单克隆抗体技术讲解PPT课件.pdf
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单克隆抗体PPT课件
单克隆抗体的应用领域
01
02
03
04
基础研究
用于研究生物分子结构和功能 ，探索生命现象的本质。
诊断
用于检测生物样本中的抗原、 抗体、激素等生物分子，用于
疾病的诊断和监测。
治疗
用于治疗肿瘤、自身免疫性疾 病、感染性疾病等，通过与靶 分子结合，发挥治疗作用。
免疫学检测
用于检测食品、环境、生物武 器等中的有害物质和病原微生
高特异性
总结词
单克隆抗体具有极高的特异性，能够精确地识别和结合特定的抗原，几乎不会 与其它物质发生交叉反应。
详细描述
单克隆抗体的特异性表现在它能够精确地识别和结合细胞、蛋白质、病毒等抗 原的特定表位，这种结合具有高度的选择性，避免了与其他物质的交叉反应， 提高了检测和治疗的准确性。
高灵敏度
总结词
单克隆抗体可以用于鉴别血型、 检测血红蛋白病和白细胞表面抗 原，有助于血液疾病的诊断和治 疗。
生物标记与示踪研究
1 2
细胞分型
利用单克隆抗体标记不同细胞表面抗原，对细胞 进行分型和鉴定，有助于研究细胞发育、分化及 功能。
示踪研究
将单克隆抗体与荧光、放射性同位素等标记物结 合，追踪生物体内的物质分布、代谢和排泄过程。
良好的重复性
总结词
单克隆抗体的生产和制备具有高度的一致性和重复性，保证了产品质量和实验结果的可靠性。
详细描述
通过采用适当的细胞培养技术，可以在实验室条件下实现单克隆抗体的规模化生产和制备。由于单克 隆抗体的克隆来源单一，其生产和制备过程具有高度的一致性和重复性，这使得单克隆抗体的质量稳 定可靠，实验结果的可重复性强。
提高单克隆抗体的生产效率与质量
优化细胞培养条件
《单克隆抗体技术》课件
单克隆抗体的制备与纯化
单克隆抗体是通过杂交瘤细胞在体外培养或注射到动物体内进行体内培养产生的，经过一系列的分离 和纯化过程，最终获得高纯度、高特异性的单克隆抗体。
制备过程中通常采用各种层析技术、沉淀技术等对抗体进行分离和纯化，以确保获得高质量的单克隆 抗体。
单克隆抗体的鉴定与质量控制
鉴定是通过对单克隆抗体的免疫学特 性、生物学活性和分子结构等方面进 行检测和评估，以确定其特异性和质 量。
总结实验过程和结果，分析存在的问题和改 进方向，为后续实验提供参考和依据。
感谢您的观看
THANKS
生物标记物
用于研究细胞生物学、分子生物学 等领域。
03
02
生物药物
用于治疗肿瘤、自身免疫性疾病等 。
免疫分析
用于检测生物样品中的抗原、抗体 等。
04
02 单克隆抗体技术的原理
杂交瘤细胞系的建立
杂交瘤细胞系的建立是单克隆抗体技 术的核心步骤之一，通过将免疫脾细 胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细 胞。
通过抗原-抗体反应检测杂交瘤细胞产生的 抗体特异性。
克隆筛选
通过选择性培养基筛选出能够产生所需抗体 的杂交瘤细胞克隆。
细胞培养与抗体纯化
将筛选出的杂交瘤细胞进行培养，并采用蛋 白质纯化技术获得单克隆抗体。
实验结果分析与总结
结果分析
对实验结果进行统计分析，评估杂交瘤细胞 的抗体产生能力和特异性。
总结
这些杂交瘤细胞既具有脾细胞无限增 殖的能力，又具有产生特异性抗体的 能力，从而为单克隆抗体的制备提供 了稳定的细胞源。
杂交瘤细胞的筛选与克隆化
在筛选过程中，通过抗原-抗体反应检 测杂交瘤细胞产生的抗体，筛选出能 够产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞 。
《单克隆抗体》课件
05
单克隆抗体的未来发展
新型单克隆抗体的研发
总结词
随着生物技术的不断发展，新型单克 隆抗体的研发将更加活跃，以满足更 多治疗需求。
