微生物操作培训大纲
微生物培训计划及记录
微生物培训计划及记录一、培训目的和意义微生物在生物学中是一个非常重要的研究领域,其研究不仅对人类的健康和环境保护有着重要的意义,还可以应用于食品加工、医疗健康、环境治理等方面。
因此,对微生物的研究和了解是非常有必要的。
为了提高员工对微生物的认识和了解,特制定本培训计划。
二、培训对象本次微生物培训面向公司所有员工,尤其是从事生物学研究、食品加工、医疗健康、环境保护等相关工作的员工。
三、培训时间和地点培训时间:8月1日至8月10日培训地点:公司会议室四、培训内容1. 微生物的基本概念介绍微生物的概念及其分类、特点等。
2. 微生物在食品加工中的应用介绍食品加工中常见的微生物,包括酵母菌、乳酸菌等,以及它们在食品加工中的作用。
3. 微生物在医疗健康中的应用介绍微生物在医疗领域中的应用,包括疫苗、抗生素等。
4. 微生物在环境保护中的应用介绍微生物在环境保护中的作用,包括污水处理、土壤修复等。
5. 微生物的培养和鉴定技术介绍微生物的培养和鉴定技术,包括常规培养方法、PCR技术等。
6. 微生物的危害和预防介绍微生物的危害及其预防措施,包括食品安全、医院感染控制等。
五、培训方法1. 理论讲解:通过PPT、视频等多媒体资料,对微生物的相关知识进行深入讲解。
2. 实践操作:通过实验操作,让学员们亲自动手培养和鉴定微生物,加深对微生物的认识。
3. 互动讨论:开展小组讨论和互动交流,让学员们可以自由发表意见,共同学习。
六、培训考核1. 阶段测试:每天进行一次阶段测试,测试学员对当天学习内容的掌握情况。
2. 期末考核:培训结束后进行期末考核,考核内容包括理论知识和实践操作的能力。
七、培训后的评估和总结1. 培训评估:培训结束后,对学员进行培训效果的评估,以及对培训内容和方法的反馈意见。
2. 培训总结:总结培训过程中的优缺点,为今后的培训提供参考和改进方向。
八、培训记录(具体培训记录见下表)日期培训内容培训方式考核情况8月1日微生物的基本概念理论讲解通过8月2日微生物的基本概念实践操作通过8月3日微生物的应用理论讲解通过8月4日微生物的应用实践操作通过8月5日微生物的应用实践操作通过8月6日微生物的培养理论讲解通过8月7日微生物的培养实践操作通过8月8日微生物的危害理论讲解通过8月9日微生物的预防理论讲解通过8月10日期末考核考核测试通过经过10天的培训,学员们基本掌握了微生物的基本概念、应用和培养技术等知识,并且具备了一定的实践操作能力。
微生物基础知识培训内容大纲
微生物基础知识培训内容大纲一、目录1、微生物是什么?(微生物基础)2、为什么要控制微生物?(危害)3、怎样控制微生物?1、微生物定义所谓微生物是指个体微小,必须借助于显微镜才能看清它们外形的一群低等的、原始的微小生物,如细菌。
(体型微小,必须借助于光学显微镜或电子显微镜才能看到它们的结构,结构简单,有的具有细胞构造,有的甚至没有细胞构造,生长繁殖快,对物质具有非常强烈的转化作用;容易引起变异,以致微生物的种类特别繁多,并且新的种类还在不断产生;数量多,分布广,对自然环境的适应性强,以致在自然界的任何地方如土壤、空气、水以及人和动植物体上都有微生物生活或生存。
2、微生物的特点微生物是结构简单、繁殖快、分布广、个体最小的生物。
2.1结构简单:微生物多数是单细胞;2.2生长旺,繁殖快(大肠杆菌在它的适宜37~44°C之间,20~30分钟繁殖一代);2.3分布广.种类多(10万多种):自然界中到处都有,如水、空气、土壤等;2.4个体小:小于0.1mm。
肉眼不可见;2.5适应性强,易变异;2.6代谢强,转化快。
食品中微生物的污染来源水、空气、土壤、人和动植物3、微生物在自然界的分布自然界中微生物的分布极为广泛,水中、高山、海底、荒漠、极地、空气等到处都生存着各种各样、形形色色的微生物。
