菌落总数检验

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国标菌落总数检测方法

国标菌落总数检测方法

国标菌落总数检测方法引言:菌落总数是指在一定的培养条件下,菌落形成的数量。

菌落总数检测是食品微生物检验中的一个重要指标,用于评估食品中微生物的污染程度和卫生质量。

本文将介绍国标菌落总数检测方法的步骤和原理。

一、国标菌落总数检测方法的步骤国标菌落总数检测方法主要包括样品制备、平板计数和结果计算三个步骤。

1. 样品制备需要准备好待测样品。

样品通常是食品、水或其他物质,可以是液体或固体。

将样品称取一定的量,然后按照一定的比例与适量的生理盐水进行稀释,以降低样品中菌落的数量,使其适合于后续的菌落计数。

2. 平板计数将制备好的样品溶液均匀地倒入已经凝固的琼脂平板中,然后用无菌铲子或无菌玻璃棒将溶液均匀涂抹在琼脂平板表面。

待琼脂凝固后,将平板倒置放置在恒温培养箱中,以利于菌落的生长。

根据不同的样品特点和需求,可以选择适当的培养温度和时间。

3. 结果计算在菌落生长适宜的条件下,菌落会在琼脂平板上形成。

在菌落形成后,使用计数器或目视观察,对菌落进行计数。

计数时需要遵循一定的规则,如避免重复计数、避免边缘菌落等。

最后,根据计数结果和样品的稀释倍数,计算出菌落总数。

二、国标菌落总数检测方法的原理国标菌落总数检测方法基于微生物在适宜的培养条件下形成可见的菌落的特性进行。

其原理主要包括稀释平板法和菌落计数法。

1. 稀释平板法稀释平板法是菌落总数检测的一种常用方法。

通过将样品与一定量的生理盐水进行稀释,使菌落的数量适于计数。

然后将稀释好的样品均匀涂抹在琼脂平板上,使菌落在琼脂上生长形成可见的菌落。

根据样品的稀释倍数和计数得到的菌落数量,计算出菌落总数。

2. 菌落计数法菌落计数法是国标菌落总数检测方法的关键步骤。

在菌落生长适宜的条件下,菌落会在琼脂平板上形成。

然后使用计数器或目视观察,对菌落进行计数。

计数时需要遵循一定的规则,如避免重复计数、避免边缘菌落等。

最后,根据计数结果和样品的稀释倍数,计算出菌落总数。

三、国标菌落总数检测方法的应用国标菌落总数检测方法广泛应用于食品、饮用水、药品、化妆品等领域。

菌落总数测定

菌落总数测定

食品安全菌落总数测定菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数。

菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价。

菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。

菌落总数检验工作中会遇到各种实验平板的菌落计数工作,如倾注法平板,螺旋接种平板,3M菌落总数测试纸片,滤膜法平板等。

因此要高效准确的进行各类平板的菌落计数并保存所有实验数据和图片,必须要求采用的自动计数仪器支持各类平板的自动分析。

迅数菌落分析仪器采用了菌落放大图象拍摄,高分辨率的1000万像素CCD数字成像技术和Colonfast 菌落智能识别技术。

在菌落自动计数方面,仪器可以快速完成包含细菌、霉菌、酵母菌等样品的各类倾注法平板、涂布法平板、滤膜法平板、空气沉降法平板、螺旋接种平板、3M纸片的菌落自动计数和浓度计算,这个功能可以促进我们食品卫生检验中“菌落总数”测定项目的自动化;自动计数菌落的速度高于500个菌落/秒,最小可以分辨的菌落直径可达 0.01mm;可构建专用计数模板以适应复杂实验室环境,计数误差控制在10%以内。

