杂质检查(4节砷盐检查5注射剂有关物质的检查)概要

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第六章
AgDDC 5ml
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第六章
3.测定方法 (1)仪器装置。见图 A为100ml标准磨口锥形瓶； B为中空的标准磨口塞, C导气管 (一端的外径为8mm，内径为6mm；另一端长 18Omm，外径4mm,内径1.6mm,尖端内径为1mm); D为平底玻璃管(长180mm,内径1Omm,于5.0ml处有一刻度)。 测试时,于导管C中装入醋酸铅棉花60mg(装管高度约80mm), 并于D管中精密加入二乙基二硫代氨基甲酸银试液5ml。
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第六章
(2)标准砷对照液的制备: 精密量取标准砷溶液5ml,置A瓶中,加盐 酸5ml与水21ml,再加碘化钾试液5ml与酸性 氯化亚锡试液5滴,在室温放置10min后,加锌 粒2g,立即将导气管C与A瓶密塞,使生成的砷 化氢气体导入D管中,并将A瓶置25~40℃水 浴中反应45min,取出D管,添加氯仿至刻度, 混匀,即得。 若供试品需经有机破坏再行检砷,则应取 标准砷溶液代替供试品，照各品种项下规定 的方法同法处理后，依法制备标准对照液。
形成锌锡齐，有利于 反应平稳的进行
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第六章
古蔡氏法检查砷装置(见图)、 分析天平(0.0001g感量)、架盘天 平(0.lg感量)、恒温水浴锅、马福炉、 坩锅、干燥器、变色硅胶(干燥剂)、 量瓶（100ml、100Oml）、量筒 (10ml)、定量滤纸。 盐酸、碘化钾、锌粒、稀硫酸、20% 氢氧化钠溶液、酸性氯化亚锡试液、 溴化汞试纸、醋酸铅棉花。
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第六章
必要时 , 可将所得溶液转移至 1cm 吸收池中 , 照紫外 - 可见分光光度法在 510nm 波长处以二乙基二硫代氨基甲 酸银试液作空白 , 测定吸收度 , 与标准 砷对照液按同法测得的吸收度比较 ,即 得。
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第六章 4.记录 记录供试品溶液的颜色与标准砷对照液的 颜色；或供试品溶液与标准砷对照液吸收度数 据。
(一)黄连上清丸中的坤盐检查
取本品5丸,切碎,过二号筛,取1.Og,称定质量。 加无水氢氧化钙1g,加少量水,搅匀,烘干,用小火 缓缓炽灼至炭化,再在500~600℃炽灼至完全灰 化(同时作空白,留做标准砷斑用),放冷,转入A瓶 中,加盐酸7ml使溶解,再加水21ml,再加碘化钾试 液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴,在室温放置 1Omin后,加锌粒2g,立即将已装入醋酸铅棉花的 导气管C与已于旋塞D的顶端平面上放上一片溴 化汞试纸,盖上旋塞E并旋紧,密塞于A瓶中,并将 A瓶置25~40℃水浴中反应45min,取出溴化汞试 纸,将生成的砷斑与标准砷斑比较,颜色浅于标准 砷斑或相近者,则黄连上清丸砷盐限量检查符合 规定(不得过百万分之二),若颜色更深,则砷盐限 量检查不符合规定。
第五节
砷盐检查法
第六章
一、概述
砷盐检查法系指用于药 品中微量砷盐(以As计算)的 限量检查方法。
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第六章 因近年来由于药材种植受除草剂、杀虫剂和磷酸盐 肥料等的影响,中药制剂的原药材中残存有三价砷。 砷是原生质毒,能与细胞酶系统的巯基(-SH)相结合, 而抑制含巯基酶的活性,影响细胞的正常代谢,导致细 胞死亡,并引起一系列严重的中毒症,如血小板减少, 扩张毛细血管,麻痹血管舒缩中枢,使腹腔脏器严重充 血,引起肝、肾、心等实质器官的损害以及致癌、致 畸、致突变。目前东南亚国家和地区对口服中药砷 含量有限量要求,一般要求低于5μg/g。故《中国药 典》2005年版规定了某些中药制剂的砷盐限量要求, 如阿胶的砷盐含量不得过百万分之三,黄连上清丸的 砷盐含量不得过百万分之二。
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第六章 二、鞣质
取注射液1ml，加新配制的含1%鸡 蛋清的生理氯化钠5ml（必要时，用微孔 滤膜（0.45μm）），放置10min，不得 出现浑浊或沉淀。如出现浑浊或沉淀， 取注射液1ml，加稀醋酸1滴，再加氯化 钠明胶试液4～5滴，不得出现浑浊和沉 淀。 含有聚乙二醇、聚山梨酯等聚氧乙烯 基物质的注射液，虽有鞣质也不产生沉 淀，对这类注射液应取未加附加剂前的 半成品检查。
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第六章