3.1土壤中的微生物:土壤是微生物的天然培养基,它具备微生物正常发育所必须的一切条件;土壤中含有一定的无机物和有机物;土壤中含有适当的水分;大多数中性偏碱,适合大多数微生物生长;土壤中还含有气体,主要是CO2、O2和N2;温度变化不大(10-25°C)。
3.2水中的微生物水也是微生物存在的天然环境,水中的细菌来自土壤、尘埃、污水、人畜排泄物及垃圾等。
水中微生物种类及数量因水源不同而异。
受到污染的水中含有大量的有机物,适合微生物的生存。
静水中的微生物多,流水中的少;离岸近处微生物多,离岸远处少;经过大城市的河流,水受到污染,含有大量的粪便.并含有大量的致病菌。
微生物工程教学大纲
微生物工程教学大纲
一、课程简介
微生物工程是应用微生物学和工程学的原理和方法,研究和开
发微生物的活性代谢产物及其在工业、农业、医学等领域的应用的
学科。
本课程旨在培养学生对微生物工程的基本理论和实践技术的
掌握,使其具备从事微生物工程相关研究与应用的能力。
二、教学目标
1. 了解微生物工程的基本概念、发展历程和研究领域。
2. 掌握微生物工程实验的基本操作技能和实验室安全操作规范。
3. 熟悉微生物工程的典型研究方法、技术和设备。
4. 理解微生物工程在工业、农业、医学等领域中的应用。
5. 培养学生的创新思维和科学研究能力。
三、教学内容
1. 微生物工程的基本概念与发展历程
- 微生物工程的定义和基本概念
- 微生物工程的发展历程及现状
- 微生物工程的研究领域和应用前景2. 微生物工程实验室安全与操作规范 - 实验室安全的意义和重要性
- 实验室安全管理的基本要求
- 微生物工程实验室的安全操作规程3. 微生物生长与培养技术
- 微生物生长曲线及其解释
- 常用微生物培养技术和设备
- 微生物细胞工厂的构建与优化4. 微生物代谢途径与调控
- 微生物代谢途径的基本特点
- 代谢调控的机制和方法
- 代谢工程的应用和展望。
微生物灭菌操作规程培训
微生物灭菌操作规程培训
《微生物灭菌操作规程培训》
为了确保在微生物实验室中进行安全可靠的工作,灭菌操作规程培训是至关重要的。
下面是一些内容,可以包括在微生物灭菌操作规程培训中。
首先,培训需要介绍相关的理论知识,包括微生物的性质、传播途径及危害性。
接着需要详细讲解微生物灭菌的目的、方法和操作流程。
这其中,需要介绍常用的灭菌设备和消毒剂,以及它们的使用要求和注意事项。
其次,培训中需要重点强调个人防护措施,包括穿戴个人防护装备、正确使用洗手液和消毒剂等。
此外,培训还应包括对工作场所的卫生和环境监测要求,以及应急情况下的处理措施。
此外,实践操作是培训中不可或缺的一环。
通过现场演示和实践操作,能够帮助参与者熟练掌握微生物灭菌的操作流程,并了解注意事项和应对方式。
实践操作还可以帮助参与者巩固理论知识,增强对微生物灭菌的操作技能。
最后,培训课程结束后,可以通过考试或者实际操作来评估参与者对微生物灭菌操作的掌握程度。
并且建议定期进行复习和培训,以确保参与者的知识和技能得到持续的提升和巩固。
微生物灭菌操作规程培训的重要性不可忽视。
只有通过系统性
的培训和实践操作,才能确保在微生物实验室中进行安全可靠的工作,并最大程度地避免微生物对人体和环境的危害。
微生物学实验基本技能培训
微生物学实验基本技能培训第一部分微生物学实验基本技能培训2人/组)4学时,第一次实验(绪言介绍本课程的教学大纲、实验指导书、实验要求和考核方法;介绍本学期《微生物学实验》课程的内容安排和时间安排。
介绍微生物实验室须知事项,注意生物安全、水电防火安全等。
介绍实验预习报告与实验报告的统一格式和要求。
实验预习报告:标题目的要求原理实验器材操作步骤(含注意事项)预期结果实验报告:标题实验器材实验程序与操作要点结果讨论与体会思考题考核:评分比例:平时考核占60%,期末考核占40%。