“迅数”是采用最多的菌落仪品牌。

食品行业适用标准:GBT 4789.2-2008 食品卫生微生物学检验菌落总数测定需要进行菌落计数的行业有:疾病控制,卫生检验中心检验检疫局质量技术监督局大学:食品科学与工程微生物发酵免疫医学检验公共卫生科学院,研究机构环境监测部门自来水公司制药企业:生物制药,化学制药,抗生素企业化妆品企业食品企业:饮料、饮用水、乳品、保健食品、糕点糖果、膨化食品、食品添加剂、粮食及其制品、酒类、调味品、微生态、保健食品消毒剂、消毒器械:消毒剂;消毒器械;生物指示剂;化学指示剂;灭菌包装物一次性使用医疗用品:输注类;导管类;诊断、治疗器具类;透析器具类;麻醉器具类;手术巾、敷料类;护理器材类卫生用品:卫生巾;尿布;皮肤、粘膜卫生用品;隐形眼睛护理用品;其他的一次性卫生用品●大肠菌群计数传统的大肠菌群最可能数(MPN)法必须经过:初发酵实验,复发酵证实试验。

菌落总数检验(食品微生物课件)

菌落总数检验(食品微生物课件)

二、菌落总数的报告
(1)菌落数小于100 CFU 时,按“四舍五入”原则修约,以整数报告。
(2)菌落数大于或等于100 CFU 时,第3 位数字采用“四舍五入”原则修 约后,取前2 位数字,后面用0 代替位数;也可用10 的指数形式来表示,按 “四舍五入”原则修约后,采用两位有效数字。
二、菌落总数的报告
知识点:菌落总数测定原理
情境:微生物检测技术 任务:菌落总数测定
课程:食品微生物技术
菌落总数测定原理
一、菌落总数
什么叫菌落总数
食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养 温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成 的微生物菌落总数。
二、菌落总数测定原理
平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释 之后,其中的微生物充分分散成单个细胞, 取一定量的稀释样液接种到平板上,经过培 养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见 的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一 个单细胞。统计菌落数,根据其稀释倍数和 取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
(n1 0.1n2 )d
式中: N——样品中菌落数; ∑C——平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和; n1——第一稀释度(低稀释倍数)平板个数; n2——第二稀释度(高稀释倍数)平板个数; d——稀释因子(第一稀释度)。
一、菌落总数的计算方法
(3)若所有稀释度的平板上菌落数均大于300 CFU,则对稀释度最高的平 板进行计数,其他平板可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释 倍数计算。
菌落总数检测报告
一、菌落总数的计算方法
(1)若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个平板 菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每g(mL)样品中菌 落总数结果。

