荧光检测实例

原子荧光法测定水中汞

原子荧光法测定水中汞摘要：汞作为生物毒性较强的污染物之一，进入生物体之后很难被排出，容易对水质以及人体造成危害性影响。

近些年来，为加强对生活饮用水、地表水中汞元素的测定分析，工作人员主动利用原子荧光法实现对水中汞含量、形态的测定分析。

针对于此，为快速准确测定水中汞，本文主要对原子荧光法测定水中汞的应用原理及方法进行研究与分析，以期可以给相关人员提供一定的借鉴价值。

关键词：原子荧光法；水中汞；测定；分析前言：水质中的汞通常含有大量毒素，会对人体以及水生动植物造成严重危害影响。

一般来说，汞在天然地下水含量较少，在地表水中含量较多。

究其原因，主要是因为地表水中的汞多是源于生产产生工业废水，如化工厂、冶金厂等，经食物链被人体吸收。

结合我国《生活饮用水卫生标准》来看，国家对于饮用水中的汞含量有着严格要求，唯有汞含量低于0.001mg/L的饮用水才可以视为合格的饮用水。

结合相关实践证明来看，人体饮用水上限汞值为0.111mg/L。

近些年来，为强化我国饮用水安全，行业内部对于水质中的汞物质含量测定问题予以了高度重视。

在测定分析过程中，主动利用原子荧光法等测定方法进行实践应用，完成对水中汞物质含量的测定分析。

1测定水中汞的必要性分析水中汞对于人体身心健康以及生态环境安全均有较为严重的负面影响，如果不能加强对水中汞含量的控制与分析，往往会对生态环境安全以及人心健康构成威胁。

近几年来，随着我国测定方法多样化发展，以原子荧光法为首的测定方法在水中汞测定过程中发挥了良好作用。

举例而言，在环境监测期间，工作人员通过对水中汞成分进行严格控制与分析，基本上可以根据分析反馈结果，确立科学合理的管理方案[1]。

与此同时，在水中汞形态测定期间，工作人员可及时发现汞污染问题，并采取针对性措施加以解决。

最主要的是，在测定分析过程中，工作人员可根据测定数据反馈，确定质量控制指标以及相关依据，并在具体管控过程中，以良好机制以及体系形式加强对汞污染问题的管控。

原子荧光光谱分析法测定的应用实例及操作规程

原子荧光光谱分析法测定的应用实例及操作规程原子荧光光谱分析法测定的应用实例原子荧光光谱分析法具有很高的灵敏度，校正曲线的线性范围宽，能进行多元素同时测定。

这些优点使得它在冶金、地质、石油、农业、生物医学、地球化学、材料科学、环境科学等各个领域内获得了相当广泛的应用。

1、原子荧光法测定农产品中砷1）前处理：依照GB/T5009、11—2023的方法，取样品0、5—5、0克，置于50ml小烧杯中或小三角瓶中，加10ml硝酸，0、5ml 高氯酸，1、25ml硫酸，盖上小漏斗，放置过夜。

置于电热板上低温消解1—2小时后，提高温度消解，直至高氯酸烟冒尽时取下。

冷却后转移至25ml比色管中，加入2、5ml5%的硫脲，定容，30分钟后上机测定。

2）仪器条件：AFS230原子荧光分光光度计灯电流：60mA；负高压：300V；其它条件都为仪器默认即可；标准曲线浓度为0,1、0,2、0,4、0,8、0,10、0,ug/L。

用5%的盐酸作载流，1、5%的硼氢化钾作还原剂，进行测定。

2、原子荧光法测定农产品中汞1）前处理：依照GB/T5009、17—2023的方法，取样品0、3—0、5克，不要超过0、5克。

置于微波消解管中，加入5ml硝酸，1ml过氧化氢，拧紧消解管盖子，放置30—60min，再置于微波消解仪中，分三步完成消解步骤。

第一步让温度升至100度左右保持10分钟，第二步让温度升至150度保持10分钟，第三步让温度升至180度保持5分钟。

完成消解后，取出冷却，用0、02%的重铬酸钾溶液转移至25ml比色管中，并用其定容。

摇匀后上机测定。

2）AFS230原子荧光分光光计，灯电流：30mA；负高压：270V；其它条件都为仪器默认即可；标准曲线浓度为0,0、1,0、2,0、4,0、8,1、0ug/L，标准曲线用汞保存液定容。

其中汞保存液为0、02%的重铬酸钾和5%的硝酸混合溶液。

用5%的硝酸作载流，0、5%的硼氢化钾作还原剂，进行测定。

荧光光谱实验报告

荧光光谱实验报告一、引言荧光光谱是研究物质在激发状态下光谱特性的一种方法，广泛应用于化学、物理、生物等领域。

荧光光谱实验是通过将样品置于紫外光激发下，观察样品发出的荧光光谱，并对其进行分析和研究。

本实验旨在利用荧光光谱仪测量不同溶液的荧光光谱，了解荧光光谱的基本原理和应用。

二、实验设备与材料1.荧光光谱仪2.荧光样品：溶液A、溶液B、溶液C3.紫外灯三、实验方法1.准备工作：将荧光光谱仪插上电源，打开电源开关，待仪器稳定后进行下一步操作。