4.记录 供试品生成的砷斑颜色与标准砷斑的颜色。 5.结果判断 供试品生成的砷斑颜色比标准砷斑颜色 浅或接近,则砷盐限量检查符合规定,若供试 品生成的砷斑颜色比标准砷斑颜色深,则砷 盐限量检查不符合规定。
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第六章
(二)第二法 (二乙基二硫代氨基甲酸银法 Ag-DDC法) 1.测定原理 利用金属锌与酸作用产生新生态的氢, 与药品中的微量亚砷酸盐反应生成具有挥 发性的砷化氢,用二乙基二硫代氨基甲酸银 溶液吸收,使之还原生成红色胶态银,与同 条件下一定量标准砷溶液所产生的红色胶 态银进行比较，或在510nm处测吸光度进 行比较,以判定砷盐的含量是否超限。
5.结果判断 供试品溶液的颜色比标准砷对照液浅或接 近,则砷盐限量检查符合规定,若供试品溶液的 颜色比标准砷对照液深,则砷盐限量检查不符 合规定；或供试品溶液的吸收度低于或等于标 准砷对照液,则砷盐限量检查符合规定,若供试 品溶液的吸收度高于标准砷对照液,则砷盐限 量检查不符合规定。
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
第六章
黄连上清丸是由黄连、栀子、连翘、防风、石膏、甘草等17味 中药制成的大蜜丸,因其中含有矿物药石膏,故需检查砷盐。《中国 药典》规定选用第一法(古蔡氏法)测定。
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第六章 (二)阿胶中的砷盐检查
阿胶为驴皮经煎煮、浓缩制成的固体胶。生产中 使用明矾作沉淀剂,可能会引入重金属,故《中国药典》 规定用第二法(二乙基二硫代氨基甲酸银法)检查砷盐。 取本品2.Og,加氢氧化钙1g,混合,加少量水,搅 匀、,干燥后先用小火烧灼使炭化,再在500~600℃炽 灼至完全灰化,放冷,加盐酸3ml与适量的水使溶解成 30ml,分取溶液10ml,加盐酸4ml与水14ml,再加碘化 钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴,在室温放置 10min后,加锌粒2g,立即将导气管C与A瓶密塞,使生 成的砷化氢气体导人D管中,并将A瓶置25~40℃水浴 中反应45min,取出D管,添加氯仿至刻度,混匀。将所 得溶液与标准砷对照液同置白色背景上,从D管上方向 下观察比较,所得溶液的颜色比标准砷对照液浅或相 近,则阿胶砷盐限量检查符合规定(不得过百万分之三), 若更深,则砷盐限量检查不符合规定。
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第六章
3.操作方法 – (1)仪器装置。见下图。A为100ml标准磨口锥形瓶；B 为中空的标准磨口塞,上连导气管C（外径8.Omm,内径 0.6mm）,全长约180mm； D为具孔的有机玻璃旋塞, 其上部为圆形平面,中央有一圆孔,孔径与导气管C的内 径一致,其下部孔径与导气管C的外径相适应,将导气管C 的顶瑞套入旋塞下部孔内,并使管壁与旋塞的圆孔适相 吻合,黏合固定；E为中央具有圆孔（孔径6.Omm）的 有机玻璃旋塞盖,与D紧密吻合。 – 测试时,于导气管C中装入醋酸铅棉花60mg（装管高度 为60~80mm）,再于旋塞D的顶端平面上放一片溴化汞 试纸（试纸大小以能覆盖孔径而不露出平面外为宜）, 盖上旋塞E并旋紧,即得。
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第六章
(3)检查法。取照各药品项下规定方法 制成的供试液 , 置 A 瓶中 , 再加碘化钾试 液 5ml 与酸性氯化亚锡试液 5 滴 , 在室温 放置10min后,加锌粒2g,立即将导气管C 与 A 瓶密塞 , 使生成的砷化氢气体导人 D 管 中 , 并 将 A 瓶 置 25~40℃ 水 浴 中 反 应 45min, 取出 D 管 , 添加氯仿至刻度 , 混匀。 将所得溶液与标准砷对照液同置白色背 景上 , 从 D 管上方向下观察、比较 , 所得 溶液的颜色不得比标准砷对照液更深。
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第六章
(一) 第一法(古蔡氏法)
测定原理：本法系采用锌和酸作用所产
生的初生态氢与供试品中微量砷盐化合物 反应生成挥发性砷化氢,再与溴化汞试纸作 用生成黄色至棕色砷斑。 比较供试品与标准砷溶液在同一条件 下所显的砷斑的颜色深浅,以测得供试品的 含砷量是否超限。
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第六章
初生态的氢
① AsO33-+3Zn+9H+→AsH3↑+3Zn2++3H ② AsH3+2HgBr2→2HBr+AsH(HgBr)2(黄色） （溴化汞试纸）
AsH3+3HgBr2→3HBr+As(HgBr)3 (棕色)
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第六章
五价砷在酸性溶液中也能被金属锌还原 为砷化氢,但生成砷化氢比三价砷慢。三 价砷生成砷化氢在2h内已反应完全,而五 价砷在同时间内仅2/10起反应。为了防 止五价砷存在,影响测定结果的准确性,故 必须加入碘化钾、酸性氯化亚锡还原剂, 将五价砷还原为三价砷。碘化钾被氧化 生成I2,以氯化亚锡来还原,使反应液中维 持有碘化钾的还原剂存在。
