Seahorse-XF实验流程

Seahorse XF实验流程

（此为简略版实验流程，详细步骤参见培训手册）

XF实验前一天

1.种细胞：将细胞接种到Seahorse XF细胞培养板中，在生长培养基中过夜培

养。注：细胞接种时间和培养时间可根据细胞处理要求进行选择。

2.预热仪器：打开Seahorse仪器和电脑，并打开软件，使仪器升温至37℃，

过夜预热。

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4.水化探针：在Utility Plate中加入Seahorse XF校准液，将测试板放回

培养箱中过夜水化探针。

Utility Plate上，置于37℃无CO

2

XF实验当天

1.准备检测液：用Seahorse XF Base Medium配制检测液，加入所需要的底物，

将溶液加热至37℃，用NaOH调pH值至，过滤，置37℃水浴中备用。

注：检测液中所需要添加的底物及浓度取决于细胞类型和实验设计，或者与生长培养基保持一致。

2.】

3.观察细胞：将细胞板从CO2培养箱中取出，在显微镜下观察细胞状态。

培养箱4.细胞换液：将生长培养基换为检测液，然后将细胞放置在37℃无CO

2中1小时。

5.配药：根据试剂盒说明书，配制并稀释药物至所需浓度。

6.加药：将稀释好的药物分别加入测试板上的A，B，C，D 四个加药孔中。

注：根据实验设计选择所用加药孔数量。

7.\

8.设计实验模板：用软件记录实验条件和设计实验程序。

9.上机：开始运行实验程序，将加过药的测试板和装有校准液的Utility Plate

一起放置到仪器托板上。

10.仪器自动校准探针。

11.换细胞板：当软件出现提示信息时，将Utility Plate换为细胞板。

12.实验完成时根据软件提示信息退出测试板和细胞板，并在显微镜下观察细胞

状态。

13.数据分析：采用wave软件和report generator对实验数据进行分析。