2.样品准备：取适量溶液A、溶液B和溶液C分别倒入三个装有样品槽的石英瓶中。

3.仪器调试：将准备好的样品石英瓶放入荧光光谱仪样品槽中，调整仪器参数，确保光束与样品槽中的溶液垂直穿过。

4.实验步骤：（1）打开紫外灯，置于荧光光谱仪下方。

（2）调节荧光光谱仪的波长范围和积分时间。

（3）依次将溶液A、溶液B和溶液C放入荧光光谱仪样品槽中，测量各溶液的荧光光谱。

（4）记录并保存实验数据。

（5）关闭紫外灯、荧光光谱仪和电源。

四、实验结果与分析将溶液A、溶液B和溶液C分别放入荧光光谱仪中测量得到实验数据，观察并记录各样品的荧光光谱曲线和峰值。

根据实验数据可以得出结论：1.不同溶液的荧光光谱曲线存在明显的差异，即不同物质的荧光光谱特性不同。

2.溶液A、溶液B和溶液C的荧光峰分别位于不同波长的位置，说明它们在激发状态下产生的荧光光谱存在差异。

3.通过对荧光光谱曲线的分析，可以推断溶液A、溶液B和溶液C所含有的荧光物质的种类和性质。

五、实验总结本实验利用荧光光谱仪测量了溶液A、溶液B和溶液C的荧光光谱，通过观察和分析数据得出了不同溶液的荧光光谱特性存在差异的结论。

荧光光谱在化学、物理、生物等领域具有广泛的应用，可以用于研究物质的结构、相互作用等。

在以后的实验和研究中，我们可以通过荧光光谱来进一步了解物质的性质和特性，提高实验研究的准确性和深度。

叶绿素荧光分析技术在植物生物学研究中的应用

Fm Fm’
＝Fm’-Fs
Fs
Fs为照光条件下产生的稳态叶绿素荧光，因为照光下，部分反应中心关闭，所以荧光发射较高。
t
Fo
M -脉冲调制光 S- 饱和脉冲光
叶绿素荧光诱导动力学曲线
Fm’：光适应下最大荧光（在作用光下用饱和脉冲光测定）。 Fo’：光适应下最小荧光（在作用光下用脉冲调整光测定）。 Fs : 为照光条件下产生的稳态叶绿素荧光。
Handy PEA
PEA
常用荧光参数及其意义
Fo：初始荧光，是PSⅡ反应中心处于完全开放状态时
（经过充分暗适应以后）的初始荧光产量。
当反应中心失活或者遭到破坏时，Fo上升。因此，可以用Fo变化来反映PSII反应中心的失活状态
Fm ：最大荧光，是PSⅡ反应中心完全关闭时
（强光照射后）的荧光产量。
用连线激发式荧光仪测定的荧光诱导曲线
Relative fluorescence intensity 1 .2 1 .0 .8 .6 .4 .2 0 .0 100 101 102
b' c'
O
K
J
c a ( a ')
I
P
b
103
104
105
106
107
T im e ( μ s )
连续激发式荧光仪有：Handy PEA， PEA，Pocket PEA， PEA Senior, M-PEA 等
.3
(C)
.2 0 50 100 150 200 250 NaCl (mmol/L)
.9 (A) .8 .7 qP .6 (C)
.7 .6 .5 ΦP39;/Fm' .6 .5 .4 .3 .2 27 30 33 36 39 42 45 48 27 30 33 36 39 42 45 48 Tem perature ( o C) (B) (D)

巨噬细胞免疫荧光染色指标

巨噬细胞免疫荧光染色指标摘要：一、巨噬细胞简介二、免疫荧光染色技术三、巨噬细胞免疫荧光染色指标四、应用实例五、总结正文：一、巨噬细胞简介巨噬细胞（Macrophage）是一种重要的免疫细胞，主要负责吞噬和消化细菌、病毒、损伤组织等异物，参与身体的免疫防御和修复过程。

巨噬细胞分布广泛，存在于几乎所有的组织和器官中，特别是在炎症和感染过程中，它们的数量会显著增加。

二、免疫荧光染色技术免疫荧光染色技术是一种用于检测和定位特定抗原或抗体在细胞或组织中的方法。

它通过将荧光标记的抗体或抗原与待检测的细胞或组织结合，然后用荧光显微镜观察，从而实现对目标分子的准确定位和定量分析。

免疫荧光染色技术具有高灵敏度、高特异性和高分辨率等优点，被广泛应用于生物学和医学研究领域。

三、巨噬细胞免疫荧光染色指标巨噬细胞免疫荧光染色的主要指标包括：1.巨噬细胞标志物：如CD68、CD163、CD11b 等，这些标志物能够特异性地识别巨噬细胞。

2.吞噬功能相关指标：如CD66b、CD66a、CD63 等，这些指标可以反映巨噬细胞的吞噬活性。

3.细胞因子受体：如TLR4、TLR2 等，这些受体可以调节巨噬细胞的免疫应答。

4.巨噬细胞亚群标志物：如CD11c、CD11b、CD101 等，这些标志物可以将巨噬细胞分为不同的亚群，从而研究它们在免疫应答中的不同作用。

四、应用实例巨噬细胞免疫荧光染色技术在许多疾病的诊断和治疗中具有重要应用价值，例如：1.在炎症和感染性疾病中，通过检测巨噬细胞的免疫荧光染色指标，可以评估疾病的严重程度和疗效。