详细描述
新型单克隆抗体将通过基因工程技术 、蛋白质工程技术等手段进行设计和 优化，以改善其疗效、降低副作用和 降低生产成本。
单克隆抗体与其他技术的结合应用
总结词
单克隆抗体将与其他治疗手段和技术相结合，以实现更有效的疾病治疗和诊断 。
03
类型
IgG、IgM、IgA等。
单克隆抗体的发现和发展历程
1901年
Ehrlich提出“侧链学说”，认为抗体是 由细胞产生的化学物质。
1986年
FDA批准第一个单克隆抗体药物上市， 用于治疗非霍奇金淋巴瘤。
1975年
Kohler和Milstein首次成功制备出单克隆 抗体。
2014年
FDA批准第一个全人源单克隆抗体药物 上市，用于治疗类风湿性关节炎。
生物治疗
总结词
单克隆抗体在生物治疗中具有显著疗效 ，可用于治疗癌症、自身免疫病等多种 疾病。
VS
详细描述
通过靶向肿瘤细胞表面抗原或免疫系统中 的特定分子，单克隆抗体能够发挥抗癌作 用。例如，针对某些癌症的单克隆抗体药 物能够抑制肿瘤生长、扩散和转移，提高 患者生存率和生活质量。此外，在自身免 疫病治疗中，单克隆抗体也具有良好疗效 ，能够调节免疫系统，缓解单克隆抗体的概述 • 单克隆抗体的制备 • 单克隆抗体的特性 • 单克隆抗体的应用实例 • 单克隆抗体的未来发展
01
单克隆抗体的概述
单克隆抗体的定义
01
单克隆抗体
由单一B细胞克隆产生的具有 高度特异性识别抗原表位的抗
(培训课件)单克隆抗体PPT幻灯片
• 种类：氢氧化铝佐剂、短小棒状杆菌、脂多 糖、细胞因子、明矾等，其中弗氏不完全佐 剂（羊毛脂：石蜡油=1:5）和弗氏完全佐剂 （弗氏不完全佐剂＋灭活的分枝结核杆菌） 是目前动物实验中最常用佐剂。
4
• 抗体：机体免疫细胞被激活后，由分化成熟的 B淋巴细胞-浆细胞合成、分泌的免疫球蛋白。
5
6
脾脏与B淋巴细胞(B lymphocytes)
淀）。
18
（2）HAT培养基的筛选
融合后细胞混合液
HAT培养基
2 weeks later
HT培养基
1 week later
正常培养基
19
HAT培养基筛选
H, 次黄嘌呤; A, 氨基喋呤; T, 胸腺嘧啶
(Hypoxanthine guznine phosphoribosyl transferase)
骨髓瘤细胞 (myeloma cells)的选择原则
①克隆效应高，能在体外连续生长，倍增期短于24小时； ②缺乏HGPRT酶和TK酶； ③本身不合成Ig，且不抑制杂交瘤细胞中的Ig合成基因。 ④与小鼠淋巴细胞融合率相当高；
脾细胞的选择
由于目前常用的骨髓瘤细胞普遍来自Bal b/c小鼠，因此应尽 量选择同源的Bal b/c健康小鼠（8-12周）作为免疫动物。
死亡
20
3、阳性杂交瘤细胞的筛选（抗体的检测）
• 检测时间：杂交瘤细胞布满孔底1／10时开 始检测特异性抗体，进行筛选。
• 检测方法：最常用酶联免疫吸附法(ELISA) 间接免疫荧光法(IFA) 放射免疫法(RIA) 双相扩散法
3）离心，弃上清，加15mL HAT培养基，混匀，转入96孔 板（预先有HAT培养基培养的饲养细胞），每孔100 ul。
4
• 抗体：机体免疫细胞被激活后，由分化成熟的 B淋巴细胞-浆细胞合成、分泌的免疫球蛋白。
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6
脾脏与B淋巴细胞(B lymphocytes)
淀）。
18
（2）HAT培养基的筛选
融合后细胞混合液
HAT培养基
2 weeks later
HT培养基
1 week later
正常培养基
19
HAT培养基筛选
H, 次黄嘌呤; A, 氨基喋呤; T, 胸腺嘧啶
(Hypoxanthine guznine phosphoribosyl transferase)
