事件也非常多。
金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点：季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。
此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。
上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83% ,所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。
一般说，金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品：食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污染。
肠毒素形成条件：存放温度，在37°C内，温度越高，产毒时间越短；存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素；食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。
金黄色葡萄球菌检测实验报告
金黄色葡萄球菌检测实验报告一、实验目的金黄色葡萄球菌是一种常见的病原菌，能够引起多种感染性疾病。
本次实验的目的是通过一系列的检测方法，准确检测出样本中是否存在金黄色葡萄球菌，并确定其数量和特性，为食品安全、临床诊断和环境卫生等领域提供可靠的检测依据。
二、实验原理金黄色葡萄球菌具有一些独特的生物学特性和生化反应，可通过以下几种方法进行检测：1、血浆凝固酶试验：金黄色葡萄球菌能够产生血浆凝固酶，使血浆发生凝固。
2、甘露醇发酵试验：金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇产酸。
3、革兰氏染色：金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，呈葡萄串状排列。
三、实验材料1、样本：食品样本（如乳制品、肉类）、临床样本（如脓液、血液）等。
2、培养基和试剂：血琼脂平板甘露醇氯化钠琼脂培养基兔血浆革兰氏染色液生理盐水3、仪器设备：恒温培养箱显微镜无菌接种环、移液管等四、实验步骤1、样本处理食品样本：称取一定量的样品，加入适量生理盐水进行均质处理，制成稀释液。
临床样本：直接进行涂片或适当稀释。
2、增菌培养将处理后的样本接种于 75%氯化钠肉汤中，置于 36±1℃恒温培养箱中培养 18 24 小时。
3、分离培养从增菌培养物中分别划线接种于血琼脂平板和甘露醇氯化钠琼脂培养基上，于 36±1℃培养 18 24 小时。
4、形态观察观察血琼脂平板上的菌落形态，金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色，周围有明显的透明溶血圈。
观察甘露醇氯化钠琼脂培养基上的菌落，金黄色葡萄球菌能使培养基变黄。
5、革兰氏染色挑取可疑菌落进行革兰氏染色，在显微镜下观察，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，呈葡萄串状排列。
6、血浆凝固酶试验取兔血浆与可疑菌落混合，置于 36±1℃培养箱中观察，若血浆发生凝固，则为阳性。
7、甘露醇发酵试验接种可疑菌落于甘露醇氯化钠琼脂培养基中，观察是否产酸。
五、实验结果1、形态观察在血琼脂平板上观察到金黄色、周围有透明溶血圈的菌落。
在甘露醇氯化钠琼脂培养基上观察到变黄的菌落。
金黄色葡萄球菌β溶血素的探究论文
金黄色葡萄球菌β-溶血素的探究论文金黄色葡萄球菌β-溶血素的探究论文金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus，金葡菌)是一种自然界中广泛存在的革兰阳性菌，可引起人和动物的局部化脓性感染、肺炎、伪膜性肠炎、心包炎以及败血症、脓毒败血症等，同时也是造成人类食物中毒的常见致病菌之一。
金葡菌主要通过产生多种致病因子而致病，这些致病因子包括溶血素、杀白细胞素、肠毒素、凝固酶、耐热核酸酶等。
溶血素(hemolysins)，又称细胞溶素(cytolysin)，是由细菌分泌的能使细胞溶解的毒素，是金葡菌产生的一种重要毒力因子，包括α、β、γ、δ4种。
其中α、γ、δ又称作打孔毒素(pore-formingtoxin)，即能跨细胞膜形成孔道，允许小分子和离子通过，从而使靶细胞代谢紊乱，最终裂解细胞。
而β-溶血素作用机制与其他3种均不同，因此被称之为非打孔毒素。
β-溶血素(β-hemolysins，Hlb)，全长993bp，编码330个氨基酸，1～34位氨基酸(aa)为其信号肽，相对分子质量为35×103。
目前国内外对Hlb的研究很少。
已有研究表明，Hlb是一种鞘磷脂酶C，能特异性地水解鞘磷脂，Mg2+的存在能增强其生物活性。
且Hlb在体外具有独特的溶血活性:热冷效应(Hot-cold)溶血特性，即Hlb在37℃作用于红细胞，红细胞不易裂解，随后置于4℃红细胞则能够迅速裂解。
晶体结构表明，Hlb的第149位和287位的组氨酸(H)是其发挥生物学活性的关键性位点，将149或287位的组氨酸(H)突变为天冬酰胺(N)时，Hlb的鞘磷脂酶活性降低。
此外，Medora等还发现Hlb具有结合核酸的活性。