2.在肿瘤免疫学中，巨噬细胞免疫荧光染色可以帮助研究肿瘤免疫微环境，从而指导肿瘤免疫治疗。

3.在神经免疫学中，巨噬细胞免疫荧光染色可以用于研究神经炎症和神经退行性疾病的病理机制。

五、总结巨噬细胞免疫荧光染色技术是一种重要的实验方法，可以有效地研究巨噬细胞在免疫应答中的作用和调控机制。

质谱荧光联用技术在新型药物筛选与定量中的应用示例

质谱荧光联用技术在新型药物筛选与定量中的应用示例引言：随着科技的不断发展，新型药物的研发在世界范围内变得越来越重要。

而质谱荧光联用技术的出现为新型药物筛选与定量提供了更准确、高效的手段。

本文将以几个具体实例，介绍质谱荧光联用技术在新型药物筛选与定量方面的应用。

1. 抗癌药物筛选与定量癌症是当今世界上最常见的致命疾病之一。

为了发现更有效的抗癌药物，科研人员需要进行广泛的药物筛选和定量工作。

质谱荧光联用技术在抗癌药物研发中发挥着重要作用。

例如，在对某种新型抑制癌细胞增殖的化合物进行筛选时，科研人员可以利用质谱荧光联用技术，通过质谱仪提供分子结构信息，以及荧光分析仪提供的荧光强度数据，来判断化合物的药物活性。

同时，质谱荧光联用技术还可以用于抗癌药物的定量测定，以确保药物在人体内的浓度达到治疗效果所需的范围。

2. 新型抗生素筛选与定量随着抗生素耐药性的不断增加，寻找新型抗生素成为了迫切的需求。

质谱荧光联用技术为科研人员提供了一种高效、准确地筛选和定量新型抗生素的工具。

通过结合质谱仪和荧光分析仪的优势，科研人员可以在药物样品中鉴定抗生素的分子结构，并通过荧光分析测定抗生素的浓度。

这种联用技术不仅可以提高抗生素筛选的速度和准确度，还可以对抗生素的药代动力学特性进行研究，为抗生素的临床应用提供依据。

3. 微量毒素检测与定量在食品安全领域，微量毒素的检测与定量一直是重要的任务之一。

质谱荧光联用技术的出现极大地推动了微量毒素检测的准确性和灵敏度。

例如，在食品样品中，某种特定的微量毒素可能只有极低的浓度，而质谱荧光联用技术可以通过质谱仪鉴定毒素的结构，并通过荧光分析测定毒素的浓度，从而实现对微量毒素的快速、准确的检测与定量。