平时考核内容包括预习报告、实验操作及实验报告(各占20%,40%, 40%。
)平时考核登记++++:65,D:60,:,C80B85,:,A:95A90B:,:,:75C70D,E:≤501实验一培养基的配制与无菌器材的准备(9月27日)一、目的要求1、明确培养基的配制原理。
2、通过对基础培养基的配制,掌握配制培养基的一般方法和步骤。
3、了解灭菌的常用方法及应用对象。
4、学习高压蒸汽灭菌锅的操作方法及注意事项。
5、学习干热灭菌的操作技术。
6、了解分离培养微生物前的有关准备工作。
二、基本原理培养基是人工配制的适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,它是进行科学研究,生产微生物制品及应用等方面的基础。
由于各类微生物对营养的要求不同,培养目的和检测需要不同,因而培养基的种类很多,要根据培养目的和检测需要不同,选择配制不同的培养基。
高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。
待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸汽不能溢出,而增加了灭菌器内的压力,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
适用于一般培养基、玻璃器皿、无菌水、金属用具。
一般培养基在121.3℃灭菌20分钟即可。
干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
(完整版)微生物学教学大纲
课程编号:《微生物学》授课大纲学时数: 72讲课:72学制:四年制本科适合专业:生物科学有关专业一、本课程的性质和任务(一)课程的性质微生物学是生命科学中一门理论与实践性较强的重要基础课程,是一门对现代生命科学的发展发挥着不可以取代的重要作用的学科,故本课程分为理论解说和实践授课两大部分(实验部分还有授课大纲)。
理论课授课主要解说微生物发展的历史、微生物的形态构造、营养和代谢特点、遗传规律、生态、传染与免疫和系统分类等内容。
(二)课程的任务:本课程主要面对生物科学专业的本科学生讲课,是专业必修课。
经过学习微生物的形态构造、生理生化、生长生殖、遗传变异、生态分布、传染免疫、分类判断以及微生物与其他生物的互有关系及其多样性,在工、农、医等方面的应用,认识该学科的发展前沿、热点和问题,使学生牢固掌握微生物学的基本理论和基础知识,认识微生物的基本特点及其生命活动规律,为学生今后的学习及工作实践打下宽厚的基础。
二、本课程与其他课程的联系:微生物学是一门专业基础课,与好多课程关系亲近,应在生物化学、遗传学、生理学等课程的基础进步行学习,并为今后专业课,如遗传学、生物化学等课程的学习确定基础。
三、授课内容(一)第一章绪论一、本学期的授课安排二、微生物和你三、微生物学四、微生物的发现和微生物学的发展五、 20 世纪的微生物学六、 21 世纪微生物学发展的特点和趋势授课基本要求:学习微生物学这门课程,必定第一认识什么是微生物、主要种类、特点、发展情况、研究意义等等。
本章要修业生在联系本质的情况下掌握微生物的见解、特点,并提起学生学习微生物的兴趣。
主要知识点与重点:微生物的见解、类群及特点。
(二)第二章微生物的纯培养和显微技术第一节微生物的分别和纯培养一、无菌技术二、用固体培养基获得纯培养三、用液体培养基获得纯培养四、单细胞(孢子)分别五、选择培养分别六、微生物的珍藏技术第二节显微镜和显微技术一、显微镜的种类及原理二、显微观察样品的制备第三节显微镜下的微生物一、细菌和古菌二、真菌三、藻类四、原生动物授课基本要求:掌握微生物学研究的基本技术,即无菌技术、纯种分别技术、培养技术及显微镜技术。
医学微生物学教学大纲