本研究以金葡菌NCTC-8325为模板扩增得到Hlb的全长序列，并构建了野生型Hlb蛋白的重组表达载体，利用点突变技术构建了突变体HlbH-149-N蛋白的重组表达载体，获得了Hlb及HlbH-149-N蛋白，验证其溶血活性，制备了Hlb的特异性抗体，并检测抗体的中和活性。
金黄色葡萄球菌简要资料
金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)隶属于葡萄球菌属（Staphylococcus），有“嗜肉菌"的别称。
1.1 形态与染色典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8μm左右,显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜。
革兰染色阳性,衰老或死亡后可转为阴性。
1.2 培养特性金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度35℃～37℃，在21℃～37℃产生肠毒素，其中37℃最易。
最适生长pH7.4。
pH＜6.7则不能生长和产生肠毒素。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1～2mm。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。
甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。
图1为文献中金黄色葡萄球菌在37℃下的正常生长曲线Pt曲线。
生长为正常的四个周期。
1.3 抵抗力金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
抗干燥:在干燥环境中存活数月；空气中存在，但不繁殖；耐热：在7℃～48.5℃（一说12℃～45℃）皆可生长，加热70℃1h ,80℃30min不被杀死（但也有文献显示肉制品中60℃6min，牛奶中75℃6s即可杀灭，71℃可杀灭未产生肠毒素的金黄色葡萄球菌）；，肠毒素可耐受100℃煮沸30 min，它引起食物中毒的潜伏期一般在2～4h。
耐低温:在冷冻食品中不易死亡；耐高渗：在含有50%～66%蔗糖或15%以上食盐食品中才可被抑制，能在15%NaCl和40%胆汁中生长。
模拟蟹肉中金黄色葡萄球菌的最低生长温度为3.8℃，最高生长温度为44.1℃，最适生长温度为37.5℃。
上图为6.8℃到45.2℃金黄色葡萄球菌生长速率的变化图。
供参考。
1.4 致病菌致死条件金黄色葡萄球菌对热和干燥的抵抗力较一般无芽胞细菌强。
金黄色葡萄球菌自主实验方案
金黄色葡萄球菌的分离和鉴定一、实验目的金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。
因而食品受其污染的机会很多。
近年来美国疾病控制中心报告由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位仅次于大肠杆菌。
金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的 3 3 % 加拿大则更多占到4 5 % 我国每年发生的此类中毒事件也非常多。
为控制金黄色葡萄球菌的对人的危害我们要分离出它们并研究。
二、实验原理典型的金黄色葡萄球菌为球型直径0 . 8 u m 左右显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛大多数无荚膜革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌营养要求不高在普通培养基上生长良好需氧或兼性厌氧最适生长温度3 7 ° C 最适生长p H 7 . 4 , 干燥环境下可存活数周。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起直径 1 — 2 m m。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性可在 1 0 — 1 5 % N a C l 肉汤中生长。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖产酸不产气。
甲基红反应阳性V — P 反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸水解尿素还原硝酸盐液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力对磺胺类药物敏感性低但对青霉素、红霉素等高度敏感。
对碱性染料敏感十万分之一的龙胆紫液即可抑制其生长。
三、实验材料和设备1 .培养基:牛肉膏蛋白胨培养基(13% NaCl):牛肉膏5g,蛋白胨1 0 g 氯化钠1 3 0 g 琼脂1 5 g 蒸馏水1 0 0 0 m l 1 2 1 ℃灭菌2 0 m i n 后倒平板。
肉汤培养基酵母膏5 g 蛋白胨1 0 g 氯化钠1 0 g 蒸馏水1 0 0 0 m l 1 2 1 ℃灭菌2 0 m i n 。
甲苯胺兰- D N A 平板2 . 试剂磺胺类药物、革兰氏染液3 . 仪器和设备显微镜、超净工作台、水浴锅、培养皿、锥形瓶、移液器、灭菌锅、培养箱、试管、载玻片、接菌环。
金色葡萄球菌实验报告
金色葡萄球菌实验报告1. 引言金色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一种常见的细菌，广泛存在于自然界和人体内。