4. 新型荧光染料筛选与定量荧光染料在生物医学研究和荧光成像等领域中起着重要的作用。

质谱荧光联用技术可以用于新型荧光染料的筛选与定量。

首先，科研人员可以通过质谱仪对染料的分子结构进行鉴定，然后利用荧光分析仪测定染料的荧光强度与浓度之间的关系，来评估染料的荧光性能。

原子荧光汞原理的应用实例

原子荧光汞原理的应用实例1. 简介原子荧光汞是一种通过激发原子使其发射特定波长的光的现象。

它的原理基于激发原子的电子到高能级，然后电子从高能级退回到低能级时发射特定波长的光。

该原理在科学研究和实际应用中得到了广泛的应用。

本文将介绍原子荧光汞原理的应用实例。

2. 汞蒸气灯汞蒸气灯是一种应用了原子荧光汞原理的照明设备。

它由一个密封的玻璃管内部充满汞蒸气，两端有电极。

当电流通过电极时，汞蒸气会被激发并发出紫外线。

紫外线照射到灯管内壁上的荧光粉上，荧光粉会被激发并产生可见光。

这样就实现了通过原子荧光汞原理来产生可见光的照明效果。

汞蒸气灯具有高亮度、高效能和长寿命的特点，被广泛应用于道路照明、体育场馆照明和工业照明等领域。

它的应用使得夜间能够得到良好的照明效果，大大提高了人们的生活质量。

3. 原子荧光汞在环境污染监测中的应用原子荧光汞在环境污染监测中起到了关键作用。

由于汞是一种有害物质，对环境和生物体都具有较高的毒性。

因此，监测和控制汞的含量对保护环境和人类健康具有重要意义。

原子荧光汞技术可以准确快速地检测水体、大气和土壤中的汞含量。

它通过对样品中的汞进行蒸发和激发，然后测量样品中发出的特定波长的荧光强度来确定汞的含量。

这种技术具有高灵敏度和高精确度，可以快速获得准确的汞含量数据，为环境保护和监测提供了重要的依据。

4. 原子荧光汞在医学诊断中的应用原子荧光汞技术在医学诊断中也有广泛的应用。

它可以用于检测血液和尿液中的汞含量，帮助医生判断患者是否有汞中毒的风险。

汞中毒可以导致神经系统和肾脏等器官的损伤，因此对汞含量的监测对于及时发现并治疗汞中毒非常重要。

原子荧光汞技术可以通过采集血液或尿液样品，将样品中的汞蒸发并激发产生荧光，然后测量荧光强度来确定汞含量。

这种技术具有高灵敏度和准确性，可以为医生提供判断患者是否有汞中毒的依据，从而采取相应的治疗措施。

5. 原子荧光汞在科学研究中的应用原子荧光汞技术在科学研究中也得到了广泛的应用。

荧光分析法的原理和应用实例

荧光分析法的原理和应用实例一、荧光分析法的原理荧光分析法是一种利用物质在激发状态下发射特定波长的荧光光子进行分析的方法。

其原理基于分子从基态被激发到激发态产生荧光，然后通过检测荧光的强度或波长来定量或鉴定物质的方法。

1. 激发和荧光现象荧光现象是一种电子在激发态能级上吸收能量，由高能级跃迁到低能级时发射光子的现象。

当物质受到激发时，其原子或分子中的电子会从基态跃迁到激发态，吸收外界能量，形成激发态的物质。

随后，这些激发态的电子会以不同的途径返回基态，释放出能量并发射光子，产生荧光现象。

2. 荧光的特性荧光具有以下几个特性： - 荧光是无热的，表示物质在感光过程中不会产生热量。

- 荧光是瞬时的，表示荧光的发射时间极短，一般为纳秒级别。

- 荧光的发射波长大于激发波长，表示物质在激发后发射的光子具有较长的波长。

- 荧光的强度与物质的浓度成正比，因此荧光法可用于定量分析。

3. 荧光分析法的基本步骤荧光分析法通常包括以下几个步骤： 1. 样品制备：将待测物质制备成适合荧光分析的样品。

2. 激发：通过合适的激发波长和光源，将样品中的荧光物质激发至激发态。

3. 荧光检测：利用荧光检测仪器测量样品发射的荧光强度或荧光波长。

4. 数据分析：根据测得的荧光结果进行数据处理和分析，得出定量或鉴定结果。

二、荧光分析法的应用实例荧光分析法在各个领域都有广泛的应用，下面将介绍几个典型的例子。

1. 生物医学领域的应用荧光分析法在生物医学领域中被广泛应用于荧光标记和荧光定量分析。

例如，研究人员可以将药物或特定分子标记为荧光物质，通过观察标记物在组织或细胞中的分布和浓度变化来研究其在生物体内的作用机制。

荧光定量分析则可用于测量生物体内的特定分子浓度，如检测血液中的白细胞数量或病原体的存在。

2. 环境监测领域的应用荧光分析法在环境监测领域中也有重要应用。

例如，通过标记环境中的特定有害物质，如重金属离子或有机污染物，研究人员可以利用荧光分析法监测水体、空气或土壤中的污染物浓度，从而评估环境质量和生态风险。

水凝胶免疫荧光染色

水凝胶免疫荧光染色技术在细胞生物学研究中的应用
随着生命科学研究的不断深入，对细胞内部结构和功能的研究也越来越重要。

而水凝胶免疫荧光染色技术作为一种常用的细胞学技术手段，已经成为细胞生物学研究中不可或缺的一部分。

本文将详细介绍水凝胶免疫荧光染色技术的基本原理、操作步骤以及在细胞生物学研究中的应用。

一、基本原理
水凝胶免疫荧光染色技术是一种利用抗体与特定抗原结合后进行荧光标记的技术。

该技术的基本原理是：将经过特定处理的抗体与特定抗原结合后，再加入一种荧光染料，使标记后的抗原能够发出荧光信号。

通过显微镜观察，可以清晰地看到细胞内特定抗原的位置和分布情况。

二、操作步骤
1. 制备细胞悬液和抗体-抗原复合物；
2. 将细胞悬液加入含有水凝胶的培养皿中；
3. 加入特定的荧光染料；
4. 洗涤并固定细胞；
5. 用荧光显微镜观察。

三、应用实例
1. 在肿瘤细胞研究中的应用：水凝胶免疫荧光染色技术可用于检测肿瘤细胞表面的特异性标志物，如HER2、EGFR等，以帮助诊断和治疗肿瘤。

2. 在神经科学研究中的应用：该技术可用于研究神经系统中的神经元和胶质细胞，并用于观察神经递质的释放过程。

3. 在免疫学研究中的应用：水凝胶免疫荧光染色技术可用于检测和分析免疫系统中的各种蛋白质和分子，如B淋巴细胞、T淋巴细胞、核糖体等。

水凝胶免疫荧光染色技术是一种非常有效的细胞学技术手段，其应用范围广泛，对于深入了解细胞内部结构和功能具有重要意义。

荧光分析法

四氯化碳的拉曼光与激发光波长相近，即与荧光波长相差较大，对荧光检测干扰较小。
影响荧光强度的主要因素
是波长比入射光较长的拉曼散射光。因为物质发射的荧光波长比激发光（即入射光）波长长。
• 消除溶剂拉曼光干扰的方法： - 选择合适的溶剂
- 改变激发光波长，使拉曼光向短波方向移动如硫酸奎宁的测定
1.荧光检测的基本原理
14
2.荧光的激发光谱和发射光谱
激发光谱（excitation spectrum)：固定测量波长，将激发光的光源分光，测定不同波长的激发光照射下所发射的荧光强度的变化，以IF —λ激发作图，便可得到荧光物质的激发光谱。发射光谱或荧光光谱（fluorescence spectrum)：固定激发光波长和强度, 让物质发射的荧光通过单色分光,以测定不同波长的荧光强度, 以IF—λ荧光作图，便可得到荧光物质的荧光光谱。
（四）、影响荧光强度的外部因素
温度
溶剂
酸度
01
02
03
荧光熄灭剂
散射光
04
05
1. 温度的影响
• 随温度降低，荧光强度增加。如荧光素钠在 0℃以下，每降10℃荧光效率增加3％。-80 ℃ 时达到100％。
• 原因是温度升高，分子运动速度加快，碰撞机率增加，使无辐射跃迁增加，因而降低了荧光；
常见溶剂在不同激发光波长下的拉曼光波长
激发光波长 248 水 271 溶剂拉曼光波长乙醇环己烷 267 四氯化碳－氯仿－
267
313
365 405 436
350
416 469 511
344
405 459 500
344
408 458 499

非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法

非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法1、范围本标准规定了非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法的试剂、仪器和耗材、操作步骤、结果判定、实验室生物安全等技术要求。

