碱裂解发制备质粒DNA原理
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它既能使细菌细胞裂解,又能使一些蛋白质变性(NaOH对细胞的裂解作用强于SDS)
在离心时,大部分主染色体与细胞碎片,杂质等缠绕一起被沉淀,而可溶性的质粒DNA留在上清夜中
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0.1
NaOH主要是为了溶解细胞,释放DNA
因为长时间的碱性条件会打断DNA50
50
泳动速度:共价闭合环状>线性>开环碱法抽提得到质粒样品中不含线性DNA
是超螺旋、开环和复制中间体
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如何去除RNA,如何将质粒与细菌基因组DNA 分开,如何去除蛋白质及其它杂质。
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