它是一种革兰氏阳性细菌，通常以球状或卵圆形的形态出现。
金色葡萄球菌可以引起多种疾病，包括皮肤感染、血液感染和肺炎等。
本实验旨在研究金色葡萄球菌的生长特性和抗菌药物敏感性。
2. 材料和方法2.1 材料•金色葡萄球菌培养基•无菌琼脂平板•无菌培养皿•无菌试管•灭菌吸管•无菌移液器•紫外灯2.2 方法1.准备工作：将培养皿、试管、琼脂平板等器材进行灭菌处理，保证实验环境的无菌。
2.采集样品：使用无菌吸管，从待测样品中采集适量的金色葡萄球菌。
3.培养金色葡萄球菌：将采集的样品转移到金色葡萄球菌培养基中，轻轻摇匀，然后在无菌琼脂平板上均匀涂抹样品。
4.孵育：将涂有样品的琼脂平板置于恒温培养箱中，在37摄氏度下孵育24小时。
5.观察生长情况：观察琼脂平板上是否有金色葡萄球菌的生长，记录菌落的形态、颜色和大小等特征。
6.统计菌落数量：使用计数板或显微镜统计菌落数量，以评估金色葡萄球菌的生长情况。
7.抗菌药物敏感性测试：使用纸片扩散法或碟片扩散法，将不同种类的抗菌药物施加到含有金色葡萄球菌的琼脂平板上，观察是否形成抑制圈，评估菌株的敏感性。
3. 结果与讨论根据实验结果，我们观察到金色葡萄球菌在培养基上形成了典型的黄色菌落。
菌落呈圆形，直径约为2-4毫米，表面平整光滑。
这与金色葡萄球菌的形态特征相符合。
在抗菌药物敏感性测试中，我们使用了几种常见的抗菌药物。
结果显示，金色葡萄球菌对某些抗菌药物表现出抗性，即在药物施加区域没有形成抑制圈，而对其他抗菌药物则表现出敏感性，形成了明显的抑制圈。
这表明金色葡萄球菌对不同抗菌药物的敏感性存在差异。
4. 结论通过本实验，我们成功培养了金色葡萄球菌，并观察到了其典型的生长特征。
同时，通过抗菌药物敏感性测试，我们发现金色葡萄球菌对不同抗菌药物表现出不同的敏感性。
实验金黄色葡萄球菌的检验
实验5 金黄色葡萄球菌的检验1 目的和要求（1）掌握金黄色葡萄球菌的检验方法（2）了解金黄色葡萄球菌各检验步骤的依据及原理2 基本原理金黄色葡萄球菌进入人体内，可引起局部的痈疾和蜂窝组织炎，还可以引起肺炎、心肌炎、骨骼炎、肾盂肾炎等系统化脓性感染，甚至可发展成败血症。
此外，食品中生长金黄色葡萄球菌是食品卫生中的一种潜在危险，因为金黄色葡萄球菌在是中会产生肠毒素，食用后将引起食物中毒，这在我国细菌性食物中毒事件中，仅次于沙门氏菌和副溶血弧菌。
因此，检验食品中金黄色葡萄球菌是实际意义。
绝大多数金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上产生金黄色色素，菌落周围有透明的溶血圈，在厌氧条件下能分解甘露醇产酸，产生血浆凝固酶和耐热的DNA酶。
3 实验材料3.1 检样乳与乳制品（如奶粉、消毒乳）、肉制品、饮料3.2 菌种金黄色葡萄球菌、藤黄八叠球菌斜面培养物。
3.3 培养基 7.5%氯化钠肉汤、肉浸液肉汤、血琼脂平板、Baird-Parker氏培养基3.4 试剂与染色剂无菌生理盐水、兔血浆、革兰氏染色液等。
3.5 仪器与其他用具无菌吸管（1mL、5、10）、无菌试管、载玻片、接种环、酒精灯、显微镜、均质器、恒温箱等。
4 检样程序5 操作步骤5.15.1.1样品的处理称取 25 g 样品至盛有 225 mL 7.5 %氯化钠肉汤或 10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌均质杯内，8000 r/min～10000 r/min 均质 1 min～2 min，或放入盛有 225 mL 7.5 %氯化钠肉汤或 10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打 1 min～2 min。
若样品为液态，吸取 25 mL 样品至盛有225 mL 7.5 %氯化钠肉汤或 10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌锥形瓶(瓶内可预置适当数量的无菌玻璃珠)中，振荡混匀。
5.1.2 增菌和分离培养5.1.2.1 将上述样品匀液于 36 ℃±1 ℃培养 18 h～24 h。
金黄色葡萄球菌
⾦黄⾊葡萄球菌⾦黄⾊葡萄球菌⽣物学性状1、形态与染⾊⾰兰阳性，球形，呈葡萄串状排列。
⽆芽孢、⽆鞭⽑，体外培养时⼀般不形成荚膜，少数菌株的细胞壁外层可见有荚膜样黏液物质。
在某些化学物质（如青霉素）作⽤下，可裂解或变成L型。
2、培养特性需氧或兼性厌氧。
营养要求不⾼，在普通培养基中，37℃⽣长良好。
属内不同菌种可产⽣⾦黄⾊、⽩⾊或柠檬⾊等不同颜⾊的脂溶性⾊素并使菌落着⾊。
致病性葡萄球菌菌落呈⾦黄⾊，于⾎琼脂平板上⽣长后，在菌落周围还可见完全透明溶⾎环（β溶⾎环）。
3、⽣化反应多数菌株能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产⽓。
致病性菌株能分解⽢露醇，产酸。
触酶阳性，可与链球菌相区分。
4、抗原种类多，结构复杂，以葡萄球菌A蛋⽩较为重要。
（1）葡萄球菌A蛋⽩（SPA）：90%以上⾦黄⾊葡萄球菌细胞壁表⾯存在SPA 蛋⽩。
在体内，SPA与IgG结合后所形成的复合物还具有抗吞噬、促细胞分裂、引起超敏反应、损伤⾎⼩板等多种⽣物活性。
（2）荚膜多糖：利于细菌黏附道细胞或⽣物合成材料表⾯（如⽣物性瓣膜、导管、⼈⼯关节等）。
（3）多糖抗原：具有群特异性，存在于细胞壁。
⾦黄⾊葡萄球菌中可提出A 群的多种抗原，其化学组成为磷壁酸中的N-⼄酰葡糖胺核糖醇残基。