骨髓瘤细胞 (myeloma cells)的选择原则
①克隆效应高，能在体外连续生长，倍增期短于24小时； ②缺乏HGPRT酶和TK酶； ③本身不合成Ig，且不抑制杂交瘤细胞中的Ig合成基因。 ④与小鼠淋巴细胞融合率相当高；
脾细胞的选择
由于目前常用的骨髓瘤细胞普遍来自Bal b/c小鼠，因此应尽 量选择同源的Bal b/c健康小鼠（8-12周）作为免疫动物。
死亡
20
3、阳性杂交瘤细胞的筛选（抗体的检测）
• 检测时间：杂交瘤细胞布满孔底1／10时开 始检测特异性抗体，进行筛选。
• 检测方法：最常用酶联免疫吸附法(ELISA) 间接免疫荧光法(IFA) 放射免疫法(RIA) 双相扩散法
3）离心，弃上清，加15mL HAT培养基，混匀，转入96孔 板（预先有HAT培养基培养的饲养细胞），每孔100 ul。
单克隆抗体技术医学PPT
可溶性抗原：多糖、药物、激素、肽类等分子量小于 5000 Da 物质。
注意：可溶性抗原需与BSA、OA等载体交联后成颗粒性抗 原才能刺激动物产生可应用的高效价的抗体。
2、免疫动物
• （1）动物选择：一般采用与骨髓瘤细胞供体来源同一品 系的动物进行免疫（如：小鼠）。由于免疫动物品系与所 采用的骨髓瘤细胞差异较远，产生的杂交瘤细胞稳定性越 差。
（2）融合技术 一种是加入融合剂后直接离心使两种细胞紧密接触
（R<3000r/min），另一种是加入融合剂后轻轻搅动融 合。
• （3）提高融合频率的可能途径
•
融合过程中由于细胞特性、操作过程、PEG毒性等
多种因素都可能影响融合而减少融合频率。
•
方法：对亲本细胞预处理，改进融合技术，加入饲养
层细胞促进杂交瘤生长。
（1）体外制备
• 体外使用旋转培养瓶大量培养杂交瘤细胞，从上清 中获取单克隆抗体。但此方法产量低，一般培养液含量为 10～60μg／ ml。如果大量生产，费用较高。
• 随着大规模的生产，需大量血清而使成本增加，同 时血清会影响单抗的纯度，大量血清的存在干扰抗体活性。 1978年iscove用补充大豆类脂，牛血清蛋白，转铁蛋白等 添加成分的无血清培养基培养杂交瘤细胞成功。
• HAT选择性培养基： 培养基中加次黄嘌呤HyPoxanthine H，氨基喋呤
Aminoopterin A及胸腺嘧啶核苷Thymidine T。
单克隆抗体制备原理
• HAT培养基的选择原理：
• （1）氨基蝶呤(A)是叶酸拮抗剂，可阻断细胞利用正常途 径合成DNA，细胞在含有氨甲蝶呤的培养基中不能通过正 常途径合成DNA。
3. 骨髓瘤细胞的准备
• 细胞株处于良好的生长状态，本身不能分泌任何抗体或免疫 球蛋白； • 瘤细胞的来源应与制备脾细胞小鼠为同一品系，以便两者组 织相容性抗原一致； • 细胞株保持HGPRT缺陷状态或TK缺陷状态。
注意：可溶性抗原需与BSA、OA等载体交联后成颗粒性抗 原才能刺激动物产生可应用的高效价的抗体。
2、免疫动物
• （1）动物选择：一般采用与骨髓瘤细胞供体来源同一品 系的动物进行免疫（如：小鼠）。由于免疫动物品系与所 采用的骨髓瘤细胞差异较远，产生的杂交瘤细胞稳定性越 差。
（2）融合技术 一种是加入融合剂后直接离心使两种细胞紧密接触
（R<3000r/min），另一种是加入融合剂后轻轻搅动融 合。
• （3）提高融合频率的可能途径
•
融合过程中由于细胞特性、操作过程、PEG毒性等
多种因素都可能影响融合而减少融合频率。
•
方法：对亲本细胞预处理，改进融合技术，加入饲养
层细胞促进杂交瘤生长。
（1）体外制备
• 体外使用旋转培养瓶大量培养杂交瘤细胞，从上清 中获取单克隆抗体。但此方法产量低，一般培养液含量为 10～60μg／ ml。如果大量生产，费用较高。