菌落总数检验操作规程

菌落总数检验操作规程

菌落总数检验操作规程一、实验室准备工作1.准备培养基:根据实验需求选择适当的培养基,如营养琼脂培养基、大肠埃希氏菌选择性培养基等。

注意培养基的成分和质量。

2.准备培养基平板:测量合适的培养基量并加入培养皿中,使用无菌技术将培养基均匀倒入培养皿,标明编号和日期。

二、样品处理1.准备样品:如食品样品,需要将样品称重并加入适当的生理盐水中,用搅拌器或均质仪进行均匀悬浮。

2.稀释样品:根据实验需要,对样品进行系列稀释。

取适量的悬浮样品,依次加入尺量瓶中的生理盐水,振摇均匀。

三、接种培养1.无菌操作:在无菌工作台内进行操作,穿戴好无菌手套,将培养皿放入工作台上,注意防止污染。

2.接种样品:使用无菌移液器,取适量的稀释样品均匀滴入培养皿上。

3.均匀涂布:使用无菌匀涂棒,将样品在培养皿上均匀涂抹,注意避免混入外来微生物。

四、培养条件1.始菌箱:将接种后的培养皿置于始菌箱中,设定适当的温度和湿度(如37℃,24小时)。

2.孵化箱:将始菌箱中的培养皿转移到恒温培养箱中适当孵育时间,保持适宜温度及湿度。

五、菌落计数1.观察菌落:取出培养好的菌落总数平板,放在均匀光源下观察菌落的形态、颜色、大小等特征,标记异常菌落。

2.计数菌落:使用计数器或显微镜对菌落进行计数,记录结果,并用公式计算菌落总数。

每个菌落总数平板至少计数两遍,计算平均值。

六、数据分析与结果判定1.数据分析:对不同样品的检测结果进行归类整理,统计菌落总数的分布情况。

2.结果判定:根据相应的标准或规定,比较样品的检测结果与标准要求,判定样品是否合格。

七、清洗和消毒1.清洗:将培养皿彻底清洗干净,清除残留的培养基和菌落。

2.消毒:将使用过的器材进行高温高压消毒或化学消毒,确保无菌环境。

以上就是菌落总数检验操作规程的简要示例,实验过程中需严格遵守无菌操作规范,并根据具体实验要求进行相应的调整。

在实验过程中,及时记录实验数据,注意安全操作。

实验完成后,对结果进行统计分析和归档保存。

菌落总数 标准

菌落总数 标准

菌落总数标准一、菌落总数定义菌落总数是指食品经过处理,在一定条件下培养后,所得每克(每毫升)检样中所生长出来的细菌菌落总数。

它是一种反映食品卫生状况的重要指标,用以判定食品被污染的程度。

二、菌落总数测定方法1. 按照国家标准方法,将样品进行稀释,取一定量稀释液接种到培养基上,置于恒温箱中培养。

2. 观察每个培养基上的菌落数量,并记录。

3. 根据稀释倍数和培养基上的菌落数量,计算出每克(每毫升)样品中的菌落总数。

三、菌落总数卫生标准根据国家卫生部门的规定,食品中的菌落总数应符合以下标准:1. 饮料、饮用水:≤100cfu/ml。

2. 植物性食品、罐头食品:≤1000cfu/g。

3. 肉制品、乳制品:≤50000cfu/g。

4. 调味品、粮谷类食品:≤1000cfu/g。

5. 冷饮食品:≤2000cfu/g。

四、菌落总数食品卫生要求1. 食品生产过程中,应采取有效措施控制菌落总数的污染,确保食品的安全卫生。

2. 生产过程中使用的原料、水源、容器等应符合卫生要求,避免污染。

3. 食品加工设备、器具、管道等应定期清洁消毒,保持良好的卫生状况。

4. 成品储存应避免污染,严格控制温度、湿度等条件,确保菌落总数不超标。

五、菌落总数环境卫生要求1. 生产场所应保持清洁卫生,定期进行清洁消毒,保持良好的卫生状况。

2. 生产场所的通风、照明等设施应符合卫生要求,防止细菌滋生。

3. 生产过程中产生的废弃物、污水等应及时处理,防止污染环境。

六、菌落总数检验规则1. 按照国家规定的标准方法进行检验,确保数据的准确性。

2. 检验时应选取具有代表性的样品,确保样品的代表性。

3. 对于不合格的样品,应进行复检,以确认数据的可靠性。

4. 对于批量生产的食品,应按比例抽样检验,确保整批产品的质量。

七、菌落总数标识、储存、运输要求1. 标识:产品标签上应注明菌落总数指标,以提示消费者注意食品的卫生质量。

2. 储存:食品应储存在清洁卫生的环境中,避免污染。

菌落总数的定量测定原理

菌落总数的定量测定原理

菌落总数的定量测定原理您好,细菌的定量测定主要通过计算细菌在培养基上的菌落数目来实现。

以下是菌落总数定量测定的原理和步骤:一、原理菌落总数的测定是通过将含有细菌的样品在固体培养基上进行培养,统计形成的菌落数目来估算原始样本中活菌的含量。

因为每一个菌落理论上是由一个细菌细胞繁殖形成的,所以菌落数目可以反映样品中活菌的数目。

菌落总数法是对环境、食品等样品中的微生物进行定量检测的常用方法。

二、操作步骤(1)称取一定量样品(污水、食品等),配置适当的稀释度,一般做3-5个稀释度。

(2)吸取适量不同稀释度的样品(通常0.1ml、0.5ml等),涂布均匀到预先准备好的固体培养基平板上,每种稀释度设置2-3个平行。

(3)将涂有样品的培养基倒置置于培养箱,在最适合样品中细菌生长的温度下培养一定时间,通常1-3天。

(4)培养结束后,将培养基取出,统计每个稀释度平板上形成的菌落数。

选择菌落数目在30-300个之间的平板计数,以获得较准确的结果。

(5)根据稀释度计算出原样品中菌落形成单位的数量,即CFU/ml或CFU/g,即为菌落总数。

计算公式:菌落总数(CFU/ml或CFU/g) = 平板计数的菌落数÷稀释度÷接种量(ml)三、注意事项(1)样品要充分混匀,进行适当稀释,以获得单独分散的菌落。

