邻苯二甲酸酯样品前处理方法和色谱柱选择

*必要时可在样品中加入0.1 mL磷酸离心沉淀蛋白后，再取清液过Chem Elut 小柱净化
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Phthalates analysis with 5975C GC/MSD June 2011
糕点，饼干类食品基质
使用Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂包， 5982-5555： 可处理15g样品： 6 g MgSO4；1.5g NaCL 5982-5122 ：50 mg PSA，50 mg C18EC，150 mg MgSO4
使用原厂塑料管
1. 曲奇饼干，用手压碎后，称取样品10g，加水10 mL，涡旋1 min后移入50 mL塑料管中。 2.加1 mL ?标，涡旋(加完后折算最终浓度100 ppb， 50ppb, 10 ppb) 3. 加 10 mL乙腈，用力振摇1分钟。 4. 加5982-5555盐包，用力振摇1 分钟。 5.4000 rpm 离心5分钟 6.转移上层清液1 mL, 至dispersive kit 5982-5122 。 7.振荡离心10000 rpm。
如果用户要求比较苛刻，可以建议其购买散装的硅藻土填料 （198003,2kg）自填玻璃柱
饮料样品塑化剂分析的Chem Elut 前处理方法
5mL 液体样 品*上样至 5g填料的
Chem Elut 小柱
等待3-5分 钟
用15 mL 二 氯甲烷分三 次洗脱，每 次5 mL
收集洗脱液 浓缩至2.5
mL, GC/MS 上样
9 邻苯二甲酸二异戊酯
Di-iso-amyl phthalate
10 邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯 Bis(4-methyl-2-pentyl) phthalate
11 邻苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯 Bis(2-ethoxyethyl) phthalate
12 邻苯二甲酸二戊酯
Dipentyl phthalate
Bis(2-ethylhexyl) phthalate
18 邻苯二甲酸二庚酯
Di-n-heptyl phthalate
19 邻苯二甲酸二苯酯
Diphenyl phthalate
20 邻苯二甲酸二正辛酯
Di-n-octyl phthalate
21 邻苯二甲酸二异壬酯 22 邻苯二甲酸二异癸酯
Diisononyl ortho-phthalate Diisodecyl ortho-phthalate
样品
1. 试剂空白 2. 样品空白 3. 100 ppb 10 mL Y 4. 100 ppb 15 mL Y 5. 100 ppb 10 mL H 6. 100 ppb 15 mL H 从谱图来看，空白除了仪器 本身本底外，试剂1没有。 样品有可能DINP。 除了DEHP, DNOP, DHXP, DIDP, DIDP，100 ppb加标回 收率在50%以上，有可能与本 底较高有关。
391.3/113.0
250
14
391.6/149.2
190
19
20
DNOP
390.56
11.22
391.6/261.4
190
13
419.2/127.0
150
17
21
DINP
418.62
11.49
419.2/275.1
150
14
447.4/141.1
190
15
22
DIDP
446.66
11.90
447.4/289.5
C20H30O4
C16H22O6 C18H26O4 C20H30O4 C19H20O4 C20H30O6 C20H26O4 C24H38O4 C22H34O4 C20H14O4 C24H38O4 C26H42O4 C28H46O4
含量 ≧（%）
99.5 99.0 98.5 97.0 98.0 99.0 99.0 94.0 99.5
去簇电压/V
105 100 150 150 150 100 130 130 150 100 70 70 120 120 100 100 100 100 170 170
碰撞气能量/V
14.3 32 10 16 10 41 24 11.6 11 23 13 16 23 13 14 50 13 15.5 10.3 18
样品
实验同时比较了带塑料管的QuEChERs kit， 发现有较高的DEHP本底。
尿液和血液中邻苯二甲酸酯
推荐产品： Bond Elut NEXUS 60mg，3mL （12103101）
含油类较多的食品基质：Packaged lunches，方便面油 包等
推荐SPE柱： Bond Elut FL，1g，6mL（12256014/124007,不锈钢筛板）+ Bond Elut PSA 500mg，3mL（12102042/12124039不锈钢筛板}
色谱柱: Poroshell 120 EC-C18, 4.6mm, 100 mm, 2.7 um
流速：0.7 mL/min
流动相:
时间(min)
0
4.0
6.0
6.1
11
11.1
15
A 0.1%甲酸水溶 液（%） 30 5 5 0 0 30 30
B甲醇（%） 流速（mL/min）
70
0.7
95
0.7
95
最终样品
1. 试剂空白 2. 样品空白 3. 100 ppb 10 mL Y 4. 100 ppb 15 mL Y 5. 100 ppb 10 mL H 6. 100 ppb 15 mL H 从谱图来看，空白除了仪器本身本底外，试剂1没有。 样品有可能DINP。 100 ppb加标回收率在50%以上，除了DEHP, DNOP, DHXP, DIDP, DIDP有 可能与本底较高有关。乙腈 添加量10mL与15 mL没有明显区别，不同人 的振摇区别不大。
3 邻苯二甲酸二异丙酯
Diisopropylo-phthalate
4 邻苯二甲酸二烯丙酯 5 邻苯二甲酸二丙酯 6 邻苯二甲酸二异丁酯 7 邻苯二甲酸二丁酯 8 邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯
Diallyl phthalate Dipropyl phthalate Diisobutyl phthalate Dibutyl phthalate Bis(2-methoxyethyl) phthalate
邻苯二甲酸酯样品前处理方法 和色谱柱选择
吴翠玲 2011/6/24