医学微生物学教学大纲医学微生物学教学大纲引言:医学微生物学是医学生必修的一门重要课程,它涉及病原微生物的种类、病原机制、传播途径、预防控制等内容。
通过学习医学微生物学,可以帮助医学生了解疾病的发生发展过程,掌握疾病的预防和治疗方法,为未来的临床实践提供基础知识和理论支持。
一、微生物的分类和特征1. 原核生物和真核生物的区别原核生物是指细菌和蓝藻,它们没有真核细胞核,遗传物质位于细胞质中;而真核生物是指真菌、原生动物和动物细胞,它们具有真核细胞核,遗传物质位于细胞核中。
2. 细菌的分类和形态特征细菌按形态可分为球菌、杆菌和螺旋菌,按革兰氏染色可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,按需氧性可分为厌氧菌和需氧菌等。
3. 真菌的分类和生长特点真菌按生活方式可分为寄生真菌和自由生活真菌,按菌丝形态可分为单菌丝和分枝菌丝。
真菌生长缓慢,需要适宜的温度、湿度和营养物质。
二、病原微生物的传播途径1. 空气传播空气传播是指微生物通过气溶胶传播到室内空气中,人们吸入感染。
例如,麻疹病毒和结核杆菌等可以通过空气传播。
2. 飞沫传播飞沫传播是指微生物通过飞沫悬浮在空气中,进入另一个人的呼吸道或黏膜,引起感染。
例如,流感病毒和肺炎链球菌等可以通过飞沫传播。
3. 接触传播接触传播是指微生物通过直接或间接接触传播到人体。
直接接触包括皮肤接触、性接触等;间接接触包括接触污染的物体、血液和体液等。
例如,艾滋病病毒和金黄色葡萄球菌等可以通过接触传播。
三、病原微生物的病原机制1. 细菌的病原机制细菌通过产生毒素、侵袭宿主细胞和免疫逃逸等方式引起感染。
例如,白喉杆菌通过产生白喉毒素破坏宿主细胞,导致白喉病发生。
2. 病毒的病原机制病毒通过感染宿主细胞复制自身,破坏宿主细胞结构和功能,引起疾病。
例如,流感病毒通过侵袭呼吸道上皮细胞,破坏细胞结构,导致流感症状的发生。
3. 真菌的病原机制真菌通过产生外毒素和内毒素,破坏宿主组织和免疫系统,引起感染。
2020版药典微生物限度培训
2020版药典微生物限度培训随着药物行业的不断发展,对药品质量的要求也日益提高。
微生物限度测试是保证药品质量的重要环节之一。
为了加强对微生物限度测试的认识和掌握,提高药品质量管理水平,我们组织了2020版药典微生物限度培训。
以下是本次培训的主要内容:一、微生物限度测试的概念及意义1. 什么是微生物限度测试?2. 微生物限度测试的意义和作用3. 微生物限度测试的国内外标准及法规要求二、微生物限度测试的基本原理1. 微生物的分类及特点2. 微生物限度测试的基本原理3. 微生物限度测试的常用方法三、微生物限度测试的样品处理1. 样品的采集与保存2. 样品的制备及稀释3. 样品处理过程中的注意事项四、微生物限度测试的操作步骤1. 试验前的准备工作2. 实验操作流程及方法3. 实验中的常见问题及解决方法五、微生物限度测试的结果判定1. 微生物限度测试的结果评定标准2. 不合格样品的处理流程3. 结果记录与报告撰写六、微生物限度测试的质量控制1. 实验室环境及设备管理2. 人员操作规范培训3. 内部质量控制与质量保证体系建设七、案例分析与讨论1. 微生物限度测试中的常见问题及解决方法2. 典型案例分析与讨论3. 经验共享与交流以上是本次培训的主要内容安排,希望能够通过本次培训,使各位同事对微生物限度测试有更深入的了解,掌握相关的操作技能,为提高药品质量管理水平,保障人民裙众用药安全作出自己的贡献。
谢谢大家!八、微生物限度测试的应用与实践1. 微生物限度测试在药品生产中的重要性2. 微生物限度测试在不同类型药品中的应用3. 微生物限度测试与药品质量安全的关系微生物限度测试作为药品生产中的重要环节,其结果直接关系到药品的质量安全和疗效。
在不同类型药品中,微生物限度测试的应用也会略有差异,例如在注射剂、口服液、眼药水等不同的药品中,针对微生物限度测试的要求和标准也会有所不同。