(2)平板要平整,接种要均匀,避免菌落聚集。

(3)培养条件要适宜样品中的细菌生长。

(4)计数时,避免重复计数同一菌落。

(5)同一样品应设置多个稀释度的平行,选取菌落数在30-300之间的结果最准确。

(6)运算时注意计数的稀释倍数。

综上所述,菌落总数定量测定通过统计单位样品量中形成的菌落数量,从而推算出原始样品中的菌量,是一种简便可靠的微生物定量检测方法,在环境监测和食品微生物检验中应用广泛。

但操作过程需遵循标准方法,并注意各种影响因素,方能获得准确可靠的结果。

食品微生物学检验菌落总数测定国标

食品微生物学检验菌落总数测定国标

食品微生物学检验菌落总数测定国标1. 前言好啦,今天咱们聊聊一个不那么热门,但绝对重要的话题——食品微生物学检验中的菌落总数测定。

说到这,很多小伙伴可能会皱起眉头,觉得这事儿离自己有点远,实际上,它和我们每天吃的东西密切相关呢!就像那句老话说的:“民以食为天”,吃得安全,咱们才有精力去干其他事情,不是吗?2. 什么是菌落总数?2.1 基本概念首先,菌落总数到底是个啥呢?简单来说,菌落总数就是在特定的培养基上,经过一段时间培养后,能够看到的细菌数量的总和。

这就好比在一块田地里,你数出有多少棵小苗。

哦,对了,当然这些小苗可不是蔬菜,而是一些微小的细菌。

它们可能是有益的,也可能是有害的,所以我们得好好查查!2.2 重要性那么,为啥我们要测这个菌落总数呢?这里面有个“门道”。

如果这个数值过高,说明食品可能被污染了,吃下去就有风险。

想想看,要是你吃的蛋糕上面跑了一群细菌,那可真是“甜蜜的负担”啊,吃了不但没啥好处,还可能拉肚子,这就得不偿失了!所以,了解菌落总数,就像是给食品加了一道安全锁,能让我们更放心地享受美食。

3. 如何进行菌落总数测定?3.1 检测步骤现在,我们来聊聊这个测定是怎么进行的。

一般来说,测定过程分几个步骤,听起来可能有点复杂,但别担心,咱们一步步来,绝对能搞定!首先,咱们需要准备一个无菌的培养基,常见的比如营养琼脂。

这就像是给细菌准备的“豪华酒店”,要干净、舒适,细菌才愿意来入住。

接着,就需要将待测食品样品进行稀释。

想象一下,你的美食是个“大胃王”,可不能让它一口气吃下去太多细菌,不然肚子受不了。

然后,咱们将稀释后的样品倒在培养基上,轻轻摇匀,放入恒温箱中,让细菌们慢慢“开派对”。

大约24到48小时后,打开恒温箱,就能看到小小的菌落在培养基上欢快地生长。

3.2 结果分析等菌落长出来后,就得开始数数了。

数菌落就像数星星,虽然不一定每颗都能看得清楚,但大致上能看到它们的数量。

然后,再根据稀释倍数,计算出样品中细菌的总数。

菌落总数测定

菌落总数测定

菌落总数测定菌落总数测定一、茵落总数的概念和测定意义菌落(colony)是指细菌在固体培养基上发育而形成的能被肉眼所识别的生长物,它是由数以万计的相同细菌聚集而成的,故又有细菌集落之称。

菌落总数是指在被检样品的单位重量(g)、容积(m1)或表面积(clni)内,、所含能于某种周体培养基上,在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。