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第六章
As(V)反应慢，须将As(V)还原成As(III) 1、 AsO43-+2I-+2H+ →AsO33-+I2+H2O
2、 AsO43-+Sn2++2H+→AsO33-+Sn4++H2O 3、 I2+Sn2+→2I-+ Sn4+
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第六章
• 溶液中的碘离子,与反应中产生的锌离子能形 成配合物,使生成砷化氢的反应不断进行。 4、4I-+Zn2+→[ZnI4]2促进反应向右进行
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第六章
古蔡氏法检查砷装置 A: 100ml标准磨口 锥形瓶 B: 中空的标准磨口 塞 C: 导气管(外径 8.0mm，内6.0mm)， 全长约180mm D/E :具孔（孔径 6.0mm）的有机 玻璃旋塞
HgBr2 试纸
醋酸铅棉60mg (装管高度6-8cm)
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第六章
溶液2ml,置A瓶中,加盐酸5ml与水21ml, 再加碘化钾试液5ml与酸性氯化亚锡试 液5滴,在室温放置1Omin后,加锌粒2g, 立即将照上法装妥的导气管C密塞于A 瓶上,并将A瓶置25~40℃水浴中,反应 45min,取出溴化汞试纸,即得。 若供试品需经有机破坏再行检砷, 则应取标准砷溶液代替供试品，照各品 种项下规定的方法同法处理后，依法制 备标准砷斑。
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(2)标准砷斑的制备。精密量取标准砷
第六章
（ 3 ）检查法。取按各药品项 下规定方法制成的供试品溶液 , 置A瓶中,加碘化钾试液5ml与酸 性氯化亚锡试液5滴,在室温放置 10min 后,加锌粒2g,立即将照前 法装妥的导气管C密塞于A瓶上, 并将 A 瓶置 25~40℃水浴中 , 反 应45min,取出溴化汞试纸。将 生成的砷斑与标准砷斑比较, 不得更深。
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第六章
二、测定方法 《中国药典》2005年版（一部） 收载了两种砷盐检查法: 第一法(古蔡氏法) 第二法(二乙基二硫代氨基甲酸银 法)
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第六章
制备标准砷溶液:称取三氧化二砷
0.132g,置1000ml量瓶中,加 20%NaOH溶液5ml溶解后,用适量的稀 硫酸中和,再加稀硫酸10ml,用水稀释至 刻度,摇匀,作为贮备液。临用前,精密量 取贮备液10ml,置lOOOml量瓶中,加稀 硫酸10ml,用水稀释至刻度,摇匀,即得 (每lml相当于1μg的As)。
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第六章
• （
第四节 注射剂有关物质检查法
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第六章
注射剂有关物质系指中药材经提取、 纯化制成注射剂后，残留在注射剂中可能 含有并需要控制的物质。 除另有规定外，一般还应控制蛋白质、 鞣质、树脂等；静脉注射液还应控制草酸 盐、钾离子等，其检查方法如下：
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第六章
一、蛋白质 取注射液1ml，加新配制的30%磺基 水杨酸试液1ml，混匀，放置5min， 不得出现浑浊。注射液中如含有遇酸 能产生沉淀的成分，可改加鞣酸试液 1～3滴，不得出现浑浊。
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第六章
2.仪器与试剂 • 二乙基二硫代氨基甲酸银法检查砷装置(图 5-3)、分析天平(0.0001g感量)、架盘天 平(0.1g感量)、分光光度计、比色计、恒 温水浴锅、马福炉、坩锅、恒温干燥箱(精 确士1℃)、干燥器、变色硅胶(干燥剂)、 量瓶(100ml、100Oml)、量筒(10ml)。 • 定量滤纸、盐酸、碘化钾、锌粒、稀硫酸、 二乙基二硫代氨基甲酸银试液、酸性氯化 亚锡试液、氯仿、醋酸铅棉花。
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第六章
5、氯化亚锡与碘化钾存在,还可抑制锑化氢生成,在 试验条件下,100μg锑存在不至于干扰测定。 同时氯化亚锡的作用可在锌粒表面形成锌锡齐(锌 锡的合金)起去极化作用,使锌粒与盐酸作用缓和, 放出氢气均匀,使产生的砷化氢气体一致,有利于砷 斑的形成,增加反应的灵敏度和准确度。
6、 Sn2++Zn→Sn+Zn2+