血清肌酸激酶(CK) DGKC推荐方法测定

血清肌酸激酶(CK) DGKC推荐方法测定

1.实验原理

德国临床化学学会(DGKC)和国际临床化学学会(IFCC)推荐的连续监测法。

ADP + 磷酸肌酸CK→肌酸+ ATP

ATP + 葡萄糖HK→ADP + 葡萄糖-6-磷酸

葡萄糖-6-磷酸+ NADP+G6PD→6-磷酸葡萄糖酸+

NADPH +

H+

NADPH在340nm处有特异吸收，通过测定NADPH 生成速率计算出CK活性。

2. 标本：

2.1 病人准备：无特殊要求。

2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。

3. 标本存放：稳定性：2～8℃保存稳定7天;15～25℃保存稳定1天;-20℃保存稳定4周（避光保存）。3天内的活性损失：2～8℃保存24小时或18～22℃保存1小时至少损失10%。

4. 标本运输：常温条件下保存运输。

5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。

6. 实验材料

6.1 试剂欧泰克CK测定试剂盒

6.1.1 试剂组成：

咪唑缓冲液（pH6.7）100mmol/L 磷酸肌酸30mmol/L

葡萄糖20mmol/L

N-乙酰半胱氨酸（NAC）20mmol/L

EDTA-Na22mmol/L

ADP 2mmol/L

NADP 2mmol/L

二腺苷-5'-磷酸10μmol/L 6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6P-DH）2800 U/L 已糖激酶（HK）4000 U/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。

6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。

6.2 校准品：使用罗氏复合校准品对自动分析仪进行

校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。

6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。

7. 仪器：日立7060生化分析仪

8. 操作步骤

8.1 项目基本参数：参见7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件

8.2 仪器操作步骤：参见7060生化分析仪操作规程.SOP文件

9. 检验结果的判断与分析

10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。

11. 计算方法：以罗氏复合校准品CK校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。

12. 参考值范围：（U/L）

健康成年人：女性24～140

男性38～174

13. 临床意义：肌酸激酶（CK）主要由存在于肌肉中的同工酶（CK-M）和存在于脑中的同工酶（CK-B）组

成。在血清中CK形式为CK-MM，CK-MB，CK-BB和巨酶等的二聚物。在心肌损伤或骨骼肌疾病时可以观测到CK活力的升高。CK和CK-MB一起检测有助于心肌梗死的诊断和监视。

14. 线性范围5-1200U/L

16. 病危报警值的处理：无。