菌落总数主要是作为判定食品被细菌污染程度的标记,也可以应用这一方法观察食一中细菌的性质以及细菌在食品中繁殖的动态.以便对被检样品进行卫生学评价时提供科学依据.二、茵落总数测定的几项说明1.菌落总数的测定。

是以检样中的细菌细胞和营养琼脂混合后,每个细菌细胞都能形成一个可见的单独菌落的假定为基础的。

由于检验中采用37℃于有氧条件下培养(空气中含氧约20%),因而并不能测出每g或ml检样中实际的总活菌数,厌氧菌、微嗜氧菌和冷营菌在此条件下不生长,有特殊营养要求的一些细菌也受到了限制,因此所得结果,只包括一群能在普通营养琼脂中发育、嗜中温的、需氧和兼性厌氧的细菌菌落的总数。

2.鉴于食品检样中的细菌细胞是以单个,成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在,因而在营养琼脂平板上出现的菌落可以来源于细胞块,也可以来源于单个细胞,因此平板上所得需氧和兼性厌氧菌菌落的数字不应报告活菌数,而应以单位重量、容量或表面积内的菌落数或菌落形成单位数(colony forming units,CFU)报告之。

3.每种细菌都有它一定的生理特性,培养时,应用不同的营养条件及其他生理条件(如温度、培养时间、PH、需氧性质等)去满足其要求,才能分别将各种细菌都培养出来。

因此,要得到较全面的细菌菌落总数,应将检样接种到几种不同的非选择性培养基上,并培养在不同条件下,如温度,氧气供应等。

但国家颁发的食品卫生标准对不同食品的菌落总数的规定,都是根据用普通营养琼脂进行需氧培养所得的结果确定的,因此在食品的一般卫生学评价中并不要用几种不同的非选择性培养基培养。

菌落总数检测标准

菌落总数检测标准

菌落总数检测标准
菌落总数检测是一种常见的微生指标检测方法用于评估食品、饮用水、医疗器械等物品中的微生物污染情况。

检测的菌落总一般采用生物计数法,即推测细菌总数的检验方法。

不同国家和地区可能有不同的标准和规定,但通常微生物指标检测标准的结构都是相对类似的,包括菌落总数、大肠埃希氏菌、霉菌、酵母菌等项目。

这些标准涉及了食品安全、饮用水卫生、医疗器械清洁等方面。

以下是一些常见的菌落总数检测标准:
1. 食品行业:根据《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数的测定GB 4789.2-2016》,菌落总数检测的标准上限值因不同食品类别而有所不同。

2. 饮用水行业:根据《生活饮用水卫生标准GB 5749-2006》,每毫升饮用水中的菌落总数应低于100个。

3. 医疗器械清洁行业:医用器械清洁标准如ISO 15883等对菌落总数也有相关的规定。

需要注意的是,具体标准和检测方法可能因国家、行业、用途等
而异,建议根据具体情况查询相关标准以获取最准确的信息。

菌落总数国标

菌落总数国标

菌落总数国标一、菌落总数概述菌落总数是指单位样品中,菌落繁殖所形成的单个菌落总数。

其用于表示食品、饮料、营养品、化妆品等产品的表面和内部微生物污染程度,是检测产品质量卫生状况的重要参数之一。

国家标准对菌落总数的要求是,在指定条件下,每克或每毫升数目必须不超过15000CFU/g或CFU/mL,其中CFU即“colony forming unit”,表示菌落形成的单位。