5、分类（1）按⾊素、⽣化反应等表型分类，分为⾦黄⾊葡萄球菌、表⽪葡萄球菌、腐⽣葡萄球菌三类。
（2）根据有⽆凝固酶分型：可分为凝固酶阳性菌株和凝固酶阴性菌株。
6、抵抗⼒葡萄球菌对外界理化因素的抵抗⼒较强。
在⼲燥的脓汁或痰液中科存活2～3个⽉；加热60℃1⼩时或80℃30分钟才能将其杀死；耐盐，于100～150g/LNaCl 培养基中仍能繁殖。
对青霉素、⾦霉素、红霉素和庆⼤霉素⾼度敏感，对链霉素中度敏感，对磺胺、氯霉素敏感性差。
该菌易产⽣耐药性，对青霉素G的耐药菌株已达90%以上，尤其是耐甲氧西林⾦黄⾊葡萄球菌（MRSA），已成为医院感染最常见的致病菌。
耐药性的产⽣机制与细菌的质粒或与细菌细胞壁成分改变和合成的量有关。
实验三 食品中金黄色葡萄球菌的检验
2、直接计数方法
2.1 梯度稀释转种BP平板
吸取上述1：10混悬液，进行10倍第次稀释， 根据样品污染情况，选择不同浓度的稀释液1mL， 分别加入三块BP平板，每个平板接种量分别为 0.3mL、0.3mL、0.4mL，然后用灭菌涂布器涂布 整个平板，如水分多不易吸收，可将平板放在 36℃±1℃1h，等水分蒸发后反转平皿置 36℃±1℃培养。
数第 三 法 金 黄 色 葡 萄 球 菌
计
MPN
三法特点及适用性：
第一法适用于食品中金黄色葡萄球菌的定 性检验
第二法适用于金黄色葡萄球菌含量较高的 食品中金黄色葡萄球菌的计数 第三法适用于金黄色葡萄球菌含量较低而
杂菌含量较高的食品中金黄色葡萄球菌的 计数。
实验安排
1、实验时间： 2、分组：每3人一组 3、评分标准：见附表1
1、增菌培养法
1.1检样处理：无菌操作取样25g（mL）加入225mL灭 菌生理盐水，固体样品研磨或均质制成混悬液。
1.2增菌及分离培养：吸取5mL上述混悬液，接种于 7.5%氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤50mL培养基内， 36℃±1℃培养24h，转种血平板和BP平板， 36℃±1℃培养24h，挑取血平板上金黄色（有时 为白色）菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶 实验。
金黄色葡萄球菌简介
金黄色葡萄球菌【微生物特征】金黄色葡萄球（Staphylococcus aureus）菌隶属于萄球菌属，为凝固酶阳性葡萄球菌，革兰染色阳性，呈单、双、短链或不规则葡萄串样排列（图1A，XXX倍下电镜照片）。
在血琼脂平板上菌落通常呈金黄色（图1B，37℃条件下平板培养几天），周围有明显的β溶血环（图1C）。
C图1. 金黄色葡萄球菌图1-1-1 A: 金黄色葡萄球菌。
B：血琼脂平板培养菌落照片；C：血琼脂平板培养菌落的β溶血环【临床意义】金黄色葡萄球菌主要寄生在人鼻腔，尤其是鼻前庭后部，是一种重要的机会性病原菌，其引起的人类疾病主要包括化脓性和毒素性两种类型：1.化脓性感染以脓肿形成为主，多数发生在皮肤组织，可表现为毛囊炎、疖、痈、伤口化脓以及脓肿等。
也可以引起深部脏器的脓肿或化脓性感染，如气管炎、肺炎、脓胸、中耳炎、骨髓炎等。
若皮肤原发化脓灶受到外力挤压或机体抵抗力下降，则会引起败血症，脓毒血症等；2.金黄色葡萄球菌产生外毒素可引起人体毒素性疾病。
如果摄入产生肠毒素的金黄色葡萄球菌污染的食物后，可造成急性胃肠炎的症状，即食物中毒。
其他还可引起烫伤样皮肤综合征以及毒性休克综合征，若不及时治疗病死率均较高。
【常见感染部位】皮肤、软组织、骨骼肌肉系统等。
【药物敏感性】“CHINET中国细菌耐药监测网”2021数据显示：甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的检出率为30%，该菌对青霉素、左氧氟沙星、克林霉素的耐药率为92.2%、14.2% 和32.6%，未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的金黄色葡萄球菌。
【主要耐药机制】耐甲氧西林金黄色葡萄球（MRSA），因其获得mecA基因或其它同系物，编码青霉素结合蛋白（PBP）、形成PBP2a，降低β-内酰胺抗生素活性，表现出对所有β-内酰胺类药物包括青霉素类、碳青霉烯类和头孢菌素类（除外具有抗MRSA活性的第五代头孢菌素如头孢罗膦）耐药。
【临床治疗】1.葡萄球菌的治疗包括迅速予以抗菌治疗和控制感染源，如去除与感染有关的血管导管和在有脓肿时行手术引流等操作；2.甲氧西林(苯唑西林)敏感葡萄球菌认为对下列抗菌药物也敏感：（1）β-内酰胺合剂(阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦)；（2）口服头孢烯类(头孢克洛、头孢地尼、头孢氨苄、头孢泊肟、头孢丙烯、头孢呋辛、氯碳头孢)；（3）注射头孢烯类包括一、二、三和四代头孢菌素类(头孢孟多、头孢唑林、头孢吡肟、头孢美唑、头孢尼西、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢替坦、头孢唑肟、头孢曲松、头孢呋辛、头孢罗膦、拉氧头孢)；（4）碳青霉烯类(多立培南、厄他培南、亚胺培南、美罗培南)；3.除头孢罗膦外，甲氧西林(苯唑西林)耐药金黄色葡萄球菌对目前所有β-内酰胺类药物耐药，其所致感染的治疗首选万古霉素，次选治疗药物包括替考拉宁、利奈唑胺、达托霉索、特拉万星，头孢罗膦等。
金黄色葡萄球菌-综述
