课件医实动学实验(大鼠、小鼠)
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实验三大、小鼠的基本操作技术
[实验目的]:通过大鼠、小鼠的抓取固定、性别辨认、灌胃、注射、采血、麻醉、标记、安乐死、动物剖检、脏器摘除与检查等实际操作,掌握大、小鼠动物实验的基本操作技术。
[实验动物]:大鼠、小鼠
[材料与器材]:大、小鼠饲养盒(带面罩)、大鼠和小鼠手术固定台,常规手术器械、大鼠灌胃针、小鼠灌胃针、lml注射器、5ml注射器、l0ml注射器、烧杯、75%酒精及酒精棉,干棉球。生理盐水、20%乌拉坦溶液(或3%戊巴比妥钠)、乙醚、新洁尔灭、3—5%苦味酸溶液、0.5%中性红或品红溶液、
[实验内容]:
一、实验动物标记编号的方法一染色法
(一)被毛染色法
1、单色涂染法;(3—5%苦味酸溶液,可染成黄色)。
2、双色涂染法:苦味酸(黄色)—为个位数;品红(红色)—为十位数.(二)耳缘打孔法:适于做长期实验用。、
(三)刺数钳烙印法:适用于长期或慢性实验的大动物编号。
(四)号牌法:用于大动物实验。
二、实验动物被毛的去除方法
(一)剪毛法;(二)拔毛法;(三)剃毛法;(四)脱毛法;
三、大鼠、小鼠性别的鉴定
方法步骤:
1、将动物抓取后,腹部朝上,观察肛门与生殖器之间的距离,距离近的为雌性,距离远的为雄性,
2、成年雌性大小鼠有12个乳头。
3、天热时或性成熟后,雄性动物的睾丸一般会从腹腔降至阴囊内,此时易于区别。
四、大鼠、小鼠的抓取和固定
(一)小鼠的抓取固定:
[实验器材]:小鼠饲养盒(带面罩)1套,小鼠防护手套若干。
[方法步骤]:
1、用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部将小鼠提起,放在饲养盒面罩上。
2、用左手拇指和食指迅速、准确地捏住小鼠的两耳后、颈背部的皮肤,将
小鼠提起。
3、翻转左手掌,以左手掌心和中指夹小鼠背部的皮肤,使小鼠整个呈一条
直线。
4、用左手无名指压住小鼠背部的皮肤,小指压住小鼠的尾巴根部。
5、松开捏住小鼠尾巴的右手拇指和食指。
[注意事项]:
1、在抓取动物时,禁止对动物采取突然、粗暴的方法。
2、抓取时注意,过分用力,会使动物窒息或颈椎脱臼,用力过小,动物头
部能反转过来咬伤实验者的手,必须熟练掌握。
(二)大鼠的抓取固定:
大鼠抓取固定的方法有徒手固定、固定板固定、固定器固定、卵圆钳固定和使用立体定位仪进行头部固定等方法。徒手固定法常用于体重小的大鼠灌胃、腹腔注射、肌肉注射和皮下注射等操作。需尾静脉取血时,将大鼠固定在特定的固定器中固定。在进行外科手术或解剖时,须用固定板固定。徒手固定的方法如下:[实验器材]:大鼠饲养盒和面罩1套,大鼠防护手套(帆布或硬皮质手套)。
[方法步骤]:
(1) 首先戴好防护手套。
(2) 用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将大鼠提起,放在大鼠饲养盒的
面罩上,轻轻向后拉尾。
(3) 左手迅速顺势按、卡在大鼠躯干背部,稍加压力向头颈部滑行。
(4) 以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈部皮肤,其余3指和手掌
握住大鼠背部皮肤,置于掌心,完成抓取固定。
(5) 较大体形的大鼠用单手不容易固定,可用右手固定其后肢和尾部,请
助手协助进行实验操作。
{注意事项}:
(1)大鼠牙齿尖锐,性情较烈,在抓取时一定要特别注意,初学者应戴上防
护手套以防咬伤。
(2)抓取时,注意不能捉提大鼠尾尖,因为尾尖易于拉脱,也不能让大鼠悬
在空中时间过长,否则会激怒大鼠翻转咬人。
五、大、小鼠的给药方法:
(一) 小鼠经口灌胃给药
原理:将药液直接注入小鼠的胃内。
器材:小鼠灌胃针1支、注射器1支、小鼠饲养盒(带面罩)1套、生理盐水、烧杯。
方法步骤:
1、将灌胃针连接在注射器上,吸入一定量的药液。
2、操作前,大致测量从口腔到胃的距离,估计出灌胃针头插入的深度。
3、左手固定小鼠,使小鼠头部向上。
3、右手将灌胃针从小鼠口角处进针放进小鼠口咽部,顺咽后壁轻轻往下推,灌胃针会顺着食管滑入小鼠的胃内,灌胃针插入约2—3cm。
4、用右手食指将针栓慢慢往下压,将注射器中的药液灌入小鼠的胃中。
注意事项;
1、操作宜轻柔,防止损伤食管。
2、在灌胃过程中,避免误插入气管。如注入不畅,动物强烈挣扎,表示针头未插入胃内,必须拔出后重新进行。
3、给药容量:约0.5ml/20g体重。
4、进针方向要正确。
(二) 大鼠灌胃给药
[原理]:将药液直接注入大鼠的胃内。
[器材]:大鼠灌胃针1支、注射器1支、大鼠饲养盒+面罩l套、生理盐水、烧杯。
[方法步骤]:
1、将灌胃针连接在注射器上,吸入一定量的药液。
2、左手捉持固定大鼠,右手将灌胃针头尖端放进大鼠口咽部,顺咽后壁轻
轻往下推,灌胃针会顺着食管滑入大鼠的胃内,灌胃针插入约5cm。
3、用右手食指将针栓慢慢往下压,将注射器中的药液灌入大鼠的胃中。 [注意事项]
1、剂量:O.Ol—O.02ml/g体重。
2、其他注意事项同小鼠灌胃给药法。
(二)大、小鼠注射给药
1、皮下注射给药:
[原理]:将药液注入皮下结缔组织,经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环。 [器材]:1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。
[方法步骤]:
(1) 注射部位:选大鼠、小鼠颈背部的皮下。
(2) 常规消毒注射部位的皮肤,用注射针头取一锐角角度刺入皮下。
(3) 针头刺入皮下前后向前2-3mm,再轻轻抽吸,如无回血,可缓慢地将
药物注入皮下。
[注意事项]
(1) 注射量:O.Olml--O.03ml/g体重。
(2)针头刺入皮下后切勿左右晃动。
2、肌肉注射给药
[原理]:将药液注入动物的肌肉组织,经毛细血管吸收进入血液循环。
[器材]:lml注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。
[方法步骤]:
(1) 注射部位,一般选择肌肉丰满而无大血管、神经通过的臀部,大腿
内或外侧。
(2) 操作时1人先将动物抓取保定好。
(3) 另1人常规消毒注射部位后,用左手抓住动物的1条后肢,右手持
注射器,
(4) 将注射器针头在动物后肢大腿外侧肌肉丰富处呈60度角迅速刺入
后注入药液。
[注意事项]