菌落总数检验

菌落总数检验

菌落总数(Aerobic bacterialcount)就是指食品工业检样经过处理,在一定条件下培养后,所得1g或1ml检样中所含细菌菌落的总数。

1、实验前准备

a.实验器具的杀菌准备：报纸包平板和移液管，报纸包广口瓶和三角瓶的口径部，干热灭菌160℃ 2个小时，杀菌完毕冷却后放入超净工作台备用（使用前不能撕开报纸）。

b.配制培养基：按标准配制所需培养基，买的现成培养基的话，按包装说明配制。称取一定量的培养基倒入三角瓶中，加入一定量的蒸馏水，搅匀，置于电炉子上加热至沸腾，立即拿下盖上胶皮塞，报纸包住，121℃湿热灭菌15分钟，杀菌完毕待压力降为零时方可打开锅盖，拿出放入46℃的水浴锅备用，多余的放入冰箱备用，下次使用前电炉子上加热融化待用。

c.配制生理盐水：按标准要求配制生理盐水，称8.5g氯化钠加入到1000mL蒸馏水中，配成0.85%的，报纸包住上口，放入121℃高压杀菌锅杀菌15分钟，冷却备用（可放入冰箱备用，防止感染细菌）。

2、实验前实验室的准备

a.洁净间紫外线杀菌半小时。

b.超净工作台紫外线杀菌半小时（杀菌前将本次试验所需的平板、移液管补齐）。

c.杀菌完毕，注意关闭杀菌灯大约十几分钟后再进入，难免吸入紫外线的难闻气味。

3、实验

a.实验前点燃酒精灯，在酒精灯旁操作

b.实验时用酒精棉球擦拭手心手背、桌面、洗耳球和样品等要接触的物品表面，对其进行进行消毒

c.样品准备

液体样品：移液管吸取25ml样品于杀菌的广口瓶中，再倒入225ml灭菌生理盐水，摇匀，再倒入无菌均质袋内用无菌均质器拍打均匀；

固体样品：称取25g粉末样品于杀菌的广口瓶中，再进行与上述同样的处理；若

是固体，需要先按GB4789样品处理的方法进行处理。

d.按样品需要做2--3个稀释度

e.注样、倒平板

平板标记，注入对应稀释度的样品，再倒入准备好的培养基，略微晃匀（不能用力过大，摇到平板侧壁、上面或外面可能会感染细菌）；

同时，做空白对照；

等琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃恒温箱内培养（48±2）h取出，计算平板内菌落数目乘以倍数，即得1mL样品所含菌落总数。

4、试验后处理

a.将剩余的杀菌的平板和移液管继续用报纸包住，放于超净工作台内。

b.倒平板后若余有培养基，则需要对三角瓶口进行灼烧，密封，放于冰箱内。

c.酒精擦拭台面，开启超净工作台和室内紫外线杀菌半小时。

5、菌落计数和报告

参照GB4789.2