金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 (Staphyloccocus aureus Rosenbach) 是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属（Staphylococcus），有“嗜肉菌"的别称，是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多严重感染。
而对于金黄色葡萄球菌在速冻食品中的存在量，卫生部于2011年11月24日公布食品安全国家标准《速冻面米制品》，允许金葡菌限量存在。
[简介]金黄色葡萄球菌细胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸。
其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密，染色时结晶紫附着后不被酒精脱色故而呈现紫色，相反，阴性菌没有细胞壁结构，所以紫色被酒精冲掉然后附着了沙黄的红色。
金黄色葡萄球菌与青霉素的发现有很大的渊源。
当年弗莱明就是在他的金黄色葡萄球菌的培养皿中发现有些球菌被杀死了，于是发现了青霉素。
而研究也表明青霉素只对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌作用明显。
这也是由肽聚糖层的厚度和结构造成的。
新出现的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，被称作超级细菌，几乎能抵抗人类现在所有的药物，但是万古霉素可以对付它。
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。
显微图像金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH7.4,干燥环境下可存活数周。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1~2mm。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl肉汤中生长。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。
甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
对碱性染料敏感，十万分之一的龙胆紫液即可抑制其生长。
[流行病学]金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。
金黄色葡萄球菌课件
将金黄色葡萄球菌的基因编码插入载 体DNA，形成DNA疫苗，通过转染机 体细胞诱导免疫反应。
亚单位疫苗
利用金黄色葡萄球菌的表面蛋白、毒 素等抗原成分，制备亚单位疫苗，以 诱导特异性免疫反应。
治疗药物研究进展
新型抗生素
针对金黄色葡萄球菌的耐药性问 题，研究新型抗生素的作用机制 和抗菌活性，以期发现更有效的
制定和实施针对金黄色葡萄球菌防控的国家 标准和行业规范。
科研支持
加大对金黄色葡萄球菌防控研究的投入，推 动相关科研成果的转化和应用。
金黄色葡萄球菌的研究进展
基础研究进展
基因组学研究
通过对金黄色葡萄球菌基因组进 行测序和分析，揭示其致病机制 和进化历程，为抗感染治疗和疫
苗研发提供理论基础。
毒力因子研究
THANKS
感谢观看
预防措施
分析预防金黄色葡萄球菌感染的有效措施，如加 强个人卫生、食品卫生管理等。
案例启示与建 议
提高认识
强调认识金黄色葡萄球菌危害性的重要性，提高公众对食品安全 和卫生的关注度。
加强监管
提出政府和相关部门应加强对食品生产和销售环节的监管，确保食 品安全。
个人防护
提供预防金黄色葡萄球菌感染的个人防护措施，如勤洗手、避免食 用不洁食品等。
加强食品安全
遵循食品安全指南，如正确烹 饪肉类和蛋类，避免生食。
提高免疫力
保持健康的生活方式，包括均 衡饮食、适量运动和充足的睡 眠，以增强身体对疾病的抵抗力。
控制策略
01
02
03
04
及时诊断和治疗
尽早识别金黄色葡萄球菌感染 的症状，并采取适当的抗生素
治疗。
隔离措施
对确诊患者进行隔离，以防止 疾病传播。
金黄色葡萄球菌（牛肉膏蛋白胨培养基）
⾦黄⾊葡萄球菌（⽜⾁膏蛋⽩胨培养基）⾦黄⾊葡萄球菌（⽜⾁膏蛋⽩胨培养基）⼀、⽣物学特性典型的⾦黄⾊葡萄球菌为球型，直径0.8 ^m左右，显微镜下排列成葡萄串状。
⾦黄⾊葡萄球菌⽆芽胞、鞭⽑，⼤多数⽆荚膜，⾰兰⽒染⾊阳性。
⾦黄⾊葡萄球菌营养要求不⾼，在普通培养基上⽣长良好，需氧或兼性厌氧，最适⽣长温度37。
C，最适⽣长pH7.4。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。
⾎平板菌落周围形成透明的溶⾎环。
⾦黄⾊葡萄球菌有⾼度的耐盐性，可在10-15% NaCI⾁汤中⽣长。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产⽓。
甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，⽔解尿素, 还原硝酸盐，液化明胶。
⾦黄⾊葡萄球菌具有较强的抵抗⼒，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等⾼度敏感。
⼆?流⾏病学⾦黄⾊葡萄球菌在⾃然界中⽆处不在，空⽓、⽔、灰尘及⼈和动物的排泄物中都可找到。
因⽽，⾷品受其污染的机会很多。