本标准适用于猪脾脏、淋巴结、血液等组织和血粉中非洲猪瘟病毒核酸的检测。

2、规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB 19489 实验室生物安全通用要求NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范3、试剂3.1DNA提取试剂DNA提取试剂的配制见附录A，或选取商品化的病毒DNA提取试剂盒并参照说明书进行DNA提取。

3.2 2 × PCR缓冲液2 × PCR缓冲液的配制见附录A。

3.3引物探针3.3.1采用针对非洲猪瘟病毒VP72基因（核苷酸序列见附录B）的引物及探针：上游引物ASF-CADC-rPCRF：5'-1528-ATAGAGATACAGCTCTTCCAG-1548-3'下游引物ASF-CADC-rPCRR：5'-1660-GTATGTAAGAGCTGCAGAAC-1679-3'荧光探针ASF-CADC-Probe：5'-1638-FAM-TATCGATAAGATTGAT-MGB-1653-3'3.3.2可以使用世界动物卫生组织（OIE）在陆生动物诊断技术和疫苗手册（Manual of Diagnostic Tests andVaccines for Terrestrial Animals）第2.8.1章African Swine Fever中提供的引物和探针，并按照手册中规定的检测程序和判定标准操作：上游引物ASF-OIE-rPCRF：5'-1627-CTGCTCATGGTATCAATCTTATCGA-1651-3'下游引物ASF-OIE-rPCRR：5'-1857-GATACCACAAGATCRGCCGT-1876-3'荧光探针ASF-OIE-Probe：5'-1761-FAM-CCACGGGAGGAATACCAACCCAGTG-TAMRA-1785-3'3.3.3使用国家农业行政主管部门批准的其他引物、探针，应对检测程序和判定标准作相应调整。

Archimed 荧光定量 PCR 系统应用手册—非洲猪瘟荧光定量 PCR 检测说明书

A PPLICATION N OTE利用Archimed定量PCR进行非洲猪瘟病毒检测鲲鹏基因（北京）科技有限责任公司阳性对照阴性样本非洲猪瘟荧光定量PCR 分析2018年8月非洲猪瘟疫情在中国爆发，爆发地区分布交广，对我国畜牧养殖造成了巨大损失。

我国将非洲猪瘟列为一类动物疫病，非洲猪瘟（ASF ）是由非洲猪瘟病毒（ASFV ）引起的猪的一种急性、烈性、高度接触性传染病，对生猪致病率高，致死率高达100%。

应用实时荧光PCR 技术可以从低微含毒量样品中扩增获得病毒特异性核酸片段，进行病毒鉴定。

通过扩增捕获ASFV 主要免疫原基因VP72，进而测定其核酸序列，可进行以毒株间核苷酸序列同源性比较为主要技术手段的非洲猪瘟分子流行病学研究。

利用Archimed 荧光定量PCR 进行非洲猪瘟检测一般流程为了帮助实验人员更便捷地进行非洲猪瘟检测，Archimed 定量PCR 在实验条件设置、孔板设置及数据分析等方面均进行了充分优化，力争以最智能化的方式帮助研究者完成该类型实验。

利用Archimed 软件智能设置向导，完成一个非洲猪瘟荧光定量PCR 分析实验只需简单的6个步骤：1. 创建实验：点击启动界面右下方“创建”按钮，或者通过菜单栏选择“创建”，可以创建全新的实验流程；选择实验类型：根据实际使用的实验类型进行选择，这里选择相对绝对定量。

创建实验•创建新的相对定量实验文件并设置实验属性设置反应条件•进行相对定量运行条件的设置设置孔板•对反应孔进行属性及分布设置运行实验•开始非洲猪瘟荧光定量PCR 运行查看及分析结果•查看非洲猪瘟荧光定量图谱实验结果并进行分析导出实验结果•将图谱及实验数据导出保存以进行后续分析2.设置反应条件：实验属性设置完成后，点击页面左侧的运行条件或者右下角的下一步，进入运行条件设置界面3.设置孔板：运行条件设置完成后，点击页面左侧孔板设置或者右下角的下一步，进入孔板设置界面。

根据实际反应管放置的相应孔位选择反应孔，对样本及检测项目进行相应属性设置，并勾选分配至对应孔位中，待测样品孔位将显示相应设置属性注：Archimed孔板设置可以在反应运行前、运行中、或运行后设置，运行中或运行后进行孔板设置可以节省时间。

固态荧光的测试方法

3、稳定性测试
3、稳定性测试
稳定性测试是长时间运行系统，以检查其是否稳定可靠。稳定性测试通常采用负载测试和疲劳测试两种方法。
三统测试中非常重要的一环，它主要测试软件系统的安全性是否符合要求。安全测试又分为以下几种：
1、用户认证和授权
1、用户认证和授权
基本内容
结果分析：在固态荧光测试中，通过对荧光光谱数据的分析，可以提取出样品的荧光峰位置、强度等信息。这些信息可以用于推断样品的能级结构、光学性质以及荧光材料的归属和应用领域。例如，通过比较样品的荧光光谱与已知荧光材料的光谱数据库，可以初步判断样品是否属于某种特定的荧光材料。根据样品的荧光峰位置和强度，可以进行材料掺杂、能量传递等研究。
基本内容
2、测量原理：固态荧光的测量原理是基于光致发光光谱（PL光谱）技术。PL 光谱是一种通过测量荧光材料的发射光谱来推算其能级结构和光学性质的测量技术。在固态荧光测试中，通常采用激光作为激发源，通过测量样品在一定波长激发下的荧光发射光谱，推算样品的荧光性质。
基本内容
3、操作步骤：（1）将样品放置在样品台上，并确保样品表面平整、清洁；（2）选择合适的激发波长和发射波长范围，调整光谱仪的狭缝宽度和扫描速度；（3）使用激光器作为激发源，对样品进行激发，并记录荧光发射光谱；（4）对光谱数据进行处理和解析，提取出样品的荧光峰位置、强度等信息；（5）根据样品的荧光特性，进行归属分析和应用研究。
固态电解质界面研究
为了解决这些问题，当前研究主要集中在以下几个方面： 1、材料设计：通过材料设计降低固态电解质界面的阻抗，提高离子传输速度。例如，选用具有合适孔径和孔隙率的材料，优化固态电解质的结构设计。
固态电解质界面研究
2、界面修饰：通过在固态电解质界面上引入修饰层，改善界面的稳定性及其与电极的相容性。例如，采用金属氧化物、金属氮化物等材料作为修饰层，提高界面的电化学稳定性。

