水产品中氯霉素残留检测方法(二)

水产品中氯霉素残留检测方法（二）

4.4.3 测定 4.4.3.1 用压杆将竞争性结合试剂压入一洁净的硅硼酸

盐玻璃试管内，加入300 uL水，用涡旋振荡器振荡10 s，使试剂振碎彻低。 4.4.3.2 加5.0 mL样品提取液(4.4.2.3)，或阴性对比液

(4.4.1.1)或阳性对比液(4.4.1.2)到试管中，混匀15 s，使样品上下

混匀15次，置于恒温孵育器中于50℃±1℃孵化3 min，取出混匀15 s，再置于恒温孵育器中50℃±1℃孵化3 min。 4.4.3.3 用压杆将[3H]标志的压入试管中，用旋涡混合器振荡15 s，使样品上下混合15次，置于恒温孵育器中50℃±1℃孵化3 min。 4.4.3.4 取出试管，于

3300r/min离心10 min，立刻取出试管，倒掉上清液，用棉签将试管边缘的污渍擦去。 4.4.3.5 加300uL水到试管内，振荡并混合混匀，再加入3.0 mL闪耀液(4.2.2.7)至试管中，涡旋混匀至试管内没有不均的云状物。 4.4.3.6 将试管放入液体闪耀计数仪内，在[3H]频道举行60 s LSC计数，读cpm值。 4.5 控制点确实定控制点是推断样品阴性与初筛阳性的一个界定值，可按照筛选水平自行设定。对于同一批号的试剂，正常状况下只需测定1次控制点。控制点设定步骤如下：称取20.0g均质好的空白组织样品，加入0.6 mL 10 ug/L抗生素标准溶液，按4.4.2试样提取和4.4.3发射免疫测定；测定六个加标样品的cpm 值，求出cpm平均值乘上系数1.2，即为筛选水平0.3ug/kg的控制点。注：空白样品应是不含抗生素残留的样品，即假如测得某个样品cpm 值在阴性对比液的cpm值±20％左右波动，可认为其不含氯霉素抗生素。 5 结果判定 5.1 将测得结果与控制点对比，当样品cpm值大于控制点50以上时，判定样品为“阴性”，即样品中氯霉素含量低于筛选水平。 5.2 将测得结果与控制点对比，当样品cpm值等于或小于控制点，视为“初筛疑惑阳性”，此时应重新测定样品、阴性对比液和阳性对比液的cpm值。阴性对比液和阳性对比液的cpm值需在正常范围波动(见试剂盒性能监测)，当重新测定样品的cpm值大于控制点，判定为“阴性”；小于或等于控制点，则判定为“初筛阳性”。 5.3 将

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