通过本次培训,我们还将重点共享微生物限度测试在不同类型药品中的应用实践经验,帮助同事们更好地掌握微生物限度测试的实际操作技能。
医学微生物学教学大纲
医学微生物学教学大纲医学微生物学是医学生必修课程之一,旨在教授学生有关微生物的基本知识和技能。
本教学大纲旨在明确课程目标、内容、教学方法、评估和参考书目,以帮助教师和学生更好地开展学习和教学活动。
二、课程目标1. 掌握微生物学的基本概念和分类体系;2. 理解微生物的形态结构、生长特性和病原机制;3. 学习微生物感染与抗感染的免疫学机制;4. 掌握微生物检测方法和常见微生物致病原理;5. 培养学生的实验技能和科学研究能力。
三、课程内容1. 微生物学概述1.1 微生物的定义和分类1.2 微生物的形态结构和生长特性1.3 微生物与人类的关系2. 微生物的传播和感染2.1 微生物的传播途径2.2 微生物的感染机制2.3 感染性疾病的预防和控制3. 免疫学与微生物3.1 免疫系统的基本概念3.2 免疫系统对微生物感染的免疫机制3.3 免疫学在微生物感染治疗中的应用4. 微生物检测和致病原理4.1 常见微生物检测方法4.2 微生物致病原理及相关疾病的防治措施四、教学方法1. 授课讲解:通过教师的讲解,学生掌握微生物学知识和相关概念;2. 实验教学:开展微生物实验,培养学生的实验技能;3. 讨论与案例分析:通过小组讨论和案例分析,提高学生的问题解决能力;4. 学科竞赛和学术研讨:组织学科竞赛和学术研讨活动,培养学生的创新思维和科学研究能力。
五、评估与考核1. 平时成绩:包括课堂参与、实验报告、小组讨论等;2. 期中考试:考核学生对课程内容的掌握情况;3. 期末考试:综合考核学生对整个课程的理解和能力。
六、参考书目1. 《医学微生物学》李华主编2. 《微生物学导论》刘伟主编3. 《医学微生物学实验教程》张明等编著最后,希望通过本教学大纲的制定和实施,学生能够全面了解和掌握医学微生物学的基本知识和技能,为未来的医学实践奠定坚实的基础。
同时,鼓励学生在学习过程中积极思考和探索,培养其创新能力和科学精神,为推动医学领域的发展作出贡献。
微生物操作培训大纲
微生物检验技术培训大纲一.玻璃器皿准备(1)玻璃器皿的清洗新购进玻璃器皿处理新构进的玻璃器皿,均含有游离碱,故应先浸于洗液或20ml/L盐酸内数小时,再用自来水冲洗干净。
待干燥后,灭菌备用。
日常清洗注意事项a.一切使用过得玻璃器皿,用完后先用清水冲洗干净,然后用热的肥皂水洗刷清洁,再用清水冲数次,蒸馏水冲洗两次,自然风干,备用。
如果肥皂水洗刷仍未清洁,可用洗液浸泡,洗出后用清水冲洗5次以上,再用蒸馏水冲洗两次。
b.吸管用完后应立即用清水和蒸馏水冲洗干净即可,如附有污物可用洗液浸泡。
c.附有油污的器皿,若用热的肥皂水不能洗净时,切不可用洗液浸泡,而应先用热的酒精、汽油或丙醇洗涤;或用氢氧化钠热溶液2(%)浸泡10-15分钟,然后再用稀盐酸洗一次,用水冲洗数次。
油污如仍未出去,再重复以上手续一次。
洗液的配制和使用:a.在35ml重铬酸钾饱和液(重铬酸钾180g溶于100ml水中,或63g重铬酸钾溶于35g水中),慢慢加入粗制浓硫酸1000ml玻璃器皿一般在这种洗液中浸泡2h以上即可除污。
如将其加热至80-100℃(但不可加热至发烟或煮沸,此时温度达240-250℃),浸泡10-15分钟,效力更大。
b.溶解80g重铬酸钾于1000ml温水中,待凉后,徐徐加入粗制浓硫酸100ml于水中即成含硫酸10%的清洗液,使用时,将玻璃器皿先浸于这种洗液中24h,然后清水和蒸馏水冲洗。
c.溶60g重铬酸钾于300ml热水中,慢慢加入粗制浓硫酸460ml,边加边用玻璃棒搅拌,因为此液产生大量热,在配制时应用耐热容器,并放在水槽中以便冷却。
一般玻璃器皿在此溶液中浸泡6h以上即可。