• 随着大规模的生产，需大量血清而使成本增加，同 时血清会影响单抗的纯度，大量血清的存在干扰抗体活性。 1978年iscove用补充大豆类脂，牛血清蛋白，转铁蛋白等 添加成分的无血清培养基培养杂交瘤细胞成功。
• HAT选择性培养基： 培养基中加次黄嘌呤HyPoxanthine H，氨基喋呤
Aminoopterin A及胸腺嘧啶核苷Thymidine T。
单克隆抗体制备原理
• HAT培养基的选择原理：
• （1）氨基蝶呤(A)是叶酸拮抗剂，可阻断细胞利用正常途 径合成DNA，细胞在含有氨甲蝶呤的培养基中不能通过正 常途径合成DNA。
3. 骨髓瘤细胞的准备
• 细胞株处于良好的生长状态，本身不能分泌任何抗体或免疫 球蛋白； • 瘤细胞的来源应与制备脾细胞小鼠为同一品系，以便两者组 织相容性抗原一致； • 细胞株保持HGPRT缺陷状态或TK缺陷状态。
单克隆抗体公开课课件
单克隆抗体公开课课件
• 单克隆抗体的基础知识 • 单克隆抗体的制备技术 • 单克隆抗体的应用实例 • 单克隆抗体的研究进展 • 单克隆抗体的未来展望
01
单克隆抗体的基础知识
单克隆抗体的定义
总结词
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的具有高度特异性的抗体 分子。
详细描述
单克隆抗体是由杂交瘤细胞产生的，这种杂交瘤细胞是由一 个单一的B细胞与骨髓瘤细胞融合而成。这种杂交瘤细胞能够 大量繁殖，并且只产生一种类型的抗体，因此这种抗体具有 高度特异性。
02
单克隆抗体的制备技术
杂交瘤技术
杂交瘤技术是制备单克隆抗体的经典方法，通过将免疫小 鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞。
杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞的无限增殖能力，又具有免 疫脾细胞的抗体产生能力，通过筛选和克隆化培养，可以 得到单一抗体分泌的杂交瘤细胞。
杂交瘤技术制备的单克隆抗体具有高度特异性，可用于诊 断和治疗疾病。
食品安全与环境监测
02
通过单克隆抗体检测食品和环境中的有害物质，保障公共卫生
安全。
生物恐怖袭击应对
03
针对生物恐怖袭击的威胁，利用单克隆抗体快速识别和清除生
物武器中的毒素和病原微生物。
TH疾病的重要手段。目前，已有多种单克隆抗体药物获得批
准上市，为患者提供了新的治疗选择。
02
单克隆抗体药物的靶点选择
靶点选择是单克隆抗体药物研发的关键环节，针对不同的靶点，可以设
计出具有不同作用机制的单克隆抗体药物。目前，针对肿瘤细胞表面抗
原、细胞内信号转导通路等靶点的研究较为广泛。
03
单克隆抗体药物的疗效评估
单克隆抗体的制备过程
总结词
单克隆抗体的制备过程包括免疫动物、杂交瘤细胞的制备、筛选和克隆化、抗体生产以 及纯化。
• 单克隆抗体的基础知识 • 单克隆抗体的制备技术 • 单克隆抗体的应用实例 • 单克隆抗体的研究进展 • 单克隆抗体的未来展望
01
单克隆抗体的基础知识
单克隆抗体的定义
总结词
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的具有高度特异性的抗体 分子。
详细描述
单克隆抗体是由杂交瘤细胞产生的，这种杂交瘤细胞是由一 个单一的B细胞与骨髓瘤细胞融合而成。这种杂交瘤细胞能够 大量繁殖，并且只产生一种类型的抗体，因此这种抗体具有 高度特异性。
02
单克隆抗体的制备技术
杂交瘤技术
杂交瘤技术是制备单克隆抗体的经典方法，通过将免疫小 鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞。
杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞的无限增殖能力，又具有免 疫脾细胞的抗体产生能力，通过筛选和克隆化培养，可以 得到单一抗体分泌的杂交瘤细胞。
杂交瘤技术制备的单克隆抗体具有高度特异性，可用于诊 断和治疗疾病。
食品安全与环境监测
02
通过单克隆抗体检测食品和环境中的有害物质，保障公共卫生
安全。
生物恐怖袭击应对
03
针对生物恐怖袭击的威胁，利用单克隆抗体快速识别和清除生
物武器中的毒素和病原微生物。
TH疾病的重要手段。目前，已有多种单克隆抗体药物获得批
准上市，为患者提供了新的治疗选择。
02
单克隆抗体药物的靶点选择
靶点选择是单克隆抗体药物研发的关键环节，针对不同的靶点，可以设
计出具有不同作用机制的单克隆抗体药物。目前，针对肿瘤细胞表面抗
原、细胞内信号转导通路等靶点的研究较为广泛。
03
单克隆抗体药物的疗效评估
单克隆抗体的制备过程
总结词
单克隆抗体的制备过程包括免疫动物、杂交瘤细胞的制备、筛选和克隆化、抗体生产以 及纯化。
单克隆抗体(用)PPT
培养
顾
！
17
机
会
只
对
进
取
有
为
的
人
,
开 放
注射到小鼠体内
体外培养
庸
人
永
远
无
法 光
单克隆抗体
顾 由单个杂交瘤细胞通过克隆，所产生的化学性质
！ 单一、特异性强的抗体。
18
活动三、用以下文字和箭头来 构建单克隆抗体的制备过程
已免疫的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、BB 细胞，B瘤细胞，瘤瘤细胞、杂交瘤 细胞、产生专一抗体的杂交瘤细胞、 体外培养、体内培养、单克隆抗体、 融合、筛选
产生抗体的B淋巴细胞， 4.如果一个农夫被毒蛇
下文将其简称为B淋巴细 咬了，如何获得相应的
胞
抗体来治疗？
抗体：能够与抗原发生特
异性结合的免疫球蛋白。
能产生抗体的细胞是浆 细胞（即效应B细胞）。10
抗体的传统生产方法
抗原 反复注射
该法制备抗体的缺点：
产量低、纯度低，且 抗体的特异性差、灵 敏度低。
从动物的血清中分离抗体
诊断试剂——最广泛应用
准确、高效、简易、快速
21
治疗疾病和运载药物
主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗 癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。
“生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物 单抗导向，药物为弹头
22
两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程
一个诱导细胞融合的新方法
－－灭活的病毒 三个“一” 一个新细胞－－杂交瘤细胞
14
机
会 只
用抗原免疫小鼠
骨髓瘤细胞的培养
对
进Байду номын сангаас
单克隆抗体概述ppt课件
2015年全球最畅销药物TOP 10中有5个单抗，分别是阿达木单抗、 英夫利昔单抗、利妥昔单抗、贝伐珠单抗和曲妥珠单抗，它们占 据了单抗药物的半壁江山，销售额约为426.6亿美元，约占2015 年全球单克隆抗体药物总销售额的44%。
根据预测，2016-2020 年，全球单抗产业仍将以9.84%的RAGR快 速发展（同期全球药品市场CAGR约为 5%），2020年市场规模有 望突破1300亿美元。
体外法
体外法(杂交瘤细胞体外培养法)的产品纯度高,可以避免鼠类病毒的
污染,简化质检项目,操作具有可控制性,适用于大规模工业生产,因此
是人用鼠源单抗生产方式的主要发展方向。体外法的制备流程也基
Hale Waihona Puke 本相同，即从超免疫的供体中即抗原免疫的小鼠获取脾细胞，选育
出非分泌免疫球蛋白缺陷型的骨髓瘤细胞，待细胞融合后，对单个
.
