氯霉素残留量的测定-水产品AB

检测项目：氯霉素

检验标准：GB /T 22338-2008

判定标准：农业部235号公告

仪器：AB 4500液质联用仪（编号：JM070，已校准）

Sartorius CP225D电子天平（编号：JM003，已检定）

PB203-N电子天平（编号：JM012 已检定）

实验步骤：

标准品溶液的制备：精密称取氯霉素标准物质（13 99.4% 中检所）

0.01021g，用乙腈溶解并稀释至10mL配成1.015mg/mL的氯霉素标准贮备液。精密量取100 μL氯霉素标准贮备液于100mL容量瓶中，用乙腈稀释刻度，摇匀，配制成1.015μg/mL的氯霉素标准中间液。精密吸取250μL氯霉素标准中间液于5mL 容量瓶中用乙腈稀释至刻度，摇匀配制成50.75ng/mL的标准工作液。

氯霉素氘代内标（氯霉素-D5）工作液：精密量取氯霉素-D5标准物质

（Dr.Ehrenstorfer GmbH 3080AC 100ng/μL）1.0mL于100mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，配成1.0ng/μL的内标贮备液，精密吸取200μL内标储备液，用乙腈定容至10mL，得到20ng/mL内标工作液。标准曲线配制见下表：

样品溶液的制备：

取样品可食部分，搅碎混匀。取混匀的样品W = g (约2g)，置于50mL离心管中，加入氯霉素氘代内标（氯霉素-D5）工作液100μL、2g无水硫酸钠和20mL乙酸乙酯，涡旋1分钟，超声20分钟，4000转/分钟离心5min。将上清液移入25mL比色管中，50℃氮气吹干。加入甲醇0.5mL，4%氯化钠溶液4.5mL 溶解残渣，涡旋1min，加正己烷5mL，涡旋1min，离心，弃去上层正己烷，下层清液再加正己烷5mL，涡旋1min，离心后弃去。下层清液中加乙酸乙酯10mL，涡旋1min，离心，取全部上清液于氮吹管中，50℃氮气吹干。精密加流动相1mL，涡旋30s，过0.22μm滤膜，供液相质谱分析。

检测条件:

液相条件：色谱柱：Thermo C18（4.6×100mm，3.5μm）

进样体积：1μL流速：1.0 mL/min 柱温：40℃

停止时间：6min 流动相组成：水:甲醇(10:90)

质谱条件： MRM CUR气帘气：35mL/min ESI(-

) Ionspray voltage喷雾电压：-4500V

Gas temp 离子源温度: 600℃喷雾气Gas1:60 mL/min 辅助气Gas2:70 mL/min 碰撞气：medium

计算：（检出限：0.1μg/Kg）

结果：样品中氯霉素含量为，标准要求。(标准要求应不得检出)