菌落总数检测的原理是采用平板计数法,将经过稀释的样品涂布于含有营养物质的琼脂平板上,培养一定时间后,计算菌落数量。

根据检测结果,可以判断样品是否符合卫生标准,有无微生物污染等。

二、菌落总数的影响因素1. 食品和营养品的原材料和生产过程。

原材料可能受到微生物污染,从而影响最终产品的菌落总数;而生产过程中,加工环境和人员和设备会是微生物传播的可能来源。

2. 菌株自身性质和数量。

不同菌株形态、生长速度和耐受力都不同,因此不同的菌株会对结果产生不同的影响。

而数量的增加也会影响结果,菌落总数越高,检测结果越大。

3. 卫生条件。

设备和环境的清洁程度会影响微生物传播,因此必须在使用前进行充分消毒。

三、菌落总数的检测方法1. 选择培养基。

菌落总数检测需要选择适合种类和数量的培养基,平板计数法中比较常用的是总菌计数琼脂培养基。

2. 检测前准备。

对样品进行稀释或加倍稀释处理,并进行排气或震荡,保证样品均匀分布。

3. 接种方法。

将稀释后的样品涂布于琼脂平板中,避免空气污染和外源性污染,最后用精密计数器计数。

4. 结果统计。

计算每一块琼脂平板中的菌落数量,将数据进行统计分析,以得到菌落总数的检测结果。

四、菌落总数国家标准的制定根据《食品安全法》的规定,为了保障消费者的身体健康及生活质量,国家相关部门制定了大量的食品卫生标准和检测方法。

其中,针对菌落总数的检测标准主要是国家卫生部《食品卫生标准》和国家质量监督检验检疫总局的GB/T 4789.2-2010《食品微生物学检验》。

菌落总数测定

菌落总数测定

菌落总数测定菌落总数测定⼀、茵落总数的概念和测定意义菌落(colony)是指细菌在固体培养基上发育⽽形成的能被⾁眼所识别的⽣长物,它是由数以万计的相同细菌聚集⽽成的,故⼜有细菌集落之称。

菌落总数是指在被检样品的单位重量(g)、容积(m1)或表⾯积(clni)内,、所含能于某种周体培养基上,在⼀定条件下培养后所⽣成的细菌集落的总数。

菌落总数主要是作为判定⾷品被细菌污染程度的标记,也可以应⽤这⼀⽅法观察⾷⼀中细菌的性质以及细菌在⾷品中繁殖的动态.以便对被检样品进⾏卫⽣学评价时提供科学依据.⼆、茵落总数测定的⼏项说明1.菌落总数的测定。

是以检样中的细菌细胞和营养琼脂混合后,每个细菌细胞都能形成⼀个可见的单独菌落的假定为基础的。

由于检验中采⽤37℃于有氧条件下培养(空⽓中含氧约20%),因⽽并不能测出每g或ml检样中实际的总活菌数,厌氧菌、微嗜氧菌和冷营菌在此条件下不⽣长,有特殊营养要求的⼀些细菌也受到了限制,因此所得结果,只包括⼀群能在普通营养琼脂中发育、嗜中温的、需氧和兼性厌氧的细菌菌落的总数。

2.鉴于⾷品检样中的细菌细胞是以单个,成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在,因⽽在营养琼脂平板上出现的菌落可以来源于细胞块,也可以来源于单个细胞,因此平板上所得需氧和兼性厌氧菌菌落的数字不应报告活菌数,⽽应以单位重量、容量或表⾯积内的菌落数或菌落形成单位数(colony forming units,CFU)报告之。

3.每种细菌都有它⼀定的⽣理特性,培养时,应⽤不同的营养条件及其他⽣理条件(如温度、培养时间、PH、需氧性质等)去满⾜其要求,才能分别将各种细菌都培养出来。

因此,要得到较全⾯的细菌菌落总数,应将检样接种到⼏种不同的⾮选择性培养基上,并培养在不同条件下,如温度,氧⽓供应等。

但国家颁发的⾷品卫⽣标准对不同⾷品的菌落总数的规定,都是根据⽤普通营养琼脂进⾏需氧培养所得的结果确定的,因此在⾷品的⼀般卫⽣学评价中并不要⽤⼏种不同的⾮选择性培养基培养。

菌落总数的概念及检测方法详解

菌落总数的概念及检测方法详解

菌落总数的概念及检测方法详解一、菌落总数的概念(一)菌落总数食品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等),所得1mL(或1g)检样中形成菌落的总数。

按国家标准方法规定,即在需氧情况下,37℃培养48h,能在平板计数琼脂平板上生长的细菌菌落总数,所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。