各种样品基质中邻苯二甲酸酯样品前处理推荐方案
1、饮料等水性基质 2、糕点类固体基质 3、含油类较多的食品基质 4、血样和尿液
饮料中邻苯二甲酸酯
推荐样品前处理产品： Chem Elut 5g（12198006）
Chem Elut HDPE（订货号12198022 ,20mL）
22种邻苯二甲酸酯化合物LC-MS/MS特征选择离子及质谱参数
序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
化合物 DMP DMEP DEEP DEP DAP DIPrP DPrP DPHP DIBP BBP
分子量 194.19 282.30 310.3 222.24 246.27 250.29 250.29 318.33 278.35 312.36
190
15
22种邻苯二甲酸酯化合物谱图
源自文库
In te n s ity , c p s
XIC of +MRM (44 pairs): 195.3/163.1 amu from Sample 6 (std200ppb) of 20110618paes.wiff (Turbo Spray)
306.4
10.11
307.4/237.2
100
13
307.4/167.2
100
20
14
DPP
306.4
10.21
307.4/149.1
190
16
331.4/167.0
170
20
15
DCHP
330.43
10.25
331.4/249.3
150
14
335.5/167.2
170
17
16
BMPP
334.43
146-50-9
605-54-9 131-18-0 84-75-3 85-68-7 117-83-9 84-61-7 117-81-7 3648-21-3 84-62-8 117-84-0 68515-48-0 26761-40-0
分子式
C10H10O4 C12H14O4 C14H18O4 C14H14O4 C14H18O4 C16H22O4 C16H22O4 C14H18O6 C18H26O4
参考保留时间
离子对
4.82 4.89 5.88 5.93 6.36 6.87 7.06 7.67 8.77 8.83
195.3/163.1 195.3/133.1 283.4/207.1 283.4/59.1 311.4/22.1 311.4/149 223.3/149.3 223.3/177.0 247.3/189.2 247.3/149.0 251.2/209.0 251.2/167.0 251.2/149.0 251.2/191.1 319.4/225.2 319.4/77.0 279.4/223.2 279.4/267.2 313.3/205.1 313.3/149.1
13 邻苯二甲酸二己酯
Dihexyl phthalate
14 邻苯二甲酸丁基苄基酯
Benzyl butyl phthalate
15 邻苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯 Bis(2-n-butoxyethyl) phthalate
16 邻苯二甲酸二环己酯
Dicyclohexyl phthalate
17 邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯
0.7
100
1
100
1
70
0.7
70
0.7
LC-MS方法推荐色谱柱： Poroshell 120 EC-C18, 2.1mm, 100 mm, 2.7 um
22种邻苯二甲酸酯
序 中文名称
号 1 邻苯二甲酸二甲酯 2 邻苯二甲酸二乙酯
英文名称
Dimethyl phthalate Diethyl phthalate
GB/T21911-2008推荐凝胶柱
含油类样品推荐凝胶柱： 1、Ecospheres glass column, 450 x 25 mm 填料：100gPL1460-4M03整套玻璃珠：PL1310-0054 2、EnviroPrep, 300 x 25 mm (PL1210-6120EPA)
HPLC-MS/MS分析22种邻苯二甲酸酯
98.0
99.5 99.2 99.0 97.0 98.5 99.5 99.0 97.0 99.5 97.5 98.5 99.5
质谱条件
离子化模式：电喷雾电离，正离子模式； b）质谱扫描方式：多反应监测（MRM）。 c）分辨率：单位分辨率。 d）气帘气压力（CUR）：30Psi（氮气）； e）离子源喷雾电压（IS）：5500V； f）雾化温度（TEM）：550°C； g）雾化气压力(GAS1)：50Psi（氮气）； h）加热辅助气(GAS2)：50Psi（氮气）； i）碰撞气流速比（CAD）：4； j) 其他参数见表
22种邻苯二甲酸酯化合物LC-MS/MS特征选择离子及质谱参数(续）
367.4/249.3
130
11
11
DBEP
366.45
8.92
367.4/101.1
130
18
279.4/205.1
140
11
12
DBP
278.35
9.05
279.4/149.2
140
20
307.4/219.2
190
12
13
DIPP
10.39
335.5/251.4
170
12
335.4/149.1
210
21
17
DHXP
334.45
10.53
335.4/233.3
170
11
363.4/149.3
170
21
18
DHP
362.51
10.82
363.4/247.3
170
11
391.3/148.7
270
25
19
DEHP
390.56
11.05
缩写
DMP DEP DIPrP DAP DPrP DIBP DBP DMEP DIPP
BMPP
DEEP DPP DHXP BBP DBEP DCHP DEHP DHP DPhP DNOP DINP DIDP
CAS号
131-11-3 84-66-2 605-45-8 131-17-9 131-16-8 84-69-5 84-74-2 117-82-8 605-50-5
使用玻璃管
1.称取10g桃酥样品10g，加水10 mL保证均相，涡旋1 min后移入 50 mL玻璃管中。 2.加1 mL 混标，涡旋(加完后折算最终浓度100 ppb) 3. 加 15 mL或10 mL乙腈，用力振摇1分钟。 4. 加5982-5555盐包，用力振摇1 分钟。 5.2000 rpm 离心5分钟 6.转移上层清液1 mL, 至分散净化包5982-5122 10 mL玻璃顶空瓶。 7.振荡离心。