8
嵌合抗体三种应用形式
嵌合免疫球蛋白G 嵌合Fab和嵌合 F（ab’）2
.
9
人源化单克隆抗体
完全CDR移植抗体
部分CDR移植抗体
特异决定区移植抗体
.
10
完全CDR移植抗体
完全CDR移植抗体由于鼠源性抗体VR中的骨架区仍残留一 定的免疫原性，为最大限度的减少鼠源成分，用人FR替代鼠 FR可形成更为完全的人源化抗体，即在此抗体中除了３个CDR 是鼠源以外，其余全部是人源结构，这一类型的抗体称为CDR 移植抗体或改型抗体。应用这一策略，将鼠源McAb的CDR区 完全移植，得到了抗磷脂酰肌醇（蛋白）聚糖嵌合抗体。但随
.
11
部分CDR移植抗体
在简单CDR移植的基础上又相继发展了部分CDR移植技术。 研究发现轻链的 CDR1、CDR2和重链的CDR3对保证抗体与抗原 特异性结合至关重要，其余三个CDR的作用则较低。因此只将 抗体结合抗原必须的CDR移植到人抗体的FR骨架上即能获得对 人免疫原性更小的嵌合抗体，这类抗体称为部分CDR移植抗体。
根据预测，2016-2020 年，全球单抗产业仍将以9.84%的RAGR快 速发展（同期全球药品市场CAGR约为 5%），2020年市场规模有 望突破1300亿美元。
体外法
体外法(杂交瘤细胞体外培养法)的产品纯度高,可以避免鼠类病毒的
污染,简化质检项目,操作具有可控制性,适用于大规模工业生产,因此
是人用鼠源单抗生产方式的主要发展方向。体外法的制备流程也基
Hale Waihona Puke 本相同，即从超免疫的供体中即抗原免疫的小鼠获取脾细胞，选育
出非分泌免疫球蛋白缺陷型的骨髓瘤细胞，待细胞融合后，对单个
.
8
嵌合抗体三种应用形式
嵌合免疫球蛋白G 嵌合Fab和嵌合 F（ab’）2
.
9
人源化单克隆抗体
完全CDR移植抗体
部分CDR移植抗体
特异决定区移植抗体
.
10
完全CDR移植抗体
完全CDR移植抗体由于鼠源性抗体VR中的骨架区仍残留一 定的免疫原性，为最大限度的减少鼠源成分，用人FR替代鼠 FR可形成更为完全的人源化抗体，即在此抗体中除了３个CDR 是鼠源以外，其余全部是人源结构，这一类型的抗体称为CDR 移植抗体或改型抗体。应用这一策略，将鼠源McAb的CDR区 完全移植，得到了抗磷脂酰肌醇（蛋白）聚糖嵌合抗体。但随
.