水的荧光光谱分析

水的荧光光谱分析不同种类，不同浓度物质的三维荧光信息不同，三维荧光光谱同时表征了发射波长、激发波长、荧光强度三者的关系，信息含量丰富。

天然湖泊、河水、生活用水等中含有多种可溶性有机物，在紫外区具有较强的荧光，因此使用三维荧光可以表征这些可溶性有机物的变化。

本文全面介绍了环境水的三维荧光分析步骤，包括三维荧光的采集、光谱校正、平行因子分析。

1. 三维荧光采集收集自来水厂各净水工序中的水样品，用0.45μm的滤膜过滤以去除不可溶有机物，使用日立荧光分光光度计F-7100采集三维荧光光谱。

在获得的各净水工序中的三维荧光光谱中，用红点标注出所有特征峰，从而直观判断激发/发射峰的变化。

2. 三维荧光校正三维荧光信息含量丰富，能够全面描述样品信息，但水样中的胶体等物质在激发光照射时容易产生散射光，因此需要进行三维荧光校正。

日立荧光操作软件配备光谱校正功能，能够满足环境水的检测需求。

荧光强度标准化样品的荧光强度会受光源亮度变化、室温变化等的影响，使用日立荧光软件FL Solutions中的“荧光强度标准化功能”可以快速进行荧光强度标准化。

通过测定标准品的荧光强度，将样品的荧光强度换算为与标准品相对的荧光强度，从而校正荧光强度的时间变化和日间差变化。

测定水中的腐殖质时，以硫酸奎宁为基准。

本实例中选用1μg/L 的硫酸奎宁作为标准品，对自来水厂各净水工序的三维荧光光谱进行荧光强度标准化。

有关拉曼散射校正、内滤效应校正的详细信息请点击瑞利散射的去除日立多变量分析软件3D SpectAlyze具有光谱预处理功能，可以直接在光谱中去除不需要的瑞利散射。

3. 三维荧光的多变量解析各个净水处理工序中样品的三维荧光光谱经过校正后，可以通过日立多变量分析软件3D SpectAlyze实现谱图分离、主成分分析等。

使用多变量分析软件中的平行因子分析(PARAFAC)功能，谱图分离为3种成分，通过查阅相关文献，确定了三种成分是富啡酸、腐殖酸和蛋白质。

荧光分光光度法

荧光分光光度计的结构与操作
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荧光分光光度计的结构
荧光分光光度计由光源、单色器、样品池、检测器等部分组成，各部分协同工作完成荧光光谱的测量。
荧光分光光度计的操作步骤
操作步骤包括样品准备、仪器调试、参数设置、数据采集与分析等，操作时应严格按照仪器说明书进行。
荧光分光光度计的维护与保养
为了保持仪器的性能和延长使用寿命，应定期对仪器进行维护和保养，如清洁光学元件、检查电路连接等。
荧光分光光度法
目录
CONTENTS
• 荧光分光光度法简介 • 荧光分光光度法的基本原理 • 荧光分光光度法的实验技术 • 荧光分光光度法的应用实例 • 荧光分光光度法的挑战与展望
01 荧光分光光度法简介
CHAPTER
定义与原理
定义
荧光分光光度法是一种基于荧光物质与激发光的相互作用，通过测量荧光光谱来研究荧光物质性质的分析方法。
利用荧光染料标记DNA或RNA，通过荧光光谱法检测基因表达和突变，以及DNA和RNA的定量分析。
在环境监测领域的应用
污染物检测
荧光分光光度法可用于检测水体、土壤和空气中的有害物质，如重金属、农药、酚类化合物等。
饮用水安全
通过荧光光谱法检测饮用水中的消毒副产物，确保饮用水安全。
生态毒理学研究
荧光光谱的定量分析方法
荧光光谱的定量分析原理
荧光光谱的定量分析基于荧光物质浓度与荧光强度之间的线性关系，通过测量荧光强度可以推算出荧光物质的浓度。
荧光光谱的定量分析方法
定量分析方法包括标准曲线法、内标法、外标法等，应根据实验需求选择合适的分析方法。
荧光光谱的定量分析误差来源
误差来源包括仪器误差、样品不均匀性、操作误差等，应采取相应措施减小误差，提高分析精度。