近年来，美国疾病控制中⼼报告，由⾦黄⾊葡萄球菌引起的感染占第⼆位，仅次于⼤肠杆菌。
⾦黄⾊葡萄球菌肠毒素是个世界性卫⽣问题，在美国由⾦黄⾊葡萄球菌肠毒素引起的⾷物中毒占整个细菌性⾷物中毒的33%，加拿⼤则更多，占4 5% ,我国每年发⽣的此类中毒事件也⾮常多。
⾦黄⾊葡萄球菌的流⾏病学⼀般有如下特点：季节分布，多见于春夏季；中毒⾷品种类多，如奶、⾁、蛋、鱼及其制品。
此外，剩饭、油煎蛋、糯⽶糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。
上呼吸道感染患者⿐腔带菌率83% ,所以⼈畜化脓性感染部位常成为污染源。
⼀般说，⾦黄⾊葡萄球菌可通过以下途径污染⾷品：⾷品加⼯⼈员、炊事员或销售⼈员带菌，造成⾷品污染；⾷品在加⼯前本⾝带菌，或在加⼯过程中受到了污染，产⽣了肠毒素，引起⾷物中毒；熟⾷制品包装不严，运输过程受到污染；奶⽜患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对⾁体其他部位的污染。
肠毒素形成条件：存放温度，在37°C内，温度越⾼，产毒时间越短；存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素；⾷物种类，含蛋⽩质丰富，⽔分多，同时含⼀定量淀粉的⾷物，肠毒素易⽣成。
食品安全之金葡菌
金黄色葡萄球菌是人类一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属，是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多严重感染。
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH7.4，干燥环境下可存活数周。
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性。
，可在10-15%NaCl肉汤中生长。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对外界因素的抵抗力强于其他无芽孢细菌。
对磺胺类药物、青霉素、红霉素、土霉素、新霉素等抗生素敏感，但易产生耐药性，特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌已经成为医院内感染最常见的致病菌。
金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。
健康人的咽喉、鼻腔、皮肤、头发等常带有产肠毒素的菌株。
故易于经手或空气污染食品。
因此，食品受到污染的机会很多，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。
在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒，占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占到45%，金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点：季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。
此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染。
上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位，常成为污染源。
而葡萄球菌产生的肠毒素能够引起急性胃肠炎即食物中毒。
肠毒素（外毒素）是一种蛋白质，已知有A～E五种抗原型，A型的毒力最强，食物中毒多由此型所致。
该肠毒素耐热性强，在食品中一般烹调方法不能破坏，须经100℃2小时方可破坏。
在进食含葡萄球菌肠毒素食物后1-6小时出现症状，先有恶心、呕吐、上腹疼痛，继以腹泻。
呕吐症状最为突出。
大多数病人在1-2天内恢复。
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立。
金黄色葡萄球菌实验报告doc
金黄色葡萄球菌实验报告篇一：微生物实验报告细菌微生物实验报告题目年级专业实验者学号小组成员指导老师一、实验目的脓汁和粪便标本中病原菌的检测 XX 级临床医学八年制1.了解细菌生长的基本营养条件，熟悉培养基的类型，学习并掌握培养基的原则与方法。
2.掌握无菌操作技术，掌握病原菌的分离与培养方法。
3.了解并比较细菌在固体、半固体和液体培养基的生长特征。
4.学习并掌握空气及人体细菌检测学方法。
5.掌握细菌涂片标本的制备以及革兰染色法，熟悉不同类型细菌的基本形态。
6.掌握糖发酵实验、抗菌素敏感性实验和血浆凝固酶实验的原理与方法。
7.从脓汁和粪便标本中分离培养和检测出病原体。