11
部分CDR移植抗体
在简单CDR移植的基础上又相继发展了部分CDR移植技术。 研究发现轻链的 CDR1、CDR2和重链的CDR3对保证抗体与抗原 特异性结合至关重要，其余三个CDR的作用则较低。因此只将 抗体结合抗原必须的CDR移植到人抗体的FR骨架上即能获得对 人免疫原性更小的嵌合抗体，这类抗体称为部分CDR移植抗体。
《单克隆抗体应用》课件
单克隆抗体的特性
总结词
单克隆抗体具有高度特异性、一致性和稳定性。
详细描述
由于单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的，因此它具有高度特异性，能够与特 定的抗原结合。此外，由于单克隆抗体的生产过程是高度控制的，因此其质量和 性能具有一致性和稳定性。
02
单克隆抗体的应用领域
生物医学研究
抗体标记技术
利用单克隆抗体与特定抗原的结 合特性，对生物样本中的抗原进 行标记，用于检测、定位和追踪 抗原的表达和分布。
利用单克隆抗体标记的免疫细胞对肿瘤进行攻击，提高肿瘤治疗的疗效和患者的生存率。
03
单克隆抗体的研究进展
新药研发
肿瘤免疫治疗
利用单克隆抗体作为肿瘤免疫治 疗的靶点，通过激活免疫系统来 攻击肿瘤细胞。
自身免疫性疾病治
疗
针对自身免疫性疾病，如类风湿 性关节炎、红斑狼疮等，单克隆 抗体可以抑制免疫反应，缓解症 状。
《单克隆抗体应用》ppt课件
CONTENTS
• 单克隆抗体的基础知识 • 单克隆抗体的应用领域 • 单克隆抗体的研究进展 • 单克隆抗体的挑战与前景 • 单克隆抗体的未来展望
01
单克隆抗体的基础知识
单克隆抗体的定义
总结词
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的具有高度特异性的免疫球蛋白。
详细描述
单克隆抗体是由杂交瘤细胞产生的，这种细胞是由免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融 合而成。这种杂交瘤细胞能够大量繁殖，并且只产生一种类型的抗体。
免疫疗法
单克隆抗体可以与免疫疗法结合，通过调节免疫 反应来增强抗肿瘤效果。
基因治疗
通过将基因导入单克隆抗体，可以实现更精确的 靶向治ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ，提高治疗效果并降低副作用。
单克隆抗体(monoclonalantibody)PPT课件
稀释方法获得产特定单克隆抗体的克隆
克隆化是指将抗体阳性孔进行克隆，目的是将抗体 分泌细胞、抗体非分泌细胞、特异性抗体分泌细胞 和无关抗体分泌细胞分开
大量获得单克隆抗体的方法
3. 单克隆抗体的应用
3.1 作为生物治疗的导向武器
将针对某一肿瘤的单克隆抗体与化疗药物或放疗药物连接， 利用单抗的特异导向作用，将药物带到靶器官，直接杀伤 靶细胞 抗肿瘤细胞毒剂，化疗药物、细菌毒素、植物毒素或放射 同位素等
杂交瘤细胞的筛选：HAT培养基筛选 讨论：细胞融合后，体系中会存在哪些细胞？
HAT系次黄嘌呤（hypoxantin）、氨基蝶呤 （aminopterin）和胸腺嘧啶脱氧核苷（thymidin）三 种物质
单克隆抗体的选择及克隆化
杂交瘤细胞及阳性孔的筛选，用多孔细胞培养板筛选， 稀释度要保证每个孔不多于1个细胞，通过抗原抗体 杂交法检测阳性反应
由不同B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗体混 合物。如:免疫血清（含多种特异性抗体）
Monoclonal antibody: 第二代抗体
由单一克隆B细胞杂交瘤产生的，只识别抗原分子某一特定抗原决定簇
的特异性抗体。特异性强、灵敏度高。 Genetic engineering antibody: 第三代抗体
在DNA水平对Ig基因进行切割、拼接或修饰，导入受体细胞表达的抗体。
思考题:
1. 单克隆抗体和普通抗体有何区别 2）作为一种新型免疫抑制 剂，治疗自身免疫疾病和抗器官移植排斥反应
3.4 作为研究工作的探针
利用单抗的特异性，将其作为探针，从分子、细胞和器官 等不同水平，研究抗原物质的结构与功能，从理论上阐明 机理 用荧光物质标记单抗作为探针，快速确定与其结合的相应 生物大分子在细胞中的位置和分布