荧光定量PCR

荧光定量PCR（Quantitative Real-Time PCR，简称qPCR）是一种分子生物学技术，用于精确测定样本中特定核酸序列的数量。

其基本原理基于PCR（聚合酶链式反应）技术和实时荧光检测，能够在PCR扩增过程中连续监测荧光信号的变化，从而实现对起始模板量的定量分析。

荧光定量PCR原理简述：1.PCR扩增：qPCR采用传统的PCR方法，包括变性（DNA双链解开成单链）、退火（引物与靶序列配对）和延伸（DNA聚合酶合成新链）这三个基本步骤，反复进行使得目标序列指数级扩增。

2.荧光标记与检测：SYBR Green法：SYBR Green是一种非特异性的双链DNA结合染料，在游离状态下几乎不发出荧光，但一旦与双链DNA结合后，荧光强度显著增强。

因此，随着PCR过程中的产物增加，荧光信号也相应增加，荧光强度与PCR产物的数量成正比。

TaqMan探针法：此方法更为特异，使用一种特殊的寡核苷酸探针，其两端分别标记了荧光报告基团和淬灭基团。

在PCR反应中，当探针与靶序列配对时，位于中间的探针被Taq 酶水解，导致荧光报告基团与淬灭基团分离，从而产生荧光信号。

只有当特定的扩增产物生成时才会释放荧光。

荧光定量PCR实验步骤概览：1.样品制备：RNA提取：从组织、细胞或其他生物样本中提取总RNA，常用TRIZOL或类似试剂进行裂解、离心分相和乙醇沉淀来纯化RNA。

cDNA合成：对于mRNA的定量，需要先将RNA逆转录为cDNA。

2.设计与合成引物：针对目标基因设计一对特异性的PCR引物，用于扩增目的片段。

3.PCR反应体系构建：将纯化的cDNA或DNA模板、特异性引物、Taq聚合酶、缓冲液、dNTPs和其他必要成分如SYBR Green染料或TaqMan探针等加入至PCR管中，配置成最终的PCR反应体系。

4.实时荧光PCR扩增与检测：在荧光定量PCR仪上进行PCR反应，仪器在每次循环的适当阶段收集荧光信号，并记录下来。

x射线荧光光谱法原理

X射线荧光光谱法原理一、引言X射线荧光光谱法是一种重要的化学分析技术，广泛应用于材料科学、环境科学、医学等领域。

该方法通过测量样品受激发后发射出的X射线荧光，推导出样品的元素组成和含量。

本文将详细阐述X射线荧光光谱法的原理，并通过实例分析说明其在不同领域的应用和优势。

二、X射线荧光光谱法简介X射线荧光光谱法是一种基于X射线与样品相互作用，产生荧光辐射的化学分析技术。

它具有高灵敏度、高分辨率和高精度等优点，能够快速、准确地测定样品的元素组成和含量。

三、X射线荧光光谱法原理X射线荧光光谱法基于以下原理：当样品受到高能X射线照射时，会吸收部分X射线能量，导致电子从低能级跃迁到高能级。

这些被激发的电子在返回基态过程中，会释放出特定波长的X射线荧光。

每种元素都有其独特的荧光波长，因此通过测量荧光波长和强度，可以确定样品中元素的种类和含量。

四、X射线荧光光谱法实验方法X射线荧光光谱法的实验方法包括样品制备、样品激发、荧光测量和数据分析等步骤。

样品制备一般包括研磨、干燥和称重等步骤，以保证样品的均匀性和稳定性。

样品激发通常采用X射线源或放射性源照射样品，以激发出元素的特征荧光。

荧光测量则通过使用高精度光谱仪测量荧光的波长和强度。

最后，通过数据分析方法，如校准曲线法、基本参数法等，推导出样品的元素组成和含量。

五、X射线荧光光谱法应用领域X射线荧光光谱法广泛应用于各个领域。

在材料科学领域，该方法被用于研究合金、陶瓷、高分子等材料的元素组成和结构。

在环境科学领域，X射线荧光光谱法用于测定土壤、水样等环境样品中的重金属元素，评估环境污染程度和制定相应的治理措施。

在医学领域，X射线荧光光谱法用于人体组织中的元素分析，如评估人体营养状况、疾病风险等。

此外，该方法还被广泛应用于地质学、农业、化学等领域。

六、X射线荧光光谱法优缺点X射线荧光光谱法的优点主要包括高灵敏度、高分辨率和高精度等。

该方法能够快速、准确地测定样品的元素组成和含量，且具有较低的检测限。

FISH检测和USP6融合基因检测内容

FISH检测和USP6融合基因检测内容FISH（荧光标记原位杂交）作为一种已在临床广泛开展的基因检测技术，有其独特的地位和优势。

在细胞、组织仍存在的背景之下，FISH明确、可靠的标记出了显微镜下肉眼可见的检测DNA大片段的数量、位置改变，优点包括：方法直接，可靠可以评估肿瘤的异质性特别能在基因扩增、基因融合的检测中发挥独特的优势。

实例 1：比如 Her2 基因扩增的检测， FISH 可以正确选择癌巢区域，逐个计数 Her2 基因扩增区域与相邻非扩增区域不同颜色杂交信号的比值，克服了其它DNA提取方法只能算出基因扩增区域与非扩增区域平均值，从而受到肿瘤异质性影响的缺陷。

实例2：使用RQ-PCR和NGS检测ALK基因重排时，常常需要考虑到基因重排的断裂点。

并根据断裂点位置设计引物或捕获目标DNA，但是实际上基因融合的断裂点常常在一个相当大的范围内变化；而FISH的探针设计把整个断裂点发生的范围都放在红绿信号之间的未覆盖区域，发生在此区域任何一处的断裂重排都将导致红绿信号分离，所以可以有效地检测出更多的重排阳性结果，图示如下：二、给基因检测非专业人士的建议1、选择能够直接指导肿瘤用药的基因检测，比如乳腺癌、胃癌、食道癌病人最重要的是完成HER2基因检测，而不是选择能成十成百的大数量的基因检测。