二、实验器材1.培养基的制备：干粉培养基、天平、蒸馏水、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、电炉、试管、洗耳球、试管筐、移液管、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、手套、石棉网2.空气与人体体表细菌学检查：琼脂培养基、酒精、碘酒3.细菌的分离培养：脓汁标本、粪便标本、伊红美蓝平板、营养琼脂平板、接种环、酒精灯、打火机4.细菌的纯培养：接种环、酒精灯、打火机、中性笔、斜面培养基5.细菌的形态学检测：斜面培养物、营养肉汤、生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、显微镜、接种环、酒精灯、打火机、中性笔、革兰染色试剂、液体培养基6.细菌的生化试验：葡萄糖发酵管、乳糖发酵管、接种针、酒精灯、打火机、中性笔、菌液、营养琼脂平板、接种环、药物纸片（青霉素、庆大霉素、头孢曲松）、玻片、兔血浆、生理盐水7.细菌的血清学试验：玻片、福氏志贺菌诊断血清、生理盐水、接种环、酒精灯三、实验方法与步骤1.培养基的制备称量琼脂粉→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里→罩上硫酸纸、牛皮纸→用橡皮筋扎好→放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到高压蒸汽灭菌室（洗刷室）→灭菌2.空气与人体体表细菌学检查2.1空气的细菌学检查每组1个营养琼脂平板，选择实验楼女厕所→将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁边→平板暴露于空气中15分钟→平板倒扣盖上→作标记→37℃温箱培养24小时→观察结果。
金黄色葡萄球菌计算案例
金黄色葡萄球菌计算案例201 6 病例讨论微微生生物物实实验验病例简介初步诊断初步诊断二.临床特征表现初步诊断:细菌起的化脓性感染。
实验检测取伤口脓汁取伤口脓汁革兰染色,可见葡萄球菌,但不能区革兰染色,可见葡萄球菌,但不能区别是否致病别是否致病标本染色镜检分离培养与鉴定将标本接种于血平板, 37 ℃培养 18h 。
选择典型菌落做血浆凝固酶试验,甘露醇发酵试验。
致病性葡萄球菌特点:产生金黄色色素, 有溶血性,血浆凝固酶阳性,可发酵甘露醇。
实验检测结果 1.菌落特点:菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径 0.5~1.0mm 。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
2.血浆凝固酶试验和血溶现象: 血浆凝固酶试验和血溶现象: 血液凝固阳性, 血液凝固阳性, 产生溶血环产生溶血环, , 甘露醇发酵产酸。
甘露醇发酵产酸。
3 3. .实验确诊: 实验确诊: 病原体为金黄色病原体为金黄色葡萄球菌葡萄球菌。
菌落在培养基生长情况致病物质与相关疾病? 1)凝固酶(Coagulase )是能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质。
分为游离和结合两种,与菌体逃避免疫,血栓形成有关。
? 2)溶血素( Staphyolysin )致病性葡萄球菌产生溶血。
重要致病物质,减毒后可做疫苗接种。
? 3)杀白细胞素(Leukocidin )含 F和S两种蛋白质,能杀死人和兔的多形核粒细胞和巨噬细胞。
此***有抗原性,不耐热,产生的抗体能阻止葡萄球菌感染的复发。
致病物质与相关疾病?4) 肠***( Enterotoxin )是引起食物中毒的致病物质,是一种蛋白质,耐热,对蛋白酶耐受, 可使人呕吐和腹泻,还是一种超抗原。
?5)毒性休克综合***Ⅰ:系噬菌体Ⅰ群金黄色葡萄球菌产生。
可引起发热,增加对内***的敏感性。
增强毛细血管通透性,引起必血管紊乱而导致休克。
?6)耐热核酸酶,对 DAN 或RNA 有较强的降解能力, 有抗原性。
败血症脓毒血症中毒性休克综合征引起的全身感染感染类型食物中毒烫伤样皮肤综合征引起的全身感染。
饮料金黄色葡萄球菌的检验酶试验法(参照模板)
FSPYL030 饮料金黄色葡萄球菌的检验 酶试验法 F_SP＿YL＿030饮料—金黄色葡萄球菌的检验—酶试验法 1 范围本方法适用于饮料中金黄色葡萄球菌的检验。
2 原理饮料样品处理后，经增菌及分离，采用血浆凝固酶试验判定结果并计数。
3 试剂3.1胰酪胨大豆肉汤3.1.1 成分胰酪胨(或胰蛋白胨) 17g植物蛋白胨(或大豆蛋白胨) 3g氯化钠100g磷酸氢二钾 2.5g葡萄糖 2.5g蒸馏水1000mL3.1.2 制法将上述成分混合，加热并轻轻搅拌至完全溶解，分装后，于121℃下高压灭菌15min，溶液的最终pH为7.3±0.2。
3.2 7.5%氯化钠肉汤3.2.1 成分蛋白胨 10g牛肉膏 3g氯化钠 75g蒸馏水 1000mL3.2.2 制法将上述成分加热溶解，校正pH为7.4，分装试管，于121℃下高压灭菌15min。
3.3 血琼脂平板3.3.1 成分pH 7.4～7.6豆粉琼脂 100mL脱纤维羊血(或兔血) 5～10mL3.3.2 制法加热溶化琼脂，冷至50℃，以灭菌手续加入脱纤维羊血，混匀，倾注平板。
亦可分装灭菌试管，置成斜面。
亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂。
3.4 Baird-Parker琼脂平板3.4.1 成分胰蛋白胨 10g牛肉膏 5g酵母膏 1g丙酮酸钠 10g甘氨酸 12g氯化锂(LiCl・6H2O) 5g琼脂 20g蒸馏水 950mL3.4.2 增菌剂的配法30%卵黄盐水50mL与除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10mL混合，保存于冰箱内。
3.4.3 制法将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解。
冷至25℃，校正pH为7.5。