如何判定清洗干净既不聚成水滴,也不成股流下。
(2)微生物检测常用玻璃器皿及规格所用玻璃仪器及规格:吸管:1ml和10ml,标有0.1ml刻度平皿:皿底直径为9cm试管:15×150mm、18×180mm、20×200mm、酒精灯三角瓶:250ml、300ml广口瓶:用于采样大肠菌群:双料:、单料、复发酵单料乳糖胆盐发酵管:20g蛋白胨、10g乳糖、5g胆盐、1.6%溴甲酚紫乙醇溶液0.6ml(0.04%溴甲酚紫水溶液25ml)、蒸馏水100制法:将各成分溶于1000ml水中,溶解后将PH值调至7.4分装于18×180mm试管中,115C高压灭菌15分钟。
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微生物检验技术培训大纲.玻璃器皿准备(1)玻璃器皿的清洗新购进玻璃器皿处理新构进的玻璃器皿,均含有游离碱,故应先浸于洗液或20ml/L 盐酸内数小时,再用自来水冲洗干净。
待干燥后,灭菌备用。
日常清洗注意事项a. 一切使用过得玻璃器皿,用完后先用清水冲洗干净,然后用热的肥皂水洗刷清洁,再用清水冲数次,蒸馏水冲洗两次,自然风干,备用。
如果肥皂水洗刷仍未清洁,可用洗液浸泡,洗出后用清水冲洗 5 次以上,再用蒸馏水冲洗两次。
b. 吸管用完后应立即用清水和蒸馏水冲洗干净即可,如附有污物可用洗液浸泡。
c. 附有油污的器皿,若用热的肥皂水不能洗净时,切不可用洗液浸泡,而应先用热的酒精、汽油或丙醇洗涤;或用氢氧化钠热溶液 2 (%)浸泡10-15 分钟,然后再用稀盐酸洗一次,用水冲洗数次。
油污如仍未出去,再重复以上手续一次。
洗液的配制和使用:a. 在35ml 重铬酸钾饱和液(重铬酸钾180g 溶于100ml 水中,或63g 重铬酸钾溶于35g 水中),慢慢加入粗制浓硫酸1000ml 玻璃器皿一般在这种洗液中浸泡2h以上即可除污。
如将其加热至80-100 C (但不可加热至发烟或煮沸,此时温度达240-250 C),浸泡10-15分钟,效力更大。
b. 溶解80g 重铬酸钾于1000ml 温水中,待凉后,徐徐加入粗制浓硫酸100ml 于水中即成含硫酸10%的清洗液,使用时,将玻璃器皿先浸于这种洗液中24h ,然后清水和蒸馏水冲洗。
c. 溶60g 重铬酸钾于300ml 热水中,慢慢加入粗制浓硫酸460ml ,边加边用玻璃棒搅拌,因为此液产生大量热,在配制时应用耐热容器,并放在水槽中以便冷却。
一般玻璃器皿在此溶液中浸泡6h 以上即可。
如何判定清洗干净既不聚成水滴,也不成股流下。
( 2 )微生物检测常用玻璃器皿及规格所用玻璃仪器及规格:吸管:1ml 和10ml ,标有0.1ml 刻度平皿:皿底直径为9cm试管:15 x 150mm、18 x 180mm、20 x 200mm、酒精灯三角瓶:250ml、300ml广口瓶:用于采样大肠菌群:双料:、单料、复发酵单料乳糖胆盐发酵管:20g蛋白胨、10g乳糖、5g胆盐、1.6 %溴甲酚紫乙醇溶液0.6ml (0.04 %溴甲酚紫水溶液25ml )、蒸馏水100制法:将各成分溶于1000ml水中,溶解后将PH值调至7.4分装于18 x180mm 试管中,115C高压灭菌15分钟。
双料乳糖胆盐发酵管:单料除水外其他各成分加倍,分装于18 x 180mm 试管中. 乳糖发酵管:20g蛋白胨10g乳糖1.6 %溴甲酚紫乙醇溶液0.6ml (0.04 %溴甲酚紫水溶液25ml )蒸馏水1000ml PH 值调至7.4取3ml分装于12 x120mm 试管中,115 °C高压灭菌15分钟。
(3 )玻璃器皿的准备、包扎、高压灭菌条件棉塞制备:用普通棉花纱布做成所需大小的棉塞,高压灭菌固定。
吸管:在吸管的上端塞上一小段棉花,防止吸管中的菌液、酸液、碱液等吸入口中。
