LD50测定实验

2. 剂量分组
本次实验 剂量组已设置好，剂间比1:0.88 每组一个剂量，随机取10只小鼠给药
How to mark?
4
1
7
2
5
8Biblioteka Baidu
3
9
6
3. 给药途径
新药报批要求2个，其中1个与临床给药 途径一致
本次实验：ip 0.2ml/10g
Intraperitoneal injection, ip P17
药物半数致死量（LD50）的测定 P164
医学部药理系
实验目的
掌握LD50测定的意义 掌握LD50测定的方法、步骤和计算方法
急性毒性试验 Acute Toxicity
指机体一次或短时间内（24 h）多次接 受大剂量某种药物后所产生的快速而剧 烈的中毒反应，包括死亡效应，是药物 安全性评价的第1道关卡。
Number
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Weight (g)
Injection volume (ml)
0.2ml/10g
盐酸普鲁卡因LD50测定结果
No. of group
1
No. of mice
10
Concentration Dose
No. of
(%)
(mg/kg) death
1.25
What is LD50?
半数致死量：能引起50%的实验动物出 现死亡反应时的药物剂量
LD50 ( Median Lethal Dose) is the dose of a substance that will kill half of the test animals.
以死亡率做纵坐标，剂量对数做横坐标，呈一个长尾“S”形曲 线。这条曲线两端平缓，中间陡峭，在反应率50%处斜度最 大，因此LD50是剂量反应曲线上最敏感的一点。
classroom
193.2(7)
注意事项
捉持小鼠动作坚决，防止咬伤。 小鼠称重及给药剂量力求准确。
ATTENTION
Please hand in your reports before next Friday.
Put the mice to death and clean the cages The group on duty should clean the
250 7
Percentage mortality (%)
2
10
1.1
220 18
90
3
10
0.97
194 9
90
4
10
0.85
170 5
5
10
0.75
150 5
50
6
10
0.66
132 2
7
10
0.58
116 0
0
LD50(mg/kg)=160.3(6) 160.6(7)
Confident limitation(95%)=147.5-174.2(6) 133.5-
Avoid puncture of the abdominal viscera
4. 观察时间
正式实验：7~14d 本次实验：20min
5. 观察指标
正式实验
每天死亡数 笼边观察：包括动物体重变化、饮食、外观、
行为、分泌物、排泄物等 解剖和病理检查：死亡动物与观察期结束后
动物需解剖尸检。
本次实验：死亡数，症状
6. LD50计算
改良寇氏法，Bliss法（新药报批方法） 本次实验：Bliss法
结果：LD50，95%可信限
7. 实验报告
日期、室温 受试物的名称、生产厂家、批号、规格、理化
性状、溶液浓度。 实验动物的种系、性别、体重范围、分组情况、
给药途径、剂量、给药时间、给药后的中毒症 状、死亡时间和死亡率。 LD50的计算过程和结果（包括LD50值和95% 可信限范围）
The mouse is grasped tightly, and held in a head-down position.
The injection is made in the lateral aspect of the lower left abdomen. The needle of syringe is inserted through the skin and muscle with a 450 angle and inject the solution.
mortality
50%
LD50
dose
LD50测定的意义
是药物筛选的第一步，药物安全性评价 的第1道关卡
初步估计该药的安全性
TI=LD50/ED50 TI值越大，越安全
提供药物毒性的基本资料：症状、靶器 官、剂量
方法和步骤
1.动物选择 Various species are used for LD50 tests.
Large numbers of rats and mice are used. 小鼠，18-22g，雌雄各半，健康活泼
2. 剂量分组
首先摸索合适剂量范围，测出0%和 100%死亡的剂量范围
在预试验所获得的0%和100%死亡的剂 量范围内，选用几个剂量组（小鼠一般 不少于5个剂量组，按等比级数增减，相 邻组间比一般取1:0.9~1:0.7），尽可能使 半数组的死亡率在50%以上，另半数组 死亡率在50%以下。