分装每瓶95mL，于121℃下高压灭菌15min。
临用时加热溶化琼脂，冷至50℃，每95mL加入预热至50℃的卵黄亚碲酸钾增菌剂5mL，混匀后倾注平板。
培养基应是致密不透明的。
使用前在冰箱储存不得超过48h。
3.5 肉浸液肉汤3.5.1 成分绞碎牛肉 500g氯化钠 5g蛋白胨 10g磷酸氢二钾 2g蒸馏水 1 000mL3.5.2 制法将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水1000mL，混合后放冰箱过夜，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。
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金黄色葡萄球菌
简介：金黄色葡萄球菌，也称“金葡菌”，细胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸。
其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密，染色时结晶紫附着后不被酒精脱色故而呈现紫色，相反，阴性菌的细胞壁肽聚糖层薄、交联度差，脂类含量高，所以紫色复合物被酒精冲掉然后附着了沙黄的红色。
金黄色葡萄球菌与青霉素的发现有很大的渊源。
研究表明青霉素只对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌作用明显。
这也是由肽聚糖层的厚度和结构造成的。
新出现的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，被称作超级细菌，几乎能抵抗人类所有的药物，但是万古霉素可以对付它。
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH7.4，干燥环境下可存活数周。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径0.5~1.0mm。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl肉汤中生长。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。
甲基红反应阳性，VP 反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物、
青霉素、红霉素、土霉素、新霉素等抗生素敏感，但易产生耐药性，原因是由于这些菌株产生青霉素酶等。
对碱性染料敏感，十万分之一的龙胆紫液即可抑制生长。
流行病学
金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。
因此，食品受到污染的机会很多。
美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。
金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点：季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。
此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。
上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位，常成为污染源。
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。
金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶：
a.溶血毒素：外毒素，分α、β、γ、δ四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死
b.杀死白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞
c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。
葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关
d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌
e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C1、C2、C3、D、E及F八种血清型。
肠毒素可耐受100°C煮沸30分钟而不被破坏。
它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。
此外，金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。
f .表皮剥脱毒素：引起烫伤样皮肤综合征，又称剥脱样皮炎。
g.毒性休克综合征毒素（tsst-1）
引发病症
金黄色葡萄球菌肠炎是金黄色葡萄球菌引起的，多因原发疾病长期用抗生素引起肠道菌群失调所致，抗生素敏感菌株受到抑制，耐药的金黄色葡萄球菌株趁机繁殖。
金黄色葡萄球菌为侵袭性细菌，能产生毒素，对肠道破坏性大，所以金黄色葡萄球菌肠炎起病急，中毒症状严重，主要表现为呕吐、发热、腹泻。
呕吐常在发热前出现，发热很高。
轻症大便次数稍多，为黄绿色糊状。