因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。

(二)细菌总数细菌总数指一定数量或面积的食品样品.经过适当的处理后,在显微镜下对细菌进行直接计数。

其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。

细菌总数也称细菌直接显微镜数。

通常以1g或1mL或1cm2样品中的细菌总数来表示。

(三)菌落总数在食品卫生质量评价中的意义1、食品中细菌数量可反映该食品被污染的程度新鲜的食品内部一般是没有或很少有细菌的,但由于外界污染情况不同,食品被细菌污染的多少就有所不同。

食品中细菌数量越多,说明被污染的程度就越严重,越不新鲜,对人体健康威胁越大。

相反,食品中菌数越少,说明该食品被污染的程度越轻,食品卫生质量越好,对人体健康影响也越小。

2、食品中细菌数量可预测食品耐放程度和时间一般讲,细菌数越少,食品耐放时间越长;相反,食品耐放时间就越短,例如用0℃保存牛肉,菌落总数为l03CFU/cm2时,可保存18天,而当菌落总数增至l05CFU/cm2时则只能保存7天。

另外,用0℃保存鱼时,菌落总数为l05CFU/cm2时可保存6天。

而菌落总数在l03CFU/cm2时则可保存12天。

3、食品中细菌数量可估测出食品腐败状况一般认为日常食品的活菌数为l04~l07CFU/g。

而当活菌数达到l08CFU/g则可认为处于初期腐败阶段。

例如,活的家禽,皮肤表面的细菌数可低到1.5×l03CFU/cm2。

菌落总数的测定

菌落总数的测定

菌落总数的测定一、菌落总数介绍:菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。

当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。

菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数。

按国家标准方法规定,即在需氧情况下,37℃培养48h,能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数,所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。

因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。

菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价。

菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。

二、检验方法菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每克(或每ml)原始样品中所含细菌菌落总数。

基本操作一般包括:样品的稀释--倾注平皿--培养48小时--计数报告。

国内外菌落总数测定方法基本一致,从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同,只是在某些具体要求方面稍有差别,如有的国家在样品稀释和倾注培养进,对吸管内液体的流速,稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。

检验方法参见:GB4789.2-94《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验菌落总数测定》SN0168-92《中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品菌落计数》三、说明(一)样品的处理和稀释:1.操作方法:以无菌操作取检样25g(或25ml),放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振要或研磨制成1:10的均匀稀释液。

微生物菌落总数的测定—菌落总数的概念和测定意义

微生物菌落总数的测定—菌落总数的概念和测定意义

现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生
长。
• 菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,也 不能区分其中细菌的种类,只包括一群在计数平 板琼脂中生长发育、嗜中温的需氧和兼性厌氧的 细菌菌落总数,所以有时被称为杂菌数,需氧菌 数等。

2 菌落总数测定的卫生学意义
(1)菌落总数主要作为判别食品被污染程度的 标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁 殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提 供依据。
(2) 食品中细菌菌落总数越多,则食品含有致 病菌的可能性越大,食品质量越差;菌落总数越 小,则食品含有致病菌的可能性越小。须配合大 肠菌群和致病菌的检验,才能对食品做出较全面 的评价。
3、细菌总数
指一定数量或面积的食品样品.经过适当的 处理后,在显微镜下对细菌进行直接计数。其中 包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。细菌总数 也称细菌直接显微镜数。通常以1 g或1 mL样品 中的细菌总数来表示。
菌落总数的测定
(GB 4789.2—2010)
• 一、 目的
• 1、 学习并掌握食品中菌落总数测定方法和 原理。 2 、了解菌落总数测定在对被样品进行卫生学 评价中的意义 。
二、原理

细菌数量的表示方法由于所采用的计数
方法不同而有两种:处理,在一定条件下
培养后,所得1g或1mL检样中形成的细菌菌落
总数。以 CFU/g(mL)来表示。

一定条件包括培养基成分、培养温度和时
间、pH、是否需要氧气等。

按国家标准方法规定,即在需氧情况下,
36 ±1℃培养48±2 h,能在平板计数琼脂上生长
发育的细菌菌落总数。所以厌氧或微需氧菌、
有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于