HER2基因检测能将这些肿瘤的用药分成两大类，而最可靠直观的HER2基因检测是选用FISH的方法。

但是非小细胞肺癌的病人宜先检测有无EGFR序列异常，再选择FISH方法逐项检测有无ALK的基因重排，查到一项阳性，则可选用相应的靶向治疗，再复查结果。

2、病患确诊肿瘤后，开始治疗之前，必须要不失时机地对经手术、穿刺采集的肿瘤标本、进行基因检测、对肿瘤进行分子分型，以便指导治疗。

3、不要轻言放弃，发现相关用药靶点突变时尽量把握更多的治疗机会，如未发现常见用药相关的基因突变，继续查验自己的肿瘤组织标本是否有罕见的用药相关基因变异，这类罕见基因变异可能有疗效甚明显的新药比如选择进行我们推出的NTRK基因重排检测。

荧光定量扩增效率计算公式

荧光定量扩增效率计算公式一、引言荧光定量扩增（Quantitative PCR，qPCR）是一种高灵敏度、高特异性的核酸检测方法，广泛应用于基因表达分析、病原体检测、基因组拷贝数分析等领域。

在进行荧光定量扩增实验时，我们常常需要计算扩增效率，以评估反应的准确性和灵敏度。

本文将介绍荧光定量扩增效率的计算公式及其应用。

二、荧光定量扩增效率计算公式荧光定量扩增效率可以通过计算阈值周期数（Ct值）与模板DNA浓度之间的关系得出。

一般而言，Ct值与模板DNA浓度呈负相关，而扩增效率则可以用斜率来表示。

荧光定量扩增效率计算公式如下：效率 = 10^(-1/斜率)-1其中，斜率是指Ct值与模板DNA浓度之间的线性关系的斜率。

三、荧光定量扩增效率计算实例为了更好地理解和应用荧光定量扩增效率计算公式，我们以一个实例来说明。

假设我们进行了一次荧光定量扩增实验，实验中测得的Ct值为25，模板DNA浓度为1 ng/μL。

我们首先需要绘制标准曲线，即以一系列已知浓度的模板DNA进行扩增实验，测量其Ct值。

在本实验中，我们选择了模板DNA浓度分别为0.1 ng/μL、0.01 ng/μL、0.001 ng/μL、0.0001 ng/μL和0.00001 ng/μL的样本，测得它们对应的Ct值分别为20、22、24、26和28。

通过绘制标准曲线，我们可以观察到Ct值与模板DNA浓度之间呈线性关系。

接下来，我们可以根据标准曲线的斜率来计算荧光定量扩增的效率。

将实验中测得的Ct值代入计算公式中，我们可以得到如下计算过程：斜率 = (Ct2 - Ct1) / (log10(C2) - log10(C1)) = (25 - 20) / (log10(1) - log10(0.1)) = 5 / (-0.52) ≈ -9.62效率 = 10^(-1/斜率) - 1 = 10^(-1/-9.62) - 1 ≈ 0.097因此，本次荧光定量扩增的效率为0.097，即每个循环的DNA模板数量增加约9.7%。

时间分辨荧光分析法 - 副本

当前，最主要的真菌毒素主要有: 黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马菌素、T-2 毒素、展青霉素、玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇等。
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2.真菌毒素的测定方法
• 目前，真菌毒素的测定方法有 TLC 法、HPLC 法等，这些方法都不同程度地存在着样品前处理过程复杂、毒性大、所需时间长等缺点。由于其他荧光物质、色素、结构类似物对检测产生干扰，必须通过液-液萃取进行净化处理，操作烦琐，有机试剂用量大，提取效率低，环境污染严重。
二、时间分辨荧光分析法基本原理与优点
1.原理
TRFIA 是用镧系金属离子作为示踪物标记蛋白质、多肽、激素、抗体、核酸探针或生物活性细胞,与其螯合剂、增强液(有一部分不需要) 在待反应体系(如:抗原抗体免疫反应、生物素亲和素反应、核酸探针杂交反应、靶细胞与效应细胞的杀伤反应等) 发生反应后,用时间分辨荧光仪测定最后产物中的荧光强度,根据荧光强度和相对荧光强度比值,推测反应体系中分析物的浓度,达到定量分析的目的。
2.3.2 固相抗体竞争法是对一些小分子半抗原化合物,因分子质量小,不能直接进行固相包被,如多肽、甲状腺激素类和一些药物等,都必须经过化学耦联剂与载体蛋白质进行共价键结合,然后可包被聚苯乙烯微量滴定条孔壁,制成固相抗原.
四、时间分辨荧光分析法的应用
1.在免疫学的应用 1.1 测定细胞因子:细胞因子不仅仅参与免疫应答反应,而且在
3.根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和物质含量测定的方法称为荧光分析法(fluorometry)。
5.时间分辨荧光分析法（Time resolved fluoroisnmuno assay,TRFIA）
是近十年发展起来的非同位素免疫分析技术，是目前最灵敏的微量分析技术,其灵敏度高达10-19g/ml，较放射免疫分析（RIA）高出3个数量级。它用镧系元素标记抗原或抗体，根据镧系元素螯合物的发光特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨，可有效地排除非特异荧光的干扰，极大地提高了分析灵敏度。