塞入的棉花应与吸管口保持5mm左右的距离棉花全长不短于10mm,赛好棉花后用截成条的旧报纸包装,先把吸管的尖端放在纸条的一端,45度角折叠纸条,包住尖端。
以螺旋式包扎剩余的纸条折叠打结,也可把塞好棉花的吸管放入铁皮筒中,加盖密封121 0C高压灭菌15分钟。
平皿:用过的培养皿中有废弃的培养基,为了防止杂菌传播污染环境,也应先经高压灭菌或沸水煮沸半小时后,倒掉污物洗涤。
新的培养皿可直接洗刷,洗净后用蒸馏水冲洗三次,培养皿全部向下,一个接一个压着皿边,然后扣在桌子上空净水。
用报纸包好或装在铁皮筒中,121 0C15分钟。
三角瓶:洗刷干净的三角瓶塞上塞子用截成方块的旧报纸包好,用绳子捆住。
二.培养基选用、配制、成分作用、高压灭菌条件(表格)三.高压锅正确使用方法及注意事项使用规则1) 松开紧固螺杆,将器盖翻开,放入消毒物后,为胆内注水,并观测水位至最高水位线即可,在顺时针方向拧紧螺杆后,消毒器就可以接通电源。
2) 加热时,应把放气阀推向垂直放气的位置,使冷空气加热由筒内逸出。
3) 等较急的蒸汽冒出时,关闭蒸汽阀直至压力表指针上升至消毒物所需压力后开始记消毒灭菌时间。
4) 消毒完毕,切断电源,开启上边放气阀,待汽排尽压力表指针回到0时才能打开器盖,开启下面放水阀,排放胆内热水。
5) 对瓶装溶液消毒完毕压力表指针回到0后,必须在放汽水咀打开下,等冷却20分钟左右,方能打开器盖,否则溶液瓶回因突然遇冷而发生爆炸事故。
6) 每次使用完毕应擦干各部件,以防生锈。
注意事项1) 严禁使用不在有效期内的或其它型号的压力表和安全阀2) 该仪器使用一年时必须进行外部检查,使用三年时,必须进行内外部检查;使用六年时,必须进行全面检查。
3) 严禁在消毒器内有压力时打开器盖。
4) 盖上器盖时应轻旋,并在橡胶圈上涂上滑石粉,提高密封圈使用寿命。
5) 不用时消毒器应放在通风处。
四.灭菌后培养基的存放注意事项最好及时用完,不宜保存过久,以免减低其营养价值或化学变化。
培养基在储存期间,因能吸收空气中的二氧化碳而变为酸性。
五.无菌室注意事项(人员、环境、灭菌要求)1. 无菌室要保持清洁整齐,室内仅存放最必须的检验用品,如:酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、接种针、接种环、记号铅等。
2. 室内检验用具及桌凳应保持固定位置,不随便移动。
3. 每2—3 周用2% 石碳酸水溶液擦拭工作台、门、窗、桌凳及地面,然后用2% 石碳酸水溶液喷雾消毒空气,最后紫外灯杀菌半小时。
4. 定期检查室内空气无菌状态,进行细菌和霉菌的检查。
5. 无菌室杀菌前应将所有物品置于操作之部位,然后打开紫外灯杀菌半小时,时间一到,关闭紫外灯待用。
6. 进入无均室以前,必须于缓冲间更换消毒过的工作服、工作帽及工作鞋。
7. 操作应严格按照无菌操作规定进行,操作少说话,不喧哗,以保持环境的无菌状态。
六.无菌室常用消毒方式及消毒剂1. 紫外线杀菌1)紫外线灯的安装一般悬空吊装在接种室或培养室的上方,吊装紫外灯的个数,应根据房间的大小而定,容1-2 人操作的接种室,吊装一个30 瓦的紫外灯就可以了。
如果有的接种室或培养室的空间较大,则除悬空吊装紫外灯之外,还可以在房间的不同角度,安装紫外线灯(开关需要设置在杀菌区室外),以达到比较彻底杀菌的目的。
2)紫外线灯的作用一般在接种室使用之前,应打开紫外灯,照射约20-30 分钟,就基本上可以使室内空气和室壁表面上无菌。
3)使用紫外线应注意的事项紫外线对物质的穿透很小,对普通玻璃也不能透过,因此,紫外线只能进行空气和室壁表面的杀菌。
紫外线对人体皮肤,尤其是对人的眼睛具有杀伤力,所以,不要对着紫外线进行操作,以免眼睛受到伤害。
2. 喷洒石炭酸1)常用浓度为50ml/L 石炭酸(酚)溶液,配制时,可先将盛石炭酸的瓶放在水浴中,使之溶解,再用吸管吸取,配制为50ml/L 的石炭酸溶液。