菌落总数测定的方法

菌落总数测定的方法

菌落总数测定的方法
菌落总数测定是一种常见的微生物检测方法,用于检验食品、水、药物、化妆品等样品中微生物的数量。

其测定步骤如下:
1. 准备好样品。

2. 将样品按一定比例加入培养基中,使得微生物得以繁殖。

3. 将培养基混匀后,将其倒入培养皿中,使得培养基均匀分布。

4. 使用平板法、斜板法或混合法等方法将培养皿中的培养基表面均匀涂布。

可根据样品中微生物的预估数量选择相应的涂布方式。

平板法适用于样品量较小的场合,斜板法适用于样品数量较大且需要进行质粘分析的场合,混合法适用于样品中微生物数量较低的情况。

5. 使用孔气道计数器或无菌的计数棒对培养皿进行计数,并计算得到菌落总数。

菌落总数可以根据前述涂布方式和培养时间进行调整。

通常,气道计数器需要在24-48小时内完成计数,而计数棒测定则需要在3-5天后进行。

6. 记录测定结果和样品信息,并分析评估菌落总数是否符合卫生标准。

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菌落总数检验
菌落总数(Aerobic bacterialcount)就是指食品工业检样经过处理,在一定条件下培养后,所得1g或1ml检样中所含细菌菌落的总数。

1、实验前准备
a.实验器具的杀菌准备:报纸包平板和移液管,报纸包广口瓶和三角瓶的口径部,干热灭菌160℃ 2个小时,杀菌完毕冷却后放入超净工作台备用(使用前不能撕开报纸)。

b.配制培养基:按标准配制所需培养基,买的现成培养基的话,按包装说明配制。

称取一定量的培养基倒入三角瓶中,加入一定量的蒸馏水,搅匀,置于电炉子上加热至沸腾,立即拿下盖上胶皮塞,报纸包住,121℃湿热灭菌15分钟,杀菌完毕待压力降为零时方可打开锅盖,拿出放入46℃的水浴锅备用,多余的放入冰箱备用,下次使用前电炉子上加热融化待用。

c.配制生理盐水:按标准要求配制生理盐水,称8.5g氯化钠加入到1000mL蒸馏水中,配成0.85%的,报纸包住上口,放入121℃高压杀菌锅杀菌15分钟,冷却备用(可放入冰箱备用,防止感染细菌)。

2、实验前实验室的准备
a.洁净间紫外线杀菌半小时。

b.超净工作台紫外线杀菌半小时(杀菌前将本次试验所需的平板、移液管补齐)。

c.杀菌完毕,注意关闭杀菌灯大约十几分钟后再进入,难免吸入紫外线的难闻气味。

3、实验
a.实验前点燃酒精灯,在酒精灯旁操作
b.实验时用酒精棉球擦拭手心手背、桌面、洗耳球和样品等要接触的物品表面,对其进行进行消毒
c.样品准备
液体样品:移液管吸取25ml样品于杀菌的广口瓶中,再倒入225ml灭菌生理盐水,摇匀,再倒入无菌均质袋内用无菌均质器拍打均匀;
固体样品:称取25g粉末样品于杀菌的广口瓶中,再进行与上述同样的处理;若
是固体,需要先按GB4789样品处理的方法进行处理。

d.按样品需要做2--3个稀释度
e.注样、倒平板
平板标记,注入对应稀释度的样品,再倒入准备好的培养基,略微晃匀(不能用力过大,摇到平板侧壁、上面或外面可能会感染细菌);
同时,做空白对照;
等琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃恒温箱内培养(48±2)h取出,计算平板内菌落数目乘以倍数,即得1mL样品所含菌落总数。

4、试验后处理
a.将剩余的杀菌的平板和移液管继续用报纸包住,放于超净工作台内。

b.倒平板后若余有培养基,则需要对三角瓶口进行灼烧,密封,放于冰箱内。

c.酒精擦拭台面,开启超净工作台和室内紫外线杀菌半小时。

5、菌落计数和报告
参照GB4789.2。

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