2)喷洒方式最后退出房间,关门,稍等片刻,即可使用,对于较大的房间,以背负式喷雾器较好,以利于房间死角的消毒。
3)注意事项石要接触炭酸对于皮肤有很强烈的毒害作用,使用时不皮肤。
喷洒石炭酸可以与紫外线杀菌结合使用,这样可增加其杀菌效果。
3. 硫磺熏蒸1)用量每立方米空间需用硫磺3-4g ,熏蒸前,须把硫磺放在金属容器内加热,利用产生的二氧化硫进行熏蒸。
熏蒸前需将地面和墙壁撒水少许,以增加灭菌效果,熏蒸完毕,房间需要密封过夜后才能使用。
次方法灭菌效果比较好,但比较麻烦。
熏蒸时,硫磺蒸汽刺鼻,影响操作和身体健康,应适当注意。
二氧化硫对金属器皿有腐蚀性,熏蒸前应把金属器皿事前搬出,以免发生腐蚀。
4. 乳酸加热熏蒸按熏蒸空间计算,以1ml/m 3的量,量取80% 的乳酸溶液,盛在可加热的容器内,用铁架或其他加热架支好。
在酒精灯或酒精炉内加入适量酒精(以能蒸干所有乳酸溶液为宜,不要超过太多)。
确认待处理区域内没有生产原料、包装材料、成品及半成品,以及所有的生产用容器均以有效保护(盖紧或覆盖严密)。
关闭所有门窗,以及空调、通风系统。
点燃酒精灯或酒精炉,所有人员迅速撤离,关闭出口的门。
任乳酸溶液煮沸挥发。
酒精灯或酒精炉应能在乳酸蒸发完后即自行熄灭。
熏蒸后保持门窗关闭12h 以上,再进行通风,放出剩余有刺激性的气体。
通风时间大约需要12h 。
5. 甲醛加热熏蒸甲醛使用量为2-6ml/m 3,常用浓度为36%-40% 。
方法步骤同乳酸加热熏蒸6. 甲醛氧化熏蒸1)使用量:按甲醛加热熏蒸所需的用量量取定量的甲醛溶液。
按甲醛溶液用量的1/2 称取高锰酸钾,置于一个非金属容器内。
2)使用方式:同乳酸加热熏蒸法,确认处理区域内准备完全后,把甲醛溶液到入盛有高锰酸钾的容器内,人员迅速撤离,关闭出口。
在与高锰酸钾作用产热下,甲醛溶液即沸腾挥发。
熏蒸后保持门窗关闭12h 以上,再进行通风,防出剩余有刺激性的气体。
通风时间大约需要12h 。
七.超净工作台工作原理、注意事项工作原理进风经过初、中效过滤器后(中效过滤器金属框架内饶无纺布制成,其过滤对象是1-10mm 的尘埃,使用一段时间后积尘增多阻力增大效率降低要定期修理或更换; 高效过滤器金属框架内饶超细玻璃纤维滤纸制成过滤对象为小于1um 尘埃,为主要部件)吸入风机,经过风机加压后,经过顶部的高效过滤器过滤的洁净空气垂直送到工作区,然后一部分排至室内,大部分通过台面上的孔回风进行循环。
注意事项1).超净工作台操作区为垂直层流区,因此出风面操作位置不应置多余的物品,以免防碍气流的正常流动,影响洁净度。
2).操作人员应穿洁净的工作服,不宜在工作区附近快速行走,避免把工作区外的空气带入操作区,操作时手的动作要尽量减少洁净空气外流。
3).超净工作台面板上的孔作为回风用,使用时要避免有液体或其它物漏入孔中。
4 )打开风机后5 分钟可以自净。
8.无菌操作、注意事项(酒精灯、接种针或环)无菌操作培养基经高压灭菌后,用经过灭菌的工具(如接种针和吸管等)在无菌条件下接种含菌材料(如样品、菌苔或菌悬液等)于培养基上,这个过程叫做无菌接种操作。
在实验室检验中的各种接种必须是无菌操作。
实验台面不论是什么材料,一律要求光滑、水平。
光滑是便于用消毒剂擦洗;水平是倒琼脂培养基时利于培养皿内平板的厚度保持一致。
在实验台上方,空气流动应缓慢,杂菌应尽量减少,其周围杂菌也应越少越好。
为此,必须清扫室内,关闭实验室的门窗,并用消毒剂进行空气消毒处理,尽可能地减少杂菌的数量。
空气中的杂菌在气流小的情况下,随着灰尘落下,所以接种时,打开培养皿的时间应尽量短。
用于接种的器具必须经干热或火焰等灭菌。
接种环的火焰灭菌方法:通常接种环在火焰上充分烧红(接种柄,一边转动一边慢慢地来回通过火焰三次),冷却,先接触一下培养基,待接种环冷却到室温后,方可用它来挑取含菌材料或菌体,迅速地接种到新的培养基上。